PENILAIAN DARI DEGRADASI hidrolitik lovastatin DENGAN HPLC
A. Alvarez-LUEJE * , J. PASTINE, JA SQUELLA DAN LJ Nunez-Vergara
Bioelectrochemistry Laboratorium. Kimia dan Farmasi Fakultas Ilmu Universitas Chili PO Box 233 Santiago 1 Faks: 56 7378920 CHILI
ABSTRAK Dalam karya ini suatu HPLC menunjukkan stabilitas-metode dikembangkan dan diterapkan untuk mempelajari perilaku hidrolitik lovastatin dalam cairan simulasi yang berbeda. Kondisi kromatografi yang dipilih adalah kolom C-18, asetonitril / metanol / larutan buffer fosfat pH 4 (32/33/35) sebagai fase gerak, 45 kolom C suhu, fluks 1,5 mL / menit dan deteksi UV pada 238 nm. Metode yang dikembangkan dipamerkan pengulangan memadai dan reproduktifitas (CV 0,057% dan 0,73%, masing-masing) dan pemulihan yang lebih tinggi dari 98%. Selanjutnya, batas deteksi dan kuantisasi adalah 9,1 10 -7 M dan 2,8 10 -6 M. Lovastastin dipamerkan degradasi tergantung pH dengan hidrolisis sesaat di media alkali pada suhu kamar. Satu atau dua produk degradasi dapat diamati ketika lovastatin dihidrolisis dalam medium alkali atau asam, masing-masing. Produk degradasi dari lovastatin mempertahankan UV- spektrum dari obat induk, yang membuktikan bahwa struktur kromofor tetap tidak berubah. Juga, lovastatin hidrolisis dalam media yang berbeda mengikuti kinetik orde pertama semu. Peringkat-agar stabilitas lovastatin di media yang berbeda adalah: media lambung simulasi tanpa pepsin> 0,06 M HCl> 0,1 M HCl> dapar fosfat pH 7,4 + laurylsulphate natrium> dapar fosfat pH 7,4. KATA KUNCI: lovastatin, HPLC, hidrolisis, stabilitas, cairan simulasi.
PENDAHULUAN Lovastatin ( Gambar 1 ) adalah obat yang menghambat 3-hidroksi-3- methylglutaryl coenzyme A (HMG-CoA) reduktase, enzim yang berpartisipasi dalam sintesis kolesterol endogen, mendukung penggunaan klinis dalam pengobatan hiperkolesterolemia [1, 2] .
Gambar 1. Struktur kimia lovastatin Penghambatan HMG-CoA reductase secara langsung berkaitan dengan perumpamaan struktural antara lovastatin dan substrat endogen, HMG-KoA. Dengan demikian, baik kegiatan farmakologi dan terapeutik obat ini menunjukkan hubungan yang erat dengan struktur kimia, yang masuk akal untuk melakukan penelitian pada stabilitas. Dari sudut pandang struktural, lovastatin memiliki beberapa pusat kimia reaktif, yaitu, ester dan gugus lakton, yang dapat dihidrolisis. Penyelidikan stabilitas obat merupakan masalah penting dalam evaluasi kualitas obat. Banyak kondisi lingkungan seperti panas, cahaya, kelembaban serta kerentanan zat kimia terhadap hidrolisis atau oksidasi dapat memainkan peran yang sangat serius dalam stabilitas farmasi. Sebuah stress testing zat obat dapat membantu untuk mengidentifikasi kemungkinan produk degradasi dan untuk menyediakan informasi penting yang melekat pada stabilitas obat. Berurutan, dapat menjadi kontribusi yang mendasar untuk pengembangan dan validasi metode menunjukkan stabilitas analisis yang digunakan dalam pemantauan kualitas produk farmasi [3,4]. Independen bentuk sediaan akhir, dipaksa degradasi obat dengan paparan larutan obat untuk asam atau alkali kondisi ini berguna untuk memprediksi produk degradasi hidrolitik potensial. Hidrolisis adalah salah satu reaksi yang paling umum degradasi kimia. Sejak air, baik sebagai pelarut atau dalam bentuk potensial kelembaban di udara kontak, bentuk sediaan yang paling farmasi untuk beberapa derajat, potensi untuk jalur degradasi ada untuk sebagian besar obat dan eksipien [5,6]. Studi Stabilitas dirancang untuk memberikan wawasan tentang mekanisme degradasi obat, waktu paruh (satu setengah konsentrasi asli) dan berakhirnya kencan (t 90, rak-hidup) estimasi. Rak-hidup didefinisikan sebagai waktu yang dibutuhkan untuk obat untuk terurai sampai 90% dari konsentrasi awal pada suhu tertentu, yaitu, dekomposisi 10%. Pembentukan tanggal kadaluwarsa calon sangat penting untuk stabilitas obat produk. Pengujian stabilitas dipercepat menggunakan hubungan Arrhenius sering digunakan untuk identifikasi parameter stabilitas. Pendekatan yang terkenal klasik terdiri dari langkah-langkah berurutan, yang meliputi penentuan pH
