Penilaian emulsifikasi in vitro minyak silikon baru

Albert Caramoy, Sabine Schrö der, Sascha Fauser, Bernd Kirchhof

ABSTRAK
Tujuan Untuk menyelidiki apakah emulsifikasi minyak silikon konvensional dapat
dikurangi dengan menambahkan sedikit jumlah molekul silikon dari rantai yang sangat
panjang panjangnya. Metode Siluron 1000, Siluron 2000, Siluron 5000, Acri. Sil-Ol 5000,
Oxane 5700, Densiron 68 LV, Densiron 68 dan Densiron 68 HV (0,5 ml) masing-masing
diuji bersama baik plasma atau serum (0,5 ml) dalam kuvet gelas. Emulsifikasi diinduksi
oleh sonikasi dan didokumentasikan oleh fotografi. Luas total yang diemulsi minyak dinilai
menggunakan perangkat lunak ImageJ. Hasil Penambahan jumlah kecil sangat-panjang-
rantai molekul silikon secara signifikan mengurangi emulsifikasi untuk minyak silikon
1000 cSt (Siluron 2000) dan untuk minyak silikon 1000 cSt dengan campuran F6H8
(Densiron 68 HV).
Kesimpulan Minyak silikon viskositas rendah baru menunjukkan emulsifikasi tereduksi
serupa dengan minyak 5000 cSt.
Di masa mendatang, mungkin untuk menghindari penggunaan oli 5000 cSt. Penemuan ini
dapat mendorong operasi minyak silikon secara umum, dan khususnya penerapan teknik
sayatan kecil.
PENGANTAR
Masalah utama yang melekat pada penggunaan minyak silicon karena tamponade vitreous
adalah emulsifikasi. 1 Emulsification dapat menghasilkan tetesan minyak yang dapat
menyebabkan glaukoma sekunder, keratopati dan subyektif gangguan, bahkan setelah
minyak silicon dihapus. Emulsifikasi minyak silikon dipengaruhi oleh banyak faktor
termasuk viskositas dan antarmuka ketegangan. 6 Minyak silikon cenderung sangat kental
lebih stabil dalam hal emulsifikasi daripada kurang minyak kental. 7 Akibatnya, ahli bedah
setidaknya masuk Europedprefer viskositas tinggi silicon minyak (5000 cSt), menerima
pengisian dan penghapusan yang diperpanjang waktu. Di sisi lain, minyak silikon kurang
kental memungkinkan penanganan yang lebih baik saat menggunakan pengukur kecil
instrumen (ukuran 25 atau 23). Oleh karena itu diinginkan mampu mengembangkan
minyak silikon yang tahan terhadap emulsifikasi dan viskositas rendah.
Minyak silikon terdiri dari polimer dan karenanya menunjukkan karakteristik fluida non
Newtonian. Ini berarti viskositas berubah seiring dengan tingkat geser. Viskositas geser
tidak sepenuhnya menjelaskan kecenderungan emulsifikasi. Oleh mencampur sedikit
silikon rantai sangat panjang molekul menjadi minyak silikon umum, ekstensional
viskositas mungkin meningkat sementara lebih atau kurang menjaga viskositas
geser. 8e10 Penambahan molekul silikon rantai sangat panjang meningkatkan ketahanan
terhadap deformasi ekstensional dan karena itu meningkatkan viskositas ekstensional. Ini
meningkat resistensi terhadap emulsifikasi. 11 Dalam penelitian ini, menggunakan system
uji in vitro, kami membandingkan emulsifikasi minyak silikon baru yang mengandung
molekul silikon rantai sangat panjang (Siluron 2000 dan Densiron 68 HV) dan berbagai
minyak silikon yang biasa digunakan (Siluron 1000, Siluron 5000, Densiron 68 LV,
Densiron 68, AcriSil-Ol 5000 dan Oxane 5700).
