Anda di halaman 1dari 31

Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

obat laut
Tinjauan

Karakterisasi Fucoidan: Penentuan Kemurnian


dan Sifat Fisikokimia dan Kimia
Ahmad Zayed1,2, Mona El-Aasr2, Abdel-Rahim S. Ibrahim2dan Roland Ulber1,*
1 Institut Teknik Bioproses, Technical University of Kaiserslautern, Gottlieb-Daimler-Straße 49, 67663
Kaiserslautern, Jerman; ahmed.zayed1@pharm.tanta.edu.eg
2 Departemen Farmakognosi, Universitas Tanta, Sekolah Tinggi Farmasi, Jalan El-Guish, Tanta 31527, Mesir;
moelaasar@pharm.tanta.edu.eg (ME-A.); abdelrahim.ibrahim@pharm.tanta.edu.eg (A.-RSI)
* Korespondensi: ulber@mv.uni-kl .de; Tel.: +49-(0)-631-205-4043; Faks: +49-631-205-4312

---- -
Diterima: 27 Oktober 2020; Diterima: 17 November 2020; Diterbitkan: 19 November 2020 ---

Abstrak:Fucoidans adalah biopolisakarida sulfat laut yang memiliki struktur kimia yang heterogen
dan rumit. Berbagai monomer gula, hubungan glikosidik, massa molekul, situs percabangan, dan
pola dan kandungan ester sulfat terlibat dalam tulang punggungnya. Selain itu, sumber, proses
hilir, dan faktor geografis dan musiman menunjukkan efek potensial pada karakteristik struktur
fukoidan. Karakteristik ini didokumentasikan sangat terkait dengan aktivitas potensial fucoidan.
Oleh karena itu, banyak penentuan kualitatif dan kuantitatif kimia dan metode elusidasi struktural
dilakukan untuk mengkarakterisasi fukoidan mengenai fitur fisikokimia dan kimianya.
Karakterisasi polimer fucoidan dianggap sebagai hambatan untuk aplikasi biologis dan industri
lebih lanjut. Akibatnya, hasil yang diperoleh mungkin terkait dengan aktivitas yang berbeda, yang
kemudian dapat ditingkatkan dengan modifikasi fungsional lebih lanjut. Artikel saat ini menyoroti
berbagai metode spektrometri dan nonspektrometri yang diterapkan untuk karakterisasi fukoidan
asli, termasuk tingkat kemurnian, komposisi monomer gula, pola dan kandungan sulfasi, massa
molekul, dan hubungan glikosidik.

Kata kunci:fucoidan; fukoidanase; hubungan glikosidik; massa molekul; NMR; hubungan


strukturaktivitas

1. Perkenalan

Polisakarida laut diklasifikasikan sebagai makromolekul sulfat (SPs) dan nonsulfasi yang terutama berasal
dari mikro dan makroalga [1,2]. Secara khusus, makroalga SP menunjukkan karakteristik kimia yang lebih
beragam daripada analog nonsulfasi, dalam hal berat molekul, komposisi monosakarida, dan kandungan dan
posisi sulfat, yang berinteraksi dengan berbagai target biologis pada tingkat berbeda yang mengarah pada
aktivitas farmakologis yang beragam dan menjanjikan.2,3]. Mereka ditemukan di filum yang berbeda, seperti di
Phaeophytes atau ganggang coklat (misalnya, fucoidans), Rhodophytes atau ganggang merah (misalnya,
karagenan), dan Chlorophytes atau ganggang hijau (misalnya, ulvan) [2,4]. Meskipun ganggang coklat, dengan
1755 spesies, bukan kelas yang paling melimpah, fukoidan SP mereka menunjukkan aplikasi yang lebih
potensial di daerah yang berbeda daripada yang diisolasi dari ulvan dan karagenan [5–7].
Fucoidans dikenal sebagai polisakarida sulfat yang mengandung fucose (FCSPs), di manaaku-fukosa
selalu mendominasi monomer gula lainnya, seperti galaktosa, manosa, glukosa, dan asam uronat. aku-
fucose dapat melebihi 90% dari total komposisi gula fucoidans [8]. Namun, galaktosa, seperti dalam
kasus galaktofukan tersulfasi, mungkin memiliki rasio yang mirip dengan fukosa.9]. Jenis lain dari FCSP
diisolasi dari invertebrata laut, yang disebut fucans sulfat. Sebaliknya, mereka terdiri dariaku-fucose saja.
Oleh karena itu, istilah fucoidans baru-baru ini diadopsi secara khusus untuk SP laut heterogen yang
kaya akan fucose dan berasal dari berbagai spesies alga coklat, termasuk nama lama.

Maret Narkoba2020,18, 571; doi:10.3390/md18110571 www.mdpi.com/journal/marinedrugs


Maret Narkoba2020,18, 571 2 dari 31

fucoidin dan fucoidan, agar konsisten dengan sistem nomenklatur International Union of Pure and
Applied Chemistry (IUPAC) [10]. Mereka spesifik spesies dan, oleh karena itu, mereka tidak memiliki
struktur kimia universal. Namun, mereka mewakili komponen utama dinding sel dan matriks
ekstraseluler (ECM) bersama dengan alginat dan selulosa dalam rumput laut coklat [11,12].
Heterogenitas fisikokimia dan kimia dari fukoidan telah dibahas sebelumnya, serta cara pengaruhnya
terhadap penerapannya [13]. Selain itu, fukoidan dicirikan oleh berat molekul tinggi, hingga 950 kDa
dalam fukoidan asliHizikia fusiformeatauSargassum fusiforme[14]. Kehadiran gugus ester sulfat
memberikan muatan negatif pada kerangka makromolekul yang bertanggung jawab atas karakteristik
anionik fukoidan [15]. Selain itu, percabangan rantai meningkatkan kompleksitas fukoidan dibandingkan
dengan fukan sulfat yang berasal dari invertebrata laut [16,17]. Oleh karena itu, penyelidikan terhadap
dua kelompok biopolimer yang mengandung fukosa ini, yaitu fukan dan fukoidan sulfat, membutuhkan
pendekatan penyelidikan yang berbeda. Karena struktur kimianya yang rumit, hidrolisis enzimatik,
hidrolisis asam ringan, dan autohidrolisis fukoidan asli selalu terlibat dalam penjelasan fitur struktural
halusnya. Pretreatment tersebut memungkinkan produksi oligomer atau fraksi sederhana yang mudah
ditafsirkan [18].
Berbagai aplikasi fukoidan dalam terapi [19], kosmetik [20], makanan nutraceutical / fungsional [21],
diagnostik [22], dan pengiriman obat [23] bidang telah meningkatkan kesadaran tentang pentingnya
mereka, terutama dalam beberapa dekade terakhir. Secara khusus, aktivitas farmakologis fucoidan
menjadikannya kandidat untuk pengobatan gangguan perdarahan [24], peradangan [25], infeksi virus [
26], tumor ganas [27], dan gangguan kekebalan tubuh [28]. Oleh karena itu, penelitian saat ini berfokus
pada investigasi farmakokinetik dan distribusi jaringan setelah pemberian fukoidan oral dan topikal [29–
31]. Studi-studi ini dapat membantu pemberian fucoidans dalam uji klinis manusia prospektif. Sementara
itu, modifikasi fucoidans asli melalui perlakuan kimia atau enzimatik dapat mengakibatkan peningkatan
aktivitas biologisnya [11,32].
Mekanisme yang terlibat dalam interaksi biologis fukoidan dengan berbagai target tidak hanya
didasarkan pada kerapatan muatan, tetapi juga fitur kimia halus [33]. Oleh karena itu, kendala utama untuk
menentukan hubungan struktur-aktivitas adalah struktur kompleks dari polisakarida tersebut [34]. Kegiatan ini
sangat berkorelasi dengan fitur struktural dan nonstruktural dari fucoidans [35,36], seperti yang dirangkum
dalam Gambar1. Contohnya termasuk hubungan antara berat molekul tinggi dan aktivitas antikoagulan [37,38
], berat molekul rendah dan apoptosis kanker [39], dan aktivitas angiogenik selektif pada tumor sebagai
antiangiogenik [40] atau pada jaringan yang rusak sebagai agen proangiogenik [41]. Selain itu, dilaporkan
bahwa pola sulfasi merupakan faktor penting, terutama pada C-4 untuk infeksi virus anti-Herpes simpleks [42]
atau pada C-2 dan C-3 untuk aktivitas antikoagulan [43], serta kandungan sulfat (densitas muatan) untuk
aktivitas sitotoksik dan antikanker [44–47] atau potensi perbaikan sel ginjal yang terluka [48], derajat
percabangan untuk aktivitas antitumor [49], dan komposisi monosakarida dalam hal kandungan asam uronat
untuk aktivitas antioksidan [50]. Selain itu, lebih dari satu faktor mungkin terlibat, seperti rasio molar sulfat /
fucose, seperti yang ditunjukkan dalam pelemahan sitotoksisitas seluler yang diinduksi stres oksidatif oleh
fucoidan mentah yang dibuat dariSargassum crassifolium[51], atau kandungan sulfat tinggi dan asam uronat
rendah untuk aktivitas antikoagulan yang signifikan seperti yang ditunjukkan olehEcklonia cava fukoidan [11,52
].
Selain itu, kualitas dan kandungan fukoidan pada produk komersial dapat mempengaruhi
penggunaannya. Contoh yang paling terkenal adalah aplikasi kosmetiknya, yang ditingkatkan
dengan adanya florotanin karena aktivitas antioksidan polifenol.53]. Oleh karena itu, penentuan
kuantitatif fukoidan sangat penting untuk pencegahan gangguan dari kontaminan yang diekstrak
bersama saat menyelidiki bioaktivitas dan memastikan kualitas produk yang tersedia secara
komersial [54,55].
Oleh karena itu, penentuan kualitatif dan kuantitatif fukoidan dan kontaminan yang diekstraksi
bersama adalah suatu keharusan sebelum karakterisasi fisikokimia, kimia, dan biologis. Setelah itu, motif
fungsional fucoidan lainnya harus dikarakterisasi dengan baik, seperti berat molekulnya, komposisi
monomer, kandungan dan pola sulfat, dan hubungan glikosidik. Terakhir, hubungan
Maret Narkoba2020,18, 571 3 dari 31

dengan aktivitas tertentu dapat diidentifikasi, dan mekanisme tindakan diduga dapat dibangun untuk
menjelaskan aktivitas tersebut. Artikel saat ini berfokus pada kemungkinan pengujian dan investigasi yang
membantu dalam karakterisasi penuh fukoidan setelah pemrosesan hilir.

Gambar 1.Ringkasan berbagai faktor yang mempengaruhi perilaku biologis fukoidan. Faktor-faktor
ini harus dicirikan untuk keberhasilan penerapan fucoidans.

2. Kimia Fukoidan

Kimia fukoidan sangat bervariasi menurut asalnya, terutama mengenai kompleksitasnya.


Misalnya, fukoidan yang berasal dari rumput laut umumnya menunjukkan kerangka bercabang dan
lebih tersulfasi dengan adanya banyak monomer gula selain α-aku-fucose. Namun, fucoidans
invertebrata laut, seperti echinodermata (misalnya, teripang) dan bulu babi (misalnya,
Strongylocentrotus droebachiensis), kurang kompleks, terdiri dari rantai pengulangan α-aku-unit
fucose [10,16,56–58]. Perbedaan-perbedaan ini membuat alga fucoidans menjadi sumber daya
biogenik yang lebih disukai daripada invertebrata laut, selain aktivitas biologisnya yang banyak dan
menarik [59].
Dalam literatur, beberapa model struktur untuk fucoidans rumput laut telah disarankan untuk
menggambarkan fitur struktur penting mereka [6,60–62] tergantung pada asal biogenik makroalga mereka,
termasuk spesies, umur, asal geografis, dan musim panen [9,13,63]. Cao dkk. menyajikan beberapa struktur
fucoidan representatif yang diisolasi dariFucus evanescens,Fucus vesiculosus,Sargassum mcclurei, Turbinaria
ornata,Sakarina cichorioides, DanUndaria pinnatifida[9].
Namun demikian, model yang paling banyak diterima adalah yang diperkenalkan oleh Cumashi et al. [64]
dan Ale dkk. [35]. Mereka mengusulkan bahwa fukoidan rumput laut sangat heterogen dalam spesies rumput
laut coklat, terdiri dari sulfat linier atau bercabangaku-tulang punggung fucopyranoside dihubungkan oleh
tidak hanya bolak-balik α-(1→3) dan α-(1→4) keterkaitan, tetapi juga α-(1→4) dan α-(1→3) hubungan saja.
Monomer gula lainnya juga dapat ditemukan, seperti β-D-galaktosa, β-D-manosa, α-D-asam glukuronat, α-D-
glukosa, dan β-D-xilosa, tetapi posisi dan mode pengikatannya masih belum dipahami [64,65]. Namun, Bilan et
al. mempelajari fraksi fucoidan yang diisolasi dariSargassum polikistik(Fucales) dan menemukan 2-linked
sulfated α-D-residu galaktopiranosa [62]. Selain itu,aku-unit fukosa adalah mono- atau disulfasi dan dapat
diasetilasi. Kelompok-kelompok ini bertanggung jawab atas karakteristik anionik fukoidan.
Maret Narkoba2020,18, 571 4 dari 31

Menurut model yang diusulkan oleh Cumashi et al. dan Ale et al., struktur kimia fukoidan diwakili
berdasarkan asalnya, seperti yang ditunjukkan pada Gambar2. Misalnya, di Fucales, pertunjukan
fucoidansaku-rantai fucopyranoside dihubungkan dengan α-(1→4) dan α-(1→3) glikosidik
keterkaitan. C-2 dan/atau C-4 (jarang pada C-3) biasanya disubstitusi dengan gugus ester sulfat (–SO− 3),
menurut jenis ikatan glikosidik [9]. Selain itu, percabangan samping terdeteksi pada C-4, bergantian
dengan gugus sulfatF.serratusL. dalam α-(1→3)aku-unit fukopiranosida. Di sisi lain, di Laminariales dan
Chordariales, subunit fucoidan terutama dihubungkan oleh α-(1→3) hubungan glikosidik. Selain itu, pada
C-2, monomer gula lain dapat dideteksi sebagai cabang samping, sedangkan gugus ester sulfat umum
ditemukan pada C-4. Struktur kimia juga dapat bervariasi dalam organisme yang sama berdasarkan
metode ekstraksi yang diterapkan [66].

Gambar 2.Model struktural untuk struktur kimia fukoidan yang berasal dari beberapa spesies rumput laut seperti
yang dikemukakan oleh Cumashi et al. dan Ale dkk. [35,64].Model A: Model mewakili fucoidans dari beberapa
spesies Fucales. Itu menunjukkan pengulanganaku-unit fucopyranoside dihubungkan dengan bolak-balik α-(1→4)
dan α-(1→3) hubungan glikosidik. C-2 selalu tersubstitusi dengan gugus ester sulfat. Contoh
termasukFucus vesiculosusDanAscophyllum nodosum: R 1= JADI3−, R2= H;F.serratusL.:R1= H, R2= sisi
rantai atau SO3−; DanFucus evanescensC.Ag: R1= H, R2= JADI− 3atau H.Model B: Model mewakili
beberapa spesies Laminariales dan Chordariales. Kedua pesanan menunjukkan pengulangan α- (1→3)-linked bercabang aku-tulang
punggung fucopyranoside di C-2. Kelompok ester sulfat terutama menggantikan C-4 dan kadang-kadang C-2.
Contohnya termasukLaminaria sakarina(Laminariales): R2= OSO− 3, R3= H bergantian dengan OSO3 −

Danaku-fucose; DanCladosiphon okamuranus(Chordariales): R2= OSO−3bergantian dengan H, R3= OSO3−


bergantian dengan H dan asam uronat. Satuan gula minor lainnya (misalnya, manosa dan galaktosa) dan gugus asetil
terjadi pada struktur fukoidan pada posisi tertentu yang tidak diketahui [64].

Baru-baru ini, Usoltseva et al. mengungkapkan model lain di anggota Laminariales, yaitu,Sakarina
atau Laminaria cichorioidesDanLaminaria longipes. Mereka mendeteksi fukoidan yang tidak biasa
dengan α-(1→3) keterkaitan yang juga mengandung α-(1→4)- dan α-(1→2) residu fucopyranoside terkait [
67]. Selain itu, Wang et al. menunjukkan bahwa α-(1→4) keterkaitan mungkin ada di tulang punggung
fukoidanLaminaria japonika[68]. Sebagai konsekuensi dari karakteristik dan heterogenitas yang
kompleks ini, selalu sulit untuk mengkarakterisasi struktur kimia dari seluruh polimer menggunakan
teknik tunggal. Metode spektrometri (misalnya Fourier-transform infrared (FT-IR), NMR dan MS)
digunakan untuk menjelaskan fitur struktural, terutama posisi gugus ester sulfat dan ikatan glikosidik.
Selain itu, metode kromatografi, seperti gel permeation (GPC) juga dikenal sebagai size-exclusion
chromatography (SEC), diterapkan untuk penentuan parameter atau rata-rata berat molekul. Saat ini,
teknik spektrometri hyphernated canggih, seperti HPLC-MS/MS, diterapkan [69,70]. Selain itu, penerapan
fukoidan degradasi enzim regio dan stereoselektif yang diisolasi dari bakteri laut memberikan
Maret Narkoba2020,18, 571 5 dari 31

wawasan tentang struktur kimia fucoidan, bila dikombinasikan dengan metode spektrometri [6,14].
Item ini dibahas dalam Bagian6.

3. Karakterisasi Kualitas Fukoidan

3.1. Karakteristik Fucoidan

3.1.1. Kandungan Gula

Uji Dubois atau asam fenol-sulfat adalah reaksi kondensasi sederhana yang dikatalisis oleh asam,
yang umumnya digunakan untuk penentuan konsentrasi gula total dalam karbohidrat.71]. Fucoidan dan
5% (w/ay) larutan fenol berair dicampur, dan kemudian asam sulfat pekat ditambahkan dengan hati-hati.
Setelah itu, sampel dicampur dengan kuat, dan absorbansi dicatat pada 490 nm. Mekanisme reaksi
didasarkan pada perkembangan warna pada dehidrasi gula menjadi turunan furfural dengan asam
sulfat. Produk furfural kemudian dikondensasikan dengan fenol untuk menghasilkan senyawa berwarna
yang stabil.
Uji Somogyi–Nelson juga digunakan untuk penentuan gula pereduksi, di mana larutan tembaga dan
fukoidan dicampur dengan hati-hati dan diinkubasi dalam penangas air mendidih. Setelah itu, reagen arsenik
molibdat ditambahkan. Campuran reaksi kemudian diinkubasi pada suhu kamar dan dianalisis pada 500 nm.
Mekanismenya didasarkan pada reaksi redoks, dimana gula pereduksi dioksidasi oleh pereaksi tembaga basa
lemah menjadi asam gula, sedangkan Cu2+direduksi menjadi Cu+. Kemudian, reagen arsenik molibdat
digunakan untuk meregenerasi Cu2+ion, sehingga mengurangi molibdat arsenik dan menghasilkan warna biru
yang khas [72,73].

