I.

DASAR TEORI

Dalam hal sediaan farmasi, istilah sterilisasi berarti pemusnahan total semua
mikroorganisme dan sporanya, atau penghilangan mikroorganisme secara menyeluruh
dari sediaan. Lima metode yang biasa digunakan untuk mensterilkan obat adalah
sterilisasi uap, panas kering, filter, gas, dan radiasi pengion. Metode yang
dipergunakan untuk mencapai steril obat bergantung kepada sifat produk maupun
bahan aktif dalam kandungannya. Namun, terlepas dari metode yang digunakan,
produk akhir harus menjalani uji sterilitas untuk menunjukkan keefektifan metode,
peralatan, dan personel (Ansel, 2016).
Proses sterilisasi adalah salah satu aspek paling penting dari kegiatan yang
bersinggungan dengan kegiatan mikrobiologis. Tujuan utamanya adalah untuk
mengurangi atau menghilangkan mikroba yang tidak diinginkan yang dapat
mencemari lingkungan. Dikhawatirkan pada kontaminasi yang disebabkan oleh
mikroba yang tidak terduga dapat menghambat pertumbuhan mikroba atau
membahayakan keselamatan mereka yang melakukan kegiatan tersebut (Fardiaz,
2013).
Steril adalah sediaan yang memenuhi persyaratan yang menyatakan steril,
bebas dari partikel asing non-diri, dan tidak mengandung atau terkontaminasi
mikroorganisme. Disinfeksi adalah suatu siklus untuk membunuh setiap satu
mikroorganisme yang ada, sehingga dengan asumsi diisi dalam suatu media tidak ada
lagi mikroorganisme yang dapat ditiru. Spora bakteri, mikroorganisme yang paling
tahan panas, harus dibunuh dengan sterilisasi. Sebaliknya, sumber lain menegaskan
bahwa sterilisasi adalah perlakuan bahan atau barang sampai tidak ada
mikroorganisme yang tersisa pada akhir proses (Aidilfiet et al., 2015).

Obat steril adalah obat yang memenuhi persyaratan sterilitas. Mikroorganisme

selain persyaratan fisik dan kimia. Tujuan pencucian adalah untuk menghilangkan
minyak, partikel, bakteri dan pirogen dari kemasan atau wadah. Alkali, deterjen, air
murni (PW), air deionisasi tersaring (DI), air pirogen dan air untuk injeksi (WFI)
(UNAND, 2019).
 Sediaan yang tidak ada cemaran mikroba pada benda atau bahan, baik patogen
maupun nonpatogen, vegetatif maupun nonvegetatif, disebut sediaan steril.
Penghancuran bentuk kehidupan ialah patogen maupun non-patogen, dan vegetatif
maupun non-vegetatif atau bahan disebut dengan sterilisasi. Ini dapat dicapai dengan
menyaring atau membunuh organisme dengan panas, bahan kimia atau metode lain,
atau dengan membuang semua organisme hidup secara fisik. Agar kultur organisme
tertentu dapat bereproduksi untuk kebutuhannya sendiri atau produk metabolisme,
sterilisasi diperlukan untuk mencegah penyebaran penyakit, kerusakan bahan oleh
mikroorganisme, dan persaingan nutrisi dalam media pertumbuhan (Agoes, 2013).
Selain memiliki standar kemurnian dan kualitas yang sangat tinggi, sediaan
steril memiliki sejumlah karakteristik bentuk sediaan yang berbeda, termasuk tidak
adanya mikroorganisme, pirogen, dan partikulat. Tidak adanya kontaminasi mikroba
adalah tujuan utama dari sediaan steril. Berikut ini adalah beberapa kemungkinan
sumber kontaminasi: Eksplan, molekul, atau benda asing kecil lainnya yang masuk ke
dalam botol kultur setelah tanam atau ditempatkan di ruangan meskipun sterilisasi
media, kondisi kerja, dan prosedur kerja tidak memadai (Agalloco dan Carleton,
2016).