BAHAN DAN METODE
Minyak silikon yang berbeda dinilai menggunakan
modifikasi dari model in vitro awalnya
dikembangkan oleh Savion et al . 12 Dalam model ini, oli
diameter tetesan mirip dengan yang ada di mata pasien
dihasilkan. Dua emulsi mapan yang berbeda
fiers digunakan: serum dan plasma. 12
Persiapan pengemulsi
Sampel darah diambil sesuai dengan Deklarasi Helsinki; informed consent adalah
diperoleh. Sampel diambil dari yang masih muda, individu laki-laki sehat dalam satu
hari. Sampel darah diambil menggunakan tabung Sarstedt (S-Monovette, Sarstedt) diisi
dengan EDTA (untuk sampel plasma) atau dengan trombosit gel (untuk sampel
serum). Darah sampel disentrifugasi pada 1000 g selama 10 menit 48C. Supernatan
dikumpulkan dengan hati-hati (tidak mengganggu buffy coat) dan disimpan pada suhu
À 808C sampai digunakan.
Komposisi minyak silikon
Komposisi dari berbagai minyak silikon adalah
dirangkum dalam tabel 1.
Prosedur emulsifikasi minyak silikon
Pengemulsi (0,5ml) ditempatkan ke dalam gelas
kuvet dengan alas datar (dimensi dalam:
4310340mm). Minyak silikon (0,5ml) ditambahkan
hati-hati untuk memungkinkan pemisahan fase. Seluruh gelas
kuvet kemudian disentrifugasi pada 5000 g untuk menghilangkannya
gelembung udara. Sejak prosedur emulsifikasi
terjadi di perbatasan antara dua fase, tidak ada udara
gelembung terlibat. Minyak silikon berikut
yang digunakan: Siluron 1000 (1000mPas, Lot SIL1
170708), Siluron 2000 (2000 mPas, Lot SIL2
120808), Siluron 5000 (5000 mPas, Lot SIL5
191007), Acri.Sil-Ol 5000 (5000mPas, Lot 3282),
Oxane 5700 (5700 mPas, Lot 31908), Densiron 68
LV (300 mPas, Lot D68-LV 120207), Densiron 68
(1400 mPas, Lot D68 101207) dan Densiron 68 HV
(1300mPas). Siluron 1000, Siluron 2000, Siluron
5000, Densiron 68 LV, Densiron 68 dan Densiron 68
HV disediakan oleh Fluoron GmbH (Neu-Ulm,
Jerman). Acri.Sil-Ol 5000 diperoleh dari Acri.
Tec GmbH (Hennigsdorf, Jerman), dan Oxane
5700 diperoleh dari Bausch & Lomb Surgical
(Berlin, Jerman).
Tes dilakukan dalam rangkap dua untuk setiap oli
jenis dan untuk setiap pengemulsi. Untuk yang negatif
kontrol, pengemulsi diganti dengan distilasi
air. Kuvet kaca diadakan di tengah

Halaman 2
perangkat sonikasi (Sonorex TK 30, Bandelin). Air di dalam
perangkat sonikasi disimpan pada 20e248C. Sonication adalah
dilakukan selama 3 menit untuk menginduksi emulsifikasi. Setelah itu,
kuvet kaca disentrifugasi pada 5000 g selama 30 menit.
Penilaian emulsifikasi
Emulsifikasi dinilai setiap 10 menit setelah sentrifuga-
tion. Kuvet difoto bersama dengan penggaris di atasnya
sisi, dan jumlah minyak teremulsi kemudian diukur pada
foto menggunakan perangkat lunak ImageJ (National Institutes of
Kesehatan, Bethesda, Maryland). Rasio minyak silikon teremulsi
ditentukan dengan membandingkan dengan seluruh area
fase air, minyak teremulsi dan minyak non-emulsi. Emul-
luas sifikasi sebagai persentase dihitung: luas emulsifikasi
(%) ¼ (luas minyak teremulsi / luas total) 3100. Total area¼area
area encer + area minyak teremulsi + area minyak non-emulsi.
Setiap sampel (n¼2) diukur 10 kali. Rasio rata-rata adalah
dihitung dari semua 10 pengukuran. Semua data dihitung
dari area emulsifikasi setelah 30 menit sentrifugasi.
Metode statistik
Untuk analisis statistik, tes dilakukan dengan menggunakan NCSS
(sistem statistik pemecah nomor) perangkat lunak (versi 2004).
