RANGKUMAN PERTEMUAN 10

KROMATOGRAFI

NAMA : MERLY VERONICA

NIM : F22029

DOSEN PENGAMPU :
Prof. Dr. Dra. Ediati, SE., Apt.

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS KUSUMA HUSADA SURAKARTA
2023
 MENGETAHUI JENIS KROMATOGRAFI GAS DAN SISTEM
INSTRUMENTASINYA

1. PRINSIP KROMATOGRAFI GAS

Kromatografi gas (GC) adalah jenis umum dari kromatografi yang digunakan dalam kimia
analitik untuk memisahkan dan menganalisis senyawa yang dapat diuapkan tanpa dekomposisi.
Penggunaan khas GC untuk menguji kemurnian zat tertentu, atau memisahkan berbagai
komponen campuran. Dalam kromatografi preparatif, GC dapat digunakan untuk memperoleh
senyawa murni dari suatu campuran.
Kromatografi gas adalah proses pemisahan senyawa dalam campuran dengan menyuntikkan
sampel gas atau cair ke dalam fase gerak, yang disebut gas pembawa, dan melewatkan gas
melalui fase diam.
Fase gerak biasanya berupa gas inert atau gas tidak reaktif seperti helium, argon, nitrogen, atau
hidrogen.
Fase diam adalah lapisan mikroskopis cairan kental pada permukaan partikel padat pada
penyangga padat inert di dalam sepotong kaca atau tabung logam yang disebut kolom. Permukaan
partikel padat juga dapat bertindak sebagai fase diam di beberapa kolom. Kolom kaca atau logam
yang dilalui fase gas ditempatkan dalam oven di mana suhu gas dapat dikontrol dan eluen yang
keluar dari kolom dipantau oleh detektor terkomputerisasi.
PRINSIP HPLC DAN GC cocok untuk pemisahan senyawa yang memiliki karakteristik
volatilitas tinggi, stabilitas termal, berat molekul rendah.
KOMPONEN KROMATOGRAFI GAS
a. Fase gerak
*Gas pembawa = untuk transfer sampel yang disuntikkan ke kolom pemisahan dan juga
bertanggung jawab untuk transfer selanjutnya dari komponen terpisah ke detektor.
Contoh umum: Nitrogen, helium, atau hidrogen
*Bahan bakar gas = untuk mendukung nyala api di detektor Flame ionization detector (FID)
seperti Hidrogen.
*Udara nol = udara murni yang berperan sebagai oksidan untuk mendukung pembakaran nyala
api di detektor.
Sebelum dibawa ke sistem kromatografi gas, ketiga macam gas di atas dicampur dalam proporsi
yang diinginkan.
b. Sampel injektor
Injektor adalah blok yang dipanaskan di mana sampel disuntikkan. Melalui aliran gas pembawa,
sampel secara spontan diuapkan dan dibawa ke kolom.Dengan bantuan jarum suntik kedap gas,
campuran sampel cair disuntikkan sedangkan, dengan bantuan katup injeksi otomatis, campuran
gas disuntikkan.
c. Kolom
Diisi dengan fase diam atau dindingnya ditutupi dengan adsorben cair. Hal ini dilakukan untuk
absorbansi selektif dan retensi komponen sampel.Umum digunakan: Kolom kemas dan kolom
Kapiler (Lebih populer)
d. Komponen Kolom – Oven
Kolom tertutup oleh oven kolom yang bertanggung jawab untuk menjaga suhu konstan selama
operasi isotermal. Suhu ini ketika pemrograman suhu diperlukan dapat ditingkatkan dengan cara
yang terkontrol untuk memperoleh pemisahan yang efektif dari komponen campuran yang
memiliki volatilitas yang berbeda.
e. Detektor
Digunakan untuk identifikasi dan kuantifikasi komponen.Di sini, wilayah puncak individu yang
dibuat berhubungan dengan konsentrasinya dan waktu retensinya mewakili identitasnya.Contoh
umum: Detektor ionisasi nyala, Detektor konduktivitas termal (TCD), dan Detektor penangkapan
elektron (ECD).
F. Sistem data
Ini adalah satu set perangkat lunak khusus yang menyediakan kontrol atas banyak parameter
operasional penting seperti urutan injeksi, siklus pencucian, kontrol suhu berlebih, laju aliran gas,
panjang gelombang detektor, dan lain-lain. Secara bersamaan, stasiun data menghitung dan
menampilkan parameter.
ANALISIS KROMATOGRAFI GAS
Sumbu X – Waktu retensi puncak (Rt)
Ini dihitung dari saat sampel disuntikkan ke dalam kolom (to) hingga mencapai detektor.
Sumbu Y – Respons detektor
Menunjukkan respons terukur dari puncak analit di dalam detektor.Garis dasar di sini mewakili
sinyal yang diterima dari detektor di mana tidak ada analit yang keluar dari kolom atau berada di
bawah batas deteksi. Dianggap sebagai indikasi masalah atau indikasi untuk memeriksa
pemeliharaan, dalam situasi di mana baseline ditemukan lebih tinggi dari biasanya.Pengukuran
seperti lebar pada baseline, lebar pada setengah tinggi, luas, dan tinggi total dapat ditarik dari
puncak.Untuk sensitivitas yang lebih baik dan resolusi yang lebih baik, ditunjukkan dengan
puncak yang lebih sempit dan lebih tajam.Keakuratan pengukuran dipengaruhi oleh jumlah total
titik data yang ada di seluruh puncak.

