Dasar-dasar&Prinsip Uji Mikrobiologi (Compatibility Mode)

PRINSIP DAN
DASAR – DASAR
PENGUJIAN
MIKROBIOLOGI
1
M-BRIO Training Proprietary – dilarang menggandakan dalam
bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo
Pendahuluan
2
1
Sejarah Mikrobiologi
1. Penemuan jasad renik dan penemu
mikroskop oleh Antony van Leeuwenhoek
(1632-1723)
2. Teori abiogenesis oleh John Needham
(1713-1781)
3. Teori biogenesis oleh Lazaro Spallanzani
(1729-1799), John Tyndall (1870), Louis
Pasteur (1822-1895)
4. Penemuan proses fermentasi oleh Louis
Pasteur (1822-1895)
3
5. Teknik isolasi bakteri pada kasus penyakit

antraks oleh Robert Koch (1843-1910)
6. Koch dan rekan-rekannya mengembangakan
beberapa prosedur laboratorium seperti
mewarnai bakteri, membiakkan bakteri,
penggunaan media
4
2
Mikrobiologi
 Micros = kecil (renik); Bios = hidup; logos
= ilmu.
 Mikrobiologi : ilmu tentang perikehidupan
organisme hidup yang sangat kecil yang
hanya dapat dilihat menggunakan
mikroskop.
Mikroorganisme :
Bakteri, Protozoa, virus, algae,
cendawan
5
Morfologi sel bakteri
- Umumnya bakteri berukuran 0,5-1,0 x 2,0-5,0

μm.
- Bentuk bakteri : bola (kokus), batang
(basilus), spiral (vibrio).
- Penataan bakteri : berpasangan, gerombol,
rantai, atau filamen.
6
3
Morfologi Khamir & Fungi
 Ukuran khamir : lebar berkisar antara 1 –
5 μm, panjang 5 – 30 μm.
 Bentuk khamir: bulat, elips, tidak
dilengkapi flagelum.
 Khamir bersifat fakultatif
 Kapang terdiri dari 2 bagian, yaitu
miselium (kumpulan beberapa filamen,
disebut hifa) dan spora.
 Kapang bersifat fakultatif
7
Medium pertumbuhan
8
4
MEDIA BIAKAN
ISO 7218:2007/Amd.1:2013
Formulasi dari substitusi dalam bentuk cair,semi

padat atau padat yang mengandung bahan alami
dan/atau bahan sistetis yang ditujukan untuk
mendukung multiplikasi (dengan atau tanpa
menghambat mikroba tertentu), identifikasi atau
menjaga kemampuan hidup mikroba.
9
Syarat-syarat media :
1. Mengandung semua nutrisi yang digunakan oleh
mikroba.
2. Mempunyai tekanan osmosis.
3. Mempunyai pH yang sesuai dengan kebutuhan
mikroba.
4. Tidak mengandung zat yang dapat menghambat
pertumbuhan mikroba.
5. Harus dalam keadaan steril sebelum digunakan.
10
5
Jenis-jenis media
ISO 7218:2007/Amd.1:2013
1. Berdasarkan fisiknya :
a. Media cair
b. Media padat
c. Media semi padat
11
1.Media Cair
Bentuk cair, tidak mengandung bahan
pemadat
Menumbuhkan/ membiakkan, menyimpan
kultur, uji kemampuan fermentasi,
pengayaan, dan pengujian lain.
Nutrient broth, Brain Heart Broth, TS
Broth, Lactose broth, SC Broth, LE Broth,
dll.
12
6
2. Media Padat
1,5 - 2 % Agar
Menumbuhkan mikroba, menyimpan kultur
untuk jangka waktu tidak terlalu lama,
mengisolasi dan menghitung mikroba.
Plate Count Agar, Potato Dextrose Agar, Violet
Red Bile Agar, Nutrient Agar, dll.
Tidak larut sempurna dalam air
Pencairan & Pemadatan terus menerus
menurunkan kekuatan agar
13
Bahan Pemadat
Agar
 Rumput laut
- Galaktan : polimer dari molekul galaktosa
(tidak dapat dipecah oleh MO)
 Tidak digunakan sbg bahan makanan MO
 Tidak berpengaruh thd karakteristik MO
 Mix dengan medium broth sebelum sterilisasi
 Mencair setelah pemanasan 90-100 0C
 Memadat 40 0C
 Digunakan pada suhu 45 0C
Jika lebih mikroba mati
14
7
Bahan Pemadat
Gelatin
- Polimer asam amino dari kolagen
- 12-15 %
- Jarang digunakan
- Mencair pada T di atas suhu ruang tidak
dapat diinkubasi pada T tinggi
- Dapat dihidrolisis oleh sebagian bakteri
15
3. Media Semi Padat

