- 1921 -
dengan perbandingan split 10:1. Pertahankan suhu
kolom 110 pada 4 menit pertama dan naikkan hingga
200 dengan kenaikan 8 per menit, pertahankan suhu
200 selama 5 menit. Suhu injektor 250. Lakukan
kromatorgrafi pada Larutan baku. Rekam
kromatogram dan ukur semua respons puncak seperti
tertera pada Prosedur. Waktu retensi relative
dimetilanilin dan naftalen, berturut-turut 1,0 dan 1,3.
Perbandingan signal-to-noise respon puncak
dimetilanilin tidak kurang dari 10.
Prosedur Suntikkan secara terpisah sejumlah
volume sama 1 µl Larutan baku dan Larutan uji ke
dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak utama. Perbandingan respons puncak
dimetilanilin terhadap puncak naftalena yang
diperoleh dari Larutan uji tidak lebih besar dari
Larutan baku (0,002 %).
UJI BATAS LOGAM BERAT <371>
Pengujian ini dimaksudkan untuk menunjukkan
bahwa cemaran logam yang dengan ion sulfida
menghasilkan warna pada kondisi penetapan, tidak
melebihi batas logam berat yang tertera pada masing-
masing monografi, dinyatakan dalam % (bobot)
timbal dalam zat uji, ditetapkan dengan
membandingkan secara visual seperti tertera pada
pembandingan visual dalam Spektrofotometri dan
Hamburan Cahaya <1191> dengan pembanding
Larutan baku timbal. [Catatan Senyawa-senyawa
yang memberikan respons pada uji ini adalah timbal,
raksa, bismut, arsen, antimon, timah, kadmium,
perak, tembaga, dan molibdenum].
Kecuali dinyatakan lain dalam masing-masing
monografi, tetapkan jumlah logam berat
menggunakan Metode I. Metode I digunakan untuk
zat yang pada kondisi penetapan memberikan larutan
jernih dan tidak berwarna pada kondisi uji. Metode III
digunakan untuk zat yang pada kondisi Metode I tidak
menghasilkan larutan jernih dan berwarna, atau
senyawa yang karena sifatnya menganggu
pengendapan logam oleh ion sulfida atau minyak
lemak dan minyak menguap. Metode V suatu metode
digesti basah, hanya digunakan bila Metode I dan
Metode III tidak dapat digunakan.
Pereaksi khusus
Larutan timbal(II) nitrat persediaan Larutkan
159,8 mg timbal(II) nitrat P dalam 100 mL air yang
telah ditambah 1 mL asam nitrat P, kemudian
encerkan dengan air hingga 1000,0 mL. Buat dan
simpan larutan ini dalam wadah kaca yang bebas dari
garam-garam timbal yang larut.
Larutan baku timbal Buat larutan segar dengan
mengencerkan 10,0 mL Larutan timbal(II) nitrat
persediaan dengan air hingga 100,0 mL. Tiap mL
Larutan baku timbal setara dengan 10 µg timbal.
Larutan pembanding yang dibuat dari 100 µl Larutan
baku timbal dalam 1 gram zat uji setara dengan 1 bpj
timbal.
Metode I
Dapar asetat pH 3,5 Larutkan 25,0 g amonium
asetat P dalam 25 mL air dan tambahkan 38,0 mL
asam hidroklorida 6 N. Jika perlu atur pH hingga 3,5
dengan penambahan amonium hidroksida 6 N atau
asam hidroklorida 6 N, encerkan dengan air hingga
100 mL, campur.
Larutan baku Pipet 2 mL Larutan baku timbal (20
µg Pb) ke dalam tabung pembanding warna 50 mL,
dan encerkan dengan air hingga 25 mL. Atur pH
antara 3,0 dan 4,0 dengan penambahan asam asetat 1
N atau amonium hidroksida 6 N, encerkan dengan air
hingga 40 mL, campur.
