Penuntun praktikum pembuatan sediaan apus bajah

Topik Pembuatan sediaan apus bajah

Waktu 2 jam
Jenis Hands on / wet lab
;

Tujuan;
Pembuatan sediaan sitologi biopsi jaraum halus
Prinsip;
Pengambilan sel dengan punksi, aspirasi menggunakan jarum ukuran kecil dari 20G,
serta apusan pada kaca object.

Alat dan Bahan;

Kaca object 2 buah
Spuit 3 cc, jarum 23-22G
Larutan fiksasi
- Methanol ; fiksasi kering
- Ethanol 06% ; fiksasi basah
Kapas steril
Ethanol 70%; sterilisasi
Plaster (bila dilakukan pada hewan coba hidup atau manusia)
Jaringan hewan coba;( hati ayam, atau ayam dengan kulit)
Staining jar 2 buah
Pipet tetes
Pinset anatomis
APD; masker, sarung tangan lab. apron

Persiapan reagen;
Siapkan reagen fiksasi dan alat.

Prosedur;
o Gunakan sarung tangan,
o Buka spuit, kencangkan posisi needle pada syringe
o Keluarkan udara dari syringe
o Sterilisasi permukaan jaringan hewan coba dengan kapas alkohol (prosedur ini
wajib bila dilakukan pada hewan coba hidup atau manusia)
o Fiksasi daerah yang akan di bajah dengan menekan area yang akan dibiopsi
diantara dua jari supaya organ tidak bergerak saat dilakukan prosedur BAJAH
o Tusukkan jarum terpasang syringe menggunakan satu tangan (tangan dominan)
dan jari tangan non-dominan memfiksasi organ target
o Tusukkan jarum dan tarik sambil diaspirasi, jaga agar jarum tidak keluar dari kulit,
dan lakukan tusukan berulang beberapa kali (3-5 kali) sampai yakin didapat sel
teraspirasi. Jaga tekanan syringe negatif agar dapat mengaspirasi sel
o Tarik jarum perlahan dari jaringan, jaga agar tidak memberikan tekanan negatif,
karena akan meyebabkan udara tertarik kedalam syringe saat jarum lepas dari kulit.
o Lepaskan needle dari syringe
o Tarik udara kedalam syringe
o Pasang kembali needle dan Kencangkan posisi syringe, pastikan needle tepasang
ketat
o Bila prosedur dilakukan pada manusia atau hewan hidup, tutup bekas punksi
dengan kapas steril, berikan tekanan perlahan, cek bila ada perdarahan dan plester
bila perlu
o Semprotkan dengan tekanan sedang isi syringe ke kaca object
o Ulangi proses mengisi udara dan semprotan ke kaca sampai yakin sel yang
diaspirasi teraplikasikan di kaca
o Tempelkan kaca objek geser diatas kaca objek sampel, gesek dengan gesekan
perlahan tanpa tekanan untuk meratakan sel dikaca, pada akhir prosedur akan
dihasikan dua slide pada dua kaca object
o Fiksasi
 Fiksasi basah;
 sediaan segera direndam dalam ethanol 96%, suhu ruang 15-30 menit
 Keringkan di suhu ruang
 Fiksasi kering
 Keringkan sediaan setelah dibuat apusan
 Teteskan methanol diatas sediaan, biarkan menggenang selama 5 menit dan
keringkan di suhu ruang
o Sediaan apus BAJAh siap untuk diwarnai
 Fiksasi basah; lanjut pewarnaan HE atau Papanicoulou
 Fiksasi kering;  lanjut pewarnaan giemsa

Teknik pengerjaan

No Tahapan Prinsip keterangan

1 Persiapka Pasang APD, buka
n alat syringe kencangkan
needle
2 Sterilisasi dengan Sterilisasi dengan
Sterilisasi ethanol 70% olesan kapas ethanol
area untuk membunuh 70%
biopsi patogen bila ada
3 Fiksasi Fiksasi organ menekan area yang
posisi target diantara akan dibiopsi diantara
daerah dua jari dan dua jari supaya organ
yang tekanan ringan tidak bergerak saat
akan di dilakukan prosedur
bajah BAJAH
5 Punksi Tusukan dan Tusukkan jarum
 dan aspirasi saat terpasang syringe
aspirasi bersamaan, akan dan tarik sambil
menarik sel yang diaspirasi, beberapa
terlepas saat kali (3-5 kali) sampai
pungksi kedalam didapat sel dalam
syringe syringe
6 Transfer Semprotan akan Tarik jarum jaringan,
sampel memindahkan sel Lepaskan needle dari
ke kaca dari syring ke syringe, isi udara
object kaca kedalam syringe, dan
semprotkan isi syringe
ke kaca
7 Apusan Menggeser Tempelkan kaca objek
sampel diantara penggeser diatas kaca
dua kaca object sampel, geser
perlahan, untuk
meratakan dan
menipiskan sampel
diatas kaca
8 Fiksasi Fiksasi basah sediaan segera
dengan ethanol direndam dalam
96% ethanol 96%, suhu
ruang 15-30 menit,
keringkan
Fiksasi kering Keringkan sediaan
dengan methanol setelah dibuat apusan
Teteskan methanol
diatas sediaan,
biarkan menggenang
selama 5 menit dan
keringkan di suhu
ruang