TESTING THE RESPONSIBILITY OF MANALAGI APPLE SKIN CREAM (Malus sylvestris Mill) AGAINST
Propionibacterium acne CAUSES OF ACNEWITH WELL DIFFUSION METHOD
UJI DAYA HAMBAT KRIM KULIT APEL MANALAGI (Malus sylvestris Mill) TERHADAP BAKTERI
PROPIONIBACTERIUM ACNE PENYEBAB JERAWAT DENGAN METODE DIFUSI SUMURAN
ABSTRACT
Manalagi apple (Malus sylvestris Mill) is one type of poor apple that has been widely consumed by the people of
Indonesia because it has a sweet, delicious taste, and is easy to obtain. This study aimed to test the effectiveness of the
anti-acne cream of Manalagi Apple (Malus sylvestris Mill) peel extract against Propionibacterium acnes bacteria. The
extract obtained by maceration using 96% ethanol solvent was made into two formulations of cream concentration,
namely 5% and 10% then tested on Propionibacterium acne bacteria using MHA media. The method used is the well
diffusion method. Manalagi Apple peel extract was declared to meet the requirements for a good cream preparation. The
5% cream formulation has shown an inhibitory effect on Propionibacterium acne bacteria with an average diameter of
19.72 mm (intermedied), a concentration of 10% with a value of 20.11 mm (sensitive). From the results obtained it
can be concluded that the preparation of Manalagi apple peel extract cream (Malus sylvestris Mill) is effective in
inhibiting the growth of Propionibacterium acne bacteria. The most effective cream is in cream preparations with an
extract concentration of 10%.
ABSTRAK
Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) merupakan salah satu jenis Apel malang yang telah banyak dikonsumsi oleh
masyarakat Indonesia karena memiliki rasa yang manis, enak, dan mudah didapat. Penelitian ini bertujuan untuk
menguji efektivitas krim antijerawat ekstrak kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) terhadap bakteri Propionibacterium
acnes. Ekstrak yang diperoleh dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 96% dibuat dua formulsi konsentrasi
krim yaitu 5% dan 10% kemudian di ujikan pada bakteri Propionibacterium acne dengan menggunakan media MHA.
Metode yang digunakan yaitu metode difusi sumuran.Ekstrak kulit Apel Manalagi dinyatakan memenuhi syarat sediaan
krim yang baik. Untuk formulasi krim 5% telah menunjukan daya hambat terhadap bakteri Propionibacterium acne
dengan diameter rata-rata 19,72 mm (intermedied), konsentrasi 10% yaitu dengan nilai 20,11 mm (sensitif). dari hasil
yang diperoleh dapat disimpulkan bahwa sediaan krim ekstrak kulit apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) efektif dalam
menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium acne. krim yang paling efektif yaitu pada sediaan krim dengan
konsentrasi ekstrak 10%.
122
JURNAL ANALIS FARMASI
Volume 6, No. 2 Oktober 2021, Hal 122 – 129
dari kandungan ini dapat merusak membran sel dari mampu menghambat pertumbuhan bakteri
mikroorganisme, kemudian kandungan kulit Apel Streptococcus mutans. Maka dalam penelitian ini
Manalagi juga mampu menghambat pertumbuhan dan penulis bertujuan untuk menguji efektivitas ekstrak
perkembangan bakteri (13). kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) sebagai
Aktivitas antibakteri pada bakteri Gram negatif aktivitas antijerawat dengan uji daya Hambat terhadap
maupun Gram positif banyak dimiliki oleh flavanol bakteri Propionibacterium acnes. Penentuan kadar
(katekin). Katekin menyebabkan kebocoran pada kepekaan bakteri patogen terhadap bakteri anti
pottasium sehingga mampu menghancurkan membran jerawat dapat dilakukan dengan salah satu dari dua
sel bakteri dan kuersetin memiliki hampir semua metode pokok yakni dilusi atau difusi (6).