3.1.2. Konten Fucose

Uji Dische atau asam sistein-sulfat dilakukan untuk mengukuraku-konten fucose dalam larutan fucoidan
terhidrolisis [74]. Pengujian terdiri dari pencampuran larutan fukoidan dengan asam sulfat encer (1:6).
Kemudian, campuran reaksi diinkubasi pada 100◦C selama satu periode, dan reaksi dihentikan dengan
pendinginan dalam penangas es. Setelah itu, airaku-larutan sistein ditambahkan, dan absorbansi diukur pada
dua panjang gelombang, yaitu 396 dan 430 nm. Menurut perbedaan kedua pengukuran tersebut,
kemungkinan gangguan heksosa dapat dikecualikan [75]. Namun, polifenol alga dapat mengganggu sebagian
besar penentuan fucose kolorimetri. Atau, karena fucose adalah gula netral, dapat ditentukan dengan
menggunakan metode yang lebih sensitif, seperti HPLC dan GC setelah derivatisasi [28]. Detail disediakan di
Bagian4.3berkaitan dengan penyelidikan komposisi monomer fucoidan.

3.1.3. Konten Fucoidan

Masalah umum dalam penentuan kuantitatif kandungan fukoidan adalah tidak adanya standar yang
tepat. Persiapan komersial mungkin tidak cukup dimurnikan dan mungkin secara struktural berbeda dari
sampel analitik. Namun demikian, berdasarkan karakteristik anionik fukoidan, pewarna tiazin, seperti
pada uji toluidin biru (TB) menurut Hahn et al. [76] dan Heparin Merah®Uji ultra menurut Warttinger et
al. [77,78], dapat diaplikasikan. Uji TB didasarkan pada pembentukan kompleks transfer muatan antara
pewarna tiazina dan polisakarida.79]. Ini terdiri dari pencampuran larutan yang mengandung fucoidan
dengan TB pada pH 1 untuk sensitivitas reaksi yang lebih baik. Absorbansi kemudian diukur pada 632 nm
menggunakan larutan fukoidan yang dimurnikan secara komersial sebagai standar referensi dalam
rentang konsentrasi 0–2,5 g·L−1. Perubahan warna ditunjukkan pada Gambar3, dimana Gambar3A
menunjukkan efek metachromatic dari fucoidan pada polycationic thiazine dye toluidine blue. Efek
hipokromik ditunjukkan dengan pergeseran hipsokromik spektrum sinar ultraviolet/cahaya tampak (UV/
Vis) biru toluidin setelah penambahan molekul polianionik (misalnya, fukoidan). Di sisi lain, Heparin Red®
Ultra assay didasarkan pada kemampuan fucoidans fluoresensi-quenching setelah inkubasi dengan
Heparin Red®reagen, seperti yang digambarkan pada Gambar3C. Ini dapat dilakukan dengan
menggunakan panjang gelombang eksitasi dan emisi masing-masing 570 dan 605 nm. Reaksinya
Maret Narkoba2020,18, 571 6 dari 31

menunjukkan selektivitas potensial untuk fukoidan bahkan dengan adanya garam natrium alginat, seperti
yang ditunjukkan pada Gambar3D [78]. Merah Heparin®Uji ultra juga menunjukkan sensitivitas yang tinggi
dalam rentang linier 0,0–8,0μG·ml−1. Hasil penyelidikan tersebut menunjukkan kualitas relatif fukoidan dan
tingkat kemurniannya.

(A) (B)

(C)

(D)

Gambar 3.(A) Efek metakromatik fukoidan pada pewarna tiazin polikationik toluidin biru (TB).
Pergeseran hipsokromik dan efek hipokromik diamati setelah reaksi TB dengan fukoidan. (B) Kurva
kalibrasi uji TB menunjukkan linieritas reaksi dalam konsentrasi fukoidan tertentu,
yaitu, 0–2,5 g·L−1. (C) Representasi reaksi polianionik polisakarida dengan molekul fluoresen perylene
diimide (misalnya, Heparin Red®). Reaksi elektrostatis menghasilkan agregat, diikuti dengan pendinginan
fluoresensi (dimodifikasi menurut [80]). (D) Kurva kalibrasi Heparin Red®pengujian menunjukkan sampel
fukoidan mentah menyimpang dari rentang linier sampel referensi tanpa gangguan dari alginat [81].
Pengukuran ultraviolet/cahaya tampak (UV/Vis) dilakukan menggunakan spektrometer UV/Vis (Cary 60 UV/
Vis, Agilent Technologies, USA), sedangkan fluoresensi direkam menggunakan spektrofluorometer
(FP-8300, JASCO Deutschland GmbH, Jerman ).
Maret Narkoba2020,18, 571 7 dari 31

Prinsip di balik reaksi fukoidan dengan pewarna dasar atau kationik berhasil diterapkan
menggunakan pewarnaan biru Alcian untuk mendeteksi fukoidan dan fragmennya setelah percobaan
degradasi dengan fukoidanase dalam elektroforesis gel poliakrilamida karbohidrat (C-PAGE) [82]. Selain
itu, polisakarida anionik serupa lainnya dari karaginan dapat dideteksi menggunakan prinsip yang sama [
83]. Saat ini, beberapa fucoidan komersial yang sangat murni dipasarkan oleh perusahaan terkenal,
seperti Sigma-Aldrich®dan Marinova®, berasal dariF.vesikulosusdan spesies ganggang coklat lainnya [17,
84].
Metode elektrokimia yang lebih sensitif dan selektif untuk mendeteksi fukoidan dikembangkan oleh Kim
et al. dalam cairan biologis dan suplemen gizi. Metode ini didasarkan pada sensor potensiometri
menggunakan elektroda membran peka poliion. Contoh senyawa yang berperan sebagai penukar ion adalah
tridodecyl methylammonium (TDMA) dan dinonylnaphthalene sulfonate (DNNS) [17,85].

3.1.4. Konten Sulfat

Seperti yang dikembangkan oleh Dodgson dan Price, kandungan sulfat dapat dianalisis berdasarkan barium
sulfat (BaSO4) presipitasi setelah penambahan barium klorida (BaCl2) dalam gelatin menggunakan natrium sulfat (Na2
JADI4) atau kalium sulfat (K2JADI4) [86,87]. Jumlah sulfat ditentukan dengan turbidimetri pada 500 nm [88]. Karena
gugus ester sulfat rentan terhadap hidrolisis, analisis turbidimetri memerlukan pembebasan awal gugus sulfat
melalui hidrolisis asam menggunakan 4 M HCl pada 100◦C selama 6 jam [89] atau 2 M trifluoroacetic acid (TFA) pada
100◦C selama 8 jam [90].
Menggunakan spektrometri massa plasma digabungkan secara induktif (ICP-MS), kandungan sulfat dari
fucoidan diisolasi dariL. hyperboreanditentukan. Kandungan belerang ditentukan dengan melarutkan fucoidan kering
(70◦C selama 90 menit) dalam 1 M HNO3. Derajat sulfasi ditentukan dengan menggunakan persamaan kesetimbangan
massa, dengan asumsi bahwa setiap gugus sulfat berasosiasi dengan ion lawan natrium.91].

3.1.5. Kandungan Asam Uronat

Penentuan kolorimetri asam uronat biasanya dilakukan dengan menggunakanmeta-fenilfenol


menurut prosedur yang disajikan oleh Filisetti-Cozzi dan Carpita [15,92] atau Blumenkrantz dan Asboe-
Hansen [93]. Prinsip yang sama dapat diterapkan denganM-fenilfenol untuk membentuk produk
kondensasi berwarna, di mana gula pertama-tama didehidrasi dengan pemanasan dengan asam sulfat
sebelum penambahanM-fenilfenol dan inkubasi pada suhu kamar. Absorbansi kemudian dicatat pada
525 nm. Reaksi karbazol asam uronat yang dimodifikasi terkadang juga diterapkan [84,94].
Selain itu, teknik HPLC spesifik berdasarkan derivatisasi monomer telah dilaporkan. Mereka
termasuk kromatografi penukar anion kinerja tinggi (HPAEC) ditambah dengan deteksi amperometri
berdenyut (PAD). Metode ini umumnya dikenal dengan Dionex HPAEC–PAD, yaitu menerapkan sistem
Dionex ICS-2500 yang dilengkapi dengan CarboPac™kolom analitik dan penjaga PA20. Itu tergantung
pada fakta bahwa asam uronat adalah asam lemah yang dapat diderivatisasi menjadi oksianion pada pH
basa.95,96].
Di bagian3.2.3, alginat dibahas sebagai kontaminan potensial fukoidan, yang menyebabkan peningkatan
kandungan asam uronat dalam produk fukoidan jika tidak dihilangkan dengan benar. Oleh karena itu, identifikasi
asam uronat diperlukan untuk membedakan komponen fukoidan dengan komponen asam alginat. Asam uronat dari
fucoidans terutama merupakan α-D-asam glukuronat [97,98], sedangkan yang ada di alginat merupakan α-aku-asam
guluronat (G-blok) dan β-D-mannuronic acid (M-block) dihubungkan melalui α-(1→4) ikatan [99], seperti yang
ditunjukkan pada Gambar4. Blok-blok ini menghasilkan pola NMR yang khas, dari mana rasio M/G dapat dihitung [100
,101].
Maret Narkoba2020,18, 571 8 dari 31

Gambar 4.Struktur kimia alginat terdiri dari α-aku-asam guluronat (G-blok) dan β-D-mannuronic acid (M-
block) dihubungkan melalui α-(1→4) ikatan glikosidik.

3.2. Kotoran Koekstraksi Potensial

Karena fukoidan ditemukan dalam matriks dinding sel yang sangat rumit selain polimer lain, seperti
selulosa, alginat, dan protein, serta polifenol [102], beberapa penyelidikan harus dilakukan untuk
mendeteksi dan mengukur komponen tersebut. Selain itu, komponen lain juga dapat diekstraksi
bersama dan terdapat dalam fukoidan mentah seperti laminaran, manitol, lipid, dan pigmen.59,103,104].
Oleh karena itu, proses hilir yang komprehensif harus diterapkan untuk menghilangkan semua senyawa
ini sebaik mungkin [54]. Namun, untuk aktivitas biologis yang dapat direproduksi dan tepercaya,
kontaminan potensial, seperti protein, alginat, laminaran, dan kandungan fenolik total harus dihitung
untuk menentukan tingkat kualitas fukoidan.

3.2.1. Protein

Folin-fenol [105] dan tes Bradford diterapkan untuk menentukan kandungan protein dalam produk
fukoidan, menggunakan albumin serum sapi sebagai standar referensi untuk kalibrasi [15,106]. Tes
Lowry dan Bradford didasarkan pada penentuan kolorimetri, di mana mereka menghasilkan larutan
berwarna masing-masing tercatat pada 750 dan 595 nm, sebagai respons terhadap protein dan/atau
asam amino. Reagen Folin-fenol terdiri dari asam fosfomolibdat-fosfotungstat, yang direduksi menjadi
larutan berwarna biru oleh protein dalam basa Cu2+larutan tartrat [105,107], sedangkan warna pada uji
Bradford terbentuk karena pembentukan kompleks antara protein dan pewarna Coomassie blue G-250.
Dalam kondisi asam, pewarna merah terprotonasi berubah menjadi bentuk biru anionik melalui interaksi
elektrostatik dan hidrofobik pewarna-protein.108,109].
Kedua tes menunjukkan hasil yang bervariasi, karena variasi komposisi protein, pH, dan
konsentrasi sampel [107], dimana hanya asam amino tirosin, triptofan, dan sistein yang dapat
bereaksi [110]. Selain itu, metode Lowry kurang spesifik karena hasilnya sangat dipengaruhi oleh
adanya senyawa pengganggu yang juga dapat mengkelat Cu.2+(misalnya, senyawa nitrogen dan
fenolik) [110,111].

3.2.2. Senyawa Fenolik

Senyawa fenolik dalam ganggang coklat bervariasi secara struktural dari molekul sederhana (misalnya, turunan
asam hidroksibenzoat, seperti asam galat, fenolik, dan sinamat) atau flavonoid (misalnya, turunan flavan-3-ol, seperti
epicatechin atau epigallocatechin) hingga polimer phlorotannin yang lebih kompleks. struktur (misalnya, phlorethol,
fuhalol, fucol, fucophlorethol, dan eckol) [112].
Seperti yang telah dibahas sebelumnya, polifenol terikat erat secara nonkovalen dengan fukoidan di
dinding sel, yang berkontribusi bersama dengan fukosantin pada warna coklat dari ekstrak kasar fukoidan [54].
Kandungan fenolik total dapat dihitung dengan menggunakan metode Folin-Ciocalteu, terutama untuk produk
mentah fucoidan [113,114]. Selain itu, uji 2,4-dimetoksibenzaldehida (DMBA) dapat diterapkan untuk
kandungan florotanin [115]. Metode Folin–Ciocalteu mirip dengan Folin–fenol yang digunakan untuk
penentuan protein; Namun, absorbansi tercatat pada 620 nm [114]. Meskipun begitu,
Maret Narkoba2020,18, 571 9 dari 31

gangguan dari monomer gula adalah umum dan dapat menyebabkan hasil yang salah. Asam galat umumnya
digunakan sebagai standar referensi dan, oleh karena itu, hasilnya dinyatakan sebagai ekuivalen asam galat [116].

3.2.3. Alginat

Pengendapan alginat oleh ion divalen (misalnya, Ca2+atau Ba2+) adalah langkah pretreatment umum
selama ekstraksi fucoidan [35,117]. Sebuah media asam, yaitu, di bawahPKa gugus karboksilat, juga membantu
dalam presipitasi alginat sebagai asam alginat [118]. Oleh karena itu, untuk menghilangkan alginat secara
efisien selama ekstraksi fukoidan, kedua kondisi tersebut biasanya diterapkan [38]. Namun demikian, jejak
alginat sering terdeteksi dalam ekstrak kasar fucoidan dari ganggang coklat [96]. Bahkan aplikasi ekstraksi
dengan bantuan enzim menggunakan lyase alginat dariSphingomonassp. (SALy) menghasilkan produk
fucoidan kasar yang mengandung alginat yang cukup besar, sehingga membutuhkan langkah pemurnian lebih
lanjut [119,120].
Karena alginat terdiri dari β-D-mannuronat (blok-M) dan α-aku-asam guluronat (G-blok) sebagai blok
bangunan [121], dapat mengganggu penentuan asam uronat selama karakterisasi kimia fukoidan. Oleh karena
itu, alginat dapat ditentukan sebagai fungsi dari perubahan metakromatik yang diinduksi saat berikatan
dengan pewarna kationik, seperti 1,9-dimetil metilen biru (DMMB) [122], atau menggunakan uji TB. Namun
karena berbedaPNilai Ka gugus ester sulfat pada fukoidan dan gugus karboksilat pada alginat, pengukuran
yang berbeda pada pH 1,0 dan pH 7,0 dapat digunakan untuk mengukur kandungan alginat, dimana pada pH
1,0, fukoidan terionisasi dan hanya berinteraksi dengan TB, sedangkan pada pH 7,0, keduanya terionisasi dan
menyebabkan perubahan warna [76]. Dionex HPAEC-PAD berpotensi dapat diterapkan untuk penentuan
spesifik blok bangunan alginat, sehingga tidak termasuk gangguan dari asam uronat fukoidan [96].

3.2.4. Laminaran

Laminaran adalah glukan netral yang larut dalam air yang terdapat pada ganggang coklat yang berfungsi
sebagai cadangan makanan [103,104]. Kehadirannya dalam preparat fukoidan mentah sangat mungkin terjadi,
karena pengendapannya dengan fukoidan setelah penambahan etanol volume tinggi (misalnya, 70%ay/ay). Ekstraksi
fukoidan dengan bantuan enzim yang dilakukan dengan menggunakan campuran enzim komersial, yaitu campuran
karbohidrat, dapat menargetkan degradasi laminarin, yang mengarah pada penghilangannya [119]. Untungnya,
laminarin tidak dapat berinteraksi dengan pewarna kationik selama penentuan kandungan fukoidan menggunakan
uji TB dan turunan perilena diimida (PDD). Prinsip yang sama diterapkan dalam pemurnian fukoidan menggunakan
kromatografi penukar anion (misalnya, DEAE-selulosa) dengan adanya laminaran [54]. Oleh karena itu, laminaran
mudah dipisahkan dari fukoidan setelah tahap pemurnian pertama.

4. Karakteristik Fisikokimia dan Fitur Struktural

4.1. Analisis Unsur


Analisis unsur sangat penting untuk studi komparatif, yang dapat digunakan untuk membandingkan
fraksi fukoidan yang berbeda sebagai alat untuk membenarkan proses pemurnian. Penurunan kandungan
nitrogen (%) dan peningkatan kandungan sulfur (%) adalah elemen penting untuk kualitas fukoidan, yang
dapat ditafsirkan sebagai penghilangan/ketidakhadiran protein dan peningkatan rasio gula monomer-sulfat.38
,117,123]. Oleh karena itu, kandungan protein dapat diperkirakan dengan mengalikan persentase N dengan
6,25. Demikian pula, kandungan gugus sulfat (seperti –SO−Na+) dapat3 dihitung berdasarkan persentase S [21,
44,113]. Selain itu, untuk penentuan derajat sulfasi dalam fukoidan, sejumlah persamaan dikembangkan,
seperti yang ditunjukkan pada Persamaan (1) dan (2) [44].

C%/12
NS = /6 (1)
S%/32

Derajat sulfasi = 1/NSS (2)


Maret Narkoba2020,18, 571 10 dari 31

di mana NSS adalah jumlah ester sulfat per monosakarida, 12 dan 32 masing-masing adalah berat atom
karbon dan belerang, dan 6 adalah jumlah atom karbon dalam monomer gula dengan asumsi bahwa semua
monomer dalam polimer adalah heksosa.

4.2. Rata-Rata Berat Molekul


Massa molar, distribusi ukuran molekul, dan konformasi rantai polimer adalah beberapa
parameter penting yang mempengaruhi aplikasi fukoidan. Ukuran molekul fukoidan berkisar
antara 13 hingga 950 kDa. Mereka dapat diklasifikasikan, menurut berat molekulnya, menjadi tiga
kelas: fukoidan dengan berat molekul rendah (LMWF) dengan ukuran polimer <10 kDa, fukoidan
dengan berat molekul sedang (MMWF) (10–10.000 kDa), dan tinggi -fucoidans dengan berat
molekul (HMWFs) (>10.000 kDa) [124]. Metode kromatografi, yaitu filtrasi gel dan pertukaran anion,
banyak digunakan, baik secara terpisah maupun kombinasi, untuk penentuan massa molekul
fukoidan. Contoh kolom yang digunakan termasuk diethylaminoethyl (DEAE) Sepharose, Zorbax
GF-450, OH-PAK SB-806 HQ, Sephadex G-50, Sephadex G-100, DEAE Toyopearl 650 M, Superdex 75
HR, dan DEAE selulosa. Kolom harus terlebih dahulu dikalibrasi dengan polisakarida dengan ukuran
molekul tertentu seperti dekstran, pullulan, karagenan, atau heparin. Namun, hasilnya
menunjukkan kisaran ukuran molekul alih-alih nilai yang tepat. Selain itu, sistem gel poliakrilamid,
yaitu C-PAGE, dapat digunakan, dimana polisakarida diwarnai dengan kombinasi biru Alcian dan
perak nitrat.14,38,82].

