PEMERIKSAAN LABORATORIUM

HEPATITIS VIRUS

Betty Agustina Tambunan

Patologi Klinik
FK Unair/RSUD Dr Soetomo Surabaya

1
VIRUS HEPATITIS
Hepatitis A Virus (HAV) RNA
Hepatitis B Virus (HBV) DNA
Hepatitis C Virus (HCV) RNA
Hepatitis D Virus (HDV) RNA
Hepatitis E Virus (HEV) RNA
Hepatitis G Virus (HGV) RNA
Hepatitis TT Virus DNA
Hepatitis SEN-V (Non- ABCDE) DNA
transmisi melalui fekal/tinja-oral
transmisi melalui parenteral
transmisi parenteral
transmisi melalui parenteral
di Asia: melalui enterik (epidemik)
penularan melalui transfusi darah
penularan melalui transfusi darah
penularan melalui transfusi darah
2
• Lima jenis virus hepatitis yang dapat dideteksi dengan
uji laboratorium, yaitu :
❖ virus hepatitis A (hepatitis A virus, HAV)
❖ virus hepatitis B (hepatitis B virus, HBV)
❖virus hepatitis C (hepatitis C virus, HCV)
❖virus hepatitis D (hepatitis D virus, HDV)
❖virus hepatitis E (hepatitis E virus, HEV).

• Virus hepatitis dapat dideteksi dengan pengujian

antigen serum, antibodi, DNA, RNA.

3
HEPATITIS A

• Virus hepatitis A terutama ditransmisikan

lewat kontak fekal-oral.

• Ikterus merupakan tanda awal HAV ➔ terjadi

beberapa hari setelah infeksi virus dan dapat
berlangsung selama 12 minggu.

• Antibodi terhadap HAV, yaitu IgM anti

HAV dan IgG anti-HAV digunakan untuk
mengkonfirmasi fase infeksi hepatitis A.

4
• IgM anti-HAV ➔ fase akut infeksi; muncul di awal
infeksi dan menghilang dalam 2-3 bulan.

• IgG anti-HAV muncul lebih lambat ➔ fase

pemulihan, pasca infeksi, atau imunitas.

• Waktu antara infeksi dan munculnya gejala klinis

(periode inkubasi) : 2-6 minggu (rata-rata 28
hari).

• 45-50 % penderita HAV memiliki IgG anti-HAV

yang menetap seumur hidupnya.

5
PROFIL SEROLOGI INFEKSI HEPATITIS A

6
PEMERIKSAAN LAB

• Anti HAV total Negatif → tidak terinfeksi HAV

Positif→ Infeksi akut HAV atau infeksi HAV lampau

• IgM Anti-HAV → membedakan infeksi akut dan lampau

Negatif → tidak terinfeksi HAV
Positif → Infeksi akut HAV

7
HEPATITIS B

 Virus hepatitis B (HBV) ditemukan Blumberg

1965 → Australian antigen , mrp enveloped
virus dengan partially double- stranded
circular DNA
 Penyebarannya melalui kontak dengan
cairan tubuh yang terinfeksi virus
 Replikasi terjadi hanya di jaringan hati
 Hepatitis B surface antigen (HBsAg)
ditemukan di permukaan virus dalam bentuk
spherical dan tubular (filamentous)

8
9
The three main ‘pathways’ of HBV replication in HBeAg-positive
patients: replication of HBV DNA, HBsAg production and HBeAg
secretion

Virus
replication:

1. Attachment
2. Penetration
3. Uncoating
4. Replication  
5. Assembly
6. Release


Nguyen, T. and Locarnini, S. (2009) Monitoring drug therapy for hepatitis B—a global challenge?
Nat. Rev. Gastroenterol. Hepatol. doi:10.1038/nrgastro.2009.160
10
HEPATITIS B

 Infeksi virus Hepatitis B (HBV) : sekitar 240 juta

penduduk dunia dengan terinfeksi HBV dan 6 %
dari yang terinfeksi menderita Hepatitis B kronik
(APASL 2015 update).
 Pada anak: 90% menjadi infeksi hepatitis B
kronik
 20% infeksi hepatitis B kronik → sirosis dan
hepatoselular karsinoma (HCC)

11
• Hepatitis B kronik:

→hepatitis B surface antigen (HBsAg),

terdeteksi selama 6 bulan atau lebih
setelah infeksi.

→ hepatitis B virus (HBV)

Deoxyribonucleic acid (DNA) yg tinggi,
risiko tinggi menularkan penyakit,
inflamasi hati, peningkatan enzim hati,
dan berisiko tinggi menjadi sirosis
dan HCC.

