com
JKPK (JURNAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA), Jil. 8, No.1, 2023 hal.75-85
Program Studi Pendidikan Kimia Universitas Sebelas Maret https:// ISSN 2503-4146
jurnal.uns.ac.id/jkpk ISSN 2503-4154 (dalam talian)
1Program Sarjana Farmasi, Sekolah Tinggi Farmasi Semarang, Jawa Tengah, Indonesia
Jl. Letjend. Sarwo Edi Wibowo Km.1 Plamongansari, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia
2Program Studi Farmasi, Sekolah Tinggi Farmasi Semarang, Jawa Tengah, Indonesia Jl.
Letjend. Sarwo Edi Wibowo Km.1 Plamongansari, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia
* Korespondensi, email:erwinindriyanti22@gmail.com
Diterima: 23 Oktober 2022 DOI : Diterima: 29 April 2023 Diterbitkan Daring: 30 April 2023
10.20961/jkpk.v8i1.66685
ABSTRAK
Kolesterol berperan penting dalam pembentukan sel dan produksi hormon dalam tubuh, namun
kadar yang berlebihan dapat memicu berbagai penyakit. Peningkatan kadar kolesterol meningkatkan
risiko penyakit kardiovaskular seperti aterosklerosis. Obat alami pengobatan kolesterol tinggi umumnya
bersumber dari tanaman obat yang banyak mengandung fitokimia. Salah satu tanaman tersebut adalah
daun Putri Malu (Mimosa pudica L.). Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi komposisi kimia ekstrak
daun Putri Malu (Mimosa pudica L.) dan potensi efek anti kolesterolnya secara in vitro. Proses ekstraksi
yang digunakan pada penelitian ini adalah maserasi yang dilanjutkan dengan analisis profiling GC-MS dan
metode Liebermann Burchad dengan spektrofotometri UV-Vis. Temuan penelitian ini mengungkapkan
adanya lima kandungan kimia dalam ekstrak. Diantaranya, puncak kedua dan keempat memiliki
kelimpahan acacetin tertinggi masing-masing sebesar 14,08% dan diosmetin sebesar 73,79%. Ekstrak
etanol daun Putri Malu menunjukkan aktivitas anti kolesterol yang kuat secara in vitro dengan nilai IC50
sebesar 24,8993, menunjukkan potensinya sebagai agen pengobatan hiperkolesterolemia. Penelitian lebih
lanjut diperlukan untuk mengevaluasi kemanjuran ekstrak ini secara in vivo dan menyelidiki mekanisme
aksi yang mendasarinya.
Kata kunci:Anti kolesterol, ekstrak daun putri malu, analisis profiling GC-MS, Liebermann
Burchard, maserasi
75
76 D.Adhityasmara1. dkk.Pembuatan Profil Ekstrak Etanol GC-MS...........
penyakit jantung koroner [3]. Ada dua jenis enzim, yang bertanggung jawab untuk
kolesterol yang diproduksi di dalam tubuh: memproduksi kolesterol dalam tubuh [10].
kolesterol highdensity lipoprotein (HDL) yang Mimosa pudica L. merupakan tanaman yang
baik bagi tubuh, dan kolesterol low-density dilaporkan memiliki efek antidiabetes,
lipoprotein (LDL) yang berdampak buruk bagi antihiperlipidemia, dan antihepatitis, serta
tubuh. Ketika kadar kolesterol LDL terlalu berbagai potensi seperti antimikroba,
tinggi, terjadi kondisi yang disebut antiinflamasi, hepatoprotektif, dan antioksidan.
hiperkolesterolemia, yang meningkatkan risiko Ekstrak etanol daun Mimosa pudica L.
penyakit kardiovaskular aterosklerotik dini.4]. mengandung senyawa seperti terpenoid,
Hiperkolesterolemia didefinisikan sebagai flavonoid, glikosida, alkaloid, fenol, tanin, kina,
suatu kondisi dimana kadar kolesterol total 190 mg/ saponin, dan kumarin. Sedangkan ekstrak
dL atau lebih tinggi. Berdasarkan penelitian yang etanol akar Mimosa pudica L. mengandung
dilakukan Kementerian Kesehatan pada tahun 2016, flavonoid, tanin, dan steroid [11].