kinetik k konstanta, T untuk urutan yang benar dari reaksi degradasi. Hal ini dilakukan melalui hubungan fungsional antara kandungan obat dan waktu pada suhu beberapa [7]. Lovastatin telah ditentukan dalam cairan biologis dengan kromatografi cair kinerja tinggi spektrofotometri [8-13], kinerja tinggi kromatografi cair- spektrometri massa tandem [14], kromatografi cair-spektrometri massa- spektrometri massa [15,16], kromatografi gas-massa spektrometri [17] dan polarografi [18]. Dalam bentuk sediaan farmasi dengan kromatografi elektrokinetik misel [19], kromatografi cairan superkritis [20] dan polarografi [18]. Juga, penentuan lovastatin dan asam hidroksi yang metabolit dalam plasma baik mouse atau tikus, dengan menggunakan kromatografi cair / semprot ion tandem spektrometri massa telah dijelaskan [21]. Dalam pengetahuan kita hanya beberapa studi yang berkenaan dengan stabilitas telah dilaporkan sebelumnya. Lovastatin pada solid state dan produk oksidasi setelah terpapar suasana oksidatif telah ditentukan dengan menggunakan elektroforesis kapiler dan kromatografi cair [22]. Juga, oksidasi lovastatin dalam keadaan padat dan stabilisasi dengan antioksidan alami [23] dan kinetik dari oksidasi bersama-sama dengan agen anticholesteremic lainnya dinilai oleh polarografi oksigen telah dijelaskan [24]. Memperhatikan anteseden ini sebelumnya, dalam karya ini metode HPLC dikembangkan dan diterapkan untuk mempelajari perilaku hidrolitik lovastatin dalam media yang berbeda pembubaran pencernaan dan cairan simulasi, dipilih dari United States Pharmacopoeia [25]. EKSPERIMENTAL Reagen dan obat-obatan. Lovastatin (100% chromatographically murni) diperoleh dari Mintlab Laboratorium (Santiago-Chili). Pelarut yang digunakan adalah HPLC asetonitril kelas (99,8%, EMD Chemicals Inc), metanol HPLC kelas (99,9%, EMD Chemicals Inc), etanol pa (99,8%, Merck), asam klorida pa (32%, Merck) dan fosfat asam pa (85%, Fluka). Semua reagen lain yang digunakan adalah kelas analitis. Air itu ganda suling dan deionisasi (Milli-Q kualitas). Buffer solusi. Solusi untuk studi HPLC adalah buffer menggunakan 0,05-M penyangga fosfat disesuaikan solusi pada pH 4 dengan asam fosfat. Untuk uji degradasi larutan buffer dibuat menurut Farmakope Amerika Serikat [25]. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC). Pengukuran HPLC dilakukan dengan menggunakan perakitan Waters dilengkapi dengan pompa 600 controller model dan model yang 996 Photodiode Array Detector. Akuisisi dan perawatan data dilakukan dengan menggunakan perangkat lunak versi 2.1 Milenium. Sebagai kolom kromatografi yang Bondapak / Porasil C-18 kolom, 10-pM-ukuran partikel (3,9 mm x 150 mm) dan sebagai penjaga kolom Bondapak C18 (30 mm x 4,6 mm) yang bekerja. Injector adalah 20 Rheodyne katup uL, model 7125. Kondisi kromatografi. Sebuah sistem elusi isokratik terdiri oleh asetonitril: metanol: dapar fosfat pH 4 solusi (32%: 33%: 35%) pada temperatur 45 C, aliran 1,5 mL / menit dan pada panjang gelombang deteksi 238 nm. Validasi metode. Setelah kondisi kromatografi didirikan, validasi metode dilakukan mengikuti prosedur yang diuraikan dalam Bab Umum <1225> Validasi Metode kompendium, Amerika Serikat Pharmacopoeia [25], dan karenanya elemen data yang diperlukan untuk validasi linearitas, presisi, akurasi dan spesifisitas . Linieritas dan jangkauan. Sebuah solusi stok obat (1 10 -3 M) sudah disiapkan. Ini larutan stok diencerkan untuk membuat larutan yang mengandung 1 x 10 -4 M - 1 10 -6 M obat dan disuntikkan dalam rangkap tiga ke dalam kolom HPLC. Presisi. Sepuluh suntikan, dari 5 10 -5 M konsentrasi lovastatin diberikan pada hari yang sama dan nilai-nilai standar deviasi relatif dihitung untuk menentukan intra-hari presisi (assay pengulangan). Studi ini juga diulang pada hari yang berbeda untuk