Baru-baru ini, dengan bantuan permeasi gel atau kromatografi eksklusi ukuran (GPC/SEC)
digabungkan dengan hamburan cahaya statis multi-sudut, hamburan cahaya kuasi-elastis, dan sistem
deteksi indeks bias (yaitu, analisis SEC–MALS–QELS–RI), karakteristik struktural penting dapat
diperkirakan, dalam konteks radius Mw, Mn, Mp, PDI, dan ukuran (root-mean-square (rms),RH) [125].
Berat molekul rata-rata angka atau massa molar (Mn) menunjukkan berat molekul rata-rata semua rantai
polimer, sedangkan berat molekul rata-rata berat (Mw) mempertimbangkan berat molekul rantai yang
berkontribusi terhadap rata-rata berat molekul. Di sisi lain, berat molekul puncak tertinggi (Mp)
menentukan mode distribusi berat molekul. Selain itu, indeks polidispersitas (PDI) mengukur luasnya
distribusi berat molekul polimer, dimana PDI yang lebih besar menunjukkan distribusi berat molekul
yang lebih luas.126]. Persamaan (3)–(5) diterapkan untuk pengukuran parameter di atas, dan sekarang
menjadi bagian integral dari banyak aplikasi atau sebagai add-on yang digunakan dalam teknik GPC/SEC,
seperti GPC Extension dari Clarity Chromatography Station ( mulai dari versi 2.3).

N
Mn = ∑SayaMSaya (3)
NSaya


NSayaM2
Saya
Mw =∑ (4)
NSayaMSaya

Mw
PDI = (5)
MN
di mana Mi adalah berat molekul rantai, dan Ni adalah jumlah rantai dari berat molekul tersebut.
Polimer alami seperti protein biasanya monodisperse, dengan PDI sekitar 1. Namun, polisakarida sangat
berbeda, menunjukkan PDI lebih besar dari 1 [127]. Produksi fukoidan dengan rata-rata berat molekul yang
berbeda dimungkinkan melalui metode fraksinasi, seperti melalui pengendapan dengan peningkatan volume
aseton, etanol, atau isopropanol, membran filtrasi dari batas berat molekul yang ditentukan (MWCO) [84], dan
elusi gradien menggunakan NaCl selama langkah elusi pemurnian kromatografi penukar ion, di mana
molaritas NaCl yang lebih tinggi mengelusi fraksi fukoidan yang ditandai dengan polaritas yang lebih tinggi,
yaitu derajat sulfasi yang lebih tinggi dan berat molekul yang lebih tinggi [38,128].
Maret Narkoba2020,18, 571 11 dari 31

4.3. Komposisi Monomer


Deteksi monomer gula pada polisakarida dilakukan setelah tahap hidrolisis asam.129], misalnya,
pemanasan pada 90–121◦C selama 2-4 jam dengan 4 M trifluoroacetic acid (TFA), diterapkan untuk isolasi
galaktofukan sulfat dari sporofilU.pinnatifida[130], 2 M HCl, diterapkan untuk fukoidan komersial
F.vesikulosus[88], dan perlakuan asam sulfat dua langkah selama 60 menit dengan 72% H2JADI4pada 30◦
C diikuti dengan hidrolisis selama 60 menit dalam 4% H2JADI4, diterapkan untuk fucoidan mentah yang
diisolasi dariSakarina latissimaDanLaminaria digitata[129,131]. Setelah itu, hidrolisat dinetralkan,
disaring, dan dikenai langkah kromatografi cair (HPLC), menggunakan monomer gula referensi yang
berbeda, seperti arabinosa, fruktosa, fukosa, galaktosa, glukosa, glukosamin, manosa, dan xilosa. Bentuk
timbal kolom Aminex HPX-87P (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) banyak digunakan untuk analisis karbohidrat,
dioperasikan pada suhu 80◦C dan ditambah dengan detektor indeks bias (RI) [97,131]. Kolom MetaCarb
67H (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA) beroperasi pada 45◦C juga dapat diterapkan [132].

Selain itu, analisis monomer netral dan mengandung amino dapat dicapai melalui derivatisasi. Konversi
monomer menjadi turunan alditol asetat lebih dapat diandalkan, dengan pemisahan selanjutnya
menggunakan pelarut organik yang mudah menguap (misalnya, diklorometana), diikuti dengan analisis yang
dilakukan menggunakan GC/ESI-MS [8,133]. Kaskade reaksi terdiri dari reduksi awal dalam media basa diikuti
dengan asetilasi menggunakan anhidrida asetat dengan adanya 1-methylimidazole [84].
Baru-baru ini, metode yang komprehensif dan cepat dikembangkan oleh Rühmann et al. sebagai fungsi
derivatisasi monomer oleh 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP) menggunakan kromatografi cair yang
dilengkapi dengan detektor yang berbeda, seperti detektor UV dan MS atau keduanya (LC–UV–ESI-MS/MS) [134
], yang berhasil diterapkan untuk karakterisasi fukoidan yang diisolasi dariF.vesikulosus[38].

4.4. Keterkaitan Glikosidik

Metilasi menggunakan CH3Metode I/NaOH untuk deasetilasi dan desulfasi fukoidan, diikuti dengan
hidrolisis, reduksi, dan asetilasi seperti sebelumnya, memungkinkan derivatisasi gula menjadi alditol
asetat yang dapat ditentukan menggunakan GC/MS [135]. Skema reaksi dirangkum dalam Gambar5.
Metilasi lengkap dapat dikonfirmasi setelah hilangnya pita OH (3200–3700 cm-1−1) dalam spektrum IR [
136]. Metode ini umumnya dilakukan untuk menentukan hubungan glikosidik dan, akibatnya, situs
percabangan pada polisakarida.
Tahap desulfasi dapat dilakukan secara enzimatis menggunakan sulfoesterase atau secara
kimiawi. Meskipun regioselektivitas reaksi enzimatik, desulfasi kimia sering dilakukan [60]. Reaksi
kimia melibatkan desulfasi solvolitik, yang terdiri dari melewatkan larutan fukoidan terlebih dahulu
melalui resin penukar kationik, yaitu kolom Amberlite CG-120 (H+-membentuk). Kemudian, langkah
desulfasi utama dilakukan melalui inkubasi garam piridinium fukoidan dalam dimetil sulfoksida
(DMSO) pada suhu 100◦C selama 3–10 jam [137–139]. Selain itu, inkubasi fukoidan desulfasi volume
yang sama dengan NH encer pekat3semalam pada suhu tinggi, yaitu, 37◦C, mengakibatkan
deasetilasi fucoidans [33,139].
Sebagai alternatif, oksidasi berkala/degradasi Smith dapat diterapkan untuk analisis hubungan glikosidik
fukoidan. Fucoidan dioksidasi dengan NaOI4kemudian direduksi dengan NaBH4. Selanjutnya produk
dihidrolisis menggunakan asam dan dianalisis dengan GC [140,141]. Namun, perlu disebutkan bahwa (1→3)
keterkaitan antara residu fucose dan tingkat substitusi hidroksil yang tinggi membuat fucoidans tahan
terhadap degradasi Smith [33]. Analisis keterkaitan glikosidik juga dapat dicapai dengan menggunakan NMR,
sebagaimana dibahas lebih lanjut di Bagian5.2.
Maret Narkoba2020,18, 571 12 dari 31

Gambar 5.Derivatisasi monomer fukoidan desulfasi dan deasetilasi menjadi alditol asetat yang mudah menguap, yang
selanjutnya dapat dianalisis menggunakan GC/MS.

4.5. Yang lain

Karakteristik lain, seperti kelarutan dan aktivitas optik, juga harus diselidiki [38]. Telah diketahui
bahwa fukoidan merupakan senyawa polar dan bebas larut dalam air. Oleh karena itu, kekeruhan dapat
menunjukkan adanya pengotor, seperti protein dan garam Ca alginat. Selain air, fukoidan sangat larut
dalam pelarut dengan konstanta dielektrik yang tinggi.59], serta dengan nilai pH asam dan basa. Namun,
untuk mencegah hidrolisis polimer, stabilitasnya diselidiki, menunjukkan bahwa larutan yang dibuat
dalam rentang pH 5,8-9,5 adalah stabil.142]. Sebaliknya, fucoidans praktis tidak larut dalam etanol atau
cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) dan, oleh karena itu, kedua pelarut dapat diterapkan untuk
pengendapan dan isolasi fukoidan dari ekstrak kasar alga [37,54].
Karena dominasi dariaku-(-)fucose dalam tulang punggung fucoidan, fucoidans adalah molekul
yang aktif secara optik, dengan larutan fucoidan menunjukkan karakteristik levorotatory ketika terkena
cahaya terpolarisasi bidang [6]. Selain itu, penelitian kimia fukoidan selalu berusaha menghubungkan
sifat kimianya, yaitu berat molekul, polidispersitas, percabangan, kandungan sulfat, dan kandungan
asam uronat, dengan sifat reologi fisiknya [133]. Larutan berair fucoidan umumnya memiliki viskositas
rendah. Namun demikian, derajat viskositas terutama tergantung pada suhu, pH, berat molekul,
konsentrasi, kandungan sulfat, dan derajat percabangan.142–145]. Salah satu contohnya adalah fucoidan
yang diisolasi dariL.japonica, yang memiliki berat molekul 10,5 kDa dan kandungan fucose yang tinggi
Maret Narkoba2020,18, 571 13 dari 31

dan sulfat. Peningkatan konsentrasi fukoidan mengakibatkan peningkatan viskositas larutan. Sementara
itu, peningkatan konsentrasi fukoidan menyebabkan penurunan pH larutan.146]. Selain itu, larutan encer
dari fucoidan diisolasi dariL. religiosaDanU.pinnatifidamenunjukkan viskositas rendah, ditandai dengan
perilaku reologi pseudoplastik [144]. Selanjutnya, Monsur et al. menyelidiki beberapa fraksi fucoidan
yang diisolasi dariTurbinaria turbinata. Mereka adalah cairan Newtonian mengenai hubungan langsung
antara tegangan geser dan laju geser, serta dalam konteks konsentrasi larutan. Bersamaan dengan itu,
mereka menemukan bahwa fraksi dengan berat molekul tertinggi, kandungan sulfat, dan polidispersitas
menunjukkan viskositas terendah.133].
Selain itu, jenis spesies alga dan keberadaan ion dapat mempengaruhi viskositas larutan fukoidan [146].
Viskositas tertinggi dari larutan berair fukoidan dilaporkan untuk diisolasi dari fukoidanF.vesikulosusspesies
ganggang [147], sedangkan viskositas larutan fucoidan diperoleh dari Cladosiphom okamuranusmeningkat
secara linier dengan meningkatnya konsentrasi polimer hingga 2% (w/ay), serta setelah penambahan garam
seperti NaCl atau CaCl2. Namun, viskositas dapat mencerminkan jumlah alginat pencemar yang tertinggal
dalam ekstrak fukoidan, karena viskositas alginat sangat tinggi [148,149].
Menariknya, fucoidans berbeda dari polisakarida lainnya, karena mereka tidak memiliki
kemampuan untuk membentuk gel saja, dimana pencampuran dengan polimer bermuatan positif
lainnya diperlukan untuk menghasilkan gel, karena interaksi ionik.145,146]. Degradasi termal
fucoidans, termasuk titik lelehnya, telah dipelajari [38,133]. Untuk informasi lebih lanjut tentang
parameter fisik lainnya seperti konsistensi, perilaku aliran, dan sifat reologi fukoidan, serta cara
sifat ini mempengaruhi aplikasi fukoidan dalam industri farmasi, termasuk pengiriman obat,
pembaca yang tertarik dapat merujuk ke [146,150], di mana desain sistem nano berbasis fukoidan
dan pembawa nano lainnya yang mengenkapsulasi fukoidan ditunjukkan bergantung pada perilaku
fisiokimia fukoidan, misalnya penampilan fisik, fitur kimia, berat molekul (Mw), kelarutan, pH, dan
titik leleh [146,151].

5. Spektrometri dan Karakterisasi Kimia

Karena struktur kimianya yang kompleks, beberapa metode spektrometri (misalnya, FT-IR,
NMR, dan MS) telah digunakan untuk menjelaskan fitur struktural fukoidan, termasuk posisi gugus
sulfat dan ikatan glikosidik, dan berat molekul. Selain itu, penerapan regioand stereoselektif enzim
pendegradasi fukoidan yang diisolasi dari bakteri laut memberikan wawasan baru ke dalam
struktur kimia fukoidan [43,74].

5.1. FT-IR
Identifikasi awal gugus fungsi fukoidan selalu dilakukan dengan pemindaian sampel menggunakan
FT-IR antara 400 dan 4000 cm−1[152,153]. Fucoidans menunjukkan pita IR yang khas dan khas untuk blok
pembangun struktural fungsionalnya (misalnya, gugus O–H dari monosakarida monomerik, C–H,
peregangan asimetris S=O dan C–O–S dari gugus ester sulfat, dan O–C –O dan C–O–C dari hubungan
glikosidik dan intramolekul pada 3421, 2940, 1221, 827, 1634, dan 1010 cm-1−1, masing-masing) [123,153
]. Apalagi puncaknya antara 1650 dan 1800 cm−1untuk gugus C=O menunjukkan apakah fukoidan asetat
dan mengandung residu asam uronat [133,154,155].
Informasi penting lainnya dapat diekstraksi dari spektrum IR, seperti posisi aksial gugus ester sulfat
pada C-4 [21,156]. Pola kompleks antara 840 dan 800 cm−1umumnya ditunjukkan, menunjukkan
substitusi yang berbeda dari gugus ester sulfat pada posisi C-4 dan C-2/C-3 yang paling melimpah,
menunjukkan puncak dan bahu untuk posisi 4 aksial C–O–S dan ekuatorial 2 /3-posisi C–O–S, masing-
masing [157]. Untuk mengecualikan vibrasi pembengkokan gugus gula C–H, hasil IR harus dibandingkan
dengan data NMR setelah hidrolisis alkali ester sulfat dan analisis metilasi untuk menentukan posisi
sulfat yang tepat [6,158]. Selain itu, pita IR pada 622 dan 583 cm−1
hasil dari deformasi sulfat O=S=O asimetris dan simetris [159].
Maret Narkoba2020,18, 571 14 dari 31

Deformasi C–H anomerik juga dapat diidentifikasi dalam spektrum IR, di mana tipe β-anomerik diwakili
oleh puncak kecil pada 890 cm-1−1, sedangkan α-analog muncul secara teoritis sekitar 860 cm-1−1, yang
mungkin tumpang tindih dengan pita sulfat yang lebih kuat dalam kisaran yang sama [8,140].
Namun, informasi struktural yang diberikan dalam spektra FT-IR mungkin tidak begitu berharga,
khususnya untuk penentuan gugus ester sulfat sekunder. Sinyal yang menggambarkan posisi gugus sulfat
sekunder bergantung pada konformasi nyata unit monosakarida, yang mungkin sangat terdistorsi dalam
rantai bercabang dan rantai tersulfasi berat oleh substituen tetangganya.160].

5.2. NMR
Artikel yang diterbitkan sebelumnya telah menunjukkan informasi berharga yang disajikan oleh NMR
untuk penjelasan struktural dan banyak fitur struktural dari berbagai fukoidan dari asal yang berbeda.
Eksperimen NMR satu dan dua dimensi (1D dan 2D) dari fukoidan, termasuk1Tangan13C-NMR, menunjukkan
spektra yang ditafsirkan dengan relatif baik terkait dengan pola sulfasi dan hubungan glikosidik. Dua
pendekatan biasanya diterapkan dalam eksperimen NMR untuk mendapatkan informasi struktur yang
berharga, yaitu fraksinasi yang hati-hati dari fukoidan mentah dan/atau modifikasi kimia tertentu, seperti
desulfasi. Perlakuan tersebut ditujukan untuk menghasilkan tulang punggung beraturan atau bertopeng
beraturan, sehingga menghasilkan spektra NMR yang dapat diinterpretasikan [161]. Contoh keberhasilan
fraksinasi fukoidan alga mentah untuk mendapatkan fraksi fukoidan berstruktur teratur, yang dielusidasi
menggunakan spektrum NMR, dijelaskan oleh Bilan et al., di mana mereka memperoleh fukoidan beraturan
dari rumput laut coklatFucus distichus[162]. Fraksinasi biasanya dilakukan selama elusi fukoidan murni dari
kolom penukar anion melalui mekanisme salting out menggunakan konsentrasi molar NaCl yang berbeda,
yaitu elusi gradien. Suatu hubungan diidentifikasi antara konsentrasi NaCl dan berat molekul dan kandungan
sulfat dari fraksi fukoidan yang diperoleh, sehingga memfasilitasi elusidasi struktur berbagai fraksi yang relatif
sederhana [38,119]. Selain itu, fraksinasi juga dapat dilakukan melalui membran dialisis dengan berat molekul
berbeda (MWCO), seperti fraksinasi fukoidan kasar menjadi LMWF dan HMWF [28]. Untuk informasi lebih lanjut
tentang perawatan tersebut, pembaca yang tertarik dapat merujuk pada tinjauan yang baru-baru ini
diterbitkan yang membahas berbagai proses hilir yang diterapkan dalam produksi fukoidan oleh Zayed et al. [
54]. Produksi fraksi atau fragmen oligomer dianggap sebagai alat potensial untuk penyederhanaan polimer,
yaitu depolimerisasi enzimatik, sebelum percobaan NMR. Langkah ini dapat dilakukan dengan perlakuan
enzimatik dari fukoidan asli dengan enzim pendegradasi fukoidan, yaitu fukoidanase [161,163]. Selain itu,
penerapan fucoidanase pada fucoidans desulfated atau deacetylated dapat menghasilkan informasi struktural
yang lebih berharga [34]. Desulfasi dan deasetilasi fukoidan diterapkan untuk menghasilkan senyawa yang
lebih sederhana, memungkinkan perbandingan pergeseran kimia (δ, ppm) dengan gula standar atau polimer
asli, terutama karena gugus ester sulfat menyebabkan deshielding proton dan karbon tetangga, akibatnya
muncul bidang bawah di spektrum NMR [8,139,163,164]. Beberapa contoh fukoidan atau fukan tersulfasi yang
dielusidasi dengan NMR 1D dan 2D dibahas di bawah secara rinci.

