Uji Efektivitas

Antimikrobial
TIM MIKROBIOLOGI
SMKN 13 BANDUNG

ALLPPT.com _ Free PowerPoint Templates, Diagrams and Charts

AntiMIKROBIAL

Sifat suatu bahan yang

dapat menghambat atau
membunuh pertumbuhan
mikroorganisme
Contoh Bahan Antimikrobial
Jenis Antimikrobial Contoh Bahan
Bahan Alam Daun sirih, kayu secang,
dll
Zat Kimia Disinfektan & Antiseptik
Antibiotik Amoxicilin, Tetrasiklin, dll
Logam Tembaga (Cu), Perak (Ag)
Mekanisme Kerja Antibiotik

Merusak dinding sel

Mengubah permeabilitas sel

Mengubah molekul protein & asam nukleat

Menghambat kerja enzim

Menghambat sintesis asam nukleat & protein

 Sifat Antimikrobial

MIC (Minimum Inhibitory

Concentration

Konsentrasi terendah bahan antimikrobial yang

menghambat pertumbuhan mikroorganisme

MKC (Minimum Killing

Concentratrion)

Konsentrasi terendah bahan antimikrobial

yang mematikan mikroorganisme
 Bahan Kimia

Yang
Yang mematikan menghambat
mikroorganisme pertumbuhan
mikroorganisme

Bakterisidal Bakteriostati
s
Faktor yang Memengaruhi
Penghambatan Mikroorganisme

Kepadatan populasi Kepekaan terhadap Volume bahan yang

mikroba bahan antimikrobial disterilkan

Lamanya bahan
antimikrobial Konsentrasi bahan
Suhu
diaplikasikan pada antimikrobial
mikroba

Kandungan bahan
organik
Beberapa pengujian yang dapat dilakukan
yang berkaitan dengan uji antimikrobial

Uji daya kerja disinfektan

Uji potensi antibiotik/Uji Antibiogram

Uji daya oligodinamik

• Kemampuan logam dalam

mematikan/menghambat mikroorganisme
 Metode Uji Antimikrobial

Turbidimetri
• Berdasarkan zona
hambat yang terbentuk • Berdasarkan hambatan
disekeliling pertumbuhan biakan mikroba
silinder/cincin/sumur/ dalam media cair yang
cakram yang berisi mengandung antibiotik
larutan antibiotik • Media cair akan keruh jika
antibiotik kurang berpotensi
• Media cair akan jernih jika
antibiotik berpotensi

Difusi Agar
Metode Difusi Agar
Metode Cakram (Kirby-Baurer)
• Menggunakan kertas cakram atau cakram
antibiotik

Metode Sumur
• Media padat dibuat seperti sumur hingga dasar
cawan petri

Metode Cincin
• Menggunakan cincin atau silinder yang
peletakkannya setengah muncul ke permukaan,
setengah lagi tenggelam ke dalam media
Prosedur Kerja Uji Antimikrobial
I. Preparasi Bahan Ekstrak
1. Timbang 20 gram bahan alam
yang akan di uji
2. Tambahkan 100 ml air
3. Didihkan hingga volume larutan
menjadi 25 ml
4. Masukkan bahan ekstrak ke dalam
wadah steril
II. Membuat Pola Pada Cawan Petri

Keterangan :
1 = Cakram Antibiotik
2 = Cakram Bahan Alam 1
3 = Cakram Alkohol 70%
4 = Cakram Bahan Alam 2
5 = Cakram CuSO4/Logam
6 = Cakram Bahan Alam 3
III. Pembuatan Cakram Kertas
Cakram kertas dibuat dari kertas saring
Whatman 40 yang dilubangi. Ambil kertas
bulatnya
Maukkan
masing- masing
20-30 pcs
cakram

Bahan Bahan Bahan Alkohol CuSO4

Alam 1 Alam 2 Alam 3 70% 20%

Diamkan ± 15 – 20 menit
IV. Membuat Suspensi Bakteri

1. Tambahkan NaCl fis steril ke dalam

biakan padat hingga ± ½ tabung
2. Ekstraksi koloni bakteri dengan ose bulat
3. Pindahkan suspensi bakteri yang sudah
di ekstrak ke tabung steril kosong
4. Cek kekeruhan: 15%T
V. Membuat Inokulum

1. Pipet 1 ml suspensi bakteri 15% T ke

dalam 100 ml media NA yang masi
h cair
2. Homogenkan

Inokulum : Media
yang telah berisi
mikroba uji
VI. Pengujian

1. Masukan inokulum yang masih cair ke

dalam cawan petri yang sudah diberi
pola ± 15 ml
2. Homogenkan
3. Biarkan memadat
4. Tempelkan cakram yang sudah direndam
sesuai pola
5. Inkubasi pada suhu 37oC, selama 1-2x24
jam
6. Amati dan hitung efektivitas antimikrobial
VII. Pengamatan
Contoh Hasil Uji Antimikrobial
 VIII. Perhitungan
No Bahan yang diuji Diameter Zone (mm)
1 Cakram Antibiotik
2 Bahan Alam 1
3 Alkohol 70%
4 Bahan Alam 2
5 CuSO4 20%
6 Bahan Alam 3
• Suatu bahan antimikrobial efektif membunuh atau
menghambat pertumbuhan mikroorganisme dilihat dari
seberapa besar diameter Zona Bening yang terbentuk.
• Semakin besar diameter yang terbentuk, maka
semakin efektif bahan antimikrobial tersebut dalam
membunuh atau menghambat pertumbuhan mikroba
uji.
Faktor yang Memengaruhi Hasil
Uji Potensi Antibiotik

Metode yang
digunakan

Mikroba Uji
Bahan dan
yang
Alat
digunakan
TERIMA KASIH