PEMERIKSAAN

MALARIA
INDRA SUWARIN KURNIAWATI, S.Si, STr.Kes
Laboratorium Mikrobiologi Klinik
Balai Besar Laboratorium
Kesehatan Surabaya
SLIDESMANIA
 GAMBARAN
UMUM
01 MALARIA
SLIDESMANIA
SLIDESMANIA
SLIDESMANIA
 STOP MALARIA
KLINIS!!
KEBIJAKAN PENGOBATAN
MALARIA DI INDONESIA
“HARUS TERKONFIRMASI
PEMERIKSAAN LABORATORIUM”
SLIDESMANIA
 PEMERIKSAAN MALARIA

METODE MIKROSKOPIS

● PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS (GOLD STANDART)

● PEWARNAAN GIEMSA 3% SELAMA 45-60 MENIT
● IDENTIFIKASI SPESIES DAN HITUNG PARASIT

METODE RDT

● PRINSIP IMUNOKROMATOGRAFI
● TARGET ANTIGEN
● MEMILIKI BEBERAPA KEKURANGAN

METODE PCR
● MEMBUTUHKAN FASILITAS DAN PERALATAN CANGGIH
SLIDESMANIA

● SENSITIF
● BIAYA LEBIH MAHAL
 PEMERIKSAAN
MIKROSKOPIS
MALARIA
SLIDESMANIA
 ADAKAH REFERENSI
PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS
MALARIA BAGI ATLM ?
Webminar BBLK Surabaya\modul mikroskopis m
alaria 2020 bagi tenaga
ATLM.pdf
SLIDESMANIA
 Jenis Sediaan Darah

SD TEBAL
Volume darah : 3 tetes (6 mikro)
Eritrosit Lisis ; Fungsi:.......?

SD TIPIS
Volume darah : 1 tetes (2 mikro)
SLIDESMANIA

Eritrosit masih utuh ; Fungsi:.......?

 JENIS SEDIAAN DARAH
Sediaan Darah Tebal
 Kepadatan parasit tinggi
 Screening POS atau NEG
 Hitung parasit
 Sulit untuk identifikasi spesies

Sediaan Darah Tipis

 Sel darah merah terfiksasi
 Identifikasi spesies
 Jika kepadatan parasit rendah,
kemungkinan false negatif
SLIDESMANIA
 Pembuatan Sediaan Darah
Jenis Spesimen : Darah segar (Kapiler atau Vena)
Lokasi Pengambilan :
 Orang dewasa : P. darah kapiler (ujung jari manis / jari tengah
tangan tidak dominan)
 Bayi : Permukaan tumit bagian samping
SLIDESMANIA
 ALAT & BAHAN
Kaca benda/slide/object glass
Yang terbaik???
Tidak dapat dipakai bila...... Lanset steril
Cara pencucian dan cara mengeringkan????

Desinfektan jari
Kapas & alkohol 70% Tissu/kasa steril
Alkohol swab

Kotak slide/slide Book slide

SLIDESMANIA
 Prosedur Pengambilan Sampel

1 2 3 4

5 6 6
SLIDESMANIA
 Pembuatan Sediaan Darah
1 Sediaan Darah Tipis
 Letakkan spreader didepan tetesan
dengan sudut 30-45°
 Tarik spreader dan tahan samapai darah
menyebar ¾ bagian
 Dorong kedepan dengan gerakan mulus
dan kontinyu

2
Sediaan Darah Tebal
 Dg gerakan melingkar sebarkan darah
sampai mengisi lingkaran besar diatas
templet (±1 - 1,2 cm)

Warning :

 Selalu Buat 2 sediaan untuk cadangan

SLIDESMANIA
 Pengeringan Sediaan Darah

 Sediaan Darah dikeringkan pada suhu

ruang dan tempat yang datar
 Hindarkan dari gangguan serangga,
debu, panas, kelembapan tinggi dan
getaran
 Sediaan dikeringkan maksimal 24 jam
SLIDESMANIA
 CONTOH HASIL PEMBUATAN SLIDE YANG BURUK
SLIDESMANIA
 PEWARNAAN SEDIAAN DARAH

