06/03/2013

VISUALISASI SEL

BIOSEL 2013

Visualisasi Sel
Sel itu kecil dan kompleks Memahami organisasi struktural sel

merupakan syarat penting untuk memahami bagaimana sel itu berfungsi. Perlu alat bantu mikroskop. Mikroskop optik akan menjadi titik awal kita karena biologi sel dimulai dengan mikroskop cahaya.
BIOSEL 2013

06/03/2013

Pengembangan metode mikroskop makin

maju pesat Dengan komponen sel penandaan khusus, dengan penanda fluoresen, seperti protein fluorescent hijau (GFP), sehingga kita dapat melihat gerakan sel dan interaksi dalam sel hidup dan organisme.

BIOSEL 2013

Visualisasi sel kulit ibu jari

BIOSEL 2013

06/03/2013

MIKROSKOP
Mikroskop adalah sebuah alat untuk

melihat objek yang terlalu kecil untuk dilihat dengan mata telanjang. Kata mikroskopik berarti sangat kecil, tidak mudah dilihat dengan mata.

BIOSEL 2013

Macam-macam mikroskop

dark-field microscope fluorescent microscope phase-contrast microscope

Mikroskop cahaya bright-field microscope

BIOSEL 2013

06/03/2013

Mikroskop elektron

Transmission Electron Microscope (TEM), untuk mengamati detail struktur internal sel Scanning Electron Microscope (SEM), untuk studi detil arsitektur permukaan sel

BIOSEL 2013

BIOSEL 2013

06/03/2013

Perbedaan mikroskop cahaya dan mikroskop elektron

BIOSEL 2013

Mikroskop Cahaya
- memiliki perbesaran maks 1000 kali - memiliki tiga dimensi lensa yaitu lensa objektif, lensa okuler dan lensa kondensor - menggunakan energi jauh lebih sedikit dan radiasi elektromagnetik yang lebih panjang dibandingkan mikroskop elektron - Sumber cahaya matahari atau sinar lain

BIOSEL 2013

06/03/2013

Sistem lensa pada mikroskop memiliki daya

resolusi, atau mampu menunjukkan detail obyek yang berdekatan satu sama lain Mikroskop cahaya memiliki kemampuan resolusi sampai 0,1 m. Artinya mampu membedakan 2 titik yang berjarak 0,1 m. Daya resolusi mikroskop tergantung pada numerical aperture (NA), panjang gelombang ( )penyinaran yang digunakan dan komponen fisik lensa mikroskop (yang terbuat dari gelas pada mikroskop cahaya),
BIOSEL 2013

Batasan kemampuan resolusi (D) dapat

dihitung dengan rumus:

D = 0,61 NA Jika NA meningkat karena pengaruh sudut

masuknya cahaya oleh lensa gelas, maka kemampuan lensa mengumpulkan sinar, juga meningkat
BIOSEL 2013

06/03/2013

panjang gelombang pendek (misalnya sinar

biru ungu) akan memberikan resolusi yang lebih baik daripada sinar dengan panjang gelombang lebih panjang (misalnya sinar tampak merah)
elektron memiliki panjang gelombang yang

jauh lebih pendek dibandingkan dengan foton, sehingga tidak heran kalau kemampuan resolusi mikroskop elektron ribuan kali jauh lebih tinggi dibanding dengan mikroskop cahaya
BIOSEL 2013

A Light microscope. Diagram showing the light path in a compound microscope. Light is focused on the specimen by lenses in the condenser. A combination of objective lenses and eyepiece lences are arranged to focus an image of the illuminated specimen in the eye. B. A modern research light microscope

BIOSEL 2013

06/03/2013

Mikroskop Elektron
mampu untuk melakukan pembesaran

objek sampai 2 juta kali, memp. bentuk yang lebih besar daripada mikroskop cahaya menggunakan elektro statik dan elektro magnetik untuk mengontrol pencahayaan dan tampilan gambar.

BIOSEL 2013

Mikroskop Elektron
memiliki kemampuan pembesaran objek serta resolusi yang jauh lebih bagus daripada mikroskop cahaya menggunakan jauh lebih banyak energi dan radiasi elektromagnetik yang lebih pendek dibandingkan mikroskop cahaya

BIOSEL 2013

06/03/2013

Resolving power. Sizes of cells and their component are drawn on logaritmic scale. Indicating the range of object that can be readily resolved by the naked eye and in the light and electron microscope.
BIOSEL 2013

The principal features of a light microscope and transmission electron microscope

BIOSEL 2013

06/03/2013

Living cells
Sel

hidup dapat terlihat jelas dengan menggunakan Phase-contrast Microscope atau Differential-Interference-Contrast Microscope.

BIOSEL 2013

Four types of light microscopy. Four images are shown of the same fibroblast cell in culture. All images can be obtained with most modern microscopes by interchanging optical components. (A) Bright-field microscopy. (B) Phase-contrast microscopy. (C) Nomarski differential-Interference-contrast microscopy. (D) Dark-field microscopy.
BIOSEL 2013

10

06/03/2013

Cellular Staining?
Mikroskop cahaya tidak dapat menghasilkan

kontras yang baik pada spesimen segar, oleh karena itu untuk memperoleh kontras yang lebih baik digunakan pewarna jaringan spesimen Pewarnaan sel adalah teknik yang dapat digunakan untuk lebih memvisualisasikan sel dan komponen sel di bawah mikroskop
BIOSEL 2013

Sel juga dapat diwarnai untuk mempelajari

proses metabolisme atau untuk membedakan antara sel hidup dan mati dalam sampel Teknik pewarnaan sel dan persiapan tergantung pada jenis pewarna dan analisis yang digunakan.

BIOSEL 2013

11

06/03/2013

Tingkatan resolusi tergantung tidak hanya

pada sistem optik, tapi juga faktor lain seperti ketebalan spesimen Untuk meningkatkan resolusi atau ketajaman obyek yang diamati seringkali mikroskop juga dilengkapi dengan filter. Untuk specimen tebal, maka harus dilakukan pengirisan jaringan/organ. Specimen disiapkan dengan Metode Embedding (penyelubungan)
BIOSEL 2013

Making tissue sections. This illustration shows how an embedded tissue is sectioned with a microtome in preparation for examination in the light microscope
BIOSEL 2013

12

06/03/2013

Staining of cellular components

BIOSEL 2013

Multiple-fluorescent-probe microscopy
BIOSEL 2013

13

06/03/2013

Immunofluorescence. (A) transmission electron microscope; (B) The same area stained with fluorescent antobodies against tubulin
BIOSEL 2013

A three-dimensional reconstruction from serial sections of mitochondrial compartment of a live yeast cell.
BIOSEL 2013

14

06/03/2013

The scanning electron microscope (SEM)

BIOSEL 2013

Selamat Belajar Terima Kasih

BIOSEL 2013

15