ENZIM DALAM REKAYASA GENETIKA

I. DNA POLIMERASE
II. ENDONUKLEASE RESTRIKSI III. ENZIM LIGASE

DNA POLIMERASE
Pada prokariot : DNA polimerase I DNA polimerase II DNA polimerase III DNA polimerase I dan III Menambahkan nukleotida ke dalam RNA atau DNA primer dalam arah 5 3 Memiliki aktivitas eksonuklease 5 3 maupun 3 5

DNA POLIMERASE II
Menambahkan nukleotida ke dalam RNA atau DNAprimer dengan arah 5 3 Memiliki aktivitas eksonuklease 5 3

ENZIM KLENOW DNA Polimerase I yang telah kehilangan aktivitas 5 3 Enzim ini banyak digunakan dalam rekayasa genetika

PADA EUKARIOT
DNA Polimerase hanya mempolimerisasi cetakan pada RNA primer

DNA polimerase dan polimeraisasi nukleotida pada ujung rantai DNA

Ketiga enzim DNA polimerase , , dan tidak memiliki aktivitas eksonuklease 5 3 maupun 3 5
OH 5-T-A-C-G polimerisasi 3-A-T-G-C-A-T-G-C PPi OH 5-T-A-C-G-T 3-A-T-G-C-A-T-G-C

ENDONUKLEASE RESTRIKSI

DNA LIGASE
Dalam rekayasa genetika, tahap akhir adalah menyambung vektor dengan fragmen DNA. Proses ini disebut LIGASI

Enzim yang mengkatalisis reaksi ini disebut : ENZIM LIGASE

Gen yang akan diklon DNA ligase gen

vektor

Molekul DNA rekombinan

Aktivitas enzim ligase : Membentuk ikatan fosfodiester antara gugus 5-P dengan 3-OH Memerlukan ATP atau NAD+ sebagai sumber energi eksternal