• Rak pewarnaan • Sediaan Darah

• Bak pewarnaan • Buffer (pH 7.0 - 7,2)
• Gelas ukur • Giemsa stock
• Pipet tetes • Kertas Whattman no.2
• Timer untuk menguji mutu
Giemsa
• Metanol

ALAT BAHAN
SLIDESMANIA
 LANGKAH PEWARNAAN

Fiksasi SD tipis

Pembuatan Larutan Giemsa 3%

Pewarnaan 45-60 menit

Pembilasan
SLIDESMANIA
 1. Fiksasi Sediaan Darah Tipis
1. Posisi sediaan darah tipis di
bawah
2. Alirkan methanol pada hapusan
darah
3. Jangan mengenai sediaan
darah tebal
4. Biarkan kering
SLIDESMANIA
 2. Pembuatan Larutan Giemsa 3%

1. Hitung kebutuhan Giemsa 3% :

(±10 ml untuk 3 slide)
2. Buat larutan dengan gelas ukur
3. Untuk 10 ml Giemsa 3% : 0,3 ml
Giemsa Stock + 9,7 ml Lar.
Pengencer
4. Larutan Giemsa harus selalu fresh
(maksimal disimpan 1 jam)
SLIDESMANIA
 Pengenceran Reagen Giemsa
SLIDESMANIA
 3. Pewarnaan Sediaan darah

1. Pastikan posisi rak pewarnaan datar (tidak miring)

2. Letakkan sediaan darah di atas rak pewarnaan
3. Genangi tiap slide dengan Giemsa 3% yang telah disiapkan
sebelumnya
SLIDESMANIA

4. Warnai selama 45-60 menit

 4. PEMBILASAN

1. Metode pencucian :
- Botol semprot
- Bak pencucian
2. Hindari membuang cat yang menggenangi
secara langsung ; Golden schum akan
menempel pada permukaan preparat ;
banyak artefak
3. Aliri permukaan sediaan dengan air perlahan
hingga cat yang menggenangi habis atau
celupkan langsung preparat ke dalam bak
pencucian, angkat perlahan (lakukan 2-3 x)
4. Angkat dan keringkan SD.
5. Setelah kering, SD siap diperiksa
SLIDESMANIA
 CONTOH
HASIL PEWARNAAN SLIDE
SLIDESMANIA
SLIDESMANIA
 PEMANTAPAN
MUTU
PEMERIKSAAN
MIKROSKOPIS
SLIDESMANIA
SLIDESMANIA
 CONTOH KEGIATAN PEMENTAPAN MUTU INTERNAL
SLIDESMANIA
 JENIS KEGIATAN
PEMANTAPAN MUTU EKSTERNAL

UJI SILANG PANEL TES PNPME

Kegiatan pemeriksaan ulang
slide sediaan malaria oleh
laboratorium rujukan uji silang
di atasnya untuk menilai
ketepatan pemeriksaan dan
kinerja petugas mikroskopis
malaria
Program Nasional pemantapan
Kegiatan penilaian kinerja Mutu Eksternal : Kegiatan yang
laboratorium yang dilakukan secara mandiri oleh
dilakukan oleh laboratorium pemeriksa
laboratorium rujukan uji malaria dengan cara mengikuti
program yang diselenggarakan
silang di atasnya dengan
oleh : BBLK Palembang, BBLK
cara membandingkan nilai Jakarta, 29
kemampuan mikroskopis
 PRINSIP UJI SILANG
DILAKUKAN SECARA BERJENJANG DAN BLINDED

CC KAB/KOTA CC PROVINSI
FASYANKES

 Petugas menyiapkan SD
yang akan diuji silang dan  Memeriksa ulang SD secara
hasil pemeriksaan. Jika ada beda baca
blinded (tidak mengetahui hasil  Memeriksa SD
 SD malaria dibawa oleh antara Fasyankes VS
pemeriksaan dari fasyankes). CC Kab/Kota, sediaan Menuliskan dalam
pengelola program malaria  Menuliskan dalam form uji form uji silang
(form diisi oleh pengelola dikirim ke CC
silang  Menyerahkan pada
program). provinsi untuk
 Menyerahkan pada pengelola konfirmasi pengelola program.
 Fasyankes akan menerima
program.
feedback setelah SD
diperiksa oleh CC kab/kota 30
 Pemilihan Sediaan (per fasyankes)
Pemilihan sediaan darah untuk uji silang dilakukan oleh pengelola program.