mekanisme antibakteri dari senyawa flavonoid (4). Metode yang paling sering digunakan adalah
Mekanisme kerja flavonoid sebagai antibakteri adalah metode difusi. Salah satu dari metode adalah cup plate
membentuk senyawa kompleks dengan protein technique. Metode ini serupa dengan metode
ekstraseluler dan terlarut sehingga dapat merusak discdiffusion, dimana dibuat sumur pada media agar
membran sel bakteri dan diikuti dengan keluarnya yang telah ditanami dengan mikroorganisme dan pada
senyawa intraseluler. Aktivitas antijerawat adalah sumur tersebut diberi agen antimikroba yang akan diuji
kemampuan suatuzat untuk menghambat atau (8).
Prosedur Penelitian
Penanganan Sampel
Kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) yang telah dipersiapkan dicuci terlebuh dahulu hingga bersih, Kulit Apel
Manalagi (Malus sylvestris Mill) yang sudah dicuci kemudian ditiriskan dan dikeringkan dengan cara kering udara hingga
bebas air. Tahap selanjutnya kulit Apel yang telah dikering udara kemudian dirajang melintang hingga sedikit halus.
Pembuatan LarutanEkstrak Kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) Kulit apel Manalagi (Malus sylvestris Mill)
yang sudah kering diblender ditimbang sebanyak 300 gram, masukkan kedalam wadah kemudian dilarutkan dengan
Etanol sebanyak 1000 ml. Di aduk, kemudian didiamkan selama 24 jam. Maserat dipisahkan dengan cara disaring
menggunakan kertas saring dan diproses diulang 3 kali dengan jenis pelarut yang sama. Semua maserat dikumpulkan
lalu diuapkan dengan menggunakan rotary evaporator tekanan rendah pada suhu 40 0C hingga didapat ekstrak kental.
Pembuatan Krim Ekstrak Kulit Apel Manalagi(9)Formulasi krim Formulasikrim ekstrak kulit Apel Manalagi 5%
R/Ekstrak kulit Apel Manalagi1,25g Paraffin liquuidum6,25g Asam stearat 3,625 g TEA 0,375 g
123
JURNAL ANALIS FARMASI
Volume 6, No. 2 Oktober 2021, Hal 122 – 129
R/ Ekstrakkulit Apel Manalagi 2,5g Paraffin liquuidum6,25g Asam stearat 3,625 g TEA 0,375 g
Adeps lanae 0,75g
Nipagin 0,025 g
Nipasol 0,0125 g
Aquadest 25 mL
Prosedur Pembuatan SediaanKrim Timbang semua bahan, bahan-bahan yang digunakan untuk pembuatan sediaan
krim terdiri dari fase minyak dan fase air, panaskan mortir dan stamper dengan air panas sampai dinding mortir bagian
luar terasa panas.Fase minyak terdiri dari asam stearat, adeps lanae dipanaskan diatas waterbath pada suhu 60-70 0C
sampai melebur sempurna.Fase air terdiri dari trietanolamin (TEA), nipagin, nipasol, dan aquadest di aduk sampai larut
sempurna.Fase minyak setelah larut dimasukkan kedalam fase air dan campuran fase minyak dimasukkan kedalam
mortir panas diaduk hingga homogen sampai membentuk basis krim yang baik.
Evaluasi Sediaan Krim 1 menit, uji dilakukan hingga beban 500 gram.
Uji organoleptis Sterilisasi Alat
Uji organoleptis dilakukan secara visual, komponen
Metode sterilisasi basah (autoclave) bekerja
yang evaluasi meliputi bau, warna, bentuk, dan tekstur
dengan tekanan uap lebih dai satu Atm, pemanasan
sediaan krim
dilakukan dengan suhu 121 0C selama 15-20 menit.
