Makalah Manajemen Biologis

Potensi Arthospira platensis Sebagai Sumber Protein dan

Pigment yang Bernilai Ekonomi Tinggi

Oleh :

Harish Muhammad 10410017

PROGRAM STUDI BIOMANAJEMEN

SEKOLAH ILMU DAN TEKNOLOGI HAYATI
INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG
 2013

Pendahuluan

Profil Arthospira platensis (habitat,

Arthospira platensis atau biasa dikenal dengan sebutan Spirulina, sudah sejak lama diketahui aman
untuk dikonsumsi. Spirulina marak digunakan oleh industri-industri makanan dan pharmaceutical,
karena spirulina kaya akan berbagai nutrisi dan zat bioaktif, mudah ditumbuhkan, dan mudah dipanen.
Adapun kandungan nutrisi Spirulina dapat dilihat di tabel di bawah ini

(FAO, 2008)
merupakan blue green algae atau termasuk ke dalam Cyanobacteria. Cyanobacteria memiliki dinding sel
yang mirip dengan bakteri gram negatif yang di dalamnya terkandung peptidoglikan. Jika diamati secara
mikroskopis terlihat bahwa Spirulina ini merupakan kesatuan yang berbentuk heliks atau berfilamen
dan bersimbiosis dengan bakteri yang dapat memfixasi nitrogen dari udara. Struktur berbentuk heliks
dari filamen yang disebut juga trikoma adalah karakteristik dari genus dan akan dipertahankan dalam
lingkungan yang berair atau di dalam medium kultur. Trikoma memiliki panjang diantara 50-500 μm dan
dengan lebar 3-4 μm. Bersamaan dengan filamen yang berbentuk heliks, terdapat vakuola gas di
dalamnya yang berfungsi sebagai struktur agar Spirulina dapat mengapung di perairan.

umum ditemukan diperairan tawar. Salah satu habitat terbesar Spirulina ditemukan di danau Chad
bagian tengah Afrika, dimana kondisi danau tersebut ber-pH tinggi dan suhu tinggi sehingga tidak
memungkinkan bagi mikroorganisme lain ikut tumbuh.
Karakteristik Biologi Arthospira platensis

1. Organisasi
Classification: 
Empire Prokaryota
Kingdom Eubacteria
Subkingdom Negibacteria
Phylum Cyanobacteria
Class Cyanophyceae
Subclass Oscillatoriophycideae
Order Chroococcales
Family Spirulinaceae
Genus Spirulina