DIMENSI KROMATOGRAFI GAS

Kromatografi Gas memiliki kapasitas puncak yang tinggi dibandingkan dengan teknik pemisahan
lainnya.
Contoh = analisis diesel yang melibatkan identifikasi jejak analit dalam matriks kompleks, seperti
sampel makanan atau sampel lingkungan.
Analisis dapat dilakukan tanpa resolusi kromatografi penuh melalui resolusi spektral, di mana MS
ditulis dengan tanda penghubung dengan GC.
PRINSIP GC MS
GC bekerja berdasarkan prinsip bahwa campuran akan terpisah menjadi zat individu ketika
dipanaskan. Gas yang dipanaskan dibawa melalui kolom dengan gas inert (seperti helium). Saat
zat yang dipisahkan muncul dari bukaan kolom, mereka mengalir ke MS.
Spektrometri Massa (MS) adalah teknik kimia analitik yang membantu mengidentifikasi jumlah
dan jenis bahan kimia yang ada dalam sampel dengan mengukur rasio massa terhadap muatan dan
kelimpahan ion fase gas. sampel diubah menjadi ion positif yang bergerak cepat dengan
bombardir elektron dan partikel bermuatan dipisahkan menurut massanya.
Spektrum massa adalah plot kelimpahan relatif terhadap rasio massa/muatan (m/e).
Spektrum ini digunakan untuk menentukan tanda unsur atau isotop dari sampel, massa partikel
dan molekul, dan untuk menjelaskan struktur kimia molekul dan senyawa kimia lainnya.
2. SISTEM INSTRUMENTASI KG DAN CARA KERJA
a. Pengatur tekanan
Tekanan diatur dalam batas 1 hingga 4 atmosfer sementara katup kontrol aliran mengukur 1
hingga 1000 liter gas per menit. Katup aliran dapat disesuaikan dengan katup jarum yang
dipasang di pangkalan. Gas pembawa yang disukai dapat berupa helium, argon, nitrogen, dan
hidrogen karena konduktivitas termalnya yang tinggi.
b. Port injeksi sampel
Sampel disuntikkan dengan jarum mikro melalui septum karet silikon yang dapat menyegel
sendiri dalam logam yang dipanaskan. Bock logam adalah pemanas listrik yang dipanaskan. Kami
menggunakan berbagai ukuran port injeksi untuk injeksi sampel.
c. Kolom kromatografi gas
Kolom kromatografi gas dapat dibuat dengan pipa yang digulung menjadi spiral terbuka. Kami
menggunakan tembaga atau baja tahan karat untuk operasi suhu tinggi. Kecepatan laju aliran gas
pembawa tergantung pada diameter dalam kolom kromatografi.Ukuran kolom yang biasa adalah 2
meter
d. Fase diam dalam kromatografi gas
Kromatografi gas cair dapat tersedia di hampir berbagai tak terbatas bahan partisi cair. Fase cair
atau stasioner dalam kromatografi gas dapat dibagi menjadi nonpolar, polaritas menengah,
karbowax polar, dan senyawa ikatan hidrogen seperti glikol.
Suhu maksimum fase diam dapat ditentukan oleh volatilitasnya. Volatilitas berlebih dari fase diam
dapat memperpendek umur kolom.
Pembebanan kolom dengan fase diam dapat dinyatakan dengan persentase berat
KOLOM PADA KG
Dua jenis kolom yang digunakan dalam kromatografi gas: kolom terkemas dan kolom kapiler.
Kolom pendek dan tebal yang terbuat dari tabung kaca atau baja tahan karat, kolom yang dikemas
telah digunakan sejak tahap awal kromatografi gas.
3. ZAT PADAT PENDUKUNG/SOLID SUPPORT KG
GSC adalah jenis GC di mana bahan yang sama bertindak sebagai fase diam dan pendukung.
Dalam metode ini, bahan kimia ditahan melalui adsorpsinya ke permukaan penyangga.
Pendukung ini sering berupa bahan anorganik seperti silika atau alumina
bahan pendukung paling umum untuk kolom GC yang dikemas = Tanah diatom = Kolom yang
dikemas berisi bahan pendukung padat yang terbagi halus, lembab, (umumnya didasarkan pada
tanah diatom) yang dilapisi dengan fase diam cair
4. FASE GERAK
Fase gerak adalah gas seperti helium, dan fase diam adalah cairan dengan titik didih tinggi yang
teradsorpsi pada padatan.
5. DETEKTOR
Detektor dapat mendeteksi kedatangan komponen yang berasal dari kolom untuk memberikan
sinyal listrik. Detektor tekanan dan suhu adalah dua kelompok utama detektor yang digunakan
