PENGARUH PENAMBAHAN ZnO TERHADAP SIFAT ANTIBAKTERI

PADA SEMEN PORTLAND

SKRIPSI

sebagai salah satu persyaratan guna memperoleh gelar

Sarjana Sains

RANDY TRAFINO

18036071

KIMIA

JURUSAN KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS NEGERI PADANG

2022
Pengaruh Penambahan ZnO Terhadap Sifat Antibakteri pada Semen Portland

Randy Trafino

ABSTRAK

Dewasa ini kebutuhan akan semen meningkat seiring dengan kebutuhan masyarakat
dalam infrastruktur bangunan, namun terdapat beberapa hal yang belum disadari
masyarakat akan komposisi semen selain ketahanan dan kekokohan yang mana
berhubungan dengan kesehatan pada masyarakat itu sendiri, salah satunya adalah sifat
antibakteri yang diperlukan pada semen. Penelitian kali ini dilakukan evaluasi sifat
Antibakteri dengan semen yang digunakan yaitu Semen Portland dengan bakteri
Escherichia coli sebagai bakteri pengevaluasi, evaluasi bakteri dilakukan dengan metode
TPC yaitu Total Plate Count, evaluasi dilakukan dengan variasi ZnO pada Semen Portland
yaitu 0%, 1%, 3% dan 5% yang mana evaluasi berasal dari aktifnya ROS pada ZnO, untuk
dapat meninjau kinerja aktif dari ROS dapat dilakukan dengan bantuan sinar UV dan tanpa
bantuan sinar UV. Disamping itu dilakukan karakterisasi dengan XRD yang bertujuan
untuk mengetahui ukuran nanopartikel dari ZnO dan jenis kristal yang terbentuk,
disamping itu juga dilakukan karakterisasi dengan SEM untuk melihat bentuk dari struktur
ZnO yang tertanam pada Semen Portland, karakterisasi SEM dilakukan dengan perbesaran
1.000x, 2.500x, 5.000x dan 10.000x perbesaran.

Kata kunci: ZnO, Semen Portland, Escherichia coli, Antibakteri, Total Plate Count.
 Influence of ZnO on the Antibacterial Properties of Portland Cement

Randy Trafino

ABSTRACT

Nowadays the cement demand is increasing along with public demand in building
infrastructure, but there are several things that the people has not realized about the
composition of cement besides its resilience and sturdiness which is related to the public
health, one of which is the antibacterial properties needed in cement. This study evaluates
the antibacterial properties of the cement used is Portland Cement, with Escherichia coli
bacteria as the evaluating bacteria, the evaluation of bacteria is carried out by the TPC
method, namely Total Plate Count, the evaluation is carried out with variations of ZnO in
Portland Cement is 0%, 1%, 3% and 5% where the evaluation comes from the active ROS
in ZnO, to be able to review the active performance of ROS can be done with the help of
UV light and without of UV light. Besides that, characterization was carried out using XRD
which aims to determine the nanoparticle size of ZnO and the type of crystal formed,
besides that, morphological analysis characterization was also carried out with SEM to see
the shape of the ZnO structure embedded in Portland Cement, SEM characterization was
carried out with magnifications of 1000x, 2.500x, 5,000x and 10,000x magnification.

Keyword: ZnO, Portland Cement, Escherichia coli, Antibacterial, Total Plate Count.
 KATA PENGANTAR

Puji syukur atas kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan

karunia-Nya kepada penulis sehingga penulis mampu menyelesaikan penelitian

yang berjudul “PENGARUH PENAMBAHAN ZnO TERHADAP SIFAT

ANTIBAKTERI PADA SEMEN PORTLAND”

Selama penyelesaian skripsi ini penulis banyak mendapat dukungan dari berbagai

pihak, oleh karena itu penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada:

1. Bapak Prof. Dr. Rahadian Zainul, S.Pd., M.Si. sebagai dosen pembimbing

dan sekaligus penasehat akademik.

2. Bapak Dr. Mawardi, M.Si dan Bapak Dr. Hardeli, M.Si sebagai dosen

pembahas

3. Bapak Budhi Oktavia, S.Si., M.Si., Ph.D. sebagai Ketua Jurusan Kimia dan

Ketua Prodi Kimia Jurusan Kimia FMIPA Universitas Negeri Padang.

4. Bapak/Ibu Staf Pengajar,Laboran dan Karyawan Urusan Jurusan Kimia

FMIPA Universitas Negeri Padang.

5. Orang tua penulis yang telah memberi dukungan kepada penulis.

6. Teman-teman Kimia 2018 yang selalu mendorong dan memberi stimulus

positif kepada penulis, sehingga penulis dapat menyelesaikan proposal

penelitian ini.

Semoga bantuan, dukungan dan semangat yang Bapak/Ibu dan teman-teman

berikan membawa hal baik dan menjadi amal baik serta semoga memperoleh

balasan yang lebih baik dari Allah SWT.

i
Penulis menyadari proposal ini jauh dari kata kesempurnaan oleh karena itu penulis

membuka kritik dan saran dari berbagai pihak agar proposal ini dapat lebih

sempurna dan berguna untuk kemajuan Ilmu Pengetahuan.

Padang, 10 Mei 2022

Randy Trafino

ii
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ............................................................................................. i

DAFTAR ISI .......................................................................................................... iii

DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. v

DAFTAR TABEL .................................................................................................. vi

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... vii

BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah ............................................................................... 1

B. Identifikasi Masalah ..................................................................................... 7

C. Batasan Masalah........................................................................................... 7

D. Rumusan Masalah ........................................................................................ 7

E. Tujuan Penelitian ......................................................................................... 8

F. Manfaat Penelitian ....................................................................................... 8

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................. 9

A. Semen Portland ............................................................................................ 9

1. Definisi ..................................................................................................... 9

2. Proses Pengolahan .................................................................................. 12

3. Sifat Fisika dan Kimia Semen Portland ................................................. 14

B. Zinc Oxide .................................................................................................. 17

1. Definisi ................................................................................................... 17

2. Bentuk Struktur ...................................................................................... 18

3. Sifat Antibakteri ..................................................................................... 19

C. Escherichia coli.......................................................................................... 20

D. Efek Antibakteri ZnO Terhadap Eschericia coli ....................................... 23

1. Bahan Nanopartikel ZnO........................................................................ 23

2. Tes Antibakteri ....................................................................................... 25

iii
 3. Hasil Efek Antibakteri ZnO.................................................................... 25

E. X-Ray Diffraction ....................................................................................... 26

F. Scanning Electron Microscope .................................................................. 29

BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 30

A. Waktu dan Tempat Penelitian .................................................................... 30

B. Objek Penelitian ......................................................................................... 30

C. Variabel Penelitian ..................................................................................... 30

D. Alat dan Bahan ........................................................................................... 30

E. Prosedur Penelitian..................................................................................... 31

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 35

A. Sintesis ZnO ............................................................................................... 35

B. Proses Mixing Semen-ZnO ........................................................................ 37

C. Pengaplikasian Semen-ZnO terhadap bakteri Escherichia coli ................. 40

1. Aplikasi Semen-ZnO dengan bantuan sinar UV........................................ 40

2. Aplikasi Semen-ZnO tanpa bantuan sinar UV .......................................... 44

D. Uji Karekteristik Semen-ZnO instrumen XRD .......................................... 48

E. Uji karakteristik Semen-ZnO instrumen SEM ........................................... 50

BAB V PENUTUP ................................................................................................ 51

A. Kesimpulan ................................................................................................ 51

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 52

LAMPIRAN .......................................................................................................... 58

iv
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Produk Portland Cement ....................................................................... 2

Gambar 2. Transformasi Bahan Mentah Menjadi Klinker.................................... 11

Gambar 3. Proses Basah Pembuatan Semen ......................................................... 12

Gambar 4. Proses Kering Pembuatan Semen Portland ........................................ 13

Gambar 5. Zinc Oxide ........................................................................................... 17

Gambar 6. Model Struktur ZnO ............................................................................ 18

Gambar 7. Struktur Bakteri Eschericia coli .......................................................... 20

Gambar 8. Pengaruh Variasi Konsentrasi ZnO Terhadap Koloni bakteri ............ 26

Gambar 9. Difraksi sinar X terhadap bidang atom ............................................... 27

Gambar 10. Instrumen XRD ................................................................................. 28

Gambar 11. Instrumen SEM ................................................................................. 29

Gambar 12. Campuran larutan dengan pH dijaga 12 ............................................ 35

Gambar 13. Bubuk ZnO murni hasil sintesis ........................................................ 36

Gambar 14. Proses skema metode pendispersi bahan nano dalam preparasi
komposit berbasis semen....................................................................................... 38

Gambar 15. Mekanisme ROS ............................................................................... 39

Gambar 16. Kurva Hasil Evaluasi Semen-ZnO bantuan sinar UV ....................... 41

Gambar 17. Hasil evaluasi bakteri bantuan sinar UV ........................................... 42

Gambar 18. Hasil evaluasi bakteri tanpa bantuan sinar UV ................................. 46

Gambar 19. Kurva Hasil Evaluasi Semen-ZnO tanpa sinar UV ........................... 46

Gambar 20.Pola XRD Semen-ZnO ....................................................................... 48

Gambar 21. Gambaran Semen-ZnO dengan instrumen SEM ............................... 50

v
 DAFTAR TABEL

Tabel 1. Notasi Kimia Semen Portland ................................................................ 13

Tabel 2. Sifat Kimia Semen Portland ................................................................... 16

Tabel 3. Hasil Evaluasi Semen-ZnO bantuan sinar UV ........................................ 41

Tabel 4. Hasil Evaluasi Semen-ZnO tanpa bantuan sinar UV ............................. 45

Tabel 5. Perhitungan Kristalin ZnO dan Semen Portland .... Error! Bookmark not
defined.

vi
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Skema Sintesis ZnO nps ..............................................................................58

Lampiran 2. Proses Mixing Semen-ZnO ..........................................................................59

Lampiran 3. Pembuatan Media NA ..................................................................................59

Lampiran 4. Proses Kontak Bakteri dengan Sampel Semen-ZnO ....................................60

Lampiran 5. Proses Pengaplikasian pada Bakteri .............................................................60

Lampiran 6. Desain Penelitian .........................................................................................62

Lampiran 7. Perhitungan ..................................................................................................63

Lampiran 8. Tabel Data Kristal XRD...............................................................................67

Lampiran 9. Tabel Data Koloni ditemui ...........................................................................68

Lampiran 10. Difaktogram XRD sampel Semen-ZnO .....................................................70

Lampiran 11. Gambar SEM sampel Semen-ZnO .............................................................71

Lampiran 12. Dokumentasi Penelitian .............................................................................72

Lampiran 13. Anggara Biaya ...........................................................................................75

vii
 BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Dewasa ini nanopartikel memiliki peranan yang sangat penting.

Peranan nanopartikel teraplikasi pada bidang elektronik, kosmetik, industri

makanan, pertanian, maupun bahan bangunan (terutama yang berbahan

dasar semen komposit). Produksi semen komposit (mortir semen dan beton)

adalah salah satu cabang terpenting dalam bahan bangunan. Salah satu

bentuk dari semen komposit adalah semen Portland. Pada tahun 2012

menunjukkan bahwa pasar dunia untuk semen Portland dapat mencapai 3,6

miliar metrik ton per tahun dan dapat diperkirakan volumenya akan

mencapai sekitar 5 miliar metrik ton pada tahun 2030 (Sikora et al., 2018).

Semen Portland merupakan produk industri yang memiliki bahan

baku utama batu gamping. Batu kapur ini dicampur dengan tanah liat dan

bahan alternatif lainnya, lalu kemudian dapat dihasilkan semen bubuk. Batu

kapur atau batu gamping yaitu bahan alam yang memiliki senyawa kalsium

oksida (CaO), berbeda dengan tanah liat, tanah liat adalah bahan alam yang

mengandung senyawa silikon oksida (SiO2), aluminium oksida (Al2O3),

oksida besi (Fe2O3), dan magnesium oksida (MgO). Dalam produksi semen,

bahan baku dibakar hingga meleleh dan ditambahkan gipsum dalam jumlah

tertentu. Bahan dasar Semen dibagi menjadi tiga jenis, yaitu: 1. Klinker

70%-95%, merupakan hasil olahan pembakaran batu gamping, pasir silika,

pasir besi, dan tanah liat, 2. Gypsum sekitar 5%, digunakan sebagai retarder

1
dan 3. Bahan ketiga, seperti batu kapur, pozzolan, fly ash, dll (Zhu et al.,

2021).

Gambar 1. Produk Portland Cement

Kemajuan material berbasis semen fungsional merupakan salah

satu hal yang baru, salah satunya dengan membuat bahan campuran baru

pada semen yang berfungsi sebagai antibakteri. Semen salah satu bahan

utama dalam membuat bangunan yang memiliki fungsi sebagai perekat.

Pada sebagian besar semen memiliki struktur yang rapuh, penuh rongga

kapiler, dengan ruang berpori. Dikarenakan itu, dalam jangka waktu tertentu

dan cuaca yang cenderung susah untuk diprediksi, pengaruh curah hujan

dan kondisi yang keras seperti suhu normal memungkinkan siklus

pembekuan dan pencairan rembesan air mulai terjadi pada struktur semen,

intrusi air jangka panjang ke dalam struktur semen akan dipercepat dan

struktur secara bertahap membusuk. Selain intrusi air, waktu yang lama

akan menyebabkan kelembapan yang memprovokasi infeksi mikroba

seperti bakteri, jamur, dan serangga di permukaan dari struktur semen.