5.2.1. NMR 1D

Fucoidan dariF.vesikulosusDanAscophyllum nodosum(Fucales) adalah bentuk paling sederhana dari


alga fucoidans. Mereka adalah polimer bolak-balik α-(1→3)- dan α-(1→4) terkaitaku-unit berulang
fucopyranoside ([→4)-α-aku-FucP-(1→3)-α-aku-FucP-(1→4)-α-aku-FucP-(1→3)-α-aku-FucP(1→]) [35,43], di
mana beberapa fitur struktural dapat dijelaskan dari spektrum NMR. Dalam1Spektrum H-NMR, puncak
singlet dari proton terlindung sekitar 1,2 ppm ditetapkan ke –CH3kelompok (H-6) dariaku-monomer
fukosa. Puncak lain yang tampak sedikit bergeser antara 3,8 dan 4,5 ppm dapat ditetapkan ke H-2, H-3,
H-4, dan H-5. Selain itu, proton anomerik H-1 dapat diamati terlindung pada 5,2 ppm,
mengkonfirmasikan monomer gula terkait-α. Kehadiran gula lain seperti galaktosa, manosa, dan xilosa
dapat disimpulkan dari sinyal di daerah yang lebih rendah dari 3,7 ppm, seperti yang dilaporkan dalam
fukoidan yang diisolasi dariS. polikistik[165]. Analisis NMR dari fukoidan ini direkam untuk bentuk
asalnya, yang menghasilkan spektrum beresolusi rendah.
Maret Narkoba2020,18, 571 15 dari 31

Selain itu, di13Spektrum C-NMR dari fraksi fukoidan diisolasi dariS. mcclurei(Fucales) yang bersifat
galaktofukan, puncak intens yang besar dapat dengan mudah dijelaskan. Mereka termasuk –CH3
gugus (C-6) muncul di daerah hulu, yaitu 15–17 ppm, dan karbon anomerik pada C-1 di daerah hilir,
yaitu 96–100 ppm. Puncak lain menunjukkan beberapa derajat multiplisitas karena adanya
berbagai ikatan glikosidik dan pola sulfasi [138]. Puncak ini khas untuk tulang punggung α-
fucopyranoside [166]. Bagian asetat dalam struktur fukoidan juga dapat dengan mudah dideteksi13
Spektra C-NMR, di mana metil (–CH3) dan gugus karbonil (C=O) dariHAIgugus -asetil masing-masing
muncul di wilayah upfield (yaitu, 21–22 ppm) dan downfield (yaitu, 170–180 ppm). Contohnya
termasuk fucoidans diisolasi dariS.japonicaDanU.pinnatifida[167,168].
Selanjutnya, efek dari kelompok ester sulfat (–OSO− 3) pada pergeseran kimia (δ, ppm) dari

C terlampir dan disertai Hs adalah salah satu fitur yang dapat diungkapkan oleh NMR. Ini membantu
penjelasan pola sulfasi dengan tulang punggung fucoidan. Contohnya termasuk karakterisasi struktural
fucoidans diisolasi dariS. myriocystum. Adanya sinyal downfield pada 4,84 ppm in1H-NMR menunjukkan
gugus sulfat pada posisi C-4, sedangkan pergeseran kimia atom hidrogen lainnya C-2, C-3, dan C-5
masing-masing muncul pada 4,80, 4,22, dan 4,77. Data ini dikonfirmasi dalam13Spektrum C-NMR, dimana
C-4 muncul pada 81,33 ppm, sedangkan posisi C-3 dikonfirmasi oleh sinyal pada 76,39 ppm [169].
Demikian pula,Nemacystus decipiensfucoidan menunjukkan substitusi sulfasi pada C-4 dan, akibatnya,
H-4 tampak lebih terlindung pada 4,9 ppm daripada proton lainnya [170]. Selanjutnya, fucoidan, yaitu
xylogalactofucan, diisolasi dariSphacelaria indica, menunjukkan 4-HAI-residu tersulfasi pada C-4 sesuai
dengan adanya puncak di1Spektrum H-NMR pada 4,4 ppm, yang ditetapkan untuk H-4 dan dikonfirmasi
dengan analisis IR [171]. Dalam kasus lain, pola sulfasi ditunjukkan dan dikonfirmasi terutama pada C-2
dan sebagian C-4 dalam fukoidan yang diisolasi dariF.evanescens
C.Ag oleh data NMR [166]. Namun, penelitian lain lebih suka menganalisis residu fukoidan desulfasi dan deasetilasi
untuk spektrum yang lebih sederhana dan lebih mudah ditafsirkan [172].
Utamaaku-tulang punggung fucopyranose dari fucoidan diisolasi dariS. binderiditentukan dengan
membandingkan1H-NMR dan spektra NMR uji proton terlampir (APT) dengan fukoidan kelas makanan
komersial dan α-aku-standar fucose. Posisi gugus sulfat ditentukan melalui perbedaan proton dan13
Pergeseran kimia C-NMR sehubungan dengan α-aku-standar fucose. Downfield proton dan pergeseran
kimia C pada H-2 (selisih 0,90 ppm) dan C-2 (selisih 14,97 ppm) dibandingkan dengan puncak α-L-fucose
disebabkan oleh adanya gugus sulfat pada C-2 [173].

5.2.2. NMR 2D

Homonuklear (misalnya, spektroskopi korelasi (COSY), spektroskopi berkorelasi total (TOCSY),


spektroskopi efek Overhauser nuklir (NOESY), dan spektroskopi efek Overhauser bingkai berputar
(ROESY)) dan heteronuklir (misalnya, korelasi ikatan ganda heteronuklir (HMBC) dan heteronuklir tunggal
koherensi kuantum (HSCQ)) teknik NMR 2d telah digunakan untuk mengungkap lebih lanjut rahasia
struktural potensial dari banyak fukoidan (misalnya,F.serratus,S. latissimi,filum korda, DanF.evanescens) [
139,167,172,174].
Penting untuk mempelajari produk desulfasi dari fukoidan asli untuk mengidentifikasi
hubungan glikosidik dari tulang punggungnya, seperti dalam kasus fukan sulfat yang diisolasi dari
Holothuria albiventertimun laut [174]. Korelasi antara H-1 dan H-3 dari residu polimer diidentifikasi
dalam spektrum ROESY, mengkonfirmasi adanya (1→3) keterkaitan. Selain itu, urutan unit berulang
juga ditentukan sebagai fungsi dari korelasi HMBC skalar jarak jauh. Untuk estimasi konfigurasi
pada hubungan glikosidik, konstanta penggandengan langsung (1JC–H) dari C-1 untuk setiap residu
monosakarida juga diperoleh dari 2D13C/1Spektrum H HMBC. Nilai besar 170–175 Hz untuk residu
fucose ini menunjukkan bahwa proton diposisikan secara ekuatorial [175]. Selain itu, dengan
mempertimbangkan konstanta kopling vicinal (3J1H–2H) dari 3 Hz untuk residu fukosa, konfigurasi
pada C-1 residu ini ditentukan sebagai bentuk-α [174].
Fucans sulfat homogen lainnya yang sangat teratur diisolasi dari teripangHolothuria fuscopunctata,
Thelenota ananas, DanStichopus horrens. Urutan hubungan glikosidik mereka diperoleh
Maret Narkoba2020,18, 571 16 dari 31

dari sinyal silang ROESY dan HMBC yang dipilih. Korelasi antara H-1 dan H-4 keduanya
H. fuscopunctataDanT. ananasfucan sulfat diidentifikasi dalam spektrum ROESY dan HMBC, sedangkan
untukS.horrensfucan sulfat, korelasi antara H-1 dan H-3 diamati, mengkonfirmasikan adanya α-(1→4)
ikatan glikosidik pada keduanyaH. fuscopunctataDanT. ananasfucan sulfat. Urutan struktural
dari tiga fucoidans dariH. fuscopunctata,T. ananas, DanS.horrensdulu→4-α-aku-FucP-(3SO− 3)-1→,
→ 4-α-aku-FucP-(2SO3−)-1→,Dan→3-α-aku-FucP-(2SO−3)-1→,masing-masing [176].

5.3. Spektrometri massa

Spektrometri massa (MS) banyak digunakan untuk memberikan informasi struktural yang berharga,
terutama jika fukoidan bervariasi dalam hal hubungan glikosidik dan/atau pola sulfasinya [138]. Namun, sulit
untuk diterapkan pada fukoidan dengan berat molekul tinggi atau derajat sulfasi yang tinggi.163], karena
depolimerisasi atau autohidrolisis polimer harus dilakukan terlebih dahulu [177,178]. Selain itu, sifat labil gugus
ester sulfat dalam fukoidan dengan berat molekul tinggi menyebabkan polimer menunjukkan desulfasi
daripada ionisasi.179]. Dengan demikian, ion yang dihasilkan dari desulfasi mendominasi spektrum massa,
membatasi data struktur yang diperoleh dari fukoidan asli [125,180].
Oleh karena itu, sebelum pengukuran spektrometri massa, pretreatment diterapkan, termasuk depolimerisasi
fukoidan, yang mengarah ke pembentukan oligomer. Selain itu, modifikasi struktural, termasuk desulfasi dan
deasetilasi, diterapkan. Praperlakuan seperti itu menghasilkan spektrum yang lebih mudah ditafsirkan dibandingkan
dengan bentuk sulfat dengan berat molekul tinggi asli. Polimer dapat didepolimerisasi secara kimia melalui hidrolisis
asam parsial menggunakan 0,2 N TFA pada 60◦C atau 0,75 mM H2JADI4
pada 60◦C mengikuti langkah desulfasi solvolitik [179]. Berbeda dengan autohydrolysis,
depolimerisasi enzimatik oleh fucoidanses dilaporkan, meskipun tidak secara luas [181]. Namun
demikian, peran enzim pengurai fukoidan atau fukoidan dibahas pada Bagian6mengenai
modifikasi enzimatik fucoidans sebagai prasyarat potensial untuk melakukan analisis spektrometri.
Analisis oligomer dapat dilakukan dengan menggunakan ionisasi tandem ion negatif elektrospray ionisasi
(ESI-MS) dan spektrometer massa desorpsi/ionisasi laser berbantuan matriks (MALDI-TOF) [135]. Interpretasi
pola fragmentasi yang masuk akal dapat mengungkapkan banyak fitur struktural dalam oligomer yang
dihasilkan yang berguna dalam memahami struktur seluruh polimer. Penganalisis MALDI-TOF lebih nyaman
untuk analisis fragmen fukoidan, yaitu fukooligosakarida, menambahkan lebih banyak sensitivitas dan akurasi
sehubungan dengan metode MS dan NMR klasik yang mendeteksi konstituen minor, seperti dalam kasus
fukoidan yang diisolasi dariF.evanescens[179,182]. Nomenklatur sistematis yang dikembangkan oleh Domon et
al. masih disetujui untuk fragmentasi karbohidrat dalam spektrum MS/MS glikokonjugat [183].

Anastyuk dkk. melaporkan protokol pengoptimalan untuk penerapan teknik tandem MS, termasuk
ESI-MS dan MALDI-TOF-MS dalam elusidasi struktural fukoidan yang diisolasi dari berbagai spesies alga
coklat. Protokol juga melaporkan fragmen umum dariS. cichorioidesfucoidan terdeteksi dalam spektrum
MS menggunakan kedua teknik dalam pendekatan komparatif setelah autohidrolisis. Ion fragmen diM/z
97 dan 225 selalu terdeteksi, mewakili anion sulfat dan [FucSO3-H2O], masing-masing. Selain itu,M/z
puncak pada 243.02 dan 389.08 berhubungan dengan [FucSO3]−dan [Fuc2JADI3]−ion fragmen [179].
Namun, fragmen karakteristik lainnya terdeteksi di tempat yang berbeda M/z, karena perbedaan yang
terkait dengan mode ionisasi, termasuk inklusi Na dengan fragmen yang dihasilkan, yaitu [Fuc3(JADI3)3]3−
dan [Fuc3(JADI3Na)3–Na]−padaM/z231.01 dan 739.1 masing-masing dalam spektrum ESI-MS dan MALDI-
TOF-MS. Interpretasi spektrum tersebut mengkonfirmasi adanya 2,4-disulfated 2-linked α-aku-fucan
sebagai tulang punggung utamaS. cichorioidesDanF.evanescensfucoidan [179]. Cuong et al. menjelaskan
struktur kimia dariSargassum henslowianumberdasarkan data MS. Hasil ESI-MS menunjukkan sinyal
utama diM/z243 sesuai dengan [M − H]−dari fucose monosulfated [FucSO3]−ion. Sinyal lain menunjukkan
α-(1→3) terkaitaku-fucopyranose sebagai tulang punggung fucoidan, sedangkan posisi sulfat bervariasi,
tetapi sebagian besar terletak pada posisi C-2 (M/z
139), K-3 (M/z169), dan C-4 (M/z183) dari residu fucose. Hasil ini menggambarkan pola sulfasi fukoidan ini
sebagian besar berada pada C-2 dan C-4 dan kadang-kadang pada posisi C-3 dari residu fucose [90],
Maret Narkoba2020,18, 571 17 dari 31

menurut temuan sebelumnya dari Tissot et al. [184]. Mereka menunjukkan bahwa ketiga isomer memiliki pola
fragmentasi yang berbeda. Sedangkan 3-HAI-sulfat fucose kehilangan anion hidrogenosulfat, isomer lainnya,
yaitu, 2-HAI-, dan 4-HAIfucose -sulfated, dipamerkan cross-ring fragmentasi, memproduksi0,2X dan
0,2Sebuah ion putri, masing-masing [184].
Persiapan sampel juga penting, dimana sampel harus dicampur dengan 0,5 M
Asam 2,5-dihidroksi benzoat (DHB) dalam MeOH untuk percobaan ion positif atau matriks arabinoosazone 0,5 M
untuk percobaan ion negatif dalam aseton. Eksperimen ion negatif membutuhkan pengenceran 10 kali lipat lebih
lanjut dari sampel dalam air [185].
Galmero dkk. baru-baru ini menetapkan metode cepat baru untuk penentuan ikatan glikosidik
karbohidrat. Metode yang dikembangkan menggunakan kromatografi cair kinerja ultra tinggi digabungkan
dengan analisis spektrometri massa triple-quadrupole (UHPLC/QqQ-MS) yang dilakukan dalam mode
pemantauan reaksi berganda (MRM), menggunakan pustaka 22 hubungan glikosidik yang dibangun dari
standar oligosakarida komersial. Kondisi permetilasi dan hidrolisis bersama parameter LC–MS/MS
dioptimalkan, menghasilkan alur kerja yang hanya membutuhkan 50μg substrat untuk analisis [91]. Metode ini
dapat digunakan di masa depan untuk penentuan ikatan glikosidik fukoidan.

6. Peran Enzim Pendegradasi Fukoidan dalam Penjelasan Struktural

Enzim pendegradasi fukoidan dapat diterapkan untuk produksi oligosakarida bioaktif yang ditentukan
secara kimiawi dengan menghidrolisis fukan dan fukoidan tersulfasi [14,186,187]. Mereka termasuk
fukoidanase dan sulfatase, yang memainkan peran sangat penting dalam elusidasi struktural makromolekul
fukoidan dalam kombinasi dengan metode spektrometri [188–190]. Mereka dicirikan menggunakan kondisi
ringan, sebagai fungsi regio- dan stereoselektivitas, untuk menentukan pola yang tepat dari sulfasi dan
hubungan glikosidik dibandingkan dengan toksik (misalnya, piridin yang digunakan dalam desulfasi solvolitik),
nonselektif, dan modifikasi kimia atau fisik yang membosankan.139,167,191,192]. Selain itu, fucoidanase
mempertahankan pola sulfasi, yang merupakan salah satu faktor utama yang terlibat dalam berbagai aktivitas
biologis [130]. Enzim tersebut terutama diisolasi dari simbion (misalnya, Proteobacteria dan Bacteroidetes)
yang terkait dengan ganggang coklat atau invertebrata laut.193]. Menariknya, Ohshiro et al. mendeteksi kedua
aktivitas tersebut, yaitu desulfasi dan depolimerisasi fukoidan, menggunakan enzim pendegradasi yang
diisolasi dari Flavobacteriumsp. F-31. Enzim ini bekerja pada fucoidan yang diisolasi dariCladosiphon
okamuranus sebagai sumber karbon. Namun demikian, aktivitas desulfasi dari enzim tersebut terdeteksi
setelah langkah degradasi enzimatik dari fukoidan asli, yaitu fraksi terdepolimerisasi [194].
Fucoidanase pertama kali dideskripsikan pada tahun 1967 oleh Thanassi dan Nakada setelah diisolasi dari
hepatopankreas.Haliotussp. [34,195]. Mereka adalah di antara glikosidase (EC3.2.1.-GH 107) yang mengkatalisis
hidrolisis ikatan glikosidik antara residu fukosa tersulfasi dalam fukoidan [9,195]. Atas dasar cara kerjanya, mereka
sebelumnya diklasifikasikan menurut jenis hubungan glikosidik yang mereka lakukan dan selanjutnya
disubklasifikasikan sebagaiendo- atauexo-hidrolisis. Oleh karena itu, mereka baru-baru ini diklasifikasikan sebagai
endo-fucoidanases atau α-aku-fucoidan endohydrolases (EC3.2.1.44 atau EC3.2.1.211 dan EC3.2.1.212), sebagaimana
didefinisikan dalam Expasy, di mana EC 3.2.1.211 diyakini membelahendo-α-(1→3)aku-hubungan fukosida, sementara
EC 3.2.1.212 kemungkinan membelah α-(1→4)aku-hubungan fukosida, selain ituexo-type, termasuk EC 3.2.1.B47, tanpa
mempengaruhi gugus ester sulfat di tulang punggung fucoidan. Sebaliknya, ada fucosidases yang mengkatalisis
pembelahan residu fucose nonsulfated dari senyawa lain yang mengandung fucose [195,196]. Selain itu, lyases
fucoglucoronnomannan pertama kali ditunjukkan untuk membelah hubungan antara manosa dan asam glukuronat
dengan cara lyase oleh Takayama et al. pada tahun 2002 [197] dan Sakai et al. di 2003 [198]. Kemudian, mereka
dianalisis pada substrat fukoidan yang berbeda oleh Cao et al. pada tahun 2018 [9] dan disarankan untuk memotong
α-(1→4) keterkaitan. Mereka termasukendo-fucoglucuronomannan lyases FdlA (nomor aksesi GenBank: AAO00510.1)
dan FdlB (nomor aksesi GenBank: AAO00511.1) [9].
Sebaliknya, tidak banyak urutan sulfatase yang bekerja pada fukoidan yang telah ditemukan [199],
karena fukoidan sulfatase atau sulfoesterase belum dieksplorasi dengan baik. Studi langka telah
melibatkan mekanisme dugaan mereka dalam penyelidikan pola sulfasi fukoidan. Mereka termasuk
enzim yang diisolasi dari bakteri lautWenyingzhuangia fucanilyticabernama SWF1 (GenBank accession
Maret Narkoba2020,18, 571 18 dari 31

nomor: WP_068825883.1) dan SWF4 (nomor aksesi GenBank: WP_068828765.1) milik keluarga enzim
yang bergantung pada formilglisin (SulfAtlas), yaitu,exo-2HAI- dan -3HAI-fucoidan sulfatase) [190] Dan
Pekten maximus, yaitu 2HAI- fukoidan sulfatase [137].
Bakteri laut dan moluska telah dilaporkan sebagai sumber utama fucoidanase.9]. Di antara
fucoidanase yang sering digunakan adalah FcnA (nomor aksesi GenBank: CAI47003.1) dan C-terminal
versi terpotong bernama FcnA2. FcnA diproduksi oleh teknologi DNA rekombinan melalui kloning gen
penyandinya dari bakteri lautFucanivora MariniflexileSW5T. FcnA2 ditampilkan endoα-(1→4) aktivitas
pembelahan aktifKanalikulat Pelvetiafukoidan [200]. Oleh karena itu, produksi baru-baru ini dari
fukoidanase stabil yang dimodifikasi, yaitu, FcnA2, melalui pemotongan target terminal-C membantu
produksi enzimatik dari fraksi fukoidan yang lebih jelas dari fukoidan yang berbeda [9]. Selain itu, Fda1
(nomor aksesi GenBank: AAO00508.1) dan Fda2 (nomor aksesi GenBank: AAO00509.1) diproduksi oleh
Alteromonassp. SN-1009 adalah α-(1→3)-spesifik, mengkatalisasi pembelahan fukoidan yang diisolasi dari
Kjellmaniella crassifoliaatauSacharina sculpera[197]. Apalagi bakteri lautAlga Formosa (KMM 3553T)
menghasilkan FFA1 (nomor aksesi GenBank: WP_057784217.1) dan FFA2 (nomor aksesi GenBank:
WP_057784219.1). Mereka berdemonstrasiendoα-(1→4) aktivitas pembelahan pada fukoidan yang
diisolasi dariF.evanescens[161]. FcnA, Fda1, Fda2, FFA1, dan FFA2 semuanya milik keluarga glikosida
hidrolase GH107 di CAZy [16,196,201]. Baru-baru ini, sebuah novelendo-fucoidanse ditandai dan diakui
sebagai anggota pertama dari keluarga GH168 di CAZy. Itu diisolasi dari bakteri lautW.fucanilyticaCZ1127
Tdan dikodekan oleh genmenyenangkanA. Ekspresi gen yang heterolog menghasilkan produksi FunA
yang secara khusus membelah α- (1→3) hubungan glikosidik antara 2-HAI- residu fucose tersulfasi dan
nonsulfat dari teripangIsostichopus badionotusfucan sulfat [202].

