Diagnostik Dengue dalam masa Covid-19

Farid Abdullah
DPW Patelki Yogyakarta
 dengue virus

Sejarah
• penyakit yang kompatibel secara klinis yang dicatat
dalam ensiklopedia medis Cina pada tahun 992
• Industri perkapalan global abad 18 -19 berkembang
pesat , kota-kota pelabuhan tumbuh dan menjadi lebih
urban, menciptakan kondisi ideal untuk vektor nyamuk
utama, Aedes aegypti.
• Nyamuk dan virus dengan demikian menyebar ke
wilayah geografis baru yang menyebabkan epidemi
besar.
Wabah yang menyerupai demam berdarah telah dilaporkan
sepanjang sejarah.Laporan kasus definitif pertama berasal
dari tahun 1789 dan dikaitkan dengan Benjamin Rush, yang
menciptakan istilah "demam patah tulang"
Penyakit ini dinamai Dengue pada tahun 1779.
Pergerakan penduduk selama Perang Dunia II
menyebarkan penyakit ini secara global.
Etiologi virus dan penularannya oleh nyamuk baru
ditemukan pada abad ke-20.
• banyak ditemukan di sebagian besar wilayah tropis dan
subtropis, terutama asia tenggara, Amerika tengah,
Amerika dan Karibia.
• Host alami DBD adalah manusia, agentnya adalah virus
dengue yang termasuk ke dalam famili Flaviridae dan
genus Flavivirus, terdiri dari 4
• serotipe yaitu Den-1, Den-2, Den3 dan Den-4
ditularkan ke manusia melalui gigitan nyamuk yang
terinfeksi

nyamuk Aedes aegypti dan Ae. albopictus

yang terdapat hampir di seluruh pelosok Indonesia

Gejala demam berdarah : Demam tinggi hingga 400C Sakit
kepala parah Nyeri pada retro-orbital (bagian belakang
mata) Nyeri ulu hati, otot & sendi Mual dan muntah Ruam
(muncul setelah demam hari ke-4) 2.
• Gejala dengue hemorrhagic fever Meliputi gejala DBD
klasik, ditambah : Kerusakan pada pembuluh darah dan
getah bening Perdarahan dari hidung, gusi, atau di bawah
kulit, menyebabkan memar berwarna keunguan
• Gejala dengue shock syndrome Meliputi semua gejala
demam berdarah klasik dan dengue hemorrhagic fever,
ditambah : Kebocoran di luar pembuluh darah
Perdarahan parah Shock (tekanan darah sangat rendah)
Hari Deman Berdarah Dengue ASEAN resmi diperingati
sejak 15 Juni 2010.

ASEAN Dengue Day (ADD) digagas dalam Konferensi

Tingkat Tinggi (KTT) ke-19 di Hanoi, Vietnam, pada 30
Oktober 2010.
 pemeriksaan laboratorium

identifikasi virus

• isolasi virus dari kultur sel

• tes NAAT

• tes antigen (NS1)

 pemeriksaan laboratorium

respon immunitas

• tes antibodi IgM/IgG

• PRNT
pemeriksaan laboratorium penunjang

• pemeriksaan darah lengkap, trombositopenia dan Hct

meningkat
 Isolasi virus

• syarat sampel :
– 6 hari sakit dan tanpa penundaan
• Jenis sampel :
serum fase akut
plasma
buffy coat dari pasien,
jaringan otopsi (hati, limpa, kelenjar getah bening dan
timus),
nyamuk yang dikumpulkan dari daerah terdampak.
 isolasi virus

• Untuk periode penyimpanan yang singkat (hingga 48

jam), spesimen yang akan digunakan untuk isolasi virus
dapat:
disimpan pada +4 °C hingga +8 °C.
• Untuk penyimpanan lebih lama, serum harus dipisahkan
dan dibekukan pada suhu –70 °C
 isolasi virus

• Untuk mengidentifikasi serotipe virus dengue yang

berbeda, kepala nyamuk dan sel kultur yang terinfeksi
diperiksa dengan imunoflouresensi indirek menggunakan
serotipe-spesifik antibodi monoklonal.
• Saat ini, kultur sel merupakan metode yang paling banyak
digunakan untuk isolasi virus dengue.
• Nyamuk cell line C6/36 atau AP61 adalah sel inang
pilihan untuk isolasi virus dengue.
 NAAT

• uji deteksi asam nukleat melibatkan tiga langkah dasar:

• ekstraksi asam nukleat dan pemurnian;

• amplifikasi asam nukleat;
• deteksi produk yang diperkuat.
 NAAT

• Nested RT-PCR
• One-step multiplex RT-PCR
• Real-time RT-PCR
• The NASBA (nucleic acid sequence-based amplification)
assay
• Loop Mediated Amplification (LAMP) PCR
 tes antigen

• gen NS1 adalah gp semua flavivirus untuk replikasi dan

kelangsungan hidup virus. disekresi oleh sel mamalia
tetapi tidak oleh sel serangga.
• NS1Ag muncul hari 1 setelah demam dan menurun ke
tingkat yang tidak terdeteksi oleh 5–6 hari.
• Tes ELISA menunjukkan bahwa antigen konsentrasi tinggi
dalam serum dengue
• tidak membedakan antara serotipe.
 tes antibodi

• haemagglutination-inhibition (HI)
• complement fixation (CF)
• neutralization test (NT)
• IgM capture enzyme-linked immunosorbent assay (MAC-
ELISA)
• indirect IgG ELISA
 tes antibodi IgM

• IgM dengue lebih awal dari IgG, dan biasanya dapat

dideteksi pada Hari-5 infeksi
• waktu munculnya antibodi IgM sangat bervariasi di antara
pasien.
• Titer antibodi IgM dalam infeksi primer lebih tinggi
daripada infeksi sekunder selama lebih dari 90 hari,
• sebagian besar tidak terdeteksi dalam 60 hari
 IgG-ELISA

• digunakan untuk membedakan infeksi dengue primer dan

sekunder.

• sangat tidak spesifik dan menunjukkan reaktivitas silang

luas yang sama di antara flavivirus

• tidak untuk mengidentifikasi serotipe dengue.

 IgM/IgG ratio

• Rasio IgM/IgG untuk membedakan infeksi primer dari

infeksi dengue sekunder.
• Infeksi primer jika rasio lebih besar dari 1,2
• Infeksi sekunder jika rasionya kurang dari 1,2
Haemagglutination inhibition test
Complement fixation test
CFT
Neutralization test
terima kasih