0,5 % agar
Menyimpan kultur mikroba
Pertumbuhan MO menyebar ke seluruh media
tapi tidak mengalami pencampuran sempurna.
Mencegah/menekan difusi oksigen kondisi
anaerob atau sedikit oksigen
Thioglycolate medium
16
8
Jenis-jenis media
ISO 7218:2007/Amd.1:2013
2. Berdasarkan komposisi :
a. Chemically defined medium : hanya terdiri dari
senyawa kimia yang sudah diketahui struktur
molekul dan tingkat kemurniannya.
a. Chemically undefined / partially undefined

medium : terdiri dari seluruh atau sebagian dari
bahan alami diproses atau sebaliknya,
komposisi kimianya tidak ditetapkan secara
lengkap.
17
c. Media kultur chomogenic & Media kultur

fluorogenic : medium kultur yang mengandung
satu atau lebih kromogenik/substrat fluorogenik.
Media kultur Chromogenic mempermudah
identifikasi bakteri atau jamur dengan
pembentukan karakteristik warna dan morfologi
(kultur media pertumbuhan yang khas).
Media fluorogenik membutuhkan visualisasi
menggunakan lampu UV. Produk reaksi biokomia
hasil dari aktivitas enzimatik organisme tertentu
yang sangat tergantung pada kondisi tertentu
(misalnya nilai suhu, pH, konsentrasi substrat).
18
9
ISO 7218:2007/Amd.1:2013
3. Berdasarkan penggunaannya :
a. Media transportasi : untuk menjaga&memelihara
viabilitas mikroba tanpa menyebabkan terjadinya
multipikasi nyata dalam periode waktu antara
pengumpulan&pengujian sampel di laboratorium,
contohnya medium transport Stuart atau Amies.
b. Media preservasi : memelihara viabilitas mikroba
melewati periode yang diperpanjang, untuk
mencegah mikroba dari pengaruh yang merugikan
yang mugkin terjadi selama penyimpanan dalam
waktu yang lama&memungkinkan terjadi
pemulihan setelah periode ini, contohnya Dorset
egg medium,M-BRIO
nutrient agar slopes.
Training Proprietary – dilarang menggandakan dalam
19
c. Media pengencer/suspensi : untuk memisahkan

mikroorganisme dari sampel padat menjadi fase
cair tanpa multipikasi atau hambatan selama masa
kontak, contohnya peptone.
d. Media resusitasi : memulihkan mikroba yang

tertekan dan rusak tanpa memacu multipikasi,
contohnya buffered peptone water.
e. Media pengayaan (enrichment) : media cair untuk

multipikasi, contohnya Tryptone soya broth

bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 20
10
e.1 Media pengaya seletif : untuk multipikasi mikroba
spesifik yang dapat menghambat sebagian atau
seluruh pertumbuhan mikroba lain, contohnya
Rappaport-Vasiliadis soya medium.
e.2 Media pengaya non-selektif : untuk pertumbuha

berbagai macam mikroba, contohnya Nutrient broth.
f. Media isolasi : media padat atau semi padat untuk

pertumbuhan mikroba, contohnya Plate count agar
21
f.1 Media isolasi selektif : untuk pertumbuhan

mikroorganisme target khusus, sementara
menghambat seluruhnya atau sebagian
mikroorganisme yang lain, contohnya XLD.
f.2 Media isolasi non-selektif : media isolasi yang

