Laporan Akhir Praktikum Fiks

LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM
MIKROBIOLOGI PERIKANAN
(STERILISASI PERALATAN, INOKULASI MIKROBA, MIKROBA
ANTAGONIS, DAN IDENTIFIKASI MIKROBA)
Kelompok 6
Kelas B
TUHPATUR ROHMAH
SITI LAILA RUFAIDAH
EGI SAHRIL
AYUNANI AGUSTINA
ACHMAD RAFFI UKASYAH
RIDWAN ARYO NUGROHO
GILANG FAJAR
AGNESIA AMALIA SUTADI
230110140068
230110140077
230110140089
230110140095
230110140116
230110140117
230110140127
230110140128
UNIVERSITAS PADJADJARAN
FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN
PROGRAM STUDI PERIKANAN
JATINANGOR
2015
KATA PENGANTAR
Puji syukur kami haturkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, sehingga kami
dapat menyelesaikan laporan akhir praktikum ini dengan judul. Tujuan penulisan
makalah ini adalah untuk memenuhi salah satu tugas mata kuliah Mikrobiologi
Perikanan.
Laporan akhir praktikum ini membahas mengenai kegiatan-kegiatan
praktikum yang telah dilakukan yaitu sterilisasi peralatan, inokulasi mikroba,
mikroba antagonis, dan identifikasi mikroba.
Pada kesempatan ini kami tidak lupa mengucapkan terima kasih kepada :
1. Dosen mata kuliah Mikrobiologi Perikanan ;
2. Asisten Laboratorium mata kuliah Mikrobiologi Perikanan ;
3. Seluruh anggota kelompok 6 ;
4. Pihak-pihak yang tidak bisa disebutkan satu persatu.
Demikianlah harapan kami, semoga laporan akhir praktikum ini dapat
bermanfaat bagi kami dan juga pembaca tentunya. Adanya saran yang
membangun dari pembaca untuk perbaikan laporan akhir praktikum selanjutya
sangat dihargai, kami ucapkan terima kasih.
Jatinangor, Desember 2015
Penyusun
DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR ISI.......................................................................................................... ii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ iii
DAFTAR TABEL .................................................................................................iv
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... v
PRAKTIKUM I. STERILASASI PERALATAN ............................................... 1
1.1 Pendahuluan ........................................................................................... 1
1.2 Tujuan Praktikum................................................................................... 1
1.3 Landasan Teori ....................................................................................... 2
1.4 Peralatan dan Bahan ............................................................................... 5
1.5 Prosedur Kerja ....................................................................................... 5
1.6 Hasil dan Pembahasan ........................................................................... 5
1.7 Pendalaman ............................................................................................ 6
PRAKTIKUM II. INOKULASI MIKROBA ...................................................... 8
2.1 Pendahuluan ........................................................................................... 8
2.2 Tujuan Praktikum................................................................................... 8
2.3 Landasan Teori ....................................................................................... 9
2.4 Peralatan dan Bahan ............................................................................. 14
2.5 Prosedur Kerja ..................................................................................... 14
2.6 Hasil dan Pembahasan ......................................................................... 15
2.7 Pendalaman .......................................................................................... 18
PRAKTIKUM III. MIKROBA ANTAGONIS ................................................. 20
3.1 Pendahuluan ......................................................................................... 20
3.2 Tujuan Praktikum................................................................................. 21
3.3 Landasan Teori ..................................................................................... 21
3.5 Prosedur Kerja ..................................................................................... 28
3.7 Pendalaman .......................................................................................... 31
PRAKTIKUM IV. IDENTIFIKASI MIKROBA .............................................. 34
4.1 Pendahuluan ......................................................................................... 34
4.2 Tujuan Praktikum................................................................................. 35
4.3 Landasan Teori ..................................................................................... 35
4.5 Prosedur Kerja ..................................................................................... 42
4.7 Pendalaman .......................................................................................... 51
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 52
LAMPIRAN.......................................................................................................... 55
ii
DAFTAR GAMBAR
Nomor
Judul
Halaman
1.
a. Alat sterilisasi basah (autoklaf); b. Alat sterilisasi kering (oven) ......... 3
2.
Teknik penggoresan ................................................................................ 12
3.
Cawan petri yang telah dibagi menjadi empat kuadran .......................... 14
4.
Metode gores ........................................................................................... 15
5.
Lactobacillus plantarum ......................................................................... 24
6.
Kubis ....................................................................................................... 25
7.
Contoh Fungi (Zigospora) ....................................................................... 36
8.
Bakteri Escherichia coli .......................................................................... 37
9.
Bentuk-bentuk koloni mikroba ............................................................... 38
10.
Bentuk pinggir koloni mikroba ............................................................... 38
11.
Bentuk elevasi koloni mikroba ............................................................... 38
12.
Teknik permukaan koloni mikroba ......................................................... 39
13.
Golongan bakteri berdasarkan jumlah dan lokasi alat geraknya............. 40
14.
Pola pertumbuhan pada mikroba pada media agar miring ...................... 40
15.
Pola pertumbuhan pada mikroba pada media agar tegak ........................ 41
16.
Pigmentasi pada mikroba ........................................................................ 41
17.
Prosedur pengenceran ............................................................................. 43
iii
DAFTAR TABEL
Nomor
Judul
Halaman
1.
Hasil pengamatan inokulasi mikroba pada ikan Kembung ...................... 15
2.
Perlakuan perendaman ikan .................................................................... 28
3.
Bobot ikan dan drip berdasarkan perlakuan lama perendaman dalam