Infeksi mikroba yang menyebar menimbulkan efek yang berbahaya pada

lingkungan dan menimbulkan penyakit kesehatan yang merugikan seperti

2
gejala saluran pernapasan atas (hidung dan tenggorokan), batuk, meningitis,

dan asma (Singh et al., 2018).

Diketahui bahwa material ZnO menunjukkan efisiensi antimikroba

yang lebih baik dengan stabilitas fotokimia yang baik. Efisiensi antimikroba

ini sangat terkait dengan superhidrofobisitas ZnO dan daya oksidasinya

yang besar. Di dalam iradiasi matahari, ZnO dapat menghasilkan pasangan

elektron lubang dalam sistem berair yang menghasilkan spesies oksigen

reaktif (ROS) beracun dan ampuh untuk kematian bakteri. Dengan beberapa

mekanisme kematian pada mikroba diantaranya yaitu kerusakan membran

sel, peroksidasi lipid, dan degradasi asam nukleat. Keuntungan atau manfaat

lain dari ZnO yaitu: a) memiliki stabilitas yang tinggi di bawah media asam

dan basa, b) keamanan hayati, c) tidak beracun secara ekologis, d) aman

bagi lingkungan dan e) relatif biaya rendah (Singh et al., 2018).

Para peneliti (Rompis et al., 2020) melakukan doping atau

mencampur beberapa bahan dari nanopartikel yang mana berfungsi untuk

meningkatkan kualitas dari bahan tersebut, yang mana campuran

nanopartikel tersebut dinamakan nanokomposit, Pada era sekarang ini

nanopartikel menunjukkan keunggulan dibandingkan dengan bahan

tradisional. Selain peran kunci dalam mengurangi dampak negatif

lingkungan, nanopartikel digunakan sebagai aditif untuk meningkatkan

karakteristik produk (Shafeek et al., 2020).

Nanopartikel ini dapat dibagi menjadi dua kelompok, jenis organik

dan anorganik, menurut sumbernya. Misalnya, nanopartikel logam dan

oksida logam (MNPs/MONPs) seperti Ag, Cu, CuO, ZnO, TiO2, Fe3O4,

3
MgO NP terletak di nanopartikel anorganik. Dalam hal ini, aktivitas

antimikroba, antikanker, antidiabetes, dan penyembuhan luka dari ZnO NP

ditunjukkan oleh banyak penelitian. Antibakteri yang teraplikasikan pada

nanokomposit dapat dibuktikan efisien terhadap Escherichia coli, hal ini

menunjukkan bahwa sifat nanopartikel memiliki sifat antibakteri yang lebih

kuat dibandingkan sifat logamnya (Alavi & Nokhodchi, 2020).

Aktivitas antibakteri nanopartikel logam telah berkorelasi dengan

ukurannya yang kecil dan rasio permukaan ke volume yang luas,

mendorong mereka untuk berinteraksi langsung dengan membran bakteri

(Menazea, 2020).

Selanjutnya dilakukan eksperimen untuk melakukan sintesis

nanokomposit ZnO dan uji efektivitasnya sebagai antibakteri pada bakteri

Escherichia coli. Untuk mensintesis nanokomposit ZnO dilakukan dengan

metode kopresipitasi. Metode kopresipitasi merupakan metode yang

dimanfaatkan untuk dapat mengambil partikel kecil nano ZnO. (Rompis et

al., 2020).

Selanjutnya dilakukan sintesis ZnO oleh (Singh et al., 2018) dengan

teknik kopresipitasi konvensional yang mana bertujuan mensintesis serbuk

nanopartikel ZnO dengan jumlah yang telah diatur. Senyawa seng nitrat

[Zn(NO3)2 6H2O,(Merk, 99,0%)] dari larutan 0,2 M diambil dari gelas

kimia, lalu menambahkan larutan encer NaOH 4 M tetes demi tetes dengan

pengadukan konstan sampai menyentuh pH 12 dari presipitasi yang

tercapai. Selanjutnya dilakukan penyaringan, setelah dilakukan proses

penyaringan maka endapan yang terbentuk dicuci beberapa kali dengan air

4
suling dan diikuti beberapa tetes aseton barulah terbentuk bubuk putih, lalu

bubuk putih dikeringkan dengan dengan oven bersuhu 180°C selama 24 jam

dalam oven.

Setelah itu dengan bubuk ZnO dilakukan persiapan 4 cawan petri yang

berisi komposit semen, yang mana dalam 4 komposit tersebut ditambahkan

ZnO dengan variasi 0%, 5%, 10%, dan 15% oleh berat. Selama melakukan

persiapan pelet komposit, pertama, (Singh et al., 2018), mencampur ZnO

dan semen putih dalam jumlah yang sesuai dengan menjaga berat total

campuran 1 gram. Untuk pencampuran homogen, campuran ZnO dan semen

putih mengalami pencampuran yang ketat dengan menggunakan mortar dan

alu. Lalu selanjutnya ditambahkan sedikit air sehingga terbentuk pasta halus

pada komposit, hal ini sesuai dengan pernyataan (Munawar et al., 2020)

bahwa sifat fisik nanokomposit dipengaruhi oleh perubahan komposisi

kimia, ukuran kristal dan volume fase penyusunnya.

Namun sebelum itu bubuk ZnO yang sudah dioven tersebut

dikarakterisasi dengan XRD menurut (Bùi, 2019) didapatkan hasil pola

XRD nanopartikel ZnO. Semua puncak difraksi XRD dari serbuk ZnO

ditunjukkan dalam kesesuaian yang baik dengan struktur heksagonal fase

sengit yang dilaporkan dalam Kartu File JCPDS No.05-0664. tidak

ditemukan puncak pengotor yang diamati, hal ini memberikan informasi

bahwa ZnO dengan kemurnian yang tinggi telah diperoleh. Disisi lain para

peneliti melakukan penghitungan ukuran partikel menggunakan rumus

Debye–Scherrer, D = 0.94λ / (βcosθ), di mana λ merupakan panjang

gelombang sinar-X, β merupakan lebar puncak setengah maksimum, dan θ

5
adalah sudut difraksi Bragg. Ukuran kristal rata-rata D adalah 10 nm yang

dihitung menggunakan rumus Debye-Scherrer.

Lalu dilanjutkan dengan uji bakteri yang mana campuran sampel

disiapkan dan ditimbang dengan berat masing-masing yaitu 0,5 g. Harus

dipastikan sebelum melakukan uji bakteri semua alat dan bahan disterilisasi,

dilakukan sterilisasi menggunakan autoclave menggunakan uap air jenuh

bertekanan 15 psi dengan suhu 121°C, lalu disiapkan kertas filter yang

sebelumnya telah melalui sterilisasi dan diletakkan pada wadah petri yang

sebelumnya telah diberikan kultur bakteri Escherichia coli, kemudian

sampel tersebut diletakkan pada bagian tengahnya, lalu petri ditutup dan

diinkubasi selama 2 hari pada suhu ruangan 26°C (Fatmawati et al., 2018).

Adapun cara kerja atau reaksi yang terjadi yaitu kehadiran ZnO dalam

sistem bakteri aktif dapat meningkatkan spesies oksigen reaktif (ROS), yang

menyebabkan penurunan aktivitas nitrat reduktase. Studi lebih lanjut

mengungkapkan bahwa ZnO secara substansial menghambat ekspresi gen

dan aktivitas katalitik enzim denitrifikasi. Oleh karena itu, keberadaan ZnO

NP secara signifikan menghambat kinerja denitrifikasi secara keseluruhan

(Ma et al., 2020).

Berdasarkan latar belakang dan beberapa permasalahan yang

muncul terutama efek bakteri itu sendiri terhadap kesehatan masyarakat

maka peneliti mengambil judul penelitian Pengaruh ZnO terhadap sifat

antibakteri pada semen Portland.

6
B. Identifikasi Masalah

Berdasarkan latar belakang, maka didapatkan identifikasi masalah

sebagai berikut:

1. Banyaknya bakteri Escherichia coli berbahaya yang tidak disadari

masyarakat.

2. Kebutuhan masyarakat terhadap semen antibakteri.

3. Bakteri Escherichia coli yang sering dijumpai pada dinding kamar

mandi, toilet dan sumur.

4. Penambahan nanopartikel ZnO yang bersifat antibakteri.

C. Batasan Masalah

Berdasarkan masalah tersebut maka batasan masalah didapatkan

sebagai berikut :

1. Penggunaan nanopartikel ZnO yang bersifat antibakteri.

2. Waktu dan suhu yang digunakan untuk sintesis ZnO .

3. Variasi ZnO yang ditambahkan yaitu 0%, 1%, 3%, dan 5% ratio berat.

4. Escheria coli (JM 109, Promega, Gram Negatif ) dipilih sebagai anggota

kelas prototipikal untuk mengevaluasi efek antimikroba.

D. Rumusan Masalah

Berdasarkan identifikasi masalah dapat dirumuskan masalah sebagai

berikut :

1. Bagaimana hasil karakterisasi sintesis ZnO menggunakan instrumen

XRD?

2. Bagaimana pengaruh variasi ZnO yang ditambahkan pada semen

Portland terhadap efek antibakteri pada koloni bakteri Escherichia coli?

7
 3. Bagaimana pengaruh sifat antibakteri pada Semen-ZnO dibawah sinar

UV (Under UV) dan tanpa sinar UV (Under Dark)

E. Tujuan Penelitian

Adapun tujuan penelitian yang dilakukan sebagai berikut :

1. Untuk mengetahui karakterisasi dari Semen-ZnO menggunakan

instrumen XRD.

2. Untuk mengetahui pengaruh variasi ZnO yang ditambah pada semen

Portland terhadap efek antibakteri pada koloni bakteri Escherichia coli.

3. Untuk mengetahui pengaruh sifat antibakteri pada Semen-ZnO dibawah

sinar UV (Under UV) dan tanpa sinar UV (Under Dark)

F. Manfaat Penelitian

Adapun beberapa manfaat yang akan didapatkan pada penelitian kali ini

sebagai berikut :

1. Menentukan hasil karakterisasi dari ZnO menggunakan instrumen

XRD.

2. Memberikan informasi pengaruh variasi ZnO yang ditambah pada

semen Portland terhadap efek antibakteri pada koloni bakteri

Escherichia coli.

3. Memberikan informasi mengenai pengaruh sifat antibakteri pada

Semen-ZnO dibawah sinar UV (Under UV) dan tanpa sinar UV (Under

Dark)

8
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Semen Portland

1. Definisi

Semen merupakan bahan perekat bertekstur halus, jika dicampur air

akan terbentuk reaksi hidrasi dan dapat terikat menjadi bahan-bahan

padat berupa satu kesatuan massa yang kokoh. Disisi lain semen

Portland merupakan semen hidrolis yang dihasilkan dengan cara

menggerus terak atau klinker yang terdapat senyawa kalsium silikat

bersifat hidrolis, bersamaan dengan bahan tambahan lain seperti gypsum

yang berfungsi untuk mengendalikan reaksi awal (Lallo da Silva et al.,

2019).

Menurut (Purnawan & Prabowo, 2018) semen menjadi salah satu

bahan dasar utama konstruksi bangunan, menjadikan semen sebagai

komoditi yang bernilai esensial. Diketahui total kapasitas produksi

semen nasional mencapai 68,7 juta ton dengan kemampuan produksi

hanya 59,9 juta ton. Tahun 2014 diketahui total impor semen sebesar 2,2

juta ton yang mana hal ini sangat kontras dengan ekspor yang hanya

sebesar 220.000 ton. Total kebutuhan semen nasional diperkirakan

mencapai 62,4 juta ton hal ini dihimpun dari data Kemenperin di tahun

2016. Beberapa tahun belakangan ini Indonesia memiliki 7 produsen

semen yang aktif beroperasi dengan persentase yaitu Holcim Indonesia

15%, Indocement 30%, dan yang terakhir yaitu Semen Gresik Group
9
(SGG) yang menguasai sekitar 45%, sementara yang lainnya sebesar

10% dibagi kepada Semen Andalas, Semen Baturaja, Semen Bosowa,

dan Semen Kupang Dilihat dari penguasaan pasar tersebut, terdapat dua

pelaku usaha yang mempunyai pangsa pasar sebagai market leader,

yaitu SGG dan Indocement.

Dewasa ini terdapat beberapa jenis semen antara lain yaitu yang

pertama adalah semen Portland, semen ini merupakan powder berwarna

abu kebiruan, yang berasal dari bahan utama batu gamping yang

memiliki kandungan kalsium yang tinggi, diproses pada tanur yang

memiliki tekanan dan suhu yang sangat tinggi, semen ini biasa

digunakan sebagai perekat untuk memplester. Semen ini disusun

berdasarkan persentase kandungan yang dimilikinya dapat didefinisikan

atau dikelompokkan menjadi beberapa tipe, yang pertama yaitu Semen

Putih (Gray Cement) adalah semen yang digunakan sebagai filler atau

biasa digunakan sebagai bahan finishing, yang mana semen ini berasal

dari bahan utama kalsit yang berasal dari limestone yang memiliki

kemurnian yang tinggi. Selanjutnya yaitu Oil Well Cement merupakan

semen dengan fungsi khusus yang digunakan untuk pengeboran minyak

bumi dengan berbagai kondisinya baik darat maupun laut. Yang terakhir

terdapat Mixed & Fly Ash Cement yaitu campuran pozzolan buatan dan

semen abu yang mana pozzolan merupakan hasil sisa dari pembakaran

batu bara yang menghasilkan besi oksida, aluminium oksida,

amorphous silica, dan oksida lainnya dalam variasi jumlah. Semen ini

berfungsi untuk campuran beton agar menjadi lebih keras.