Uji homogenitas Peralatan yang dapat disterilkan dengan cara ini
Uji homogenitas dilakukan dengan mengoleskan adalah alat gelas, cawan petri dan media.
sejumlah krim pada plat kaca obyek kemudian diamati
homogenitas sediaan. Prosedur Pembuatan Suspensi Bakteri Suspensi
bakteri disesuaikan dengan setandarisasi
Uji pH standar kekeruhan Mc Farland 0,5. Kultur bakteri
Uji pH dilakukan dengan menggunakan pH stik uji yang akan digunakan disiapkan dengan cara
yang dicelupkan kedalam sediaan. pH stik yang sudah mengambil satu ose bakteri dari agar miring kemudian
dicelupkan kemudian dicocokan hasilnya perubahan diinokulasikan ke dalam media Nutrient broth (NB)
warna pada standarwarna pada kotak pH. steril. Kemudian diinkubasi pada suhu 37 0C selama
24 jam, setelah 24 jam didapatkan inokulum yang
Uji daya lekat langsung dapat digunakan untuk pengujian aktivitas
Ujidaya lekat dilakukan dengan minimum 0,25 antimikroba.
gram krim diatas objek glas. Objek glas selanjutnya di Prosedur Pembuatan Muller Hinton Agar (MHA)
tutup dengan objek glass lain dan diletakan dengan Sebanyak 4 gram MHA dilarutkan dalam 150 mL
beban 1 kg selama 5 menit diatas tumpukan objek aquades, kemudian dipanaskan dan diaduk sampai
glass tersebut. Objek glass selanjutnya dipasangkan larut pada erlenmeyer. Tuang pada masing-masing
pada alat uji yang telah diberi beban dan cawan petri sebagai media, lalu disterilkan dengan
dicatat waktu sampai kedua objek tersebut terlepas. autoklaf selama 15 menit dengan suhu 1210C.
Uji Aktivitas Krim Ekstrak Kulit Apel Manalagi
Uji daya sebar Terhadap Bakteri Propionibacterium acnes Dengan
Uji daya sebar dilakukan dengan menimbang Menggunakan Difusi Sumuran.
sebanyak 0,5 gram krim pada kaca bulat. Kaca Siapkan cawan petri yang berisi 20 mL media MHA
penutup ditimbang kemudian diletakan diatas basis steril, suspensi bakteri standar digoreskan pada media
didiamkan selama 1 menit diameter penyebaran MHA menggunakan kapas steril dalam keadaan
dicatat. Kemudian beban 50 gram didiamkan selama aseptis dan dibiakan selama 5 menit, buat lubang
sumuran dimedia MHA yang telah diinokulasikan
jamur menggunakan alat yang telah disesuaikan
ukuran diameternya seperti cakram, kemudian
124
JURNAL ANALIS FARMASI
Volume 6, No. 2 Oktober 2021, Hal 122 – 129
masukkan stik krim ekstrak kulit Apel Manalagi di bening) disekitar sumuran , sampel atau zat yang
(masing-masing konsentrasi uji) menggunakan digunakan dapat menghambat pertumbuhan bakteri.
mikropipet kedalam setiap lubang di media MHA lalu Jika tidak terjadi zona hambat (zona bening)
cawan petri diinkubasi selama 48 jam. Efektifitas disekitar sumuran, sampel atau zat digunakan tidak
antibakteri ditentukan dengan mengukur zona mdapat menghambat pertumbuhan bakteri.
penghambat disekitar sumuran, semua pengujian
dilakukan triplo. Jika terjadi zona hambat (zona
Analisis Data
Analisis data merupakan analisis yang diperoleh dari pengamatan stabilitas fisik krim ekstrak kulit Apel Manalagi.
Pengamatan berupa uji KHM ekstrak kulit Apel Manalagi uji organaleptis, uji viskositas, uji pH, uji daya lekat, uji daya
sebar, dan uji daya hambat bakteri Propionibacterium acnes dengan krim bahan ekstrak kulit Apel Manalagi dalam
konsentrasi tertentu.
125
JURNAL ANALIS FARMASI
Volume 6, No. 2 Oktober 2021, Hal 122 – 129
- Daya
Sediaan Lengket Keterangan
(Detik)
Formulasi I >4 Memenuhi persyaratan
Detik
1. apabila memiliki daya
lekat >4
Formulasi II >4
2. Detik (14)
detik
Tabel 6. Hasil Uji Daya Hambat Sediaan Krim Ekstrak Kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) Terhadap Bakteri
Propionibacterium acnes.