larutan fermentasi .................................................................................... 29
4.
Hasil pengamatan kelompok karakteristik fisik mikroba ....................... 43
5.
Hasil pengamatan (data kelas) karakteristik fisik mikroba ..................... 45
iv
DAFTAR LAMPIRAN
Nomor
Judul
Halaman
1.
Dokumentasi kegiatan sterilisasi peralatan ............................................. 56
2.
Dokumentasi kegiatan inokulasi mikroba ................................................ 56
3.
Dokumentasi kegiatan mikroba antagonis ............................................... 59
4.
Dokumentasi kegiatan identifikasi mikroba ............................................ 60
PRAKTIKUM I
STERILISASI PERALATAN
1.1
Pendahuluan
Mikrobiologi merupakan cabang dari biologi pada umumnya. Secara
pengertian mikrobiologi tidak jauh berbeda dengan biologi itu sendiri, hanya saja
kata mikro yang melekat pada mikrobiologi menimbulkan pengertian terhadap
organisme yang memiliki ukuran kecil atau mikroskopi. Mikroba adalah jasad
hidup yang ukurannya kecil sering disebut mikroorganisme atau jasad renik.
Pengertian alat dan sterilisasi merupakan hal mendasar yang harus
diketahui dan dikuasai karena penting dalam melaksanakan kegiatan-kegiatan
mikrobiologi selanjutnya. Objek yang terbebas dari mikroba disebut dengan steril.
Sterilisasi sangat diutamakan baik alat-alat yang siap pakai maupun medianya.
Sterilisasi merupakan suatu usaha untuk membebaskan alat-alat dan
bahan-bahan dari segala macam bentuk kehidupan, terutama mikroba, sehingga
dalam sterilisasi nanti alat-alat tidak terkontaminasi dengan pihak luar. Oleh
karena itu, sangat perlu mengenal teknik sterilisasi karena merupakan dasar-dasar
kerja dalam laboratorium mikrobiologi. Steril merupakan syarat mutlak
keberhasilan kerja dalam laboratorium mikrobiologi. Dalam melakukan sterilisasi,
diperlukan teknik-teknik agar sterilisasi dapat dilakukan secara sempurna, dalam
arti tidak ada mikroorganisme lain yang mengkontaminasi media.
Berdasarkan uraian di atas, maka perlu diadakan praktikum sterilisasi alat
dan bahan biakkan guna memberikan pemahaman tentang hal-hal yang berkaitan
dengan sterilisasi serta menambah pengetahuan dan keterampilan tentang teknik
atau tata cara sterilisasi dalam mkrobiologi.
1.2
Tujuan Praktikum
Tujuan dari praktikum ini adalah untuk menghasilkan peralatan yang steril
sehingga dapat digunakan untuk melaksanakan pekerjaan yang berkaitan dengan

mikroba.
1.3
Landasan Teori
1.3.1
Pengertian Sterilisasi
Sterilisasi adalah suatu proses di mana kegiatan ini bertujuan untuk
membebaskan alat ataupun bahan dari berbagai macam mikroorganisme. Suatu

bahan bisa dikatakan steril apabila bebas dari mikroorganisme hidup yang patogen
maupun tidak baik dalam bentuk vegetatif maupun bentuk nonvegetatif (spora)
(Subaghdja, 2010). Sterilisasi harus dapat membunuh renik yang paling tahan
panas yaitu spora bakteri (Fardiaz, 1992).
Adanya pertumbuhan mikroorganisme menunjukkan bahwa pertumbuhan
bakteri masih berlangsung dan tidak sempurnanya proses sterilisasi. Jika sterilisasi
berlangsung sempurna, maka spora bakteri yang merupakan bentuk paling resisten
dari kehidupan mikrobia akan diluluhkan (Lay dan Hatowo, 1992).
Sterilisasi
dilakukan
dengan
tujuan
utama
yaitu
mematikan,
menyingkirkan atau mengahambat pertumbuhan mikroorganisme agar dapat

mencegah inflasi pada manusia, hewan dan tumbuhan; mencegah makanan dan
lain-lain
menjadi
rusak;
mencegah
gangguan
kontaminasi
terhadap
mikroorganisme; dan mencegah kontaminasi bahan-bahan yang dipakai.
1.3.2
Macam-Macam Sterilisasi
Ada tiga cara utama yang umum dipakai dalam proses sterilisasi yaitu
penggunaan panas (fisik), penggunaan bahan kimia (kimiawi), dan penyaringan