42% dari 25.234 subjek dari 34 provinsi di Indonesia Salah satu cara untuk mengetahui potensi daun
menderita hiperkolesterolemia [5]. Kadar kolesterol Putri Malu (Mimosa pudica L.) sebagai anti kolesterol
yang tinggi dalam tubuh dapat memicu timbulnya adalah dengan melakukan profiling Gas
berbagai penyakit, salah satunya adalah penyakit Chromatography-Mass Spectrometry (GCMS) untuk
kardiovaskular. Selain itu, Genetika dan pola makan menganalisis senyawa kimia yang terdapat pada daun
berkontribusi terhadap peningkatan kadar kolesterol tersebut. Profil GCMS menunjukkan pola fragmentasi
Saat ini sedang dikembangkan tanaman obat total [12]. Berdasarkan hal tersebut, penelitian ini
sebagai pengobatan kolesterol. Tanaman ini banyak bertujuan untuk mengidentifikasi senyawa kimia yang
mengandung fitokimia dengan sifat antioksidan terdapat dalam ekstrak daun Putri Malu (Mimosa pudica
yang dapat mencegah dan mengobati berbagai L.) dan mengevaluasi efek anti kolesterolnya secara in
kemudian dijemur dengan kain hitam. Kemudian Tes Anti Kolesterol (Lieberman Bourchad)
dihaluskan menggunakan blender hingga diperoleh Kolesterol (kelompok kontrol)
Larutan stok kolesterol dibuat dengan cara
bubuk. Serbuk yang diperoleh diayak dengan
melarutkan 50,8 mg bubuk kolesterol standar
menggunakan ayakan mesh no 30/40.
dalam 50,0 ml kloroform tingkat analitik,
Ekstraksi Tanaman Daun Putri Malu (Mimosa
menghasilkan konsentrasi stok 1016 ppm.
pudica L.).
200 gram Putri Malu (Mimosa pudica L.) Kurva Standar
Daun diekstraksi dengan metode maserasi Untuk menentukan linearitas, 5 seri
menggunakan pelarut etanol 96% sebanyak standar kurva disiapkan dengan
2 L (1 : 10) selama 3 hari kemudian konsentrasi 60, 80, 100, 120, dan 200 ppm
dilanjutkan dengan proses maserasi. Ekstrak yang langsung dibuat dalam tabung reaksi.
dipekatkan dengan rotary evaporator 2,0 ml asam asetat anhidrat dan 0,1 ml H.
hingga menjadi ekstrak kental yang pekat2JADI4ditambahkan ke setiap larutan,
kemudian dilakukan screening fitokimia. dihomogenisasi menggunakan pusaran, dan
Analisis Ekstrak Daun Putri Malu (Mimosa ditutup dengan aluminium foil pada lapisan
pudica L.) dengan GC-MS luar tabung. Absorbansi diukur pada
Profil kimia Putri Malu panjang gelombang maksimum 662,9 nm
Ekstrak daun (Mimosa pudica L.) disaring
setelah inkubasi 7 menit. Kurva korelasi
menggunakanGas Kromatografi-Massa kemudian dibangun antara konsentrasi dan
Spektrometri-GCMS (Hewlett-Packard 6890) serapan.
dengan kolom Agilent 19091S-433 HP-5MS
berukuran panjang 30 meter dan diameter HASIL DAN DISKUSI
250 meter. Satu liter ekstrak daun Putri Malu Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Daun
(Mimosa pudica L.) (dilarutkan dalam Putri Malu (Mimosa pudica L.).
Tabel 2. Komponen fitokimia yang teridentifikasi pada ekstrak daun Putri Malu (Mimosa pudica L.).
dengan analisis GC-MS
TIDAK Nama Senyawa % Daerah Waktu Retensi TN SIM
1 Dihidroflavonol 1.54 17.637 239 83
2 Acacetin/2,4,5 dihidroksil 7- 14.08 18.059 269 84
meoksiflavon
3 C13H16N2HAI2S/1,2 5.78 19.194 264 92
Benzisotiazol,3-
(Hexahydro-1H-azepin-1-
y)1,1-dioksida
4 Diosmetin 73,79 19.616 299 88
5 C15H26HAI/ 4.82 23.340 207 83
1H-Siklopenta[a]pentalen-7-
ol,dekahidro-3,3,4,7a-
tetrametil-(CAS)
DariMeja 2,dapat ditunjukkan bahwa senyawa pada puncak no. 2 dan 4 yaitu
senyawa yang mempunyai kelimpahan acacetin dan diosmetin. Berikut pola
paling besar pada ekstrak daun Putri Malu fragmentasi senyawa acacetin dan
(Mimosa pudica L.) adalah diosmetin :
Spektrum hasil kali ion keduanya fragmen kedua senyawa akibat terbentuknya
senyawa isomer Acacetin dan 2,4,5-hidroksi-7- struktur radikal anion yang sangat stabil. Kedua
kesamaan; ion m/z 268 adalah yang dominan CH3. Bersama-sama dan CO atau HCO,
80 D.Adhityasmara1. dkk.Pembuatan Profil Ekstrak Etanol GC-MS...........
membentuk ion kecil m/z 240 dan 239, flavon adalah satu-satunya perbedaan yang
Hilangnya HCO (29) dari senyawa fenolik yang diamati dalam spektrum produk ion dari dua
yang sesuai dengan produksi fragmen cincin B memungkinkan diferensiasi kedua senyawa [16].