Sterilisasi adalah proses penghilangan, pemusnahan atau pemusnahan semua

partikel hidup yaitu patogen atau non patogen, dari suatu benda atau bahan untuk
mencapai keadaan bebas kuman. Mengetahui dasar-dasar sterilisasi dan desinfeksi
penting untuk dapat melakukan pekerjaan yang bertanggung jawab di bidang medis.
Setiap siklus fisik, sintetis, atau mekanis yang dapat membunuh bentuk kehidupan,
terutama mikroorganism, dapat disebut dengan disinfeksi. Spora bakteri adalah bentuk
kehidupan mikroba yang paling tahan jika sterilisasi dilakukan dengan benar. Untuk
menghilangkan atau mengurangi kontaminan mikroba, partikulat, produk industri dan
produk lain yang berinteraksi (misalnya bakteri), produk steril harus disiapkan sesuai
dengan persyaratan khusus dalam formulasi steril. dengan pengemasan dan penutupan
pengemasan, yang sangat bergantung tidak hanya pada kemurnian bahan mentah,
tetapi juga pada keterampilan, tanggung jawab, dan sikap pekerja yang terlibat dalam
proses produksi. Karena tidak mungkin menghasilkan produk steril pada pemrosesan
ulang pertama, jaminan dan jaminan kualitas sangat penting. Oleh karena itu, metode
produksi harus mengikuti prosedur yang telah divalidasi (Elisma, 2016).

Untuk menghindari kontaminasi produk steril yang diproduksi, yang dapat

mempengaruhi pengguna produk steril, perhatian harus diberikan pada proses
sterilisasi produk selama pembuatan obat-obatan steril. Oleh karena itu, proses yang
sangat ketat harus diterapkan di setiap fase pemrosesan. Tahapan dari masing-masing
metode adalah menghasilkan obat steril bermutu tinggi yang aman dan bebas kuman
serta bebas industri bagi masyarakat penggunanya, maka salah satu upayanya adalah
proses pembuatan produk steril menggunakan dua metode yaitu. proses aseptik. dan
proses sterilisasi akhir (Elisma, 2016).
Dalam sediaan farmasi, "sterilisasi" berarti penghilangan total mikroba dari
sediaan atau pemusnahan total semua mikroba dan sporanya. Pada sterilisasi uap,
kering, filter, gas, dan radiasi pengion adalah lima metode sterilisasi yang paling
umum untuk produk medis. Sifat sediaan dan bahan aktif yang dikandungnya sangat
mempengaruhi metode yang digunakan untuk mencapai sterilitas sediaan obat.
Namun, terlepas dari metode yang digunakan, produk harus menjalani uji sterilitas
untuk menunjukkan keefektifan metode, peralatan, dan personel (Mehdi, et al., 2018).
Sebelum dan sesudah berjalannya praktikum, harus dilakukan sterilisasi.
Sterilisasi adalah salah satu proses yang dilakukan untuk mengeliminasi ataupun
menghilangkan semua mikroorganisme atau patogen yang hidup maupun yang tidak
hidup pada suatu objek ataupun bahan. Pada proses sterilisasi akan diperoleh sediaan
yang steril. Pembuatan sediaan atau produk secara aseptis, penyinaran, penggunaan
zat kimia, penyaringan bakteri, pemanasan kering dan pemanasan basah merupakan
cara sterilisasi lazim yang biasa digunakan pada saat ini. (Fitriani Lili, 2019)
Ruang kerja laboratorium berventilasi, yang dikenal sebagai lemari biosafety,
dirancang untuk melindungi sampel bahan, lingkungan kerja, dan personel yang
bekerja dengan sampel bahan dari kontaminasi atau penyebaran bakteri atau virus
patogen. Awalnya terlihat seperti lemari asam, tetapi lemari asam sebenarnya tidak
memiliki asuransi HEPA. Namun, kabinet biosafety memiliki beberapa kategori
keamanan dan tujuan dari kategori keamanan ini berbeda (Sudarmono, 2015).
 Tabel 1. Penjelasan Ruang Bersih (CPOB, 2012).