Dalam beberapa tahun terakhir, beberapa hidrolase fucan sulfat diisolasi. Namun, sebagian besar
penelitian ditujukan untuk mengkarakterisasi spesifisitas enzim dan menurunkan berat molekul fukoidan
untuk modifikasi aktivitasnya dan penanganan yang mudah, sedangkan hanya sedikit penelitian yang
menghasilkan fragmen yang secara struktural ditentukan oleh analisis spektrometri. Contohnya
termasuk fucoidanases yang diisolasi dariAlga LuteolibacterH18 danFlavibacteriumsp. F-31
mengkatalisasi hidrolisisC. okamuranus fucoidan [194,203,204], isi usus teripangSticopus japonicus(
Strain, SI-1234) mengkatalisasiC. okamuranusDanA. nodosumfucoidan [198],Sphingomona spaucimobilis
PF-1 (FNase S) mengkatalisasiU.pinnatifidafucoidan [130], Alteromonadaceae (Strain SN-1009)
mengkatalisasiKjellmaniella crassifoliafucoidan [205],DendryphiellaarenariaTM94 mengkatalisasi
F.vesikulosusfucoidan [206], DanPseudoalteromonas citreaKMM 3296 danKurila Littorinakatalis
F.evanescensfucoidan [207]. Selain itu, novel α-aku-fucosidase diisolasi dari bakteri lautWenyingzhuangia
fucanilyticaCZ1127Tyang bekerja pada α-(1→4) hubungan-fukosidik dariThelenotaananas(teripang liar)
fucoidans [208]. Meja1merangkum fukoidanase dan sulfatase fukoidan yang telah dikarakterisasi
sebelumnya yang menghasilkan fragmen fukoidan yang terdefinisi dengan baik.
Maret Narkoba2020,18, 571 19 dari 31

Tabel 1.Contoh berbagai fucoidanase dan fucoidan sulfatases, termasuk sumber fucoidans yang dikatalisis dan mode aksi pembelahannya.

Sumber Enzim dan Aksesi substrat enzim Mode Pembelahan


Produk Degradasi dan Fitur Struktural referensi
Nomor di GenBank * (Sumber Fucoidan) Tindakan Nomor EC *
Fucoidanases

Strain Flavobacteriacean, yaitu,


MariniflexilefucanivoransSW5T - endo
-FcnA: CAI47003.1 Pelvetia canaliculata α-(1→4) → 3)-α-aku-FucP, 2-OSO−3 - (1→4)-α-aku-FucP-2,3-OSO3− [82,200,209]
-FdlA: AAO00510.1 - (EC 3.2.1.212)
-FdlB: AAO00511.1
→ 3)-α-aku-FucP, 2-OSO−3 - (1→4)-α-aku-FucP-2,3-OSO3− - (1→pecahan,
Sargassum horneri - endo [16]
Alga Formosa(FFA1) dengan penyisipan dari→3)-α-aku-FucP, 2,4-OSO3−-(1→
α-(1→4)
-WP_057784217.1 → 3)-α-aku-FucP, 2,4-OSO3 −-(1→4)-α-aku-FucP-2,4-OSO−3 - (1→4)
F.evanescens - (EC 3.2.1.212) [161]
- α-aku-FucP, 2-OSO3−-(1→

→ 3)-α-aku-FucP, 2,4-OSO−3 - (1→4)-α-aku-FucP, 2-OSO3−-(1→Dan


- endo [196]
Alga FormosaKMM 3553T(FFA2) → 3)-α-aku-FucP, 2-OSO−3-(1→4)-α-aku-FucP- 2-OSO3− - (1→
F.evanescens α-(1→4)
-WP_057784219.1
- (EC 3.2.1.212) α-aku-FucP-2-OSO3−(1→3)-α-aku-FucP-2-OSO3−Dan
[34]
α-aku-FucP-2,3-OSO3−(1→3)-α-aku-FucP,2-OSO3−

Trisakarida terdiri dari


- ∆4,5GlcPUA-(1→2)-α-aku-FucP, 3-OSO− 3-(1→3)-α-D-PriaP,
Kjellmaniella crassifolia
- endo-α-D-mannosidase - ∆4,5GlcPUA-(1→2)-α-aku-FucP, 3-OSO− 3 - (1→3)-α- D-PriaP,
Fucobacter marinaSA-0082 (sulfat [210]
- (EC 3.2.1.130) 6-OSO−3, Dan
fukoglukuronomanna)
- ∆4,5GlcPUA-(1→2)-α-aku-FucP, 2,4-OSO− 3 - (1→3)-α-D-PriaP,
6-OSO−3
- endo
Pseudoalteromonas citrea,KMM 3296, Sulfat α-aku-fucooligosaccharides dari 1,7–5,0 kDa dan 1,3–5,0 kDa oleh
L. cichorioides(20–40 kD) α-(1→3) [211]
KMM 3297, dan KMM 3298 galur strain KMM 3296 dan KMM 3298, masing-masing
- (EC 3.2.1.211)
- endo
Kurila Littorina F. distichus α-(1→3) → 3)-α-aku-FucP-2,4-OSO−3 - (1→4)-α-aku-FucP-2-OSO3−-(1→ [212]
- (EC 3.2.1.211)

Wenyingzhuangia fucanilyticaCZ1127T
- ANW96115.1 - endo
α-aku-FucP-(1→3)-α-aku-FucP(2,4-OSO–3)-(1→3)-
-ANW96116.1 Isostichopus badionotus α-(1→3) [202]
α-aku-Fucp(2-OSO–3)-(1→3)-α-aku-FucP(2-OSO3–)
-ANW96098.1 - (EC 3.2.1.211)
- ANW96097.1
Maret Narkoba2020,18, 571 20 dari 31

Tabel 1.Lanjutan.

Sulfatase atau sulfoesterase

Wenyingzhuangia fucanilyticaCZ1127T
exo-2HAIdan -3HAI-fucoidan sulfatase
-SWF1: WP_068825883.1 F.evanescensDanS.horneri [190]
- (EC 3.1.6.B2)
-SWF4: WP_068828765.1
2HAI-fucoidan sulfatase
Pekten maximus A. nodosum [137]
- (EC 3.1.6.B2)
* bila tersedia.
Maret Narkoba2020,18, 571 21 dari 31

7. Kesimpulan dan Perspektif Masa Depan

Fucoidans adalah makromolekul multifungsi, di mana beberapa motif struktural berpartisipasi dan
memengaruhi spektrum aplikasinya yang luas. Oleh karena itu, banyak karakteristik harus ditetapkan
(misalnya, pola dan kandungan sulfasi, komposisi monomer, derajat kemurnian, distribusi berat molekul, dan
ikatan glikosidik) sebelum aplikasi lebih lanjut, terutama karena ada beberapa produk fukoidan yang
dipasarkan. Oleh karena itu, metode analitik tunggal tidak dapat menjawab semua pertanyaan mengenai
berbagai fitur fukoidan. Juga bermanfaat jika karakteristik fucoidan dapat dikaitkan dengan aktivitas yang
dibutuhkan. Ini dapat membantu para peneliti untuk memahami dan mengungkap beberapa rahasia fucoidan.
Teknik yang agak lama masih diterapkan; Namun, baru-baru ini, teknik baru lainnya dikembangkan untuk
mendapatkan dan mengkonfirmasi hasil dengan lebih mudah. Ini termasuk spektrometri lanjutan (yaitu, NMR
dan MS) dan metode kromatografi digabungkan dengan spektrometri (GC/MS). Selain itu, enzim pendegradasi
fukoidan memainkan peran potensial sebelum analisis lebih lanjut dengan metode spektrometri canggih, dan
mereka memiliki beberapa keunggulan dibandingkan dengan metode modifikasi kimia.
Oleh karena itu, prospek di bidang karakterisasi fukoidan dan elusidasi struktural harus fokus pada
analisis metagenomik gen yang mengkode enzim tersebut, di mana overekspresi dan karakterisasi mungkin
menjadi alat yang lebih efektif dalam kombinasi dengan teknik spektrometri. Ini akan memungkinkan
pemahaman tentang mekanisme aksi fucoidan dan interaksinya yang tepat dengan target manusia yang
berbeda.

Kontribusi Penulis:AZ merencanakan topik artikel. AZ dan ME-A. menulis naskah. A.-RSI dan RU berpartisipasi
dalam pengumpulan data dan merevisi draf akhir. Semua penulis telah membaca dan menyetujui versi naskah
yang diterbitkan.
Pendanaan:Penelitian ini didanai oleh Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, German Research Foundation), hibah
nomor 172116086-SFB 926.

Ucapan terima kasih:Penulis ingin mengucapkan terima kasih khusus kepada Hannah Niehuis dan Emilie Marie Ulber karena telah
memanenF.vesikulosusganggang selama penelitian kami tentang fucoidan.

Konflik kepentingan:Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.

Referensi
1. Ruocco, N.; Costantini, S.; Guariniello, S.; Costantini, M. Polisakarida dari lingkungan laut dengan potensi
farmakologis, cosmeceutical dan nutraceutical.Molekul2016,21, 551. [CrossRef] [PubMed]
2. de Yesus Raposo, MF; de Morais, AM; de Morais, RM Polisakarida laut dari alga dengan potensi aplikasi
biomedis.Maret Narkoba2015,13, 2967–3028. [CrossRef] [PubMed]
3. Garcia-Vaquero, M.; Rajauria, G.; O'Doherty, JV; Sweeney, T. Polisakarida dari makroalga: Kemajuan terkini,
teknologi inovatif, dan tantangan dalam ekstraksi dan pemurnian.Makanan Res. Int.2017,99, 1011–1020. [
CrossRef] [PubMed]
4. Venkatesan, J.; Anil, S.; Rao, S.; Bhatnagar, saya.; Kim, SK Sulfat polisakarida dari makroalga untuk regenerasi
jaringan tulang.Kur. Farmasi. Des.2019,25, 1200–1209. [CrossRef]
5. Li, J.; Cai, C.; Yang, C.; Li, J.; Matahari, T.; Yu, G. Kemajuan terbaru dalam potensi farmasi polisakarida alga
coklat dan turunannya.Kur. Farmasi. Des.2019,25, 1290–1311. [CrossRef]
6. Li, B.; Lu, F.; Wei, X.; Zhao, R. Fucoidan: Struktur dan bioaktivitas.Molekul2008,13, 1671–1695. [CrossRef]
7. Hamid, SS; Wakayama, M.; Ichihara, K.; Sakurai, K.; Ashino, Y.; Kadowaki, R.; Soga, T.; Tomita, M. Metabolome
profiling berbagai spesies rumput laut membedakan antara ganggang coklat, merah, dan hijau.Tanaman 2019,
249, 1921–1947. [CrossRef]
8. Kopplin, G.; Rokstad, AM; Mélida, H.; Bulone, V.; Skjåk-Bræk, G.; Aachmann, FL Karakterisasi struktural
fucoidan dari Laminaria hyperborea: Penilaian sifat koagulasi dan inflamasi serta hubungan struktur-
fungsinya.Aplikasi ACS Bio Mater.2018,1, 1880–1892. [CrossRef]
9. Cao, HTT; Mikkelsen, MD; Lezyk, MJ; Bui, LM; Trans, VTT; Silchenko, SEBAGAI; Kusaykin, MI; Pham, TD; Truong,
BH; Holck, J.; et al. Tindakan enzim baru untuk depolimerisasi galaktofukan sulfat dan strategi rekayasa
baru untuk stabilisasi molekul enzim pendegradasi fukoidan.Maret Narkoba2018,16, 422. [CrossRef]
Maret Narkoba2020,18, 571 22 dari 31

10. Deniaud-Bouët, E.; Hardouin, K.; Potin, P.; Kloareg, B.; Hervé,C. Tinjauan tentang dinding sel alga coklat dan
polisakarida sulfat yang mengandung fucose: Konteks dinding sel, sifat biomedis, dan tantangan penelitian
utama.Karbohidrat. Polim.2017,175, 395–408. [CrossRef]
11. Wang, Y.; Xing, M.; Cao, Q.; Ji, A.; Liang, H.; Song, S. Aktivitas biologis fucoidan dan faktor-faktor yang
memediasi efek terapeutiknya: Tinjauan studi terbaru.Maret Narkoba2019,17, 183. [CrossRef] [PubMed]
12. Michel, G.; Tonon, T.; Scornet, D.; Ayam, JM; Kloareg, B. Metabolisme polisakarida dinding sel alga coklat
Ectocarpus siliculosus. Wawasan tentang evolusi polisakarida matriks ekstraseluler pada eukariota.Phytol
Baru.2010,188, 82–97. [CrossRef]
13. Zayed, A.; Ulber, R. Fucoidan Production: Tantangan dan Peluang Kunci Persetujuan.Karbohidrat. Polim.
2019,211, 289–297. [CrossRef]
14. Holtkamp, AD; Kelly, S.; Ulber, R.; Lang, S. Fucoidans dan fucoidanase-fokus pada teknik untuk penjelasan
struktur molekul dan modifikasi polisakarida laut.Aplikasi Mikrobiol. Bioteknologi.2009,82, 1–11. [CrossRef
] [PubMed]
15. Borazjani, NJ; Tabarsa, M.; Anda, S.; Rezaei, M. Peningkatan sifat imunomodulator dan antioksidan dari fukoidan yang tidak
dimurnikan dari Sargassum angustifolium dengan hidrolisis.J.Makanan. Sains. Technol.2017,54, 4016–4025. [CrossRef] [
PubMed]
16.Silchenko, AS; Rasin, AB; Kusaykin, MI; Kalinovsky, AI; Miansong, Z.; Changheng, L.; Malyarenko, OS; Zueva,
AO; Zvyagintseva, TN; Ermakova, SP Struktur, transformasi enzimatik, aktivitas antikanker fukoidan dan
fukooligosakarida sulfat dari Sargassum horneri.Karbohidrat. Polim.2017,175, 654–660. [CrossRef]

17. Fitton, JH; Stringer, DN; Karpiniec, Terapi SS dari fucoidan: Pembaruan.Maret Narkoba2015,13, 5920–5946. [
CrossRef]
18. Menshova, RV; Shevchenko, NM; Imbs, TI; Zvyagintseva, TN; Malyarenko, OS; Zaporoshets, TS; Besednova,
NN; Ermakova, SP Fucoidans dari ganggang coklat Fucus evanescens: Struktur dan aktivitas biologis.
Depan. Maret Sci.2016,3, 129. [CrossRef]
19. Fitton, JH; Stringer, DS; Taman, AY; Karpiniec, SN Terapi dari fucoidan: Perkembangan baru. Maret Narkoba
2019,17, 571. [CrossRef]
20. Fitton, JH; Dell'Acqua, G.; Gardiner, V.-A.; Karpiniec, SS; Stringer, DN; Davis, E. Manfaat topikal dari dua
ekstrak kaya fucoidan dari makroalga laut.Kosmetik2015,2, 66–81. [CrossRef]
21. Zhao, Y.; Zheng, Y.; Wang, J.; Ibu, S.; Yu, Y.; Putih, WL; Yang, S.; Yang, F.; Lu, J. Fucoidan diekstraksi dari
Undaria pinnatifida: Sumber nutraceuticals/makanan fungsional.Maret Narkoba2018,16, 321. [CrossRef] [
PubMed]
22. Chauvierre, C.; Aid-Launais, R.; Aerts, J.; Chaubet, F.; Maire, M.; Chollet, L.; Rolland, L.; Bonafé,R.; Rossi, S.; Bussi, S.;
et al. Pengembangan farmasi dan evaluasi keamanan fukoidan tingkat GMP untuk diagnosis molekuler penyakit
kardiovaskular.Maret Narkoba2019,17, 699. [CrossRef] [PubMed]
23. Venkatesan, J.; Anil, S.; Kim, S.-K.; Shim, MS Nanopartikel berbasis polisakarida rumput laut: Persiapan dan
aplikasi untuk pengiriman obat.Polimer2016,8, 30. [CrossRef] [PubMed]
24. Zhang, Z.; Sampai, S.; Knappe, S.; Quinn, C.; Catarello, J.; Ray, GJ; Scheiflinger, F.; Szabo, CM; Dockal, M. Skrining
fucoidans kompleks dari empat spesies ganggang coklat sebagai agen prokoagulan.Karbohidrat. Polim. 2015,
115, 677–685. [CrossRef] [PubMed]
25. Taman, HY; Han, MH; Taman, C.; Jin, CY; Kim, GY; Choi, IW; Kim, ND; Nam, TJ; Kwon, TK; Choi, YH Efek anti-
inflamasi fucoidan melalui penghambatan aktivasi NF-κB, MAPK dan Akt dalam sel mikroglia BV2 yang
diinduksi lipopolisakarida.Makanan Kimia. Toksikol.2011,49, 1745–1752. [CrossRef]
26. Prokofjeva, MM; Imbs, TaI; Shevchenko, NM; Spirin, PV; Tanduk, S.; Fehse, B.; Zvyagintseva, TN; Prassolov, VS
Fucoidans sebagai penghambat potensial HIV-1.Maret Narkoba2013,11, 3000–3014. [CrossRef]
27.Atashrazm, F.; Lowenthal, RM; Woods, GM; Holloway, AF; Dickinson, JL Fucoidan dan kanker: Molekul
multifungsi dengan potensi anti tumor.Maret Narkoba2015,13, 2327–2346. [CrossRef]
28. Yoo, HJ; Anda, D.-J.; Lee, K.-W. Karakterisasi dan efek imunomodulator Fraksi fukoidan berat molekul tinggi
dari sporofil Undaria pinnatifida pada tikus imunosupresi yang diinduksi siklofosfamid.Maret Narkoba
2019,17, 447. [CrossRef]
29. Pozharitskaya, ON; Shikov, AN; Obluchinskaya, ED; Vuorela, H. Farmakokinetik fucoidan setelah aplikasi
topikal pada tikus.Maret Narkoba2019,17, 687. [CrossRef]
Maret Narkoba2020,18, 571 23 dari 31

