Replikasi DNA & PCR

Aprilia Indra K, S. Pd., M.Biotech

kartika.biotechugm@gmail.com
Capaian pembelajaran MK
Mahasiswa mampu menyebutkan dan menjelaskan
komponen dan mekanisme replikasi DNA
Mahasiswa mampu mengaitkan proses replikasi DNA
dengan prinsip PCR.
DOGMA SENTRAL BIOLOGI

Transkripsi Translasi
DNA RNA Protein
Transkripsi Balik
Replikasi
KROMOSOM – DNA
TES DNA
TES DNA (PATERNITY)

1 2 3 4

1. Ibu
2. Anak
3. Pengusaha kaya
4. Tukang sapu
Jadi, bapak anak tersebut
adalah tukang sapu
PROFIL DNA
dalam kasus

1. PATERNITY
2. CRIME

1 2
Komponen penting dalam Replikasi
DNA cetakan : molekul DNA atau RNA yang akan
direplikasi
Molekul Deoksi Ribonukleotida : dATP, dTTP, dCTP,
Dgtp
DNA terdiri dari 3 komponen, yaitu ……
Enzim DNA polimerase , enzim utama yang mengkatalisis
proses polimerisasi nukleotida menjadi untaian DNA
Pada bakteri DNA polimerase I, II, dan III
Enzim primase enzim yang mengkatalisis proses sintesis
primer untuk memulai replikasi DNA. Pada bakteri disebut
dengan enzim primosom
Continue ……
Enzim pembuka ikatan untaian DNA induk, yaitu
enzim helikase, dan enzim lain yang membantu proses
tersebut, enzim girase
Molekul protein yang menstabilkan untaian DNA yang
sudah terbuka, yaitu protein SSB (single strand
binding protein)
Enzim DNA ligase, enzim yang berfungsi untuk
menyambung fragmen DNA.
Prokariot dan Eukariot
prokariot
 DNA polimerase 1 : hanya digunakan untuk mengisi takik antara
fragmen fragmen okazaki selain untuk proses reparasi DNA yang rusak
 DNA polimerase II : terlibat dalam proses reparasi DNA
 DNA polimerase III : proses polimerisasi DNA
Eukariot
DNA polimerase α : Mengawali replikasi kedua untaian
DNA polimerase β : reparasi DNA
DNA polimeraseϒ : replikasi DNA mitokondria
DNA polimerase delta : pemanjangan kedua untaian
DNA polimerase epsilon : reparasi DNA
Enzim helikase
Enzim helikase : untuk emisahkan untaian DNA
DNA girase: Enzim topoisomerase, enzim yang dapat
mengubah topologi DNA , dapat memisahkan ikatan
hidrogen pada salah satu atau kedua untai DNA
pRotein SSB : menjaga agar bagian DNA yang sudah
terpisah tidak berikatan lagi seingga bisa digunakan
sebagai cetakan
Tahap Replikasi DNA
1. Denaturasi (pemisahan) untaian DNA induk
2. peng-awal-an (initiation) sintesis DNA
3. Pemanjangan untaian DNA
4. Ligase fragmen fragmen DNA
5. peng-akhir-an (terminasi) sintesis DNA
Denaturasi akan membentuk garpu replikasi : enzim
DNA helikase
Terbentuk ORI : leading strand (continue)
Fragmen okazaki, Enzim ligase, lagging strand,
discontinue
Tahap inisiasi diawali dengan 5’-P - 3’-OH