Larutan uji Ke dalam tabung pembanding warna
50 mL masukkan 25 mL Larutan uji seperti tertera
pada masing-masing monografi atau menggunakan
sejumlah volume asam jika dinyatakan dalam masing-
masing monografi, larutkan dan encerkan dengan air
hingga 25 mL. Gunakan sejumlah zat uji dalam g,
yang dihitung dengan rumus :
2,0
1000𝐿
L adalah batas Logam berat dalam persen. Atur pH
antara 3,0 dan 4,0 dengan penambahan asam asetat 1
N atau amonium hidroksida 6 N, encerkan dengan air
hingga 40 mL, campur.
Larutan pembanding Masukkan 25 mL larutan
yang dibuat sama seperti Larutan uji ke dalam tabung
pembanding warna 50 mL, dan tambahkan 2,0 mL
Larutan baku timbal. Atur pH antara 3,0 dan 4,0
dengan penambahan asam asetat 1 N atau amonium
hidroksida 6 N, encerkan dengan air hingga 40 mL,
campur.
Prosedur Ke dalam tiap tabung dari 3 tabung yang
masing-masing berisi Larutan baku, Larutan uji dan
Larutan monitor tambahkan 2 mL dapar asetat pH
3,5 kemudian tambahkan 1,2 mL tioasetamida LP,
encerkan dengan air hingga 50 mL, campur, diamkan
selama 2 menit. Amati permukaan dari atas pada dasar
putih: Warna yang terjadi pada Larutan uji tidak lebih
gelap dari warna yang terjadi pada Larutan baku dan
warna yang terjadi pada Larutan monitor sama atau
lebih gelap dari warna yang terjadi pada Larutan baku
[Catatan Bila warna pada larutan monitor lebih
muda dari warna larutan baku gunakan Metode III
sebagai pengganti Metode I untuk zat uji].
Metode II
Larutan uji 12 mL larutan zat uji seperti tertera
pada masing-masing monografi.
 - 1922 -
Larutan baku Campur 10 mL Larutan baku timbal
1 bpj atau 2 bpj sesuai yang ditetapkan dengan 2 mL
Larutan uji.
Larutan blangko Campur 10 mL air dengan 2 mL
Larutan uji.
Prosedur Ke dalam tiap larutan tambahkan 2 mL
dapar asetat pH 3,5 dan campur. Tambah 1,2 mL
tioasetamida LP, campur dengan cepat dan diamkan
2 menit. Amati permukaan dari atas pada dasar putih:
uji tidak absah bila Larutan baku tidak menunjukkan
warna coklat dibanding Larutan blangko, warna
coklat yang terjadi pada Larutan uji tidak lebih
intensif dari warna Larutan baku. Jika hasil yang
diperoleh sulit untuk disimpulkan, saring larutan
melalui penyaring membran (ukuran pori 3 µm); lihat
gambar alat tanpa prefilter. Lakukan penyaringan
secara lambat dan menyeluruh menggunakan tekanan
sedang dan konstan. Bandingkan bercak pada
penyaring di antara ketiga larutan.
Metode III
[Catatan Metode ini tidak mencakup merkuri.]
Dapar asetat pH 3,5 Buat seperti tertera pada
Metode I.
Larutan baku Buat seperti tertera pada Metode I.