30. Zhan, E.; Chu, F.; Zhao, T.; Chai, Y.; Liang, H.; Lagu, S.; Ji, A. Penentuan fukoidan dalam plasma tikus dengan HPLC
dan penerapannya dalam farmakokinetik.Pak. J. Farmasi. Sains.2020,33, 1–9.
31. Bai, X.; Zhang, E.; Hu, B.; Liang, H.; Lagu, S.; Ji, A. Studi mekanisme penyerapan dan distribusi jaringan
fucoidan.Molekul2020,25, 1087. [CrossRef] [PubMed]
32.Krylova, NV; Ermakova, SP; Lavrov, VF; Leneva, IA; Kompanets, GG; Iunikhina, OV; Nosik, MN; Ebralidze, LK;
Falynskova, DI; Silchenko, SEBAGAI; et al. Analisis komparatif aktivitas antivirus fucoidan asli dan
termodifikasi dari ganggang coklat Fucus evanescens in vitro dan in vivo.Maret Narkoba2020, 18, 224. [
CrossRef] [PubMed]
33. Bilan, MI; Usov, AI Analisis struktur fukoidan.Nat. Melecut. Komunal.2008,3, 1639–1648. [CrossRef]
34.Silchenko, AS; Kusaykin, MI; Kurilenko, VV; Zakharenko, AM; Isakov, VV; Zaporozhets, TS; Gaza, AK;
Zvyagintseva, TN Hidrolisis fukoidan oleh fukoidanase diisolasi dari bakteri laut, ganggang Formosa.Maret
Narkoba2013,11, 2413–2430. [CrossRef]
35.Ale, MT; Mikkelsen, JD; Meyer, AS Penentu penting untuk bioaktivitas fucoidan: Tinjauan kritis tentang hubungan
struktur-fungsi dan metode ekstraksi untuk polisakarida sulfat yang mengandung fucose dari rumput laut
coklat.Maret Narkoba2011,9, 2106–2130. [CrossRef]
36. Morya, VK; Kim, J.; Kim, E.-K. Fucoidan alga: Bioaktivitas struktural dan tergantung ukuran serta
perspektifnya.Aplikasi Mikrobiol. Bioteknologi.2012,93, 71–82. [CrossRef]
37. Ustyuzhanina, NE; Ushakova, NA; Zyuzina, KA; Bilan, MI; Elizarova, AL; Somonova, OV; Madzhuga, AV; Krylov,
VB; Preobrazhenskaya, ME; Usov, AI; et al. Pengaruh fucoidans pada sistem hemostatik.Maret Narkoba
2013,11, 2444–2458. [CrossRef]
38. Zayed, A.; Knalpot, K.; Hahn, T.; Rupp, S.; Finkelmeier, D.; Burger-Kentischer, A.; Ulber, R. Karakterisasi fisikokimia
dan biologi fukoidan dari Fucus vesiculosus dimurnikan dengan kromatografi afinitas pewarna.
Maret Narkoba2016,14, 79. [CrossRef]
39. Lu, J.; Shi, KK; Chen, S.; Wang, J.; Hassouna, A.; Putih, LN; Merien, F.; Xie, M.; Kong, Q.; Li, J.; et al. Fucoidan
diekstraksi dari perbandingan pinnatifida-fisikokimia Undaria Selandia Baru terhadap lima fucoidan lainnya:
Bioaktivitas fraksi berat molekul rendah yang unik dalam garis sel kanker payudara.Maret Narkoba 2018,16, 461.
[CrossRef]
40. Chen, MC; Hsu, WL; Hwang, PA; Chou, TC Fucoidan dengan berat molekul rendah menghambat angiogenesis tumor
melalui penurunan regulasi pensinyalan HIF-1/VEGF di bawah hipoksia.Maret Narkoba2015,13, 4436–4451. [CrossRef]
41. Bouvard, C.; Galy-Fauroux, I.; Grelac, F.; Carpentier, W.; Lokajczyk, A.; Gandrill, S.; Colliec-Jouault, S.; Fisher, AM;
Helley, D. Fucoidan dengan berat molekul rendah menginduksi migrasi sel endotel melalui jalur PI3K/AKT dan
memodulasi transkripsi gen yang terlibat dalam angiogenesis.Maret Narkoba2015,13, 7446–7462. [CrossRef] [
PubMed]
42. Mandal, P.; Mateu, CG; Chattopadhyay, K.; Pujol, CA; Damonte, EB; Ray, B. Struktur fitur dan aktivitas
antivirus fucans sulfat dari rumput laut coklat Cystoseira indica.Antivirus. kimia Kemoterapi. 2007,18, 153–
162. [CrossRef] [PubMed]
43. Chevolot, L.; Mulloy, B.; Ratiskol, J.; Foucault, A.; Colliec-Jouault, S. Unit pengulangan disakarida adalah struktur
utama dalam fukoidan dari dua spesies ganggang coklat.Karbohidrat. Res.2001,330, 529–635. [CrossRef]
44. Zayed, A.; Hahn, T.; Finkelmeier, D.; Burger-Kentischer, A.; Rupp, S.; Kramer, R.; Ulber, R. Investigasi
fenomenologis aktivitas sitotoksik fucoidan diisolasi dari Fucus vesiculosus.Proses Biokimia.2019,81, 182–
187. [CrossRef]
45. Wei, X.; Cai, L.; Liu, H.; Tu, H.; Xu, X.; Zhou, F.; Zhang, konformasi rantai L. dan aktivitas biologis fucoidan
hipercabang yang berasal dari ganggang coklat dan turunannya yang didesulfasi.Karbohidrat. Polim.2019, 208,
86–96. [CrossRef]
46.Ale, MT; Maruyama, H.; Tamauchi, H.; Mikkelsen, JD; Meyer, AS Polisakarida sulfat yang mengandung fucose
dari rumput laut coklat menghambat proliferasi sel melanoma dan menginduksi apoptosis dengan
aktivasi caspase-3 in vitro.Maret Narkoba2011,9, 2605–2621. [CrossRef]
47. Cho, ML; Lee, B.-Y.; Anda, S. Hubungan antara oversulfasi dan konformasi fukoidan dengan berat molekul rendah
dan tinggi dan evaluasi aktivitas antikanker in vitro mereka.Molekul2010,16, 291–297. [CrossRef]
48. Ma, X.-T.; Matahari, X.-Y.; Yu, K.; Gui, B.-S.; Gui, Q.; Ouyang, J.-M. Pengaruh kandungan gugus sulfat pada polisakarida
rumput laut terhadap aktivitas antioksidan dan efek perbaikan organel subseluler pada sel HK-2 yang cedera. Oksida.
Kedokteran Sel. Longev.2017,2017, 2542950. [CrossRef]
Maret Narkoba2020,18, 571 24 dari 31

49. Oliveira, C.; Ferreira, SEBAGAI; Novoa-Carballal, R.; Nunes, C.; Pashkuleva, I.; Neves, NM; Coimbra, MA; Reis,
RL; Martins, A.; Silva, TH Peran Kunci Sulfasi dan Percabangan pada Aktivitas Antitumor Fucoidan.
Makromol. Biosci.2017,17, 1600340. [CrossRef]
50. Zhou, J.; Hu, N.; Wu, YL; Pan, YJ; Sun, CR Studi pendahuluan tentang karakterisasi kimia dan sifat antioksidan
polisakarida asam dari Sargassum fusiforme.Universitas J.Zhejiang. Sains. B2008,9, 721–727. [CrossRef]

51. Yang, W.-N.; Chen, P.-W.; Huang, C.-Y. Karakteristik komposisi dan evaluasi in vitro sifat antioksidan dan
neuroprotektif dari ekstrak kasar fucoidan yang dibuat dari Sargassum crassifolium yang diolah dengan puffing
kompresional.Maret Narkoba2017,15, 183. [CrossRef] [PubMed]
52. Athukorala, Y.; Jung, W.-K.; Vasanthan, T.; Jeon, Y.-J. Polisakarida antikoagulatif dari hidrolisat enzimatik
Ecklonia cava.Karbohidrat. Polim.2006,66, 184–191. [CrossRef]
53. Jesumani, V.; Du, H.; Pei, P.; Aslam, M.; Huang, N. Studi perbandingan aktivitas perlindungan kulit dari
ekstrak kaya polifenol dan ekstrak kaya polisakarida dari Sargassum vachellianum.PLo SATU2020, 15,
e0227308. [CrossRef] [PubMed]
54. Zayed, A.; Ulber, R. Fucoidans: Proses hilir dan aplikasi terkini.Maret Narkoba2020,18, 170. [CrossRef]

55. Ehrig, K.; Alban, S. Sulfat galaktofukan dari ganggang coklat Saccharina latissima—Variabilitas hasil,
komposisi struktural dan bioaktivitas.Maret Narkoba2014,13, 76–101. [CrossRef]
56. MourAo, PA; Pereira, MS Mencari alternatif untuk heparin: Fucan tersulfasi dari invertebrata laut. Tren
Kardiovaskular. Kedokteran1999,9, 225–232. [CrossRef]
57. Vilela-Silva, AC; Castro, MO; Valente, AP; Biermann, CH; Mourao, PA Fucan tersulfasi dari jeli telur bulu babi
Strongylocentrotus droebachiensis dan Strongylocentrotus pallidus yang berkerabat dekat memastikan
pembuahan spesifik spesies.J.Biol. kimia2002,277, 379–387. [CrossRef]
58. Vilela-Silva, AC; Alves, AP; Valente, AP; Vaquier, VD; MourAo, PA Struktur alfa-L-fucan tersulfasi dari lapisan
ubur-ubur telur landak laut Strongylocentrotus franciscanus: Pola preferensial 2-O- dan 4-O-sulfasi
menentukan pengenalan sel sperma.Glikobiologi1999,9, 927–933. [CrossRef]
59. Hahn, T.; Lang, S.; Ulber, R.; Muffler, K. Novel prosedur untuk ekstraksi fucoidan dari ganggang coklat.
Proses Biokimia.2012,47, 1691–1698. [CrossRef]
60. Jiao, G.; Yu, G.; Zhang, J.; Ewart, HS Struktur Kimia dan Bioaktivitas Polisakarida Sulfat dari Alga Laut.Maret
Narkoba2011,9, 196–223. [CrossRef]
61. Patankar, MS; Oehninger, S.; Barnett, T.; Williams, RL; Clark, GF Struktur yang direvisi untuk fucoidan dapat
menjelaskan beberapa aktivitas biologisnya.J.Biol. kimia1993,268, 21770–21776. [PubMed]
62. Bilan, MI; Grachev, AA; Shashkov, SEBAGAI; Tuy, TTT; Van, TTT; Ly, BM; Nifantiev, NE; Usov, AI Investigasi
pendahuluan dari fraksi galaktofukan yang sangat sulfat yang diisolasi dari alga coklat Sargassum
polycystum.Karbohidrat. Res.2013,377, 48–57. [CrossRef] [PubMed]
63. Fletcher, SDM; Biller, P.; Ross, AB; Adams, JMM Variasi musiman fukoidan dalam tiga spesies makroalga
coklat.Alga Res.2017,22, 79–86. [CrossRef]
64. Cumashi, A.; Ushakova, NA; Preobrazhenskaya, ME; D'Incecco, A.; Piccoli, A.; Totani, L.; Tinari, N.;
Morozevich, GE; Berman, AE; Bilan, MI; et al. Sebuah studi perbandingan aktivitas anti-inflamasi,
antikoagulan, antiangiogenik, dan antiadhesif dari sembilan fukoidan berbeda dari rumput laut coklat.
Glikobiologi 2007,17, 541–552. [CrossRef] [PubMed]
65. Duarte, AKU; Cardoso, MA; Noseda, MD; Cerezo, AS Studi struktural pada fukoidan dari rumput laut coklat
Sargassum stenophyllum.Karbohidrat. Res.2001,333, 281–293. [CrossRef]
66.Ale, MT; Meyer, AS Fucoidans dari rumput laut coklat: Pembaruan pada struktur, teknik ekstraksi dan penggunaan
enzim sebagai alat untuk elusidasi struktural.RSC Adv.2013,3, 8131–8141. [CrossRef]
67. Usoltseva, RV; Shevchenko, NM; Malyarenko, OS; Anastyuk, SD; Kasprik, AE; Zvyagintsev, NV; Ermakova, SP
Fucoidans dari ganggang coklat Laminaria longipes dan Saccharina cichorioides: Karakteristik struktural,
antikanker dan aktivitas radiosensitisasi in vitro.Karbohidrat. Polim.2019,221, 157–165. [CrossRef]

68. Wang, J.; Zhang, Q.; Zhang, Z.; Zhang, H.; Niu, X. Studi struktural pada sulfat fucogalactan baru yang diekstraksi
dari rumput laut coklat Laminaria japonica.Int. J.Biol. Makromol.2010,47, 126–131. [CrossRef]
Maret Narkoba2020,18, 571 25 dari 31

69. Zhu, Z.; Zhu, B.; Ai, C.; Lu, J.; Wu, SL; Liu, Y.; Wang, L.; Yang, J.; Lagu, S.; Liu, X. Pengembangan dan
penerapan metode HPLC-MS/MS untuk kuantisasi kondroitin sulfat fukosilasi dan fukoidan dalam
teripang.Karbohidrat. Res.2018,466, 11–17. [CrossRef]
70. Yu, L.; Xue, C.; Chang, Y.; Xu, X.; Ge, L.; Liu, G.; Wang, Y. Penjelasan struktur fucoidan terdiri dari unit
pengulangan tetrafucose baru dari teripang Thelenota ananas.Makanan Kimia.2014,146, 113–119. [
CrossRef]
71. Dubois, M.; Gilles, K.; Hamilton, JK; Rebers, PA; Smith, F. Sebuah metode kolorimetri untuk penentuan gula.
Alam1951,168, 167. [CrossRef] [PubMed]
72. Smogyi, M. Catatan tentang penentuan gula.J.Biol. kimia1952,195, 19–23. [PubMed]
73. Shao, Y.; Lin, AH Peningkatan kuantifikasi gula pereduksi dengan miniaturisasi uji Somogyi-Nelson menggunakan
pelat mikrotiter.Makanan Kimia.2018,240, 898–903. [CrossRef] [PubMed]
74. Dische, Z.; Shettles, LB Reaksi warna spesifik metilpentosa dan mikrometode spektrofotometri untuk
penentuannya.J.Biol. kimia1948,175, 595–603. [PubMed]
75. Djurdjić, V.; Mandić, L. Metode spektrofotometri untuk penentuan simultan heksosa dan fukosa yang
terikat protein dengan campuran L-sistein dan fenol.Anal. Biokimia.1990,188, 222–227. [CrossRef]
76. Hahn, T.; Schulz, M.; Stadtmüller, R.; Zayed, A.; Knalpot, K.; Lang, S.; Ulber, R. Pewarna kationik untuk
penentuan spesifik polisakarida sulfat.Anal. Lett.2016,49, 1948–1962. [CrossRef]
77. Warttinger, U.; Giese, C.; Harenberg, J.; Krämer, R. Kuantifikasi langsung fucoidans yang berasal dari ganggang coklat
dalam plasma manusia dengan uji probe fluoresen.arXiv2016, arXiv:1608.00108.
78. Zayed, A.; Dienemann, C.; Giese, C.; Kramer, R.; Ulber, R. Turunan perylene diimide amobil untuk pemurnian
fucoidan dari ekstrak ganggang coklat kasar.Proses Biokimia.2018,65, 233–238. [CrossRef]
79. Jiao, Q.; Liu, Q. Metode spektrofotometri sederhana untuk estimasi konsentrasi alga polisakarida.
J.Agri. Makanan Kimia.1999,47, 996–998. [CrossRef]
80. Rappold, M.; Warttinger, AS; Krämer, R. A Probe fluoresen untuk glikosaminoglikan diterapkan untuk mendeteksi
dermatan sulfat dengan uji campuran dan baca.Molekul2017,22, 768. [CrossRef]
81. Zayed, A.Senyawa Bioaktif dari Sumber Laut; TU Kaiserslautern: Kaiserslautern, Jerman, 2018.
82. Descamps, V.; Colin, S.; Lahaye, M.; Selai, M.; Richard, C.; Potin, P.; Barbeyron, T.; Yvin, JC; Kloareg, B. Isolasi
dan kultur bakteri laut yang mendegradasi fucan tersulfasi dari ganggang coklat laut.Maret Biotechnol.
2006,8, 27–39. [CrossRef] [PubMed]
83. ZiHaiłkowska, D.; Kaniewska, A.; Lamkiewicz, J.; Shyichuk, A. Penentuan karaginan dengan cara titrasi
fotometrik dengan pewarna biru metilen dan biru toluidin.Karbohidrat. Polim.2017,165, 1–6. [CrossRef] [
PubMed]
84. Mak, W.; Wang, SK; Liu, T.; Hamid, N.; Li, Y.; Lu, J.; Putih, WL Potensi antiproliferasi dan kandungan fukoidan
yang diekstraksi dari sporofil Undaria pinnatifida Selandia Baru.Depan. Nutr.2014,1, 9. [CrossRef] [
PubMed]
85. Kim, JM; Nguyen, L.; Barr, MF; Morabito, M.; Stringer, D.; Fitton, JH; Mowery, KA Penentuan kuantitatif
fukoidan menggunakan elektroda membran peka poliion.Anal. Chim. Acta2015,877, 1–8. [CrossRef]

86. Dodgson, KS; Price, RG Catatan tentang penentuan kandungan ester sulfat dari polisakarida sulfat.
Biokimia. J.1962,84, 106–110. [CrossRef]
87. Dodgson, KS Penentuan sulfat anorganik dalam studi tentang hidrolisis enzim dan non-enzim karbohidrat
dan ester sulfat lainnya.Biokimia. J.1961,78, 312–319. [CrossRef]
88. Oliveira, RM; CAmara, RBG; Monte, JFS; Viana, RLS; Melo, KRT; Queiroz, MF; Filgueira, LGA; Oyama, LM;
Rocha, HAO Fucoidan komersial dari Fucus vesiculosus dapat dikelompokkan menjadi agen
antiadipogenik dan adipogenik.Maret Narkoba2018,16, 193. [CrossRef]
89. Camara, RBG; Costa, LS; Fidelis, GP; Nobre, LTDB; Dantas-Santos, N.; Cordeiro, SL; Costa, MSSP; Alves, LG;
Rocha, HAO Heterofucans dari rumput laut coklat Canistrocarpus cervicornis dengan aktivitas
antikoagulan dan antioksidan.Maret Narkoba2011,9, 124–138. [CrossRef]
90. Cuong, HD; Tuy, TTT; Huong, TT; Ly, BM; Van, TTT Struktur dan aktivitas hipolipidemik fukoidan yang diekstraksi
dari rumput laut coklat Sargassum henslowianum.Nat. Melecut. Res.2015,29, 411–415. [CrossRef]
91. Galermo, AG; Nandita, E.; Barboza, M.; Amicucci, MJ; Vo, T.-TT; Lebrilla, CB Pendekatan spektrometri massa
kromatografi cair-tandem untuk menentukan hubungan glikosidik.Anal. kimia 2018,90, 13073–13080. [
CrossRef]
Maret Narkoba2020,18, 571 26 dari 31