10
 Terlepas dari produksi semen, disisi lain peneliti selalu

mengembangkan sifat dan struktur semen dan menciptakan biaya

produksi semen seefisien mungkin. Biaya produksi semen Portland terkait

erat dengan biaya bahan bakar yang digunakan untuk membuat suhu dari

kiln (Tempat pembakaran modern) tinggi dan untuk memungkinkan

reaksi kimia yang berbeda yang mengubah bahan mentah menjadi klinker.

Klinker keluar dari kiln sebagai nodul abu-abu, pucat atau warna yang

lebih pekat sesuai dengan jumlah zat besi yang dikandungnya. Ketika

kandungan oksida besi lebih rendah dari 1% klinker berwarna keputihan,

dan semakin rendah kandungan oksida besi, semakin putih semen yang

dihasilkan, namun disamping itu (Sui et al., 2019) mengatakan

penggantian sebagian klinker dengan batu kapur memberikan manfaat

lingkungan dan ekonomi bagi industri beton. Memahami karakteristik

fisik dan kimia bahan berbasis semen Portland batu kapur penting untuk

memastikan masa pakai struktur beton jangka panjang, khususnya di

lingkungan yang menyebabkan korosi tulangan seperti paparan larutan

garam.

Gambar 2. Transformasi Bahan Mentah Menjadi Klinker

11
2. Proses Pengolahan

Proses Pengolahan semen dibagi menjadi 2 proses yaitu: yang

pertama proses basah pada jenis proses ini semua bahan dihomogenkan

dengan air lalu dihancurkan, diuapkan dan kembali dipanaskan dengan

(bunker crude oil), dikarenakan keterbatasan energi maka proses ini

sangat jarang dilakukan.

Gambar 3. Proses Basah Pembuatan Semen

Yang kedua yaitu proses kering, proses ini menggunakan Teknik

penggerusan atau penggilingin dan blending, kemudian dibakar dengan

bahan bakar batubara. Untuk mencapai hasil yang baik proses ini melalui

5 tahapan, yang pertama yaitu batu kapur/koral yang didapat pada proses

penembakan batu bara dipecah sampai terbentuk pada ukuran < 50mm.

Yang kedua yaitu batu kapur yang telah dihancurkan dengan ukuran yang

telah ditentukan dicampur dengan lempung, pasir dan bijih besi, lalu pada

proses ketiga setelah dilakukan pencampuran hasil dari campuran

tersebut dibawa ke Ball Mill, dicampur dengan air barulah setelah itu

terbentuk larutan pekat yang memiliki tekstur seperti bubur yang biasa

dinamakan slurry, pada proses keempat yaitu dilakukan pengujian

12
komposisi kesesuaian spesifikasi, selajutnya proses terakhir setelah

dilakukan pengujian barulah dilakukan pembakaran slurry pada kiln

berputar dengan temperatur 1500°C.

Lalu selanjutnya dihasilkan klinker yang mengandung senyawa kimia

antara lain:

Oxide CaO SiO2 Al2O3 Fe2O3 K2O MgO Na2O SO3 CO2 TiO2

Notation C S A F K M N S’ C’ T

Tabel 1. Notasi Kimia Semen Portland

(Hanein et al., 2015)

Dengan tahapan pertama yaitu bubuk batu bara halus dan udara

ditiupkan pada ujung tungku pada suhu 1500°C, pada proses kedua

dilakukan proses pemanasan yang bertujuan menghilangkan air dan CO2

dari slurry, lalu pada proses ketiga partikel-partikel terbentuk

didinginkan membentuk butiran abu abu gelap yang biasa disebut klinker

lalu hasil klinker tersebut disimpan pada suatu penyimpanan sebelum

dilanjutkan pada tahap selanjutnya. Proses terakhir yaitu Klinker

dicampur gypsum (CaSO4) dan dihaluskan di Ball Mill sehingga

terbentuk bubuk halus yang dinamakan semen Portland. barulah semen

disimpan di silo siap untuk didistribusikan (Nurfatimah, 2015).

Gambar 4. Proses Kering Pembuatan Semen Portland

13
3. Sifat Fisika dan Kimia Semen Portland

Pada sifat fisika semen Portland padat, terdapat beberapa bahan

campuran yang berbeda yang mana pada setiap campuran pada

kontruksinya ditampakkan oleh sifat fisiknya dengan beberapa

parameter kunci yang mengontrol kualitas semen. Sifat fisik semen yang

baik didasarkan pada Fineness/Kehalusan.

Para peneliti yaitu (Petre et al., 2012) pada hasil eksperimen yang

mereka lakukan didapatkan hasil pemeriksaan laboratorium mengenai

perolehan semen dengan kehalusan canggih yang dirancang untuk

grouting dalam pekerjaan kontruksi. Sampel semen Portland biasa

dengan berbagai tingkat kehalusan telah dikembangkan dan dianalisis

dalam hal sifat fisik dan mekanik. Sampel semen yang diperoleh

digunakan dalam mempersiapkan campuran nat dengan berbagai rasio

air eksperimen mengarah pada pengembangan jenis semen portland

biasa dengan kehalusan lanjutan (7000 cm2/g dan 8000 cm2/g, masing-

masing) bagus untuk digunakan dalam pekerjaan konsolidasi dengan

injeksi.

Lalu selanjutnya terdapat Kuat Tekan (Compressive Strength) kuat

tekan dapat didefinisikan sebagai indeks kuatnya suatu material dalam

menahan beban. Kuat tekan adalah aspek utama atau fungsi utama dari

semen itu sendiri. Komposisi mineral, kandungan kapur bebas,

magnesium, kandungan gypsum, temperatur, perbandingan air dengan

semen, kualitas agregat, cara pengerjaan, dan perlakuan merupakan

perbedaan kuat yang dapat diperhatikan komposisinya. Pada sisi lain

14
perbedaan kuat tekan semen dapat dipantau dari kecepatan

pengembangan, kuat tekan semen sangat dipengaruhi oleh komposisi

kimia mineral semen yang ada, seperti telah diketahui bahwa semen

mengandung 4 mineral utama yaitu C3S, C2S, C3A, dan C4AF yang

mempunyai reaktifitas masing-masing terdapat perbedaan sewaktu

bertemu dengan air (Purnawan & Prabowo, 2018).

Selanjutnya terdapat Loss of Ignition yaitu pemanasan sampel

semen pada 900°C - 1000°C sampai berat konstan diperoleh

menyebabkan penurunan berat sampel. Kehilangan berat pada

pemanasan ini dihitung sebagai kehilangan penyalaan. Penyimpanan

atau pemalsuan yang tidak tepat dan berkepanjangan selama

pengangkutan atau pemindahan dapat menyebabkan pra-hidrasi dan

karbonasi, yang keduanya dapat ditunjukkan dengan meningkatnya

kehilangan penyalaan. Menurut eksperimen yang dilakukan oleh

(Omoniyi & Okunola, 2016) yaitu Sekitar 3,0 g sampel semen dari merk

(As, Br, De dan Sk) dipindahkan ke dalam krus platina kering yang telah

ditimbang sebelumnya kemudian masing-masing cawan lebur dengan

sampel dinyalakan di atas 9000°C dalam tungku selama sekitar 30

menit. Crucible kemudian diangkat, didinginkan dan ditimbang.

Persentase loss on ignition (LOI) dihitung menggunakan Persamaan:

LOI = (W1+W2 +W3 +) x100

W2
W1 = berat wadah kosong

15
 W2= berat sampel + wadah kosong

W3 = berat wadah kosong + berat setelah pengapian

Sifat Kimia Semen Portland terdiri dari bahan baku untuk produksi

semen seperti batu kapur (kalsium), pasir atau tanah liat (silikon), bauksit

(aluminium) dan bijih besi, dan mungkin termasuk cangkang, kapur,

napal, serpih, tanah liat, terak tanur tinggi, batu tulis. Analisis kimia

bahan baku semen memberikan informasi tentang sifat kimia semen, hal

ini sesuai dengan eksperimen yang dilakukan oleh (Jayawardane et al.,

2012) didapatkan informasi kandungan yang terdapat pada semen

Portland yaitu :

Sifat Kimia Persentase (%)

Loss on Ignitation 2,05
Insoluble Residue 4,1
Chloride 0,07
SiO2 28,7
Al2O3 13,5
CaO 53,6
MgO 2,21
Fe2O3 2,27

Tabel 2. Sifat Kimia Semen Portland

16
B. Zinc Oxide

1. Definisi

ZnO (Zinc Oxide) adalah senyawa anorganik berwarna putih,

tidak memiliki bau dan sukar larut dalam air. Pada suhu kamar, senyawa

ini memiliki fasa padat dengan densitas sebesar 5,610 g/cm 3, titik leleh

sebesar 1975oC serta berat molekul ZnO yaitu sebesar 81,38 g/mol,

Seng oksida (ZnO) merupakan semikonduktor dengan celah pita besar

sekitar 3,37 eV dan energi ikat eksiton tinggi (60 meV). Ini adalah

senyawa multifungsi dengan optik unik, luminescent 58 S.N.A.

(Mohamad Sukri et al., 2019). ZnO biasanya disintesis dalam bentuk

serbuk yang biasa digunakan sebagai zat aditif pada berbagai bahan dan

produk seperti plastik, keramik, kaca, semen, karet, pelumas, cat dan

lain-lain. Di kerak bumi, ZnO muncul sebagai mineral zincite, namun

ZnO sebagian besar diproduksi secara sintesis untuk kebutuhan

komersial, disamping itu para ilmuwan sedang mengembangkan ZnO

untuk menjadi fotokatalis semikonduktor yang efisien karena sifatnya

yang tidak beracun dan stabilitas fisik.(Qi et al., 2020).

Gambar 5. Zinc Oxide

17
2. Bentuk Struktur

ZnO mempunya tiga struktur kristal antara lain cubic rocksalt,

zincblende cubic, dan hexagonal wurzite. Struktur yang paling

umum dari ZnO dengan jenis bentuk wurtzite, adalah kisi hexagonal

dengan atom seng dikelilingi oleh atom oksigen dengan koordinasi

tetragonal. Wurtzite ini juga merupakan struktur paling stabil dari

ZnO dan sering dijumpai (Kim et al., 2020). Bentuk zincblende dari

ZnO terbentuk pada saat pertumbuhan kristal dan mencapai

kestabilan ketika membentuk kubus. Bentuk rocksalt hanya di

temukan pada tekanan 10 GPa. Dapat diamati bahwa wurtzite ZnO

terdiri dari atom membentuk sub kisi heksagonal. Dalam hal ini,

masing-masing Zn sub-kisi berisi empat Zn ion dan dikelilingi oleh

empat ion O2 dan sebaliknya terkoordinasi di tepi tetrahedron

koordinasi tetrahedral ini akan membentuk simetri kutub sepanjang

sumbu heksagonal yang menginduksi efek piezoelektrik dan

polarisasi spontan pada ZnO kristal wurtzite. Efek polarisasi adalah

salah satu faktor utama yang mempengaruhi pertumbuhan kristal

selama proses sintesis struktur nano (Pradeev raj et al., 2018).

Gambar 6. Model Struktur ZnO

(Lee et al., 2016)

18
3. Sifat Antibakteri

Dewasa ini para peneliti mengembangkan fungsi dari ZnO

salah satunya yang dilakukan oleh (Pasquet et al., 2014) mereka

mendefinisikan seng oksida (ZnO) adalah agen antimikroba yang

efisien yang bekerja melalui beberapa mekanisme yang melibatkan

spesies kimia yang berbeda. Tiga mekanisme aksi yang berbeda

telah dikemukakan dalam literatur bahwa produksi spesies oksigen

reaktif (ROS) karena semikonduktor sifat ZnO. Destabilisasi

membran mikroba pada kontak langsung partikel ZnO ke dinding

sel, dan sifat antimikroba intrinsik dari ion Zn 2+ yang dilepaskan

oleh ZnO dalam air . Penelitian ini bertujuan untuk menyelidiki

kontribusi spesies terlarut yang dilepaskan oleh ZnO, terutama Zn 2+.

Penggunaan agen antimikroba anorganik untuk memerangi

infeksi telah telah disorot karena menawarkan keuntungan penting

dalam kaitannya dengan antimikroba organik, seperti toksisitas yang

lebih rendah untuk tuan rumah, stabilitas yang lebih tinggi dengan

daya tahan yang lebih lama, resistensi mikroba yang lebih rendah

dan selektivitas yang baik. Seng oksida (ZnO) menawarkan

keuntungan tambahan dibandingkan dengan semua antimikroba

anorganik, seperti sitotoksisitas yang lebih rendah, selektivitas yang

lebih baik, stabilitas yang lebih tinggi dan ketahanan panas (Lallo da

Silva et al., 2019). Menurut (Eskani et al., 2020) beberapa laporan

tentang garam seng yang larut dalam air, aktivitas antimikroba Zn 2+

tergantung pada konsentrasi dan kontak durasi yang terjadi dan juga

19
 tergantung dosis yang diberikan hal ini telah dilakukan tindakan

dalam pembasmian bakteri Escherichia coli. Nanomaterial seng

oksida ZnO telah banyak digunakan pada berbagai industri

dikarenakan sifat-sifat uniknya antara lain antibakteri, fotokatalitik,

optik dan elektrik dan sifat antibakteri ZnO disebut sangat tinggi

karena tahan panas dan stabil di berbagai kondisi.