Larutan uji Gunakan sejumlah zat uji dalam g,
yang dihitung dengan rumus :
2,0
1000𝐿
L adalah batas Logam berat dalam persen. Masukkan
sejumlah zat yang telah ditimbang ke dalam krus yang
sesuai, tambahkan asam sulfat P secukupnya untuk
membasahi, dan pijarkan hati-hati pada suhu rendah
hingga mengarang. Selama pengarangan krus tidak
boleh ditutup rapat. Pada bagian yang telah
mengarang, tambahkan 2 mL asam nitrat P dan 5
tetes asam sulfat P, panaskan hati-hati sampai asap
putih tidak terbentuk lagi. Pijarkan, sebaiknya dalam
tanur, pada suhu 500º hingga 600º, sampai arang habis
terbakar. Dinginkan, tambahkan 4 mL asam
hidroklorida 6 N, tutup, digesti di atas tangas uap
selama 15 menit, buka dan uapkan perlahan-lahan di
atas tangas uap hingga kering. Basahkan sisa dengan
1 tetes asam hidroklorida P, tambahkan 10 mL air
panas, dan digesti selama 2 menit. Tambahkan
amonium hidroksida 6 N tetes demi tetes, hingga
larutan bereaksi basa terhadap kertas lakmus,
encerkan dengan air hingga 25 mL, dan atur pH antara
3,0 dan 4,0 dengan penambahan asam asetat 1 N,
menggunakan kertas indikator pH rentang pendek
sebagai indikator eksternal. Saring jika perlu, bilas
krus dan penyaring dengan 10 mL air. Kumpulkan
filtrat dan air bilasan dalam tabung pembanding
warna 50 mL, encerkan dengan air hingga 40 mL, dan
campur.
Prosedur Ke dalam tiap tabung yang masing-
masing berisi Larutan baku dan Larutan uji
tambahkan 2 mL dapar asetat pH 3,5 kemudian
tambahkan 1,2 mL tioasetamida LP, encerkan dengan
air hingga 50 mL, campur, diamkan selama 2 menit.
Amati permukaan dari atas pada dasar putih: Warna
yang terjadi pada Larutan uji tidak lebih gelap dari
warna yang terjadi pada Larutan baku.
Metode IV
Larutan uji Masukkan sejumlah zat (tidak lebih
dari 2 g) ke dalam krus silika dan 4 mL larutan
magnesium sulfat P 25% dalam asam sulfat 2 N. Aduk
dengan batang pengaduk kaca kecil dan panaskan
hati-hati. Jika campuran berbentuk cairan, uapkan
perlahan-lahan di atas tangas air hingga kering.
Pijarkan dengan cepat, suhu tidak lebih dari 800º, dan
lanjutkan pemanasan hingga sisa berwarna putih atau
keabu-abuan. Biarkan dingin, basahkan sisa dengan
0,2 mL asam sulfat 2 N, uapkan, pijarkan kembali dan
biarkan dingin. Lama pemijaran tidak boleh lebih dari
2 jam. Larutkan residu dalam 5 mL asam hidroklorida
2 N, dan tambahkan lagi 5 mL asam hidroklorida 2 N.
Tambahkan 0,1 mL fenolftalein LP dan amonium
hidroksida 13 N tetes demi tetes hingga terjadi warna
merah muda. Dinginkan, tambahkan asam asetat
glasial P hingga larutan tidak berwarna, dan
tambahkan lagi 0,5 mL asam asetat glasial P. Saring
jika perlu dan encerkan larutan dengan air hingga 20
mL.
Larutan baku Buat seperti tertera pada larutan uji
menggunakan sejumlah Larutan timbal yang
ditentukan (10 bpj Pb) untuk mengganti zat yang
diuji. Pada 10 mL larutan yang diperoleh tambahkan
2 mL Larutan uji.
Larutan blangko Campur 10 mL air dengan 2 mL
Larutan uji.
Prosedur Ke dalam masing-masing 12 mL larutan
tambahkan 2 mL dapar asetat pH 3,5 dan campur.
Tambahkan 1,2 mL tioasetamida LP, campur dengan
cepat, diamkan 2 menit. Amati permukaan dari atas
pada dasar putih: Uji tidak absah bila Larutan baku
tidak menunjukkan warna coklat dibanding Larutan
blangko, warna coklat yang terjadi pada Larutan uji
tidak lebih intensif dari warna Larutan baku. Jika
hasil yang diperoleh sulit untuk disimpulkan, saring
larutan melalui penyaring membran (ukuran pori 3
µm); lihat gambar alat tanpa prefilter. Lakukan
penyaringan secara lambat dan menyeluruh
menggunakan tekanan sedang dan konstan.
