ISOLASI DAN ANALISIS MINYAK ATSIRI

KULIT BUAH JERUK KASTURI (Citrus microcarpa Bunge)

ISOLATION AND ANALYSIS OF VOLATILE OIL

FROM Citrus microcarpa Bunge PEEL

Tiomangsi M. Sihotang, Panal Sitorus*, Effendy De Lux Putra

Departemen Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

*Coresponding author:
Panal Sitorus
Departemen Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara, Medan
Jl. Tri Dharma No. 5, Pintu 4, Kampus USU Medan 20155, Indonesia
No Hp: 08126507151
Email: sitoruspanal@gmail.com
 ABSTRAK

Latar Belakang: Tumbuhan jeruk dari famili Rutaceae adalah salah satu tanaman yang mengandung
minyak atsiri dan banyak dimanfaatkan masyarakat sebagai bumbu penyedap masakan dan
pembuatan minuman. Salah satu contoh dari tumbuhan jeruk yang dapat digunakan adalah jeruk
kasturi (Citrus microcarpa Bunge). Kulit buah jeruk kasturi mengandung 1,20% minyak atsiri dengan
komponen utama: sitronelol, (R)-(+) sitronelal, β-pinena, D-limonena, 4-metil-1-(1-metiletil)-3-
sikloheksen-1-ol, β-linalool, α-terpineol, αfarnesena, β-sitral, L-isopulegol dan cis-linalil oksida.
Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk memisahkan dan menganalisis komponen minyak atsiri kulit
buah jeruk kasturi segar dan kering secara GC-MS.
Metode Penelitian: Penelitian ini meliputi pengambilan dan pengolahan sampel, karakterisasi
simplisia pemeriksaan karakteristik simplisia, penetapan kadar minyak atsiri dilakukan dengan
menggunakan alat Stahl, isolasi minyak atsiri kulit buah jeruk kasturi segar dan kering dilakukan
dengan metode penyulingan air (water distillation), identifikasi minyak atsiri meliputi penetapan
parameter fisika (indeks bias dan bobot jenis) dan analisis komponen minyak atsiri dengan
menggunakan seperangkat alat GC-MS.
Hasil: Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia kulit buah jeruk kasturi diperoleh kadar air 7,99%;
kadar sari larut dalam air 21,76%; kadar sari larut dalam etanol 12,82%; kadar abu total 5,51%; kadar
abu tidak larut dalam asam 0,35%; hasil penetapan kadar minyak atsiri dengan alat Stahl diperoleh
kadar minyak atsiri kulit buah jeruk kasturi segar sebesar 0,93%, dan kadar minyak atsiri kulit buah
jeruk kasturi kering sebesar 1,27%. Hasil penetapan indeks bias minyak atsiri kulit buah jeruk kasturi
segar dan kering adalah sama, yakni sebesar 1,4240. Bobot jenis minyak atsiri kulit buah jeruk kasturi
segar sebesar 0,8526 dan bobot jenis minyak atsiri kulit buah jeruk kasturi kering sebesar 0,8522.
Hasil analisis GC-MS minyak atsiri yang diperoleh dari kulit buah jeruk kasturi (Citrus microcarpa
Bunge) segar menunjukkan 6 komponen utama yaitu: α-pinen (1,65%), β-pinen (1,15%), β-mirsen
(6,26%), Limonen (77,03%), 2,6-oktadien-1-ol (0,56%), dan 1,6-siklodekadien (1,99%). Sedangkan
hasil analisis GC-MS minyak atsiri yang diperoleh dari kulit buah jeruk kasturi (Citrus microcarpa
Bunge) kering menunjukkan 6 komponen utama yaitu: α-pinen (2,05%), β-pinen (1,13%), β-mirsen
(6,51%), D-Limonen (76,02%), 2,6-oktadien-1-ol (0,44%), dan 1,6- siklodekadien (1,51%).
Kesimpulan: Minyak atsiri kulit buah jeruk kasturi dapat dianalisis dan dipisahkan komponennya
dengan GC-MS serta memiliki perbedaan komponen antara kulit buah segar dan kering.