C. Escherichia coli

Escherichia coli merupakan bakteri komensal memiliki sifat

patogen, bertindak sebagai penyebab utama morbiditas dan mortalitas

diseluruh dunia

Gambar 7. Struktur Bakteri Eschericia coli

Escherichia coli adalah anaerob fakultatif yang dominan dari flora

kolon manusia. Organisme ini biasanya menjajah saluran pencernaan bayi

dalam beberapa jam kehidupan, Escherichia coli biasanya tidak berbahaya

jika berjumlah terbatas pada lumen usus, Namun pada manusia yang

memiliki imun yang lemah atau imunosupresi, atau keadaan dimana

terjadinya hambatan gastrointestinal, Escherichia coli patogenik dapat

menyebabkan infeksi. Lebih lagi, bahkan anggota paling kuat dari spesies

ini mungkin rentan terhadap infeksi oleh salah satu dari beberapa klon
20
Escherichia coli yang beradaptasi mengembangkan kemampuan untuk

menyebabkan spektrum luas kumpulan penyakit manusia (Saravanakkumar

et al., 2018).

Disamping itu menurut (Jang et al., 2017) Escherichia coli adalah

bakteri gram-negatif berbentuk batang, dan diklasifikasikan sebagai

anggota famili Enterobacteriaceae dalam kelas Gammaproteobacteria.

Escherichia coli adalah salah satu bakteri yang dipelajari dengan baik.

Escherichia coli dapat tumbuh dengan cepat di bawah kondisi pertumbuhan

yang optimal, bereplikasi dalam 20 menit. Banyak sistem manipulasi gen

telah dikembangkan menggunakan Escherichia coli sebagai bakteri inang,

menghasilkan enzim yang tak terhitung jumlahnya dan produk industri

lainnya.

Infeksi karena Escherichia coli patogen mungkin terbatas pada

permukaan mukosa atau dapat menyebar seluruh tubuh. Tiga hasil sindrom

klinis umum dari infeksi strain Escherichia coli yang secara inheren

patogen: (i) infeksi saluran kemih, (ii) sepsis/meningitis, dan (iii) enterik/

penyakit diare. Escherichia coli mencakup beberapa patogen yang muncul

dari pentingnya kesehatan masyarakat di seluruh dunia, dan secara khusus

akan fokus pada patogen yang menyerang manusia. (Kaper et al., 2004).

Escherichia coli termasuk golongan bakteri mesofilik yaitu bakteri

yang berada pada suhu pertumbuhan optimumnya 15-45°C dan dapat

melangsungkan kehidupan pada pH 5,5-8. Escherichia coli merupakan

bakteri yang paling sering menyebabkan infeksi saluran pencernaan

maupun infeksi saluran kemih pada manusia. Bakteri ini memiliki bentuk

21
batang gram negatif dengan beberapa subspesies, seperti enterotoxygenic

Escherichia coli (ETEC), Escherichia coli (EPEC), enteroaggregative

Escherichia coli (EAEC), Enteroinvasive Escherichia coli (EIEC), dan

diffusely adherant Escherichia coli. Di Amerika Serikat yang paling sering

menyebabkan diare adalah tipe enterotoxygenic Escherichia coli. Selain

dapat menyebabkan diare juga infeksi saluran kemih, ada tipe lain dari

Escherichia coli ini yang bisa menyebabkan sindrom penyakit, yaitu

sindrom hemolitik-uremik yang disebabkan oleh Shiga-toxin – producing

Escherichia coli.(Mutaqin et al., n.d.).

Menurut data dari (Daga et al., 2019) di negara maju, Escherichia coli

merupakan patogen dalam infeksi aliran darah. Escherichia coli menduduki

peringkat pertama atau kedua dalam kejadian infeksi aliran darah di negara-

negara seperti Australia, Kanada, Denmark, Finlandia, Islandia, Selandia

Baru, Swedia, dan Amerika Serikat. Namun, menganalisis frekuensi infeksi

aliran darah Escherichia coli di Rumah Sakit Universitas di Brasil,

menunjukkan bahwa dalam beberapa tahun terakhir, Escherichia coli

bertanggung jawab atas 4,7% infeksi aliran darah.

Selain itu bakteri resisten antimikroba (AMR) ada di mana-mana di

perairan lingkungan, termasuk lautan, sungai, danau, dan air selokan, dan

bahkan telah tercatat di sumber air minum. Sistem air mengandung

antibiotik, biosida, logam berat, dan bahan kimia lainnya yang secara alami

memilih resistensi antimikroba dalam kumpulan gen mikroba yang terbawa

air ini. Escherichia coli berlimpah dalam sistem air dan merupakan reservoir

yang mengkhawatirkan untuk AMR di lokasi ini. Sebuah survei terhadap

22
 AMR Escherichia coli di Belanda menunjukkan 17,1% ESBL Escherichia

coli yang diisolasi dari air sungai dan air limbah dilaporkan sebagai patogen

(Critchley et al., 2019).

D. Efek Antibakteri ZnO Terhadap Eschericia coli

1. Bahan Nanopartikel ZnO

Dilakukan eksperimen oleh (Liu et al., 2009) yaitu melakukan

suspensi ZnO NP dengan ukuran NP 70 ± 15 nm dibeli dari Alfa Aesar

(Ward Hill, MA, USA). Suspensi ZnO NP asli 12 mol diencerkan

dengan media tryptone soy agar (TSA) untuk membuat rangkaian media

yang mengandung ZnO NP dengan konsentrasi 0, 3, 6 dan 12 mmol.

Media kemudian diautoklaf untuk menghilangkan mikroorganisme

alami dan segera digunakan untuk tes antimikroba berikut. Selain itu,

alikuot 10 ml suspensi ZnO NP disaring secara vakum melalui filter

membran aluminium oksida dengan ukuran pori 20 nm dan kerapatan

optik 25 mm (OD; Anodisc; Whatman Inc., Clifton, NJ, USA ),

menghasilkan larutan bebas NP yang terdiri dari air dan dispersan.

Larutan bebas NP diencerkan dengan TSA sebanyak 1000 kali dan

diautoklaf untuk digunakan dalam studi pengaruh larutan bebas NP pada

pertumbuhan bakteri.

Penghambatan pertumbuhan populasi bakteri dapat dijelaskan

oleh interaksi spesifik dengan nanopartikel. Secara umum, ukuran sel

bakteri berada dalam kisaran mikrometer, sedangkan membran sel

luarnya memiliki pori-pori dalam kisaran nanometer. Karena

nanopartikel berukuran lebih kecil dari pori-pori bakteri, mereka akan

23
memiliki kemampuan unik untuk menembus membran sel, seperti

halnya dengan NP CuO. Untuk NP ZnO, tiga mekanisme yang paling

sering dilaporkan adalah: pembentukan spesies oksigen reaktif (ROS)

termasuk hidrogen peroksida (H2O2), radikal hidroksil OH– dan

peroksida O2-2 (Dadi et al., 2019).

Salah satu cara untuk mendapatkan nanopartikel yaitu dengan

sintesis nanokomposit ZnO dan uji efektivitasnya sebagai antibakteri

pada bakteri Escherichia coli (E. coli). Untuk mensintesis nanokomposit

ZnO dilakukan dengan metode kopresipitasi. Metode kopresipitasi

merupakan metode yang dimanfaatkan untuk dapat mengambil partikel

kecil nano ZnO dengan persamaan reaksi:

Pada penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh (Abebe et al.,

2020) mengkonfirmasi penciptaan ROS menggunakan teknik ESR dan

aktivitas antibakterinya yang efektif. Proses sonokimia satu langkah

baru yang digunakan untuk mensintesis komposit ZnO-PVA. Aktivitas

antibakteri terhadap Escherichia coli dan S. aureus dilakukan dengan

metode unit pembentuk koloni per mililiter. Dibandingkan dengan ZnO

tanpa PVA (~ 80–100 nm), NP ZnO yang disintesis menggunakan PVA

sebagai agen penutup (4–6 nm) menunjukkan peningkatan aktivitas

antibakteri pada bakteri Escherichia coli dan S. aureus. Ini menegaskan

ketergantungan aktivitas antibakteri pada ukuran partikel.

24
 Menggunakan pewarna fluoresen propidium iodida, sel-sel mati

(fluoresensi merah) dan sel-sel hidup (fluoresensi merah hijau)

diidentifikasi dengan mikroskop pemindaian laser confocal.

2. Tes Antibakteri

Escherichia coli O157:H7 C7927 diperoleh dari koleksi kultur di

Food Microbiology Laboratory di University of Missouri, Columbia,

MO. Escherichia coli O157:H7 ditumbuhkan secara aerobik pada suhu

37°C selama 12-16 jam dalam kaldu kedelai tripton (TSB; Difco, MD,

USA). Kultur kemudian diencerkan dalam TSB segar mulai dari OD

pada 600 nm (OD600) 0,05 dan diinkubasi pada suhu 37°C semalaman

dalam labu Erlenmeyer serta pada pelat TSA. Uji bakteriologis

dilakukan dengan menginokulasi sel bakteri pada pelat TSA yang

mengandung konsentrasi ZnO NP yang berbeda (0, 3, 6 dan 12 mmol)

dan larutan bebas NP. Sel yang diinokulasi diperkirakan c.200 CFU per

piring, dan semua pengukuran dilakukan dalam rangkap tiga. Pengaruh

autoklaf terhadap fungsionalitas ZnO NP juga dievaluasi dengan

menggunakan ZnO NP dengan dan tanpa perlakuan autoklaf untuk uji

antibakteri (Haberecht et al., 2019).

3. Hasil Efek Antibakteri ZnO

Suspensi ZnO yang telah dikarakterisasi oleh TEM dengan ukuran

ZnO NP adalah 70 ± 15 nm dan memiliki struktur seperti bola atau

batang. Larutan bebas ZnO NP diperoleh setelah penyaringan dan

dianalisis komposisinya, yang terdiri dari air dan dispersan. Larutan

bebas ZnO NP tidak berpengaruh pada pertumbuhan bakteri dan

25
 pembentukan koloni normal diamati. Untuk menilai pengaruh ZnO NP

pada Escherichia coli O157:H7, kultur bakteri diinokulasi dengan

menyebarkan pada pelat TSA yang mengandung konsentrasi ZnO NP

yang berbeda 0, 3, 6 dan 12 mmol, diinkubasi semalaman pada 37°C

sebelum sel dicacah. Lalu terlihat ZnO NP menunjukkan peningkatan

aktivitas antimikroba terhadap Escherichia coli O157:H7 seiring

dengan peningkatan konsentrasinya. Ketika konsentrasi ZnO NP

meningkat hingga 12 mmol, pertumbuhan Escherichia coli O157:H7

benar-benar terhambat yang dibuktikan dengan tidak adanya koloni

pada pelat TSA. Pengaruh autoklaf pada fungsi ZnO NP dievaluasi

dengan menggunakan ZnO NP dengan dan tanpa perlakuan autoklaf

untuk uji antibakteri dan tidak ada perbedaan signifikan yang diamati.

Gambar 8. Pengaruh Variasi Konsentrasi ZnO Terhadap Koloni bakteri

E. X-Ray Diffraction

Dewasa ini terdapat beberapa metode untuk memastikan bahwa

kedudukan bidang tertentu dari material yang dikaji memenuhi syarat Bragg

mengenai pengukuran penyinaran difraksi. Metode tersebut adalah adalah:

(1) Metode difraksi Laue; (2) Metode hablur bergerak; dan (3) Metode
26
difraktometeri serbuk. Metode Difraktometeri serbuk berfungsi untuk

melihat difraksi sampel polikristal. Sampel berupa serbuk/bubuk dengan

permukaan yang rata dan mempunyai ketebalan yang pas untuk menyerap

alur sinar-X yang menuju keatasnya. Digunakan pencacah Geiger dan

sintilasi untuk menghasilkan puncak-puncak difraksi. sampel diatur pada

sudut 2Ө terhadap alur datang agar alat monitor dapat mengelilingi sampel

tersebut. Alat monitor tersebut dijajarkan agar sumbunya selalu melalui dan

bersudut tepat dengan sumbu putaran sampel. Intensitas sinar-X yang

difraksi sebagai fungsi sudut 2Ө.

Gambar 9. Difraksi sinar X terhadap bidang atom

Peralatan yang digunakan pada penelitian yang dilakukan oleh

(Munasir et al., 2012) adalah XRD (merk Philips).yang mana sumber

pancaran sinar yang dipancarkan Cu Ka dicetakkan pada kertas dan

menghasilkan hasil data informasi. lalu dengan kartu JCPDS (Joint

Committee Powder Diffraction Standard) data difraksi sinar-X daripada

sampel kemudian dibandingkan. Dari hasil difraksi sinar X yang

menghasilkan intensitas dan sudut difraksi, dianalisa untuk menentukan

jenis struktur kristalnya dengan mencocokan pada data ICSD (Inorganic

Crystal Structure Database) pada sampel yang diuji. Pada metode difraksi,

hukum Bragg harus dipenuhi, kerena itu perlu diatur orientasi kristal
27
terhadap berkas dating. Metode difraksi sinar X dapat dibedakan menjadi :

(1) Metode kristal tunggal. Metode ini berfungsi untuk menentukan struktur

kristal, dalam ini dipakai berbentuk kristal tunggal. (2) Metode

serbuk/bubuk (powder method). Bahan sampel pada metode ini dibuat

berbentuk serbuk, sehingga terdiri banyak kristal yang sangat kecil dan

orientasi tidak perlu diatur lagi kerena semua orientasi bidang telah terdapat

pada sampel dengan demikian hukum Bragg dapat dipenuhi.

