Jurnal Bioteknologi
Embriogenesis Pertanian,
somatik langsungVol. 10, tanaman
pada No. 1, 2005, pp. 1-6
cendana
Embriogenesis somatik langsung pada tanaman cendana
Direct somatic embryogenesis on sandalwood
Deden Sukmadjaja
Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian
Jalan Tentara Pelajar No. 3A, Bogor 16111, Indonesia
ABSTRACT
Sandalwood (Santalum album L.) is a commercially important
commodity of Indonesia, particularly in West and East Nusa
Tenggara. However, the population has significantly de-
creased and the planting materials are difficult to be provided
through conventional methods. A study was conducted to
propagate sandalwood by using in vitro technology through
somatic embryogenesis. Primary somatic embryos were formed
on immature or mature zygotic embryos planted on MS basal
medium containing benzyl-aminopurine or thidiazuron. Pri-
mary somatic embryos then formed secondary embryos when
they were transferred to MS medium with or without indole-
acetic acid. Transferring somatic embryos onto MS medium
containing gibberrelic acid could not convert the embryos into
plantlets, but they regenerated forming shoot multiplication.
Culturing shoots from somatic embryo on MS induction
medium enriched with indole butyric acid produced a few
number of roots.
[Keywords: Santalum album, somatic embryogenesis, primary
somatic embryo, secondary somatic embryo]
ABSTRAK
Cendana (Santalum album L.) merupakan salah satu tanaman
yang bernilai ekonomi tinggi bagi Indonesia khususnya di
Nusa Tenggara Barat dan Timur. Namun, populasi tanaman
tersebut cenderung menurun dan penyediaan bahan tanaman
secara konvensional sulit dilakukan. Penelitian ini bertujuan
untuk memperbanyak tanaman cendana secara in vitro melalui
embriogenesis somatik secara langsung. Embrio somatik
primer diperoleh dengan cara menanam eksplan embrio
zigotik muda dan dewasa pada media dasar MS yang me-
ngandung bensil-aminopurin atau thidiazuron. Pada tahap
selanjutnya, embrio somatik primer akan membentuk embrio
somatik sekunder setelah disubkultur pada media dasar MS
dengan atau tanpa penambahan asam indolasetat. Pemindahan
embrio somatik pada media pendewasaan atau perkecambahan
MS yang mengandung asam giberelat tidak dapat mendorong
embrio menjadi plantlet, tetapi mengarah pada proses
regenerasi membentuk multiplikasi tunas. Induksi akar pada
tunas-tunas yang berasal dari embrio somatik pada media
dasar MS yang mengandung asam indol butirat hanya meng-
hasilkan akar dalam jumlah yang sedikit.
[Kata kunci: Santalum album, embriogenesis somatik, embrio
somatik primer, embrio somatik sekunder]
1
PENDAHULUAN
Cendana (Santalum album L.) merupakan salah satu
komoditas yang bernilai ekonomi tinggi. Tanaman ini
banyak terdapat di Nusa Tenggara Timur, namun po-
pulasinya cenderung menurun akibat tidak seimbang-
nya antara eksploitasi dan upaya pelestariannya. Di
Pulau Sumba, misalnya, tanaman cendana telah punah,
sedangkan di Pulau Timor cendana akan mengalami
nasib serupa apabila tidak ada upaya penyelamatan-
nya. Eksploitasi kayu cendana terutama disebabkan
oleh permintaan pasar yang tinggi, baik di dalam
maupun luar negeri (Musakabe 2000). Oleh karena itu
perlu segera dilakukan upaya pengembangannya.
Salah satu faktor yang menentukan keberhasilan
pengembangan tanaman cendana adalah ketersediaan
bibit yang bermutu. Penyediaan bibit melalui per-
banyakan secara konvensional kurang memadai untuk
suatu tanaman yang akan dikembangkan secara luas.
Teknologi yang biasa digunakan dan memberikan
harapan dalam penyediaan bibit dalam jumlah besar
dan waktu singkat ialah kultur in vitro. Aplikasi bio-
teknologi dalam bidang pertanian bukan hanya untuk
perbanyakan, tetapi juga untuk perbaikan karakter
tanaman.