Kata kunci: Minyak atsiri, jeruk kasturi (Citrus microcarpa Bunge), GC-MS
 ABSTRACT

Background: Oranges from Rutaceae family are kind of plants that contains of volatile oil which can
be used as food flavoring or juices. One of the oranges that can be used is Citrus microcarpa Bunge.
This orange peel consists of 1.20% volatile oil with the main component include sitronelol, (R)-(+)
sitronelal, -pinene, D-limonene, 4-methyl-1-(1-methylethyl)-3-cyclohexene-1-ol, -linalool, -
terpineol, -farnesene, -citral, L-isopulegol dan cis-linalil oxide.
Objective: The aims of this study are to separate and analyze component of volatile oil from fresh and
dried peel of Citrus microcarpa Bunge by GC-MS.
Method: This study included collection and procession of Citrus microcarpa Bunge peel,
characterization of simplex, determination of volatile oil content using Stahl method, isolation of
volatile oil by water distillation, identification of volatile oil, such as physic parameter identification
and analysis of volatile oil component by Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS).
Results: The result of simplex characterization of Citrus microcarpa Bunge peel gave the water
content value 7.99%, the water soluble extract value 21.76%, the ethanol extract value 12.82%, the
total ash value 5.51%, the acid insoluble ash value 0.35% and the volatile oil content of fresh and
dried Citrus microcarpa Bunge peel were 0.93% v/b and 1.27% v/b, respectively. Both volatile oil
refractive index for dried and fresh Citrus microcarpa Bunge peel were 1.4240. The density of dried
and fresh Citrus microcarpa Bunge peel were 0.8526 and 0.8522, respectively. The result of volatile
oil component of fresh Citrus microcarpa Bunge peel analyzed by GC-MS revealed the presence of
six main components, such as -pinene (1.65%), -pinene (1.15%), -mirsene (6.26%), limonene
(77.03%), 2,6-octadien-1-ol (0.56%) and 1,6-cyclodecadien (1.99%). Meanwhile, the result of volatile
oil component of dried Citrus microcarpa Bunge peel analyzed by GC-MS revealed the presence of
six main components as well, such as -pinene (2.05%), -pinene (1.13%), -mirsene (6.51%), D-
limonene (76.02%), 2,6-octadiene-1-ol (0.44%) and 1,6-cyclodecadiene (1.51%).
Conclusion: The volatile oil components from Citrus microcarpa Bunge peel can be analyzed and
separated using GC-MS and there are different results between fresh and dried peel.