Pada penelitian ini dipergunakan metode serbuk. Informasi yang

dapat diperoleh dari data difraksi sinar X ini yaitu: (1) Posisi puncak difraksi

memberikan gambaran tentang parameter kisi (a) jarak antar bidang,

struktur kristal dan orientasi dari sel satuan; (2) intensitas relatif puncak

difraksi memberikan gambaran tentang posisi atom dalam sel satuan; (3)

bentuk puncak difraksi memberikan gambaran tentang ukuran kristalit

dengan persamaan rumus:

𝐾ʎ
𝐷=
𝛽. 𝑐𝑜𝑠𝜃

Dimana d merupakan ukuran kristal dalam nanometer, K merupakan

konstanta Scherrer, ʎ merupakan panjang gelombang dari berkas sinar-X

yang datang, 𝛽 lebar merupakan penuh pada setengah intensitas maksimum

puncak refleksi (Hayle, 2014).

Gambar 10. Instrumen XRD

28
F. Scanning Electron Microscopy

SEM adalah instrumen canggih serbaguna yang sebagian besar

digunakan untuk mengamati fenomena permukaan bahan. Sampel ditembak

dalam SEM menggunakan high- elektron energi, dan elektron/sinar-X yang

keluar dianalisis. Hasil ini elektron/sinar-X memberikan informasi tentang

topografi, morfologi, komposisi, orientasi butir, informasi kristalografi, dll.

dari suatu material.

Gambar 11. Instrumen SEM

Morfologi menunjukkan bentuk dan ukuran, sedangkan topografi

menunjukkan fitur permukaan sebuah objek atau "bagaimana tampilannya",

teksturnya, kehalusan atau kekasarannya. Juga, komposisi berarti unsur dan

senyawa yang menyusun bahan, sedangkan kristalografi berarti susunan

atom dalam bahan. SEM adalah peralatan terkemuka yang mampu mencapai

gambar visual rinci dari sebuah partikel dengan kualitas tinggi dan resolusi

spasial 1 nm. Jenis elemen dan senyawa yang terdiri dari sampel dan rasio

relatifnya serta pengaturannya atom dalam partikel kristal tunggal dan

derajat keteraturannya juga dapat diberikan. Dengan demikian, SEM

merupakan instrumen multiguna yang mampu mengkaji dan menganalisis

bahan dengan resolusi tinggi (Akhtar et al., 2018).

29
 BAB III

METODE PENELITIAN

A. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini akan dilaksanakan di laboratorium penelitian kimia,

Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Negeri Padang pada bulan November sampai Januari 2022.

B. Objek Penelitian

Objek Penelitian ini yaitu Semen Antibakteri dengan nanopartikel ZnO

C. Variabel Penelitian

Pada penelitian ini peneliti menggunakan beberapa variable yaitu:

1. Variabel Terikat : Uji efektivitas ZnO Terhadap Escherichia coli

dengan evaluasi menggunakan sinar UV dan tanpa sinar UV

2. Variabel dikontrol : Jumlah Semen Portland seberat 1 gram.

3. Variabel Bebas : Variasi persentase Nanokomposit ZnO ditambahkan

0, 1, 3, dan 5%.

D. Alat dan Bahan

Alat yang digunakan pada penelitian kali ini adalah gelas kimia,

gelas ukur, neraca analitik, batang pengaduk, pipet tetes, cawan petri, kertas

filter, ultrasonic digital. Dengan instrumen yang digunakan adalah XRD

yang mana bertujuan untuk mengidentifikasi zat pengotor pada material

ZnO. Dengan bahan penelitian yaitu ZnO heksahidrat, Aseton, semen

Portland, bakteri Escherichia coli, Aquades, dan NaOH.

30
E. Prosedur Penelitian

1. Sintesis ZnO

Untuk mensintesis serbuk nanopartikel ZnO mengikuti prosedur

(Singh et al., 2018) dengan modifikasi. Sebanyak 7 gram [Zn(NO3)2

6H2O,(Merk, 99,0%)] dilarutkan dalam 117 ml dari larutan, lalu

menambahkan larutan encer NaOH 4 M tetes demi tetes dengan

pengadukan konstan sampai menyentuh pH 12 dari presipitasi yang

tercapai. Selanjutnya dilakukan penyaringan, setelah dilakukan proses

penyaringan maka endapan yang terbentuk dicuci beberapa kali dengan

air suling dan diikuti beberapa tetes aseton barulah terbentuk bubuk

putih. Lalu bubuk putih dikeringkan dengan dengan oven bersuhu

110°C selama 5 jam dalam oven.

2. Proses Mixing bubuk ZnO dan Semen Portland

Setelah dilakukan sintesis ZnO maka didapatkan bubuk ZnO,

dilakukan persiapan 4 cawan petri berisi komposit semen. yang mana

dalam 4 komposit tersebut ditambahkan ZnO dengan variasi 0%, 1%,

3% dan 5% oleh ratio berat. Selama melakukan persiapan pelet

komposit, pertama, mencampur ZnO dan semen putih dalam jumlah

yang sesuai dengan menjaga berat total semen 1 gram dan variasi yang

ditambahkan, lalu dicampurkan dengan beberapa ml aquades yang

bersifat sebagai pelarut. Untuk pencampuran homogen, campuran ZnO

dan semen putih mengalami pencampuran yang ketat dengan

menggunakan ultrasonic digital selama 2 jam dibawah sinar UV 30 watt

sampai terbentuk komposit campuran antara Semen-ZnO, hal yang sama

31
 dilakukan namun tanpa penggunaan sinar UV atau Under Dark (Sikora

et al., 2018).

3. Karakterisasi Semen-ZnO dengan instrumen XRD

Serbuk Semen-ZnO kering dikarakterisasi dengan difraksi

sinar-X (XRD) menggunakan difraktometer serbuk Rigaku berbasis

anoda berputar 9 kW (Cu Ka). Sampel dipindai dengan kecepatan

pemindaian 2°/menit dalam rentang pemindaian (2 jam) mulai dari 20°

hingga 80°. Sebuah mikroskop dari HORIBA (Model-LabRAMHR

Evolution) dipasang dengan spektrometer yang memfokuskan sinar laser

pada sampel. Perangkat lunak LabSpec-6 digunakan untuk pengumpulan

data.

4. Karakterisasi Semen-ZnO dengan instrumen SEM

SEM memiliki pemegang sampel khusus di mana rintisan harus

dipasang berisi sampel di permukaan. Umumnya, stip karbon digunakan

untuk menempelkan sampel ke rintisan. Keran karbon dua sisi pertama

harus dipasang pada rintisan dan kemudian lapisan tipis atau sejumlah

kecil bahan akan ditempatkan pada keran karbon, lapisan tipis yang

menempel dengan keran karbon dapat mengurangi masalah pengisian daya

dan membantu dalam mendapatkan citra yang baik. Beberapa persyaratan

diperlukan saat beroperasi analisis SEM. Selain itu, saat menggunakan

SEM, sampel harus elektrik konduktif untuk menghindari pengisian yang

berlebihan di permukaan (Akhtar et al., 2018).

32
5. Uji Antibakteri terhadap Eschericia coli

Sebelum dilakukan uji bakteri, terlebih dahulu dilakukan

pembuatan media Nutrient Agar Medium NA dibuat dengan cara timbang

media NA 2,8 gr dan larutkan dalam 100 mL akuades kemudian panaskan

di atas magnetic stirrer hingga homogen, kemudian sterilkan pada

autoklafe suhu 121°C selama 1 jam guna menghindari tumbuhnya

mikroorganisme yang tidak diinginkan.

Setelah sterilisasi, media dapat dituang secara aseptis pada

cawan petri steril untuk penggunaan. Sebelum menuang media, tunggu

hingga suam-suam kuku (± 40˚C) lalu dibiarkan pada suhu ruang hingga

media memadat dengan sempurna. Dilanjutkan dengan uji bakteri yang

mana sampel campuran disiapkan dan ditimbang dengan berat masing-

masing yaitu 0,2 g.

Harus dipastikan sebelum melakukan uji bakteri semua alat dan

bahan disterilisasi, dilakukan sterilisasi menggunakan autoclave

menggunakan uap air jenuh bertekanan 15 psi dengan suhu 121°C, lalu

sampel Semen-ZnO seberat 0,2 gram dimasukkan ke dalam tabung falcon

diikuti dengan 1 ml sampel bakteri Escherichia coli lalu dilakukan vortex

selama beberapa menit dengan bertujuan mengkontakkan langsung

bakteri dengan komposit Semen-ZnO. Setelah itu dilakukan pengenceran

bertingkat yang bertujuan untuk memperkecil jumlah mikroba yang

tersuspensi dalam cairan. Selanjutnya sebanyak 1 ml sampel yang telah

diencerkan dituangkan ke dalam media dengan metode Spread Plate, lalu

33
diinkubasi selama 2x24 jam pada suhu ruangan. Dilakukan

evaluasi/perhitungan jumlah koloni dengan metode TPC (Total Plate

Count) dengan bantuan colony counter, persamaan rumus:

𝐶𝐹𝑈 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 𝑥 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛

𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( 𝑚𝑙 ) = 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙

34
 BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Sintesis ZnO

Pada proses sintesis ZnO dilakukan dengan metode presipitasi, yang

merupakan metode pengendapan bahan material dasar yang mana metode

ini dilakukan dengan mengendalikan bahan material dalam larutan melalui

perubahan pH, suhu dan pelarut. Seluruh komponen pada sintesis ZnO

dijaga sesuai dengan sifat dan karakteristiknya yang bertujuan agar

terbentuknya bubuk nanopartikel ZnO murni.

Bubuk ZnO dihasilkan dari campuran antaran ZnO nitrat heksahidrat

dengan NaOH 0,2 M, penambahan NaOH dengan pH yang dijaga yaitu 12.

Gambar 12. Campuran larutan dengan pH dijaga 12

penambahan NaOH bertujuan untuk memisahkan antara ZnO dengan nitrat

sehingga terbentuk Seng Hidroksida dan Natrium Nitrat, selanjutnya larutan

35
disaring yang bertujuan untuk pembersihan atau pemisahan partikel padat

dari suatu larutan/fluida dengan melewatkannya pada medium penyaringan

atau septum yang menahan zat padat.

Zat padat yang terbentuk ditetesi aseton yang bertujuan untuk

menghilangkan zat nitrat pada ZnO sesekali diberi aquabides untuk

membersihkan zat pengotor, dilakukan pengovenan selama 5 jam dengan

reaksi sebagai berikut:

Setelah dilakukan penyaringan dan pencucian endapan beberapa kali

dengan aquades, dilanjutkan dengan aseton, diperoleh serbuk berwarna putih,

sehingga didapatkan serbuk ZnO murni dengan berat 3,2 gram sejalan dengan

penelitian yang dilakukan oleh (Singh et al., 2018)

Gambar 13. Bubuk ZnO murni hasil sintesis

36
B. Proses Mixing Semen-ZnO

Melakukan pencampuran pada sejumlah kecil bahan nano dengan

konstituen berbasis semen (semen dan air) sangat mempengaruhi sifat

mekanik dan daya tahan komposit berbasis semen, serta memberikan

sifat fungsional tambahan seperti self-sensing, self-healing, dan sifat

antibakteri. Pada proses sonikasi mempercepat proses pelarutan suatu

materi dengan prinsip pemecahan reaksi intermolekuler, sehingga

terbentuk suatu partikel yang berukuran nano. Sonikasi yang efisien dari

jumlah nanopartikel yang tinggi dan selanjutnya memfasilitasi dispersi

yang stabil dalam komposit berbasis semen. Selain itu, stabilisasi setelah

pembubaran aglomerat dan mempertahankan keadaan terdispersi.

Jadi, bahkan dengan dispersi yang memuaskan, fenomena re-

aglomerasi terjadi, yang menyebabkan perubahan signifikan dalam

distribusi ukuran partikel nano. Ini kemungkinan akan menurunkan

kinerja nanomaterial dalam komposit semen. Oleh karena itu, semua

elemen ini dimasukkan dalam tahap pengujian awal aditif semen. Pada

proses sonikasi sampel dilakukan dengan bantuan sinar UV 30 watt

dengan panjang gelombang maksimum 365 nm dan intensitas cahaya 144

µW/m2, dan tanpa bantuan sinar UV.

37
 UV light 30
watt

nanomaterials

Campuran antara air Dispersi homogen Campuran semen-

dan nanomaterial nanomaterial ZnO nanomaterial
semen-ZnO sonikasi

Gambar 14. Proses skema metode pendispersi bahan nano dalam preparasi
komposit berbasis semen

Sinar radiasi UV membantu dalam mempercepat pembubaran

nanopartikel ZnO, sejalan dengan kepentingan relatif dari fotoaktivasi

(produksi ROS) dan disolusi partikel (termasuk potensi untuk

mempercepat foto-disolusi) dalam menentukan toksisitas nanopartikel

ZnO di bawah radiasi sinar UV. Pembubaran nanopartikel ini dalam

kondisi yang berbeda diukur berdasarkan waktu dan untuk membantu

peran produksi ROS dan pelarutan dalam toksisitas ZnO, disisi lain sifat

antibakteri pada ZnO tanpa UV light atau tanpa sumber cahaya berasal

dari ion Zn²⁺ yang dilepaskan dalam air.

Cahaya sinar UV mengandung foton yang berguna dalam

proses eksitasi elektron dari pita valensi ke pita konduksi pada katalis

38
 yang digunakan. Elektron pada katalis tersebut akan tereksitasi jika

memiliki energi yang cukup untuk berpindah dari energi yang lebih

kecil (pita valensi) ke energi yang lebih besar (pita konduksi). Suatu

fotokatalis akan menghasilkan suatu radikal hidroksida dengan

berinteraksi dengan molekul air (Singh et al., 2018).