menentukan hari antar presisi (assay reproduktifitas). Akurasi. Akurasi dievaluasi dengan memperkuat campuran reaksi solusi membusuk dengan 5 10-5 M konsentrasi lovastatin. Pemulihan obat yang ditambahkan ditentukan. Spesifisitas dan selektivitas. Kekhususan metode menuju obat didirikan melalui studi faktor resolusi puncak obat dari puncak menyelesaikan terdekat. Selektivitas keseluruhan didirikan melalui penentuan kemurnian puncak untuk setiap produk degradasi menggunakan detektor PDA. Juga, batas deteksi (LOD) dan kuantisasi (LOQ) metode dihitung dengan menggunakan rata-rata (Yb) dan deviasi standar (Sb) dari respon diperkirakan kosong, lereng kurva kalibrasi (m) dan dengan rasio sinyal / noise 3 dan 10, masing-masing, sesuai dengan ungkapan berikut [26]:
Degradasi percobaan. Solusi penyangga dibubuhi dengan lovastatin untuk mendapatkan konsentrasi awal berkisar antara 1,0 x 10 -3 M dan 5,0 10 -5
M Solusi dibagi dalam sejumlah 2 mL botol kuning (satu untuk setiap titik dari kurva degradasi) dan kemudian ditempatkan dalam oven pada 80,0, 60,0 dan 37,0 C ( 0,2 C). Botol diambil dari oven pada interval waktu yang dipilih tergantung pada kedua pH dan suhu (yaitu masing-masing 5 menit dan 20 menit untuk 0,1 N HCl dan fosfat pH 7,4 penyangga pada 80 C, masing-masing). Segera masing-masing sampel didinginkan di atas es untuk memadamkan reaksi dan diuji dengan HPLC. Degradasi dimonitor selama setidaknya tiga setengah-hidup. Percobaan dilakukan dalam rangkap dua. Energi aktivasi (E a). Setiap nilai Ea diperoleh dari model Arrehnius, dengan memplot ln k vs 1 / T untuk setiap konsentrasi yang diuji. Nilai Ea akhir merupakan rata-rata dihitung untuk 4 Ea konsentrasi antara 1 M 10 -3 dan 1 10 -5 M Dalam semua kasus koefisien regresi memiliki nilai lebih tinggi dari 0,997 diperoleh. HASIL DAN PEMBAHASAN Sampai dengan hari, metode analisis yang berbeda untuk menentukan lovastatin telah dijelaskan. Metode tersebut telah dikembangkan dengan tujuan untuk menjadi terutama diterapkan untuk penentuan lovastatin dalam bentuk sediaan farmasi dan dalam sampel biologi. Dalam karya ini merupakan metode HPLC telah dikembangkan untuk diterapkan untuk menilai stabilitas hidrolitik lovastatin di media yang berbeda. Pengembangan dan optimalisasi metode stabilitas menunjukkan Dalam Gambar 2 kromatogram HPLC khas standar lovastatin ( Gambar. 2A ) dan produk degradasi setelah hidrolisis dalam media yang berbeda ( Gambar. 2B-2C ) yang akan ditampilkan. Baik C-8 dan C-18 kolom, proporsi yang berbeda dari campuran asetonitril / metanol / larutan buffer fosfat diuji sebagai fase stasioner dan mobile, masing-masing. Dalam kondisi yang dipilih akhir, lovastatin dipamerkan waktu retensi 8,27 0,04 min. Di sisi lain, beberapa perbedaan dalam kromatogram sesuai untuk setiap kondisi degradasi diperoleh, = 6,11 0,27 menit dan bahu dekat 6,9 min. Sehingga lovastatin hidrolisis dalam media basa seketika, dengan munculnya puncak di Rt Karakteristik ini tidak memungkinkan untuk mengikuti kursus yang waktu di bawah kondisi ( Gambar. 2B ). Dalam asam Media lovastatin dihasilkan dua produk degradasi asam, dengan waktu retensi 5,94 0,78 menit (2) dan 3,54 1,86 menit (1), ( Gambar. 2C ). Selanjutnya, produk degradasi lovastatin mempertahankan asli UV-spektrum dari obat induk, yang membuktikan bahwa struktur kromofor tetap tidak berubah, yang memungkinkan untuk menyimpulkan bahwa hanya ester dan / atau gugus lakton bisa terpengaruh dengan proses hidrolisis. Hasil di atas diperoleh pada suhu yang berbeda yang adalah sebagai berikut:, 37 60 dan 80 C. Seperti yang diharapkan, sejajar dengan perjalanan waktu-dari hidrolisis, penurunan puncak asli sesuai dengan obat induk terjadi tanpa campur tangan dengan sinyal lain. Dengan demikian, metode yang dikembangkan menjadi menjadi cukup selektif untuk membedakan lovastatin dari yang sesuai dengan produk hidrolitik, yang mewakili alat yang berguna untuk mengikuti jenis degradasi.