3.1.1 Morphology
Spirulina termasuk ke dalam kelas Chyanophyta atau blue green algae. Secara morfologi Spirulina
Spirulina is symbiotic, multicellular and filamentous blue-green microalgae with symbiotic bacteria that
fix nitrogen from air. Spirulina can be rod- or disk-shaped. Their main photosynthetic pigment is
phycocyanin, which is blue in colour. These bacteria also contain chlorophyll a and carotenoids. Some
contain the pigment phycoythrin, giving the bacteria a red or pink colour. Spirulina are photosynthetic
and therefore autotrophic. Spirulina reproduce by binary fission.
The helical shape of the filaments (or trichomes) is characteristic of the genus and is maintained only in a
liquid environment or culture medium. The presence of gas-filled vacuoles in the cells, together with the
helical shape of the filaments, result in floating mats. The trichomes have a length of 50 to 500 μm and a
width of 3 to 4 μm. However, cyanobacteria have a cell wall similar to that of Gram-negative bacteria:
they contain peptidoglucan, a lysozyme-sensitive heteropolymer that confers shape and osmotic
protection to the cell, in addition to other material not sensitive to lysozyme. In the 1970s, sphaeroplasts,
produced by disintegration of their cell wall by enzymatic treatment, were isolated from Oscillatoria
formosa, Fremyella dipplosiphon, Plectonema calothricoides and Synecchoccus lividus, as well as from
Anabaena ambique and Anacystis nidulans. In the case of spirulina, protoplasts had been obtained by
several researchers. For example, Abo-Shady et al. (1992) succeeded in obtaining protoplasts of Spirulina
platensis with high efficiency by lysozyme treatment at the exponential phase of algal growth at 30 °C
under illumination with 1 450 lux/m2/second. The body surface of spirulina is smooth and without
covering so it easily digestible by simple enzymatic systems.
3.1.2 Taxonomy
In 1827, P.J. Turpin isolated spirulina from a freshwater sample (Ciferri, 1983). In 1844, Wittrock and
Nordstedt reported the presence near the city of Montevideo of a helical, septal and green-blue
microalgae named Spirulina jenneri f. platensis. But it was not until 1852 that the first taxonomic report
written by Stizenberger appeared. He gave this new genus the name Arthrospira based on the septa
presence, helical form and multicellular structure. Gomont confirmed Stizenberger’s studies in 1892. This
author attributed the aseptate form to the Spirulina genus, and the septal form to the Arthrospira genus.
Geitler in 1932, because of the common helical morphology, reunified the members of the two genera
under the designation Spirulina without considering the septum presence, only morphological similarity.
In 1989, these micro-organisms were separately classified into two genera Spirulina and Arthrospira; this
classification is currently accepted (Tomaselli, Palandri and Tredici, 1996; Sánchez et al., undated).
Arthrospira maxima and A. platensis are the most important species in this genus and among these existed
taxonomic differences in filaments, vacuoles and external cover or capsule regularity of each filament
(Tomaselli, 1997). The worldwide investigation on microalgae has been carried out under the name of
“spirulina”; this common designation between scientists and consumers has proved difficult to change.
The microalgae under discussion belongs to the genus Arthrospira, but it will probably be called Spirulina
for some time. For the purpose of this report we refer to both collectively as “spirulina”.
The systematic position of cyanobacteria has been a matter of discussion, as these photosynthetic
organisms were first considered algae. In 1962, a distinction between prokaryotes and eukaryotes was
clearly established. The main difference is based upon the presence of cell organelles enveloped by a
phospholipidic membrane in eukaryotes. Stanier and Van Neil (1962) incorporated green-blue algae into
the prokaryote kingdom and proposed to call these micro-organisms cyanobacteria. This designation was
accepted and first published in 1974 in the Bergey's Manual of Determinative Bacteriology (Guglielmi,
Rippka and Tandeau De Marsac, 1993).
3.2 Natural habitat, source and growth
Besides Lake Texcoco, the largest spirulina lakes are in Central Africa around Lakes Chad and Niger, and
in East Africa along the Great Rift Valley. Under normal water conditions, Spirulina may be one of many
algal species. Lakes Bodou and Rombou in Chad have a stable monoculture of spirulina dating back
centuries. It is also a major species in Kenya's lakes Nakuru and Elementeita and Ethiopia's lakes
Aranguadi and Kilotes. Spirulina thrives in alkaline lakes where it is difficult or impossible for other micro
2. Tumbuh dan Berkembang
3. Reproduksi
Aseksual secara pembelahan biner
4. Penggunaan Energi
fotoautotrof melakukan fotosintesis menggunakan bakterioklorofil
mengambil nutisi dengan intake zat terlarut, bukan absorbsi enzimatik
5. Respon Terhadap Lingkun gan

Kandungan
 FAO, 2008

The
phycocyanin market is considered small, estimated at 6 tonnes/year. According to some estimates, 100 kg
of dry spirulina biomass per month extracted from a pond area of 200 m3 could give 60 kg of crude
protein and 1–3 kg of phycocyanin. Following water extraction, as well as small amounts of enzymes and
cytochromes; 1–2 kg of chlorophyll, 100–200 g of xanthophylls and 100–200 g of β-carotene, following
solvents extraction (Olguín, 1986).
The redness of pectoralis superficialis, profundus and sartorius muscles of broiler chickens reaches

