DIAGRAM ALIR EKSTRAKSI DNA DAGING BABI

(Menggunakan EzWay Genomic DNA Kit Tissue)

25 mg daging babi

Diletakkan di dalam sample tube

20 µl Proteinase K

200 µl lysis buffer 1

Divortex selama 15 detik

0
Diinkubasi pada suhu 56 C selama 1-3 jam untuk melisiskan jaringan sampel,
divortex 2-3 kali setiap jamnya

Disentrifugasi pada 13000 rpm selama 1 menit

Pellet

Supernatant

Dipindahkan pada microcentrifuge tube baru

100 mg/ml RNase A
Bila diperlukan kondisi
RNA-free Diinkubasi pada suhu ruang selama 10 menit

200 µl lysis buffer 2

Divortex selama 15 detik

Dipindahkan campuran ke dalam DNA-prep column

Disentrifugasi pada 13000 rpm selama 1 menit

Dipindahkan ke tube baru

Siap dicuci
DNA Washing to DNA Yield

DNA-prep column

500 µl Wash Buffer A

Disentrifugasi pada 13000 rpm selama 1 menit

500 µl Wash Buffer B
Disentrifugasi pada 13000 rpm selama 1 menit
500 µl Ethanol 70%
Disentrifugasi pada 13000 rpm selama 1 menit

Disentrifugasi pada 13000 rpm selama 1 menit

Diletakkan DNA-prep column pada tube baru

50-100 µl elution buffer
/ ddH2O pH 7.5-9.0
Pengulangan
Ditambahkan pada bagian tengah membran DNA-prep column proses dapat
meningkatkan
10-20% DNA
Didiamkan selama 1 menit yield

Disentrifugasi pada 13000 rpm selama 1 menit untuk mengelusi DNA

Disimpan pada suhu -200C

DNA yield