Bandingkan bercak pada penyaring di antara ketiga
larutan.
 - 1923 -
Metode V
Dapar asetat pH 3,5 Buat seperti tertera pada
Metode I
Larutan baku Masukkan campuran 8 mL asam
sulfat P dan 10 mL asam nitrat P ke dalam labu
Kjeldahl 100 mL yang bersih dan kering, tambahkan
sejumlah volume asam nitrat P yang sama dengan
jumlah yang ditambahkan pada Larutan uji. Panaskan
larutan hingga terbentuk asap putih tebal, dinginkan,
tambahkan dengan hati-hati 10 mL air; dan jika
digunakan hidrogen peroksida pada pembuatan
Larutan uji, tambahkan sejumlah volume yang sama
hidrogen peroksida P yang digunakan pada Larutan
uji, didihkan perlahan-lahan hingga terbentuk asap
putih tebal. Dinginkan lagi, tambahkan hati-hati 5 mL
air, campur dan didihkan hati-hati hingga terbentuk
asap putih tebal, hingga volume 2 mL sampai 3 mL.
Dinginkan, encerkan hati-hati dengan beberapa mL
air, tambahkan 2,0 mL Larutan baku timbal (20 µg
Pb) dan campur. Pindahkan ke dalam tabung
pembanding warna 50 mL, bilas labu dengan air,
tambahkan air bilasan ke dalam tabung hingga 25 mL
dan campur.
Larutan uji Kecuali dinyatakan lain pada masing-
masing monografi, gunakan sejumlah zat uji dalam g,
yang dihitung dengan rumus :
2,0
1000𝐿
L adalah batas Logam berat dalam persen.
Jika zat uji berbentuk padat Masukkan sejumlah
zat uji ke dalam labu Kjeldahl 100 mL yang bersih
dan kering. [Catatan Labu 300 mL dapat digunakan
jika reaksi membentuk busa berlebihan]. Klem labu
dengan sudut 450, dan tambahkan campuran 8 mL
asam sulfat P dan 10 mL asam nitrat P secukupnya
untuk membasahi zat. Hangatkan perlahan-lahan
hingga terjadi reaksi, biarkan reaksi mereda.
Tambahkan sejumlah sama campuran asam, panaskan
pada setiap penambahan, sampai jumlah campuran
asam yang ditambahkan 18 mL. Naikkan suhu dan
didihkan perlahan-lahan hingga larutan menjadi
gelap. Dinginkan, tambahkan 2 mL asam nitrat P dan
panaskan lagi hingga larutan menjadi gelap.
Lanjutkan pemanasan, diikuti dengan penambahan
asam nitrat P sampai tidak lagi gelap, kemudian
panaskan kuat sampai terbentuk asap putih tebal.
Dinginkan, tambahkan hati-hati 5 mL air, didihkan
perlahan-lahan sampai terbentuk asap putih, dan
lanjutkan pemanasan sampai volume berkurang
hingga beberapa mL. Dinginkan, tambahkan dengan
hati-hati 5 mL air dan amati warna larutan. Jika
berwarna kuning, tambahkan dengan hati-hati 1 mL
hidrogen peroksida P dan uapkan lagi sampai
terbentuk asap putih tebal dan volume menjadi 2
hingga 3 mL. Jika warna larutan masih kuning, ulangi
penambahan 5 mL air dan peroksida seperti di atas.
Dinginkan, encerkan hati-hati dengan beberapa mL
air, pindahkan ke dalam tabung pembanding warna 50
mL, dan bilas. Jaga kumpulan volume bilasan tidak
lebih dari 25 mL.
