Kurva Kalibrasi

Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
Kalibrasi
Adalah suatu proses menghubungkan sinyal analitik
yang diukur (respon alat) dengan konsentrasi analit.
Metode Kalibrasi:
A. Kurva Kalibrasi (Kurva Baku)
B. Metode Adisi Standard
C. Metode Standard Internal
Arie BS
A. KURVA KALIBRASI
Sejumlah larutan baku dengan dengan variasi konsentrasi
disiapkan, kemudian diukur menggunakan instrumen, dan respon
instrumen dicatat.
Larutan Baku Larutan analit yg telah diketahui konsentrasinya.
Larutan baku dibuat agar dalam pengukuran
menggunakan instrumen tidak melampaui batas
linearitas (LOL = Limit of Linearity) dari
instrumen.
Kurva Kalibrasi Plot konsentrasi baku (X) versus respon
instrumen (Y).
Hubungan antara konsentrasi baku dan respon
instrumen adalah linier.
Arie BS
A. KURVA KALIBRASI
Konsentrasi Respon Instrumen (RI) RI terkoreksi (S
i
S
bl
)
0,00 0.013 0.000
6.01 0.101 0.088
31.80 0.811 0.798
63.50 1.498 1.485
88.90 2.094 2.081
Sampel 0.924 0.875
Kurva Kalibrasi
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
0 20 40 60 80 100
Konsentrasi
R
I

t
e
r
k
o
r
e
k
s
i

1. Penyiapan Kurva Kalibrasi
Arie BS
A. KURVA KALIBRASI
x
i
y
i
x
i
2
y
i
2
x
i
y
i

Concentration IR Corr. IR
0.000 0.013 0.000 0.000000 0.000000 0.000000
6.010 0.101 0.088 36.120100 0.007744 0.528880
31.800 0.811 0.798 1011.240000 0.636804 25.376400
63.500 1.498 1.485 4032.250000 2.205225 94.297500
88.900 2.094 2.081 7903.210000 4.330561 185.000900
E =
190.210 4.452 12982.820100 7.180334 305.203680
Mean 38.042 0.890

Gunakan metode regresi linier untuk menghitung persamaan fitting y = mx + b
( )
( )
( )
( )
( )( )

intercept) - (Y (Slope)

yy xx
xy
xx xy
i i
i i i i xy
i
i i yy
i
i i xx
S S
S
r
m x - y b S S m
N
y x
y x y y x x S
N
y
y y y S
N
x
x x x S
=
= =

=
2
2
2
2
2
2
( )
( )
( )
( )
( )( )


yy xx
xy
xx xy
i i
i i i i xy
i
i i yy
i
i i xx
S S
S
r
m x - y b S S m
N
y x
y x y y x x S
N
y
y y y S
N
x
x x x S
=
= =

= =
= =
= =
2
2
2
2
2
2
( )
( )
( )
( )
( )( )


yy xx
xy
xx xy
i i
i i i i xy
i
i i yy
i
i i xx
S S
S
r
m x - y b S S m
N
y x
y x y y x x S
N
y
y y y S
N
x
x x x S
=
= =

= =
= =
= =
2
2
2
2
2
2
A. KURVA KALIBRASI
Arie BS
A. KURVA KALIBRASI
Gunakan persamaan fitting y = mx + b untuk menghitung
konsentrasi sampel
2. Interpretasi Kurva Kalibrasi
m = 0.0236 & b = -0.00881
y = 0.0236x 0.00881

Sehingga:
x = (y b)/m
x = (y + 0.00881)/0.0236

dan:
x (konsentrasi sampel) = (0.875+0.00881)/0.0236
= 37.4

Arie BS
B. METODE ADISI STANDARD
Digunakan untuk analit dalam matriks yang kompleks, yg
mengakibatkan terjadinya interferensi dalam respon instrumen (RI).
Contoh: darah, sedimen, serum, dll.
Sering disebut juga metode SPIKING.
Metode:
1. Siapkan beberapa aliquot identik, V
x
, dari sampel.
2. Tambahkan sejumlah volume tertentu secara bervariasi, V
s
,
larutan baku yang telah diketahui konsentrasinya, c
s
, pada tiap
aliquot.
3. Encerkan (add-kan) masing
2
larutan hingga volume tertentu, V
t

4. Ukurlah dengan instrumen untuk mendapatkan respon
instrumen, S
5. Hitung konsentrasi sampel, c
x
, dengan persamaan berikut:
Arie BS
Persamaan Adisi Standard
t
x x
t
s s
V
c kV
V
c kV
S + =
S = sinyal atau respon instrumen
k = konstanta proporsionalitas
V
s
= volume standard yg ditambahkan
c
s
= konsentrasi standard
V
x
= volume aliquot sampel
c
x
= konsentrasi sample
V
t
= volume total pengenceran
Arie BS
Plot respon instrumen (S) vs volume standard (V
s
)
b mV S
s
+ =
V
s
R
e
s
p
o
n
s