tidak menghambat mikroorganisme tertentu,
contohnya nutrient agar.
f.3 media slektif kromogenic/fluorogenik :

mengandung senyawa selektif seluruhnya atau
sebagian dengan tepat mendeteksi
mikroorganisme, contohnya EC MUG medium.
22
11
g. Media differensial/pembeda : media yang dapat
menguji satu atau lebih ciri fisiologis/biokimia
mikroba untuk diidentifikasi, contohnya MacConkey
agar.
h. Media identifikasi : untuk menghasilkan reaksi

identifikasi khusus yang biasanya tidak
memerlukan uji konfirmasi lanjut, contohnya TBX
agar.
i. Media enumerasi : media biakan selektif atau non

selektif untuk perhitungan mikroba, contohnya
PCA, BPA M-BRIO Training Proprietary – dilarang menggandakan dalam 23
j. Media konfirmasi : media yang memberikan

kontribusi untuk identifikasi dan karakterisasi
mikroorganisme menyusul resusitasi awal dan /
atau pengayaan dan / atau langkah isolasi,
contohnya Kligler iron agar
k. Media yang mengandung netralisasi : media

transportasi, media pengenceran atau medium
kultur yang mengandung menetralisir bahan untuk
menonaktifkan deterjen / disinfektan atau agen
biosidal lainnya
24
12
l. Media multifungsi : media yang berfungsi untuk
beberapa kategori, contohnya blood agar (media
resusitasi, media isolasi, media differensial.
m. Media acuan : media yang biasanya non-selektif,

untuk evaluasi komparatif kinerja medium dan
digunakan sebagai kontrol, contohnya Tryptone
Soya Agar (TSA).
25
ISO 7218:2007/Amd.1:2013
4. Media berdasarkan metode preparasi :

a. Media siap pakai : media cair, semi padat, padat
yang disiapkan dalam wadah bentuk siap pakai.
a.1 media kultur akhir : siap untuk diinokulasi.

a.2 media siap pakai setelah remelting
a.3 media siap pakai setelah remelting dan
penambahan supplement.
26
13
b. Media yang disiapkan dari formulasi kering :
membutuhkan rehidrasi dan pengolahan sebelum
digunakan, contohnya powder,granul,produk
liofilisat.
c. Media yang disiapkan dari komponen

tunggal/individual : media yang dibuat oleh
laboratorium mikrobiologi dan bahan seluruhnya
dari individu.
27
Larutan Pengencer
Mengencerkan contoh yang akan dianalisa
atau mikroba yang akan ditumbuhkan (dilusi).
Mengandung buffer: mempertahankan
keseimbangan fisiologis mikroba.
PH netral = Larutan garam fisiologis 0.85%,
buffer fosfat (KH2PO4), Buffered Peptone
Water.
PH basa = Alkaline Peptone Water
28
14
Bahan Tambahan Media
Indikator Asam-Basa
- Phenol Red
-Neutral Red
Antibiotik
- Menghambat pertumbuhan mikroba non-
target/kontaminan
29
TEKNIK ASEPTIK
30
15
Teknik Aseptik
Suatu teknik yang dilakukan di laboratorium
mikrobiologi yang bertujuan untuk meminimalisasi
terjadi kontaminasi, yaitu dengan cara :
1. Menggunakan APD
2. Membersihkan meja kerja sebelum dan
sesudah dengan menggunakan desinfektan
3. Menggunakan Protective Cabinets
31
Protective Cabinets
ISO 7218:2007/Amd.1:2013
 Area kerja dengan laminar aliran udara

horizontal atau vertikal untuk
menghilangkan debu dan partikel lain,
seperti mikroba dari udara.
 Lemari yang digunakan dalam