atau filtrasi (mekanik). Pemilihan metode didasarkan pada sifat bahan yang
disterilkan (Ratna, 1993). Namun, diantara cara-cara tersebut, teknik sterilisasi
yang umum digunakan adalah metode sterilisasi menggunakan uap air panas
bertekanan atau menggunakan prinsip kerja autoklaf. Menurut Ratna (1993),
berikut ini adalah jenis proses sterilisasi:
a)
Pemanasan
Sterilisasi secara fisik dilakukan dengan cara pemanasan atau penyinaran.
Pemanasan dapat dilakukan dengan cara pemijaran, pemanasan kering,
menggunakan uap air panas, dan menggunakan uap air panas bertekanan
(Agalloco, 2008). Bila panas digunakan bersama-sama dengan uap air
maka disebut sterilisasi panas lembut atau sterilisasi basah, bila tanpa
kelembapan maka disebut sterilisasi panas kering atau sterilisasi kering
(Hadioetomo, 1993). Sterilisasi basah biasanya dilakukan di dalam
autoklaf atau sterilisator uap yang mudah diangkat (portable) dengan
menggunakan air jenuh bertekanan pada suhu 121oC selama 15 menit.
Sterilisasi basah dapat digunakan untuk mensterilkan bahan apa saja yang
dapat ditembus uap air (misalnya minyak) dan tidak rusak bila dipanaskan
dengan suhu yang berkisar antara 110oC dan 121oC. Bahan-bahan yang
biasanya disterilkan dengan cara ini antara lain medium biakan yang
umum, air suling, peralatan laboratorium, biakan yang dibuang, medium
yang tercemar, dan bahan-bahan dari karet. Sedangkan untuk sterilisasi
kering dapat diterapkan dengan cara pemanasan langung sampai merah,
pembakaran, dan sterilisasi dengan udara panas (oven). Pemanasan kering
sering digunakan dalam sterilisasi alat-alat gelas di laboratorium. Dalam
sterilisasi panas kering, bahan yang sering disterilkan adalah pipet, tabung
reaksi, cawan petri dari kaca, dan barang-barang pecah belah lainnya.
Sebelum melakukan sterilisasi udara panas kering ini terlebih dahulu
membungkus alat-alat gelas dengan kertas payung atau aluminium foil.
Gambar 1. a. Alat sterilisasi basah (autoklaf); b. Alat sterilisasi kering (oven)

(Sumber: a. alexschemistry.blogspot.com; b. www.alatkesehatan.info)
b)
Penyaringan atau filtrasi

Penyaringan telah banyak digunakan untuk mensterilkan medium
laboratorium dan larutan yang dapat mengalami kerusakan jika
dipanaskan. Penyaringan dengan ukuran pori-pori 0,45 mikron atau kurang
akan menghilangkan jasad renik yang terdapat di dalam larutan tersebut.

Penyaring yang banyak digunakan terbuat dari gelas sinter, selulsa, dan
asbestos atau penyaring Seitz. Pori-pori dari penyaring tersebut berkiras
antara 0,22 sampai 10 mikron. Pori-pori yang lebih kasar biasanya
digunakan untuk penjernihan sebelum digunakan pori-pori yang lebih
halus, sehingga tidak terjadi penyumbatan. Penyaring yang biasa
digunakan untuk bakteri tidak dapat menahan atau menyaring virus atau
mikoplasma. Beberapa contoh bahan yang biasa disterilkan dengan cara
ini adalah serum, larutan bikarbonat, enzim, toksin, bakteri, medium
sintetik tertentu, dan antibiotik.
c)
Penggunaan bahan kimia

Desinfektan adalah zat yang dapat membunuh bakteri. Senyawa kimia
yang banyak digunakan sebagai desinfektan antara lain larutan AgNO3,
CuSO4, HgCl2, ZnO, serta alkohol dan campurannya. Zat-zat yang dapat
membunuh atau menghambat pertumbuhan bakteri dapat dibagi atas
garam-garam, logam, fenol, dan senyawa-senyawa lain yang sejenis,
formaldehida,yodium, alkohol, klor, zat warna, detergen, sulfonamida, dan
antibiotik. Umumnya bakteri yang muda kurang daya tahannya terhadap
desinfektan daripada bakteri yang tua. Kepekatan, konsentrasi dan
lamanya berada di bawah pengaruh desinfetan merupkan faktor-faktor
yang berperan dalam sterilisasi jenis ini.
1.4
Peralatan dan Bahan
1.4.1
Alat
Alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah sebagai berikut :
Oven sebagai alat sterilisasi dengan prinsip panas kering
Keranjang plastik sebagai wadah peralatan yang disterilisasi
Gunting digunakan untuk memotong benang
1.4.2
Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah sebagai berikut :
Peralatan praktikum yang akan disterilisasi yaitu cawan petri, tabung

reaksi, labu erlenmeyer, gelas ukur, gelas kimia, pinset, dan spatula.
1.5
Benang yang digunakan untuk mengikat pada saat pembungkusan
Kertas coklat sebagai pembungkus peralatan yang akan disterilisasi
Prosedur Kerja
Dalam praktikum ini langkah-langkah yang harus dilakukan antara lain :
1. Dicuci peralatan yang akan disterilisasi
2. Ditiriskan agar cairan sisa tidak menempel pada alat
3. Dibungkus dengan kertas coklat dan diikat menggunakan benang
4. Diletakkan dan disusun peralatan di dalam oven
5. Dilakukan sterilisasi menggunakan suhu 121oC selama 30 menit
6. Disimpan peralatan yang sudah disterilisasi pada tempatnya
1.6
Hasil dan Pembahasan