126
JURNAL ANALIS FARMASI
Volume 6, No. 2 Oktober 2021, Hal 122 – 129
127
JURNAL ANALIS FARMASI
Volume 6, No. 2 Oktober 2021, Hal 122 – 129
semakin kuning, adapun bau dari krim ekstrak kulit Hasil penelitian menunjukan bahwa uji sediaan
Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) yaitu khas bau krim ekstrak kulit Apel Manalagai (Malussylvestris
obat tradisional yang dihasilkan dari kulit Apel Mill) menggunakan ekstrak 10% dan 5% memiliki
Manalagi (Malus sylvestris Mill) tersebut. Evaluasi aktivitas antibakteri terhadap bakteri
homogenitas menunjukan bahwa semua sediaan krim Propionibacterium acnes. Pada konsentrasi 10%
memiliki homogenitas yang baik, hal ini ditunjukan didapatkan rata-rata zona hambat tertinggi yaitu
ketika sejumlah krim dioleskan pada sekeping kaca sebesar 20,11 mm, pada konsentrasi 5% didapatkan
terlihat susunan yang homogen. Hal ini sesuai dengan rata-rata zona hambat tertingi yaitu 19,94 mm. Dari
persyaratan homogenitas krim yaitu harus menunjukan data kedua formulasi sediaan krim 10% dan 5%
susunan yang homogenya dan tidak terlihat butiran memenuhi ketentuan standar diameter zona hambat
kasar (14). menurut CLSI yaitu sedang/intermed (15-20 mm)
Uji daya sebar merupakan pengujian yang kuat/sensitive (>21 mm)(2).
dilakukan untuk mengetahui kelunakan sediaan krim Adapun zona hambat yang dihasilkan kontrol
esktrak kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) positif klindamicin dengan rata- rata 19,71 mm dan
evaluasi ini dilakukan dengan cara sejumlah krim termasuk zona hambat sedang. Penggunaan
diletakkan diatas kaca kemudian bagian atasya clindamycin sebagai kontrol positif dikarenakan
diberikan kaca yang sama dan ditingkatkan bebanya, clindamycin merupakan suatu pilihan yang efektif
diameter penyebaran diukur pada setiap penambahan untuk bakteri penyebab jerawat.
beban semakin besar diameter daya sebar maka Berdasarkan penelitian (8)menunjukan bahwa
semakin tinggi kecepatan krim menyebar dan mudah kekuatan daya hambat ekstrak kulit Apel Manalagi
diusapkan dikulit. Hasil daya sebar krim dengan (Malus sylvestris Mill) Terhadap pertumbuhan
konsentrasi ekstrak 10% dan 5% memenuhi Streptococcus mutans pada semua konsentrasi
persyaratan yaitu berada direntang 5-7 cm (14). termasuk kedalam kategori kuat. Oleh karena itu pada
Uji pH dilakukan untuk mengetahui kestabilan penelitian ini menguji kekuatan uji daya hambat
suatu sediaan apakah sediaan tersebut aman atau ekstrak kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill)
tidak dan terjadi iritasi atau tidak bila digunakan pada dalam bentuk sediaan krim dan menghasilkan zona
kulit manusia. Dari hasil pengukuran pH sediaan krim hambat sedang dan kuat. Zat antibakteri ekstrak kulit
ekstrak kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) dengan Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) antara lain terdiri
konsentrasi 10% dan 5% sebesar 5,62 dan 5,64 nilai dari polifenol, fitokimia turunan fenol, yang terdiri dari
yang dihasilkan memenuhi persyaratan. Nilai pH yang katekin, kuersetin, phlorizin dan asam klorogenik, dan
terlalu basa dapat menyebabkan kulit menjadi kering. flavonoid. Flavonoid merupakan salah satu golongan
Uji daya lekat dilakukan untuk mengetahui senyawa fenol alam yang terbesar dalam tanaman
seberapa besar kemampuan krim melekat pada kulit dan tersusun oleh 15 atom karbon sebagai inti
dalam waktu tertentu sehingga dapat berfungsi secara dasarnya.