Jika zat berbentuk cair Masukkan sejumlah zat uji
ke dalam labu Kjeldahl 100 mL yang bersih dan
kering. [Catatan Labu 300 mL dapat digunakan jika
reaksi membentuk busa berlebihan]. Klem labu pada
sudut 45 dan tambahkan dengan hati-hati beberapa
mL campuran 8 mL asam sulfat P dan 10 mL asam
nitrat P. Hangatkan perlahan-lahan hingga terjadi
reaksi, biarkan reaksi mereda dan lanjutkan seperti
tertera pada Jika zat uji berbentuk padat dimulai
dengan “Tambahkan lagi sejumlah campuran asam
yang sama ...”.
Larutan Pembanding Lakukan digesti
menggunakan sejumlah sama sampel dengan
prosedur yang sama seperti tertera pada Larutan uji
sub bagian Jika zat berbentuk padat sampai langkah
“Dinginkan, tambahkan dengan hati-hati dengan
beberapa mL air”. Tambahkan 2,0 mL Larutan baku
timbal (20 µg Pb), campur. Pindahkan ke dalam
tabung pembanding warna 50 mL, bilas labu dengan
air, tambahkan air bilasan ke dalam tabung sampai 25
mL dan campur.
Prosedur Perlakukan Larutan uji, Larutan baku
dan Larutan monitor sebagai berikut: Atur pH larutan
antara 3,0 dan 4,0 dengan penambahan amonium
hidroksida P (amonia LP dapat digunakan jika
diinginkan pada saat mendekati jarak pH yang
ditetapkan), encerkan dengan air hingga 40 mL,
campur. Ke dalam tiap tabung tambahkan 2 mL dapar
asetat pH 3,5 kemudian 1,2 mL tioasetamida LP,
encerkan dengan air hingga 50 mL, campur dan
diamkan 2 menit. Amati permukaan dari atas pada
dasar putih: Warna yang terjadi pada Larutan uji tidak
lebih gelap dari warna yang terjadi pada Larutan baku
dan warna yang terjadi pada Larutan monitor sama
atau lebih gelap dari warna yang terjadi pada Larutan
baku.
Metode VI
Larutan uji Campur sejumlah zat uji dengan 50
mg magnesium oksida P dalam krus silika. Pijarkan di
atas nyala api sampai terbentuk masa homogen
berwarna putih atau putih keabu-abuan. Jika setelah
30 menit campuran masih berwarna, biarkan dingin,
aduk dengan batang pengaduk kaca kecil dan ulangi
pemijaran. Panaskan pada suhu 800 selama lebih
kurang 1 jam, larutkan residu dalam 5 mL asam
hidroklorida 5 N, tambahkan lagi 5 mL asam klorida
5 N dan lanjutkan prosedur seperti tertera pada
Metode IV, mulai dengan “Tambahkan 0,1 mL ...”.
Larutan baku Buat seperti tertera pada Larutan uji
menggunakan Larutan baku timbal yang ditetapkan
 - 1924 -
(10 bpj) untuk menggantikan zat yang diuji dan
keringkan dalam oven pada suhu 100º hingga 105º.
Pada 10 mL larutan yang diperoleh, tambahkan 2 mL
Larutan uji.
Larutan blangko Campur 10 mL air dan 2 mL
Larutan uji.
Prosedur Ke dalam masing-masing 12 mL larutan
tambahkan 2 mL dapar asetat pH 3,5 dan campur.
Tambahkan 1,2 mL tioasetamida LP, campur dengan
cepat, diamkan 2 menit. Amati permukaan dari atas
pada dasar putih: Uji tidak absah bila Larutan baku
tidak menunjukkan warna coklat dibanding Larutan
blangko, warna coklat yang terjadi pada Larutan uji
tidak lebih intensif dari warna Larutan baku. Jika
hasil yang diperoleh sulit untuk disimpulkan, saring
larutan melalui penyaring membran (ukuran pori 3
µm); lihat gambar alat tanpa prefilter. Lakukan
penyaringan secara lambat dan menyeluruh
menggunakan tekanan sedang dan konstan.