Gambar 2. Kromatogram dari (A) 3,0 x 10 -4 M lovastatin larutan standar; (B) 3,0 10 -4 M lovastatin solusi dalam 0,1 N NaOH; (C) 3.0 10 -4 M lovastatin solusi setelah 12 jam dari hidrolisis asam (0,1 M HCl) pada 80 C (1, 2 produk degradasi =; 3 = lovastatin). Sisipkan: UV-spektrum puncak masing-masing. (Elusi sistem isokratik disusun oleh asetonitril-metanol-larutan buffer fosfat (pH 4; 50 mM) (32:33:35, v / v)). Validasi metode menunjukkan stabilitas yang dikembangkan Dalam Tabel 1 , penilaian analitis dari prosedur HPLC baru untuk lovastatin diringkas. Dari parameter analisis diperoleh dapat disimpulkan bahwa uji kromatografi yang dikembangkan memenuhi persyaratan analitis, yang menunjukkan pengulangan memadai dan reproduktifitas (CV 0,057% dan 0,73%, masing-masing) dan pemulihan lebih tinggi dari 98%. Di sisi lain, rentang konsentrasi untuk kurva kalibrasi tampaknya memadai untuk mengikuti degradasi dengan batas deteksi dan kuantisasi rata-rata sebesar 9,1 10-7 M dan 2,8 10-6 M, masing-masing.
Degradasi Perilaku Metode yang dikembangkan telah berhasil diterapkan untuk menentukan stabilitas lovastatin pada waktu yang berbeda, media pH dan suhu. Media simulasi pencernaan dan media lainnya pembubaran disiapkan seperti yang dijelaskan di Amerika Serikat Pharmacopoeia [25]. Orde reaksi Dalam Gambar 3 waktu-kursus degradasi lovastatin di dua media yang berbeda ditampilkan. Seperti dapat dilihat, hidrolisis lovastatin dalam medium asam mengikuti kinetik campuran. Sebaliknya, di media belajar lainnya kinetik adalah orde pertama. Dalam kasus pertama, model untuk menghitung orde reaksi hanya dianggap sebagai titik data percobaan setelah 1 jam degradasi ( Gambar. 3A ). Dalam kondisi eksperimental lainnya semua titik data yang digunakan agar sesuai dengan kinetik orde pertama seperti dapat dilihat pada Gambar 3B .
Gambar 3. Waktu-kursus degradasi lovastatin pada konsentrasi awal yang berbeda pada 80 C dalam 0,1 M HCl (A), Fosfat buffer pH 7,4 (B). Masukkan: plot urutan pertama. 1 X 10 -3 M (), 5 X 10 M -4 (#), 1 X 10 -4
M (A), 5 X 10 -5 M (&) konsentrasi Untuk menguji urutan kinetik dari degradasi hidrolitik, percobaan pada kedua konsentrasi awal yang berbeda dan pH dilakukan. Seperti dapat dilihat dari Gambar 4 , perubahan konsentrasi awal tidak mempengaruhi lereng kurva peluruhan. Oleh karena itu, dari linearitas dari ln c vs t plot (r> 0,9991) dan fakta bahwa perbedaan lereng yang sesuai dengan plot ln vs c t secara statistik tidak signifikan (p> 0,05), sebagaimana ditentukan oleh analisis bifactorial, pseudo -first order kinetik untuk degradasi hidrolitik untuk lovastatin dapat diasumsikan [27].
