Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com
Ini adalah artikel akses terbuka yang diterbitkan di bawah Creative Commons Attribution (CC-BY) Lisensi,
yang mengizinkan penggunaan, distribusi, dan reproduksi tanpa batas dalam media apa pun, asalkan
penulis dan sumbernya disebutkan.

Artikel

Kutip ini:kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX pubs.acs.org/crt

Pemodelan Toksikokinetik−Toksikodinamik Pengaruh Pestisida terhadap

PertumbuhanRattus norvegicus
Thomas Martin,*,† Helen Thompson,‡Pernille Thorbek,‡,∥dan Roman Ashauer†,§
†Universitas York, Departemen Lingkungan Hidup, Heslington, York YO10 5NG, Inggris Raya
‡Syngenta, Pusat Penelitian Internasional Jealott's Hill Bracknell, Berkshire RG42 6EY, Inggris Raya
§Syngenta Crop Protection AG, Basel 4002, Swiss

*Sinformasi pendukung

ABSTRAK:Penilaian risiko ekologis dilakukan terhadap bahan kimia seperti pestisida sebelum dilepaskan
Lihat https://pubs.acs.org/sharingguidelines untuk opsi tentang cara membagikan artikel yang diterbitkan secara sah.

ke lingkungan. Penilaian risiko tersebut saat ini bergantung pada ringkasan statistik yang dikumpulkan
dalam studi laboratorium standar. Namun, statistik ini hanya mengekstrak informasi terbatas dan
bergantung pada durasi paparan. Ekstrapolasi mereka terhadap skenario ekologi yang realistis pada
dasarnya terbatas. Model efek mekanistik menyimulasikan proses yang mendasari toksisitas sehingga
berpotensi mengatasi masalah ini. Model toksikokinetik−toksikodinamik (TK−TD) beroperasi pada
Diunduh melalui 84.54.57.178 pada 3 November 2019 pukul 00:44:51 (UTC).

tingkat individu, memprediksi konsentrasi internal suatu bahan kimia dari waktu ke waktu dan tekanan
yang ditimbulkannya pada suatu organisme. Model TK−TD sangat cocok untuk mengatasi perbedaan
pola paparan antara skenario laboratorium (konstan) dan lapangan (variabel). Sejauh ini, hanya sedikit
penelitian yang berupaya memprediksi dampak tidak mematikan dari paparan pestisida terhadap
mamalia liar di lapangan, meskipun dampak tersebut menjadi perhatian khusus sehubungan dengan
paparan jangka panjang. Kami mengembangkan model TK−TD berdasarkan teori anggaran energi
dinamis (DEB), yang dapat diparametrikan dan diuji hanya dengan menggunakan studi peraturan
standar. Kami
menunjukkan bahwa pendekatan ini dapat digunakan secara efektif untuk memprediksi efek racun pada berat badan tikus dari waktu ke waktu. Prediksi model
memisahkan dampak dari penghindaran pemberian pakan dan tindakan racun, dengan menyoroti faktor mana yang menjadi pendorong utama dampak
terhadap pertumbuhan. Informasi tersebut relevan dengan risiko ekologis yang ditimbulkan oleh suatu senyawa karena di dalam lingkungan, sumber
makanan alternatif mungkin tersedia atau tidak tersedia bagi spesies fokus. Meskipun penelitian ini berfokus pada satu titik akhir, yaitu pertumbuhan,
pendekatan ini dapat diperluas hingga mencakup keluaran reproduksi. Kerangka kerja yang dikembangkan mudah digunakan dan dapat bermanfaat bagi
penelitian ekologi dan toksikologi serta penilai risiko di industri dan badan pengatur.

■ PERKENALAN
Sebelum bahan kimia dapat didaftarkan untuk digunakan, bahan
proses, teknik pemodelan dapat menambah realisme ekologi pada
ekstrapolasi dan bahkan mengurangi persyaratan pengujian pada hewan.10
Memperhitungkan ketidaksesuaian paparan antara laboratorium dan
kimia tersebut harus menjalani penilaian risiko ekologis (ERA),
lapangan11diidentifikasi sebagai salah satu dari lima hambatan utama
proses ini sangat ketat terutama untuk pestisida pertanian, yang
dalam penilaian risiko jangka panjang pestisida untuk mamalia (bersama
dirancang untuk menjadi racun bagi spesies hama.1,2Secara praktis
dengan pemilihan titik akhir toksisitas yang sesuai, ekstrapolasi toksisitas
tidak mungkin menentukan dampak ekologis suatu bahan kimia
antar spesies, penilaian paparan, dan evaluasi dampak pada tingkat
secara eksperimental. Sebaliknya, penilaian risiko bergantung pada
populasi12). Dalam uji toksisitas kronis, tikus atau mencit terkena
ekstrapolasi dari ringkasan statistik seperti “tingkat efek merugikan
pestisida dengan konsentrasi konstan dalam makanannya selama jangka
yang tidak diamati” (NOAEL) yang dihasilkan untuk beberapa spesies
waktu hingga 2 tahun.6,13-15Paparan yang terus-menerus seperti ini tidak
dalam penelitian laboratorium standar.3Namun, statistik tersebut
realistis di lahan dimana penggunaan pestisida tidak dilakukan secara
sebaiknya diekstrapolasi dengan hati-hati karena tidak
konstan sepanjang tahun. Disparitas ini dapat diatasi melalui
memperhitungkan proses yang menyebabkan efek toksik dan
penggunaan pemodelan toksikokinetik-toksikodinamik (TK−TD).10Model
bergantung pada durasi paparan.4,5Selain itu, mereka dihasilkan
TK−TD bekerja pada tingkat individu, memprediksi ukuran internal
dalam kondisi suhu yang terkendali (seharusnya optimal) dan
konsentrasi bahan kimia dari waktu ke waktu (toksikokinetik) dan
makanan serta air tersedia secara bebas6-yang tidak realistis di
tekanan yang ditimbulkannya pada suatu organisme (toksikodinamik).
lapangan. Kurangnya realisme ekologis dalam metode penilaian
Dengan demikian, dampak pada titik akhir tertentu akibat paparan yang
risiko standar saat ini merupakan suatu permasalahan.7
bervariasi terhadap waktu dapat diprediksi.16
Model efek mekanistik (MEM) bertujuan untuk mensimulasikan mekanisme
Penggunaan pemodelan TK−TD kini telah direkomendasikan untuk
dimana bahan kimia mempengaruhi individu, populasi, dan komunitas dan oleh
karena itu memungkinkan kita untuk memprediksi bagaimana bahan kimia akan
tujuan peraturan tertentu, seperti memprediksi kelangsungan hidup

merespons dalam kondisi yang belum teruji dan lebih relevan secara ekologis.3Ini
merupakan prospek yang menarik dengan potensi besar untuk digunakan dalam ERA Diterima:22 Juli 2019
pestisida.8,9Dengan berfokus pada hal yang mendasarinya

© XXXX Masyarakat Kimia Amerika A DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294

kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi
organisme akuatik.17Namun, tujuan perlindungan burung dan
mamalia di Eropa menyatakan bahwa tidak boleh ada kematian
yang terlihat terkait dengan pestisida1digunakan sehingga efek
sublethal lebih relevan dibandingkan dengan paparan yang realistis.
Efek tidak mematikan dapat diprediksi menggunakan kerangka
pemodelan “DEBtox”,18,19menggabungkan pemodelan TK−TD
dengan teori Dynamic Energy Budget (DEB).20DEB adalah teori
metabolisme mapan yang telah diterapkan pada berbagai taksa,21
menggambarkan secara matematis proses perolehan dan alokasi
energi yang menentukan sejarah kehidupan suatu organisme.
Menggunakan pemodelan TK−TD untuk memberikan tekanan pada
proses-proses ini dapat menghasilkan prediksi efek pada titik akhir
yang tidak mematikan seperti pertumbuhan dan reproduksi.
Namun, sangat sedikit penelitian yang membahas mamalia, karena
penelitian DEBtox sejauh ini hanya berfokus pada invertebrata22dan
baru-baru ini ikan.23,24
Saat ini DEBtox terbatas pada aplikasi penelitian karena dianggap
tidak cukup ramah pengguna untuk digunakan oleh regulator.25
Untuk tujuan ini, versi sederhana dari teori, “DEBkiss”, dikembangkan di
mana hanya massa struktural tubuh (tulang, otot, organ, dll.) yang
dianggap tanpa penyimpanan cadangan.26Model ini mempertahankan
banyak prinsip DEB tetapi dengan lebih sedikit parameter dan
persamaan model. Ini dikembangkan untuk aplikasi yang
mengutamakan kesederhanaan dan kemudahan penggunaan, seperti
analisis data toksisitas atau untuk digunakan dalam model populasi
berbasis individu. Satu-satunya studi yang dipublikasikan hingga saat ini
di mana pemodelan TK−TD telah digunakan untuk memprediksi efek
sublethal pada mamalia menggunakan DEBkiss.27Meskipun data yang
tersedia terbatas, model ini secara akurat menyimulasikan dampak racun
lingkungan terhadap pertumbuhan dan reproduksi cerpelai Amerika (Visi
Mustela).Hasil-hasil ini menunjukkan bahwa kerangka kerja yang
disederhanakan ini mungkin cukup untuk penerapan praktis dan
peraturan.
Di sini kami menguji kegunaan DEBkiss dengan menggunakan data
mentah dari uji toksisitas dosis makanan berulang dan memodelkan efek
beberapa pestisida pada tikus. Sebagai studi pertama yang
menggunakan data peraturan untuk tujuan ini, kami mengadopsi praktik
yang memulai dengan metode yang paling sederhana dan
mengidentifikasi bidang-bidang yang mungkin memerlukan teknik yang
lebih kompleks. Konsentrasi pestisida internal dimodelkan dengan model
satu kompartemen dan titik akhir tunggal, berat badan, dimodelkan dari
waktu ke waktu menggunakan model pertumbuhan DEBkiss. Penelitian
kami bertujuan untuk menetapkan prosedur praktis untuk parametrisasi,
kalibrasi, dan validasi model DEBtox menggunakan data peraturan dan
untuk menilai kualitas dan kegunaan prediksi. Selain itu, kami bertujuan
untuk meningkatkan interpretasi studi toksisitas standar dengan
mengekstraksi informasi baru dan bermakna menggunakan pemodelan.
■
METODE
Data.Semua data yang digunakan di sini tersedia dari studi peraturan
yang ada (Syngenta, tidak dipublikasikan) yang dilakukan sesuai dengan
94/79/EC,28menyelidiki toksikokinetik dan toksisitas kronis acibenzolar-S-
metil (benzothiadiazole; fungisida, insektisida dan penggerak tanaman29),
azoxystrobin (strobilurin; fungisida30), fenpropidin (tidak diklasifikasikan;
fungisida31), fludioxonil (fenilpirol; fungisida32), mandipropamid
(mandelamide; fungisida33) dan prosulfuron (sulfonilurea; herbisida34),
dan thiamethoxam (neonicotinoid; insektisida35) pada tikus laboratorium
(Rattus norvegicus).
Studi toksikokinetik mengikuti OECD 41736pedoman. Hewan diobati
dengan dosis oral tunggal (gavage) a14Pestisida berlabel radio C dengan
radioaktivitas total yang ditemukan di berbagai jaringan dan kotoran
dipantau selama beberapa hari. Hewan-hewan tersebut diberi akses
gratis ke makanan standar bersertifikat.
B DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
Artikel
Kumpulan data berbeda antar pestisida namun mengikuti kerangka
umum. Setidaknya dua tingkat dosis dipelajari dengan biasanya tiga
hewan jantan dan tiga hewan betina di setiap kelompok perlakuan.
Laporan tersebut mencakup data yang merinci proporsi dosis awal yang
dikeluarkan melalui tinja, urin, dan empedu∼48 jam setelah dosis oral
tunggal, memberikan persentase rata-rata dosis yang diserap ke dalam
tubuh. Konsentrasi pestisida dalam darah hewan diukur ∼48 jam setelah
dosis tinggi atau rendah tunggal. Konsentrasi pestisida juga diukur pada
jaringan tubuh yang berbeda dari hewan yang dimusnahkan∼4 titik
waktu setelah satu dosis tinggi atau rendah. Rincian dosis, termasuk
dosis pastinya (mg(AI)), berat badan (g) pada awal (dan dalam beberapa
kasus di akhir) pengujian dan dosis yang dicapai (mg(AI)×
kg(BW) − 1) disediakan untuk setiap hewan.
Studi toksisitas kronis yang berlangsung selama 28 hari (OECD 407), 90 hari
(OECD 408) atau 2 tahun (OECD 414 atau 416) dilakukan sesuai dengan
pedoman OECD.6,13-15Hewan berumur sekitar 5−7 minggu diberikan makanan
yang mengandung pestisida dan beberapa titik akhir toksikologi yang
dipantau selama masa penelitian. Hewan dipelihara dalam kondisi standar
dengan makanan dan air tersedia ad libitum. Setiap penelitian memberikan
pengamatan mingguan individu terhadap berat badan (g) dan konsumsi
makanan (g(diet)×hari−1). Ukuran sampel biasanya 5 hewan per jenis kelamin
per perlakuan dalam penelitian 28 hari, 10 hewan per jenis kelamin dalam
penelitian 90 hari, dan 50−80 hewan per jenis kelamin dalam penelitian 2
tahun. Konsentrasi pestisida yang diukur dalam makanan setiap perlakuan
juga dilaporkan. Setiap penelitian terdiri dari kelompok kontrol dan setidaknya
3 perlakuan yang diberi pakan yang mengandung konsentrasi pestisida
berbeda. Seiring bertambahnya durasi penelitian, dosis makanan umumnya
diturunkan.
Model.Model Toksikokinetik.Untuk setiap racun (dilambangkan “AI” untuk
bahan aktif), konsentrasi internal dimodelkan menggunakan model TK satu
kompartemen dengan kinetika orde pertama. Konsentrasi internal di sini
hanya mengacu pada racun yang ada di jaringan tubuh pada waktu tertentu
dan tidak termasuk racun di usus yang belum diserap. Karena mamalia darat
terutama terpapar pestisida melalui makanannya, konsentrasi racun dalam
usus juga dimodelkan sebagai kompartemen “depot” perantara. Ini adalah
pendekatan yang sangat mirip dengan Bednarska dkk.37tetapi kami juga
memperhitungkan perubahan ukuran tubuh dengan memasukkan
pengenceran berdasarkan pertumbuhan dan perubahan rasio luas permukaan
terhadap volume sesuai Gergs et al.38Persamaan model ditunjukkan di bawah
ini.
ΔCUsus=SAYA-L∞/LukasACUsusF-CUsus(ΔW/W) (1)
ΔCInt=L∞/LukasACUsusF-L∞/LukaseCInt-CInt(ΔW/W) (2)
di mana ΔCmenunjukkan perubahan berat badan (dilambangkan “BW”)
− 1×
dosis normal,C,racun dari waktu ke waktu (Mass(AI)×Massa(BW)
T−1) dan subskrip Gut dan Int masing-masing menunjukkan usus dan internal;SAYA
-1
adalah tingkat konsumsi racun (Mass (AI)×Massa (BW) ×T−1);Fmewakili
bioavailabilitas (tanpa dimensi);kADankemewakili konstanta laju
penyerapan racun dari usus dan penghapusan racun dari sistem (T−1);W
menunjukkan berat badan, dan ΔWadalah perubahan berat badan
seiring waktu;Ladalah panjang volumetrik (akar pangkat tiga volume
benda), danL∞adalah panjang volumetrik akhir dari spesies uji.
Model Pertumbuhan.Berat badan dari waktu ke waktu dimodelkan dengan
DEBkiss26persamaan pertumbuhan:
ΔW=kamu
VA
(kfJASAYA
W2/3-JayW)M (3)
di mana ΔWmewakili perubahan berat badan total (W)
lembur, kamuVAmewakili efisiensi konversi asimilat
−1
massa struktural (Mas(BW)×Massa (Berasimilasi)),kadalah proporsi
berasimilasi dialokasikan ke soma,Fadalah tingkat pemberian makan berskala (tanpa unit),
JASAYAadalah laju asimilasi spesifik luas permukaan maksimum
− 2/3×T−1
(Massa(Berasimilasi) ×Massa(BW) ) DanJay Mspesifik massa
-
tingkat pemeliharaan (Mass(Berasimilasi)×Massa(BW) 1×T−1). DEBkissnya
model direpresentasikan secara grafis diGambar 1.
Endotermik juga dikenakan biaya pemeliharaan spesifik luas
permukaan, yang menyebabkan hilangnya panas ke lingkungan.
Namun, selama suhu lingkungan berada dalam zona termonetral
suatu spesies39ini diasumsikan nol.40Pedoman laboratorium
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi
Gambar 1.Representasi grafis dari model DEBkiss. Nilai darikmenentukan
proporsi sumber daya yang diasimilasi dari makanan yang dialokasikan untuk
pemeliharaan dan pertumbuhan atau kematangan dan reproduksi. Proses
yang diberi garis merah adalah proses yang dapat mengalami stres.
mengharuskan hewan pengerat dipelihara pada usia 22 tahun±3°C, karena ini
dianggap berada dalam zona termonetral tikus.41Penelitian terbaru menunjukkan
bahwa kisaran suhu ini terlalu rendah42namun untuk kesederhanaan diasumsikan
bahwa kehilangan panas dapat dihilangkan.
Parameternyakmewakili proporsi asimilasi yang dialokasikan untuk pemeliharaan
dan pertumbuhan dengan sisanya (1-k)menuju pematangan dan reproduksi. Teori
DEBkiss menyatakan bahwa hingga masa pubertas, sumber daya ini digunakan
seiring perkembangan hewan dan disimpan sebagai “penyangga reproduksi” selama
masa pubertas dan dewasa.26Namun, karena reproduksi tidak dimodelkan dalam
penelitian ini, buffer reproduksi tidak memiliki tujuan lain selain membuat model
menjadi lebih kompleks. Sebaliknya, diasumsikan bahwa 1-kCabang terus digunakan
seiring dengan perkembangan hewan menjadi dewasa secara seksual (pada usia 70
−90 hari43) dan kemudian untuk menjaga kedewasaan, sebuah proses yang juga
dapat dimasukkan dalam DEBkiss.26Hanya hewan yang belum kawin yang
dimasukkan dalam penelitian ini, sehingga massa tubuh tidak terpengaruh oleh
kehamilan.
M 2/3<Jay MWtapi
Jika asupan makanan dikurangi sedemikian rupakf jAAW totalnya
tingkat asimilasifjA AW
M 2/3≥Jay MW (yaitu, dalam situasi di mana makanan
asupan cukup untuk mempertahankan homeostatis tetapi tidak untuk tumbuh), lalu
ΔW =0 karena sumber daya yang tersedia dialihkan dari 1-kcabang untuk memenuhi
biaya pemeliharaan. Jika tingkat asimilasi total tidak mencukupi
memenuhi biaya pemeliharaan, yaitufjA AW
M 2/3<Jay MW,lalu tingkat pertumbuhannya
menjadi negatif karena jaringan dimetabolisme untuk memenuhi kebutuhan
pemeliharaan.
ΔW= (fJA W2/3-JayW)/Mkamu
SAYA AV
Di manakamuAVadalah efisiensi konversi struktur menjadi asimilasi. Nilai darikoleh karena itu
menentukan titik di mana laju pemberian makan menjadi tidak mencukupi untuk
pertumbuhan namun tidak berdampak pada permulaan penurunan berat badan. Titik di
mana penurunan berat badan menyebabkan kematian tidak diketahui karena kurangnya
data. Pengobatan apa pun yang menyebabkan pengurangan pemberian makan secara
drastis akan ditinggalkan karena pedoman menyatakan bahwa pemberian dosis tidak boleh
menyebabkan “kematian atau penderitaan parah”.14,15
Model Toksikodinamik.Terakhir, model toksikodinamik DEBtox18,19,44digunakan
untuk menghubungkan konsentrasi racun internal dengan tekanan pada
pertumbuhan. Diasumsikan bahwa untuk xenobiotik apa pun, terdapat “konsentrasi
tanpa efek” (NEC) di bawahnya yang tidak menyebabkan tekanan pada proses
biologis apa pun. NEC adalah ambang batas yang tidak bergantung pada waktu dan
oleh karena itu tidak memiliki hubungan dengan durasi paparan. Dengan asumsi
bahwa setiap molekul racun di luar NEC-nya menciptakan jumlah “stres” yang sama
akan menghasilkan hubungan “linier dengan ambang batas”, yang dapat dimodelkan
secara sederhana (Gambar 2):
Dalam pendekatan kami, stres dapat diterapkan pada salah satu dari tiga
parameter pertumbuhan (“cara tindakan fisiologis”19,45) yang masing-masing
merespons stres secara berbeda, ini adalah tingkat asimilasi maksimum,
Artikel
Gambar 2.Stres meningkat dengan konsentrasi racun internal melebihi
ambang batas, dimanaSadalah stres tak berdimensi danCTadalah “toleransi
-1
konsentrasi” (Mas(AI)×Massa (BW)). Di sini NEC menentukan
titik di mana tegangan melebihi nol sementaraCTadalah peningkatanCInt
sesuai dengan peningkatanSdari 1. Ini berarti gradien dariSadalah
1/CTKapanCIntmelebihi NEC.
JASAYA, tingkat pemeliharaan,Jay M, atau efisiensi konversi,kamuVA
(Gambar 3). Proporsi sumber daya yang dialokasikan untuk soma,k, secara
teoritis dapat dipengaruhi oleh suatu racun, namun data mengenai reproduksi
diperlukan untuk membedakannya dengan efek pada asimilasi dan efek
tersebut tidak terdokumentasi dengan baik.44
Implementasi Model.Semua model diimplementasikan di Matlab (ver. R2016b).
Model pertumbuhan TK dan TK−TD dikembangkan dengan BYOM46platform model
fleksibel (ver. 4.1), beberapa fungsi dan skrip tambahan juga dikembangkan sebagai
bagian dari penelitian ini. Semua nilai parameter yang dipasang diperoleh
menggunakan algoritma simpleks Nelder Mead untuk memaksimalkan fungsi
kemungkinan, berdasarkan data yang diamati.47Pembuatan profil kemungkinan juga
digunakan untuk memeriksa bahwa kecocokan awal bukanlah local optima.48
Parameter model TK disesuaikan dengan rata-rata konsentrasi pestisida internal dari
waktu ke waktu, sedangkan parameter pertumbuhan dan model TD disesuaikan
dengan rata-rata berat badan dari waktu ke waktu (Tabel 1).
Pemodelan toksikodinamik juga memerlukan pemilihan cara
tindakan fisiologis. Cara tindakan fisiologis yang paling sesuai
ditentukan dengan menggunakan kriteria informasi Akaike.49Karena
model alternatif tidak disarangkan, uji rasio kemungkinan tidak
sesuai namun AIC tidak memiliki persyaratan seperti itu.50
Pemodelan TK.Parameterisasi.Persentase dosis yang diserap ke dalam
tubuh dilaporkan dalam studi ekskresi. Data ini memberikan nilai
parameterFdalam model TK (persamaan 1Dan2). Jika persentase yang
terserap sangat tinggi (>90%), maka Fdiberi nilai 1 karena ini mewakili
skenario terburuk. Untuk studi dosis tunggal nilaiSAYAadalah nol
sedangkan konsentrasi usus awal adalah dosis rata-rata yang dicapai
(4)
untuk setiap pengobatan. Jika berat badan dicatat pada awal dan akhir
pengujian, maka ΔWdihitung sebagai tingkat pertumbuhan linier yang
diamati pada setiap perlakuan. Jika tidak, maka diasumsikan bahwa ΔW =
0 karena pengenceran berdasarkan pertumbuhan memiliki efek minimal
pada model selama periode pengujian yang singkat, biasanya 48 jam.
Panjang maksimum dihitung sebagai akar pangkat tiga dari 782 cm3yang
merupakan rata-rata volume akhir tikus Sprague−Dawley jantan dengan
ketersediaan makanan ad libitum,52dengan asumsi bahwa rata-rata kepadatan
jaringan basah sama dengan air.40
Kalibrasi.Setelah menentukan input model lainnya langsung dari data
eksperimen, dua parameter model TK bebas dibiarkan disesuaikan dengan
data, yaitu konstanta laju penyerapan dan eliminasi.kADanke. Data perjalanan
waktu terbaik untuk konsentrasi racun internal (jumlah titik waktu tertinggi)
berasal dari darah karena dapat diambil sampelnya tanpa menghentikan
hewan. Untuk memastikan apakah konsentrasi pestisida dalam darah sesuai
dengan beban tubuh secara keseluruhan, koefisien korelasi Pearson
digunakan untuk menentukan apakah koefisien tersebut berkorelasi secara
signifikan dengan konsentrasi di seluruh jaringan sampel lainnya. Jika ya, maka
data konsentrasi darah (dalam μg×
C DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi Artikel

Gambar 3.Plot yang menunjukkan bagaimana parameter model pertumbuhan merespons konsentrasi racun internal ketika stres diterapkan. A.Maksimal
tingkat asimilasiJA SAYAberkurang secara linier dengan tegangan hingga mencapai nol kapanS =1. B. Tingkat pemeliharaanJay Mmeningkat secara linear dengan stres dan adalah
dua kali lipat kapanS =1. C. Karena biaya per unit sintesis jaringan meningkat secara linier seiring dengan stres, efisiensi konversikamuVAmendekati nol tanpa gejala,
efisiensi berkurang setengahnya ketikaS =1.