Sarana dari semua 10 pengukuran digunakan. Nilai p <0,05
dianggap signifikan secara statistik. Semua nilai adalah
ditampilkan sebagai mean6SD.
HASIL
Pada kontrol negatif menggunakan akuades, sejumlah kecil
tetesan minyak terdeteksi setelah sonikasi; tetesan minyak
menghilang setelah sentrifugasi. Setelah proses emulsifikasi-
Pada saat menggunakan minyak silikon dengan pengemulsi, terlihat tiga fase
di kuvet kaca (gambar 1). Fase air di bagian bawah,
minyak silikon teremulsi di tengah dan silikon non-emulsi
minyak di atas terlihat untuk Siluron 1000, Siluron 2000, Siluron 5000,
AcriSil-Ol 5000 dan Oxane 5700. Minyak silikon lebih berat dari air
menunjukkan minyak silikon non-emulsi di bagian bawah, teremulsi
minyak silikon di tengah dan fase air di atas. Selama
prosedur sonikasi, gelembung minyak teremulsi dibuat di
perbatasan antara fase air dan minyak. Tidak ada gelembung udara
terlibat dalam proses ini. Area emulsifikasi adalah
dinilai setiap 10 menit setelah sentrifugasi, dan tidak ada statistik
perbedaan ditemukan di antara mereka. Oleh karena itu, semua data yang ditampilkan
digunakan
data setelah 30 menit sentrifugasi.
Secara keseluruhan, area emulsifikasi dari minyak silikon diuji
lebih tinggi pada serum dibandingkan pada kelompok plasma (tabel 2). Itu
daerah emulsifikasi terendah ditemukan untuk Siluron 2000 di
kelompok serum (8,2%) dan Densiron 68 HV dalam kelompok plasma
(2,4%). Ringkasan area emulsifikasi pada kedua grup adalah
disajikan pada gambar 2, 3. Nilai p dari semua kelompok disajikan
pada gambar 4. Secara keseluruhan, tidak ada signifikansi statistik yang terlihat di antara
keduanya
AcriSil-Ol 5000, Oxane 5700 dan Siluron 5000. Dibandingkan dengan
minyak silikon yang lebih ringan dari air, Siluron 2000 memiliki lebih sedikit
emulsifikasi, yang juga signifikan secara statistik. Densiron 68
HV juga memiliki lebih sedikit emulsifikasi dibandingkan dengan yang lebih berat-
minyak silikon dari air. Dalam kelompok serum, Densiron 68 HV memiliki
tentang emulsifikasi yang sama dengan Siluron 5000 dan Oxane 5700.
DISKUSI
Dalam studi ini, kami menyajikan analisis kuantitatif emulsi-
fication dari minyak silikon. Kami memodifikasi metode awalnya
dikembangkan oleh Savion et al 12 dengan menggunakan kuvet kaca dengan pipih
dasar, yang memungkinkan kami juga untuk mengukur sili yang lebih berat dari
minyak kerucut. Kami juga menentukan luas minyak yang diemulsi
bukannya ketinggian, yang meningkatkan ketepatan tes.
Siluron 5000, Acri.Sil-Ol 5000 dan Oxane 5700 adalah
agen tamponade paling sering digunakan di Jerman dan sedang
dianggap minyak silikon standar yang dibandingkan dengan semua minyak lainnya
diuji. Menggunakan model in vitro kami, secara statistik tidak ada
perbedaan yang signifikan antara ketiga minyak ini
emulsifikasi mereka (gambar 4). Seperti yang diharapkan, jauh lebih tinggi
derajat emulsifikasi ditemukan untuk minyak silikon 1000cSt
(Siluron 1000). Perbedaan ini lebih menonjol saat digunakan
serum sebagai pengemulsi daripada plasma.