Pada praktikum kali ini dilakukan sterilisasi peralatan praktikum.
Sterilisasi bertujuan untuk mematikan, menyingkirkan atau menghambat

pertumbuhan mikroorganisme. Metode sterilisasi yang digunakan pada praktikum
ini adalah sterilisasi kering. Disebut sterilisasi kering karena proses sterilisasi
menggunakan oven. Namun, tidak semua peralatan dapat di sterilisasi kering,
hanya peralatan yang mampu bertahan pada suhu tinggi saja seperti peralatanperalatan yang mampu bertahan pada suhu tinggi saja seperti peralatan yang
digunakan pada praktikum ini yaitu cawan petri, tabung reaksi, labu erlenmeyer,
gelas ukur, gelas kimia, pinset dan spatula.
Suhu oven yaitu 121oC dan di oven selama 30 menit. Alasan digunakan
suhu 121oC adalah karena air mendidih pada suhu tersebut jika digunakan tekanan
15 psi. untuk tekanan 0 psi pada ketinggian di permukaan laut air mendidih pada
suhu 100oC, sedangkan untuk autoklaf yang diletakan pada ketinggian yang sama,
menggunakan tekanan 15 psi maka air akan mendidih pada suhu 121oC. Suhu
yang tinggi inilah yang akan membunuh mikroorganisme. Autoklaf terutama

ditujukan untuk membunuh endosproda yaitu sel resisten yang diproduksi oleh
bakteri, sel ini terhadap pemanasan, kekeringan dan antibiotik.
Sebelum dimasukan kedalam oven, terlebih dahulu peralatan dibungkus
dengan kertas coklat. Tujuan pembungkusan dengan kertas coklat adalah agar
panas yang dihasilkan oleh oven dapat terserap secara merata. Warna coklat
merupakan pigmen warna yang dapat menyerap panas secara optimal, sehingga
panas yang diserapkan rata pada semua sisi kertas karena apabila penyerapan
panas tidak merata maka menyebabkan proses sterilisasi tidak merata.
Selain itu, dalam membungkus peralatan tersebut diusahakan serapat
mungkin agar tidak ada celah mikroba untuk hinggap kedalam peralatan tersebut.
Setelah dilakukan sterilisasi, maka peralatan tersebut dapat digunakan untuk
melaksanakan praktikum karena sudah steril dari mikroba.
Sterilisasi dapat berjalan baik bilamana seorang praktikan sebelumnya
telah dibekali dengan pengetahuan mengenai pengenal analat
sehingga pada
praktikum ini tujuan sterilisasi dapat tercapai dan peralatan serta bahan yang
disterilisasi tersebut tidak rusak dan juga dapat dengan tepat mengambil
keeputusan metode sterilisasi yang akan dipakai.
1.7
Pendalaman
Untuk meningkatkan pemahaman praktikan mengenai materi praktikum,
berikut ini diberikan beberapa pertanyaan berkaitan dengan materi praktikum

yang harus dijawab oleh setiap praktikan :
1. Mengapa digunakan suhu sterilisasi 121oC? Jelaskan.
Jawaban: Alasan digunakan 121C atau 249,8F adalah karena air mendidih
pada suhu tersebut jika digunakan tekanan 15 psi. Untuk tekanan 0
psi pada ketinggian di permukaan laut (sea level) air mendidih
pada suhu 100C, sedangkan untuk autoklaf yang diletakkan pada
ketingian yang sama, mengunakan tekanan 15 psi maka air akan
mendidih pada suhu 121C. Semua bentuk kehidupan akan mati
jika dididihkan pada suhu 121C dan tekanan 15 psi selama 15
menit.
Suhu
yang
tinggi
inilah
yang
akan
membunuh
mikroorganisme. Autoklaf terutama ditujukan untuk membunuh