Protein: Spirulina contains unusually high amounts of protein, between 55 and 70 percent by dry weight,
depending upon the source (Phang et al., 2000). It is a complete protein, containing all essential amino
acids, though with reduced amounts of methionine, cystine, and lysine, as compared to standard proteins
such as that from meat, eggs, or milk; it is, however, superior to all standard plant protein, such as that
from legumes.
Essential fatty acids: Spirulina has a high amount of polyunsaturated fatty acids (PUFAs), 1.5–2.0 percent
of 5–6 percent total lipid. In particular spirulina is rich in γ-linolenic acid (36 percent of total PUFAs), and
also provides γ-linolenic acid (ALA), linoleic acid (LA, 36 percent of total ), stearidonic acid (SDA),
eicosapentaenoic acid (EPA), docosahexaenoic acid (DHA) and arachidonic acid (AA).
Vitamins: Spirulina contains vitamin B1 (thiamine), B2 (riboflavin), B3 (nicotinamide), B6 (pyridoxine), B9
(folic acid), B12 (cyanocobalamin), vitamin C, vitamin D and vitamin E.
Minerals: Spirulina is a rich source of potassium, and also contains calcium, chromium, copper, iron,
magnesium, manganese, phosphorus, selenium, sodium and zinc.
Photosynthetic pigments: Spirulina contains many pigments including chlorophyll a, xanthophyll, betacarotene,
echinenone, myxoxanthophyll, zeaxanthin, canthaxanthin, diatoxanthin, 3-hydroxyechinenone,
beta-cryptoxanthin, oscillaxanthin, plus the phycobiliproteins c-phycocyanin and allophycocyanin.
Detailed biochemical composition analyses have been conducted of spirulina grown either under
laboratory conditions, collected in natural condition or in mass culture system using different agroindustrial
waste effluent. This was found to vary in response to the salinity of the growing medium –
Vonshak et al. (1996) reported that salt-adapted cells had a modified biochemical composition with a
reduced protein and chlorophyll content, and increased carbohydrate content. However the following
provides a review of the literature on the broad composition of spirulina.

Kultivasi Arthospira platensis

Tahapan kultivasi massal ini sebenarnya berisi prosedur bagaiman menumbuhkan Haemotococcus
pluvialis di fase vegetatifnya yang bertujuan untuk memperoleh biomassa Haemotococcus sebanyak-
banyaknya. Adapun proses kultivasi massalnya dapat menggunakan photobioreactor atau
menggunakan raceway pond. Photobioreactor memiliki keunggulan dibanding raceway pond dalam
hal lebih sedikit kontaminasi karena keadaannya yang relatif terkontrol dan bisa dimanipulasi, namun
instalasi photobioreactor memakan biaya yang lebih tinggi.

Gambar photobioreactor dan raceway pond

Sebelum dapat dikultivasi secara massal, tentunya diperlukan jumlah inokulum Haemotococcus
pluvialis yang cukup untuk mempercepat proses kultivasi dan mencegah crash-nya kultur. Untuk
memperoleh jumlah inokulum yang cukup dilakukanlah kultivasi bertingkat, misalnya dari kultivasi
kultur di tabung reaksi, kemudian ditingkatkan skala kultivasinya ke labu erlenmeyer 50 ml,
kemudian kultivasi ditingkatkan lagi ke wadah skala 1 L, selanjutnya kultivasi ditingkatkan ke skala
10 L, dan kultivasi terus-menerus ditingkatkan hingga jumlah inokulum dirasa cukup untuk di scale
up ke bioreaktor produksi massal.

1. Persiapan Alat, Bahan, dan Media, serta Sterilisasi

Dalam pengembangan produk pakan larva ikan berbasis Arthrospira platensis dan
Daphnia magna, sebelumnya dipersiapkan dulu alat, bahan, dan media yang dibutuhkan.
Adapun alat dan bahan yang dibutuhkan dapat dilihat di tabel di bawah

Tabel Alat dan Bahan yang Diperlukan untuk Pengembangan Produk Pakan Ikan
Berbasis Arthrospira platensis dan Daphnia magna