92. Filisetti-Cozzi, TMCC; Carpita, NC Pengukuran asam uronat tanpa gangguan gula netral. Anal. Biokimia.1991
,197, 157–162. [CrossRef]
93. Blumenkrantz, N.; Asboe-Hansen, G. Metode baru untuk penentuan kuantitatif asam uronat. Anal. Biokimia.
1973,54, 484–489. [CrossRef]
94. Pahit, T.; Muir, HM Reaksi karbazol asam uronat termodifikasi.Anal. Biokimia.1962,4, 330–334. [CrossRef]
95. Corradini, C.; Cavazza, A.; Bignardi, C. Kromatografi penukar anion kinerja tinggi digabungkan dengan deteksi
elektrokimia berdenyut sebagai alat yang ampuh untuk mengevaluasi karbohidrat dari minat makanan: Prinsip
dan aplikasi.Int. J. Karbohidrat. kimia2012,2012, 487564. [CrossRef]
96. Zhang, Z.; Khan, NM; Nunez, KM; Catur, EK; Szabo, CM Analisis monosakarida lengkap dengan kromatografi
penukar anion kinerja tinggi dengan deteksi amperometrik berdenyut.Anal. kimia2012, 84, 4104–4110. [
CrossRef]
97. Balboa, EM; Rivas, S.; Moure, A.; Dominguez, H.; Parajo, JC Ekstraksi simultan dan depolimerisasi fukoidan
dari Sargassum muticum dalam media air.Maret Narkoba2013,11, 4612–4627. [CrossRef]
98. FlHairez-FernAndez, N.; Balboa, EM; DomSayanguez, H. Ekstraksi dan pemurnian fukoidan dari sumber laut. Di
dalamEnsiklopedia Bioteknologi Kelautan; Kim, SK, Ed.; John Wiley & Sons Ltd.: Hoboken, NJ, AS, 2020; hlm. 1093–
1125. [CrossRef]
99. Spadari, CDC; Lopes, LB; Ishida, K. Potensi penggunaan pembawa berbasis alginat sebagai sistem pengiriman antijamur.
Depan. Mikrobiol.2017,8, 97. [CrossRef]
100. Bouissil, S.; El Alaoui-Talibi, Z.; Pierre, G.; Michaud, P.; El Modafar, C.; Delattre, C. Penggunaan alginat yang diekstraksi dari
ganggang coklat Maroko untuk merangsang pertahanan alami pada akar kurma.Molekul2020,25, 720. [CrossRef]

101. Belattmania, Z.; Kaidi, S.; El Atouani, S.; Katif, C.; Bentiss, F.; Jama, C.; Reani, A.; Sabour, B.; Vasconcelos, V.
Isolasi dan karakterisasi FTIR-ATR dan 1H NMR alginat dari spesies alginofit utama di Pantai Atlantik
Maroko.Molekul2020,25, 4335. [CrossRef]
102. Deniaud-Bouët, E.; Kervarec, N.; Michel, G.; Tonon, T.; Kloareg, B.; Hervé,C. Fraksinasi kimia dan enzimatik
dinding sel dari Fucales: Wawasan ke dalam struktur matriks ekstraseluler ganggang coklat.
Ann. Bot.2014,114, 1203–1216. [CrossRef]
103. Malyarenko, OS; Usoltseva, RV; Zvyagintseva, TN; Ermakova, SP Laminaran dari alga coklat Dictyota dichotoma
dan turunan sulfatnya sebagai radioprotektor dan radiosensitizer dalam terapi melanoma.Karbohidrat. Polim.
2019,206, 539–547. [CrossRef] [PubMed]
104. Takei, MN; Kuda, T.; Taniguchi, M.; Nakamura, S.; Hajime, T.; Kimura, B. Deteksi dan isolasi alginat dengan
berat molekul rendah dan bakteri usus yang rentan terhadap laminaran dari tikus ICR.Karbohidrat. Polim.
2020,238, 116205. [CrossRef] [PubMed]
105. Lowry, OH; Rosebrough, NJ; Farr, AL; Randall, pengukuran RJ Protein dengan reagen fenol Folin.
J.Biol. kimia1951,193, 265–275. [PubMed]
106. Wu, Q.; Ibu, S.; Xiao, H.; Zhang, M.; Cai, J. Pemurnian dan struktur sekunder fucoidanase dari Fusarium sp. LD8.
Jelas. Pelengkap Berbasis. Alternatif. Kedokteran2011,2011, 196190. [CrossRef]
107. Lu, T.-S.; Yiao, S.-Y.; Lim, K.; Jensen, RV; Hsiao, L.-L. Interpretasi variasi biologis dan mekanik antara metode
Lowry versus Bradford untuk kuantifikasi protein.N.Am. J.Med. Sains.2010,2, 325–328. [CrossRef] [PubMed
]
108. Brady, PN; Macnaughtan, MA Evaluasi uji kolorimetri untuk menganalisis protein yang dimetilasi secara
reduktif: Bias dan wawasan mekanistik.Anal. Biokimia.2015,491, 43–51. [CrossRef]
109. Bradford, MM Metode yang cepat dan sensitif untuk kuantisasi jumlah mikrogram protein dengan memanfaatkan
prinsip pengikatan protein-pewarna.Anal. Biokimia.1976,72, 248–254. [CrossRef]
110. Matsushita, S.; Iwami, N.; Nitta, Y. Estimasi kolorimetri asam amino dan peptida dengan reagen fenol
Folin.Anal. Biokimia.1966,16, 365–371. [CrossRef]
111. Peterson, GL Tinjauan metode kuantisasi protein fenol folin dari lowry, rosebrough, farr dan randall. Anal.
Biokimia.1979,100, 201–220. [CrossRef]
112. Santos, SAO; Félix, R.; Pais, ACS; Rocha, SM; Silvestre, AJD Pencarian senyawa fenolik dari makroalga:
Tinjauan metodologi ekstraksi dan identifikasi.Biomolekul2019,9, 847. [CrossRef]
113. Rohwer, K.; Neupane, S.; Bittkau, KS; Galarza Pérez, M.; Dörschmann, P.; Roider, J.; Alban, S.; Klettner, A. Efek
ekstrak mentah Fucus distichus subspesies evanescens fucoidan pada sel epitel pigmen retina - implikasi untuk
digunakan dalam degenerasi makula terkait usia.Maret Narkoba2019,17, 538. [CrossRef] [PubMed]
Maret Narkoba2020,18, 571 27 dari 31

114. Chale-Dzul, J.; Moo-Puc, R.; Robledo, D.; Freile-PelegrSayan, Y. Efek hepatoprotektif dari fucoidan dari rumput laut
coklat Turbinaria tricostata.J.Appl. Phycol.2015,27, 2123–2135. [CrossRef]
115. Ferreira, RM; Ramalho Ribeiro, A.; Patinha, C.; Silva, AMS; Cardoso, SM; Costa, R. Einetik ekstraksi air dari
senyawa bioaktif Fucus vesiculosus.Molekul2019,24, 3408. [CrossRef] [PubMed]
116. Lee, J.; Jung, Y.; Shin, J.-H.; Kim, HK; Bulan, SM; Ryu, DH; Hwang, G.-S. Profil metabolit sekunder spesies
Curcuma tumbuh di lokasi berbeda menggunakan GC/TOF dan UPLC/Q-TOF MS.Molekul2014,19, 9535–
9551. [CrossRef] [PubMed]
117. Hahn, T.; Zayed, A.; Kovacheva, M.; Stadtmüller, R.; Lang, S.; Knalpot, K.; Kromatografi afinitas Ulber, R. Dye untuk
pemurnian fukoidan yang cepat dan sederhana dari ganggang coklat laut.Eng. Sains Kehidupan. 2016,16, 78–87.
[CrossRef]
118. Szekalska, M.; Sosnowska, K.; Czajkowska-Kośnik, A.; Winnicka, K. Kalsium klorida memodifikasi mikropartikel alginat yang
diformulasikan dengan proses pengeringan semprot: Sebuah strategi untuk memperpanjang pelepasan obat yang larut secara
bebas.Bahan2018,11, 1522. [CrossRef] [PubMed]
119. Nguyen, TT; Mikkelsen, MD; Tran, VHN; Trang, VTD; Rhein-Knudsen, N.; Holck, J.; Rasin, AB; Cao, HTT; Van,
TTT; Meyer, AS Ekstraksi fukoidan dengan bantuan enzim dari makroalga coklat Fucus distichus subsp.
evanescens dan Saccharina latissima.Maret Narkoba2020,18, 296. [CrossRef]
120. Dörschmann, P.; Mikkelsen, MD; Ini, TN; Roider, J.; Meyer, SEBAGAI; Klettner, A. Efek dari metode ekstraksi berbantuan
enzim yang baru dikembangkan pada aktivitas biologis fukoidan dalam sel okular.Maret Narkoba2020, 18, 282. [
CrossRef]
121. Catarino, MD; Silva, AMS; Cardoso, SM Kandungan fisikokimia dan aktivitas biologis Fucus spp.Maret
Narkoba2018,16, 249. [CrossRef]
122. Aulaé,JP; Landry, D.; Fournier, A.; Beaudry, M.; Leblond, FA Metode kuantifikasi alginat dalam mikrokapsul.
Transplantasi Sel.1993,2, 429–436. [CrossRef]
123. Abdella, AA; Ulber, R.; Zayed, A. Chitosan-toluidine blue beads untuk pemurnian fukoidan.Karbohidrat.
Polim.2020,231, 115686. [CrossRef] [PubMed]
124. van Weelden, G.; Bobinski, M.; Okla, K.; van Weelden, WJ; Romano, A.; Pijnenborg, Struktur dan Aktivitas JMA
Fucoidan dalam Kaitannya dengan Mekanisme Anti-Kanker.Maret Narkoba2019,17, 32. [CrossRef] [PubMed]
125. Neupane, S.; Bittkau, KS; Alban, S. Distribusi ukuran dan konformasi rantai dari enam fukoidan yang berbeda
menggunakan kromatografi eksklusi ukuran dengan beberapa deteksi.J. Kromatografi. A2020,1612, 460658. [CrossRef]
[PubMed]
126. Patkar, SN; Panzade, PD Metode cepat dan efisien untuk analisis berat molekul pulp selulosa, produk
dalam proses dan produk jadi.Anal. Metode2016,8, 3210–3215. [CrossRef]
127. Scott, D.; Coleman, PJ; Mason, RM; Levick, JR Aksi polisakarida dengan massa rata-rata yang sama tetapi volume
molekul berbeda dan muatan pada drainase cairan melalui interstitium sinovial pada lutut kelinci.
J. Physiol.2000,528, 609–618. [CrossRef]
128. Somasundaram, SN; Shanmugam, S.; Subramanian, B.; Jaganathan, R. Efek sitotoksik fucoidan yang diekstraksi
dari Sargassum cinereum pada garis sel kanker usus besar HCT-15.Int. J.Biol. Makromol.2016,91, 1215–1223. [
CrossRef]
129. Manns, D.; Deutschle, AL; Saake, B.; Meyer, AS Metodologi penentuan kuantitatif komposisi karbohidrat
rumput laut coklat (Laminariaceae).RSC Adv.2014,4, 25736–25746. [CrossRef]
130. Kim, WJ; Taman, JW; Taman, JK; Choi, DJ; Park, Pemurnian YI dan Karakterisasi Fucoidanase (FNase S) dari
Bakteri Laut Sphingomonas paucimobilis PF-1.Maret Narkoba2015,13, 4398–4417. [CrossRef]

131. Bruhn, A.; Janicek, T.; Manns, D.; Nielsen, MM; Balsby, TJS; Meyer, SEBAGAI; Rasmussen, MLB; Hou, X.; Saake, B.;
Goke, C.; et al. Kandungan fucoidan mentah dalam dua spesies rumput laut Atlantik Utara, Saccharina latissima
dan Laminaria digitata-variasi musiman dan pengaruh faktor lingkungan.J.Appl. Phycol.2017,29, 3121–3137. [
CrossRef]
132. Van Vliet, DM; Palakawong Na Ayudthaya, S.; Diop, S.; Villanueva, L.; Stams, AJM; SAnchez-Andrea, I.
Degradasi anaerob polisakarida tersulfasi oleh dua strain baru Kiritimatiellales yang diisolasi dari Black
Sedimen laut.Depan. Mikrobiol.2019,10, 253. [CrossRef]
133. Monsur, HA; Jaswir, I.; Simsek, S.; Di tengah, A.; Alam, Z. Struktur kimia polisakarida sulfat dari rumput laut
coklat (Turbinaria turbinata).Int. J. Makanan Prop.2017,20, 1457–1469. [CrossRef]
Maret Narkoba2020,18, 571 28 dari 31

134. Ruhmann, B.; Schmid, J.; Sieber, V. Analisis karbohidrat cepat melalui kromatografi cair ditambah dengan ultra violet dan
deteksi perangkap ion ionisasi elektrospray dalam format 96-sumur.J. Kromatografi. A2014,1350, 44–50. [CrossRef] [
PubMed]
135. Menshova, RV; Anastyuk, SD; Ermakova, SP; Shevchenko, NM; Isakov, VI; Zvyagintseva, TN Struktur dan aktivitas
antikanker in vitro dari galaktofukan sulfat dari ganggang coklat Alaria angusta.Karbohidrat. Polim. 2015,132,
118–125. [CrossRef] [PubMed]
136. Zhang, BW; Xu, JL; Zhang, H.; Zhang, Q.; Lu, J.; Wang, JH Penjelasan struktur polisakarida dari Umbilicaria
esculenta dan aktivitas imunostimulasinya.PLo SATU2016,11, e0168472. [CrossRef] [PubMed]

137. Daniel, R.; Berteau, O.; Chevrolet, L.; Varenne, A.; Gareil, P.; Goasdoue, N. Regioselective desulfation dari
sulfat L-fucopyranoside oleh sulfoesterase baru dari moluska laut Pecten maximus: Aplikasi untuk studi
struktural alga fucoidan (Ascophyllum nodosum).eur. J. Biochem.2001,268, 5617–5626. [CrossRef]

138. Thinh, PD; Menshova, RV; Ermakova, SP; Anastyuk, SD; Ly, BM; Zvyagintseva, TN Karakteristik struktural
dan aktivitas antikanker fucoidan dari alga coklat Sargassum mcclurei.Maret Narkoba 2013,11, 1456–
1476. [CrossRef]
139. Chizhov, AO; Dell, A.; Morris, SDM; Haslam, SM; McDowell, RA; Shashkov, SEBAGAI; Nifant'ev, NE;
Khatuntseva, EA; Usov, AI Kajian fukoidan dari filum Chorda rumput laut coklat.Karbohidrat. Res. 1999,320
, 108–119. [CrossRef]
140. Luo, D.; Wang, Z.; Nie, K. Karakterisasi struktural polisakarida baru dari Sargassum thunbergii dan efek
antioksidan dan antiperadangannya.PLo SATU2019,14, e0223198. [CrossRef]
141. Luo, D.; Wang, Z.; Li, Z.; Yu, X.-Q. Struktur heteropolisakarida terjerat dari Pholidota chinensis Lindl dan
sifat antioksidan dan anti kankernya.Int. J.Biol. Makromol.2018,112, 921–928. [CrossRef]
142. Tako, M. Karakteristik reologi fukoidan yang diisolasi dari Cladosiphon okamuranus yang dibudidayakan secara
komersial.Bot. Merusak.2003,46, 461–465. [CrossRef]
143. Cho, M.; Choi, WS; Anda, S. Reologi geser yang stabil dan dinamis dari campuran pati fucoidan-buckwheat. Starch-
Starke2009,61, 282–290. [CrossRef]
144. KOO, J.-G.; JO, K.-S.; TAMAN, J.-H. Sifat reologi fucoidans dari Laminaria religiosa, sporofil Undaria
pinnatifida, Hizikia fusiforme dan Sagassum fulvellum di Korea.Ikan J. Korea. Aquat. Sains.1997, 30, 329–
333.
145. Sezer, AD; Cevher, E. Fucoidan: Biopolimer serbaguna untuk aplikasi biomedis. Di dalamImplan Aktif dan Scafftua
untuk Regenerasi Jaringan; Peloncat: Berlin/Heidelberg, Jerman, 2011; hlm. 377–406.
146. Citkowska, A.; Szekalska, M.; Winnicka, K. Kemungkinan pemanfaatan fucoidan dalam pengembangan
bentuk sediaan farmasi.Maret Narkoba2019,17, 458. [CrossRef]
147. Rioux, LE; Turgeon, SL; Beaulieu, M. Karakterisasi reologi polisakarida yang diekstraksi dari rumput laut coklat.
J.Sci. Pertanian Pangan.2007,87, 1630–1638. [CrossRef]
148.Lee, KY; Mooney, DJ Alginate: Properti dan aplikasi biomedis.Prog. Polim. Sains.2012,37, 106–126. [CrossRef
]
149. Dobrinčić, A.; Balbino, S.; Zoric, Z.; Pedisić, S.; Bursać Kovačević, D.; Elez Garofulić, I.; Dragović-Uzelac, V.
Teknologi canggih untuk ekstraksi polisakarida alga coklat laut.Maret Narkoba2020,18, 168. [CrossRef] [
PubMed]
150. Cunha, L.; Grenha, A. Polisakarida rumput laut tersulfasi sebagai bahan multifungsi dalam aplikasi penghantaran
obat.Maret Narkoba2016,14, 42. [CrossRef]
151. Chollet, L.; Saboural, P.; Chauvierre, C.; Villemin, JN; Letourneur, D.; Chaubet, F. Fucoidans dalam pengobatan nano. Maret
Narkoba2016,14, 145. [CrossRef]
152. Yuan, Y.; Macquarrie, D. Microwave membantu ekstraksi polisakarida sulfat (fucoidan) dari Ascophyllum
nodosum dan aktivitas antioksidannya.Karbohidrat. Polim.2015,129, 101–107. [CrossRef]
153. Huang, C.-Y.; Kuo, C.-H.; Chen, P.-W. Pretreatment kompresi-puffing meningkatkan efek neuroprotektif dari
fucoidans dari rumput laut coklat Sargassum hemiphyllum pada apoptosis yang diinduksi 6-hidroksidopamin
dalam sel SH-SY5Y.Molekul2017,23, 78. [CrossRef]
154. Saboural, P.; Chaubet, F.; Rouzet, F.; Al-Shoukr, F.; Azzouna, RB; Bouchemal, N.; Picton, L.; Louedec, L.; Maire, M.;
Rolland, L.; et al. Pemurnian fucoidan dengan berat molekul rendah untuk pencitraan molekuler SPECT dari
infark miokard.Maret Narkoba2014,12, 4851–4867. [CrossRef] [PubMed]
Maret Narkoba2020,18, 571 29 dari 31