12
DIAGNOSIS

 Diagnosis hepatitis B kronik

ditentukan berdasarkan pemeriksaan
biokimia, virologi, gambaran histologi

 Tes fungsi hati rutin dan pemeriksaan

serologi antigen HBV (HBsAg dan
HBeAg) dan antibodi (anti-HBs, anti
HBc, dan anti-HBe) harus dilakukan
untuk menilai fase hepatitis B kronik

13
 MARKER SEROLOGI HEPATITS B

• HBsAg
- Marker yang pertama kali muncul, terdeteksi
2-10 minggu setelah paparan HBV
- Deteksi awal terjadinya infeksi
- Monitoring infeksi, progresivitas jd kronik
- Skrining donor darah
- Tidak terdeteksi selama masa penyembuhan

14
• Anti- HBs
- Antibodi spesifik terhadap HBsAg (anti HBs)
- Tampak pd periode penyembuhan dari infeksi
hepatitis akut, segera setelah HbsAg
menghilang
- Timbul setelah vaksinasi hepatitis B yang
berhasil
- menentukan perlunya vaksinasi, sembuh
dari infeksi, punya ketahanan terhadap infeksi

15
Anti HBc
• IgM anti-HBc merupakan antibodi pertama yang dibentuk
setelah infeksi HBV, mengindikasikan infeksi baru
→ terdeteksi saat window periode
• dideteksi 1-2 minggu setelah HBsAg pada infeksi akut
• menetap dengan titer tinggi selama 4-6 bulan, kemudian
menurun secara bertahan
• Ig G anti-HBc positif dapat diinterpretasi hepatitis B
sembuh atau infeksi kronik

16
HBeAg

▪ Protein ini dikeluarkan dari HBcAg selama periode

inkubasi, timbul segera setelah HBsAg muncul, dan
menghilang sebelum HBsAg menghilang

▪ mengindikasikan replikasi virus dan kemampuan

menginfeksi

▪ Hilangnya HBeAg diikuti dgn timbulnya Anti-Hbe

▪ In fact, the majority (75 %) of cirrhosis complications and
HCC occur in this population of HBeAg-negative, chronic
HBV-infected people

17
KARAKTERISTIK HEPATITIS B AKUT DAN KRONIK

Gambar. Karakteristik hepatitis B akut dengan kesembuhan

Gambar. Karakteristik hepatitis B kronik

18
• Chronic HBV infection can be classified into five
phases:
(I) HBeAg-positive chronic infection,
(II) HBeAg-positive chronic hepatitis,
(III) HBeAg-negative chronic infection,
(IV)HBeAg-negative chronic hepatitis and
(V) HBsAg-negative phase

• The duration of the immune tolerance phase is related to

such factors as age of infection (younger/older), mode of
infection (vertical/horizontal), immune status (suppressed /
competent), ethnicity (Asians/non-Asians), HBV genotype C
>B >D> A, baseline biochemical and histological activity
(higher / lower), and ALT flare during follow-up (present
/absent).

19
Natural history of HBV

20
EASL 2017 Clinical Practice Guidelines on the management of hepatitis B virus infection
 HBV DNA

• Pemeriksaan virus hepatitis B dengan PCR merupakan

teknik biologi molekular untuk deteksi HBV DNA.

• Prinsip pemeriksaan HBV DNA berdasarkan dua proses

utama yaitu preparasi sampel untuk memperoleh HBV
DNA dan PCR amplification dari target DNA

• Sampel HBV DNA dapat menggunakan plasma EDTA

atau serum.

• Hasil pemeriksaan titer HBV DNA menggunakan

international Unit (IU)/ml.
•

21
EASL 2017 Clinical Practice Guidelines on the management of hepatitis B virus infection

22
Asian-Pacific clinical practice guidelines on the management of hepatitis B:
a 2015 update

23
Asian-Pacific clinical practice guidelines on the management of hepatitis B:
a 2015 update
24
Asian-Pacific clinical practice guidelines on the management of hepatitis B:
a 2015 update
25
HEPATITIS C
• Hepatitis Non A Non B.
• RNA, genom rantai tunggal.

• Diameter 30- 60 nm.

• Panjang : 10 kb.
• Flaviviridae/ hepacivirus.
• Asam amino: 3000.
• Ujung 5’ → protein struktural.
• Ujung 3’ → protein non struktural.
• 6 genotipe.

26

26
27

27
 HEPATITIS C

 Virus RNA ini mempunyai 6 genotipe utama.