laboratorium mikrobiologi pangan terdiri
dari empat jenis.
32
16
Protective Cabinets
1. Kelas 1 : melindungi operator dan lingkungan. Cabinet ini
tidak cocok untuk kategori patogen resiko 3.
2. Kelas 2 : melindungi produk, operator, dan lingkungan.
Cabinet ini cocok untuk kategori patogen resiko 2 dan 3.
3. Horizontal laminar outflow cabinets : melindungi pekerjaan
dari kontaminasi tetapi aerosol yang dihasilkan mengarah
pada wajah operator. Tidak cocok untuk menangani
inokulasi kultur atau preparasi kultur jaringan.
4. Vertical laminar airflow cabinets : melindungi produk dengan
aliran udara vertikal dan juga melindungi operator dengan
menggunakan udara sirkulasi internal, sehingga mendukung
lingkungan aseptik. Cocok untuk menangani produk steril
dan melindungi operator pada saat menangani produk
bubuk. 33
Sterilisasi
Suatu proses untuk membunuh mikoba, baik sel
vegetatif maupun spora.
Beberapa teknik sterilisasi :
A. Mekanik/Filtrasi
- 0,22-0,45 µ
- Bahan yang mudah rusak dengan pemanasan
34
17
B. Fisik
- Pemanasan
• Pemijaran : ose, pinset,dll
• Panas Kering (oven,160-180 0C selama 2 jam) : alat
gelas
• Uap air panas bertekanan : autoklaf (121 0C, 15 psi, 15 ‘)
: medium
-Penyinaran
• UV, X, gamma, dll
• UV : membunuh mikroba pada permukaan LAF
C. Kimiawi
* Desinfektan : alkohol, formalin, khlor, dll
35
KULTUR MIKROBA
 Prosedur
 SR 02
 Kelompok Resiko MO
36
18
Kultur Mikroba
 Mengetahui sifat dari mikroba, harus dipisahkan

satu dengan yang lain dari kutur campuran
 Kultur Campuran : Biakan yang terdiri dari lebih

dari satu species
 Kultur murni : biakan yang hanya terdiri dari satu

spesies tunggal.
37
Kultur Mikroba
 Peremajaan kultur murni dengan memindahkan
ke medium baru Sub Kultur
 Piaraan Kultur yang disimpan Stock Kultur
 Kultur mikroba disimpan dalam L.Es pada T 40C
 Dorman : tidak dapat tumbuh & berkembang biak
tetapi tidak mati
 Bagaimana penanganan & pemeliharaan MO ?
38
19
Kultur Mikroba & Cara Isolasi
 Kultur mikroba dapat dibekukan dengan cara
Liofilisasi
 Isolasi mikroba adalah tehnik pemisahan/

pemurnian mikroba, dapat dilakukan dengan cara :
1. Isolasi pada medium agar dalam cawan
2. Isolasi pada agar tegak/ agar miring
3. Isolasi pada medium cair
39
Kultur Murni
 Pelet (Lypo – disk)
 Stik (kwik – stick)
 Cultiloop
Berbeda cara penanganan

dan persiapannya
40
20
Faktor-Faktor yang Mempengaruhi
Pertumbuhan Mikroba
41
Sumber Nutrisi
 Carbon T
 Nitrogen E
 Oksigen R
 Fosfor G
A Sifat MO
 Sulfur
N
 Air T
 Hidrogen U
 Fe, Ca, Na, Mg, K N
dll G
42
21
Waktu Reproduksi
Fase Pertumbuhan Mikroba
Stationary phase
Decline phase
Lag phase Log phase
43
Fase Pertumbuhan Mikroba