maksimal pada penghantaran obat. Hasil daya lekat Mekanisme kerja flavonoid sebagai antibakteri
krim ekstrak kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) adalah membentuk senyawa kompleks dengan protein
dengan konsentrasi 10% dan 5% memenuhi ekstraseluler dan terlarut sehingga dapat merusak
persyaratan yaitu lebih dari 4 detik. membrane sel bakteri dan diikuti dengan keluarnya
Metode yang digunakan dalam uji daya hambat senyawa intraseluler. Hasil uji antibakteri menunjukan
krim ekstrak kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) bahwa isolat flavonoid ekstrak kulit Apel Manalagi
terhadap bakteri Propionibacterium acnes adalah (Malus sylvestris Mill) menghasilkan adanya zona
metode sumuran, yaitu dengan membuat lubang pada hambat. Hal ini menunjukan bahwa yang berperan
media Mueller Hinton Agar (MHA). Penggunaan aktif dalam menghambat pertumbuhan bakteri adalah
metode sumuran dikarenakan metode sumuran terjadi flavonoid. Flavonoid menghambat pertumbuhan
osmolaritas dari konsentrasi yang lebih tinggi dari bakteri dengan cara merusak dinding sel,
metode disk cakram. Metode sumuran setiap lubang menonaktifkan kerja enzim, berikatan dengan adhesin,
dimasukkan sediaan krim sehingga osmolaritas terjadi dan merusak membran sel. Cincin beta dan gugus –
lebih menyeluruh, lebih homogen dan lebih kuat untuk OH pada flavonoid diduga sebagai struktur yang
menghambat pertumbuhan bakteri. Kontrol negative bertanggung jawab sebagai aktivitas antibakteri.
yang digunakan sebagai formulsi krim adalah
aquadest.
128
JURNAL ANALIS FARMASI
Volume 6, No. 2 Oktober 2021, Hal 122 – 129
Kesimpulan
Dari hasil penelitian uji daya hambat sediaan krim Jawetz. 2015. Mikrobiologi kedokteran. Jakarta: EGC.
ekstrak kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill)
Terhadap Bakteri Propionibacterium acnes sebagai Octaviany, V. D., et al. 2017. Uji Efektifitas Ekstrak
penyebab jerawat dapat disimpulkan bahwa Sediaan Kulit Apel (Malussylvestris Mill) Var. Rome Beauty
krim ekstrak kulit Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) Terhadap Kadar Enzim SGPT Tikus
Terhadap Bakteri Propionibacterium acnes sebagai (Rattusnorvegicus) Galur Wistar Yang Diinduksi
penyebab jerawat dapat menghambat pertumbuhan CCL4 (Karbon Tetra Klorida). Jurnal Profesi
bakteri Propionibacterium acnes, Konsentrasi Medika, Vol.11, No.2.
hambatan minimum (KHM) sediaan krim ekstrak kulit
Apel Manalagi (Malus sylvestris Mill) diperoleh pada Pratiwi,S.T.2008.Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: EMS.
konsentrasi 5%. Konsentrasi hambatan minimum
(KHM) sediaan krim ekstrak kulit Apel Manalagi (Malus Putri, Nuriyanda Setia. 2020. Uji Daya Hambat
sylvestris Mill) diperoleh pada zona hambat minimum Formulasi Krim Dengan Bahan Aktif Ekstrak Daun
dengan nilai 19,72 mm.Dari hasil yang didapat pada Pegagan (Centella asiatica (L)Urb) Sebagai
penelitian krim ekstrak kulit Apel Manalagi (Malus Antijerawat Terhadap Bakteri Propionibacterium
sylvestris Mill) maka masuk kedalam kategori acne Dengan Metode Difusi Sumuran. KTI.
sensitive. Univ.Malahayati. Lampung.
129