Gambar 4. Decay plot dari hidrolisis lovastatin pada konsentrasi awal yang berbeda: 1 X 10 M -3 (), 5 X 10 M -4
(#), 1 X 10 -4 M (A), 5 X 10 -5 M (&), 80 C. A. 0,1 M HCl; B. simulasi lambung menengah; C. dapar fosfat pH 7,4; D. dapar fosfat pH 7 + SLS. Waktu-kursus produk 1 dan 2 ditunjukkan pada Gambar 5 . Seperti dapat dilihat, generasi produk 1 tergantung dari media diuji. Jadi, dalam medium asam, produk ini dengan cepat dihasilkan selama jam pertama dari hidrolisis. Di sisi lain, produk 2 hanya diamati dalam medium asam menunjukkan sifat kromatografi miskin, mungkin karena pada polaritas tinggi dibandingkan dengan kedua orang tua obat dan produk 1. Ini perilaku produk 2 diamati pada semua suhu dan media.
Gambar. 5. 5 X 10 -4 M lovastatin hidrolisis pada 80 C dalam 0,1 M HCl (A); media simulasi lambung tanpa pepsin (B); penyangga fosfat pH 7,4 (C) dan dapar fosfat pH 7 + SLS (!). n Lovastatin; A produk 1; toouk 2 Dalam Tabel 2 , dihitung pseudo orde pertama konstanta dirangkum. Perbandingan nilai-nilai k dalam konsentrasi percobaan yang berbeda pada setiap suhu yang diuji (37, 60 dan 80 C) menunjukkan bahwa perbedaan tersebut tidak signifikan secara statistik sesuai dengan Student t-test dengan p> 0,05. Namun, perbandingan antara nilai-nilai k di media hidrolitik yang berbeda dan setiap temperatur menunjukkan bahwa perbedaan antara nilai-nilai secara statistik signifikan dengan p <0,024. Di sisi lain, nilai-nilai k ditingkatkan sejalan dengan peningkatan suhu. Seperti dapat dilihat dari Tabel 2 , laurylsulphate natrium menghasilkan penurunan dalam degradasi konstan dalam 3,5, 2,0 dan 3,3 kali pada 37 , 60 C dan 80, masing- masing, seperti yang dibandingkan dengan media dapar fosfat. Mungkin, efek ini dapat dijelaskan oleh fenomena persaingan antara laurylsulphate natrium dan lovastatin oleh agen hidrolisis.
Selanjutnya, dari Tabel ini adalah mungkin untuk membangun urutan peringkat stabilitas lovastatin sebagai berikut: media lambung simulasi tanpa pepsin> 0,06 M HCl> 0,1 M HCl> dapar fosfat pH 7 + laurylsulphate natrium> dapar fosfat pH 7,4. Pesanan ini dalam perjanjian dengan kedua setengah-hidup dan t90 dihitung untuk tiga suhu yang diuji ( Tabel 3 ). Seperti dapat dilihat, setengah-hidup secara dramatis dipengaruhi oleh temperatur dan komposisi media, yaitu lovastatin pH dapar fosfat 7,4 pada 80 C hanya setengah-hidup sekitar 20 menit. dibandingkan dengan media lambung simulasi, di mana dipamerkan setengah-hidup sekitar 37 jam. Namun, pada suhu 37 C, setengah-hidup sekitar 7 jam dan 6 bulan, masing-masing. Selain itu, parameter farmasi khas yang menggambarkan kehidupan rak-obat (t90) juga dihitung.
Arrehnius aktivasi energi (Ea) yang sesuai untuk memproses lovastatin hidrolisis dalam masing-masing media dihitung ( Tabel 4 ). Dari hasil tersebut ( Tabel 2 dan 4 ) dapat disimpulkan bahwa hidrolisis lebih cepat di media basa atau netral dari media asam, yang konsisten dengan nilai-nilai Ea diperoleh untuk masing-masing media. Di sisi lain, nilai-nilai Ea berada dalam perjanjian dengan yang dilaporkan untuk hidrolisis gugus ester 27. Selanjutnya, dengan mempertimbangkan hidrolisis alkali seketika dalam media pada suhu kamar, dan kedua k dan nilai-nilai Ea, tampaknya bahwa proses hidrolisis basa-dikatalisis.