Bandingkan bercak pada penyaring di antara ketiga
larutan.
Alat untuk Uji Batas Logam Berat
UJI BATAS RAKSA <381>
Metode I
[Catatan Raksa(II) ditizonat peka terhadap
cahaya. Lakukan pengujian dalam cahaya redup].
Pereaksi
Larutan persediaan ditizon Larutkan 40 mg ditizon
P dalam 1000 mL kloroform P.
Titran ditizon Encerkan 30,0 mL Larutan
persediaan ditizon dengan kloroform P hingga 100,0
mL. Larutan ini mengandung lebih kurang 12 mg
ditizon P per liter.
Larutan persediaan raksa Masukkan 135,4 mg
raksa(II) klorida P ke dalam labu tentukur 100-mL,
encerkan dengan asam sulfat 1 N sampai tanda.
Larutan ini mengandung setara dengan 100 mmHg
per 100 mL.
Larutan raksa untuk pembakuan titran ditizon
Masukkan 2,0 mL Larutan persediaan raksa ke
dalam labu tentukur 100-mL, encerkan dengan asam
sulfat 1 N sampai tanda. Tiap mL larutan ini
mengandung setara dengan 20 µg Hg.
Larutan-larutan berikut digunakan untuk uji batas
raksa yang tertera pada monografi: Besi(II) Fumarat
dan Besi(II) Sulfat.
Larutan hidroksilamina hidroklorida Buat seperti
tertera pada Uji Batas Timbal <401>.
Larutan baku raksa Buat larutan segar dengan
mengencerkan secara kuantitatif 1,0 mL Larutan
persediaan raksa dengan asam sulfat 1 N sampai
1000 mL. Tiap mL larutan ini setara dengan 1 µg Hg.
Larutan pengekstraksi ditizon Buat seperti tertera
pada Uji Batas Timbal <401>.
Larutan pengekstraksi ditizon encer Buat larutan
segar, encerkan 5 mL Larutan pengekstraksi ditizon
dengan 25 mL klorofrom P.
Pembakuan titran ditizon Masukkan 1,0 mL
Larutan raksa untuk pembakuan titran ditizon ke
dalam corong pisah 250 mL, tambahkan 100 mL asam
sulfat 1 N, 90 mL air, 1 mL asam asetat glasial P dan
10 mL larutan hidroksilamina hidroklorida P (1
dalam 5). Titrasi larutan dengan Titran ditizon
menggunakan buret mikro 10 mL, kocok campuran
20 kali setiap penetesan dan biarkan lapisan
kloroform memisah, kemudian buang lapisan
kloroform. Lanjutkan sampai penambahan Titran
ditizon terakhir berwarna hijau setelah dikocok.
Hitung jumlah dalam µg kesetaraan Hg untuk tiap mL
Titran ditizon dengan rumus:
20
𝑉
V adalah volume, dalam mL Titran ditizon yang
ditambahkan.
Larutan uji Timbang saksama lebih kurang 2 g,
masukkan ke dalam labu Erlenmeyer 250 mL
bersumbat kaca, tambahkan 20 mL campuran asam
nitrat P dan asam sulfat P volume sama, hubungkan
dengan pendingin yang sesuai, refluks campuran
selama 1 jam, dinginkan, encerkan hati-hati dengan
air dan didihkan sampai uap asam nitrit habis.
Dinginkan larutan, encerkan hati-hati dengan air,
pindahkan ke dalam labu tentukur 200-mL, encerkan
dengan air sampai tanda, campur dan saring.
Prosedur Masukkan 50,0 mL Larutan uji ke dalam
corong pisah 250 mL, ekstraksi beberapa kali dengan
sedikit kloroform P, sampai ekstrak kloroform
terakhir tidak berwarna. Buang ekstrak kloroform dan
pada larutan tambahkan 50 mL asam sulfat 1 N, 90