Tabel 1. Daftar Lengkap Parameter ModelA

nama penjelasan nilai ukuran

pertumbuhan

k fraksi asimilat untuk pertumbuhan dan pemeliharaan 0,8*

JASAYA laju asimilasi maksimum per unit luas permukaan laju disesuaikan dengan data G(Berasimilasi)×G (BW)− 2/3 ×T−1
JayM pemeliharaan per unit biomassa disesuaikan dengan data G(Berasimilasi)×G (BW)− 1×T−1
kamuVA
biomassa baru per unit asimilasi 0,45 (sesuai Sible & Calow51) G(BW)×G(Berasimilasi) − 1
kamuAV
hasil asimilat per unit biomassa 0,8* G(Berasimilasi)×G(BW) − 1
toksikokinetik
F proporsi diserap dari usus laju dihitung dari data
kA penyerapan konstan laju disesuaikan dengan data
T−1
ke eliminasi konstan disesuaikan dengan data
T−1
toksikodinamik
−1
NEC tidak ada efek konsentrasi disesuaikan dengan data mg(AI)×kg(BW)
−1
CT toleransi konsentrasi disesuaikan dengan data mg(AI)×kg(BW)
parameter lainnya
F tingkat pemberian makan yang ditingkatkan dihitung dari data
SAYA panjang volumetrik laju dihitung dari data mg(AI)×kg(BW) − 1×T−1

L konsumsi pestisida
W1/3 cm
A
L∞ panjang volumetrik akhir 1/3ataukfJSAYA cm
W∞ Jay
M
LM panjang volumetrik maksimum JA cm
WM 1/3ataukSAYA
Jay M
3
W∞ massa tubuh struktural ultimat massa 782 (sesuai Hubert dkk.52) atauL∞ G
WM tubuh struktural maksimum LM3 G
variabel keadaan
−1
CUsus konsentrasi pestisida dalam usus (ΔCUsus) - L∞/LukasACUsusF-CUsus(ΔW/W) mg(AI)×kg(BW) ×T − 1
−1
CInt konsentrasi pestisida internal (ΔCUsus) L∞/LukasACUsusF-L∞/LukaseCInt-CInt(ΔW/W) mg(AI)×kg(BW) ×T − 1
W massa struktur tubuh (ΔW) kamu
VA
W2/3-JayWM)
(kfJASAYA G(BW) ×T−1
ANilai parameter yang ditandai dengan “*” adalah nilai default yang disarankan oleh Jager, Martin, & Zimmer.26.

−1
G(darah) ) dianggap mewakiliCInt(dalam mg×kg(BW)) Dan − 1
dapat digunakan untuk menyesuaikan ΔCInt(persamaan 2). Jika tersedia,
konsentrasi karkas utuh dapat digunakan sebagai alternatif, namun data yang
tersedia lebih sedikit.
Data pertama kali diperiksa untuk menentukan apakah terdapat perbedaan
nyata dalam kinetika antara pria dan wanita. Properti yang dipertimbangkan
adalah konsentrasi puncak rata-rata (Cmaks), waktu setelah pemberian dosis
tercapai (Tmaks) dan waktu yang dibutuhkan untuk menghilangkan pestisida
dari darah. Jika terlihat jelas perbedaannya, maka model dikalibrasi secara
terpisah untuk pria dan wanita.
Untuk beberapa jenis pestisida, individu hewan yang sama diambil sampelnya
untuk seluruh periode pengamatan setelah pemberian dosis, untuk jenis pestisida
ada perbedaan yang signifikan dalam nilai yang dipasangkADanke
terkait dengan jenis kelamin, tingkat dosis (keduanya terpisah) atau berat (kontinu).
Jika lebih dari satu radiolabel yang digunakan, maka hal ini juga dimasukkan sebagai
faktor.
Jika jenis kelamin merupakan satu-satunya faktor yang mempunyai pengaruh
signifikan, maka model dikalibrasi untuk laki-laki dan perempuan secara terpisah. Jika
jenis kelamin dan berat badan terbukti mempunyai pengaruh yang signifikan, maka
uji Mann−Whitney U digunakan untuk menentukan apakah ada perbedaan berat
badan yang signifikan antara pria dan wanita. Jika ya, maka dilakukan pengulangan
ANOVA dengan data dipisahkan berdasarkan jenis kelamin. Jika tidak ada efek yang
ditemukan pada masing-masing jenis kelamin, maka model tersebut hanya dipasang

lainnya hanya sebagian waktu saja yang tersedia untuk masing-masing individu. Jika pada pria dan wanita secara terpisah. Jika konstanta laju dipengaruhi secara

data kursus waktu lengkap tersedia, model pertama kali disesuaikan dengan data signifikan oleh faktor selain jenis kelamin, maka hal ini dicatat bersama dengan hasil
setiap individu. ANOVA multiway dilakukan untuk menentukan apakah TK lengkap (informasi pendukung,SI).

D DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi
Terakhir, model dikalibrasi berdasarkan rata-rata (pada setiap titik waktu)
konsentrasi darah yang diamati pada kelompok dosis tinggi dan rendah secara
bersamaan. Apabila diperlukan, hal ini dilakukan secara terpisah untuk pria
dan wanita.
Validasi.Studi toksikokinetik mengambil sampel konsentrasi pestisida yang
ditemukan di berbagai jaringan tubuh, termasuk darah, dari hewan yang
diberhentikan pada titik waktu berbeda setelah pemberian dosis oral tunggal.
Sampel darah disusun untuk memberikan kumpulan data waktu independen
mengenai konsentrasi racun internal. Ini kemudian digunakan untuk menilai
kinerja model dengan membandingkan konsentrasi pestisida dalam darah
individu yang diterminasi dengan konsentrasi dalam darah yang disimulasikan
oleh model dengan parameter tetap.
Secara umum, data ini mencakup dua tingkat dosis yang sama dengan
kumpulan data kalibrasi sehingga tidak dapat memberikan validasi
semata, karena masukan model (yaitu, tingkat dosis) pada dasarnya
sama. Perbedaan dalam dosis yang dicapai umumnya sangat kecil
sehingga perbedaan antara toksikokinetik yang diamati terutama
disebabkan oleh variabilitas individu. Namun hal ini memberikan indikasi
seberapa baik respons rata-rata sebenarnya diwakili oleh kumpulan data
kalibrasi dan model yang dikalibrasi.
Dalam kebanyakan kasus, kumpulan data konsentrasi darah hanya
mencakup tiga sampel untuk setiap titik waktu dan tanggapannya bisa sangat
bervariasi antar individu. Kami tidak melakukan penilaian kuantitatif terhadap
prediksi karena hal ini akan menyesatkan karena ukuran sampel yang rendah
dikombinasikan dengan variabilitas antarindividu yang kuat.
Pemodelan Pertumbuhan TK−TD.Parameterisasi.Model pertumbuhan
TK−TD lengkap mencakup semua persamaan model (persamaan 1,2Dan3
) dan sekaligus memprediksi konsentrasi racun di usus (mg(AI)×
kg(BW) − 1), konsentrasi racun internal (mg(AI)×kg
berat badan (g).
Parameter pertumbuhankmenggambarkan proporsi sumber daya yang
dialokasikan untuk pemeliharaan dan pertumbuhan. Ketika hanya memodelkan
pertumbuhan, nilai pastinya tidak penting (hanya produknya yang dilengkapi
parameterJA SAYAberkontribusi pada model) jadi ini diperbaiki pada modelnya
nilai default 0,8,26yang perkiraannya masuk akal untuk spesies tersebut.53,54
Studi fisiologis menunjukkan energi yang diasimilasi diubah menjadi jaringan
baru secara homeotermik dengan efisiensi antara 0,4 dan 0,551jadi
parameternyakamuVAditetapkan pada 0,45. Jika bukti kuat diberikan, maka hal
ini menunjukkan nilai yang berbeda untuk kedua hal tersebut
parameter, laluJA SAYADanJay Mhanya perlu disesuaikan
faktor koreksi yang sesuai. Fungsi stres akan terus mempunyai dampak
yang sama sehingga tidak memerlukan penyesuaian.
Dalam uji toksisitas dosis berulang, berat badan dan konsumsi makanan
masing-masing hewan dicatat setidaknya setiap minggu untuk beberapa atau
seluruh periode penelitian.6,13-15Dalam beberapa kasus, konsumsi makanan
dicatat per kandang, sehingga nilai yang diberikan adalah rata-rata per hewan
namun setiap pengukuran berat badan memiliki pengukuran konsumsi
makanan yang sesuai. Konsentrasi racun yang dicapai dalam makanan
masing-masing kelompok perlakuan juga diukur. Hal ini memungkinkan
parameter pertumbuhanF (laju pemberian makan berskala) dan parameter TK
SAYA (tingkat konsumsi racun) untuk dihitung langsung dari data.
Laju pemberian makan maksimum pada kepadatan makanan tertentu diasumsikan sebanding
dengan luas permukaan. Tingkat pemberian makan yang ditingkatkan,F,sama dengan laju pemberian
makan aktual suatu individu pada kepadatan makanan tertentu dibagi dengan laju pemberian makan
maksimum untuk ukurannya dan oleh karena itu berkisar dari 0 hingga 1.26
Konsumsi makanan yang diukur per hari diubah menjadi laju makan spesifik luas
permukaan dengan membaginya dengan berat badan terkait yang dipangkatkan 2/3.
Membagi nilai-nilai ini dengan jumlah pemberian makan maksimum yang dicatat
dalam kelompok studi (dipisahkan berdasarkan jenis kelamin) diberikan skalanyaF
nilai antara 0 dan 1 untuk setiap individu di setiap minggu masa penelitian. Sebuah
matriks kemudian dihasilkan yang berisi rata-rata tingkat pemberian makan
mingguan untuk setiap kelompok perlakuan, yang memberikan nilaiF untuk setiap
perawatan di setiap interval mingguan.
Mengalikan konsentrasi toksikan yang dicapai dalam makanan (mg(AI)
−1
×kg(diet)) dengan laju pemberian pakan harian spesifik massa (kg(diet)×kg(BW)
-1
×D−1) memberikan dosis yang ditelan (mg (AI)×kg ×D−1). Sekali lagi, sebuah
(BW)
matriks dihasilkan, kali ini berisi rata-rata mingguan dosis harian yang
dikonsumsi untuk setiap pengobatan. Ini memberikan nilai tingkat
konsumsi racunSAYAyang berfluktuasi dengan tingkat pemberian makan
selama masa studi. Semua parameter TK lainnya tetap pada nilainya
Artikel
ditentukan selama kalibrasi model TK (kADankedikalikan dengan 24 untuk
mengubahnya dari tarif per jam menjadi harian).
Kalibrasi.Data dari studi toksisitas 90 hari (OECD 408) berada pada tingkat
menengah dalam hal ukuran sampel dan tingkat dosis makanan. Dengan demikian,
data ini lebih representatif dibandingkan penelitian yang dilakukan selama 28 hari
(OECD 407) sedangkan dampak yang diamati terhadap pertumbuhan umumnya lebih
besar dibandingkan penelitian yang dilakukan selama 2 tahun (OECD 414 dan 416).
Untuk alasan ini, studi 90 hari digunakan untuk mengkalibrasi model TK−TD. Kalibrasi
parameter pertumbuhan dan TD dilakukan secara terpisah untuk jantan dan betina.
Dua parameter model pertumbuhan bebas,JA SAYADanJay Mdipasang ke
data pertumbuhan dari kelompok kontrol dan kemudian diperbaiki. Selanjutnya,
model dijalankan untuk semua perlakuan tetapi tanpa tekanan yang diterapkan.
Langkah ini digunakan untuk mengidentifikasi kelompok dosis terendah dimana
pertumbuhan yang diamati lebih rendah dari yang diperkirakan oleh model
pertumbuhan berdasarkan laju pemberian makan saja (yaitu, kelompok dosis
terendah di mana terjadi stres kimia). Nilai awal estimasi parameter TD NEC
kemudian ditetapkan menjadi setengah rata-rata konsentrasi internal yang diprediksi
oleh model TK untuk perlakuan tersebut. Hanya dua perlakuan (perlakuan dengan
dampak terendah dan dosis tertinggi) yang digunakan untuk penyesuaian karena hal
ini memungkinkan lebih banyak data digunakan untuk prediksi pengujian sambil
tetap memberikan rentang prediksi konsentrasi internal yang luas.
Parameter TD NEC danCTkemudian disesuaikan dengan pengobatan
dengan dampak paling rendah dan kelompok dosis tertinggi secara
bersamaan, hal ini diulangi untuk setiap mode tindakan fisiologis. Fit
yang menghasilkan nilai AIC terendah dipilih. Mode tindakan fisiologis
dan nilai parameter TD yang dihasilkan kemudian diperbaiki.
Validasi.Untuk verifikasi, model yang dihasilkan kemudian dijalankan untuk
-1
(BW)) Dan semua perlakuan dalam penelitian 90 hari yang menghasilkan interpolasi ke
kelompok dosis menengah. Kemudian, model tersebut digunakan untuk
memprediksi pertumbuhan dalam studi 28 hari dan dua tahun. Hanya data
pertumbuhan 12−14 minggu pertama dari studi dua tahun yang digunakan
untuk menguji prediksi model. Alasan titik batas ini dibahas secara rinci dalam
diskusi.
Matriks yang berisi rata-rata mingguan laju pemberian pakan,F,dan tingkat
konsumsi racun,SAYA,dihasilkan dari data seperti yang dijelaskan sebelumnya.
Meskipun parameter TK dan TD tetap, hal ini perlu dilakukan
ulangi pemasangan parameter pertumbuhan (JA SAYADanJay M) ke kontrol
data kelompok. Hal ini penting agar pengaruh laju pemberian pakan terhadap
pertumbuhan diprediksi secara relatif terhadap kelompok kontrol di setiap
penelitian, bukan dengan penelitian terpisah yang kondisinya (strain tikus di
laboratorium, pakan, suhu rata-rata) mungkin berbeda.
Semua parameter model kemudian diperbaiki dan model tersebut digunakan
untuk memprediksi dampak terhadap pertumbuhan di semua perlakuan. Prediksi
dibandingkan dengan data pengamatan untuk setiap perlakuan pada setiap titik
waktu pengamatan. Prediksi dipertimbangkan berdasarkan berat hewan (g) atau efek
proporsional terhadap berat badan relatif terhadap kelompok kontrol
-1
(berarti berat badan (perlakuan)×berarti berat badan (kontrol)). Prediksinya adalah
dianggap akurat jika data tersebut berada dalam satu deviasi standar
dari nilai rata-rata pengamatan pada setiap titik waktu karena ukuran ini
memperhitungkan variabilitas individu dalam data. Persentase prediksi
yang akurat dilaporkan dan setiap pengecualian dicatat. Pengecualian
digunakan untuk menentukan keterbatasan model dan menyimpulkan
alasan mendasar mengapa hal tersebut muncul.
■
HASIL
Hasilnya dirangkum dalam bagian ini, namun karena banyaknya
penelitian yang digunakan untuk mengkalibrasi dan menguji model,
tidak praktis untuk menyertakan semua tabel dan gambar di sini. Ini
dapat ditemukan diSI.
Toksikokinetik.Untuk semua pestisida, konsentrasi yang
−1 dicapai di dalam darah berkorelasi signifikan dengan
konsentrasi di seluruh jaringan lain yang dijadikan sampel (hal <
0,01) kecuali konsentrasi fenpropidin dalam lemak tidak
signifikan (hal =0,0574). Namun, ketika satu outlier (sisa >3 sd
dari mean) dikeluarkan dari analisis, korelasinya menjadi sangat
signifikan (hal <0,001).
E DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi
Semua senyawa menunjukkan kinetika orde pertama, menghasilkan
kurva waktu konsentrasi darah yang dapat direproduksi dengan
pemasangan model TK satu kompartemen. Dalam beberapa kasus
diperlukan penyesuaian terhadap prosedur pemodelan yang akan
dijelaskan pada gilirannya.
Untuk thiamethoxam, model global yang cocok pada
tingkat dosis tinggi dan rendah sangat cocok dengan data
yang diamati. Ketika prediksi model diuji terhadap data
konsentrasi darah independen, kurva prediksi kembali
meniru data observasi.
Untuk empat senyawa, acibenzolar-S-methyl, azoxystrobin,
fludioxonil dan fenpropidin, model global lebih cocok mewakili
kinetika darah pada kelompok dosis tinggi, dengan kurva yang
dimodelkan tidak mencapai konsentrasi darah puncak (Cmaks)
diamati pada kelompok dosis rendah. Dalam semua kasus ini, pola
yang sama diamati ketika prediksi model diuji terhadap kumpulan
data konsentrasi darah independen. Penjelasan yang mungkin
untuk fenomena ini adalah ketika konsentrasi pestisida dalam usus
meningkat, laju penyerapan menjadi jenuh dan mencapai
maksimum.55Namun, dengan hanya dua tingkat dosis yang diuji
dalam sebagian besar penelitian toksikokinetik, yang umumnya
berbeda setidaknya 100 kali lipat, maka tidak mungkin
memperkirakan titik terjadinya atau menentukan apakah proses
tersebut terjadi secara bertahap atau terjadi secara tiba-tiba.
Akurasi model yang lebih rendah pada konsentrasi internal yang
rendah berdampak kecil terhadap prediksi efek akhir, dan tidak
berdampak sama sekali jika di bawah NEC. Karena tingkat dosis
tinggi lebih relevan dengan tingkat konsumsi makanan yang terkait
dengan efek terhadap berat badan, nilai parameter ini diterima.
Tikus jantan diberikan dosis tinggi (100 mg×kg(BW) −1) dari
fenpropidin tampaknya menunjukkan puncak ganda dalam konsentrasi
yang dicapai dalam darah. Puncak awal dicapai 1 jam setelah pemberian
dosis dan puncak kedua yang lebih rendah setelah sekitar 8 jam. Puncak
ganda telah dikaitkan dengan penyerapan yang bervariasi di berbagai
wilayah usus, resirkulasi enterohepatik, atau pengosongan lambung
yang tertunda.56Jika dosis diberikan pada tingkat yang lebih konstan
dalam makanan dibandingkan dengan dosis tunggal yang besar, maka
diharapkan tingkat penyerapan dan eliminasi secara keseluruhan akan
mencapai keseimbangan sehingga salah satu mekanisme ini akan
berdampak lebih kecil pada kinetika darah. Karena tujuan penerapan
model ini adalah untuk memprediksi efek dosis makanan, diputuskan
untuk menyesuaikan model untuk pria dengan data yang dikumpulkan 2
jam, 3 jam, 4 jam, dan 6 jam setelah pemberian dosis tidak termasuk
dalam kelompok dosis tinggi. Hal ini memungkinkan model untuk
menyesuaikan satu puncak tempat pengamatanCmaks, waktu tercapainya
(Tmaks), dan waktu untuk menghilangkan dosis secara total disesuaikan
dengan model.
Setelah pemberian dosis tinggi, konsentrasi puncak
prosulfuron dalam darah (μg(AI)×G(Darah))- melebihi
1
dosis
normal berat badan (mg(AI)×kg (BW) − 1). Ini bisa
tidak dimodelkan oleh model TK kami (persamaan 1Dan2) yang menggunakan
konsentrasi darah sebagai proksi untuk konsentrasi internal keseluruhan.
Namun, darah hanya menyumbang sekitar 7% dari massa tubuh57jadi pada
kenyataannya hanya> 7% dari dosis yang perlu ada dalam darah pada satu
waktu agar hal ini dapat terjadi. Namun demikian, fenomena ini tidak biasa
terjadi pada bahan kimia yang termasuk dalam penelitian ini.
Untuk mengatasi hal ini, hubungan antara konsentrasi prosulfuron
dalam darah (CDarah) dan konsentrasi karkas keseluruhan hewan yang
dimusnahkan diselidiki. Hanya hewan jantan yang digunakan dalam
percobaan pengambilan sampel jaringan dengan tiga hewan diambil
sampelnya pada masing-masing empat titik waktu setelah dosis tinggi
atau rendah. Darah dan bangkai
F DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
Artikel
konsentrasi berkorelasi kuat dan signifikan (koefisien korelasi
Pearson,r =0,99,n =24,hal < 0,0001) . Garis yang paling cocok,
mencegatkamusumbu di nol, diperoleh dengan mencari solusi
kuadrat terkecil dari persamaan tersebut CDarah=XCInt. Gradien,X
=2.4337, ditentukan sebagai faktor konsentrasi dimana
konsentrasi prosulfuron dalam darah melebihi konsentrasi di
dalam tubuh secara keseluruhan.
Persamaan ketiga, menggabungkan faktor konsentrasi tersebut tetapi identik
denganpersamaan 2, kemudian ditambahkan ke model TK untuk menggambarkan
konsentrasi darah dari waktu ke waktu sebagai berikut:
CDarah= 2,4337L∞/LukasACUsusF-L∞/LukaseCInt-CInt(ΔW/W) (5)
Ini menentukan bahwa,CDarah= 2,4337×CIntpada titik waktu tertentu,
dengan ΔCIntdimodelkan olehpersamaan 2. Konsentrasi internal darah
dan seluruh tubuh kemudian dapat dimodelkan secara bersamaan.
Model yang dipasang menghasilkan kurva yang cocok dengan data
untuk kedua variabel pada dosis tinggi.
Berbeda dengan senyawa lain, model prosulfuron memperkirakan
konsentrasi internal yang lebih tinggi daripada yang diamati pada tingkat
dosis rendah. Demikian halnya dengan konsentrasi di seluruh tubuh
maupun di dalam darah sehingga faktor konsentrasi bukanlah penyebab
perbedaan tersebut. Faktanya, untuk kelompok dosis rendah saja faktor
konsentrasinya lebih tinggi dari angka keseluruhan. Penjelasan yang
mungkin untuk kasus ini adalah bahwa laju eliminasi menjadi jenuh
melebihi konsentrasi internal tertentu,58,59hal ini konsisten dengan
konsentrasi internal yang luar biasa tinggi yang diukur pada kelompok
dosis tinggi. Dosis tinggi dalam percobaan toksikokinetika prosulfuron
-1
adalah sekitar 450 mg (AI)×kg (BW), beberapa kali lebih tinggi dari
dosis tinggi yang digunakan untuk bahan kimia lain yang termasuk dalam penelitian ini
(100 mg(AI)×kg(BW) − 1). Apakah bahan kimia lainnya telah diuji
pada dosis tinggi mungkin pola serupa akan terjadi
telah terbukti. Sayangnya, hanya dua tingkat dosis
(berbeda sekitar 900 kali lipat) memberikan data yang
tidak memadai untuk menentukan laju eliminasi
maksimum dan konsentrasi internal pencapaiannya.
Dengan parameter tetap dan data independen, model tersebut kembali
memperkirakan konsentrasi prosulfuron yang lebih tinggi dalam darah dibandingkan
yang diamati pada dosis rendah. Namun data tersebut diprediksi dengan baik pada
dosis tinggi. Untuk kedua jenis kelamin,CmaksDanTmaks
diprediksi dengan akurasi yang wajar. Penghapusan senyawa
tersebut lebih lambat dari perkiraan pada perempuan, namun
parameternya dianggap dapat diterima dan model tidak dipasang
secara terpisah pada laki-laki dan perempuan.
Pertumbuhan.Kurva pertumbuhan DEBkiss yang dipasang mampu
memodelkan pertumbuhan tikus berusia sekitar 6−20 minggu secara akurat.
Secara total, model tersebut dipasang pada 34 kumpulan data kelompok
kontrol yang terdiri dari pengamatan mingguan terhadap berat badan dan
tingkat konsumsi makanan. Berat badan yang dimodelkan berada dalam 1
standar deviasi dari rata-rata yang diamati pada semua titik waktu dalam 30
dari 34 kasus dan pada >90% titik waktu dalam 32 dari 34 kasus.
Penyimpangan paling besar terjadi pada dua kumpulan data. Untuk kelompok
kontrol wanita dalam studi toksisitas fenpropidin selama 28 hari, berat badan
yang dimodelkan lebih rendah dari rata-rata yang diamati dengan lebih dari
satu standar deviasi pada minggu pertama saja. Hasilnya, hanya 75% bobot
yang dimodelkan berada dalam satu standar deviasi. Untuk kelompok kontrol
laki-laki dalam studi toksisitas azoxystrobin selama 90 hari, berat badan yang
dimodelkan lebih rendah dari rata-rata dengan lebih dari satu standar deviasi
pada minggu kedua dan keempat. Hal ini mengakibatkan hanya 84,6% bobot
yang dimodelkan berada dalam satu standar deviasi dari rata-rata yang
diamati. Untuk setiap kumpulan data, semua prediksi tubuh
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi Artikel

Tabel 2. Parameter Toksikodinamik yang Digunakan untuk Memodelkan Pengaruh Tiap Senyawa pada Tikus Jantan dan BetinaA

APersentase prediksi (dalam hal berat badan absolut dan pengaruhnya terhadap berat badan relatif terhadap kelompok kontrol pada setiap titik waktu) dalam satu
standar deviasi dari rata-rata yang diamati, ditampilkan. Persentase≥75% disorot dengan warna hijau, yaitu≥50% dan <75% ditampilkan dengan warna biru
sedangkan <50% disorot dengan warna oranye. Yang diberi tanda “*” hanya dipasang pada satu kelompok perlakuan. pMoA: Mode Aksi fisiologis yang paling sesuai.