Perbedaan serum dan plasma terletak pada kandungan
trombosit. Serum kekurangan trombosit, sedangkan plasma tidak
tidak. Secara keseluruhan, terlihat emulsifikasi yang sedikit lebih tinggi, menggunakan
serum, bukan plasma. Satu penjelasan untuk ini mungkin adalah
aktivasi trombosit dalam tabung serum selama
proses koagulasi. Selama ini trombosit disekresikan bermacam-macam
protein koagulasi seperti serotonin, faktor platelet 4, platelet
faktor pertumbuhan turunan, fibrinogen, dll. Ini mungkin berfungsi sebagai
pengemulsi juga, menjelaskan emulsifikasi yang sedikit lebih tinggi
Tabel 1 Komposisi berbagai minyak silikon
Minyak silikon
Komposisi
Siluron 1000
PMDS 1000 mPas (MW 36.760 g / mol)
Siluron 2000
5% minyak silikon dengan berat molekul tinggi
(423 K PMDS) + 95% Siluron 1000
Siluron 5000
PMDS 5000 mPas (MW 65.025 g / mol)
Acri.Sil-Ol 5000
PMDS 5000 mPas
Oksana 5700
PMDS 5700 mPas
Densiron 68 LV
30,5% SFA + 69,5% Siluron 1000
Densiron 68
30,5% SFA + 69,5% Siluron 5000
Densiron 68 HV
30,5% SFA + 69,5% dari (10% Sil 2500000
+ 90% Siluron 1000)
MW, berat molekul; PMDS, polydimethysiloxane; SFA, alkana semifluorinasi.
Gambar 1 Emulsifikasi berbagai
minyak silikon menggunakan plasma sebagai pengemulsi.
Saat menguji silikon yang lebih ringan dari air
minyak, tiga fase dapat dilihat: non-
minyak silikon teremulsi (atas), diemulsi
minyak silikon (tengah) dan fase air
(bawah). Saat menguji lebih berat dari
minyak silikon air, fase berair
berada di atas, minyak silikon teremulsi di
minyak tengah dan non-emulsi di
bawah. Densiron 68 LV teremulsi dengan mudah
dan agak menyebar, menciptakan
penampilan yang kabur, dibandingkan dengan
sonikasi sebelumnya.
510
Br J Ophthalmol 2010; 94: 509e512. doi: 10.1136 / bjo.2009.170852
Ilmu laboratorium

Halaman 3
tingkat dalam kelompok serum. Peran setiap protein yang disekresikan
emulsifikasi masih spekulatif.
Siluron 2000 (minyak silikon 1000 cSt ditambah minyak silikon rantai panjang)
diemulsi secara signifikan kurang dari Siluron 1000 (1000 cSt
minyak silikon konvensional), dan bahkan lebih kecil dari Siluron 5000, Acri.
Sil-Ol 5000 dan Oxane 5700 (angka 3, 4). Ini menunjukkan bahwa
emulsifikasi dapat dikurangi dengan menambahkan silikon rantai sangat panjang
molekul. Viskositas geser Siluron 1000 (1000cSt)
meningkat menjadi 2000 cSt dalam kasus Siluron 2000.
Kebanyakan keberatan terhadap minyak silikon yang lebih berat dari air adalah
berdasarkan tingkat emulsifikasi Densiron 68 yang lebih tinggi
(Siluron 5000 + F 6 H 8 ). 1 13e15 Kami berspekulasi bahwa penambahan
fluorokarbon semifluorinasi tidak hanya membuat silikon lebih banyak
hidrofilik tetapi juga membuatnya lebih rentan terhadap pemisahan
tetesan kecil ke dalam lingkungan berair. Beruntung
bahwa penambahan molekul minyak silikon rantai panjang (Densiron
68 HV) ke Densiron 68 LV (Siluron 1000 + F 6 H 8 ) secara signifikan
mengurangi emulsifikasi dibandingkan dengan Densiron 68 LV atau
Siluron 1000. Jika dibandingkan dengan tiga oli 5000cSt,
Densiron 68 HV menunjukkan tentang emulsifikasi yang sama di
kelompok serum tetapi menunjukkan emulsifikasi yang lebih rendah dalam plasma
kelompok (gambar 4). Viskositas geser Densiron 68 (1400 mPas)
dan Densiron 68 HV (1300 mPas) agak mirip. Satu mungkin
Oleh karena itu menyarankan untuk memberikan preferensi pada Densiron 68 HV
daripada
Densiron 68; studi tentang toleransi retinal masih tertunda.