 Lag phase
Belum ada pertumbuhan populasi karena sel mulai
beradaptasi dengan medium sehingga siap untuk
membelah diri.
 Logaritma phase
Sel membelah diri dengan laju yang cepat & konstan.
 Stationary phase
-Terjadinya penumpukan racun akibat metabolisme sel
- kandungan nutrien mulai habis
 Decline phase
-Sel menjadi mati akibat penumpukan racun
- nutrisi habis, mengalami penurunan jumlah sel secara
eksponensial. 44
22
Aerob Anaerob
Mutlak ada O2 Mutlak tidak ada O2
Kebutuhan
O2
Mikroaerofil Fakultatif
Sedikit O2 Ada/tidak O2
45
Penggolongan Mikroorganisme
Mesofil
25 - 40 0C
Psikrofil Termofil
0 – 30 0C 50 atau lebih 0C
Aktivitas
Suhu
46
23
Suhu
 Suhu dapat mempengaruhi mikroba dalam dua cara yang
berlawanan :
1. Apabila suhu naik maka kecepatan metabolisme naik dan
pertumbuhan dipercepat dan Sebaliknya.
2. Apabila suhu naik atau turun secara drastis, tingkat pertumbuhan
akan terhenti, komponen sel menjadi tidak aktif dan rusak, sehingga
sel-sel menjadi mati.
 suhu yang berkaitan dengan pertumbuhan mikroorganisme
digolongkan menjadi tiga, yaitu :
1. Suhu minimum : suhu yang apabila berada di bawahnya maka
pertumbuhan terhenti.
2. Suhu optimum : pertumbuhan berlangsung paling cepat dan
optimum. (Disebut juga suhu inkubasi)
3. Suhu maksimum : suhu yang apabila berada di atasnya maka
pertumbuhan tidak terjadi.
M-BRIO Training Proprietary – dilarang menggandakan dalam 47
• : 6,5-7,5
Bakteri
PH • Y&M : 3-4
• Jumlah air yang

terikat dalam bahan
Aw pangan
• Aw bakteri : 0,9
• Aw Y&M : 0,7
Kondisi lembab dan kadar air yang tinggi sangat menguntungkan untuk
pertumbuhan mikroba,,
48
24
Jumlah dan Jenis Mikroorganisme
dalam suatu produk tergantung pada
Kondisi lingkungan (substrat, kadar air, pH,

dll).
Kualitas mikrobiologi tempat penanganan &
pengolahan (ruangan, personil, alat)
Kondisi pengemasan, penanganan,
penyimpanan (kemasan, ruangan, personil)
M-BRIO Training Proprietary – dilarang menggandakan dalam 349

TOTAL MIKROBA BERDASARKAN

KELOMPOK
 Total mikroba
- Prinsip hitungan cawan menggunakan
Plate Count Agar (PCA) sebagai media
pemupukan.
- Semua bakteri, kapang, khamir dapat
tumbuh.
50
25
KELOMPOK
 Total bakteri
- Perhitungan menggunakan Nutrient
Agar (NA), media yang mengandung
nitrogen, tetapi tidak mengandung
karbohidrat.
- Baik untuk pertumbuhan bakteri,
tetapi kapang dan khamir tidak dapat
tumbuh.
51

KELOMPOK
 Total spora bakteri
- Perhitungan jumlah spora bakteri, suspensi
contoh dipanaskan terlebih dahulu untuk
membunuh sel vegetatif bakteri, kapang,
dan khamir maupun spora kapang dan khamir
- Jumlah spora dihitung menggunakan metode
hitungan cawan setelah contoh dipanaskan
pada suhu tertentu.
52
26
KELOMPOK
 Total kapang dan khamir
 Perhitungan jumlah kapang dan khamir dengan metode

hitungan cawan menggunakan media PDA.
 PDA merupakan suatu medium yang mengandung sumber

karbohidrat dalam jumlah cukup sehingga baik untuk
pertumbuhan kapang dan khamir, tetapi kurang baik untuk
pertumbuhan bakteri. Dengan menurunkan pH PDA
menjadi sekitar 3,5 pertumbuhan bakteri terhambat disebut
Acidified Potato Dextrose Agar (APDA).
53
Keselamatan kerja di
Lab. mikrobiologi
54
27
Asumsi Dasar
Perlakukan semua MO sebagai yang memiliki potensi

membahayakan kesehatan manusia.
Yang Harus Dilakukan :
1. Cuci tangan dengan sabun sebelum bekerja laboratorium.