Gambar 4.Grafik yang menunjukkan pertumbuhan yang dimodelkan berdasarkan laju pemberian makan saja (garis) dan berat badan pengamatan (lingkaran) tikus jantan. Kelompok kontrol
-1
dan yang diberi dosis 20.000 mg×kg (diet) fludioksonil ditampilkan. Rincian proporsional dari penurunan berat badan yang diamati
tikus yang diberi perlakuan vs kontrol pada akhir pengujian diwakili dalam diagram batang.

berat badan pada kelompok kontrol berada dalam 10% dari rata-rata sama sekali
titik waktu.
Toksikodinamik.Dengan pertumbuhan dan toksikokinetik
nilai parameter tetap, parameter toksikodinamik, NEC danCT,
disesuaikan dengan data yang dipilih seperti yang dijelaskan
dalam Bagian metode. Prediksi diinterpolasi ke perlakuan lain
dalam penelitian 90 hari dan diekstrapolasi menjadi penelitian
28 hari dan 2 tahun.
Dari segi berat badan≥75% prediksi berada dalam 1 standar
deviasi rata-rata observasi untuk 28 dari 34 kelompok studi. Jika
dilihat dari pengaruhnya terhadap berat badan,≥75% prediksi
berada dalam 1 standar deviasi rata-rata observasi untuk 30
dari 34 kelompok studi. Ringkasan hasil ditunjukkan diMeja 2.
Untuk tikus betina yang diberikan thiamethoxam atau
fludioxonil, parameter TD disesuaikan dengan satu kelompok
pengobatan. Pasalnya, dalam penelitian terhadap kedua
senyawa tersebut, penurunan berat badan melebihi perkiraan

G DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi Artikel

Gambar 5.Grafik batang menunjukkan proporsi penurunan berat badan yang diamati relatif terhadap kelompok kontrol yang disebabkan oleh penurunan laju pemberian makan
dan/atau stres toksik berdasarkan model pertumbuhan. Semua perlakuan yang menunjukkan penurunan berat badan pada akhir periode analisis disertakan.X-label sumbu
menunjukkan tanggal observasi dan dosis makanan, dalam beberapa kasus pengobatan diduplikasi antar penelitian. Tidak ada bilah yang ditampilkan jika tidak ada pengurangan
berat. Perhatikan bahwa batang mempunyai ukuran yang sama terlepas dari besarnya efek yang diamati.

berdasarkan kecepatan pemberian makan hanya terlihat pada kelompok mg/kg(diet)thiamethoxam selama 28 hari. Wanita yang diberikan fludioxonil
dosis teratas. Dalam kasus thiamethoxam, penurunan berat badan yang dalam makanan mereka memang menunjukkan penurunan berat badan yang
signifikan hanya diamati pada wanita yang diberi dosis 10.000 signifikan. Namun, hal ini diprediksi sepenuhnya berdasarkan

H DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi
pengurangan laju pemberian makan pada semua kecuali satu perlakuan,
yang diberi dosis 20.000 mg/kg(diet)lebih dari 90 hari. Konsekuensinya
adalah meskipun NEC konsisten dengan data dari beberapa perlakuan,CT
ditentukan dengan menggunakan data hanya dari satu perlakuan.
Namun, karena tingkat konsumsi racun bersifat dinamis, CTdisesuaikan
dengan kisaran konsentrasi internal bahkan dalam satu perlakuan.
Prediksi model juga digunakan untuk menyelidiki sejauh mana penurunan
berat badan dapat dikaitkan dengan berkurangnya pemberian makan atau
tindakan toksik langsung. Hal ini dilakukan dengan membandingkan data
eksperimen dengan simulasi model yang tidak menerapkan tekanan, sehingga
menghasilkan prediksi kurva pertumbuhan hanya berdasarkan laju pemberian
pakan. Perbandingan antara berat badan yang diharapkan yang dimodelkan
dengan tingkat pemberian makan sebenarnya dan berat badan yang diamati
dilakukan secara terpisah untuk setiap kelompok perlakuan. Bobot badan yang
diamati dan diprediksi pada setiap perlakuan diubah menjadi proporsi bobot
badan kontrol (masing-masing diamati dan diprediksi) pada setiap titik waktu.
Proporsi penurunan berat badan yang diamati (relatif terhadap kontrol) yang
diprediksi berdasarkan jumlah pemberian makan saja kemudian dapat
dihitung. Sisanya disebabkan oleh tindakan beracun. Jika berat badan yang
diprediksi hanya berdasarkan data pemberian makan sebenarnya berada di
bawah berat badan yang diamati pada titik waktu tertentu, maka setiap
penurunan berat badan yang diamati (dibandingkan dengan kontrol)
sepenuhnya disebabkan oleh berkurangnya frekuensi pemberian makan.
Demikian pula, jika prediksi berat badan berdasarkan frekuensi pemberian
makan sebenarnya pada kelompok perlakuan tertentu lebih tinggi
dibandingkan kontrol, maka setiap penurunan berat badan yang diamati
sepenuhnya disebabkan oleh tindakan toksik. Contoh dari proses ini
ditunjukkan padaGambar 4; hasil yang dipilih untuk semua senyawa
ditunjukkan padaGambar 5.
Untuk azoxystrobin, prosulfuron, thiamethoxam, dan fludioxonil tampaknya
terdapat pola yang terjadi pada kedua jenis kelamin, dengan penurunan
pertumbuhan yang lebih disebabkan oleh laju makan pada betina dan
toksisitas pada jantan (Gambar 5). Hal ini paling jelas terlihat pada kasus
fludioxonil, yang dikaitkan dengan penurunan berat badan yang signifikan
pada kedua jenis kelamin. Meskipun penurunan berat badan laki-laki sebagian
besar disebabkan oleh toksisitas, penurunan yang diamati pada perempuan
diperkirakan sepenuhnya didasarkan pada penurunan frekuensi makan di
semua kelompok kecuali kelompok dosis tertinggi dalam dua penelitian. Pola
serupa terlihat pada thiamethoxam. Sekali lagi efek toksik diperkirakan hanya
berdampak pada berat badan perempuan pada kelompok dosis tertinggi.
Namun dalam kasus ini, penurunan berat badan betina tidak terlihat pada
sebagian besar peternakan ulang karena laju pemberian makan juga tidak
■
terpengaruh.
T DISKUSI
Memprediksi Pertumbuhan di Bawah Tekanan Kimia.Data
mentah dari studi toksisitas kronis digunakan untuk menguji
prediksi DEBtox mengenai efek toksik subletal pada mamalia.
Pengukuran mingguan berat badan dan konsumsi makanan serta
konsentrasi makanan yang diukur secara tepat memberikan data
berkualitas baik yang dapat digunakan untuk mengkalibrasi model.
Karena kerangka peraturan memerlukan beberapa penelitian
serupa, tersedia banyak data untuk menguji prediksi.6,13-15Seperti
telah disebutkan sebelumnya, cara pendanaan ilmu pengetahuan
pada umumnya berarti bahwa studi pembuktian jarang dilakukan di
dunia akademis atau dipublikasikan di jurnal ilmiah karena studi
tersebut tidak dianggap baru.60
Temuan kami menunjukkan kesesuaian yang baik antara prediksi dan
data. Dengan pemasangan model yang minimal, efek yang diamati pada
berat badan dapat diprediksi secara andal (≥75% prediksi akurat dalam
satu standar deviasi dari rata-rata yang diamati di semua penelitian yang
datanya tersedia) pada pria dan wanita untuk
SAYA
Artikel
empat dari enam bahan kimia yang dimodelkan. Hal ini menunjukkan
bahwa prediksi TK setidaknya sebanding dengan konsentrasi internal
aktual dari waktu ke waktu dan bahwa model TD “linier melewati ambang
batas” (Gambar 2) didasarkan pada asumsi yang masuk akal.
Tingkat Pemberian Makan vs Penelanan Racun.Kendala dalam
menganalisis dampak paparan racun dalam makanan adalah bahwa
dosis yang tertelan sangat bergantung pada kecepatan makan hewan
yang diteliti dan juga pada konsentrasi dalam makanan. Meskipun
tingkat pemberian pakan yang tinggi akan berdampak positif pada
pertumbuhan, konsumsi racun yang terkait akan memberikan tekanan
pada parameter pertumbuhan. Pemahaman tentang trade-off ini penting
61karena konsumsi dianggap sebagai jalur paparan utama mamalia darat
terhadap pestisida di lapangan37,62meskipun ada pendapat bahwa rute
lain harus mendapat perhatian lebih besar.63
Dalam pendekatan pemodelan yang digunakan di sini, laju pemberian pakan
berskala dan laju konsumsi pestisida dihitung sebagai masukan model
dinamis, langsung dari data. Hal ini memungkinkan prediksi model untuk
memisahkan dampak persaingan antara laju pemberian pakan dan tindakan
racun terhadap pertumbuhan. Misalnya tikus jantan diberi 2500 mg/kg(diet)
thiamethoxam tumbuh lebih besar dibandingkan yang diberikan 1250 mg/kg
(diet). Hasil ini diprediksi dengan tepat oleh model sebagai laju pemberian
pakan yang lebih tinggi yaitu 2500 mg/kg(diet)kelompok sebagian menangkal
tekanan kimia.
Oleh karena itu, prediksi model dapat memberikan wawasan baru terhadap
data yang diamati dengan membandingkan data dengan simulasi model yang
tidak menerapkan tekanan. Prediksi tersebut hanya memerlukan model
pertumbuhan yang terkalibrasi dan data laju pemberian pakan. Oleh karena
itu, meskipun efek toksik tidak dapat diprediksi secara andal, prediksi model
pertumbuhan dapat menunjukkan sejauh mana penurunan berat badan yang
diamati disebabkan oleh toksisitas atau berkurangnya pemberian makan
dibandingkan dengan kontrol. Informasi tersebut sangat berharga untuk
menilai risiko yang ditimbulkan suatu bahan kimia terhadap mamalia darat di
lapangan. Jika terjadi penghindaran yang kuat, maka hal ini dapat
meningkatkan atau menurunkan risiko yang ditimbulkan tergantung pada
apakah hewan mempunyai pilihan makanan dalam skenario lapangan.61,62
Untuk beberapa senyawa tampaknya terdapat pola yang berbeda-
beda antar jenis kelamin, dengan penurunan pertumbuhan lebih
disebabkan oleh jumlah makan pada betina, namun oleh toksisitas pada
jantan. Pola ini paling kuat terjadi pada fludioxonil dan thiamethoxam
dan pada kedua kasus tersebut tercermin dari perbedaan besar dalam
nilai NEC untuk setiap jenis kelamin. Hal ini menunjukkan bahwa
meskipun betina menunjukkan toleransi yang lebih tinggi terhadap
senyawa-senyawa ini, setidaknya dalam kaitannya dengan pertumbuhan,
mereka menunjukkan penghindaran makan yang lebih kuat.
Ketidakkonsistenan dalam parameter toksikodinamik pria dan wanita
mungkin tampak mengejutkan, namun perbedaan besar antara dosis
referensi untuk setiap jenis kelamin telah lama didokumentasikan pada
tikus.64Selain itu, hasil yang diperoleh tidak ambigu sehubungan dengan
thiamethoxam, karena perempuan tidak terpengaruh pada beberapa
tingkat dosis yang mempengaruhi laki-laki. Dalam beberapa kasus,
terdapat perbedaan sensitivitas hati dan ginjal terhadap toksisitas,64,65
mungkin terkait dengan produksi enzim yang bervariasi antara kedua
jenis kelamin.66Hati dan ginjal diidentifikasi sebagai organ target
pestisida pada mamalia sehingga hasil ini tampak konsisten dengan
temuan sebelumnya (Syngenta, tidak dipublikasikan). Mengingat bahwa
perbedaan sensitivitas kimiawi dapat terjadi antara kedua jenis kelamin,
maka tidak mengherankan jika model tersebut menyarankan cara kerja
yang berbeda untuk beberapa senyawa pada pria dan wanita (Meja 2).
Cara kerja DEBtox mengacu pada proses abstrak dan bukan jalur kimia
tertentu, sehingga hal ini menyiratkan bahwa efek pada kurva
pertumbuhan berbeda antara kedua jenis kelamin.44
DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi
Keterbatasan Model.Keterbatasan mendasar pada model sistem kompleks
apa pun adalah trade-off antara realisme dan kesederhanaan. Karena
keramahan pengguna merupakan pertimbangan penting dalam penggunaan
sesuai peraturan,25DEBkiss dipilih sebagai pendekatan paling sederhana untuk
menyelidiki bagaimana data laboratorium mentah harus digunakan untuk
membuat parameter dan mengkalibrasi model dengan data dari studi
toksisitas makanan. Alasan lain untuk memprioritaskan kesederhanaan adalah
agar permasalahan potensial dapat diidentifikasi dengan jelas pada tahap
awal untuk mengembangkan model di masa depan, dengan ruang untuk
elaborasi lebih lanjut jika diperlukan. Beberapa masalah tersebut disoroti oleh
hasil kami yang dibahas di bagian ini.
Meskipun hasil kami menunjukkan bahwa DEBtox adalah kerangka kerja
yang berguna, prediksi pertumbuhan di bawah tekanan kimia tidak dapat
diandalkan di semua kasus. Efek fenpropidin dan acibenzolar-S-metil diprediksi
secara akurat dalam beberapa perlakuan, tetapi akurasi model secara
keseluruhan lebih rendah dibandingkan bahan kimia lainnya. Ketika
mempertimbangkan efek in vivo, setiap penyimpangan yang diamati dari
prediksi kemungkinan besar tidak disebabkan oleh kesalahan pengukuran,
dan seringkali variabilitas individu adalah penyebabnya. Hal ini merupakan
tantangan bagi pemodelan prediktif, bahkan untuk strain laboratorium yang
secara genetik serupa dan disimpan dalam kondisi terkendali. Memang benar,
variabilitas individu dalam pertumbuhan masih terlihat jelas dalam penelitian
yang menggunakan springtail yang identik secara genetik (Folsomia kandida)
klon dipelihara secara individual dan diberikan makanan tanpa batas.67Oleh
karena itu, kita tidak dapat mengetahui dengan pasti bagaimana hewan yang
diberi perlakuan akan tumbuh jika mereka berada dalam kelompok kontrol,
namun kita harus mengasumsikan parameter pertumbuhan yang konstan di
seluruh perlakuan. Akibatnya, model memberikan prediksi rata-rata berat
badan dari waktu ke waktu dalam kondisi tertentu tetapi tidak mencakup
ketidakpastian atau variabilitas.
Konsekuensi lain dari variabilitas individu adalah sulitnya
mengidentifikasi penyebab ketidakakuratan model. Misalnya, beberapa
kelompok perlakuan tikus betina yang diberi acibenzolar-S-metil tumbuh
lebih besar daripada kontrol meskipun pemberian makan pada tingkat
yang lebih rendah. Hal ini jelas merupakan hasil yang tidak dapat
diprediksi oleh model dan mungkin saja merupakan hasil dari variabilitas
parameter pertumbuhan rata-rata antar kelompok perlakuan. Atau, hal
ini dapat ditafsirkan sebagai bukti hormesis, fenomena dimana dosis
rendah suatu bahan kimia mempunyai efek sebaliknya dari dosis tinggi
pada titik akhir tertentu. Jika hal ini terjadi, maka fungsi tegangan akan
memerlukan perubahan, bukan parameter pertumbuhan, namun kita
tidak dapat memastikan yang mana. Pada beberapa perlakuan, masalah
sebaliknya muncul ketika hewan diberi makan dalam jumlah yang relatif
tinggi namun tidak tumbuh sesuai harapan. Karena laju pemberian
makan dihitung berdasarkan ukuran tubuh sebenarnya dan bukan
berdasarkan perkiraan, pertumbuhan yang dimodelkan berlanjut pada
tingkat yang lebih tinggi dari laju pengamatan. Untuk perlakuan ini,
prediksi model jauh melebihi pertumbuhan yang diamati. Masalah ini
dapat diatasi dengan menghitung laju pemberian makan relatif terhadap
perkiraan ukuran tubuh dari waktu ke waktu. Namun, kemungkinan
besar variabilitas parameter pertumbuhan juga berperan.
Selain itu, pertumbuhan bukanlah satu-satunya properti yang dimodelkan
yang bergantung pada variabilitas individu. Toleransi terhadap racun68atau
tingkat di mana hal tersebut diambil dan dihilangkan37mungkin sangat
bervariasi antar individu dalam suatu populasi. Perbedaan antar perlakuan
dalam satu atau lebih sifat ini dapat mengakibatkan efek yang diamati tidak
berkorelasi secara seragam dengan konsentrasi internal dan oleh karena itu
sulit diprediksi tanpa pengetahuan lebih lanjut. Hal ini terbukti pada
mandipropamid; hasilnya tidak dilaporkan karena data tidak sesuai untuk
menguji prediksi model. Dalam penelitian selama 90 hari, pejantan yang diberi
dosis tertinggi tumbuh lebih besar dibandingkan pejantan yang diberi dosis
lebih rendah meskipun frekuensi pemberian makannya sama. Sementara itu,
betina tumbuh
J DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
Artikel
lebih besar dari yang diperkirakan berdasarkan tingkat pemberian makan di
semua kelompok dosis. Kelompok dosis tertinggi dalam penelitian 28 hari
dihentikan lebih awal karena pengurangan laju pemberian makan yang tidak
dapat diterima, sementara penurunan pertumbuhan tidak diamati dalam
penelitian 2 tahun sehingga prediksi toksikodinamik tidak mungkin divalidasi.
Akurasi model yang buruk (<50% prediksi akurat dalam satu standar
deviasi) hanya terjadi saat memprediksi efek paparan makanan selama
28 hari. Hal ini tidak terlalu mengejutkan karena ada beberapa faktor
yang membuat kumpulan data ini lebih menantang untuk dimodelkan.
Dalam penelitian selama 28 hari, ukuran sampel merupakan yang
terendah, dengan hanya 5 orang per jenis kelamin dan hanya empat titik
waktu yang diamati, sehingga secara alami, variabilitas individu dan