endospora, yaitu sel resisten yang diproduksi oleh bakteri, sel ini
tahan terhadap pemanasan, kekeringan, dan antibiotik. Pada spesies
yang sama, endospora dapat bertahan pada kondisi lingkungan
yang dapat membunuh sel vegetatif bakteri tersebut.
2. Apakah peranan kertas coklat dalam proses sterilisasi peralatan? Jelaskan.
Jawaban: Tujuan pembungkusan dengan kertas coklat ialah agar panas yang
dihasilkan oleh oven pada sterilisasi kering dapat terserap secara
merata. Warna coklat merupakan pigmen warna yang dapat
menyerap panas secara optimal, sehingga panas yang diserap akan
rata pada semua sisi kertas karena apabila penyerapan panas
tersebut tidak merata, maka dapat menimbulkan warna kuning
seperti noda pada peralatan yang disterilisasi tersebut. Apabila ini
terjadi maka percobaan tidak dapat berjalan optimal. Kemudian,
dalam membungkus peralatan dengan kertas coklat tersebut
usahakan serapat mungkin, agar tidak ada celah bagi mikroba
untuk hinggap kedalam peralatan tersebut.
PRAKTIKUM II
INOKULASI MIKROBA
2.1
Pendahuluan
Mikroba berukuran sangat kecil sehingga sulit untuk diamati tanpa
menggunakan peralatan bantu. Salah satu upaya yang dapat dilakukan untuk
mempelajari mikroba adalah dengan melakukan inokulasi mikroba tersebut.
Inokulasi adalah penanaman mikroba dalam media buatan. Bila proses inokulasi
dilakukan secara benar, mikroba akan tumbuh dan berkembang sehingga mudah
untuk diamati.
Selain untuk mempelajari mikroba, inokulasi juga berperan dalam
peremajaan maupun perbanyakan mikroba. Keberhasilan inokulasi berpengaruh
positif terhadap koleksi mikroba maupun pemanfaatan mikroba.
Inokulasi mikroba dapat dilakukan pada media kaldu atau media padat.
Inokulasi mikroba dengan media padat dapat dilakukan pada agar miring, tegak
dan lempeng. Pada media agar lempeng, proses inokulasi dapat dilakukan dengan
menggunakan metode gores (streak method), tuang (pour plate) dan hapus (swab
method)
Pemilihan dan penentuan media inokulasi yang akan digunakan tergantung
dari tujuan inokulasi itu sendiri. Untuk kebutuhan produksi digunakan media
kaldu sebagai media inokulasi, sedangkan untuk tujuan peremajaan atau
identifikasi mikroba digunakan media padat.
2.2
Tujuan Praktikum
Tujuan dari percobaan inokulasi mikroba ini adalah untuk mempelajari
teknik inokulasi biakan mikroba pada medium steril. Mikroba dapat berkembang
secara alami ataupun buatan. Teknik inokulasi merupakan suatu pekerjaan
memindahkan bakteri dan jamur dari medium yang lama ke medium yang baru
dengan tingkat ketelitian yang sangat tinggi. Dengan demikian akan diperoleh
biakan mikroba yang dapat digunakan untuk pembelajaran mikrobiologi. Pada
praktikum ini akan dilakukan teknik inokulasi biakan mikroba pada medium
steril untuk mempelajari mikrobiologi dengan satu kultur murni saja. Substrat
yang digunakan dalam mengembangkan dan menumbuhkan mikroba disebut
media. Setelah mengikuti praktikum mengenai inokulasi mikroba, mahasiswa
memahami dan mampu melakukan inokulasi mikroba.
2.3
Landasan Teori
2.3.1
Inokulasi
Penanaman bakteri dan jamur atau mikroba lainnya biasa disebut juga
inokulasi. Inokulasi adalah pekerjaan memindahkan bakteri dan jamur atau

mikroba dari medium yang lama ke medium yang baru dengan tingkat ketelitian
yang sangat tinggi. Untuk melakukan penanaman bakteri (inokulasi) terlebih
dahulu diusakan agar semua alat yang ada dalam hubungannya dengan medium
agar tetap steril, hal ini agar menghindari terjadinya kontaminasi.
Ada beberapa tahap yang harus dilakukan sebelum melakukan teknik
penanaman bakteri dan jamur atau mikroba (inokulasi) yaitu :
1.
Menyiapkan ruangan
Ruang tempat penanaman bakteri harus bersih dan keadannya harus steril
agar tidak terjadi kesalahan dalam pengamatan atau percobaaan .dalam
labotarium pembuataan serum vaksin dan sebagainya. Inokulasi dapat
dilakukan dalam sebuah kotak kaca (encast) udara yang lewat dalam kotak
tersebut dilewatkan saringan melalui suatu jalan agar tekena sinar
ultraviolet.
2.
Pemindahan dengan dengan pipet

Cara ini dilakukan dalam penyelidikan air minum atau pada penyelidikan
untuk diambil 1 ml contoh yang akan diencerkan oleh air sebanyak 99 ml
murni.
3.
Pemindahan dengan kawat inokulasi.

Ujung kawat inokulasi sebaiknya dari platina atau nikel. Ujungnya boleh
lurus atau berupa kolongan yang diametrnya 1-3 mm. Dalam melakukan
penanaman bakteri kawat ini terlebih dahulu dipijarkan sedangkan sisanya
10
cukup dilewatkan nyala api saja setelah dingin kembali kawat itu
disentuhkan lagi dalam nyala.
2.3.2
Teknik Inokulasi
Ada beberapa metode yang digunakan untuk mengisolasi biakan murni
mikroba yaitu :
1.
Metode Gores
Teknik ini lebih menguntungkan jika ditinjau dari sudut ekonomi dan
waktu, tetapi memerlukan ketrampilan-ketrampilan yang diperoleh dengan
latihan. Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang
terpisah. Inokulum digoreskan di permukaan media agar nutrien dalam
cawan petri dengan jarum pindah (lup inokulasi). Diantara garis-garis
goresan akan terdapat sel-sel yang cukup terpisah sehingga dapat tumbuh
menjadi koloni. Cara penggarisan dilakukan pada medium pembiakan
padat bentuk lempeng. Bila dilakukan dengan baik teknik inilah yang
paling praktis. Dalam pengerjaannya terkadang berbeda pada masingmasing laboratoran tapi tujuannya sama yaitu untuk membuat goresan
sebanyak mungkin pada lempeng medium pembiakan.
2.
Metode tebar
Setetes inokolum diletakan dalam sebuah medium agar nutrien dalam
cawan petri dengan menggunakan batang kaca yang bengkok dan steril.
Inokulasi itu disebarkan dalam medium batang yang sama dan dapat
digunakan menginokulasikan pinggan kedua untuk dapat menjamin
penyebaran bakteri yang merata dengan baik. Pada beberapa pinggan akan
muncul koloni-koloni yang terpisah.
3.
Metode tuang
Inokulasi menggunakan media cair dilakukan dengan cara pengenceran.
Dasar melakukan pengenceran adalah penurunan jumlah mikroorganisme
sehingga pada suatu saat hanya ditemukan satu sel di dalam tabung
(Winarni, 1997).
11
4.
Metode tusuk
Metode tusuk yaitu dengan dengan cara meneteskan atau menusukan
ujung jarum ose yang didalamnya terdapat inokolum, kemudian
dimasukkan ke dalam media (Winarni, 1997).
2.3.3
Teknik Biakan Murni