Semakin tinggi kemungkinan emulsifikasi untuk pertemuan
minyak silikon tradisional, yang lebih jelas adalah efek penurunannya
menambahkan rantai panjang silikon. Efek ini paling baik ditampilkan saat
membandingkan Densiron 68 LV (campuran Siluron 1000 dan F 6 H 8 )
dengan Densiron 68 HV (campuran Siluron 1000, F 6 H 8 , dan sangat-
molekul silikon rantai panjang). Emulsifikasi Densiron 68
HV lebih rendah, dan perbedaannya dengan Densiron 68 LV sangat mencolok
penting. Kami menyimpulkan bahwa menambahkan sejumlah kecil sangat-panjang-
rantai molekul minyak silikon memiliki pengaruh besar dalam mengurangi
emulsifikasi. Alasan untuk ini adalah ekstensional yang meningkat
viskositas fluida non-Newtonian, yang menentukan
kecenderungan untuk emulsifikasi.
Hasil in vitro yang disajikan di sini memerlukan verifikasi oleh
studi masa depan menggunakan model hewan. Tetap saja, beberapa kesulitan
menggunakan model hewan untuk menguji emulsifikasi dan toksisitas
minyak silikon belum bisa diatasi. Pada model in vivo, beragam
jumlah pengemulsi atau berbagai intensitas gerakan mata
mata hewan mungkin menghasilkan jumlah emulsifica-
untuk minyak silikon yang sama. Juga, tidak ada metode obyektif
saat ini dikenal untuk mengukur emulsifikasi in vivo. Dalam istilah
toksisitas, model pada beberapa hewan, seperti kelinci, telah
terbukti tidak memadai. Ini karena ketidakmampuan untuk
menginduksi detasemen vitreous posterior lengkap, menyebabkan
retina untuk dilindungi dari minyak silikon oleh sisa
seperti kaca. 16 Model hewan yang tepat untuk pengujian emulsifikasi dan
toksisitas masih akan dikembangkan. Namun demikian, kami tunjukkan dalam hal ini
kertas yang emulsifikasi minyak silikon dapat dipengaruhi
menambahkan minyak silikon rantai sangat panjang. Model in vitro ditunjukkan pada
Makalah ini bahkan lebih penting, karena ini menunjukkan bahwa dengan sama
jumlah pengemulsi dan energi yang sama yang digunakan untuk menginduksi emul-
sifikasi, ada lebih sedikit emulsifikasi dengan Siluron 2000 dan
Densiron 68 HV dibandingkan dengan minyak silikon lainnya. Ini penting-
langkah tant sebelum beralih ke model in vivo. Juga, secara in vivo
model, proporsi minyak dan pengemulsi yang berbeda akan
diharapkan.
Sebagai kesimpulan, dengan menggunakan teknik in vitro, kami menghitung
emulsifikasi berbagai minyak silikon. Metode yang disajikan dalam
studi ini memberikan alat yang sangat efektif untuk penentuan yang akurat
minasi emulsifikasi dan perbandingan silikon yang berbeda
Tabel 2 Area emulsifikasi (%; mean6SD) minyak silikon ditentukan menggunakan uji in
vitro
Minyak silikon
Pengemulsi
Siluron
1000
Siluron
2000
Siluron
5.000
AcriSil-
Ol 5000
Oxane
5700
Densiron
68 LV
Densiron
68
Densiron
68 HV
Plasma
11.061.7
6.560.4
8.962.0
8.961.8
8.961.6
46.361.6
14.965.7
2.460.5
Serum
16.4611.1
8.261.6
10.061.9
9.960.8
9.662.2
50.362.0
28.761.8
10.560.7
Gambar 2 Daerah emulsifikasi berbagai minyak silikon menggunakan plasma sebagai
pengemulsi.
Gambar 3 Area emulsifikasi berbagai minyak silikon menggunakan serum sebagai
pengemulsi.
Br J Ophthalmol 2010; 94: 509e512. doi: 10.1136 / bjo.2009.170852
511
Ilmu laboratorium
 Halaman 4
minyak. Kami juga menunjukkannya, dengan menambahkan minyak silikon rantai panjang
molekul, emulsifikasi minyak silikon dapat dikurangi, seperti pada
kasus Siluron 2000 dan Densiron 68 HV.