dengan kelimpahan yang nyata, seperti yang meningkatkan ekspresi protein reduktase
ditunjukkan padaGambar 1.Puncak dengan melalui jalur MsrA dan Nrf2 melalui fosforilasi
kelimpahan tertinggi terdapat pada puncak Nrf2 dan degradasi Keap1. Secara in vivo,
kedua dan keempat. Struktur masing-masing pengobatan acacetin sangat melemahkan
senyawa ditentukan berdasarkan pola aterosklerosis dengan meningkatkan sirkulasi
fragmentasi dan puncak basa yang khas. akar aorta dan tingkat reduktase, mengurangi
tingkat faktor inflamasi plasma, dan
Tes Kolesterol
mempercepat metabolisme lipid. Hal ini
Setelah flavonoid spesifik acacetin
menunjukkan efek anti-oksidatif dan
dan diosmetin teridentifikasi, dilakukan uji
antiaterosklerotik acacetin, yang menunjukkan
aktivitas antikolesterol pada ekstrak daun
nilai terapeutik potensial untuk penyakit
Mimosa pudica. Acacetin adalah flavonoid
kardiovaskular terkait aterosklerotik [19,20].
alami dengan sifat antioksidan,
Diosmetin merupakan flavonoid dengan efek
antiinflamasi, dan antidepresan. Ia juga
antioksidan dan antiinflamasi serta dapat
dapat mengatur metabolisme protein dan
mengatur tekanan darah dan perubahan
lipid, sehingga mencegah radikal bebas
pembuluh darah [21,22]. Diosmetin adalah
mengoksidasi kolesterol dan menyebabkan
aglikon dari diosmin glikosida flavonoid, dan
arteriosklerosis [17,18].
berbagai efek terapeutiknya menunjukkan
Pengaruh acacetin pada
aktivitas antioksidan yang sangat baik baik in
aterosklerotikproses, plasma
vitro dan in vivo [23]. Perubahan pembuluh
faktor inflamasi, dan metabolisme lipid
darah berhubungan dengan penyakit
diselidiki. Acacetin secara signifikan
dislipidemia yang berujung pada penyakit
meningkatkan viabilitas sel EA.hy926
jantung. Uji anti kolesterol dilakukan dengan
dengan mengurangi rasio sel apoptosis dan
menggunakan metode Liebermann-Burchard [
nekrotik menjadi 3 mol/L. Selain itu, 3 mol/L
20] pada ekstrak etanol daun Mimosa pudica.
acacetin menurunkan kadar ROS dan
Tabel 3. Data Penurunan Kadar Kolesterol Daun Putri Malu (Mimosa pudica L.)
Ekstrak
daya serap IC 50
konsentrasi kosong Sampel % penghambatan ppm
20,56 0,793 0,397 49,93695 24,8993
61,68 0,793 0,384 51,57629
102,8 0,793 0,353 55,4855
143,92 0,793 0,341 56,99874
185,04 0,793 0,353 55,4855
58
56.99873897
56
55.48549811 55.48549811
54
% Penghambatan
52
51.57629256
50 49,9369483
48
46
20,56 61,68 102,8 143,92 185,04
Setelah menganalisis tabel dan diagram yang agen penurun kolesterol. Temuan ini selaras
diberikan, terlihat bahwa serapannya menurun dengan hasil metode spektrofotometri UV Vis
seiring dengan meningkatnya konsentrasi ekstrak yang digunakan untuk menguji aktivitas anti
sedangkan persentase penurunan kolesterol kolesterol senyawa tersebut. Nilai IC50 sebesar
meningkat. Ekstrak tersebut mengikat lebih banyak 24,8993 ppm menunjukkan kemampuan
kolesterol pada konsentrasi yang lebih tinggi, padatan anti kolesterol. Perlu diketahui bahwa
sehingga menyisakan lebih sedikit kolesterol yang keterbatasan penelitian ini antara lain senyawa
tidak terikat dalam sampel. Akibatnya, ketika aktifnya masih dalam bentuk ekstrak, dan akan
ditambahkan pereaksi Lieberman-Burchard, warna lebih baik diperoleh fraksi atau isolat dari
larutan uji menjadi pudar sehingga nilai serapannya senyawa aktif tersebut. Langkah selanjutnya
rendah.24-26]. Perubahan warna tersebut adalah menguji Ekstrak Daun Putri secara in
menunjukkan adanya kolesterol bebas yang terikat vivo.
