Tujuan
• Terdifusinya senyawa antimikroba ke
dalam media padat yang telah
diinokulasi dengan bakteri.
Prinsip
• Cakram= kertas cakram yang mengandung antibiotik
diletakkan di atas media yang telah mengandung mikroba,
kemudian diinkubasi dan dibaca hasilnya berdasarkan
kemampuan penghambatan mikroba di sekitar kertas cakram.
• Sumuran dilakukan dengan membuat sumuran dengan diameter
tertentu pada media agar yang sudah ditanami bakteri.
Antibiotik diinokulasikan ke dalam sumuran tersebut dan
diinkubasikan.
• Zona jernih yang terbentuk di sekitar cakram atau sumuran
merupakan indikator penghambatan antibiotik terhadap
pertumbuhan mikroba.
Metode Dilusi
• Metode dilusi cair,= menentukan minimum inhibitory concentration
(MIC) atau kadar hambat minimum (KHM) dan minimum bacterial
concentration (MBC)atau kadar bunuh minimum (KBM).
• Cara= membuat seri pengenceran agen antimikroba pada agen
medium cair yang ditambahkan dengan agen mikroba uji.
• Larutan uji agen antimikroba pada kadar terkecil yang terlihat jernih
tanpa adanya pertumbuhan mikroba uji ditetapkan sebagai KHM.
• Larutan yang ditetapkan sebagai KHM tersebut dilanjutkan dikultur
ulang pada media cair tanpa penambahan mikroba uji ataupun agen
antimikroba, dan diinkubasi selama 18-24 jam.
• Media cair yang tetap terlihat jernih setelah diinkubasi ditetapkan
sebagai KBM.
Metode Dilusi
• 1. Alat= cawan petri, beaker glass, pipet, erlenmeyer,
tabung reaksi, Mikropipet, Pinset, Kawat ose, Pipet ukur,
Jangka sorong
• 2. Bahan= Suspensi kuman, Standar Mc. Farland,
Cakram antibiotik, Media Muller Hinton Agar (MHA),
Aquadest steril, Alkohol 70 %, Kapas usap steril
Cara Tabung
• buat suspensi antibiotika dengan kadar tertentu
• masukkan 1 ml suspensi kuman kedalam tubung reaksi yang telah berisi
larutan antibiotika
• inkubasi pada suhu 35O C selama 16 – 18 jam
Prosedur Kerja
Pembacaan Hasil
Clinical & Laboratory Standards Institute
CLSI
• Konsentrasi terendah dari antibiotik yang dapat
menghambat pertumbuhan mikroorganisme tertentu
(Vipra et al., 2013).
• Suatu antibiotic atau obat sebelum digunakan untuk
pengobatan sebaiknya dilakukan uji efektifitas terlebih
dahulu yang meliputi uji Minimum Inhibitory
Concentration (MIC)
• Pengujian secara mikrobiologi dari antibiotic terhadap
mikroorganisme (bakteri) menggunakan metode tube-
dilution technique (Pelczar et al., 1993)
MIC
Minimum Inhibitory Concentration (MIC)
TERIMAKASIH