Pendanaan Didukung sebagian oleh Forschung fü r das Sehen eV.
Kepentingan yang saling bersaing Bahan, yaitu minyak silikon, disediakan oleh Fluoron
GmbH,
Neu-Ulm, Jerman.
Persetujuan pasien Diperoleh.
Provenance dan peer review Tidak ditugaskan; peer review secara eksternal.
REFERENSI
1. Engelmann K, Herbrig E. [Agen endotamponade berbeda dan klinisnya
indikasi]. Klin Monbl Augenheilkd 200; 225: 138e45.
2. Blodi FC. Injeksi dan impregnasi silikon cair ke dalam jaringan mata. Am J
Ophthalmol 1971; 71: 1044e51.
3. Kirchhof B, Tavakolian U, Paulmann H, dkk. Temuan histopatologi di mata setelah
injeksi minyak silikon. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol 1986; 224: 34e7.
4. Manschot WA. Injeksi silikon intravitreal. Adv Ophthalmol 198; 36: 197e207.
5. Ni C, Wang WJ, Albert DM, dkk. Injeksi silikon intravitreous. Histopatologi
temuan di mata manusia setelah 12 tahun. Arch Ophthalmol 198; 101:
1399e401.
6. Joussen AM, Wong D. Konsep kemungkinan tamponade berat dan batasan.
Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol 2008; 246: 1217e24.
7. Heidenkummer HP, Kampik A, Thierfelder S. Evaluasi eksperimental in vitro
stabilitas polidimetilsiloksan (minyak silikon) yang dimurnikan dalam rentang viskositas
dari 1000 hingga
5000 centistoke. Retina 1992; 12 (3 Suppl): S28e32.
8. Barnes HA. Buku Pegangan reologi dasar. Wales: Universitas Wales, Institut
dari Mekanika Fluida non-Newtonian, 2000; 204.
9. Landau LD, Lifhitz EM. Mekanika fluida (kursus fisika teoretis). Edisi ke-2.
Oxford, Inggris: Butterworth-Heinemann, 1987; 552.
10. Happel J, hidrodinamika bilangan Brenner H. Low Reynolds: dengan aplikasi khusus
untuk
media partikulat (mekanisme fluida dan proses transportasi). Edisi pertama. Den Haag:
Martinus
Nijhoff Publishers, 1973: 570.
11. Williams RL, Hari M, Garvey MJ, dkk. Meningkatkan viskositas ekstensional silikon
minyak mengurangi kecenderungan emulsifikasi. Retina 2009.
12. Savion N, Alhalel A, Treister G, dkk. Peran komponen darah dalam minyak silikon
okular
emulsifikasi. Studi tentang model in vitro. Berinvestasi Ophthalmol Vis Sci 199; 37: 2694e9.
13. Heimann H, Stappler T, Wong D. Tamponade berat 1: tinjauan indikasi, penggunaan,
dan komplikasi. Mata 2008; 22: 1342e59.
14. Majid MA, Hussin HM, Biswas S, dkk. Emulsifikasi Densiron-68 digunakan di inferior
operasi pelepasan retina. Mata 2008; 22: 152e7.
15. Lai WW, Wong D, Li KK, dkk. Emulsifikasi dan pembentukan hipopion terbalik dari
oksana
HD di ruang anterior. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol 2008; 246: 1633e5.
16. Mackiewicz J, Maaijwee K, Luke C, dkk. Pengaruh gravitasi dalam cairan vitreus jangka
panjang
tamponade: investigasi in vivo menggunakan cairan perfluorocarbon dan semi-fluorinated
alkana. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol 2007; 245: 665e75.
Gambar 4 Tingkat probabilitas (nilai p) dari
perbedaan antara minyak silikon
diuji menggunakan plasma dan serum sebagai
pengemulsi. Nilai non-signifikan adalah
ditampilkan dalam kotak berbayang abu-abu.
512
Br J Ophthalmol 2010; 94: 509e512. doi: 10.1136 / bjo.2009.170852
Ilmu laboratorium