Perbanyakan tanaman melalui kultur jaringan dapat
dilakukan melalui tiga cara, yaitu pembentukan tunas
adventif, proliferasi tunas lateral, dan embriogenesis
somatik. Penelitian perbanyakan tanaman cendana
melalui proliferasi tunas telah dilakukan oleh Kamil
dan Umboh (1990). Di masa mendatang, perbanyakan
klonal melalui embriogenesis somatik untuk produksi
benih sintetis tanaman kehutanan akan lebih banyak
mendapat perhatian dibandingkan cara lainnya (Attree
et al. 1990).
Embriogenesis somatik merupakan suatu proses di
mana sel-sel somatik (baik haploid maupun diploid)
berkembang membentuk tumbuhan baru melalui
tahapan perkembangan embrio yang spesifik tanpa
melalui fusi gamet (Williams dan Maheswara 1986).
Regenerasi melalui embriogenesis somatik memberikan
2 Deden Sukmadjaja
banyak keuntungan, antara lain: (1) waktu perbanyak-
an lebih cepat; (2) pencapaian hasil dalam mendukung
program perbaikan tanaman lebih cepat; dan (3) jumlah
bibit yang dihasilkan tidak terbatas jumlahnya
(Mariska 1996). Di samping itu, dengan strukturnya
yang bipolar dan kondisi fisiologis yang menyerupai
embrio zigotik maka perbanyakan melalui pembentuk-
an embrio somatik lebih menguntungkan daripada
pembentukan tunas adventif yang unipolar.
Embriogenesis somatik pada tanaman kehutanan
mempunyai beberapa tahapan perkembangan yang
spesifik, seperti induksi kalus embriogenik atau em-
brio somatik (pembentukan langsung), pemeliharaan,
pendewasaan, perkecambahan, dan aklimatisasi (Lelu
et al. 1993). Pembentukan embrio somatik secara
langsung lebih disukai karena dapat menekan masalah
sulitnya pembentukan benih somatik pada tahap per-
kecambahan (Rai dan McComb 2002).
Keberhasilan regenerasi melalui embriogenesis
somatik dipengaruhi oleh berbagai faktor, antara lain
formulasi media yang berbeda pada setiap tahap per-
kembangan embrio somatik serta jenis eksplan yang
digunakan. Pada tahap pembentukan struktur globular
dan hati sering digunakan zat pengatur tumbuh
sitokinin seperti benzyladenin (BA) atau yang mem-
punyai peran fisiologis yang sama yaitu thidiazuron
(Husni et al. 1997) atau 2,4-D, dan NAA apabila
embrio somatik melalui fase kalus (Hutami et al. 2002).
Untuk tahap pendewasaan, konsentrasi sitokinin
diturunkan dan untuk tahap perkecambahan sering
ditambahkan GA3 (Mariska et al. 2001a; 2001b; Rai
dan McComb 2002). Sebagai eksplan umumnya digu-
nakan jaringan atau organ yang bersifat embriogenik
seperti embrio zigotik, kotiledon, mata tunas, dan
hipo/epikotil.
Di India, penelitian perbanyakan klonal pada tanam-
an cendana dikembangkan dengan menggunakan
bioreaktor dengan cara memanipulasi berbagai faktor
yang mempengaruhi proses produksi embrio somatik
pada setiap tahapannya, seperti komposisi sukrosa,
nitrogen, asam absisic (Das et al. 2001) atau ion
kalsium dalam media (Anil dan Rao 2000). Dengan
demikian, perbanyakan tanaman melalui embriogene-
sis somatik memerlukan beberapa tahapan dengan
formulasi media yang berbeda, bergantung pada
tahap perkembangan embrio somatik. Penelitian ini
bertujuan mempelajari sistem regenerasi dan per-
banyakan secara in vitro tanaman cendana melalui
pembentukan embrio somatik secara langsung.
BAHAN DAN METODE
Penelitian dilaksanakan di laboratorium kultur jaring-
an Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bio-
teknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian pada
bulan Februari sampai Desember 2003. Bahan tanaman
yang digunakan adalah embrio dari buah cendana
muda dan dewasa yang diperoleh dari Nusa Tenggara
Barat dan Yogyakarta.