Penutup 1. Sebuah HPLC menunjukkan stabilitas-metode untuk lovastatin dikembangkan. 2. Lovastastin dipamerkan degradasi tergantung pH dengan hidrolisis sesaat di media alkali pada suhu kamar. 3. Satu atau dua produk degradasi dapat diamati ketika lovastatin dihidrolisis dalam medium alkali atau asam, masing-masing. 4. Degradasi produk dari lovastatin mempertahankan UV-spektrum dari obat induk, yang membuktikan bahwa struktur kromofor tetap tidak berubah. 5. Lovastatin hidrolisis dalam media yang berbeda mengikuti kinetik orde pertama semu. 6. Peringkat-agar stabilitas lovastatin di media yang berbeda adalah sebagai berikut: media lambung simulasi tanpa pepsin> 0,06 M HCl> 0,1 M HCl> dapar fosfat pH 7,4 + laurylsulphate natrium> dapar fosfat pH 7,4. REFERENSI 1. A. Corsini, S. Bellosta, R. Baetta, R. Fumagalli, R. Paoletti, F. Bernini, Pharmacol. Ada. 84, 413-428 (1999). [ Link ] 2. ID Chong, JD Seeger, Franklin C, Am. J. Med. 111, 390-400 (2001) [. Link ] 3. ECY Chan, PY Wee, PC Ho, Clin. Chim. Acta. 288, 47-53 (1999). [ Link ] 4. M. Baksi, S. Singh, J. Pharm. Biomed. Anal. 28, 1011-1040 (2002). [ Link ] 5. KC Waterman, RC Adami, KM Alsante, SEBAGAI Antipas, DR Arenson, R. Carrier, J. Hong, MS Landis, F. Lombardo, JC Shah, E. Shalaev, SW Smith, H. Wang, Pharm. Dev. Technol. 7, 113-146 (2002). [ Link ] 6. P. Kovarkov, J. Klims, J. Dohnal,, L. Tisovsk, J. Pharm. Biomed. Anal. 36, 205-209 (2004) [. Link ] 7. Beberapa TI, P. Bogaerts, R. Hanus, M. Hanocq, J. Dubois. Int. J. Pharm. 184, 165-172 (1999). [ Link ] 8. LY Ye, PS Firby, MJ Moore, J. Ada. Obat Monit. 22, 737-741 (2000). [ Link ] 9. P. Sharma, H. Chawla, R. Panchagnula, J. Chromatogr. B Analyt. Technol. Biomed. Hidup Sci. 768, 349-359 (2002). [ Link ] 10. G. Morovjan, G. Szakacs, J. Fekete, J. Chromatogr. Sebuah 763,. 165- 172 (1997). [ Link ] 11. PM Shen, MS Shiao, SDM Chung, KR Lee, YS Chao, VM Hunt, J. Chin. Chem. Soc. 43, 451-457 (1996). [ Link ] 12. M. Konfino, S. Deltcheva, K. Mindjova, J. Planar Chromatogr. 6, 404-406 (1993). [ Link ] 13. R. Kysilka, V. Kren, J. Chromatogr. 630, 415-417 (1993). [ Link ] 14. XS Miao, CD Metcalfe, J. Chromatogr. A. 998, 133-141 (2003). [ Link ] 15. JX Sun, R. Niecestro, G. Phillips, J. Shen, P. Lukacsko, L. Friedhoff, J. Clin. Pharmacol. 42, 198-204 (2002). [ Link ] 16. JM Donovan, JC Kisicki, MR Stiles, WG Tracewell, SK Burke, Ann. Pharmacother. 36, 392-397 (2002). [ Link ] 17. D. Wang-Iverson, E. Ivashkiv, M. Jemal, A. Cohen, Rapid Mass Commun Spectrom.. 3, 132-134 (1989). [ Link ] 18. MT Xu, JF Song, Microchim. Acta. 148, 183-189 (2004). [ Link ] 19. MK Srinivasu, AN Raju, GO Reddy, J. Pharm. Biomed. Anal. 29, 715-721 (2002). [ Link ] 20. JT melangkah, LT Taylor, AL Howard, Ip D., J. Pharm. Biomed. Anal. 20, 137-143 (1999). [ Link ] 21. Y. Wu, J. Zhao, J. Henion, WA Korfmacher, AP Lapiguera, Lin CC, J. Spectrom massa. 32, 379-387 (1997). [ Link ] 22. S. Javernik, S. Samo Kreft, B. Borut trukelj, F. Franc Vrecera, Kroasia. Chem. Acta. 76, 263-268 (2003) [. Link ] 23. S. Javernik, S. Kreft, B. Strukelj, F. Vrecer, Pharmazie. 56, 738-740 (2001). [ Link ] 24. MJ Kaufman, Pharm. Res. 7, 289-292 (1990). [ Link ] 25. USP 25/NF 20, Amerika Serikat Pharmacopoeia / The formularium Nasional, (2002). Amerika Serikat farmakope Konvensi, Inc, Rockville MD Amerika Serikat [. Link ] 26. OA Quattrochi, SA De Andrizzi, RF Laba, (1992) Introduccin ala HPLC, aplicacin y practica, Artes Grficas farro SA, Buenos Aires [. Link ] 27. KA Connors, CL Amidon, VJ Stella, (1986). Kimia stabilitas farmasi:. Sebuah buku pegangan untuk Apoteker, J. Willey, New York [ Link ] UCAPAN TERIMA KASIH Penulis sangat berterima kasih dengan dukungan FONDECYT N Hibah 1030737.