I
n
s
t
r
u
m
e
n

(

S

)

m =
A
y/
A
x
b = y-intercept
(V s ) 0
Arie BS
Hitung konsentrasi sampel.
Kombinasikan:
b mV S
s
+ = dan
t
x x
t
s s
V
c kV
V
c kV
S + =
x
s
x
mV
bc
c =
Arie BS
Contoh: Metode Adisi Standard
Arsenik in suatu sampel biologi ditetapkan dengan metode adisi standard.
10 mL aliquot sample dipipet ke dalam 5 buah labu takar 100 mL. Variasi
volume dari standard 22.1 ppm ditambahkan ke dalam 4 labu takar, masing
2

diencerkan hingga batas. Absorbansi masing
2
larutan ditentukan.
Sample (mL) Standard (mL) Absorbance
10.0 0.00 0.156
10.0 5.00 0.195
10.0 10.00 0.239
10.0 15.00 0.276
10.0 20.00 0.320
Hitung konsentrasi sampel!
Arie BS
Adisi Standard Arsenik
0.00
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0.35
0.40
0.45
0 5 10 15 20
Volume Standard (V
s
)
A
b
s
o
r
b
a
n
c
e

m = 0.00818
b = 0.1554
s m
= 0.000119
s b
= 0.001463
x
s
x
V m
c b
c
.
.
=
) 10 )( 00818 . 0 (
) 1 . 22 )( 1554 . 0 (
=
x
c
ppm 98 . 41 =
x
c
Arie BS
Penggunaan Adisi Standard untuk menghitung konsentrasi sampel
1) Buat 2 larutan yg mengandung aliquot sampel yg sama, tambahkan
standar pada salah satu larutan. Encerkan hingga batas (100 mL)
( )
x
s s
x
V S S
V c S
c
1 2
1
=
dimana: S
1
= respon instrumen sampel
S
2
= respon instrumen sampel + spike

2) Ukurlah respon instrumennya (absorbansi) pada kedua larutan.
3) Hitung konsentrasi sampel dengan persamaan berikut:
Arie BS
Contoh: Standard Addition 2 titik
Sebanyak 25.0 mL aliquot larutan quinine diencerkan hingga
50.0 mL dan diukur absorbansinya, mempunyai absorbansi
0.416 pada 348 nm diukur dalam kuvet setebal 1.00 cm.
Sebanyak 25 mL aliquot kedua dicampur dengan 10.0 mL
larutan yg mengandung 23.4 ppm quinine. Setelah diencerkan
hingga50.0 mL, larutan ini memiliki absorbansi 0.610 (kuvet
1.00 cm pada panjang gelombang yg sama). Hitung
konsentrasi (ppm) quinine dalam sampel.

S
1
= 0.416
S
2
= 0.610
V
s
= 10 mL
c
s
= 23.4 ppm
V
x
= 25.0 mL

ppm 07 . 20
) 0 . 25 )( 416 . 0 610 . 0 (
) 0 . 10 )( 4 . 23 )( 416 . 0 (
=
=
x
c
( )
x
s s
x
V S S
V c S
c
1 2
1
=
Arie BS
C. METODE STANDARD INTERNAL
Umumnya digunakan dalam GC dan HPLC
Suatu senyawa reference/pembanding (standard internal) dengan
volume/massa yg konstan ditambahkan ke dalam larutan standar
dan sampel.
Rasio analit terhadap standard internal digunakan sebagai sumbu
Y dalam plot kurva kalibrasi dan untuk menetapkan sampel.
Arie BS
Hexane Calibration Curve
y = 31641x + 142659
R
2
= 0.8171
0.00E+00
5.00E+05
1.00E+06
1.50E+06
2.00E+06
2.50E+06
0 10 20 30 40 50 60
Conc. (ppt hexane)
P
e
a
k

A
r
e
a
Arie BS
Hexane/Octane Calibration Curve
y = 0.0359x + 0.0772
R
2
= 0.9998
0
0.5
1
1.5
2
2.5
0 10 20 30 40 50 60
Conc. (ppt hexane)
H
e
a
x
n
e
/
O
c
t
a
n
e

P
e
a
k

A
r
e
a

Kurva Kalibrasi

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Kurva Kalibrasi

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Analisis Instrumen I

Anda mungkin juga menyukai