2. Selalu menggunakan jas laboratorium yang bersih dan APD
lainnya selama berada di laboratorium.
3. Tidak makan, minum dan merokok di dalam laboratorium.
4. Sebelum mulai kerja, semprot tangan dengan alkohol 70 %.
5. Meja kerja dibersihkan dengan alkohol 70 % sebelum dan
sesudah bekerja.
6. Beri label pada kultur atau media (nama kultur/media, tanggal
dibuat).
7. Sterilisasikan peralatan bekas kultur dan media yang sudah
tercemar.
8. Jangan memipet dengan mulut.
9. Jika kultur atau media tumpah, segera dilap dengan alkohol 7055%.
Teknik dasar
analisis
mikrobologi
56
28
1. Teknik Dilusi
• Sangat penting di dalam analisa mikrobiologi.

Hampir semua metode perhitungan jumlah
mikroba mempergunakan teknik ini.
• 1 : 10, 1 : 100, 1 : 1000, dst.
• Kelebihan teknik ini adalah digunakan untuk

mendeteksi jumlah populasi mikroba yang tinggi
dengan pengenceran bertingkat.
57
2. Teknik Pour Plate
•Suatu teknik menumbuhkan mikroorganisme

pada media agar dengan cara mencampurkan
media agar yang masih cair dengan sample.
•Teknik ini biasa digunakan pada uji TPC, Y&M,

Enterobacteriaceae, Coliform, dll.
•Kelebihan teknik ini adalah mikroorganisme

yang tumbuh dapat tersebar merata pada
media agar.
58
29
3. Teknik Spread Plate
• Suatu teknik menumbuhkan mikroorganisme pada media
agar dengan cara menuangkan sample di atas media agar
yang telah memadat dan diratakan menggunakan hockey
stick.
• Bedanya dengan pour plate adalah pencampuran sample

dilakukan setelah media agar memadat sedangkan pour
plate kultur dicampurkan ketika media masih cair (belum
memadat).
• Teknik ini biasa digunakan pada uji S.aureus, B.cereus, dll.
• Kelebihan teknik ini adalah mikroorganisme yang tumbuh

dapat tersebar merata pada bagian permukaan media agar.
59
4. Teknik Streak Plate

• Suatu teknik menumbuhkan mikroorganisme pada media
agar dengan cara menstreak (menggores) permukaan agar
yang telah memadat dengan jarum ose yang telah
diinokulasikan dengan sample.
• Dengan teknik ini mikroorganisme yang tumbuh akan

tampak dalam goresan-goresan inokulum bekas dari
streak jarum ose.
• Teknik ini biasa digunakan pada uji Salmonella,

L.monocytogenes, Vibrio, dll.
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan

60
Training
M-BRIOdalam Proprietary
bentuk apapun–tanpa
dilarang
ijin menggandakan
tertulis dari dalam Biotekindo
Embrio
30
5. Teknik Transfer Aseptik
• Suatu teknik memindahkan atau mentransfer

sample dari satu medium ke medium lain secara
aseptik agar tidak terjadi kontaminasi.
• Teknik transfer aseptis, yaitu :

1) Inoculating (inokulasi) dengan jarum ose
2) Pipetting (mentransfer dengan pipet)
61
1) Inoculating (inokulasi) dengan jarum ose
a) Bakar jarum ose dari bagian pangkal dalam terus

hingga ke bagian lup (ujung) sampai berpijar merah.
b) Biarkan selama beberapa detik sampai pijar
menghilang, kemudian segera ambil tabung
reaksi/cawan yang berisi MO.
c) Segera masukkan jarum ose ke dalam tabung
reaksi/cawan, lalu segera keluarkan dan lakukan di
dekat pembakar bunsen.
d) Jarum ose dibakar kembali untuk membunuh bakteri
yang sudah diinokulasikan.
62
31
2) Pipetting (mentransfer dengan pipet)
a) Gunakan pipet steril
b) Usahakan ketika memasukkan pipet yang berisi

sample ke dalam tabung/cawan petri jangan
sampai menyentuh dinding tabung/cawan dan
lakukan di dekat pembakar bunsen.
c) Ganti dengan pipet baru dalam melakukan dilusi

yang berbeda.
63
Pengambilan contoh
dalam uji mikrobologi
64
32
PENGAMBILAN CONTOH DALAM
UJI MIKROBIOLOGI
Prosedur Pengambilan Contoh