Pada saat pembuatan produk sediaan steril harus dilakukan di ruangan yang
bersih serta steril. White area merupakan ruangan yang bersih yang digunakan untuk
pembuatan sediaan steril yang termasuk dalam kelas A,B,C dan D. Pada white area
kelas C biasanya digunakan untuk pembuatan sediaan steril dengan dilakukan
sterilisasi pada tahap akhir. Pada white area kelas A dengan Background B
digunakan untuk pembuatan sediaan steril dengan tanpa dilakukan metode sterilisasi
di tahap akhir namun dilakukan dengan teknik aseptik. Grey area merupakan tempat
yang digunakan untuk pembuatan atau produksi sediaan yang tidak steril. (Tim
dosen,2023).
Sehingga dapat disimpulkan bahwa ruang kelas A,B,C,dan D merupakan
white area yaitu ruangan yang digunakan untuk pembuatan sediaan steril. Sedangkan
ruang kelas E merupakan grey area yaitu ruangan yang digunakan untuk pembuatan
sediaan yang tidak steril atau non steril dengan spesifikasi kebersihan pada
ruangannya tersebut tidak ketat seperti pada ruangan bersih yang digunakan pada
pembuatan sediaan obat steril. (Tim Dosen,2023).
 Secara umum kategori kelas bersih dibagi menjadi 3 yaitu white area atau
daerah putih seperti kelas A,B,C,D. Grey area atau daerah abu seperti kelas E. Serta
black area atau daerah hitam seperti kelas F. Semakin terkontrol atau semakin tinggi
tingkat kebersihannya maka daerah tersebut semakin ke arah daerah putih. Pada
white area digunakan untuk produksi sediaan obat steril sedangkan pada grey area
digunakan untuk produksi sediaan yang sudah di dalam wadah primer sehingga
kontak langsung antara sediaan dengan lingkungan luar tidak ada. Area yang tidak
terkontrol kebersihannya atau jumlah paling sedikit partikel viable ataupun non
viable yang terdapat pada ruangan tersebut merupakan ruangan black area. (Tim
Dosen,2023)
Yang dimaksud dengan ruang bersih adalah ruangan yang digunakan untuk
membuat sediaan obat steril, dimana kondisinya dikontrol dan yang boleh digunakan
diperbolehkan. 2013 (Badan POM RI) Sediaan obat steril dibuat di ruang Kelas A, B,
C, dan D atau dikenal dengan white area. Ruang kelas E atau disebut juga ruang grey
area digunakan untuk membuat sediaan obat yang tidak steril. Kamar ini tidak
sebersih kamar bersih karena digunakan untuk pembuatan sediaan obat steril. Area
putih, juga dikenal sebagai area putih, adalah bagian pertama dari tiga bagian yang
membentuk kelas bersih. Itu termasuk kelas A, B, C, dan D. Yang kedua adalah area
abu-abu, juga dikenal sebagai area abu-abu, yang hanya mencakup kelas E; Area
hitam, juga dikenal sebagai area hitam yang hanya berisi kelas F, adalah yang ketiga.
Saat menggunakan grade bersih, tingkat kebersihan meningkat saat area lebih putih.
Area abu-abu digunakan untuk mengolah sediaan yang sudah berada di wadah
primer agar sediaan tidak bersentuhan langsung dengan bagian luar, sedangkan area
putih digunakan untuk pembuatan sediaan obat steril. Area hitam adalah area yang
najis hingga tidak mungkin untuk menentukan jumlah minimum partikel yang dapat
hidup dan tidak dapat hidup di area tersebut. Karena risiko kontaminasi yang tinggi,
area ini tidak dapat digunakan untuk membuat obat-obatan dan hanya digunakan
untuk pergantian personel. Seorang anggota staf terlebih dahulu harus melewati area
hitam dan abu-abu sebelum memasuki area putih. (Badan POM RI, 2013).
Sebelum dan sesudah melakukan praktikum harus dilakukan cuci tangan.
Mencuci tangan merupakan kegiatan yang bertujuan untuk menghilangkan
mikroorganisme dengan sementara yang bisa saja ditularkan dari dan ke orang lain.
Mencuci tangan adalah suatu langkah yang paling efektif guna mengendalikan dan