Key words: Volatile oil, Citrus microcarpa Bunge, GC-MS

PENDAHULUAN
Minyak atsiri adalah zat berbau
yang terkandung dalam tanaman, disebut
juga minyak menguap, minyak eteris atau
minyak esensial karena mudah menguap
pada suhu kamar (Gunawan & Mulyani,
2004).
Kegunaan minyak atsiri sangat luas
dan spesifik, khususnya dalam berbagai
bidang industri, antara lain dalam industri
kosmetik, industri makanan, industri
parfum, industri farmasi atau obat-obatan
sebagai anti nyeri, anti infeksi, pembunuh
bakteri, dalam industri bahan pengawet,
bahkan digunakan pula sebagai insektisida
(Lutony & Rahmayati, 1994).
Minyak atsiri dari bagian kulit buah
jeruk banyak digunakan sebagai flavoring
agent untuk berbagai makanan dan
minuman, seperti: minuman beralkohol dan
non alkohol, roti panggang, kembang gula,
puding, gelatin desert, permen karet, dan
bahan obat-obatan. Minyak atsiri ini juga
digunakan dalam parfum, kosmetik dan
sebagai bahan pewangi sabun. Karenanya
produksi dan konsumsi minyak ini juga
cukup besar (Guenther, 1990).
Kulit jeruk merupakan sampah atau
limbah yang dapat diolah untuk
menghasilkan produk bernilai tinggi, yaitu
minyak atsiri. Produk ini digandrungi oleh
konsumen, terutama kalangan menengah ke
atas, untuk keperluan kesehatan dan bahan
pengharum (Anonim, 2008).
Jeruk kasturi berasal dari Filipina
yang dikenal dengan nama kalamansi,
aldonisi, kalamodin dan telah
dibudidayakan secara luas. Jeruk ini
tumbuh mencapai ketinggian 3-4 meter
dengan buah yang relatif sangat kecil
dibandingkan jeruk jenis lain, berbau khas
dan sering digunakan sebagai bumbu
masak. Di Indonesia jenis ini biasa dikenal
dengan nama jeruk limau dan umumnya
digunakan sebagai penyedap dan perancah
dari beberapa jenis masakan (Jamal, dkk.,
2000).
Kebutuhan minyak atsiri meningkat
terus seiring dengan kegunaan yang makin
beragam dari minyak atsiri. Hal ini
merupakan upaya untuk menambah
produksi zat pewangi yang dapat dipakai
oleh masyarakat. Berdasarkan uraian di
atas, penulis tertarik memanfaatkan kulit
buah jeruk kasturi sebagai bahan penelitian
dengan melakukan karakterisasi simplisia,
isolasi, serta analisis komponen minyak
atsiri secara Gas Chromatography-Mass
Spectrometer (GC-MS) dari kulit buah
jeruk kasturi segar dan kering.
METODE PENELITIAN
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian
adalah alat-alat gelas laboratorium,
mikroskop, refraktometer abbe,
piknometer, oven, neraca listrik (Mettler
Toledo), neraca kasar (Ohaus), seperangkat
alat Stahl, seperangkat alat destilasi air
(Water Distillation), Gas Chromatograph-
Mass Spectrometer (GC-MS) model
Shimadzu QP 2010 Plus.
Bahan-bahan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah kulit buah jeruk
kasturi segar dan kering, natrium sulfat
anhidrat p.a (E. Merck), kloralhidrat p.a (E.
Merck), kloroform p.a (E. Merck), etanol
96%, toluen p.a, HCl p.a, dan air suling.
Penelitian ini dilakukan melalui
beberapa tahapan kerja sebagai berikut:
1. Pengumpulan bahan dan determinasi
tumbuhan dilakukan di Herbarium
Bogoriense, Bidang Botani Pusat
Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu
Pengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor.
2. Pembuatan simplisia kulit buah jeruk
kasturi
3. Pemeriksaan makroskopik dan
mikroskopik kulit buah jeruk kasturi
segar dan serbuk simplisia kulit buah
jeruk kasturi
4. Pemeriksaan karakteristik simplisia
meliputi penetapan kadar air dengan
metode Azeotropi, kadar sari larut air
dan etanol dengan metode Gravimetri,
kadar abu total dan tidak larut asam
dengan metode Gravimetri, dan
penetapan kadar minyak atsiri dengan
menggunakan alat Stahl.
5. Isolasi minyak atsiri kulit buah jeruk
kasturi segar dan kering dilakukan
dengan metode penyulingan air (water
distillation).
6. Identifikasi minyak atsiri meliputi
penetapan parameter fisika yaitu
penentuan indeks bias dan bobot jenis.
Penentuan indeks bias dilakukan
menggunakan alat Refraktometer Abbe.
Penentuan bobot jenis dilakukan
dengan menggunakan piknometer.
7. Analisis komponen minyak atsiri dengan
menggunakan seperangkat alat GC-MS
model Shimadzu QP-2010 Plus dan
Auto Injecto AOC-20i. Kondisi analisis
adalah jenis kolom kapiler Rtx - 5MS,
panjang kolom 3 m, diameter kolom
dalam 0,25 mm, suhu injektor 270oC,
gas pembawa He dengan laju alir 1,16
ml/menit. Suhu kolom terprogram
(temperature programming) dengan
suhu awal 60oC selama 5 menit, lalu
dinaikkan perlahan-lahan dengan laju
kenaikan 5,0oC/menit sampai suhu akhir
280oC yang dipertahankan. Cara
identifikasi komponen minyak atsiri
adalah dengan membandingkan
spektrum massa dan komponen minyak
atsiri yang diperoleh (unknown) dengan
data library yang memiliki tingkat
kemiripan (similary index) tertinggi.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pemeriksaan Makroskopik dan
Mikroskopik
Makroskopik: kulit buah jeruk kasturi
segar dicirikan dengan kulit buah berwarna
hijau, bagian dalam berwarna putih, kulit
tipis, berupa potongan-potongan kecil kulit
buah, panjang kira-kira 3-4 cm, lebar 1-2
cm dan berbau khas.
Kulit buah jeruk kasturi kering dicirikan
dengan kulit buah berwarna hijau
kecoklatan, bagian dalam berwarna putih
kecoklatan, menggulung ke dalam, berupa
potongan-potongan kecil kulit buah yang
telah dikeringkan dan berbau khas
Mikroskopik: Pada penampang
melintang kulit segar tampak kutikula,
bagian sel epidermis, rongga skizolisigen,
kelenjar minyak, bagian sel parenkim, dan
berkas pembuluh.
Pada serbuk simplisia kulit buah jeruk
kasturi tampak fragmen rongga
skizolisigen, parenkim dengan kristal
kalsium oksalat bentuk prisma dan berkas
pembuluh.
Karakterisasi Simplisia
Penetapan kadar air dari simplisia
jeruk kasturi adalah sebesar
7,99%. Pengeringan simplisia dilakukan
untuk mendapatkan simplisia yang tidak
mudah rusak sehingga dapat disimpan
dalam waktu yang lebih lama. Penurunan
mutu atau kerusakan simplisia dapat
dicegah dengan mengurangi kadar air dan
penghentian reaksi enzimatik. Reaksi
enzimatik tidak berlangsung lagi bila kadar
air dalam simplisia kurang dari 10%
(BPOM RI, 2005; Trease dan Evans, 1983).
Penetapan kadar sari larut air-