Teknik biakan murni untuk suatu spesies dikenal dengan beberapa cara,
yaitu:
a.
Cara pengenceran
Caranya adalah dengan mengencerkan suatu suspensi yang berupa
campuran bermacam-macam spesies kemudian diencerkan dalam suatu
tabung tersendiri. Dari pengenceran ini kemudian diambil 1 ml untuk
diencerkan lagi, diambil lagi untuk disebarkan pada suatu medium padat.
Kemungkinan besar kita akan mendapatkan beberapa koloni tumbuh
dalam medium tersebut, tetapi mungkin juga kita memperoleh satu koloni
saja. Dalam hal demikian, kita telah memperoleh satu koloni murni, dan
selanjutnua spesies ini dapat kita jadikan piaraan murni (biakan murni).
b.
Cara penuangan
Caranya adalah dengan mengambil sedikit sampel campuran bakteri yang
sudah diencerkan dan sampel itu kemudian disebarkan dalam satu medium
dari kaldu dan gelatin encer. Setelah medium mengental, maka selang
beberapa jam kemudian nampaklah koloni yang masing-masing dapat
dianggap murni.
c.
Cara penggesekan atau penggoresan

Cara ini lebih menguntungkan bila ditinjau dari sudut ekonomi dan waktu,
tetapi memerlukan keterampilan yang diperoleh dari latihan. Penggoresan
yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah. Tetapi
kelemahan cara ini adalah bakteri-bakteri anaerob tidak dapat tumbuh.
Ada beberapa teknik penggesekkan yakni goresan T, goresan kuadran,
goresan radian, dan goresan sinambung.
12
Gambar 2. Teknik Penggoresan

(Sumber : belajarbiokimia.wordpress.com)
2.3.4
Perbedaan Inokulasi Jamur dan Bakteri

Perbedaan inokulasi jamur dan bakteri adalah :
Inokulasi jamur menggunakan jarum ose bentuk batang. Hifa yang

berbentuk seperti benang mudah diambil dengan jarum ose batang dan
mudah sekali tumbuh di dalam suatu media.
Inokulasi bakteri menggunakan jarum ose bentuk bulat. Pada ujung

jarum ose yang berbentuk bulat, bakteri akan dapat terambil dalam
jumlah yang relatif banyak (Rohimat, 2002).
2.3.5
Macam-Macam Media Inokulasi

Ada beberapa macam media yang digunakan untuk inokulasi yaitu :
Mixed culture yaitu media yang berisi dua atau lebih spesies
mikroorganisme.
Plate culture yaitu media padat dalam petridish.
Slant culture yaitu media padat dalam tabung reaksi.
13
Stap culture yaitu media padat dalam tabung reaksi, tetapi

penanamannya dengan cara penusukan.
Liquid culture yaitu media cair dalam tabung reaksi.
Shake culture yaitu media cair dalam tabung reaksi
yang
penanamannya dikocok.
Suspensi mikroba digoreskan pada agar lempengan, agar miring atau
media cair. Sifat biakan dari suatu mikroorganisme tergantung pada
penampilannya pada berbagai media.
1.
Agar lempengan
Koloni yang tumbuh diatas lempeng perlu diperhatikan warna, sifat
tembus cahaya, pinggiran, sifat permukaan, dan bentuknya.
2.
Agar miring
Sifat pertumbuhan pada agar miring terlihat seperti tidak ada, sedikit, atau
subur. Pengamatan pembentukan warna koloni. Mikroba yang tumbuh
dengan subur diatas permukaan suatu media akan telihat lebih buram
dibanding dengan pertumbuhan yang tidak subur.
3.
Media cair
Sifat pertumbuhan pada bagian permukaan, dibawah permukaan, dan dasar
tabung dapat terlihat dengan jelas. Pada beberapa mikroba terlihat
pembentukan partikel yang tebal pada lapisan pemukaan. Dibawah lapisan
permukaan dapat terlihat pertumbuhan yang keruh, bergranula, atau
flokulen, sedangkan pada bagian dasar kadang terlihat sedimen berupa
granula kental atau terdiri dari partikel besar.
2.4
Peralatan dan Bahan
2.4.1
Alat
Tabung reaksi sebagai wadah yang berisi media kultur agar steril
Cawan petri sebagai tempat inokulasi mikroba
Jarum ose sebagai alat untuk menggoreskan biakan pada media agar
14
Lampu bunsen untuk memanaskan jarum ose dan cawan petri agar
steril
Inkubator yang digunakan sebagai lemari steril tempat inkubasi untuk