mencegah infeksi noskomial. Tujuan personel mencuci tangan adalah untuk
membasmi mikroorganisme yang mungkin ada di tangan, mencegah infeksi silang
atau disebut cross infection, melindungi diri dari infeksi serta menjaga kondisi tetap
sterilOperator atau personel di pembuatan sediaan yang aseptik merupakan sumber
kontaminasi paling besar pada produk dan oleh karena itu harus dilakukan
pengendalian. Contoh pengendalian kontaminasi yang didapat dari operator adalah
dengan menggunakan pakaian kerja yang tidak menyebar partikel dari kulit atau
rambut operator. Makin bersih ruangan, semakin tinggi perlindungan produk
terhadap kontaminasi dari personel produksi. Oleh karena itu pakaian kerja dan
peralatan yang berbeda akan digunakan untuk setiap kategori ruangan yang bersih.
Kebersihan tangan didefinisikan menjadi mencuci tangan menggunakan sabun dan
air atau disinfektan menggunakan antiseptik, yang artinya cara termudah serta paling
ekonomis untuk mencegah penyakit (Kemenkes, 2016).
Personel yang melakukan kegiatan pembuatan sediaan steril wajib
menggunakan baju kerja yang khusus. Personel yang akan menggunakan baju kerja,
sebelumnya personel harus menggunakan baju ruang dan mengganti dengan baju
kerja. Selain itu, personel yang melakukan kegiatan pembuatan sediaan steril tidak
boleh menggunakan aksesoris misalnya kalung, jam tangan, cincin, make-up serta
kalung dan tidak boleh menggunakan cat kuku. Personel diwajibkan mencuci tangan
sesuai dengan prosedur yang sudah ditetapkan sebelum menggunakan baju kerja.
(Tim dosen,2023).
Personel diwajibkan mendapatkan perlakuan pelatihan dahulu sebelum
melakukan pekerjaan dengan menggunakan Bio Safety Cabinet (BSC). Biosafety
cabinet atau disebut pula Biological cabinet adalah area kerja di laboratorium dengan
ventilator udara yang sudah diatur untuk mengamankan personel yang bekerja
menggunakan sampel material, lingkungan kerja dan sampel material asal
kemungkinan bahaya terkena kontaminasi atau menyebabkan kontaminasi bakteri
atau virus yang bersifat pathogen. .Dengan BSC, udara yang berasal ruangan masuk
ke dalam Biosafety cabinet yang selanjutnya diserap oleh cabinet ke arah saluran
pembuangan. Arah peredaran udara memungkinkan partikel aerosol yang bisa saja
dihasilkan saat melakukan kegiatan tidak mengontaminasi personel dan dibuang.
Bagian, depan cabinet dibuka sedikit sampai tangan personel bisa masuk serta
bekerja menangani bahan yang ada pada cabinet saat personel tadi mengamati dari
luar penutup BSC yg transparan. (Hairunisa, 2016).
Pada ruang A harus didesinfeksi terlebih dahulu menggunakan sinar UV,
pada saat sebelum dan sesudah menggunakan BSC. Personel diperbolehkan untuk
membuka jendela BSC serta dilakukan dan melakukan desinfeksi lagi menggunakan
alkohol 70%, setelah sinar UV dipaparkan ke permukaan ruangan A selama 1 jam.
Langkah selanjutnya yaitu didesinfeksi terlebih dahulu saat memasukkan bahan dan
semua peralatan ke ruang A. Pada saat menaruhkan bahan serta alat, beberapa yang
harus diperhatikan yaitu tidak boleh menghidupkan api dalam ruang A karena dapat
menganggu aliran pada udara laminar, tidak diperbolehkan meletakkan grill karena
hal tersebut mengakibatkan terganggunya aliran udara linier. Pada tempat kerja
terdapat tiga area yaitu area kotor, area kerja, dan area bersih. Hal tersebut bertujuan
untuk mengurangi bioburden di sediaan atau produk steril. Teknik-teknik pembuatan
sediaan dan teknik pembuatan sediaan dengan teknik aseptik secara mendalam
merupakan hal yang harus di kuasai personel ketika ingin melakulan praktikum
sediaan steril (Tim Dosen,2023).