REPRESENTATIF
Peralatan Steril
Teknik Aseptik
 Bahaya terhadap kesehatan
Organisme berbahaya sample semakin banyak
 Keseragaman
Homogen sample semakin sedikit
65
Penetapan Penerimaan Produk
Sampel defektif:
 Mengandung mikroorganisme berbahaya
 Mengandung mikroorganisme dalam
jumlah lebih tinggi dari yang ditetapkan
66
33
The N
67
34

Dasar-dasar&Prinsip Uji Mikrobiologi (Compatibility Mode)

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Dasar-dasar&Prinsip Uji Mikrobiologi (Compatibility Mode)

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

PRINSIP DAN

5. Teknik isolasi bakteri pada kasus penyakit

Morfologi sel bakteri

- Umumnya bakteri berukuran 0,5-1,0 x 2,0-5,0

Formulasi dari substitusi dalam bentuk cair,semi

3. Media Semi Padat

a. Chemically undefined / partially undefined

c. Media kultur chomogenic & Media kultur

bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

c. Media pengencer/suspensi : untuk memisahkan

d. Media resusitasi : memulihkan mikroba yang

e. Media pengayaan (enrichment) : media cair untuk

M-BRIO Training Proprietary – dilarang menggandakan dalam

e.2 Media pengaya non-selektif : untuk pertumbuha

f. Media isolasi : media padat atau semi padat untuk

f.1 Media isolasi selektif : untuk pertumbuhan

f.2 Media isolasi non-selektif : media isolasi yang

f.3 media slektif kromogenic/fluorogenik :

bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

h. Media identifikasi : untuk menghasilkan reaksi

i. Media enumerasi : media biakan selektif atau non

bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo

j. Media konfirmasi : media yang memberikan

k. Media yang mengandung netralisasi : media

m. Media acuan : media yang biasanya non-selektif,

4. Media berdasarkan metode preparasi :

a.1 media kultur akhir : siap untuk diinokulasi.

c. Media yang disiapkan dari komponen

 Area kerja dengan laminar aliran udara

 Lemari yang digunakan dalam

 Mengetahui sifat dari mikroba, harus dipisahkan

 Kultur Campuran : Biakan yang terdiri dari lebih

 Kultur murni : biakan yang hanya terdiri dari satu

 Isolasi mikroba adalah tehnik pemisahan/

Berbeda cara penanganan

Fase Pertumbuhan Mikroba

• Jumlah air yang

Kondisi lingkungan (substrat, kadar air, pH,

M-BRIO Training Proprietary – dilarang menggandakan dalam 349

TOTAL MIKROBA BERDASARKAN

TOTAL MIKROBA BERDASARKAN

 Perhitungan jumlah kapang dan khamir dengan metode

 PDA merupakan suatu medium yang mengandung sumber

Perlakukan semua MO sebagai yang memiliki potensi

1. Cuci tangan dengan sabun sebelum bekerja laboratorium.

• Sangat penting di dalam analisa mikrobiologi.

• 1 : 10, 1 : 100, 1 : 1000, dst.

• Kelebihan teknik ini adalah digunakan untuk

2. Teknik Pour Plate

•Suatu teknik menumbuhkan mikroorganisme

•Teknik ini biasa digunakan pada uji TPC, Y&M,

•Kelebihan teknik ini adalah mikroorganisme

• Bedanya dengan pour plate adalah pencampuran sample

• Teknik ini biasa digunakan pada uji S.aureus, B.cereus, dll.

• Kelebihan teknik ini adalah mikroorganisme yang tumbuh

4. Teknik Streak Plate

• Dengan teknik ini mikroorganisme yang tumbuh akan

• Teknik ini biasa digunakan pada uji Salmonella,

M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan

• Suatu teknik memindahkan atau mentransfer

• Teknik transfer aseptis, yaitu :

1) Inoculating (inokulasi) dengan jarum ose

a) Bakar jarum ose dari bagian pangkal dalam terus