Hal ini terjadi karena satu elektron pada pita valensi berpindah

ke pita konduksi, sehingga elektron yang berada pada kedua pita tidak

stabil. Elektron pada pita valensi akan berinteraksi langsung dengan

molekul air membentuk ion hidroksida radikal sedangkan elektron

yang berada pada pita konduksi bereaksi terlebih dahulu dengan

oksigen, sehingga akan membentuk anion radikal superoksida, yang

mana selanjutnya ROS yang dihasilkan dari ZnO nanopartikel yang

lebih kecil dari pori-pori bakteri akan menembus dan menghancurkan

dinding sel bakteri. Antibacterial

activity
Pita konduksi
Elektron (e-) (e-)
Reduksi :
O2 + e- → •O2⁻
Radikal
superoksida

Eksitasi
elektro celah
UV LIGHT
Oksidasi :
H2O + h+ →
Hole (h+) (h+) OH•
Radikal
Pita Valensi Hidroksida
Gambar 15. Mekanisme ROS

39
C. Pengaplikasian Semen-ZnO terhadap bakteri Escherichia coli

1. Aplikasi Semen-ZnO dengan bantuan sinar UV

Setelah terbentuk komposit antara Semen-ZnO yang sebelumnya

telah divariasikan dengan variasi 0%, 1%, 3% dan 5% maka

selanjutnya dilakukan pengaplikasian produk hasil terhadap bakteri,

yang mana bertujuan untuk melihat keefektivan produk dalam

mengevaluasi bakteri. Bakteri yang digunakan untuk mengevaluasi

sifat antibakteri pada produk semen-ZnO yang sebelumnya telah dibuat

yaitu bakteri Escherichia coli. Evaluasi bakteri dilakukan dengan

metode TPC (Total Plate Count), metode TPC ini atau yang biasa

disebut metode hitung cawan memiliki kelebihan yang mana jika

jumlah koloni bakteri yang sangat banyak dapat digunakan faktor

pengenceran dan hasil evaluasi mikroba lebih mudah diamati. Pada

penelitian kali ini, peneliti menggunakan faktor pengenceran 10 -4 atau

dilakukan pengenceran berulang sebanyak 4 kali. Dengan rumus:

𝐶𝐹𝑈 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖

𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=
𝑚𝑙 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙

Pengenceran memudahkan dalam perhitungan koloni, untuk

memenuhi persyaratan statistik, cawan yang dipilih untuk perhitungan

koloni ialah yang mengandung antara 25 sampai 250 koloni.

Pengenceran biasanya dilakukan secara desimal yaitu 1:10, 1:100,

1:1000 dan seterusnya, atau 1:100; 1:10000, 1: 1000.000 dan

seterusnya.

40
 No. Variasi Semen-ZnO Jumlah koloni Jumlah koloni
(CFU/ml)

1. Variasi 0% 285 2,85x106

2. Variasi 1% 203 2,03x106

3. Variasi 3% 109 1,09x106

4. Variasi 5% 48 0,48x106

Tabel 3. Hasil Evaluasi Semen-ZnO bantuan sinar UV

Dari tabel diatas ditunjukkan tingkat kehidupan bakteri unit pembentuk

koloni per volume (CFU/ml) dari Escherichia coli dengan variasi ZnO dan

bantuan sinar UV. Dengan variasi ZnO yang ditambahkan didapatkan tingkat

kelangsungan hidup bakteri menurun. Dari variasi yang terkecil yaitu 0%

sampai kepada variasi terbesar yaitu 5% mengalami penurunan yang

signifikan. Berikut disajikan kurva hasil evaluasi Semen-ZnO dengan bantuan

sinar UV terhadap kelangsungan hidup koloni bakteri Escherichia coli.

PERCENT SURVIVAL E.Coli terhadap

komposit semen-zno dengan bantuan
sinar uv
95
100
67,6

50 36,3
16

0
variasi 0% variasi 1% variasi 3% variasi 5%

Gambar 16. Kurva Hasil Evaluasi Semen-ZnO bantuan sinar UV

Dengan demikian, dari kurva didapatkan persen survival bakteri

terhadap komposit semen-ZnO(%) sangat menurun dengan

menambahkan ZnO daripada semen putih, didapatkan hasil pada semen

41
dengan variasi ZnO 0% didapatkan jumlah cemaran mikroba sebesar

2,85x106 yang mana dapat dikatakan jumlah ini berada diambang batas

dengan total maksimal koloni yaitu 300, pada variasi 1% didapatkan

jumlah cemaran mikroba sebesar 2,03x106 dapat diasumsikan

penambahan variasi mengakibatkan nilai survival bakteri menurun,

selanjutnya pada variasi 3% didapatkan jumlah cemaran mikroba

sebesar 1,09x106, hal ini menunjukkan kelangsungan hidup bakteri

semakin menurun, variasi terakhir yaitu 5% didapatkan data jumlah

cemaran mikroba yaitu sebesar 0,48x106, dapat disimpulkan bahwa

semakin besar variasi yang ditambahkan secara relatif mengakibatkan

kematian bakteri yang meningkat secara signifikan.

Oleh karena itu, peningkatan aktivitas fotokatalitik sampel

komposit semen-ZnO(%) dapat dikaitkan dengan ZnO yang tertanam

dalam semen putih dan keterpaduan relatifnya dalam semen (Sikora et

al., 2018).

Variasi 0% Variasi 1% Variasi 3% Variasi 5%

Gambar 17. Hasil evaluasi bakteri bantuan sinar UV

Perhitungan koloni dilakukan dengan syarat yang memenuhi

yaitu hitung sebagai satu koloni individual untuk koloni yang memiliki

penampakan mirip tanpa bertindihan, hitung masing-masing sebagai

42
satu koloni individu terhadap dua koloni yang memilki bentuk atau

penampakan yang sama (APHA, AWWA, & WEF SM, 2004)

sedangkan menurut aturan (FDA BAM Ch3, 2001) menambahkan

beberapa persyaratan yaitu hitung masing-masing sebagai satu koloni

untuk beberapa koloni yang bergabung menjadi satu atau bentuk rantai,

namun dapat dibedakan penampakan dan bentuk penyusunnya.

Pada Gambar.16 ditemukan adanya koloni spreader menurut

(ISO 7218, 2007) mengatakan bahwa jika ditemukan koloni spreader

maka koloni tersebut dihitung sebagai koloni tunggal, selanjutnya

koloni yang berhimpit dengan koloni spreader dapat dihitung sebagai

satu koloni dengan ketentuan koloni spreader tersebut memiliki ukuran

< ¼ cawan.

Koloni spreader memiliki beberapa macam penampakan

yaitu koloni spreader yang berada diantara agar dan bagian bawah agar

dan lainnya tumbuh pada lapisan tipis air di permukaan agar, pada hasil

inkubasi ditemukan dua jenis penampakan tersebut, hampir pada semua

variasi ditemukan jenis penampakan spreader tersebut.

Berdasarkan 4 sampel pada Gambar.16 menunjukkan bahwa

koloni yang berhasil tumbuh pada media NA berasal dari pengenceran

yang sama yaitu pengenceran 10-4. Cawan yang memiliki 30-300 koloni

diambil karena kisaran ini dianggap signifikan secara statistik. Namun

jika didapatkan yang memiliki koloni kurang dari 30 koloni

menandakan adanya kesalahan kecil dalam teknik pengenceran. Seperti

43
 yang dilaporkan oleh (Thomas et al., 2012) cawan dengan kisaran 25-

250 atau 30-300 koloni per cawan agar (100 μl sampel) ditetapkan

sebagai CFU yang dapat diterima untuk penghitungan yang akurat.

Sifat katalitik fotoaktif ZnO ini disebabkan karena adsorpsi foton

dengan energi yang sama atau permukaan menghasilkan pasangan

elektron (e-) dan hole (h+) yang lebih besar dari celah pitanya. Foton

yang diserap (≥375 nm) oleh pita ZnO (elektron pada pita konduksi dan

hole pada pita valensi). Elektron (e -) dan hole (h+) yang difotogenerasi

masing-masing adalah oksidator dan pereduksi kuat, Menggunakan

ZnO, kationik (.OH) dan anionik (O2.-) pembentukan radikal di bawah

UV iradiasi cahaya untuk degradasi polutan organik dengan reaksi:

2. Aplikasi Semen-ZnO tanpa bantuan sinar UV

Dilakukan proses sonikasi pada Semen-ZnO tanpa bantuan sinar

UV, gelas kimia yang berisi komposit Semen-ZnO dilapisi dengan

alumunium foil untuk mencegah terjadinya kontak dengan sinar luar,

sehingga didapatkan hasil evaluasi sebagai berikut.

44
 No. Variasi Semen-ZnO Jumlah koloni Jumlah koloni
(CFU/ml)

1. Variasi 0% undefined -

2. Variasi 1% 283 2,83x106

3. Variasi 3% 239 2,39x106

4. Variasi 5% 188 1,88x106

Tabel 4. Hasil Evaluasi Semen-ZnO tanpa bantuan sinar UV

Dari tabel diatas disajikan data tingkat kehidupan bakteri unit

pembentuk koloni per volume (CFU/ml) dari Escherichia coli dengan

variasi ZnO tanpa bantuan sinar UV, didapatkan hasil pada semen

dengan variasi ZnO 0% didapatkan jumlah cemaran mikroba yang tidak

dapat dihitung/undefined yang mana dapat dikatakan jumlah ini berada

melebihi batas dengan total maksimal koloni yaitu 300, pada variasi 1%

didapatkan jumlah cemaran bakteri sebesar 2,83x106.

Dapat diasumsikan penambahan variasi ZnO mengakibatkan nilai

survival bakteri menurun, selanjutnya pada variasi 3% didapatkan jumlah

cemaran mikroba sebesar 2,39x106, hal ini menunjukkan kelangsungan

hidup bakteri semakin menurun, variasi terakhir yaitu 5% didapatkan

data jumlah cemaran mikroba yaitu sebesar 1,88x106.

45
 variasi 0% variasi 1% variasi 3% variasi 5%

Gambar 18. Hasil evaluasi bakteri tanpa bantuan sinar UV

Dengan variasi ZnO yang ditambahkan, didapatkan tingkat

kelangsungan hidup bakteri menurun. Namun tidak terlalu signifikan.

Dari variasi yang terkecil yaitu 0% sampai kepada variasi terbesar yaitu

5% mengalami penurunan yang tidak terlalu signifikan hal ini karena

tanpa adanya bantuan sinar UV. Berikut disajikan kurva hasil evaluasi

Semen-ZnO tanpa bantuan sinar UV terhadap kelangsungan hidup koloni

bakteri Escherichia coli.

PERCENT SURVIVAL E.Coli terhadap

komposit semen-zno tanpa bantuan sinar
uv
100
100 94,3
79,6
80
62,6
60

40

20

0
variasi 0% variasi 1% variasi 3% variasi 5%

Gambar 19. Kurva Hasil Evaluasi Semen-ZnO tanpa sinar UV

Disisi lain sifat antibakteri pada ZnO tanpa UV light atau tanpa

sumber cahaya berasal dari ion Zn²⁺ yang dilepaskan dalam air. Dibawah

reaksi air, hole (h+) menghasilkan radikal hidroksil (.OH) dan elektron

46
(e-) membentuk anion radikal superoksida (O2.-). Potensial oksidasi dari

radikal hidroksil (.OH) ini sangat tinggi (2,80 V), yang mengoksidasi

hampir semua molekul organik kaya elektron (polutan) dan

mengubahnya menjadi CO2 dan air, dan produk sampingan yang tidak

berbahaya (Singh et al., 2018).

47
D. Uji Karekteristik Semen-ZnO instrumen XRD

Pengujian karakteristik Semen-ZnO bertujuan untuk mengetahui

bentuk atau jenis kristal ZnO yang terdapat pada Semen Portland, disisi lain

perlu diketahui ukuran nanopartikel dari ZnO itu sendiri yang terdapat pada

Semen Portland, analisa kali ini digunakan instrumen X-Ray Diffraction.

Gambar 20.Pola XRD Semen-ZnO

Pada hasil XRD didapatkan bentuk kristal ZnO yaitu hexagonal

wurtzite yang dibuktikan oleh bidangnya, dengan mengkonfirmasi sifat

kemurnian tinggi dari bubuk hasil sintesis, dan hasil struktur yang hampir

sama dengan penelitian yang dilakukan oleh (Sagadevan et al., 2017) yang

mana puncak ditemukan pada sudut 32,769°, 34,2976°, 36,0389°, 39,417°,

41,3164°, dan 43,1495° dengan nilai hkl (1 0 0), (0 0 2), (1 0 1), (1 0 3), (1

1 2), dan (2 0 1).

Ketajaman grafik spektrum XRD bertautan dengan kualitas

kristalinitasnya. Ketajaman puncak juga bertautan dengan lebar kurva atau

yang biasa disebut sebagai lebar penuh pada setengah maksimum FWHM

48
(full width half maximum). Nilai FWHM berkaitan dengan ukuran diameter

kristal, semakin besar FWHM maka ukuran diameter kristal yang didapat

akan semakin kecil (Ghina Afrilia, 2019), Diketahui bahwa berdasarkan

hasil perhitungan menggunakan formula debye-scherrer, ukuran kristalin

serbuk ZnO 13,82 nm.

49
E. Uji karakteristik Semen-ZnO instrumen SEM

(a) (b)
Gambar 21. Gambaran Semen-ZnO dengan instrumen SEM

Menunjukkan gambar SEM komposit semen-ZnO (5%). Dengan

perbesaran 1000x Gambar 21(a) menunjukkan sampel semen . Pada

Gambar 21(b), gambar menunjukkan dua jenis morfologi; satu sampel

semen putih pada gambar 21 (a), dan yang lainnya serupa dengan struktur

jarum atau batang, dengan jelas difokuskan oleh lingkaran pada gambar.