kloroform dilakukan untuk mengetahui
kadar sari yang larut dalam air yang
terkandung di dalam simplisia kulit buah
jeruk kasturi adalah 21,76%.
Penetapan kadar sari larut dalam
etanol dilakukan untuk mengetahui kadar
sari larut dalam etanol yang hasilnya
18,82%.
Penetapan kadar abu total dilakukan
untuk mengetahui kadar zat anorganik
dalam simplisia kulit buah jeruk kasturi
yang hasilnya adalah 5,51%.
Penetapan kadar abu tidak larut
dalam asam dilakukan untuk mengetahui
kadar zat anorganik yang tidak larut dalam
asam yang hasilnya adalah 0,35%.
Monografi dari simplisia tidak ditemukan
di buku Materia Medika Indonesia.
Kadar minyak atsiri kulit buah jeruk
kasturi segar sebesar 0,93% v/b dan kadar
minyak atsiri kulit buah jeruk kasturi kering
sebesar 1,27%.
Dapat diketahui bahwa minyak atsiri lebih
banyak terdapat pada kulit buah jeruk
kasturi kering.
Identifikasi Minyak Atsiri
 Hasil penentuan indeks bias dan Bobot jenis minyak atsiri dari kulit buah
bobot jenis minyak atsiri hasil isolasi dari jeruk kasturi segar adalah sebesar 0,8526
kulit buah jeruk kasturi dapat dilihat pada dan minyak atsiri dari kulit buah jeruk
Tabel 1. kasturi kering adalah sebesar 0,8522. Hal
ini disebabkan pada identifikasi minyak
atsiri dengan GC-MS diperoleh komponen
senyawa kimia dari minyak atsiri kulit buah
jeruk kasturi segar lebih banyak
dibandingkan dengan minyak atsiri kulit
buah jeruk kasturi kering.
Tabel 1. Hasil penentuan indeks bias
dan bobot jenis minyak atsiri Analisis dengan GC-MS
Hasil analisis dengan GC-MS minyak
Indeks Bobot atsiri dari kulit buah jeruk kasturi segar
Sampel
bias jenis diperoleh 25 puncak dengan enam
Kulit buah segar 1,4240 0,8526 komponen utama minyak atsiri
Kulit buah kering 1,4240 0,8522 (berdasarkan konsentrasi tertinggi) yaitu: α-
pinen, β-pinen, β-mirsen, Limonen, 2,6-
oktadien-1-ol, dan 1,6-siklodekadien.
Indeks bias merupakan Hasil analisis dengan GC-MS minyak atsiri
perbandingan antara kecepatan cahaya di dari kulit buah jeruk kasturi segar dapat
dalam udara dengan kecepatan cahaya di dilihat pada Gambar 1 dan Tabel 2.
dalam zat tersebut pada suhu tertentu.
Indeks bias berguna untuk identifikasi Hasil analisis dengan GC-MS
kemurnian. minyak atsiri dari kulit buah jeruk kasturi
Dapat dilihat bahwa indeks bias kering diperoleh 20 puncak dengan enam
minyak atsiri dari kulit buah jeruk kasturi komponen utama minyak atsiri
segar dan kering hasilnya sama yaitu (berdasarkan konsentrasi tertinggi) yaitu: α-
1,4240. Perubahan kecil pada komposisi pinen, β-pinen, β-mirsen, D-Limonen, 2,6-
kimiawi minyak atsiri tidak mempengaruhi oktadien-1-ol, dan 1,6-siklodekadien.
harga indeks bias. Hasil analisis dengan GC-MS minyak atsiri
Bobot jenis minyak atsiri dari kulit buah jeruk kasturi kering dapat
merupakan perbandingan antara bobot dilihat pada Gambar 2 dan Tabel 3.
minyak dengan bobot air pada volume air
yang sama dengan volume minyak. Bobot
jenis merupakan salah satu kriteria paling
penting dalam menentukan mutu dan
kemurnian minyak atsiri (Armando, 2009).