Banyak hasil degradasi bahan obat yang dapat menimbulkan reaksi samping. Hasil degradasi tersebut yang paling sering dapat menjadi senyawa inisiator pembentukan antigen adalah terjadinya reaksi anafilaksis atau reaksi alergi. Beberapa diantara hasil degradasi tersebut bersifat sangat toksik. Oleh karena itu penentuan stabilitas calon bahan obat sangat perlu dilakukan.
PENGARUH pH pada partisi Beberapa obat mengandung gugus-gugus yg mudah mengalami ionisasi. Oleh karena itu, koefisien partisi obat-obat ini pada pH tertentu sulit diprediksi terlebih jika melibatkan lebih dari 1 gugus yg mengalami ionisasi. Meskipun demikian, seringkali salah satu gugus dalam satu molekul obat lebih mudah mengalami ionisasi daripada gugus yg lain pada pH tertentu. Persamaan Handersen-Hasselbalch dapat diturunkan untuk menghitung variasi koefesien partisi asam-asam atau basa-basa organik pada pH larutan yg mana asam-asam/basa-basa dilarutkan ke dalamnya. Untuk asam : Papp =
Untuk Basa : Papp =
Papp: (app merupakan singkatan apparent) merupakan koefesien partisi senyawa nyata yg nilainya bervariasi terhadap pH. Jika suatu senyawa, asam atau basa mengalami ionisasi sebesar 50% (pH=pKa) maka koefesien partisinya setengah dari koefesien obat-obat yg tidak mengalami ionisasi. Papp =
Contoh Sautu formula mengandung komponen-komponen sebagai berikut: Basa A pKa 6,7; P (kloroform/NaOH 0,1 M) = 100 5 mg/ml Basa B pKa 9,7; P (kloroform/NaOH 0,1 M) = 10 30mg/ml Asam benzoat pKa 4,2 (kloroform/NaOH 0,1 M) = 100 5mg/ml Untuk ekstraksi basa A secara selektif, sebanyak 5 ml formula dicampur dengan 15 ml bufer fosfat pH 6,7 dan diekstraksi sekali dengan kloroform. Hitunglah persentase dan berat masing -masing komponen yg terekstraksi? Jawab
Fisiko-Kimia Molekul Obat w.by: Wahyu Oktana F,SSi Page 4 STABILITAS OBAT Beberapa obat cukup stabil, meskipun demikian beberapa obat yg mempunyai gugus fungsional tertentu seperti ester dan laktam akan mudah mengalami degradasi dengan jalur reaksi hidrolisis. Obat dengan gugus fungsional seperti katekol dan fenol akan mudah mengalami oksidasi. Tipe degradasi obat yg palin umum adalah degradasi obat orde nol (0) dan orde satu. 1.Degradasi orde 0 Dalam kinetika reaksi orde 0, kecepatan degradasi obat tidak tergantung pada konsentrasi reaktan. Jadi, jika tetapan kecepatan untuk reaksi degradasi orde 0 suatu senyawa adalah 0,01mol/jam maka setelah 10 jam sebanyak 0,1 mol senyawa tersebut akan mengalami degradasi. Tipe degradasi orde 0 ini merupakan tipe degradasi hidrolisis obat pada sediaan suspensi atau tablet yg mana obat pada awalnya berada dalam bentuk padat lalu secara perlahan-lahan melarut. Oleh karena itu, kecepatan degradasinya kurang lebih sama dengan degradasi dalam larutan bebas karena konsentrasi obat pada keadaan setimbang adalah konstan. 2.Degradasi orde 1 Reaksi kinetika degradasi obat orde 1 telah dipelajari secara luas. Reaksi degradsi orde 1 merupakan tipikal reaksi hidrolisis obat dalam larutan. Reaksi orde 1 semu merupakan reaksi degradasi sejenis reaksi orde 1yg melibatkan air. Karena air dalam j umlah berlebih sehingga dianggap konstan (meskipun sebenarnya air juga berperan dalam reaksi degradasi), sehingga reaksi tersebutdianggap reaksi orde 1. Pada reaksi orde 1, tetapan kecepatan ( rate constant) mempunyai unit satuan jam-1 atau detik-1. Kecepatan reaksi degradasi obat orde 1 diekspresikan oleh persamaan:
Yg mana A adalah konsntrasi obat yg berubah karena proses degradasi. Persamaan di atas dapat diekspresikan:
Dan dapat ditulis:
=
Yang mana x adalah jumlah obat yg terdegradasi dan a merupakan konsentrasi awal obat.Dengan melakukan integrasi dan penataan ulang: t=
waktu paro (half time) merupakan waktu yg dibutuhkan oleh suatu obat untuk terdegradasi sebesar 50% atau x sebesar . Waktu paro reaksi orde 1 diberikan oleh persamaan:
Jadi aspirin yg mempunyai tetapan kecepatan hidrolisis pada gugus eternya pada suhu 250C pada pH 7 sebesar 0,0133 jam-1 akan mempunyai waktu paro sebagai berikut:
Shelf life suatu obat merupakan waktu yg diperlukan suatu obat untuk degradasi 10% (yg mana x adalah 0,1a) dan diberikan pleh persamaan:
Contoh Pada pengujian tablet aspirin dengan metode kromatografi cair kinerja tinggi, sebanyak 10 tablet aspirin digerus dan dilarutkan dalam fase gerak yg terdiiri atas asetonitril -bufer fosfat pH 4,5(10:90) dan dianalisa secara berkesinambungan. Jika konstanta kecepatan degradasi aspirin dalam fase
Fisiko-Kimia Molekul Obat w.by: Wahyu Oktana F,SSi Page 5 gerak sebesar 0,0101/jam pada suhu kamar;berapa lamakah seorang analis dapat menyimpan larutan aspirin pada suhu kamar sebelum analit mengalami degradasi lebih besar daripada 0,5%? Jawab LATIHAN SOAL 1. Hitunglah pH larutan berikut (a) HCL 0,05 M;(b) NaOH 0,05 M;(c) HCl 10-8M dan (e) H2SO4 0,05 M. 2. Hitunglah pH larutan-larutan berikut: (a) Asam format 0,1 M (Ka=1,77x10-4) (b) Fenol 0,05 M (Ka=1,3x10-10) (c) Etil amin 0,15 M (Kb=5,6x10-4) 3. Tentukan banyaknya persentase asam asetat yg terionisasi (A) Pada pH 3,76 (B) Pada pH 5,76 4. Hitunglah persentase ionisasi obat-obat berikutyg mengandung 1 gugus fungsional yg dapat bersifat asam atau basa yg dapat terionisasi pada kisaran pH 0-14. (a) pH 4 (b) pH 9
2
basa pKa 9,6 atenolol HN NH OH OH F 5-flourourasil asam pKa 8,0 CH3 CH3 N H C O N C4H9 basa pKa 8,1 bupivakin N H3CO CH2COOH CH3 CO Cl asam pKa 4,5 indometasin 5. Berapakah kisaran-kisaran bufer yg dapat dibuat dari senyawa-senyawa berikut: (a) Asam karbonat dgn nilai pKa 6,38 dan 10,32 (b) Asam borat dgn niali pKa 2,34 dan 9,60 (c) Asam sitrat dgn nilai pKa 3,06;4,74,dan 5,4 6. Sebanyak 10 ml HCl 0,1M ditambahkan pada larutan bufer natrium asetat pH 4,3. Hitunglah (A) pH larutan bufer setelah penambahan HCl;(b) molaritas bufer setelah penambahan HCl;(C) pH akhir jika sebanyak 20 ml HCl ditambahkan pada 20 ml air. 7. Tentukan waktu paro obat-obat berikut yg dapat mengalami hidrolisis pada gugus fungsi esternya pada kondisi yg telah ditentukan: (a) atropin pada suhu 400C;pH 7;nilai k=2,27x10-4/jam (b) prokain pada suhu 370C;pH 8;nilai k=1,04x10-2/jam (c) benzokain pada suhu 300C;pH 9;nilai k=2,27x10-3/jams Perhitungan Ph Asam Dan Basa Dalam Larutan Air Download this Document for FreePrintMobileCollectionsReport Document Info and Rating
oabinajah Share & Embed Related Documents PreviousNext 1. p.
p.
p.
2. p.
p.
p.
3. p.
p.
p.
4. p.
p.
p.
5. p.
More from this user PreviousNext 1. 5 p.
16 p.
4 p.
Recent Readcasters
Add a Comment
Upload a Document ph asam de Search Documents - Follow Us! - scribd.com/scribd - twitter.com/scribd - facebook.com/scribd - About - Press - Blog - Partners - Scribd 101 - Web Stuff - Support - FAQ - Developers / API - Jobs - Terms - Copyright - Privacy Copyright 2011 Scribd Inc. Language: English