Struktur jarum/batang terbuat dari ZnO, yang peneliti gunakan sebagai

pengisi semen atau bahan. Struktur mikro Gambar 21 (b) mengungkapkan

bahwa jarum / batang ZnO tertanam padat di semen putih, dan pada

gambar mengungkapkan bahwa mikro/ struktur nano dari ZnO adalah

struktur tubular mikro khas/ nanotube memiliki bentuk heksagonal,

Kontras kecerahan antara tengah dan tepi menunjukkan struktur tabung

berongga, sesuai dengan hasil SEM yang mana dapat ditarik bahwa

ditemukannya penampakan material ZnO berbentuk heksagonal (Chen et

al., 2010).

50
 BAB V

PENUTUP

A. Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, maka dapat

disimpulkan bahwa:

1. Pengaruh penambahan ZnO pada Semen Portland dengan bantuan

sinar UV mengakibatkan kelangsungan hidup bakteri menurun

secara signifikan, namun pada tanpa bantuan sinar UV kelangsungan

hidup bakteri juga menurun namun tidak terlalu signifikan.

2. Hasil sintesis ZnO yang dikarakterisasi dengan XRD terbentuk

kristal hexagonal wurtzite dengan puncak yang terbentuk pada sudut

32,769°, 34,2976°, 36,0389°, 39,417°, 41,3164°, dan 43,1495°.

3. Diamati dari gambar SEM, Analisa XRD, menegaskan bahwa tidak

ada reaksi yang terjadi antara ZnO dan semen putih dalam komposit

semen-ZnO(%) dan karenanya komposit berhasil terbentuk. Tidak

ada pembentukan fase lain, penyerapan atau ikatan yang diamati

pada semen-ZnO(%)

51
 DAFTAR PUSTAKA

Abebe, B., Zereffa, E. A., Tadesse, A., & Murthy, H. C. A. (2020). A Review on
Enhancing the Antibacterial Activity of ZnO: Mechanisms and Microscopic
Investigation. Nanoscale Research Letters, 15(1).
https://doi.org/10.1186/s11671-020-03418-6

Akhtar, K., Khan, S. A., Khan, S. B., & Asiri, A. M. (2018). Scanning electron
microscopy: Principle and applications in nanomaterials characterization. In
Handbook of Materials Characterization. https://doi.org/10.1007/978-3-319-
92955-2_4

Alavi, M., & Nokhodchi, A. (2020). An overview on antimicrobial and wound

healing properties of ZnO nanobiofilms, hydrogels, and bionanocomposites
based on cellulose, chitosan, and alginate polymers. Carbohydrate Polymers,
227(July 2019), 115349. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2019.115349

Bùi, H. K. (2019). Volume Synthesis By Sol-Gel Method And Characterization Of

Zno Nanoparticles.

Chen, H., Wu, X., Gong, L., Ye, C., Qu, F., & Shen, G. (2010). Hydrothermally
grown ZnO micro/nanotube arrays and their properties. Nanoscale Research
Letters, 5(3), 570–575. https://doi.org/10.1007/s11671-009-9506-4

Critchley, I. A., Nicole Cotroneo, Pucci, M. J., & Rodrigo Mendes. (2019). The
burden of antimicrobial resistance among urinary tract isolates of Escherichia
coli in the United States in 2017. PLoS ONE, 14(12), 1–11.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0220265

Dadi, R., Azouani, R., Traore, M., Mielcarek, C., & Kanaev, A. (2019).
Antibacterial activity of ZnO and CuO nanoparticles against gram positive and
gram negative strains. Materials Science and Engineering C, 104(March),

52
 109968. https://doi.org/10.1016/j.msec.2019.109968

Daga, A. P., Koga, V. L., Soncini, J. G. M., De Matos, C. M., Perugini, M. R. E.,
Pelisson, M., Kobayashi, R. K. T., & Vespero, E. C. (2019). Escherichia coli
Bloodstream Infections in Patients at a University Hospital: Virulence factors
and clinical characteristics. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology,
9(JUN). https://doi.org/10.3389/fcimb.2019.00191

Eskani, I. N., Haerudin, A., Setiawan, J., Lestari, W., & Astuti, W. (2020).
Ketahanan Sifat Antibakteri Kain Batik Teraplikasi Nanopartikel ZnO. 14–15.

Fatmawati, R. Y., Wijaya, K., & Tahir, I. (2018). Material CuO/Bentonit Sebagai
Bahan Antibakteri Escherichia Coli Cuo / Bentonite Material As Antibacterial
Agent For Escherichia Coli. Berkala Ilmiah MIPA-UGM, 25(3), 216–223.
https://jurnal.ugm.ac.id/bimipa/article/view/37836

Ghina Afrilia, C. (2019). Studi proses sintesis serbuk nano ZnO beserta
karakterisasi. Jurnal Ilmu Dan Inovasi Fisika, 3(2), 105–113.
https://doi.org/10.24198/jiif.v3i2.23063

Haberecht, H. B., Nealon, N. J., Gilliland, J. R., Holder, A. V., Runyan, C., Oppel,
R. C., Ibrahim, H. M., Mueller, L., Schrupp, F., Vilchez, S., Antony, L., Scaria,
J., & Ryan, E. P. (2019). Antimicrobial-Resistant Escherichia coli from
Environmental Waters in Northern Colorado. Journal of Environmental and
Public Health, 2019. https://doi.org/10.1155/2019/3862949

Hanein, T., Glasser, F. P., & Bannerman, M. (2015). Thermodynamics of Portland

Cement Clinkering. 14th International Congress on the Chemistry of Cement,
October. http://www.iccc2015beijing.org/dct/page/1

Hayle, S. T. (2014). Synthesis and Characterization of Titanium Oxide

Nanomaterials Using Sol-Gel Method. American Journal of Nanoscience and
Nanotechnology, 2(1), 1. https://doi.org/10.11648/j.nano.20140201.11

Jang, J., Hur, H. G., Sadowsky, M. J., Byappanahalli, M. N., Yan, T., & Ishii, S.
(2017). Environmental Escherichia coli: ecology and public health

53
 implications—a review. Journal of Applied Microbiology, 123(3), 570–581.
https://doi.org/10.1111/jam.13468

Jayawardane, D. L. N. B., U.P.A.S, U., W.M.N.R., W., & C.K., P. (2012). Physical
and Chemical Properties of Fly Ash based Portland Pozzolana Cement. Civil
Engineering Research Exchange Symposium 2012, 8–11.

Kaper, J. B., Nataro, J. P., & Mobley, H. L. T. (2004). Pathogenic Escherichia coli.
Nature Reviews Microbiology, 2(2), 123–140.
https://doi.org/10.1038/nrmicro818

Kim, I., Viswanathan, K., Kasi, G., Thanakkasaranee, S., Sadeghi, K., & Seo, J.
(2020). ZnO Nanostructures in Active Antibacterial Food Packaging:
Preparation Methods, Antimicrobial Mechanisms, Safety Issues, Future
Prospects, and Challenges. Food Reviews International, 00(00), 1–29.
https://doi.org/10.1080/87559129.2020.1737709

Lallo da Silva, B., Caetano, B. L., Chiari-Andréo, B. G., Pietro, R. C. L. R., &
Chiavacci, L. A. (2019). Increased antibacterial activity of ZnO nanoparticles:
Influence of size and surface modification. Colloids and Surfaces B:
Biointerfaces, 177(September 2018), 440–447.
https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2019.02.013

Lee, K. M., Lai, C. W., Ngai, K. S., & Juan, J. C. (2016). Recent developments of
zinc oxide based photocatalyst in water treatment technology: A review. Water
Research, 88, 428–448. https://doi.org/10.1016/j.watres.2015.09.045

Liu, Y., He, L., Mustapha, A., Li, H., Hu, Z. Q., & Lin, M. (2009). Antibacterial
activities of zinc oxide nanoparticles against Escherichia coli O157:H7.
Journal of Applied Microbiology, 107(4), 1193–1201.
https://doi.org/10.1111/j.1365-2672.2009.04303.x

Ma, T. F., Chen, Y. P., Fang, F., Yan, P., Shen, Y., Kang, J., & Nie, Y. D. (2020).
Effects of ZnO nanoparticles on aerobic denitrifying bacteria Enterobacter
cloacae strain HNR. Science of the Total Environment, 725, 138284.
https://doi.org/10.1016/j.scitotenv.2020.138284
54
Menazea, A. A. (2020). Antibacterial activity of TiO2 doped ZnO composite
synthesized via laser ablation route for antimicrobial application. Journal of
Materials Research and Technology, x x.
https://doi.org/10.1016/j.jmrt.2020.05.103

Mohamad Sukri, S. N. A., Shameli, K., Mei-Theng Wong, M., Teow, S. Y., Chew,
J., & Ismail, N. A. (2019). Cytotoxicity and antibacterial activities of plant-
mediated synthesized zinc oxide (ZnO) nanoparticles using Punica granatum
(pomegranate) fruit peels extract. Journal of Molecular Structure, 1189, 57–
65. https://doi.org/10.1016/j.molstruc.2019.04.026

Munasir, M., Triwikantoro, T., Zainuri, M., & Darminto, D. (2012). UJI XRD DAN
XRF PADA BAHAN MENERAL (BATUAN DAN PASIR) SEBAGAI
SUMBER MATERIAL CERDAS (CaCO3 DAN SiO2). Jurnal Penelitian
Fisika Dan Aplikasinya (JPFA), 2(1), 20.
https://doi.org/10.26740/jpfa.v2n1.p20-29

Munawar, T., Iqbal, F., Yasmeen, S., Mahmood, K., & Hussain, A. (2020). Multi
metal oxide NiO-CdO-ZnO nanocomposite–synthesis, structural, optical,
electrical properties and enhanced sunlight driven photocatalytic activity.
Ceramics International, 46(2), 2421–2437.
https://doi.org/10.1016/j.ceramint.2019.09.236

Mutaqin, F. S., Fitrianingsih, S. P., & Choesrina, R. (n.d.). Uji Aktivitas Antibakteri
Ekstrak Etanol Buah Terung Belanda ( Solanum Betaceum Cav .) Terhadap
Escherichia Coli dan Bacillus Subtillis Pendahuluan yang memiliki
keanekaragaman hayati belanda yang dilakukan oleh Reuda et al vesicatoria
CECT 792 , Pseudomo.

Nurfatimah, S. S. (2015). Produksi Semen. 88.

http://file.upi.edu/Direktori/FPMIPA/JUR._PEND._KIMIA/1968021619940
22-SOJA_SITI_FATIMAH/Kimia_industri/PRODUKSI_SEMEN.pdf

Omoniyi, K., & Okunola, O. (2016). Comparative Studies of Physico-chemical

Properties of Some Selected Cements in Nigeria. Nigerian Journal of

55
 Technological Development, 12(2), 54. https://doi.org/10.4314/njtd.v12i2.4

Pasquet, J., Chevalier, Y., Pelletier, J., Couval, E., Bouvier, D., & Bolzinger, M. A.
(2014). The contribution of zinc ions to the antimicrobial activity of zinc oxide.
Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 457(1),
263–274. https://doi.org/10.1016/j.colsurfa.2014.05.057

Petre, I., Moanţǎ, A., & Muntean, M. (2012). Ordinary Portland cement with
advanced fineness used for grout mixes. UPB Scientific Bulletin, Series B:
Chemistry and Materials Science, 74(4), 103–112.

Pradeev raj, K., Sadaiyandi, K., Kennedy, A., Sagadevan, S., Chowdhury, Z. Z.,
Johan, M. R. Bin, Aziz, F. A., Rafique, R. F., Thamiz Selvi, R., & Rathina
bala, R. (2018). Influence of Mg Doping on ZnO Nanoparticles for Enhanced
Photocatalytic Evaluation and Antibacterial Analysis. Nanoscale Research
Letters, 13. https://doi.org/10.1186/s11671-018-2643-x

Purnawan, I., & Prabowo, A. (2018). Pengaruh Penambahan Limestone terhadap

Kuat Tekan Semen Portland Komposit. Jurnal Rekayasa Proses, 11(2), 86.
https://doi.org/10.22146/jrekpros.31136

Qi, K., Xing, X., Zada, A., Li, M., Wang, Q., Liu, S. yuan, Lin, H., & Wang, G.
(2020). Transition metal doped ZnO nanoparticles with enhanced
photocatalytic and antibacterial performances: Experimental and DFT studies.
Ceramics International, 46(2), 1494–1502.
https://doi.org/10.1016/j.ceramint.2019.09.116

Rompis, J., Aritonang, H., & Pontoh, J. (2020). SINTESIS NANOKOMPOSIT

ZnO-MgO DAN ANALISIS EFEKTIVITAS SEBAGAI ANTIBAKTERI.
Chemistry Progress, 13(1), 56–62.
https://doi.org/10.35799/cp.13.1.2020.30197

Sagadevan, S., Pal, K., Chowdhury, Z. Z., & Hoque, M. E. (2017). Structural,
dielectric and optical investigation of chemically synthesized Ag-doped ZnO
nanoparticles composites. Journal of Sol-Gel Science and Technology, 83(2),
394–404. https://doi.org/10.1007/s10971-017-4418-8
56
Saravanakkumar, D., Sivaranjani, S., Kaviyarasu, K., Ayeshamariam, A.,
Ravikumar, B., Pandiarajan, S., Veeralakshmi, C., Jayachandran, M., &
Maaza, M. (2018). Synthesis and characterization of ZnO-CuO
nanocomposites powder by modified perfume spray pyrolysis method and its
antimicrobial investigation. Journal of Semiconductors, 39(3).
https://doi.org/10.1088/1674-4926/39/3/033001