155. Marinval, N.; Saboural, P.; Haddad, O.; Maire, M.; Bassand, K.; Geinguenaud, F.; Djaker, N.; Ben Akrout, K.;
Lamy de la Chapelle, M.; Robert, R.; et al. Identifikasi potensi pro-angiogenik dan mekanisme serapan
seluler dari fraksi fucoidan LMW yang sangat sulfat dari Ascophyllum nodosum.Maret Narkoba2016, 14,
185. [CrossRef] [PubMed]
156. Hifney, AF; Fawzy, MA; Abdel-Gawad, KM; Gomaa, M. Optimasi industri ekstraksi fukoidan dari Sargassum
sp. dan aktivitas antioksidan dan pengemulsi yang potensial.Hidrokol Makanan.2016,54, 77–88. [CrossRef]

157. Rodriguez-Jasso, RM; Mussato, SI; Pastrana, L.; Aguilar, CN; Teixeira, JA Ekstraksi polisakarida sulfat (fucoidan)
dengan bantuan gelombang mikro dari rumput laut coklat.Karbohidrat. Polim.2011,86, 1137–1144. [CrossRef]

158. Pavlenko, AF; Belogortseva, NI; Kalinovskii, AI; Ovodov, YS Penentuan posisi gugus sulfat dalam
polisakarida sulfat.kimia Nat. Komp.1976,12, 515–518. [CrossRef]
159. Synytsya, A.; Kim, W.-J.; Kim, S.-M.; Pohl, R.; Synytsya, A.; Kvasnička, F.; PolisiSayakovA,J.; Park, Y. Struktur
dan aktivitas antitumor fukoidan diisolasi dari sporofil rumput laut coklat Korea Undaria pinnatifida.
Karbohidrat. Polim.2010,81, 41–48. [CrossRef]
160. Bilan, MI; Shashkov, SEBAGAI; Usov, AI Struktur xylofucan tersulfasi dari ganggang coklat Punctaria
plantaginea.Karbohidrat. Res.2014,393, 1–8. [CrossRef]
161. Silchenko, AS; Rasin, AB; Kusaykin, MI; Malyarenko, OS; Shevchenko, NM; Zueva, AO; Kalinovsky, AI;
Zvyagintseva, TN; Ermakova, SP Modifikasi Native Fucoidan dari Fucus Evanescens oleh Fucoidanase
Rekombinan dari Bakteri Laut Formosa Algae.Karbohidrat. Polim.2018,193, 189–195. [CrossRef]

162. Bilan, MI; Grachev, AA; Ustuzhanina, NE; Shashkov, SEBAGAI; Nifantiev, NE; Usov, AI Fraksi yang sangat
teratur dari fucoidan dari rumput laut coklat Fucus distichus L.Karbohidrat. Res.2004,339, 511–517. [
CrossRef]
163. Rasin, AB; Silchenko, SEBAGAI; Kusaykin, MI; Malyarenko, OS; Zueva, AO; Kalinovsky, AI; Airong, J.; Surits, VV;
Ermakova, SP Transformasi enzimatik dan aktivitas anti tumor dari fucoidan Sargassum horneri. Karbohidrat.
Polim.2020,246, 116635. [CrossRef]
164. Bezerra, F.; Pomin, V. Mekanisme struktural yang terlibat dalam hidrolisis asam ringan dari fucan sulfat berulang
tetrasakarida yang ditentukan. Di dalamTeknologi Enzimatik untuk Polisakarida Laut, edisi pertama.; Trincone,
A., Ed.; Grup Taylor & Francis: Boca Raton, FL, AS, 2019; hlm. 111–128. [CrossRef]
165. Palanisamy, S.; Vinosha, M.; Marudhupandi, T.; Rajasekar, P.; Prabhu, NM Isolasi fucoidan dari ganggang
coklat Sargassum polycystum: Karakterisasi struktural, aktivitas antioksidan dan antikanker in vitro.
Int. J.Biol. Makromol.2017,102, 405–412. [CrossRef] [PubMed]
166. Bilan, MI; Grachev, AA; Ustuzhanina, NE; Shashkov, SEBAGAI; Nifantiev, NE; Usov, AI Struktur fucoidan dari
rumput laut coklat Fucus evanescens C.Ag.Karbohidrat. Res.2002,337, 719–730. [CrossRef]
167. Bilan, MI; Grachev, AA; Shashkov, SEBAGAI; Nifantiev, NE; Usov, AI Struktur fucoidan dari rumput laut
coklat Fucus serratus L.Karbohidrat. Res.2006,341, 238–245. [CrossRef] [PubMed]
168. Vishchuk, OS; Ermakova, SP; Zvyagintseva, TN Polisakarida tersulfasi dari rumput laut coklat Saccharina japonica
dan Undaria pinnatifida: Isolasi, karakteristik struktural, dan aktivitas antitumor.Karbohidrat. Res. 2011,346,
2769–2776. [CrossRef] [PubMed]
169. Badrinathan, S.; Shiju, TM; Sharon Christa, SEBAGAI; Arya, R.; Pragasam, V. Pemurnian dan karakterisasi
struktural polisakarida sulfat dari Sargassum myriocystum dan kemanjurannya dalam mengais radikal
bebas.India J. Pharm. Sains.2012,74, 549–555. [CrossRef]
170. Tako, M.; Nakada, T.; Hongou, F. Karakterisasi kimia fucoidan dari Nemacystus decipiens (Itomozuku) yang
dibudidayakan secara komersial.Biosci. Bioteknologi. Biokimia.1999,63, 1813–1815. [CrossRef] [PubMed]
171. Bandyopadhyay, SS; Navid, MH; Ghosh, T.; Schnitzler, P.; Ray, B. Fitur struktural dan aktivitas antivirus in
vitro dari polisakarida sulfat dari Sphacelaria indica.Fitokimia2011,72, 276–283. [CrossRef]
172. Bilan, MI; Grachev, AA; Shashkov, SEBAGAI; Kelly, M.; Sanderson, CJ; Nifantiev, NE; Usov, AI Studi lebih
lanjut tentang komposisi dan struktur preparat fukoidan dari alga coklat Saccharina latissima.
Karbohidrat. Res.2010,345, 2038–2047. [CrossRef]
173. Lim, SJ; Wan Aida, WM; Maskat, SAYA; Latip, J.; Badri, KH; Hasan, O.; Yamin, BM Karakterisasi fucoidan yang
diekstraksi dari Sargassum binderi Malaysia.Makanan Kimia.2016,209, 267–273. [CrossRef]
Maret Narkoba2020,18, 571 30 dari 31

174. Cai, Y.; Yang, W.; Yin, R.; Zhou, L.; Li, Z.; Wu, M.; Zhao, J. Antikoagulan fucan sulfate dengan hexasaccharide
unit berulang dari teripang Holothuria albiventer.Karbohidrat. Res.2018,464, 12–18. [CrossRef]
175. Yoshida, K.; Minami, Y.; Nemoto, H.; Numata, K.; Yamanaka, E. Struktur DHG, glikosaminoglikan
terdepolimerisasi dari teripang, Stichopus japonicus.Lett tetrahedron.1992,33, 4959–4962. [CrossRef]
176. Shang, F.; Mou, R.; Zhang, Z.; Gao, N.; Lin, L.; Li, Z.; Wu, M.; Zhao, J. Analisis struktural dan aktivitas antikoagulan
dari tiga sulfat fucan yang sangat teratur sebagai penghambat faktor intrinsik Xase baru.Karbohidrat. Polim.
2018,195, 257–266. [CrossRef] [PubMed]
177. Thanh, TT; Tran, VT; Yuguchi, Y.; Bui, LM; Nguyen, TT Struktur fukoidan dari rumput laut coklat Turbinaria ornata
seperti yang dipelajari dengan teknik spektrometri massa ionisasi elektrospray (ESIMS) dan hamburan sinar-X
sudut kecil (SAXS).Maret Narkoba2013,11, 2431–2443. [CrossRef]
178. Anastyuk, SD; Shevchenko, NM; Nazarenko, EL; Imbs, TI; Gorbach, VI; Dimitrenok, PS; Zvyagintseva, TN
Analisis struktural dari fucan yang sangat sulfat dari alga coklat Laminaria cichorioides dengan tandem
MALDI dan spektrometri massa ESI.Karbohidrat. Res.2010,345, 2206–2212. [CrossRef] [PubMed]
179. Anastyuk, SD; Shevchenko, NM; Gorbach, VI Analisis fukoidan dengan tandem MALDI-TOF dan Spektrometri
massa ESI.Metode Mol. Biol.2015,1308, 299–312. [CrossRef] [PubMed]
180. Lang, Y.; Zhao, X.; Liu, L.; Yu, G. Aplikasi spektrometri massa untuk analisis struktural oligosakarida laut.
Maret Narkoba2014,12, 4005–4030. [CrossRef]
181. Anastyuk, SD; Imbs, TI; Dimitrenok, PS; Zvyagintseva, TN Analisis spektrometri massa cepat dari fukoidan baru,
diekstraksi dari ganggang coklat Coccophora langsdorfii.Sains. Dunia J.2014,2014, 972450. [CrossRef]
182. Anastyuk, SD; Shevchenko, NM; Dimitrenok, PS; Zvyagintseva, TN Kesamaan struktural fucoidans dari ganggang
coklat Silvetia babingtonii dan Fucus evanescens, ditentukan oleh spektrometri massa MALDI-TOF tandem.
Karbohidrat. Res.2012,358, 78–81. [CrossRef]
183. Domon, B.; Costello, CE Nomenklatur sistematis untuk fragmentasi karbohidrat dalam spektrum FAB-MS/MS dari
glikokonjugat.Glikokonj. J.1988,5, 397–409. [CrossRef]
184. Tissot, B.; Salpin, J.-Y.; Martinez, M.; Gaigeot, M.-P.; Daniel, R. Diferensiasi konstituen isomer l-fucose
fucoidan sulfat oleh CE-ESIMS dan pemodelan molekuler.Karbohidrat. Res.2006,341, 598–609. [CrossRef]
185. Shevchenko, NM; Anastyuk, SD; Menshova, RV; Vishchuk, OS; Isakov, VI; Zadorozhny, PA; Sikorskaya, TV;
Zvyagintseva, TN Studi lebih lanjut tentang struktur fukoidan dari ganggang coklat Saccharina
gurjanovae.Karbohidrat. Polim.2015,121, 207–216. [CrossRef] [PubMed]
186. Manivasagan, P.; Oh, J. Produksi fucoidanase baru untuk sintesis hijau nanopartikel emas oleh
Streptomyces sp. dan efek sitotoksiknya pada sel HeLa.Maret Narkoba2015,13, 6818–6837. [CrossRef]
187. Schultz-Johansen, M.; Cueff, M.; Hardouin, K.; Selai, M.; Larocque, R.; Mencolok, MA; Hervé,C.; Czjzek, M.; Stougaard, P.
Penemuan dan penyaringan enzim GH107 yang diturunkan dari metagenome baru yang menargetkan fucan sulfat dari
ganggang coklat.FEBS J.2018,285, 4281–4295. [CrossRef] [PubMed]
188. Kitamura, K.; Matsuo, M.; Tsuneo, Y. Enzim degradasi fucoidan oleh fucoidanase dari Hepatopancreas dari
Patinopecten yessoensis.Biosci. Bioteknologi. Biokimia.1992,56, 490–494. [CrossRef] [PubMed]

189. Silchenko, AS; Kusaykin, MI; Zakharenko, AM; Menshova, RV; Khanh, HHN; Dimitrenok, PS; Isakov, VV;
Zvyagintseva, TN Endo-1,4-fucoidanase dari moluska laut Vietnam Lambis sp. yang menghasilkan
fukooligosakarida sulfat.J.Mol. Katal. B Enzim.2014,102, 154–160. [CrossRef]
190. Silchenko, SEBAGAI; Rasin, AB; Zueva, AO; Kusaykin, MI; Zvyagintseva, TN; Kalinovsky, AI; Kurilenko, VV;
Ermakova, SP Fucoidan Sulfatases dari Bakteri Laut Wenyingzhuangia fucanilytica CZ1127(T). Biomolekul
2018,8, 98. [CrossRef]
191. Usoltseva, RV; Anastyuk, SD; Shevchenko, NM; Surits, VV; Silchenko, SEBAGAI; Isakov, VV; Zvyagintseva, TN;
Tipis, PD; Ermakova, SP Polisakarida dari ganggang coklat Sargassum duplicatum:
Struktur dan aktivitas antikanker secara in vitro.Karbohidrat. Polim.2017,175, 547–556. [CrossRef] [PubMed]
192. Jo, BB; Choi, S.-K. Degradasi fucoidans dari Sargassum fulvellum dan aktivitas biologisnya. Karbohidrat.
Polim.2014,111, 822–829. [CrossRef]
193. Kusaykin, M.; Bakunina, I.; Sova, V.; Ermakova, S.; Kuznetsova, T.; Besednova, N.; Zaporozhets, T.;
Zvyagintseva, T. Struktur, aktivitas biologis, dan transformasi enzimatik fukoidan dari rumput laut coklat.
Bioteknologi. J.2008,3, 904–915. [CrossRef]
194. Ohshiro, T.; Ohmoto, Y.; Ono, Y.; Ohkita, R.; Miki, Y.; Kawamoto, H.; Izumi, Y. Isolasi dan karakterisasi
mikroorganisme pendegradasi fukoidan baru.Biosci. Bioteknologi. Biokimia.2010,74, 1729–1732. [CrossRef]
Maret Narkoba2020,18, 571 31 dari 31

195. Kusaykin, MI; Silchenko, SEBAGAI; Zakharenko, AM; Zvyagintseva, TN Fucoidanases.Glikobiologi2015,26, 3–12. [
CrossRef] [PubMed]
196. Silchenko, SEBAGAI; Ustyuzhanina, NE; Kusaykin, MI; Krylov, VB; Shashkov, SEBAGAI; Dmitrenok, AS;
Usoltseva, RV; Zueva, AO; Nifantiev, NE; Zvyagintseva, Ekspresi TN dan karakterisasi biokimia dan
spesifisitas substrat fucoidanase dari ganggang Formosa.Glikobiologi2017,27, 254–263. [CrossRef] [
PubMed]
197. Takayama, M.; Koyama, N.; Sakai, T.; Kato, I. Enzim yang Mampu Mendegradasi Polisakarida yang Mengandung
Sulfat-Fucose dan Gen Penyandinya. Paten AS 6.489.155,B1, 3 Desember 2002.
198. Sakai, T.; Ishizuka, K.; Kato, I. Isolasi dan karakterisasi bakteri laut pendegradasi fukoidan. Maret
Biotechnol.2003,5, 409–416. [CrossRef] [PubMed]
199. Helmert, W. Sulfatase Polisakarida Laut.Depan. Maret Sci.2017,4, 6. [CrossRef]
200. Colin, S.; Deniaud, E.; Selai, M.; Descamps, V.; Chevrolet, Y.; Kervarec, N.; Yvin, JC; Barbeyron, T.; Michel, G.;
Kloareg, B. Kloning dan karakterisasi biokimia dari fukanase FcnA: Definisi keluarga hidrolase glikosida
baru yang spesifik untuk fukan tersulfasi.Glikobiologi2006,16, 1021–1032. [CrossRef] [PubMed]
201. Lombard, V.; Golaconda Ramulu, H.; Drula, E.; Coutinho, PM; Henrissat, B. Database enzim aktif
karbohidrat (CAZy) pada tahun 2013.Asam Nukleat Res.2014,42, D490–D495. [CrossRef] [PubMed]
202. Shen, J.; Chang, Y.; Zhang, Y.; Mei, X.; Xue, C. Penemuan dan karakterisasi endo-1,3-fucanase dari bakteri
laut Wenyingzhuangia fucanilytica: Keluarga hidrolase glikosida baru.Depan. Mikrobiol. 2020,11. [
CrossRef]
203. Nagao, T.; Arai, Y.; Yamaoka, M.; Komatsu, F.; Yagi, H.; Suzuki, H.; Ohshiro, T. Identifikasi dan karakterisasi
gen fucoidanase dari Luteolibacter algae H18.J. Biosci. Bioeng.2018,126, 567–572. [CrossRef]

204. Ohshiro, T.; Harada, N.; Kobayashi, Y.; Miki, Y.; Kawamoto, H. Degradasi fukoidan mikroba oleh
Luteolibacter algae H18 dengan deasetilasi.Biosci. Bioteknologi. Biokimia.2012,76, 620–623. [CrossRef]
205. Sakai, T.; Kawai, T.; Kato, I. Isolasi dan karakterisasi strain bakteri laut pendegradasi fukoidan dan
fukoidanasenya.Maret Biotechnol.2004,6, 335–346. [CrossRef]
206. Wu, Q.; Zhang, M.; Wu, K.; Liu, B.; Cai, J.; Pan, R. Pemurnian dan karakteristik fucoidanase diperoleh dari
Dendryphiella arenaria TM94.J.Appl. Phycol.2011,23, 197–203. [CrossRef]
207. Kusaykin, MI; Chizhov, AO; Grachev, AA; Alekseeva, SA; Bakunina, IY; Nedashkovskaya, OI; Sova, VV;
Zvyagintseva, TNStudi Perbandingan Kekhususan Fucoidanase dari Mikroorganisme Laut dan
Invertebrata; Springer: Dordrecht, Belanda, 2007; hlm. 143–147.
208. Dong, S.; Chang, Y.; Shen, J.; Xue, C.; Chen, F. Pemurnian, ekspresi dan karakterisasi novel α-l-fucosidase
dari bakteri laut Wenyingzhuangia fucanilytica.Expr Protein Purif.2017,129, 9–17. [CrossRef] [PubMed]

209. Barbeyron, T.; L'Haridon, S.; Michel, G.; Czjzek, M. Mariniflexile fucanivorans sp. nov., anggota laut dari
Flavobacteriaceae yang mendegradasi fucans sulfat dari ganggang coklat.Int. J.Syst. Evol. Mikrobiol.2008,58,
2107–2113. [CrossRef] [PubMed]
210. Sakai, T.; Kimura, H.; Kojima, K.; Shimanaka, K.; Ikai, K.; Kato, I. Marine bakteri sulfated
fucoglucuronomannan (SFGM) lyase mencerna SFGM alga coklat menjadi trisakarida.Maret Biotechnol.
2003,5, 70–78. [CrossRef] [PubMed]
211. Bakunina, IY; Nedashkovskaya, OI; Alekseeva, SA; Ivanova, EP; Romanenko, LA; Gorshkova, NM; Isakov, VV;
Zvyagintseva, TN; Mikhailov, VV Degradasi fucoidan oleh proteobacterium laut Pseudoalteromonas citrea.
Mikrobiologi2002,71, 41–47. [CrossRef]
212. Bilan, MI; Kusaykin, MI; Grachev, AA; Tsvetkova, EA; Zvyagintseva, TN; Nifantiev, NE; Usov, AI Pengaruh
pembuatan enzim dari moluska laut Littorina kurila pada fukoidan dari ganggang coklat Fucus distichus.
Biokimia2005,70, 1321. [CrossRef] [PubMed]

Catatan Penerbit:MDPI tetap netral sehubungan dengan klaim yurisdiksi dalam peta yang diterbitkan dan afiliasi
kelembagaan.

©2020 oleh penulis. Penerima Lisensi MDPI, Basel, Swiss. Artikel ini adalah artikel akses
terbuka yang didistribusikan berdasarkan syarat dan ketentuan lisensi Creative Commons
Attribution (CC BY) (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).

Anda mungkin juga menyukai