9221 B.

Standar Teknik Fermentasi Total Koliform

1. Sampel sekumpulan media, lakukan pengujian [bagian
9020B.5f2)].
Kumpulkan sampel sesuai petunjuk di Jika laboratorium beralih ke Teknik
bagian 9060A, menggunakan wadah sampel yang fermentasi multi-tabung, analis idealnya pertama
ditentukan dalam Bagian 9030B.19. Ikuti harus melakukan tes parallel dengan metode
pedoman QC untuk botol sampel yang dijelaskan sebelumnya untuk menunjukkan penerapan dan
pada Bagian 9020b.5d. Pastikan bahwa sampel komparabilitas. Hasil dari banyak studi kinerja
memenuhi kriteria penerimaan laboratorium saat colifrom tersedia dalam literatur, dan tingkat
diterima. hasil false-positive dan hasil negative dapat
2. Kontrol Kualitas berbeda diantara berbagai media. Pengguna harus
hati-hati memilih media dan prosedur yang paling
Semua fase Teknik fermentasi (9221B- sesuai dengan kebutuhan mereka.
G) membutuhkan kepatuhan terhadap pedoman
jaminan kualitas/control kualitas (QA/QC) yang 3. Fase Presumptive/Praduga
disajikan dalam bagian 9020, termasuk, namun Gunakan lauryl tryptose baik di bagian
tidak terbatas pada, analitis QC (Bagian dugaan dari tes multi-tabung, mengikuti pedoman
9020B.9), instrumentasi/peralatan (Bagian QC yang dikutip dalam 9221B.2.
9020B.4 dan 9030B), dan persediaan (Bagian a. Reagen dan medium kultur:
9020B.5). Merujuk ke tabel 9020:I untuk Lauryl tryptose broth (LTB):
prosedur QC utama. Juga, perhatikan bagian yang Tryptose ................ .................................................... 20.0 g
berkaitan dengan ketepatan penyimpanan dan Lactose .................. ...................................................... 5.0 g
persiapan kultur media dehidrasi (kering) dan Dipotassium hydrogen phosphate (K2HPO4) ............ 2.75 g
Potassium dihydrogen phosphate (KH2PO4) ............. 2.75 g
kualitas air (Bagian 9050 dan 9020B.5f).
Sodium chloride (NaCl) ............................................... 5.0 g
Gunakan media kering komersial bila Sodium lauryl sulfate ................................................... 0.1 g
memungkinkan, dan pastikan bahwa Reagent-grade water........................................................ 1 L
formulasinya sesuai dengan yang ditentukan
karena formulasi komersial dapat bervariasi. TABEL 9221:I. PERSIAPAN UNTUK LAURYL
Media fermentasi yang disiapkan dapat disimpan TRYPTOSE BROTH
Jumlah Volume Lauryl
dalam tabung atau botol yang tertutup rapat media di media + tryptose
hingga 3 bulan kedepan dalam ruangan gelap, Inoculum tabung Inoculum broth
jika suhu antara 1 dan 30°C dan penguapan mL mL mL kering yang
dibutuhkan
kurang dari 10% dari volume asli. Jika tabung g/L
telah didinginkan setelah sterilisasi, mereka harus 1 10 atau 11 atau 35.6
diinkubasi semalam pada suhu kamar (20 °C) lebih lebih
sebelum digunakan dan yang menunjukkan 10 10 20 71.2
10 20 30 53.4
pertumbuhan atau gelembung harus dibuang 20 10 30 106.8
untuk menghindari hasil false-positive (positif 100 50 150 106.8
palsu). Untuk menunjukkan kinerja menengah 100 35 135 137.1
100 20 120 213.6
yang dapat diterima, kultur control positif dan
negative harus diuji terlebih dahulu dan
sebagaimana ditentukan seperti yang lainnya
Tambahkan bahan kering ke air, campur
(lihat tabel 9020:VI). Sterilitas, volume per
dengan saksama, dan panaskan agar menjadi
tabung, dan pH juga harus diverifikasi dan
larut. Sebelum sterilisasi, keluarkan cukup media
dicatat. Untuk menunjukkan perbandingan antara
ke dalam tabung fermentasi yang berisi botol
terbalik (juga dikenal sebagai tabung Durham)