Bagian luar kulit buah (pericarp) dibuka/dipecah,
kemudian benih dikeluarkan dan dikumpulkan. Benih
dikeringanginkan di atas cawan petri di dalam laminar
selama 5-10 menit. Embrio yang berada di bagian dalam
benih dikeluarkan dengan menggunakan pinset steril,
kemudian ditanam dalam media perlakuan yang sudah
disiapkan di dalam botol kultur.
Media yang digunakan sebagai perlakuan disesuai-
kan dengan tahapan percobaan yaitu:
• Tahap induksi embrio somatik: MS + BA 0,5 mg/l;
MS + BA 1 mg/l; MS + BA 2 mg/l; MS + thidiazuron
0,5 mg/l; MS + thidiazuron 1 mg/l dan MS +
thidiazuron 2 mg/l.
• Tahap pembentukan embrio somatik sekunder: MS
+ IAA 0,5 mg/l dan MS + IAA 1 mg/l.
• Tahap perkecambahan/pembentukan plantlet: MS1/2
tanpa GA 3; MS1/2 + GA 3 0,5 mg/l; MS1/2 + GA3
1 mg/l; MS tanpa GA3; MS + GA3 0,5 mg/l dan MS +
GA3 1 mg/l.
• Tahap perakaran: MS + IBA 5 mg/l dan MS + IBA
10 mg/l.
Medium dasar MS (Murashige dan Skoog 1962) di-
lengkapi dengan sukrosa 3% (w/v), serta dibuat padat
dengan menambahkan agar 0,2% (Phytagel/Gelrite).
Selanjutnya, pH media dibuat 5,8 dengan menambah-
kan 1 N NaOH atau 1 N HCl sebelum diotoklaf pada
suhu 121oC selama 15 menit. Biakan diinkubasi pada
suhu 25 + 2oC di bawah cahaya neon 1.000-2.000 lux
selama 16 jam.
Dalam media induksi, eksplan embrio somatik akan
membentuk sel-sel embriogenik yang kemudian ber-
kembang membentuk fase globular (fase embrio
somatik primer). Eksplan kemudian dipindahkan ke
dalam media pendewasaan untuk mengoptimalkan
pembentukan embrio somatik sekunder. Embrio so-
matik yang telah membentuk kotiledon dipindahkan ke
dalam media perkecambahan untuk pembentukan
plantlet. Kondisi penyimpanan biakan pada semua
tahap perlakuan adalah sama.
Embriogenesis somatik langsung pada tanaman cendana 3

Setelah plantlet cukup kuat untuk dipindahkan, Tabel 1. Pengaruh zat pengatur tumbuh dalam media
dasar MS terhadap pembentukan embrio somatik dari
dilakukan aklimatisasi di kamar kaca. Media tanam eksplan embrio zigotik muda dan dewasa pada cendana
yang digunakan berupa campuran tanah dan pupuk setelah 8 minggu.
kandang atau kasting (1:1) dalam pot plastik. Di sam- Table 1. Effect of plant growth regulators in MS basal me-
dium on somatic embryo formation from mature and imma-
ping itu, pada pot tersebut disediakan bibit tanaman ture zygotic embryo explant of sandalwood after 8 weeks.
cabai yang diharapkan berfungsi sebagai tanaman
Zat pengatur tumbuh Persentase embrio somatik
inang.
Plant growth regulator Percentage of somatic embryo
Pengamatan dilakukan terhadap persentase eksplan
(mg/l) Dewasa/Mature Muda/Immature
membentuk embrio primer, persentase embrio primer
membentuk embrio somatik sekunder, jumlah embrio MS + BAP 0,5 33,3a 46,1a
somatik yang berkecambah, dan persentase plantlet/ MS + BAP 1 63,6a 53,8a
MS + BAP 2 23,1a 71,4a
tanaman yang tumbuh. Data dianalisis menggunakan
MS + thidiazuron 0,5 16,7a 15,0b
uji Duncan pada p < 0,05. MS + thidiazuron 1 18,7a 14,8b
MS + thidiazuron 2 33,3a 18,7b
Keterangan/Notes:
HASIL DAN PEMBAHASAN
Angka pada satu kolom yang diikuti oleh huruf yang sama
tidak berbeda nyata pada taraf 5% uji Duncan.