Alat Bahan
- Mikroskop cahaya - Alkohol 70%
- Botol Jamu 1 L - Spirtus
- Pipa Kapiler - Plastik Tahan Panas
- Sumbat Botol - Tips
- Bunchen - Tepung Ikan
- Toples plastik 15 L - Tepung Kedelai
- Botol Gelap - Dry yeast (Saccharomyces
- Batang Pengaduk cerevisiae)
- Kaca Preparat - TSP
- Cover glass - ZA
- Pipet - Urea
- Mikropipet 100-1000 μL - NPK
- Gelas Ukur 100 ml - FeCl2
- Gelas Ukur 1 L - Air Sungai yang telah difiltrasi
- Gelas Ukur 3 L - Air Sumur yang telah difiltrasi
- Spatula - Na2-EDTA
- Lux meter - CaCl2.2H2O
- Haemocytometer - MgSO4.7H2O
- Blower - K2HPO4
- Aerator - KH2PO4
- DO meter - NaCl
- Termometer - K2SO4
- Pipa Paralon - KOH
- Lampu TL - NaNO3
- pH meter - NaHCO3
- Plankton net - FeSO4.7H2O
- Saringan halus - H2SO4
- Saringan kasar - H3BO3
- Neraca analitik - MoO3
- Serokan - MnCl2.4H2O
- Ember - ZnSO4.7H2O
- Ozonizer - CuSO4.5H2O
- Cu(NO3)2.6H2O
- Sodium Molibdate
- Bayclin atau NaOCl
- Natrium Thiosulfat
- Wipol
 Setelah alat dan bahan dipersiapkan, pertama-tama dilakukan pembuatan medium Zarrouk
sebagai medium stok kultur dan medium modifikasi berbasis pupuk komersial sebagai medium
kultivasi massal Arthrospira platensis. Selanjutnya seluruh alat, bahan dan media disterilisasi
sebelum digunakan. Sterilisasi peralatan kaca dan bahan dilakukan dengan metode panas
lembab menggunakan autoklaf, sterilisasi peralatan yang terbuat dari plastik dengan
menggunakan bayclin, dan sterilisasi media skala diatas 1 L menggunakan metode klorinasi yang
dilanjutkan dengan netralisasi oleh Natrium Thiosulfat.
Tabel Komposisi Medium Zarrouk dan Medium Modifikasi

Komposisi bahan Medium standar Medium modifikasi

zarrouk(g/L) (g/L)
Sodium bicarbonate 16.8
(NaHCO3)
K2HPO4 0.5
NaNO3 2.5
K2SO4 1
NaCl 1 1
Na2EDTAA 0.08
MgSO4.7H2O 0.2 0.15
CaCl2.2H2O 0.04 0.04
FeSO4.7H2O 0.01
NPK
Urea 0.88
KH2PO4 (kualitas 0.35
komersial)
NaHCO3 (kualitas 0.89
komersial) baking soda
A5 solution 1 ml 10
Boric acid 2.86
Magnese Chloride 1.81
Zinc sulphate 0.22
Sodium Molibdate 0.0177
Copper Sulphate 0.079
(Faradila, 2012)

2. Pembuatan Kurva Tumbuh Arthrospira platensis

Pada awalnya 80 mL kultur stok Arthrospira platensis dengan kepadatan 106
sel/mL diinokulasi ke dalam 720 mL medium modifikasi, kemudian ditumbuhkan dengan
kondisi mendekati kondisi pertumbuhan optimumnya. yaitu dilakukan di suhu ruang
sekitar 25°C, laju aerasinya 480 mL/menit, diberi intensitas cahaya sekitar 5000 lux, dan
 pH awal medium sekitar pH 8. Selanjutnya dilakukan perhitungan jumlah sel dari kultur
di medium modifikasi setiap 24 jam selama 7-9 hari dengan menggunakan
haemocytometer. Jumlah sel per mL dihitung dengan cara:

sel Jumlah sel pada se jumlah kotak yang dihitung 6

Jumlah = × 10
mL Jumlah kotak yang dihitung × 4

Data hasil perhitungan jumlah sel/ml dari medium modifikasi kemudian dikumpulkan
dan diplot ke dalam grafik jumlah sel/mL terhadap waktu. Grafik atau kurva hasil plot
jumlah sel/ml terhadap waktu (per 24 jam) tersebut melambangkan kurva pertumbuhan
Arthrospira platensis. Selanjutnya berdasarkan data dari kurva pertumbuhan tersebut
ditentukan umur inokulum terbaik dan umur biomassa Arthrospira platensis yang tepat
dipanen. Umur inokulum terbaik dibutuhkan agar ketika scaling up ke kapasitas yang
lebih besar seperti ke volume 500 L atau 1000 L, kultur Arthrospira platensis langsung
aktif membelah dan tidak mengalami fase adaptasi lagi dikultur dengan skala yang lebih
besar. Umur inokulum terbaik umumnya terjadi pada pertengahan fase eksponensial.
Setelah umur inokulum terbaik didapat, dilakukan penentuan waktu pemanenan biomassa
yang tepat. Prinsip penentuan waktu pemanenan biomassa adalah dengan menentukan
kapan kultur memiliki kepadatan sel yang paling tinggi. Umumnya kepadatan sel
tertinggi berada ketika kultur Arthrospira platensis mengalami awal fase stasioner.

3. Kultivasi massal Arthrospira platensis dan Daphnia magna

Proses kultivasi massal Arthrospira platensis dilakukan dengan metode kultivasi secara
bertahap dan ditumbuhkan mendekati kondisi pertumbuhan optimumnya, awalnya kultivasi
dilakukan pada volume kultur yang lebih kecil kemudian meningkat skala volume kulturnya
seiring dengan bertambahnya jumlah/volume inokulum yang dimiliki. Secara umum persyaratan
volume inokulum untuk kultivasi massa adalah sebanyak 10% dari volume yang akan dikultur
berikutnya dengan kepadatan 106 sel/mL. Proses kultivasi massal Arthrospira platensis dengan
skala 500 L, 1000 L, dan seterusnya, dilakukan dengan menggunakan medium modifikasi di
dalam kolam atau bak fiber yang sebelumnya telah disterilisasi.
 Untuk proses kultivasi massal Daphnia magna, secara umum metode pengkulturan yang
dilakukan disebut dengan green water technique. Metode green water technique ini diawali
dengan penumbuhan fitoplankton hingga air kolam mengalami maturasi (ditandai dengan
warna kehijauan), selanjutnya kolam baru diinokulasi Daphnia magna. Proses penumbuhan
fitoplankton dilakukan dengan metode autotrof, yakni dengan melakukan pemupukkan pada
kolam menggunakan pupuk urea, pupuk TSP, FeCl 3, tepung ikan dan tepung bungkil kedelai,
selanjutnya kolam diberi aerasi kuat selama beberapa hari hingga air kolam berwarna kehijauan.
Setelah air kolam berwarna kehijauan, aerasi dikecilkan dan dilakukan inokulasi Daphnia magna
dengan kepadatan 20 individu/L. Selama proses kultivasi Daphnia magna, setiap harinya ke
dalam kolam kultur diberikan dry yeast (ragi roti) sebagai makanan Daphnia magna.

Gambar Skema Produksi Daphnia magna

4. Pemanenan dan Produksi biomassa kering Arthrospira platensis dan Daphnia magna
Proses pemanenan Arthrospira platensis dilakukan ketika kultur di medium sudah
mengalami fase stasioner. Proses pemanenan dilakukan dengan memompa air kultur berulang-
ulang ke kain sablon sehingga Arthrospira platensis tersangkut di kain tersebut. Selanjutnya
biomassa Arthrospira platensis yang tersangkut di kain sablon dikerok dan dikumpulkan dalam
suatu wadah yang kemudian dikeringkan dengan diangin-anginkan. Setelah diangin-anginkan
biomassa kering kemudian di oven dengan suhu 60 oC untuk mengurangi kadar air. Hasil
biomassa kering dari proses pengeringan di oven kemudian ditimbang dan disimpan di dalam
wadah yang ditutup rapat.
ekstraksi
Guiry, M.D. & Guiry, G.M. 2013. AlgaeBase. World-wide electronic publication, National
University of Ireland, Galway. http://www.algaebase.org; searched on 14 October
2013.