Nama : Roby Ilham Zulianto

NIM : 1908511038

Ekstraksi DNA

Berdasarkan video yang saya tonton, saya tidak ingin menjelaskan kembali langkah kerja, namun
dari video yang saya lihat, prinsip dasar ekstraksi DNA adalah menghancurkan dinding dan
membran sel sampel lalu mengeluarkan DNA yang terdapat dalam nukleus tanpa menyebabkan
kerusakan pada DNA tersebut. Adapun jika dirincikan, berdasarkan yang saya amati, secara
umum proses ekstraksi DNA dibagi menjadi beberapa tahap yaitu persiapan materi yang akan
digunakan (preparasi sampel), proses penghancuran sel (lisis sel), penghilangan senyawa
kontaminan, dan pengumpulan DNA hasil perlakuan. Adapun DNA yang diekstrak harus
terbebas dari senyawa kontaminan seperti polisakarida, polifenol, dan tanin yang seringkali ikut
terbawa dan dapat menghambat kerja beberapa enzim dalam aktivitas molekuler dalam proses
ekstraksi DNA.

Skema Kerja

1. Pembuatan Larutan

Dibuat larutan
buffer lisis

Dibuat larutan Dibuat larutan

Tris-Cl sds 20%

15,760 g Tris-Cl 18,6120 EDTA 4 g SDS

dilarutkan dalam dilarutkan dalam dimasukkan
aquades hingga aquades steril botol lalu
100 mL hingga 100 mL dimasukkan
lalu ditambah aquades steril
NaOH 10 M hingga volume
(pH=8) 20 mL

Dibuat larutan Dicampur larutan fenol dan

kloroformfenol kloroform 10 mL dengan
1:1 perbandingan volume 1:1
 Dibuat larutan air
Larutan ditampung
garam yang sudah
diatas gelas beaker
dikumur kumur
minimal 1 menit

2. Prosedur Kerja

Dimasukkan 500µL sampel kedalam tabung mikro steril

Dimasukkan 250µL buffer lisis, dikocok bolak balik

pelan lalu digetarkan dengan vortex 10-20 detik

Dimasukkan campuran kedalam air es selama 15 menit

lalu segera dimasukkan ke air mendidih 1 menit lalu air
es lagi 5 menit

Dimasukkan fenolkloroform 1:1 sebanyak 750µL

dengan diaduk pelan dan hati hati

Campuran disentrifugasi selama 1-2 menit dengan

kecepatan 9000-10000 rpm

Diambil lapisan atas dengan hati hati

 Ditambah etanol sebanyak volum yang diperoleh

Campuran disentrifugasi kembali selama 1-2 menit

dengan kecepatan 9000-10000 rpm

Supernatan Dibuang dan tersisa pellet dan pellet itu

adalah DNA