Bahan tanaman (buah) yang digunakan sebagai Numbers at each column followed by the same letter are not
eksplan berasal dari Yogyakarta untuk buah masak significantly different at 5% Duncan test.
(mature) dan dari NTT untuk buah masak dan muda
(immature). Embrio zigotik dari kedua tingkat ke-
masakan buah tersebut diisolasi dan ditanam pada Tabel 2. Pengaruh media terhadap persentase embrio primer
yang membentuk embrio sekunder dari eksplan embrio
media perlakuan untuk induksi embrio somatik. Hasil zigotik muda dan dewasa cendana umur 7 minggu.
pengamatan menunjukkan bahwa setelah berumur 8 Table 2. Effect of media on percentage of primary embryos to
minggu, eksplan yang berasal dari Yogyakarta tidak form secondary embryos from mature and immature zygotic
embryo explant of sandalwood after 7 weeks.
menunjukkan adanya pertumbuhan pada semua media
perlakuan yang dicobakan. Hal ini diduga karena Persentase embrio somatik
Media Percentage of somatic embryo
bahan tanaman (biji) sudah tidak mempunyai viabilitas
Media
lagi akibat disimpan terlalu lama. Eksplan dari buah Dewasa/Mature Muda/Immature
yang berasal dari NTT memberikan respons yang MS (kontrol) 87,5a 71,25a
berbeda dalam membentuk embrio somatik pada be- MS + IAA 0,5 mg/l 73a 43,25ab
berapa perlakuan media yang diberikan. MS + IAA 1 mg/l 52a 15b
Secara umum, media dasar MS yang diperkaya de- Keterangan/Notes:
ngan BAP menunjukkan respons yang lebih baik dalam Angka pada satu kolom yang diikuti oleh huruf yang sama
membentuk embrio somatik dibandingkan dengan MS tidak berbeda nyata pada taraf 5% uji Duncan.
Numbers at each column followed by the same letters are not
+ thidiazuron, baik untuk eksplan embrio muda mau-
significantly different at 5% Duncan test.
pun embrio dewasa. Persentase pembentukan embrio
somatik dari eksplan embrio zigotik muda pada media
MS + BAP 2 mg/l menunjukkan nilai tertinggi (71,4%),
sedangkan untuk eksplan embrio zigotik dewasa, nilai 43,25%. Persentase embrio somatik sekunder tertinggi
tertinggi (63,6%) diperoleh pada media MS + BAP (71,25%) diperoleh dari media MS tanpa penambahan
1 mg/l (Tabel 1). IAA.
Keberhasilan pembentukan embrio somatik sekun- Media MS tanpa zat pengatur tumbuh IAA tampak-
der dari embrio zigotik dewasa dengan perlakuan MS nya selalu memberikan hasil yang lebih tinggi, baik
+ IAA 0; 0,5; dan 1 mg/l tidak menunjukkan perbedaan untuk embrio zigotik muda maupun dewasa. Embrio
yang nyata (Tabel 2). Namun demikian, media MS zigotik terdiri atas jaringan yang sangat muda dan
tanpa IAA menunjukkan persentase keberhasilan bersifat embrionik sehingga tanpa zat pengatur
paling tinggi (87,5%) diikuti MS + IAA 0,5 mg/l se- tumbuh pun tetap dapat beregenerasi. Kandungan
besar 73%. Pada embrio somatik muda, keberhasilan garam-garam anorganik yang tinggi dalam media MS
regenerasi eksplan membentuk embrio somatik se- serta adanya vitamin dan sukrosa cukup memadai
kunder pada media MS + IAA 1 mg/l hanya 15% dan untuk mendukung proses pembentukan dan per-
tidak berbeda nyata dengan MS + IAA 0,5 mg/l sekitar kembangan sel-sel somatik dari embrio zigotik menjadi
4 Deden Sukmadjaja

embrio somatik. Rai dan McComb (2002) pada tanam-
an cendana dengan menggunakan embrio zigotik
dewasa berhasil pula meregenerasikan eksplan mem-
bentuk embrio somatik dewasa. Namun, Becwor et al.
