Anda di halaman 1dari 4

Genomic DNA Extraction Kit Whole Blood

Tambahkan 20µl proteinase


K
50 - 200µl darah ditransfer Diaduk menggunakan mikropipet
ke dalam tabung 1,5ml sebanyak 5-6 kali
Dan masukkan ke inkubasi selama 5
menit

Tambahkan 200µl GSB Tambahkan 200µl alkohol


Buffer murni (100%)
Lalu dikocok dengan cepat dan ikubasi Dan kocok kembali agar merata
lagi selama 5 menit

Dari tabung 1,5ml tersebut Tambahkan 400µl W1 Buffer


pindahkan ke gd column Dan disentrifugasi selama 30 detik
Lalu disentrifugasi selama 1 menit

Tambahkan 600µl Wash Tambahkan 100µl Elution


Buffer Buffer
Dan disentrifugasi selama 30 detik Diamkan selama 1 menit dan
disentrifugasi selama 30 detik

Dan didapatkan elusi dari


5µg kualitas gDNA terbaik
How to Extract DNA From Plants

Potong bagian Buang aliran Buang aliran


daun hingga melalui dan melalui dan
seberat 100mg tambahkan tambahkan Wash
jaringan Buffer W1 Buffer
tanaman Kemudian
Lalu disentrifugasi
disentrifugasi
Lalu bekukan dengan
nitrogen cair dan giling
hingga menjadi bubuk
halus

Pindahkan kolom
Pindahkan hasil Buang aliran gd kering ke
tersebut ke melalui dan tabung 1,5 ml baru
tabung 1,5 ml tambahkan sisa
Tambakan elution buffer
Tambahkan GPX1
campuran yang telah dipanaskan
buffer dan RNase A Dan sentrifugasi lagi terlebih dahulu sebesar
60o C

Vortex dan Sediakan GD


inkubasi pada
Centrifuge
Column di dalam
suhu 60 oC tabung 2ml
untuk
selama 10 menit mengelusi
Dan pindahkan 700µl
Dan tambahan GP2 campuran tadi ke GD DNA murni.
Buffer column dan sentrifugasi

Vortex lalu Tambahkan 1,5


diinkubasi pada volume GP3
Buffer Dan didapatkan
suhu dingin geomic DNA
selama 3 menit Dan vortex secepatnya
selama 5 detik murni

Sediakan Singkirkan kolom


tabung 2ml filter
yang sudah Kemudian pindahkan
ditambahkan lagi supernatan dengan
kolom filter hati-hati ke tabung
1,5ml yang baru.
Lalu pindahkan
campuran tersebut
ke kolom filter dan
sentrifugasi
Blood DNA Extraction – HiMedia Laboratories

Muat campuran Dan tambahkan


etanol lysate pada 500µl prewash
Preparation kolom putar yang solution
disediakan Dan sentrifugasi pada 10.000
Dan sentrifugasi pada rpm selama 1 menit
10.000rpm selama 1 menit

Prewash solution yang Dan tambahkan


sudah diencerkan (2:3) Tambahkan 200µl
alkohol 96%-100%) 500µl Wash solution
Tambahkan Prewash solution yang diencerkan
concentrate sebanyak 6 ml dan
ethanol (96-99%) 9 ml Dan sentrifugasi pada 10.000
rpm selama 1 menit

Tambahkan 200µl
Wash solution yang Lysis Solution (C1)
diencerkan (1:3) Dan vortex selama 10 - 15 Tambahkan 100µl
Tambahkan wash solution detik dan inkubasi pada suhu Elution Buffer (ET)
concentrate 4ml dan 55oC selama 10 menit
Dan sentrifugasi pada 13.000 - 16.000 rpm
ethanol (96-99%) 11ml selama 3 menit sampai kering
Dan sentrifugasi pada 10.000 rpm selama 1
menit

Miniprep Tambahkan 20µl


purification spin kit larutan RNase A
Tambahkan 200µl aliquot darah ke Vortex selama 10 - 15 detik
tabung 2ml
Dan tambah 20µl larutan Proteinase K Dan inkubasi 15oC - 25oC
Vortex selama 10-15 detik selama 2 menit
Plant Genomic DNA Isolation

Potong daun selebar 1 cm


Lalu masukkan ke lumpang dan alu dan Ulangi Cl (24: 1) langkah Tambahkan volume sama es
ambil 200µl universal plant extraction
buffer dan tumbuk hingga halus sekali lagi dan kumpulkan dingin IPA (isopropyl alkohol)
fase air atas dalam tabung ke fase atas yang
eppendorf steril dikumpulkan

Potong mikrotip
Tambahan larutan buffer lagi
menggunakan gunting dan campur dengan sangat
hingga volume mencapai
kumpulkan fase air atas lembut dan inkubasi pada
500µl and lanjutkan
dalam tabung microfuge steril suhu -20oC selama 30 menit
menumbuk
lainnya

Setelah pencampuran, Setelah inkubasi, endapan


Setelah penggilingan ambil sentrifus pada 10.000 rpm DNA dapat dilihat dalam
jaringan homogenat dalam selama 10 menit tabung sampel Simpan DNA pada suhu
tabung microfuge steril Setelah sentrifugasi, Anda akan Sentrifugasi tabung pada 10,000 rpm rendah
menemukan tiga fase yang berbeda selama 10 menit
menggunakan pipet.

Tambahkan volume yang


Tempatkan tabung microfuge Sekarang tambahkan 50µl air
sama dari kloroform: Setelah sentrifugasi, buang
dalam penangas air dan steril atau buffer TE dan ketuk
campuran isoamyl alcohol supernatan dan kumpulkan
inkubasi pada suhu 60oC dengan lembut untuk
(24: 1) ke sampel dan aduk peletnya
selama 30 menit melarutkan pelet
rata

Transfer supernantant ke
Setelah inkubasi, putar Setelah selesai mengeringkan
tabung microfuge steril Beri 70% alkohol dan biarkan
sampel pada 10.000 rpm DNA akan muncul setetes air
lainnya menggunakan pelet mengering sepenuhnya
selama 10 menit transparan
mikropipet

Anda mungkin juga menyukai