Alur Pengambilan DNA

Alat dan Bahan Bahan

 Mikrotip dan mikrotube 100 dan  GT Buffer

1000 uL  Enzim Proteinase K
 Efendof  GBT Buffer
 Sentrifuge  Etanol absolute
 Oven  W1 Buffer
 Penggerus steril  Wash Buffer
 Kolom  Akuades Steril (Jika dibutuhkan
 Kit PCR untuk menggerus)
 Elution Buffer

Catatan : Jika jumlah sample ganjil maka perlu dibuat penyeimbang untuk senttrifuge
yaitu akuades. Jika jumlah sample genap tidak perlu dibuat penyeimbang.

Cara Kerja :
Keterangan :
Tissue dissociation
Step 1 Lysis
Step 2 DNA Binding
Step 3 Wash
Step 4 DNA Elution
Alur Kerja

Siapkan alat dan bahan

Ambil sample dari media cair sebanyak 1 ml dan dimasukkan ke microtube

Sample digerus menggunakan micropestie

Tambahkan 200 uL GT buffer pada tube dan digojok hingga homogen

Tambahkan 20 uL Proteinase K pada campuran sample kemudian digojok hingga
homogen

Campuran diinkubasi selama 30 menit pada suhu 60oC

Nb : Selama Inkubasi tube diinver tiap 5

Tambahkan 200 uL GBT Buffer kemudian digojok selama 5 detik

Campuran diinkubasi selama 20 menit pada suhu 60oC

Nb : Selama Inkubasi tube diinver tiap 5

Selama menunggu inkubasi dapat disiapkan elution buffer 100 uL (Tiap

sample) di Oven hingga akan digunakan

Campuran yang sudah diinkubasi lalu disentrifuge 10.000 rpm selama 2 menit

Pindahkan supernatan ke microcentrifuge tube, kemudian ditambahkan 200 uL

absolute etanol

Tempatkan GS coloumn pada 2ml Collection tube

Pindahkan campuran ke GS kolom kemudian dicentrifuge 10.000 rpm selama 2 menit

 Lepaskan 2ml Collection tube kemudian pindahkan GS coloumn ke 2ml Collective
kolom baru

Tambahkan 600 uL Wash Buffer ke GS kolom kemudian disentrifuge 13.000 rpm

selama 30 detik

Lepaskan bagian bawah GS coloum, cairannya dibuang kemudian GS coloumn

ditempatkan di 2ml Collection tube

Campuran disentrifuge 13000 selama 3 menit

Pindahkan GS coloum kering pada 1,5 ml microtube

Tambahkan Elution buffer yang sudah diinkubasi di tengah tengah kolom matrix
dan ditunggu selama 5 menit

Kemudian sample dicentrifuge 13.000 rpm selama 30 detik.

Setelahnya didapatkan sample DNA dan dapat disimpan dalam kulkas suhu -20 oC