(1987) pada tanaman Picea abis dan Lelu et al. (1994)
pada tanaman hibrida antara Larix dan Leptoeuro-
paca menggunakan embrio zigotik muda. Berdasarkan
hasil penelitian ini, penggunaan kedua jenis eksplan,
yaitu embrio zigotik muda dan dewasa memberikan
persentase keberhasilan yang cukup tinggi, berturut-
turut 71,25% dan 87,5%. Dengan demikian, perbanyak-
an tanaman cendana melalui pembentukan embrio
somatik memberikan kemudahan dalam pengangkutan
biji sebagai sumber eksplan mengingat produksi biji
pada cendana relatif lama.
Gambar 1 menunjukkan embrio zigotik yang diguna-
kan sebagai eksplan serta pembentukan dan per-
kembangan embrio somatik tanaman cendana. Setelah
disubkultur pada media perkecambahan, embrio soma-
tik dewasa ternyata tidak langsung membentuk benih
somatik, tetapi bermultiplikasi membentuk tunas
(Tabel 3; Gambar 2). Multiplikasi paling tinggi (92%)
terdapat pada media MS1/2 + GA 3 namun tidak ber-
beda dengan perlakuan lainnya kecuali MS. Dengan
demikian media MS yang konsentrasi makronya di-
cairkan sampai setengahnya lebih baik dibandingkan
media MS konsentrasi penuh. Pengenceran media MS
sebagai media perkecambahan dilakukan pula oleh Rai
dan McComb (2002) pada tanaman cendana, serta Rout
et al. (1995) pada tanaman Acacia catechu. Tremblay
(1990) melakukan pengenceran garam makro media
Schenk dan Hilderbrandt sampai seperempatnya.
Menurut Rout et al. (1995), pengenceran media pada
tahap perkecambahan dimaksudkan untuk meng-
hindari pengkalusan kembali pada dasar tunas atau
struktur embrio somatik.
Kelompok tunas pada media perkecambahan me-
nunjukkan bentuk yang normal dan tidak normal.

Gambar 1. Pembentukan embrio somatik dari eksplan embrio zigotik pada tanaman cendana; a = embrio zigotik sebagai eksplan,
b = tahap globular, c = tahap bentuk hati, d = tahap torpil (torpedo), e dan f = konfigurasi kotiledon embrio somatik.
Fig. 1. Development of somatic embryos from zygotic embryo explant on sandalwood; a = zygotic embryo explant, b = globular
stage, c = heart shaped stage, d = torpil stage, e and f = configurations of somatic embryos cotyledon.
Embriogenesis somatik langsung pada tanaman cendana 5

Tabel 3. Pengaruh komposisi media perkecambahan terhadap rata-rata persentase biakan berorganogenesis
serta jumlah tunas normal dan abnormal dari embrio somatik pada cendana.
Table 3. Effect of germinating media compositions on percentage of cultured organogenesis, number of normal
and abnormal shoots from somatic embryos of sandalwood.

Persentase biakan Jumlah Persentase

Media berorganogenesis tunas normal tunas abnormal
Media Percentage of Number of Percentage of
cultured organogenesis normal shoots abnormal shoots

MS1/2 4 8 ab 2,8bc 0
MS1/2 + GA 3 0,5 mg/l 92 a 5,8ab 9,4
MS1/2 + GA 3 1 mg/l 88 a 9,2a 0
MS 0b 0c 0
MS + GA 3 0,5 mg/l 60 a 1,6bc 33,3
MS + GA 3 1 mg/l 4 8 ab 2,4bc 25
Keterangan/Notes:
Angka pada satu kolom yang diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada taraf 5% uji Duncan.
Numbers at each column followed by the same letters are not significantly different at 5% Duncan test.

Gambar 2. Pertumbuhan embrio somatik tanaman cendana pada media pendewasaan (a) dan perkecambahan (b).