Shafeek, A. M., Khedr, M. H., El-Dek, S. I., & Shehata, N. (2020). Influence of
ZnO nanoparticle ratio and size on mechanical properties and whiteness of
White Portland Cement. Applied Nanoscience (Switzerland), 10(9), 3603–
3615. https://doi.org/10.1007/s13204-020-01444-5

Sikora, P., Augustyniak, A., Cendrowski, K., Nawrotek, P., & Mijowska, E. (2018).
Antimicrobial activity of Al2O3, CuO, Fe3O4, and ZnO nanoparticles in scope
of their further application in cement-based building materials. Nanomaterials,
8(4), 1–15. https://doi.org/10.3390/nano8040212

Singh, V. P., Sandeep, K., Kushwaha, H. S., Powar, S., & Vaish, R. (2018).
Photocatalytic, hydrophobic and antimicrobial characteristics of ZnO nano
needle embedded cement composites. Construction and Building Materials,
158, 285–294. https://doi.org/10.1016/j.conbuildmat.2017.10.035

Sui, S., Wilson, W., Georget, F., Maraghechi, H., Kazemi-Kamyab, H., Sun, W., &
Scrivener, K. (2019). Quantification methods for chloride binding in Portland
cement and limestone systems. Cement and Concrete Research, 125(March),
105864. https://doi.org/10.1016/j.cemconres.2019.105864

Thomas, P., Sekhar, A. C., & Mujawar, M. M. (2012). Nonrecovery of varying

proportions of viable bacteria during spread plating governed by the extent of
spreader usage and proposal for an alternate spotting-spreading approach to
maximize the CFU. Journal of Applied Microbiology, 113(2), 339–350.
https://doi.org/10.1111/j.1365-2672.2012.05327.x

Zhu, J., Yang, K., Chen, Y., Fan, G., Zhang, L., Guo, B., Guan, X., & Zhao, R.
(2021). Revealing the substitution preference of zinc in ordinary Portland

57
 cement clinker phases: A study from experiments and DFT calculations.
Journal of Hazardous Materials, 409(June), 124504.
https://doi.org/10.1016/j.jhazmat.2020.124504

LAMPIRAN

Lampiran 1. Skema Sintesis ZnO nps

Menyiapkan Larutan NaOH 4M

1. Menimbang 4 gram padatan NaOH

2. Menambahkan 25 ml aquades

Menyiapkan [Zn(NO3)26H2O] 0,2 M

1. Menimbang 7 gram
[Zn(NO3)26H2O]
2. Menambahkan 117 ml aquades

Meneteskan 4 M NaOH lalu dilakukan

pengukuran pH sampai 12

Melakukan penyaringan terhadap

endapan yang terbentuk

Endapan terbentuk dicuci dengan air

suling dan beberapa tetes aseton

Endapan terbentuk dikeringkan dengan

oven selama 110°C selama 4 jam

58
Lampiran 2. Proses Mixing Semen-ZnO

Menyiapkan semen sebanyak 1 gram

sebanyak 4 buah

Menyiapkan variasi ZnO sebanyak 0%,

1%, 3%, dan 5% dengan satuan w/w

Memasukkan semua variasi Semen-ZnO

ke dalam ultrasonik selama 2 jam

Dimasukkan ke dalam inkubator dengan

bantuan sinar UV 30 watt

Lampiran 3. Pembuatan Media NA

Menyiapkan nutrient agar

1. Menimbang 2 gram Nutrient Agar

2. Menambahkan 100 ml aquades

Menyiapkan magnetic stirrer dan spinbar

1. Memasukkan spinbar ke dalam

Erlenmeyer
59 2. Suhu dijaga 80°C selama 30
menit
 Menuang media NA dalam petri dish dan
tunggu hingga mengeras

Lampiran 4. Proses Kontak Bakteri dengan Sampel Semen-ZnO

Melakukan autoklaf pada semua alat pada

suhu 121°C selama 30 menit

Proses kontak Semen-ZnO dengan bakteri

1. Sampel Semen-ZnO digerus

sebanyak 0,2 gram
2. Memasukkan sampel ke dalam
tabung vortex
3. Memasukkan 1 ml sampel
bakteri Escherichia coli

Melakukan vortex selama beberapa menit

untuk mendapatkan kontak langsung
yang efektif

Melakukan sampai 4 kali pengenceran

pada sampel yang telah divortex dengan
perbandingan 1:9

Lampiran 5. Proses Pengaplikasian pada Bakteri

Sampel bakteri yang telah diencerkan 10 -4

diambil sebanyak 1 ml
60
Menyiapkan cawan petri yang telah berisi
media NA

Menuang 1 ml sampel 10-4 ke cawan petri

dengan metode spread plate

Cawan petri diinkubasi

selama 48 jam pada suhu
27°C

Menghitung pertumbuhan koloni

61
 Lampiran 6. Desain Penelitian

Larutan 0,2 M [Zn(NO3)26H2O]

menambahkan

Larutan encer NaOH 4M tetes

demi tetes sampai pH 12

menyaring

Endapan terbentuk dicuci

beberapa dengan air suling
dan beberapa tetes aseton

Dikeringkan dengan oven

bersuhu 180°C selama 24 jam
dalam oven

Mempersiapkan 4 cawan petri

dengan variasi 0, 1, 3, dan 5%
Mencampur ZnO dan semen Portland dengan
variasi yang telah ditentukan dengan berat
total semen 1 gram serta variasi ZnO, dengan
proses sonikasi

Dilakukan
Pembuatan Media Nutrient karakterisasi dengan
Agar XRD dan SEM

62
Pengujian pada Bakteri Melakukan sterilisasi alat dan bahan dengan
autoclave, melakukan vortex pada sampel dan
pengenceran bertingkat, dan hasil diinkubasi
selama 2x24 jam, selanjutnya hasil dievaluasi
dengan metode TPC.
Lampiran 7. Perhitungan

1. Pembuatan NaOH 4 M
𝑥 𝑔𝑟𝑎𝑚 1000
4𝑀= 𝑥
40𝑔𝑟𝑎𝑚 25𝑚𝑙
𝑚𝑜𝑙
𝑥 𝑔𝑟𝑎𝑚 1000
160 = 𝑥
40𝑔𝑟𝑎𝑚 25𝑚𝑙
𝑚𝑟

𝑥 = 4 𝑔𝑟𝑎𝑚

2. Pembuatan [Zn(NO3)26H2O] 0,2 M

7 𝑔𝑟𝑎𝑚 1000
0,2 𝑀 = 𝑥
297𝑔𝑟𝑎𝑚 𝑥 𝑚𝑙
𝑚𝑜𝑙
7000
59,4 𝑥 =
𝑥

𝑥 = 2,97 𝑔𝑟𝑎𝑚

3. % Nanopartikel ZnO terhadap Semen

a. Nanopartikel 1%

𝑤 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑍𝑛𝑂
%( ) = 𝑥 100%
𝑤 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑠𝑒𝑚𝑒𝑛

𝑥 𝑔𝑟𝑎𝑚
1= 𝑥 100%
1 𝑔𝑟𝑎𝑚

𝑥 = 0,01 𝑔𝑟𝑎𝑚

b. Nanopartikel 3%

𝑤 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑍𝑛𝑂
%( ) = 𝑥 100%
𝑤 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑠𝑒𝑚𝑒𝑛

𝑥 𝑔𝑟𝑎𝑚
3= 𝑥 100%
1 𝑔𝑟𝑎𝑚

𝑥 = 0,03 𝑔𝑟𝑎𝑚

63
 c. Nanopartikel 5%

𝑤 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑍𝑛𝑂
%( ) = 𝑥 100%
𝑤 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑠𝑒𝑚𝑒𝑛

𝑥 𝑔𝑟𝑎𝑚
5= 𝑥 100%
1 𝑔𝑟𝑎𝑚

𝑥 = 0,05 𝑔𝑟𝑎𝑚

4. Perhitungan koloni under uv light

a. Variasi 0%
𝐶𝐹𝑈 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( 𝑚𝑙 ) = 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙

𝐶𝐹𝑈 285
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=
𝑚𝑙 10−4 𝑥 1 𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈 𝑐𝑓𝑢
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 285 𝑥 104
𝑚𝑙 𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈 𝑐𝑓𝑢
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 2,85 𝑥 106
𝑚𝑙 𝑚𝑙

b. Variasi 1%
𝐶𝐹𝑈 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=
𝑚𝑙 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙

𝐶𝐹𝑈 203
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )= −4
𝑚𝑙 10 𝑥 1 𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 203 𝑥 104 𝑐𝑓𝑢/𝑚𝑙
𝑚𝑙

𝐶𝐹𝑈 𝑐𝑓𝑢
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 2,03 𝑥 106
𝑚𝑙 𝑚𝑙

c. Variasi 3%
𝐶𝐹𝑈 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=
𝑚𝑙 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙

𝐶𝐹𝑈 109
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )= −4
𝑚𝑙 10 𝑥 1 𝑚𝑙

64
 𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 109 𝑥 104 𝑐𝑓𝑢/𝑚𝑙
𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 1,09 𝑥 106 𝑐𝑓𝑢/𝑚𝑙
𝑚𝑙

d. Variasi 5%
𝐶𝐹𝑈 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=
𝑚𝑙 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝐶𝐹𝑈 48
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=
𝑚𝑙 10−4 𝑥 1 𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 48 𝑥 104 𝑐𝑓𝑢/𝑚𝑙
𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 0,48 𝑥 106 𝑐𝑓𝑢/𝑚𝑙
𝑚𝑙

5. Perhitungan koloni under dark

a. Variasi 0%
𝐶𝐹𝑈 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=
𝑚𝑙 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝐶𝐹𝑈 𝑢𝑛𝑑𝑒𝑓𝑖𝑛𝑒𝑑
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=
𝑚𝑙 10−4 𝑥 1 𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=−
𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )= −
𝑚𝑙
b. Variasi 1%
𝐶𝐹𝑈 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=
𝑚𝑙 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝐶𝐹𝑈 283
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )= −4
𝑚𝑙 10 𝑥 1 𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 283 𝑥 104 𝑐𝑓𝑢/𝑚𝑙
𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 2,88 𝑥 106
𝑚𝑙
c. Variasi 3%
𝐶𝐹𝑈 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=
𝑚𝑙 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝐶𝐹𝑈 239
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )= −4
𝑚𝑙 10 𝑥 1 𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 239 𝑥 104 𝑐𝑓𝑢/𝑚𝑙
𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 2,39 𝑥 106 𝑐𝑓𝑢/𝑚𝑙
𝑚𝑙

65
d. Variasi 5%

𝐶𝐹𝑈 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖

𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( )=
𝑚𝑙 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝐶𝐹𝑈 188
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = −4
𝑚𝑙 10 𝑥 1 𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 188 𝑥 104 𝑐𝑓𝑢/𝑚𝑙
𝑚𝑙
𝐶𝐹𝑈
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 ( ) = 1,88 𝑥 106 𝑐𝑓𝑢/𝑚𝑙
𝑚𝑙

66
Lampiran 8. Tabel Data Kristal XRD

Theta FWHIM Ukuran

Jenis Sampel 2𝜽 (°) Kristalin

(°) (nm)

32,769 0,307 26,95803

34,2976 0,307 27,08113

Bubuk ZnO 36,0389 0,4093 20,41056

murni 39,417 0,307 27,48736

41,3164 0,614 13,82768

43,1495 0,307 27,82674

23,4291 0,307 26,40796

26,6011 0,307 26,58687

Semen Portland 29,7991 0,307 26,7507

Ca(CO3) dan 34,1151 0,307 21,07121

Ca3SiO5 44,0731 0,307 28,20547

49,4291 0.307 28,2739

67
Lampiran 9. Tabel Data Koloni ditemui

a. Hasil Evaluasi dengan bantuan Sinar UV

No. Variasi Jenis uji Koloni Acuan Pengenceran

Metode

1. 0% TPC 285 APHA, 10-4

AWWA,
>250 WEF SM
9215

2. 1% TPC 203 APHA, 10-4

AWWA,
30 - 250 WEF SM
9215

3. 3% TPC 109 APHA, 10-4

AWWA,
30 – 250 WEF SM
9215

4. 5% TPC 48 APHA, 10-4

AWWA,
30 - 250 WEF SM
9215

68
 b. Hasil Evaluasi tanpa bantuan Sinar UV

No. Variasi Jenis uji Koloni Acuan Pengenceran

Metode

1. 0% TPC - APHA, 10-4

AWWA,
>250 WEF SM
9215

2. 1% TPC 283 APHA, 10-4

AWWA,
250 WEF SM
9215

3. 3% TPC 239 APHA, 10-4

AWWA,
30 – 250 WEF SM
9215

APHA,
AWWA,
4. 5% TPC 188 WEF SM 10-4

30-300 9215

69
Lampiran 10. Difaktogram XRD sampel Semen-ZnO

a. Difaktorgram sampel Semen-ZnO

b. Stick Pattern sampel ZnO

70
Lampiran 11. Gambar SEM sampel Semen-ZnO

71
Lampiran 12. Dokumentasi Penelitian

a. Proses sintesis ZnO

b. Proses Mixing Semen-ZnO

72
c. Proses Pembuatan Media NA dan Pengenceran Bertingkat

d. Sampel Semen-ZnO

73
e. Sampel Hasil Evaluasi Bakteri

74
Lampiran 13. Anggara Biaya

ALAT/BAHAN BIAYA

Seng Nitrat Rp 372.000,00

Larutan NaOH Rp 50.000,00

Aquades Rp 100.000,00

Semen Portland Rp 60.000,00

Eschericia Coli Rp 350.000,00

Karakterisasi XRD 2 x Rp 285.000,00

Draft Rp 200.000,00

Kertas Filter Rp 30.000,00

SEM Rp 500.000

Publikasi Rp. 1.000.000,00

Total Rp 3.232.000,00

75