 Penularan utama melalui transfusi (90% kasus,
sekarang hanya 4% kasus)
 Sekarang lebih dari 50% penularan melalui pengguna
suntikan obat/ narkoba

28
 HCV - Sources of Infection

Injecting drug use 60%

Sexual 15%

Transfusion 10%
(before screening)

Other* 5%
Unknown 10% *Nosocomial;
Health-care work;
Source: Centers for Disease Control and Prevention Perinatal 29
INFEKSI HCV
Pada sebagian kasus,
infeksi HCV dapat
hilangspontan atau dg
terapi obat antivirus
20% nya terjadi
sirosis
85% menjadi
infeksi kronis
Gejala klinis
timbul hanya meningkatkan
pada sekitar 20% resiko
kasus
Masa inkubasi karsinoma
7 minggu (2- hepatoselular
30 minggu) 30

30
 Koinfeksi dengan virus HCV dijumpai pada sedikitnya 30%
pada kelompok dengan infeksi HIV.

 Pada infeksi HIV perjalanan Hepatitis C kronik lebih cepat

progresif menjadi sirosis hati, sedangkan HCV sendiri
meningkatkan hepato-toxicity terapi HAART (highly active
antiretroviral) pada infeksi HIV/AIDS.

31
Diagnosis Hepatitis C

• HCV sulit dikultur → perlu pemeriksaan lain ➔ Tes

serologi dan molekuler.

• Tes serologi: deteksi adanya antibodi anti HCV.

• Tes molekuler : deteksi RNA HCV.

• Menahun : ALT meningkat dan anti HCV (+) terjadi

lebih dari 6 bulan / 1 tahun.

 Anti-HCV tidak mempunyai daya proteksi,

 Pada hepatitis akut maupun kronis sebagai penanda adanya
infeksi hepatitis C adalah anti HCV
32
➢ Hasil serologi anti-HCV dapat negatif palsu maupun positif
palsu ➔ diagnosis hepatitis C dapat dikonfirmasi dengan uji
RNA HCV ( PCR).
 Anti-HCV positif, tetapi uji RNA HCV serum ( uji PCR ) negatif
berarti adanya penyembuhan (recovery)

➢Tes anti-HCV pada donor darah bertujuan mengurangi risiko

hepatitis pasca transfusi (darah donor dengan anti-HCV
positif akan ditolak)

33
PEMERIKSAAN LAB HCV
Pemeriksaan serologi utk deteksi antibodi anti HCV

Pemeriksaan serologi utk genotipe HCV

Asai molekuler utk mendeteksi dan mengukur RNA HCV

Penentuan genotipe HCV.

34

34
ALGORITME PEMERIKSAAN SEROLOGI DAN VIROLOGI HCV

35
Asai serologi deteksi antibodi anti HCV

Anti HCV • C 100-3 ( turunan regio NS4)

generasi I
Anti HCV • Peptide C 22-3 (core), C 33c (NS3)
generasi II • C 100-3

Anti HCV • = generasi II

generasi III • Regio NS5, RNA polymerase.

Anti HCV • Regio core, NS3,NS4,NS5

generasi IV
36
Marker Hepatitis C
Asai molekuler utk deteksi dan mengukur RNA HCV

kualitatif kuantitatif

Ada/ tidak RNA HCV dalam RT-PCR, real time PCR, dan
sampel. branched DNA amplification.

Konfirmasi pada anti HCV Monitor jumlah RNA HCV/ viral

positif. load sebelum, selama , setelah
terapi antivirus.
RT-PCR dan TMA (Transcription
-Mediated Amplification)

Deteksi 2-3 minggu setelah

terpapar

Mampu deteksi RNA HCV ≤ 50

IU/ml
38
Asai molekuler penentuan genotipe
(genotyping)
•Dengan analisis urutan, subtype-spesific RT-
PCR, line probe assay.
•Genotipe berkaitan dengan terapi optimal.
•Genotipe 1, 4 perlu pengobatan lebih agresif,
dibandingkan genotipe 2, 3.

Pemeriksaan serologi untuk genotipe HCV.

➔antibodi terhadap epitop genotipe spesifik.

39
Prognosis hepatitis:

 Hepatitis A : tidak menyebabkan penyakit hati kronik

 Hepatitis kronik :
▪  aminotransferase > 6 bulan
▪ Hepatitis C akut ➔ 80% menjadi kronik
Hepatitis B : 1-2% menjadi kronik
• Kemungkinan sirosis (C:30%,B:40%,C&B %>, atau dgn
HIV %>)
▪ Px sirosis : 3-5%/ tahun ➔ hepato cellular carcinoma
(HCC)
▪ Tanpa sirosis, virus B dgn replikasi virus aktif ➔ HCC
40
Pencegahan

➢vaksinasi terhadap HAV dan HBV

( belum ada vaksin terhadap HCV )

➢Imunisasi pasif dengan pemberian imun globulin baik

terhadap hepatitis A, hepatitis B (HBIG)

41
TERIMA KASIH
42