Fig. 2. Somatic embryo growth of sandalwood on maturing media (a) and germination media (b).

Jumlah tunas normal paling banyak (rata-rata 9,2
tunas) diperoleh dari media MS1/2 + GA3 1 mg/l namun
tidak berbeda nyata dengan MS1/2 + GA 3 0,5 mg/l
sebanyak 5,8 tunas, sedangkan tunas abnormal yang
paling banyak berasal dari media MS + GA3 0,5 mg/l.
Tabel 4. Rata-rata tinggi serta jumlah tunas dan akar dari
eksplan kecambah embrio somatik cendana pada media
induksi perakaran umur 4 minggu.
Table 4. Average of height and number of shoots and roots from
somatic embryo explant of sandalwood on root induction media
after 4 weeks.

Tampaknya media MS konsentrasi penuh selalu mem- Jumlah tunas Tinggi tunas Jumlah akar
Media
berikan hasil yang lebih rendah dibandingkan media Shoot Shoot Root
Media
MS yang diencerkan setengahnya. Hal ini kemungkin- number height n u m b er
an disebabkan pengaruh nutrisi yang terlalu kaya MS + IBA 5 mg/l 3,75 1,72 0,6
sehingga mengakibatkan induksi pertumbuhan yang MS + IBA 10 mg/l 4,25 1,55 0,0
abnormal.
Pada media perkecambahan/pendewasaan, embrio
somatik dewasa tidak dapat membentuk akar seperti
yang diharapkan. Untuk itu pada tahap selanjutnya KESIMPULAN
tunas disubkultur pada media perakaran (Tabel 4;
Gambar 3). Sampai umur 3 minggu, akar hanya tumbuh Pembentukan embrio somatik tanaman cendana secara
pada beberapa biakan yang diberi perlakuan IBA 5 mg/ langsung dengan eksplan embrio zigotik dewasa men-
l dengan rata-rata jumlah akar 0,6. Perlakuan IBA 5 dan capai 63,6% dengan menggunakan media MS + BAP 1
10 mg/l tidak menunjukkan perbedaan pada jumlah dan mg/l dan untuk eksplan embrio zigotik muda 71,4%
tinggi tunas yang dihasilkan. pada media MS + BAP 2 mg/l. Pada media MS,
6 Deden Sukmadjaja
Gambar 3. Pertumbuhan biakan cendana pada media induksi
perakaran.
Fig. 3. Growth of sandalwood culture on root induction media.
persentase embrio somatik sekunder yang dihasilkan
relatif sama antara embrio zigotik muda dan dewasa.
Pada media perkecambahan, embrio somatik yang
paling banyak bermultiplikasi membentuk tunas
terdapat pada media MS1/2 + GA3 0,5 mg/l. Umumnya
media MS yang diencerkan setengahnya menghasil-
kan jumlah tunas yang lebih tinggi dibandingkan
media MS penuh untuk setiap penambahan GA 3.
Media MS + GA3 0,5 dan 1 mg/l menghasilkan tunas
abnormal paling tinggi, yaitu masing-masing 33,3%
dan 25%. Induksi perakaran belum memberikan hasil
yang memuaskan, meskipun akar dapat terbentuk pada
media MS + IBA 5 mg/l dengan jumlah yang masih
sedikit.
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Direktur
SEAMEO-BIOTROP yang telah memberikan dukung-
an dana terhadap penelitian ini melalui Bagian Proyek
Pengembangan Biologi Tropika Indonesia Bogor TA
2003.
DAFTAR PUSTAKA
Anil, V.S. and K.S. Rao. 2000. Calcium-mediated signaling during
sandalwood somatic embryogenesis. Role for exogenous
calcium as second messenger. Plant Physiol. 123: 1301-1312.
Attree, S.M., S. Budimirand, and L.C. Fawke. 1990. Somatic
embryogenesis and plantlet regeneration from cultured shoots
and cotyledons of seedlings from stored seeds of black and
white spruce (Picea mavina and P. glauca). Can. J. Bot. 68:
30-34.