pada pereaksi. Ekstrak daun Putri Malu (Mimosa
KESIMPULAN
pudica L.) dengan konsentrasi 185,04 ppm
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk
menunjukkan penurunan kadar kolesterol sebesar
mengidentifikasi senyawa kimia yang terdapat
55,4855%, sehingga berpotensi sebagai obat in vitro.
pada ekstrak daun Putri Malu (Mimosa
JKPK (JURNAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA), Vol.8, No.1, 2023, hlm.75-85 83
pudica L.) dan untuk mengevaluasi efek anti- [3] R.Rong., “Konstituen anestesi Zanthoxylum
kolesterolnya secara in vitro. Hasil penelitian bungeanum Maxim.: Sebuah studi
farmakokinetik,”J. Sep. Sains., jilid. 39,
menunjukkan terdapat lima senyawa kimia dalam
tidak. 14, hal. 2728–2735, 2016, doi:
ekstrak, dengan puncak kedua dan keempat 10.1002/jssc.201600295.
mengandung senyawa paling melimpah, yaitu
[4] E. Setiati, Bahaya Kolesterol,
acacetin dengan kelimpahan 14,08% dan
Mengenal, Mungkin dan
Diosmetin dengan kelimpahan 73,79%. Lebih Menanggulangi Kolesterol.
lanjut, hasil penelitian menunjukkan bahwa Yogyakarta: Buku Dokter, 2009,
ISBN:9789792404272.
ekstrak etanol Putri Malu (Mimosa pudica L.)
[14] T. Tomini , “Profil Gc-Ms Dari Ekstrak Daun [21] S. Meephat, P. Prasatthong, P. Potue,
Rhizophora apiculatadari Pesisir,” Jurnal S. Bunbupha, P. Pakdeechote, dan P.
Kelautan,jilid. 14, tidak. 1, hal.30–42, Maneesai, “Diosmetin memperbaiki
2021, disfungsi dan remodeling pembuluh
doi:10.21107/jk.v14i1.8904. darah dengan modulasi ekspresi nrf2/
ho-1 dan p-jnk/pnf-κb pada tikus
[15] Mahmiah, GW Sudjarwo, dan F. hipertensi,” Antioksidan, jilid. 10, tidak.
Andriyani, “Skrining Fitokimia dan 9, hlm.1–17, 2021,
Analisis GC-MS Hasil Fraksi Heksana doi:10.3390/antioks10091487.
Kulit BatangRhizophora mucronata L.,”
Semin. tidak. Kelaut. XII, TIDAK. 2016, hal.44– [22] M. Noviani, S. Slamet, W. Wirasti, dan
51, 2017. U. Waznah, “Uji Aktivitas Antikolesterol
Ekstrak Etanol Daun Jambu Air (
[16] kamu. Justesen, “Disebabkan oleh tabrakan Syzygium aqueum (Burm.f.)Alston)
fragmentasi dari dideprotonasi Secara in vitro,”Kelebihan. Semin.
flavonoid termetoksilasi, diperoleh dengan tidak. Kesehat., jilid. 1, tidak. 8,
electrospray ionisasi massa hal.839–849, 2021,
spektrometri,”J. Spektrum Massa., jilid. 36, doi:10.48144/prosiding.v1i.761.
tidak. 2, hal.169–178, 2001,
doi:10.1002/jms.118. [23] L. Li, EP Dutkiewicz, Y. Huang, H. Zhou,
dan C. Hsu, “Metode analitik
JKPK (JURNAL KIMIA DAN PENDIDIKAN KIMIA), Vol.8, No.1, 2023, hlm.75-85 85
untuk kuantifikasi kolesterol,”J. Anal Obat perlemakan hati non-alkohol: studi kohort
Makanan., jilid. 27, tidak. 2, hal.375-386, Jinchang,”Lipid Kesehatan Dis., jilid. 18,
2019, tidak. 47, hal.1-7, 2019,
doi:10.1016/j.jfda.2018.09.001. doi:10.1186/s12944-019-0984-9.
[24] A. Pooria, A. Pourya, dan A. Gheini, [26] NA Marston, MP Bonaca, P. Jarolim, dkk.,
“Perbandingan kolesterol serum “Penerapan klinis pengujian troponin
sebelum operasi dan satu bulan pasca sensitivitas tinggi dalam kerangka
operasi setelah kolesistektomi,”Ann. penyakit kardiovaskular aterosklerotik
medis. Bedah. (Lond).,jilid. 79, 2022, dari pedoman kolesterol saat ini,”
doi:10.1016%2Fj.amsu.2022.104016. JAMA Kardiol.,jilid. 5, tidak. 11,
hal.1255-1262, 2020,
[25] XYRen, D. Shi, J. Ding, dkk., “Rasio kolesterol total doi:10.1001/jamacardio.2020.2981.
terhadap kolesterol lipoprotein densitas
tinggi merupakan prediktor yang signifikan