waktu diharapkan memiliki dampak yang lebih besar. Selain itu, pada
minggu-minggu awal studi mengenai pola makan, frekuensi pemberian
pakan bisa sangat bervariasi antar perlakuan dan seiring berjalannya
waktu, karena hewan bereaksi secara perilaku terhadap bahan baru yang
ditambahkan ke dalam makanannya. Di ketiga kumpulan data yang
prediksinya buruk, prediksi berat badan pada kelompok dosis tertinggi
jauh lebih rendah daripada yang diamati. Nilai default darik bisa
berperan di sini. Rendahknilai akan menghentikan pertumbuhan ketika
pertumbuhan masih dapat terjadi, meskipun hal ini hampir seluruhnya
akan dikompensasikan dengan penyesuaian parameter pertumbuhan
lainnya. Dimasukkannya buffer reproduksi juga dapat menunda
kebutuhan untuk memetabolisme struktur,26tetapi penggunaan buffer
tetap berarti penurunan berat badan secara keseluruhan. Selain itu,
kelaparan diperkirakan hanya terjadi pada minggu-minggu awal
pengujian, sekitar masa pubertas,54jadi buffer apa pun yang terkumpul
hampir dapat diabaikan. Sangat mungkin bahwa tekanan ganda berupa
berkurangnya pemberian makan dan toksisitas menimbulkan respons
fisiologis atau perilaku kompensasi yang tidak diprediksi oleh model.
Penurunan suhu tubuh telah didokumentasikan sebagai respons
terhadap kelaparan pada tikus69sementara itu stres kimia telah terbukti
menyebabkan penurunan suhu dan aktivitas tubuh.70Tanggapan seperti
itu kemungkinan besar sesuai dengan a
pengurangan tingkat pemeliharaanJay M, dan seharusnya
dipertimbangkan dalam model stres fisik dan kimia di masa depan.
Variabilitas individu juga terlihat pada data toksikokinetika. Respon
individu bervariasi tergantung pada konsentrasi racun yang dicapai
dalam darah dan kecepatan penyerapan dan pembuangannya. Ukuran
sampel yang rendah yaitu tiga individu per perlakuan berarti bahwa rata-
rata pengamatan untuk setiap titik waktu, dimana model dipasang,
dapat sangat dipengaruhi oleh variabilitas pada kedua sumbu. Sebagai
contoh, meskipun tiga individu menunjukkan satu puncak dengan
variabilitas yang sangat kecilCmaks, data rata-rata dapat menunjukkan
puncak ganda jika hanya satu individu yang mencapai puncak lebih
lambat dari dua individu lainnya. Terlebih lagi, kedua puncak tersebut
kemungkinan besar akan lebih rendah dari puncak tersebutCmaksdari
individu mana pun. Bahkan penilaian kuantitatif sederhana terhadap
kesesuaian model, seperti apakah prediksi model berada dalam kisaran
yang diamati untuk statistik toksikokinetik sepertiCmaks,Tmaksatau area di
bawah kurva, oleh karena itu bermasalah. Selain itu, statistik mana yang
lebih relevan untuk memprediksi konsentrasi internal akibat paparan
makanan dalam jangka waktu lama masih bisa diperdebatkan dan tidak
ada satupun yang digunakan oleh model TK−TD untuk memprediksi efek.
Namun demikian, prediksi model TK memberikan perkiraan konsentrasi
internal yang masuk akal yang dihasilkan dari tingkat konsumsi yang
bervariasi berdasarkan waktu, dengan nilai parameter disesuaikan
dengan data terbaik yang tersedia. Kemungkinan besar prediksi tersebut
setidaknya sebanding dengan nilai sebenarnya dan oleh karena itu
menjadi dasar yang kredibel untuk penyesuaian parameter TD.
Meskipun variabilitas dalam TD dan parameter pertumbuhan tidak
dapat dipisahkan, iterasi model di masa depan dapat dilakukan
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi
stochasticity dalam parameter pertumbuhan dengan memanfaatkan kekayaan
data kontrol yang tersedia dari penelitianR. norvegicus.67Hal ini juga
dimungkinkan untuk parameter TK meskipun ukuran sampel yang rendah
akan menimbulkan tantangan.
Implikasi terhadap Teori DEB.Dalam studi ini, data konsumsi pangan yang
tepat tersedia, bukan sekadar ketersediaan pangan. Hal ini memungkinkan
rata-rata tingkat pemberian makan spesifik luas permukaan dihitung setiap
minggu untuk setiap perlakuan dalam sebuah penelitian, sebelum diskalakan
sebagai proporsi dari nilai maksimum di setiap kumpulan data. Akibatnya,
parameter pertumbuhan disesuaikan dengan kontrol di setiap kumpulan data
untuk memperhitungkan variabilitas laju pemberian pakan di dalam dan di
antara penelitian. Sebelumnya, diasumsikan bahwa skala pemberian pakan, f,
sama dengan 1 ketika makanan tersedia secara ad libitum.27Untuk tujuan
tertentu, ini adalah asumsi yang masuk akal dan perlu. Misalnya, ketika
memodelkan pertumbuhan di lapangan, data rinci kemungkinan tidak tersedia
sehingga laju pemberian pakan harus diperkirakan sebagai bagian dari
pemberian pakan ad libitum dalam penelitian di laboratorium. Namun, hal ini
tidak memuaskan dalam penelitian ini karena variabilitas kecepatan
pemberian pakan dari waktu ke waktu dan antar perlakuan merupakan
pendorong penting dari efek tersebut. Selain itu, beberapa kelompok
perlakuan memberi makan lebih banyak daripada kelompok kontrol, jadi
penting untuk tidak mengasumsikan nilai maksimumFsebagai bawaannya.
Pertumbuhan berhenti pada bobot tertinggi,W∞, karena ini adalah titik
di mana tingkat asimilasi maksimum hanya dapat memenuhi kebutuhan
pemeliharaan organisme.26Asumsif = 1 berarti ituW∞sama dengan berat
maksimum teoretis, WM, ketika makanan tersedia ad libitum (lihatTabel 1
). Namun, tren yang terlihat dalam data tersebut adalah, meskipun akses
terhadap makanan tidak dibatasi, laju pemberian makan relatif terhadap
luas permukaan menurun seiring dengan pertumbuhan hewan. Hal ini
menimbulkan masalah yang jelas karena memberikan batasan
tambahan pada tingkat asimilasi dan memastikan bahwa kurva
pertumbuhan mencapai titik tertinggi sebelumWMtercapai. Dalam
banyak kasus, pada observasi minggu ke 13−14, nilaiFberada jauh di
bawah maksimum sehingga sesuai dengan teoriWMberdasarkan nilai
parameter yang dipasang sangatlah tinggi.
Studi DEBtox baru-baru ini mengenai efek racun pada ikan rainbow trout
juga berupaya memperhitungkan variabilitasnyaF,namun hal ini terfokus pada
perbedaan antar kelompok studi dibandingkan perubahan pengobatan dari
waktu ke waktu.23,24Banyak upaya telah dilakukan untuk mendapatkan
parameter DEB standar untuk spesies yang diteliti.21,53,54Namun, variasi
seumur hidup dalamFHal ini harus dipertimbangkan agar sesuai dengan data
waktu pemberian pakan yang bervariasi dibandingkan dengan kepadatan
makanan yang konstan. Untuk strain laboratoriumR.norvegicushal ini tentu
dapat diatasi; karena penggunaannya yang ekstensif dalam pengujian
regulasi, terdapat database yang luas tentang pertumbuhan dan konsumsi
pangan dalam kondisi terkendali. Jika hubungan antara laju pemberian makan
dan ukuran tubuh dijelaskan secara matematis, maka hal ini dapat digunakan
untuk menskalakan laju pemberian pakan yang diamati sedemikian rupa
sehingga laju pemberian pakan maksimum menurun seiring dengan ukuran
dan nilai yang dihasilkan.F tetap kira-kira konstan sepanjang masa.
Meskipun data jangka panjang tersedia, prediksi efek toksik pada
berat badan tidak dilaporkan setelah 12−14 minggu setelah paparan
makanan selama dua tahun penelitian. Di luar titik ini, interval
antara pengamatan berat badan dan konsumsi makanan
meningkat. Karena laju pemberian makan yang diamati digunakan
sebagai masukan model, pengurangan resolusi data ini
diperkirakan akan berdampak buruk pada prediksi. Ada juga alasan
yang lebih mendasar di balik penghentian ini. Sedangkan kurva
sigmoidal seperti model pertumbuhan Von Bertalanffy (yang
disederhanakan DEBkiss26) dapat memperkirakan kurva
pertumbuhan tikus, terdapat tahapan berbeda yang diamati
K DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
Artikel
pertumbuhan menyimpang dari model seperti itu. Sebelumnya telah
dilaporkan bahwa fungsi Gompertz − juga sigmoid − sangat cocok dengan
data ketika disesuaikan dengan 70−10 hari pertama pertumbuhan tikus, tetapi
prediksi jangka panjang tersebut bermasalah.71Ketika disesuaikan dengan
data kontrol dua tahun penuh, kurva DEBkiss juga menunjukkan kesalahan
sistematis. Baik untuk tikus jantan maupun betina, prediksi berat badannya
lebih rendah dari yang diamati pada tiga bulan pertama, lebih tinggi dari yang
diamati hingga sekitar bulan ke-14, dan kemudian lebih rendah dari yang
diamati selama 10 bulan terakhir.
Penjelasan yang mungkin adalah demikiank (alokasi untuk soma dan
reproduksi), tidak tetap konstan sepanjang umur tikus. Saran logisnya adalah
bahwa sebagian besar energi dapat dialokasikan untuk pertumbuhan pada
awal kehidupan, sedangkan lebih banyak energi digunakan untuk pematangan
seksual selama masa pubertas. Memang, hal itu telah dipostulasikankdapat
berubah pada manusia saat pubertas.20
Kemungkinan besar dinamika cadangan juga menjadi lebih penting pada tikus
dewasa, karena ketersediaan makanan ad libitum yang berkelanjutan
memungkinkan hewan untuk mengembangkan simpanan cadangan yang signifikan
setelah pertumbuhan struktural terhenti. Oleh karena itu, model DEB lengkap yang,
tidak seperti DEBkiss, model cadangan dan struktur mungkin lebih mampu
mengatasi masalah ini.
Masalah lain terkait prediksi jangka panjang adalah kurangnya
pengetahuan mengenai pemulihan setelah terhambatnya pertumbuhan pada
tikus. Secara default, setelah pemicu stres dihilangkan, berat badan yang
dimodelkan secara teori dapat tercapaiWMjika tingkat pemberian makan cukup
tinggi. Berdasarkan analisis kami, asumsi ini tampaknya masuk akal untuk
tikus hingga usia sekitar 23 minggu. Prediksi model sangat sesuai dengan data
dalam kasus di mana studi 90 hari mencakup 4 minggu pemulihan untuk
kelompok dosis tertinggi. Namun, pertumbuhan tulang diketahui berhenti
pada tikus pada usia sekitar 26 minggu, proses yang mendasarinya rumit
tetapi tampaknya lebih berkaitan dengan usia, bukan ukuran.72Logikanya, jika
pertumbuhan telah ditekan hingga usia kritis maka pemulihan penuh,
dibandingkan dengan kelompok kontrol, tidak akan mungkin terjadi karena
pertumbuhan akan berhenti sebelum usia kritis.W∞, apalagiWM, dapat
dihubungi. Kami berhipotesis bahwa hal ini terjadi karena, setelah usia
tertentu, energi yang tersedia dialokasikan untuk proses selain pertumbuhan,
seperti pematangan dan reproduksi. Hal ini berarti terjadi penurunan
parameterk,mengakibatkan berkurangnya tingkat pertumbuhan dan, yang
terpenting, lebih rendahW∞, untuk hewan yang pernah mengalami stres.20,26
Kendala pemulihan yang realistis sangat penting agar prediksi jangka
panjang dapat berguna. Jika tidak, agar sesuai dengan data yang diamati,
parameter TD harus terus-menerus menekankan pertumbuhan meskipun hal
tersebut tidak memungkinkan lagi, sehingga melebih-lebihkan toksisitas suatu
bahan kimia. Pemulihan mungkin terbatas sebagai fungsi dari berat badan
(struktural) yang dicapai pada usia kritis. Namun, menentukan aturan yang
dapat digunakan untuk menurunkan nilai secara akuratksetelahnya
kemungkinan besar akan memerlukan kerja eksperimental yang signifikan.
Menghilangkan stresor tertentu pada titik waktu yang berbeda dapat
mengidentifikasi usia di mana pemulihan penuh menjadi tidak mungkin
dilakukan. Namun, percobaan selanjutnya masih diperlukan untuk menguji
bagaimana potensi pemulihan dipengaruhi oleh tingkat stres serta durasinya.
Hal ini dibahas secara lebih rinci dalamSI. Pekerjaan eksperimental tersebut
berada di luar cakupan penelitian ini dan, bagaimanapun juga, untuk tujuan
regulasi, prediksi jangka panjang tersebut memiliki relevansi yang terbatas.
Karena penggunaan pestisida tidak konstan selama bertahun-tahun, skenario
paparan 21 hari digunakan dalam penilaian risiko ekologi untuk menentukan
risiko terhadap hewan di lapangan.62jauh di bawah paparan 12−14 minggu
yang dimodelkan dalam penelitian ini.
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
■ ■
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi
KESIMPULAN
Studi ini menunjukkan bahwa pemodelan DEBtox dengan DEBkiss dapat
memberikan alat yang efektif dan mudah digunakan untuk memprediksi efek
toksik pada pertumbuhan tikus. Kami menunjukkan bagaimana input model
variasi waktu untuk laju pemberian pakan dan laju konsumsi pestisida dapat
dihitung langsung dari data yang dihasilkan dalam studi toksisitas kronis
standar, memberikan wawasan tambahan terhadap data dengan
menunjukkan sejauh mana berat badan dipengaruhi oleh laju pemberian
pakan atau efek racun dari waktu ke waktu.
Kami juga mengidentifikasi beberapa kesulitan yang harus diatasi oleh
model masa depan. Variabilitas individu menghadirkan hambatan yang
signifikan dalam menilai keakuratan model. Model kami mensimulasikan
toksikokinetik, toksikodinamik, dan pertumbuhan, yang kesemuanya mungkin
bergantung pada variabilitas. Dalam sebagian besar kasus, prediksi akurat
hingga dalam satu standar deviasi dari rata-rata yang diamati sehingga
memberikan perkiraan yang berguna mengenai rata-rata tetapi bukan
proyeksi yang tepat termasuk variabilitas.
Temuan kami mendukung teori DEB sebagai dasar efektif untuk
memprediksi efek toksik sublethal pada mamalia. Namun, beberapa
masalah menjadi jelas mengenai kompatibilitasnya dengan data
toksisitas kronis. Mengingat luasnya penggunaanR. norvegicus
dalam pengujian laboratorium dan banyaknya data kontrol yang
dihasilkan, komplikasi ini dapat diatasi. Analisis lebih lanjut terhadap
variasi waktu pemberian pakan dan alokasi energi pada soma dapat
meningkatkan akurasi model dan secara realistis menghambat
pemulihan. Penyesuaian tersebut akan memperluas jangkauan
■
penerapan DEBtox yang dapat digunakan.
A KONTEN TERKAIT
*Sinformasi pendukung