menumbuhkan kultur mikroba.
Spidol sebagai alat untuk membagi cawan petri menjadi empat

kuadran.
2.4.2
Bahan
Ikan (diambil daging, insang, usus, serta air cuciannya) sebagai sumber
mikroba.
2.5
Media agar sebagai inokulasi mikroba.
Prosedur Kerja
1. Disiapkan tabung reaksi yang berisi media kultur agar steril
2. Digunakan spidol untuk membagi cawan petri menjadi empat kuadran
dengan cara menulis di bagian bawah cawan petri.
Gambar 3. Cawan petri yang telah dibagi menjadi empat kuadran

(Sumber : Modul praktikum inokulasi mikroba)
3.
Disediakan ikan sebagai sumber mikroba.
4.
Dilakukan inokulasi biakan mikroba pada kuadaran tersebut dengan

menggunakan metode gores.
15
Gambar 4. Metode gores

(Sumber : Modul praktikum inokulasi mikroba)
5.
Dinkubasi cawan petri dalam inkubator pada suhu 370C selama 24

jam.
6.
Dilakukan pengamatan dan disajikan dalam bentuk dokumentasi dan

deskripsi.
2.6
2.6.1
Hasil Pengamatan
Berdasarkan pengamatan yang telah dilakukan, diperoleh data hasil
pengamatan mengenai inokulasi mikroba pada ikan kembung sebagai berikut :

Tabel 1. Hasil pengamatan inokulasi mikroba pada ikan Kembung
Lokasi Mikroba : Ikan Kembung
Media Inokulasi
Dokumentasi
Deskripsi
Insang
Bentuk bulat dan

warna kuning
Bentuk bulat dan

warna putih
kekuningan
Jumlah 44
16
Bentuk bulat dan

warna putih
kekuningan
Bentuk tidak
beraturan dan
Kulit
warna putih
kekuningan
Bentuk lonjong
dan warna kuning
Jumlah 52
Bentuk bulat dan

warna putih
kekuningan
Bentuk tidak
beraturan dan
Saluran Pencernaan
warna putih
kekuningan
Jumlah 21
Bentuk bulat dan

warna putih
kekuningan
Daging
Bentuk tidak
beraturan dan
warna putih
Jumlah 15
17
2.6.2
Pembahasan
Pada praktikum mengenai inokulasi mikroba ini, diawali dengan
pengambilan sampel dari insang, air bilasan, saluran pencernaan (usus), dan
daging dengan media agar supaya tumbuh mikroba. Bila inokulasi dilakukan
dengan benar mikroba akan tumbuh dan berkembang sehingga mudah untuk
diamati. Praktikan melakukan inokulasi dengan menggunakan metode gores.
Teknik penggoresan ini lebih menguntungkan jika ditinjau dari sudut ekonomi
dan waktu, tetapi memerlukan keterampilan-keterampilan yang diperoleh dengan
latihan.
Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah.
Inokulum digoreskan di permukaan media agar nutrien dalam cawan petri dengan
jarum pindah (lup inokulasi). Di antara garis-garis goresan akan terdapat sel-sel
yang cukup terpisah sehingga dapat tumbuh menjadi koloni (Winarni, 1997). Cara
penggarisan dilakukan pada medium pembiakan padat bentuk lempeng. Bila
dilakukan dengan baik teknik inilah yang paling praktis. Dalam pengerjaannya
terkadang berbeda pada masing-masing laboratoran tapi tujuannya sama yaitu
untuk membuat goresan sebanyak mungkin pada lempeng medium pembiakan.
Ada beberapa teknik dalam metode goresan, yakni : Goresan T, goresan kuadran
c, goresan radiand, goresan sinambung.
Media agar untuk bakteri digunakan media NA (Nutrien Agar) karena
yang komposisinya ekstrak daging sapi didalamnya mengandung protein,
karbohidrat, vitamin, dan sedikit lemak juga terdapat adanya beberapa faktor
pertumbuhan yang tidak mampu mensintesis mikroorganisme. Medium NA
berfungsi untuk membiakan berbagai macam mikroorganisme serta kultur bakteri.
Pada praktikum ini kita mempelajari bagaimana melakukan teknik
inokulasi
biakan
mikroorganisme
pada
medium
steril
sehingga
bisa
mendefinisikan bahwa teknik inokulasi adalah pekerjaan memindahkan bakteri