Becwor, M.R., T.L. Noland, and S.R. Wann. 1987. Somatic embryo
development and regeneration from embryogenic Norway
spruce callus. Tappi J. 70: 155-160.
Das, S., S. Ray, S. Dey, and S. Dasgupta. 2001. Optimation of
sucrose, inorganic nitrogen and absisic acid levels for Santalum
album L. somatic embryo production in suspension culture.
Process Biochem. 37(1): 51-56.
Husni, A., I. Mariska, dan M. Kosmiatin. 1997. Embriogenesis somatik
tanaman lada liar. Makalah Seminar Mingguan Balai Penelitian
Bioteknologi Tanaman Pangan, Bogor, 5 September 1997.
Hutami, S., I. Mariska, R. Purnamaningsih, M. Herman, D.
Damayanti, and T.I. Utami. 2002. Regeneration of papaya
(Carica papaya) through somatic embryogenesis. Proc. the 2nd
Indonesian Biotechnology Conference. Indonesian Biotechnol-
ogy Consortium, Jakarta.
Kamil, H. and M.I.J. Umboh. 1990. Root induction of Santalum
album by using IBA and NAA. Proc. The Symposium on
Biotechnology for Forest Tree Improvement. Bogor, 21-23
March 1990. Biotrop Special Publication No. 49.
Lelu, M.A., K.K. Klimaszewska, C. Jones, C. Ward, P. Van
Aderkas, and P.J. Charest. 1993. A laboratory guide to somatic
embryogenesis in spruce and larch. Information Report.
Petawawa National Forestry Institute, Canada.
Lelu, M.A., K.K. Klimaszewska, C. Jones, C. Ward, P. Van
Aderkas, and P.J. Charest. 1994. An improved method for
somatic plantlet production of hybrid larch (Lorix x
Leptoeuropaea) Part 2 Control of germination and plantlet
development. Plant Cell, Tissue and Organ Culture 36: 117-127.
Mariska, I. 1996. Embriogenesis somatik tanaman kehutanan.
Prosiding Kursus Bioteknologi, 4-9 November 1996. Badan
Pengkajian dan Penerapan Teknologi. Serpong. 13 hlm.
Mariska, I., S. Hutami, M. Kosmiatin, dan W.H. Adil. 2001a.
Regenerasi massa sel embriogenik kedelai setelah diseleksi
pada kondisi Al berbeda dan pH rendah. Berita Puslitbangtan
No. 20: 1-3.
Mariska, I., D. Sopandie, S. Hutami, E. Syamsudin, dan M.
Kosmiatin. 2001b. Peningkatan ketahanan terhadap Al pada
tanaman kedelai melalui kultur in vitro. Laporan Riset
Unggulan Terpadu VIII. Kantor Menristek dan LIPI, Jakarta.
Murashige, T. and F. Skoog. 1962. A revised medium for rapid
growth and bioassay with tobacco tissue culture. Physiol. Plant
15: 473-497.
Musakabe, H. 2000. Peluang dan kendala cendana dalam
perekonomian Propinsi Nusa Tenggara Timur. Kumpulan
makalah Seminar Nasional Kajian terhadap Tanaman
Cendana (Santalum album L.) sebagai Komoditi Utama
Perekonomian Propinsi Nusa Tenggara Timur (NTT) Menuju
Otonomisasi. Pemda NTT dan LIPI, Jakarta. 26 Juni 2000.
Rai, V.R. and J. McComb. 2002. Direct somatic embryogenesis
from mature embryos of sandalwood. Plant Cell Tissue and
Organ Culture 69: 65-70.
Rout, G.R., S. Samantaray, and P. Das. 1995. Somatic embryo-
genesis and plant regeneration from callus culture of Acacia
catechu a multipurpose leguminous tree. Plant Cell Tissue and
Organ Culture 42: 283-285.
Tremblay, F.M. 1990. Somatic embryogenesis and plantlet
regeneration from embryos isolated from stored seeds of Picea
glauca. Can. J. Bot. 68: 236-242.
Williams, E.G. and Maheswara. 1986. Somatic embryogenesis
factors influencing coordinated behaviour of cells as on
embryogenic group. Ann. Bot. 57: 443-462.