Daerah Pre Daerah

Daerah
eliminasi dan Pemberantasa
Pemeliharaan eliminasi n/ endemik

SD < 20/bln SD 20-200/bln > 200/bl

5% negatif dan 100 % positif
5% negatif dan
atau
SEMUA SEDIAAN 100% positif metode LQAS* (Jika setelah perhitungan
LQAS didapat jumlah slide yg tll sedikit, bisa
ditambahkan menjadi 25-30 slide per bulan)

LQAS (Lot Quality Assurance System) The Power of PowerPoint | thepopp.com 31

CONTOH PENGISIAN FORMULIR OLEH PENGELOLA PROGRAM

29
PEMBACAAN SEDIAAN OLEH CROSSCHECKER

Kualitas Pembuatan Sediaan Darah

 Kualitas Pewarnaan Sediaan darah
 Pemeriksaan mikroskoskopis
(Positif/Negatif dan Identifikasi spesies)
 Add an image
CONTOH PENGISIAN FORMULIR OLEH CC

PENGELOLA
PROGRAM
MENYALIN PADA
LEMBAR BARU,
DAN
MENGOSONGKAN
JAWABAN UPK
(BLINDED)

30
ANALISA HASIL OLEH PENGELOLA PROGRAM

Sensitifitas : Spesifisitas : Akurasi Spesies :

Ketepatan Ketepatan identifikasi
pembacaan pembacaan Spesies
Slide Positif Slide Negatif

Kinerja Sensitifitas Spesifisitas Akurasi Spesies

Laboratorium

Baik > 70% > 70% > 70%

Cukup 60 – 69 % 60 – 69 % 60 – 69 %

Kurang < 60% < 60% < 60%

SENSITIFITAS (KEPEKAAN)
KEMAMPUAN MENDETEKSI SEDIAAN DARAH
POSITIF NILAI RUJUKAN

POSITIF NEGATIF
POSITIF POSITIF BENAR POSITIF PALSU
JAWABAN (PB) (PP)
“A” “B”
NEGATIF NEGATIF PALSU NEGATIF BENAR
(NP) (NB)
“C” “D”
TOTAL
A+C B+D
SENSITIFITAS = PB X 100% atau A X 100%
PB + NP A+C
SPESIFISITAS (KECERMATAN)

KEMAMPUAN MENDETEKSI SEDIAAN DARAH NEGATIF

NILAI RUJUKAN

POSITIF NEGATIF
POSITIF POSITIF BENAR POSITIF PALSU
JAWABAN (PB) (PP)
“A” “B”
NEGATIF NEGATIF PALSU NEGATIF BENAR
(NP) (NB)
“C” “D”
TOTAL
A+C B+D
SPESIFISITAS = NB X 100% atau D X 100%
NB + PP B+D
 HASIL UJI SILANG

Hasil uji silang dari cross-checker disampaikan kepada

penanggung jawab program/pemantapan mutu 
dianalisis sensitivitas, spesifitas dan akurasi
spesies  dilaporkan ke Dinas Kesehatan setempat

Dinas Kesehatan setempat menyampaikan hasil uji

silang kepada laboratorium yang diuji dan
laboratorium rujukan uji silang melalui mekanisme
umpan balik sebagai bahan evaluasi.
38
UMPAN BALIK (FEEDBACK)
KEPADA PENGIRIM (fasyankes)

The Power of PowerPoint | thepopp.com 39

 CONTOH KEGIATAN PEMENTAPAN MUTU
EKSTERNAL
SLIDESMANIA

https://simultan.bblksurabaya.id/index
 CONTOH KEGIATAN PEMENTAPAN MUTU
EKSTERNAL
SLIDESMANIA
SLIDESMANIA
 BBLK SURABAYA MEMBERIKAN
FASILITAS BAGI BAPAK IBUK YANG
INGIN MAGANG PEMERIKSAAN
MALARIA DAN PEMERIKSAAN
SLIDESMANIA

MIKROBIOLOGI LAINYA
SLIDESMANIA