Informasi Pendukung tersedia gratis di Situs web
Publikasi ACSdi DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294.
Seluruh keluaran dan angka model, rincian lebih lanjut tentang peran
pemulihan dalam prediksi TK−TD jangka panjang, dan kerangka kerja
terperinci untuk menguraikan efek yang diamati pada berat badan dari
waktu ke waktu (PDF)
Semua parameter model dan hasil dalam format tabel (XLSX)
■
INFORMASI PENULIS
Penulis yang sesuai
* Surel:TM604@York.ac.uk.
ORCID
Tomas Martin:0000-0002-0814-5947
Alamat sekarang
∥(BASF SE, Speyerer Strasse, Limburgerhof, 67117
Limburgerhof, Jerman).
Pendanaan
Proyek ini didukung oleh BBSRC Industrial Case Studentship BB/
P504944/1 bekerja sama dengan Syngenta dan diselenggarakan
oleh The University of York.
Catatan
■
dia penulis menyatakan tidak ada kepentingan finansial yang bersaing.
UCAPAN TERIMA KASIH
T biologi.2018,14,e1006100.
Kami ingin mengucapkan terima kasih kepada Mark Hodson atas komentarnya
terhadap rancangan sebelumnya serta Richard Currie, Alex Stevens, dan Roger
Murfitt atas bantuan mereka dalam memperoleh dan menafsirkan data
peraturan. Terima kasih juga kepada para peer reviewer atas komentarnya
yang sangat membangun.
L DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
Artikel
REFERENSI
(1) EFSA (2009) Penilaian Risiko pada Burung dan Mamalia.EFSA J.
7,1438.
(2) van Leeuwen, CJ, dan Vermeire, TGPenilaian Risiko Bahan
Kimia: Suatu Pengantar,2danedisi; Springer: Belanda, 2007.
(3) Grimm, V., dan Martin, BT (2013) Pemodelan efek mekanistik untuk
penilaian risiko ekologi: Ke mana arahnya setelah ini? Integrasikan.
Mengepung. Menilai. Mengelola. 9,E58−E63.
(4) Jager, T. (2012) Kebiasaan buruk sulit dihilangkan: Kegigihan NOEC
mencerminkan buruknya ekotoksikologi.Mengepung. beracun. kimia. 31,228−229.
(5) Murado, MA, dan Prieto, MA (2013) NOEC dan LOEC hanya
sebagai cara konsesif: Dua alternatif yang jelas dan beberapa
kriteria untuk memaksimalkan efisiensi desain eksperimental
respons dosis.Sains. Lingkungan Total. 461,576−586.
(6) OECD. Tes No. 416: Toksisitas Reproduksi Dua Generasi,
2001.
(7) Komisi Eropa. Mengatasi tantangan baru dalam penilaian
risiko, (Direktorat Jenderal Kesehatan dan Konsumen, Ed.), 2014.
(8) Forbes, VE, Hommen, U., Thorbek, P., Heimbach, F., Van den Brink,
PJ, Wogram, J., Thulke, H.-H., dan Grimm, V. (2009) Ekologis model yang
mendukung penilaian risiko regulasi pestisida: mengembangkan strategi
untuk masa depan.Integrasikan. Mengepung. Menilai. Mengelola. 5,167
−172.
(9) Forbes, VE, dan Calow, P. (2012) Janji dan masalah
paradigma baru penilaian risiko dan pendekatan alternatif yang
melibatkan model sistem prediktif.Mengepung. beracun. kimia.
31, 2663−2671 .
(10) Jager, T., Heugens, EHW, dan Kooijman, SALM (2006)
Memahami hasil uji ekotoksikologi: Menuju penerapan model
berbasis proses.Ekotoksikologi 15,305−314.
(11) Fischer, DL (2005) Memperhitungkan perbedaan pola paparan
antara uji laboratorium dan lapangan dalam penilaian risiko jangka
panjang pestisida terhadap vertebrata darat.Ekotoksikologi 14, 853
−862.
(12) Hart, ADM, dan Thompson, HM (2005) Pendekatan yang lebih baik
untuk menilai risiko jangka panjang terhadap burung dan mamalia.
Ekotoksikologi 14,771−773.
(13) OECD. Tes No. 414: Studi Toksisitas Perkembangan Prenatal,
2001.
(14) OECD. Tes No. 407: Studi Toksisitas Mulut Dosis Berulang selama 28 hari pada
Hewan Pengerat, 2008.
(15) OECD. Tes No. 408: Studi Toksisitas Mulut 90 Hari Dosis Berulang pada
Hewan Pengerat, 1998.
(16) Nyman, AM, Schirmer, K., dan Ashauer, R. (2012)
Pemodelan toksikokinetik-toksikodinamik kelangsungan hidup
Gammarus pulex dalam paparan multipel terhadap
propikonazol: asumsi model, persyaratan data kalibrasi, dan
daya prediksi. Ekotoksikologi 21,1828−1840.
(17) EFSA. Opini Ilmiah tentang model efek Toxicokinetic/
Toxicodynamic (TKTD) yang canggih untuk penilaian risiko
peraturan pestisida untuk organisme akuatik.EFSA J.,2018,16.
(18) Kooijman, SALM, dan Bedaux, JJM (1996) Analisis uji toksisitas
terhadap kelangsungan hidup dan reproduksi Daphnia.Resolusi Air. 30,
1711−1723.
(19) Kooijman, S., dan Bedaux, JJMAnalisis Data Toksisitas
Perairan;Pers Universitas VU, 1996.
(20) Kooijman, S.Energi Dinamis dan Anggaran Massal dalam Sistem
Biologis;Pers Universitas Cambridge: Cambridge, 2000.
(21) Marques, GM, Augustine, S., Lika, K., Pecquerie, L., Domingos,
T., dan Kooijman, S. Proyek AmP: Membandingkan spesies
berdasarkan parameter anggaran energi dinamis.Komputasi PLoS.
(22) Ashauer, R., dan Jager, T. (2018) Cara kerja fisiologis
lintas spesies dan racun: kunci ekotoksikologi prediktif.
Proses & Dampak Sains Lingkungan 20,48−57.
(23) Zimmer, EI, Preuss, TG, Norman, S., Minten, B., dan Ducrot,
V. Memodelkan efek paparan variabel waktu terhadap
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi
piretroid beta-cyfluthrin pada tahap awal kehidupan ikan trout pelangi.
Mengepung. Sains. euro.2018,30DOI: 10.1186/s12302-018-0162-0.
(24) Sadoul, B., Augustine, S., Zimmer, E., Beǵout, ML, dan Vijayan,
MM Prediksi variasi jangka panjang dalam metabolisme keturunan
akibat BPA pada telur ikan rainbow trout menggunakan model DEB.
J.Res Laut.2019,143,222.
(25) EFSA.Opini Ilmiah tentang model efek Toxicokinetic/
Toxicodynamic (TKTD) yang canggih untuk penilaian risiko
peraturan pestisida untuk organisme akuatik.EFSA J.2018,16.
(26) Jager, T., Martin, BT, dan Zimmer, EI (2013) DEBkiss atau pencarian
model generik paling sederhana dari sejarah kehidupan hewan.J.Teor.
biologi. 328,9−18.
(27) Desforges, JPW, Sonne, C., dan Dietz, R.Menggunakan anggaran energi
untuk menggabungkan ekologi dan toksikologi pada spesies penjaga mamalia.
Sains. Reputasi.2017,7DOI: 10.1038/srep46267.
(28) Komisi Eropa. Petunjuk Komisi 94/79/EC tanggal 21 Desember
1994 mengubah Petunjuk Dewan 91/414/EEC tentang penempatan
produk perlindungan tanaman di pasar, 1994.
(29)PPDB. Database Sifat Pestisida-Acibenzolar-S-metil, https://
sitem.herts.ac.uk/aeru/ppdb/en/Reports/13.htm, 2019.
(30)PPDB. Basis Data Properti Pestisida-Azoxystrobin,https://
sitem.herts.ac.uk/aeru/ppdb/en/Reports/54.htm, 2019.
(31)PPDB. Database Sifat Pestisida-Fenpropidin,https://
sitem.herts.ac.uk/aeru/ppdb/en/Reports/307.htm, 2019.
(32)PPDB. Database Sifat Pestisida-Fludioxonil,https://
sitem.herts.ac.uk/aeru/ppdb/en/Reports/330.htm, 2019.
(33)PPDB. Database Sifat Pestisida-Mandipropamid, https://
sitem.herts.ac.uk/aeru/ppdb/en/Reports/425.htm, 2019.
(34)PPDB. Database Sifat Pestisida-Prosulfuron,https://
sitem.herts.ac.uk/aeru/ppdb/en/Reports/558.htm, 2019.
(35)PPDB. Database Sifat Pestisida-Thiamethoxam, https://
sitem.herts.ac.uk/aeru/ppdb/en/Reports/631.htm, 2019.
(36) OECD. Tes No. 417: Toksikokinetik, 2010.
(37) Bednarska, AJ, Edwards, P., Sively, R., dan Thorbek, P. (2013) Model
toksikokinetik untuk thiamethoxam pada tikus: implikasi untuk penilaian
risiko tingkat tinggi.Ekotoksikologi 22,548−557.
(38) Gergs, A., Gabsi, F., Zenker, A., dan Preuss, TG (2016)
Pemodelan Demografi Toksikokinetik-Toksikodinamik Efek
Mematikan.Mengepung. Sains. Teknologi. 50,6017−6024 .
(39) Kingma, BRM, Frijns, AJH, Schellen, L., dan van Marken
Lichtenbelt, WD (2014) Di luar zona termonetral klasik:
Termasuk kenyamanan termal.Suhu: Jurnal Biomedis
Multidisiplin 1,142−149.
(40) Lika, K., Kearney, MR, Freitas, V., van der Veer, HW, van der
Meer, J., Wijsman, JWM, Pecquerie, L., dan Kooijman, S. (2011)″
metode kovarian″untuk memperkirakan parameter model
Anggaran Energi Dinamis standar I: Filsafat dan pendekatan.
J.Res Laut. 66,270−277.
(41) Poole, S., dan Stephenson, JD (1977) Pengaturan suhu tubuh dan
termoneutralitas pada tikus.QJ Exp. Fisiol. Pengetahuan. medis. Sains. 62,
143−149.
(42) Le, NMP, dan Brown, JW Karakterisasi Zona
Thermoneutral Tikus Laboratorium.Faseb J.2008,22 DOI:
10.1096/fasebj.22.1_supplement.956.19.
(43) Tacutu, R., Thornton, D., Johnson, E., Budovsky, A., Barardo,
D., Craig, T., Diana, E., Lehmann, G., Toren, D., Wang, J., Fraifeld, V.
E, dan de Magalhaes, J. P (2018) Sumber Daya Genomik Penuaan Manusia:
database baru dan diperbarui.Asam Nukleat Res. 46,H1083−D1090.
(44) Jager, T.Memahami Stres Kimia: Penerapan Teori Anggaran
Energi Dinamis dalam Ekotoksikologi dan Ekologi Stres;Leanpub,
2015.
(45) Alvarez, OA, Jager, T., Redondo, EM, dan Kammenga, JE
(2006) Cara kerja fisiologis bahan kimia beracun pada nematoda
Acrobeloides nanus.Mengepung. beracun. kimia. 25,3230−
3237.
(46) Jager, T. BYOM Platform Model Fleksibel.http://www.debtox.
info/byom.html, 2019.
M DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
Artikel
(47) Estimasi Kemungkinan Maksimum Pan, JX, dan Fang, KT. Di dalam
Model Kurva Pertumbuhan dan Diagnostik Statistik;Pegas: New York,
2002.
(48) Kreutz, C., Raue, A., Kaschek, D., dan Timmer, J. (2013)
Kemungkinan profil dalam biologi sistem.FEBS J.280,2564−2571 .
(49) Burthe, SJ, Lambin, X., Telfer, S., Douglas, A., Beldomenico,
P., Smith, A., dan Begon, M. (2010) Tingkat pertumbuhan individu pada tikus
lapangan alami, Microtus agrestis, populasi menunjukkan dinamika populasi
siklik.Oekologia 162,653−661.
(50) Murtaugh, PA (2014) Untuk mempertahankan nilai P.Ekologi 95, 611
−617.
(51) Sively, R., dan Calow, P.Ekologi Fisiologis Hewan: Suatu
Pendekatan Evolusioner;Publikasi Ilmiah Blackwell, 1986.
(52) Hubert, MF, Laroque, P., Gillet, JP, dan Keenan, KP (2000) Pengaruh pola
makan, pemberian makan ad libitum, dan pembatasan pola makan sedang
dan berat terhadap berat badan, kelangsungan hidup, parameter patologi
klinis, dan penyebab kematian pada tikus kontrol Sprague-Dawley. beracun.
Sains. 58,195−207.
(53) Kooijman, SALMAmP Rattus norvegicus,versi 2015/11/06;
https://www.bio.vu.nl/thb/deb/deblab/add_my_pet/entries_ web/
Rattus_norvegicus/Rattus_norvegicus_res.html, 2015.
(54) Rakel, K., dan Gergs, A.AmP Rattus norvegicus Wistar,versi
2018/06/18,https://www.bio.vu.nl/thb/deb/deblab/add_my_pet/
entry_web/Rattus_norvegicus_Wistar/Rattus_norvegicus_Wistar_
res.html, 2018.
(55) Sjovall, J., Alvan, G., dan Westerlund, D. (1985) Penyerapan
amoksisilin dan bacampisilin yang bergantung pada dosis.Klinik.
Farmakol. Ada. 38,241−250.
(56) Godfrey, KR, Arundel, PA, Dong, ZM, dan Bryant, R. (2011)
Pemodelan Fenomena Puncak Ganda dalam farmakokinetik.
Metode dan Program Komputer dalam Biomedis 104,62−69.
(57) Lindstedt, SL, dan Schaeffer, PJ (2002) Penggunaan alometri dalam
memprediksi parameter anatomi dan fisiologis mamalia.Laboratorium.
animasi. 36,1−19.
(58) Lesko, LJ (1979) Kinetika eliminasi teofilin yang bergantung
pada dosis.Klinik. Farmakokinet. 4,449−459.
(59) Caccia, S., Cappi, M., Fracasso, C., dan Garattini, S. (1990)
Pengaruh dosis dan rute pemaparan terhadap kinetika fluoxetine
dan metabolitnya norfluoxetine pada tikus.Psikofarmakologi 100,
509−514.
(60) Jager, T., dan Ashauer, R. (2018) Bagaimana Mengevaluasi Kualitas
Model ToksikokinetikToksikodinamik dalam Konteks Penilaian Risiko
Lingkungan.Integrasikan. Mengepung. Menilai. Mengelola. 14,604−614.
(61) Thompson, HM (2007) Mengatasi permasalahan dalam penilaian risiko pestisida
untuk burung dan mamalia.Pandangan Pengendalian Hama. 18,23−27.
(62) EFSA (2009) Penilaian Risiko pada Burung dan Mamalia.EFSA J.
7,1438.
(63) Mineau, P. (2011) Menggonggong pada tempat bertengger yang salah: Mengapa kita harus
berhenti mengabaikan jalur paparan pestisida pada burung yang bukan makanan.Integrasikan.
Mengepung. Menilai. Mengelola. 7,297−299.
(64) Calabrese, EJ (1986) Perbedaan jenis kelamin dalam kerentanan terhadap
bahan kimia industri beracun.Pekerjaan. Mengepung. medis. 43,577−579.
(65) Seralini, GE, Cellier, D., dan de Vendomois, JS (2007) Analisis baru terhadap studi
pemberian makan tikus dengan jagung hasil rekayasa genetika mengungkapkan
tanda-tanda toksisitas hepatorenal.Lengkungan. Mengepung. Menular. beracun. 52,
596−602.
(66) Moser, VC, Chanda, SM, Mortensen, SR, dan Padilla, S. (1998)
Perbedaan sensitivitas terhadap klorpirifos pada tikus terkait usia
dan gender mencerminkan profil perkembangan aktivitas esterase.
beracun. Sains. 46,211−222.
(67) Jager, T. (2013) Semua Individu Tidak Diciptakan Sama; Akuntansi
untuk Variasi Antarindividu dalam Menyesuaikan Respons Riwayat Hidup
terhadap Racun.Mengepung. Sains. Teknologi. 47,1664−1669.
(68) Barata, C., Baird, DJ, Mitchell, SE, dan Soares, A. (2002) Variabilitas
antar dan dalam populasi dalam toleransi terhadap tekanan kadmium
pada populasi alami Daphnia magna: Implikasi terhadap penilaian risiko
ekologi.Mengepung. beracun. kimia. 21,1058−1064.
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX
Penelitian Kimia di bidang Toksikologi Artikel

(69) Sakurada, S., Shido, O., Sugimoto, N., Hiratsuka, Y., Yoda,
T., dan Kanosue, K. (2000) Termoregulasi otonom dan perilaku
pada tikus kelaparan.J.Fisiol. 526,417−424.
(70) Buwalda, B., Blom, WAM, Koolhaas, JM, dan van Dijk, G. (2001) Respon
perilaku dan fisiologis terhadap stres dipengaruhi oleh pemberian makanan
tinggi lemak pada tikus jantan.Fisiol. Berperilaku. 73,371−377.
(71) Pahl, PJ (1969) Kurva Pertumbuhan Berat Badan Tikus
Laboratorium.Australia. J.Biol. Sains. 22,1077−1080.
(72) Roach, HI, Mehta, G., Oreffo, ROC, Clarke, NMP, dan Cooper, C.
(2003) Analisis temporal lempeng pertumbuhan tikus: Penghentian
pertumbuhan seiring bertambahnya usia meskipun terdapat fisis.J.
Histokimia. Sitokimia. 51,373−383.

N DOI:10.1021/acs.chemrestox.9b00294
kimia. Res. beracun.XXXX, XXX, XXX−XXX