Gambar 1. Kromatogram GC minyak atsiri dari kulit buah jeruk kasturi segar.
Gambar 2. Kromatogram GC minyak atsiri dari kulit buah jeruk kasturi kering.

No Nama Waktu Kada

Komponen Tamba r (%) No. Nama Waktu Kadar
t Komponen Tamba (%)
(menit) t
1. Heksana 1,595 9,22 (menit
2. Siklopentan 1,712 0,20 )
3. α- Pinen 6,565 1,65 1. Heksana 1,597 10,93
4. Sikloheksen 8,042 0,37 2. Stiren 5,183 0,24
5. β- Pinen 8,142 1,15 3. α- Pinen 6,596 2,05
6. β- Mirsen 8,721 6,26 4. β- Feladren 8,056 0,34
7. Limonen Tabel
10,681 77,03 2. Komposisi
5. minyak
β- atsiri
Pinen 8,172 1,13
8. 1- oktanol 11,924 0,11 dari kulit
Tabel
6.buah
3. Komposisi
jeruk kasturi
β- Mirsen minyak atsiri
8,751 6,51
segar. 7. dari kulit
D- Limonen buah jeruk kasturi
10,671 76,02
9. 2- siklopenten- 12,607 0,03
8. kering.
1,6- 13,080 0,33
1-one
10. 1,6- oktadien- 13,059 0,36 oktadien-3-
3-ol ol
11. Nonanal 13,239 0,19 9. Dekanal 13,262 0,07
12. 1- propanon 13,725 0,01 10. Pentana 16,122 0,02
13. 1- heksanol, 3- 15,887 0,01 11. 3- 16,639 0,06
metil 7 sikloheksen-
14. 3-metil-hepta- 16,103 0,04 1-metanol
1,6-dien-3-ol 12. 1-heksen, 17,021 0,02
15. 3-sikloheksen- 16,620 0,09 3,4-dimetil
1-metanol 13. Dodekanal 17,204 0,13
16. Dekanal 17,187 0,32 14. 3-metil- 17,448 0,03
17. 1-okten 17,430 0,03 hepta-1,6-
18. Metil vinil 19,269 0,01 dien-3-ol
keton 15. 2- 18,661 0,07
19. Heksanal 20,921 0,03 sikloheksen-
20. 1-penten-3- 22,938 0,04 1-one
one 16. Sikloheksen 22,041 0,03
21. 2,6-oktadien-1- 23,598 0,56 17. 1-penten-3- 22,949 0,44
ol one
22. Propan, 1- 24,430 0,04 18. 2,6- 23,608 1,51
bromo-2-metil oktadien-1-
23. 1,6- 26,920 1,99 ol
siklodekadien 19. 1,6- 26,925 0,03
24. Naftalen 31,575 0,17 siklodekadie
25. 2- 32,137 0,17 n
naftalenmetan 20. 1,5- 27,432 0,04
ol heptadien
KESIMPULAN
Hasil pemeriksaan karakteristik kulit
buah jeruk kasturi kering diperoleh kadar
air 7,99%; kadar sari yang larut dalam air
21,76%; kadar sari yang larut dalam etanol
18,82%; kadar abu total 5,51%; kadar abu
yang tidak larut dalam asam 0,35%.
Hasil penetapan kadar minyak atsiri
dengan alat Stahl diperoleh kadar minyak
atsiri kulit buah jeruk kasturi segar sebesar
0,93%, dan kadar minyak atsiri kulit jeruk
kasturi kering sebesar 1,27%. Hasil
penetapan indeks bias untuk minyak atsiri
kulit buah jeruk kasturi segar dan kering
diperoleh sebesar 1,4240. Bobot jenis
minyak atsiri kulit buah jeruk kasturi segar
sebesar 0,8526 dan bobot jenis minyak
atsiri kulit buah jeruk kasturi kering sebesar
0,8522.
Kulit buah jeruk kasturi dapat
dianalisis dan dipisahkan komponennya
dengan GC-MS serta memiliki komponen
yang berbeda antara kulit buah jeruk kasturi
segar dan kering.
Hasil analisis GC-MS minyak atsiri
yang diperoleh dari kulit buah jeruk kasturi
segar menunjukkan 25 komponen dengan 6
komponen yang memiliki konsentrasi
paling tinggi, yaitu: α-pinen (1,65%), β-
pinen (1,15%), β-mirsen (6,26%), Limonen
(77,03%), 2,6-oktadien-1-ol (0,56%), dan
1,6-siklodekadien (1,99%) .
Hasil analisis GC-MS minyak atsiri
yang diperoleh dari kulit buah jeruk kasturi
kering menunjukkan 20 komponen dengan
6 komponen yang memiliki konsentrasi
paling tinggi, yaitu: α-pinen (2,05%), β-
pinen (1,13%), β-mirsen (6,51%), D-
Limonen (76,02%), 2,6-oktadien-1-ol
(0,44%) dan 1,6-siklodekadien (1,51%).
DAFTAR PUSTAKA
Anonim. (2008). Minyak Atsiri Jeruk:
Peluang Meningkatkan Nilai
Ekonomi Kulit Jeruk.
http://pustaka.litbang.deptan.go.id/p
ublikasi/wr306084.pdf
Armando, R. (2009). Memproduksi
15 Minyak Atsiri Berkualitas.
Jakarta: Penebar Swadaya.
Hal. 23-33.
BPOM RI. (2005). Penyiapan
Simplisia untuk Sediaan
Herbal. Jakarta: Direktorat
Obat Asli Indonesia. Hal 12.
Depkes RI. (1995). Farmakope
Indonesia. Edisi IV. Jakarta:
Departemen Kesehatan RI.
Hal. 1030-1031.
Guenther, E. (1990). The Essential
Oils. Penerjemah: Ketaren,
R.S. Minyak Atsiri. Jilid III A.
Jakarta: Penerbit Universitas
Indonesia. Hal. 147-157.
Jamal, Y., Praptiwi, dan Agusta,
A.(2000). Komponen Kimia
dan Efek Antibakteri Minyak
Atsiri Kulit Buah dan Daun
Jeruk Kasturi (Citrus
microcarpa Bunge.). Majalah
Farmasi Indonesia 11 (2). Hal.
77-85.
Lutony, T.L., dan Rahmayati, Y.
(1994). Produksi Dan
Perdagangan Minyak
Atsiri. Jakarta: Penerbit
Penebar Swadaya. Hal. 1-3,
112-113.
Trease, G.E. dan Evans, W.C. (1983).
Pharmacognosy. 12th Edition.
London: Bailliere Tindal. Hal.
132.