dalam kromatografi gas.
Detektor dalam instrumentasi kromatografi gas terletak di dekat kolom untuk menghindari
kondensasi cairan atau mendeteksi sampel sebelum dekomposisi.
Detektor TCD berisi empat elemen penginderaan panas yang dibuat oleh termistor atau kabel
resistansi. Termometer adalah semikonduktor elektronik dari oksida logam yang menyatu yang
hambatan listriknya bervariasi dengan suhu.
GC-FID digunakan dalam kimia analitik untuk memisahkan dan menganalisis senyawa yang
dapat diuapkan tanpa dekomposisi.
GC-FID dapat mendeteksi hampir semua senyawa yang mengandung karbon.
FAKTOR YANG MEMPENGARUHI PEMISAHAN KOMPONEN :
a. Tekanan uap
Fungsi meningkatkan tekanan dalam kromatografi gas = Lebih banyak resistensi untuk
mengalir melalui kolom atau pengatur tekanan yang berbeda diperlukan. Kolom yang lebih
panjang dengan lapisan lapisan fasa film yang lebih tipis akan memberikan ketahanan yang
lebih besar terhadap aliran, memungkinkan pengaturan tekanan yang lebih tinggi digunakan
untuk mendapatkan laju aliran pembawa 10 mL/menit.
b. Polaritas komponen versus polaritas fase diam pada kolom.
Polaritas pelarut yang melewati kolom mempengaruhi laju relatif di mana senyawa bergerak
melalui kolom. Pelarut polar dapat lebih efektif bersaing dengan molekul polar dari campuran
untuk situs polar pada permukaan adsorben dan juga akan lebih baik melarutkan konstituen
polar.
c. Suhu kolom
Suhu merupakan parameter yang sangat penting untuk mempengaruhi pemisahan. Sebagai
aturan praktis, untuk setiap 15 °C lebih tinggi atau lebih rendah, retensi kolom berkurang atau
meningkat dengan faktor 2. Itu berarti jika puncak terakhir terelusi pada 100 °C setelah 10
menit, itu akan terelusi pada 5 menit pada 115 °C dan pada 20 menit pada 85 °C.
 Temperatur kolom dapat divariasikan dari sekitar 50 °C hingga 250 °C. Lebih dingin dari
oven injektor, sehingga beberapa komponen campuran dapat mengembun di awal kolom
d. Laju aliran gas pembawa
Gas pembawa yang umum digunakan dan populer termasuk helium, hidrogen, dan nitrogen,
meskipun argon, amonia, dan karbon dioksida juga telah digunakan dalam jumlah kecil. Juga,
hidrogen telah lama digunakan sebagai bahan bakar gas untuk deteksi ionisasi nyala (FID)
serta metode deteksi lainnya di GC.
laju aliran gas pembawa di GC = 60 hingga 120 ml/menit
Cara menghitung laju aliran di GC= untuk mengukur laju aliran volumetrik adalah
flowmeter gelembung. Perangkat ini digunakan untuk menentukan aliran dengan mengukur
waktu yang dibutuhkan aliran gas untuk memindahkan gelembung sabun melalui volume
tertentu
Meteran gelembung sabun = Pengukur aliran bubbler sabun adalah metode klasik untuk
mengukur laju aliran gas untuk gas pembawa dalam aplikasi seperti kromatografi gas (GC).
Unit ini dilengkapi dengan bola karet yang menempel di bagian bawah perangkat.
Cara meningkatkan efisiensi kromatografi kolom = Mengurangi ukuran partikel, oleh
karena itu, adalah metode lain yang berguna untuk meningkatkan efisiensi. Semakin kecil
partikel, semakin besar tekanan yang dibutuhkan untuk mendorong fase gerak melalui kolom.
Akibatnya, untuk setiap bentuk kromatografi ada batas praktis untuk ukuran partikel
Penyebab tailing puncak = terjadinya lebih dari satu mekanisme retensi analit. Dalam
pemisahan fase terbalik, retensi analit biasanya dicapai melalui interaksi hidrofobik
nonspesifik dengan fase diam
Kolom yang memiliki efisiensi lebih besar = Kolom kapiler tubular terbuka
e. Panjang kolom
f. Jumlah bahan yang disuntikkan
g. Kesimpulan
APLIKASI KROMATOGRAFI GAS
1. Industri farmasi
2. Riset
3. Medis dan Forensik
4. Pemantauan lingkungan (baik di dalam laboratorium, dan badan air alami)
5. Penyulingan minyak bumi dan petrokimia
6. Minyak goreng
7. Rasa, minuman, dan industri makanan
8. Industri wewangian (Kosmetik)
9. Polimer dan plastik
10. Pestisida