dari medium lama ke medium baru dengan tingkat ketelitian sangat tinggi dan
dituntut untuk bekerja secara aseptik yaitu bebas dari pengaruh kontaminan
mikroorganisme yang lain. Teknik aseptik dilakukan dengan penyediaan alat-alat
kerja yang steril dan bekerja didekat api bunsen agar terhindar dari kontaminan
18
udara. Pada waktu inokulasi, jarum yang digunakan untuk meindahkan mikroba
harus dipijarkan diatas api segera sebelum dan sesudah melakukan pemindahan.
Pemanasan ini menghancurkan semua bentuk kehidupan yang ada pada
permukaan jarum atau alat pemindahan, setelah diinokulasi biakan bakteri
disimpan dan diinkubasi dalam lingkungan yang sesuai untuk petumbuhan,
(Dwidjoseputro, 1998)
Pada proses inokulasi yang berlangsung selama 24 jam, mikroba yang
tumbuh pada setiap sampel berbentuk bulat dan tidak beraturan, ini
mengindikasikan bahwa mikroorganisme yang tumbuh pada media adalah jamur
dan bakteri karena bakteri bentuknya bulat dan berwarna kuning, sedangkan
jamur berbentuk tidak beraturan dan berwarna putih. Warnanya pun rata-rata
putih kekuningan. Pada keempat sampel yang berbeda terdapat jumlah koloni
bakteri sebanyak 44 pada insang, 52 pada air cucian, 21 pada saluran pencernaan
(usus), dan 45 pada sampel daging.
2.7
Pendalaman
Untuk meningkatkan pemahaman praktikan mengenai inokulasi mikroba,
berikut ini diberikan beberapa pertanyaan berkaitan dengan materi praktikum

yang harus dijawab oleh setiap praktikan :
1.
Jenis mikroba apa saja (bakteri, jamur atau khamir/ragi) yang tumbuh pada
media kultur Anda ? Jelaskan mengapa Anda berkesimpulan demikian.
Jawaban : Mikroba yang tumbuh pada media kami yaitu bakteri dan
jamur. Ini ditandai dengan bentuk mikroba yang bulat dan tidak
beraturan, serta warna mikroba putih dan kuning karena bakteri
bentuknya bulat dan berwarna kuning, sedangkan jamur
berbentuk tidak beraturan dan berwarna putih.
2.
Apakah pada media kultur tersebut mungkin tumbuh virus? Jelaskan

jawaban Anda.
Jawaban : Tidak mungkin, karena pada dasarnya virus dapat hidup dan
tumbuh apabila ada inang yang hidup dan berkembang.
19
3.
Jelaskan mengapa terjadi kondisi seperti dijelaskan pada jawaban

pertanyaan nomor 1 ?
Jawaban : Karena medium yang kami gunakan baik untuk pertumbuhan
mikroorganisme, selain itu bakteri dan jamur dapat tumbuh
karena dipengaruhi beberapa faktor, yaitu suhu, cahaya,
pengeringan (kelembaban), keasaman (pH), pengaruh O2 dari
udara, pengaruh tekanan osmotik, pengaruh mikroorganisme
disekitarnya, dan pengaruh zat kimia (desinfektan) terhadap
mikroba.
4.
Jelaskan tujuan utama inokulasi mikroba pada media agar tegak, agar
miring, dan agar lempeng.
Jawaban : Pada media agar tegak memudahkan mengidentifikasi bentuk
dan morfologi mikroba karena tidak terbentukya koloni seperti
pada agar miring. Pada media agar miring dapat meningkatkan
jumlah atau kuantitatif mikroba yang dapat dilihat dengan mata
telanjang.
Pada
media
agar
lempeng
berfungsi
untuk
menumbuhkan, meremajakan mikroba, dan mendapatkan

populasi mikroba yang murni.
PRAKTIKUM III
MIKROBA ANTAGONIS
3.1
Pendahuluan
Ikan merupakan salah satu sumber protein yang sering dikonsumsi
masyarakat. Hal ini dikarenakan ikan mudah di dapat dan harganya yang relatif
murah jika dibandingkan dengan sumber protein hewani seperti daging ayam
maupun sapi. Ikan banyak dipasarkan dalam bentuk segar maupun filet. Namun,
dibandingkan dengan bahan pangan lain, ikan memiliki sifat yang mudah rusak
(Perishable food), rentan terhadap kontaminasi, dan penurunan mutu. Oleh karena
itu, harus dilakukan penanganan dan pengolahan yang cermat.
Proses pembusukan merupakan salah satu indikator dari proses
kemunduran mutu yang mengakibatkan semakin singkatnya masa simpan pada
ikan dan dapat menurunkan nilai jualnya. Proses pembusukan dapat dihambat
dengan beberapa cara, salah satunya dengan penyimpanan pada suhu rendah.
Penyimpanan pada suhu rendah diketahui dapat memperlambat proses
kemunduran mutu dan memperpanjang masa hidup jaringan-jaringan di dalam
bahan pangan dengan menghambat aktivitas enzim dan bakteri pembusuk.
Namun, beberapa bakteri pembusuk mampu bertahan pada penyimpanan suhu
rendah. Oleh karena itu, penggunaan suhu rendah perlu dikombinasikan dengan
metode pengawetan yang lain. Penggunaan zat antibakteri dapat digunakan untuk
pengawetan bahan pangan. Zat antibakteri ada yang berasal dari bahan alami dan
artifisial. Namun, konsumen cenderung lebih memilih produk yang diawetkan
menggunakan bahan pengawet alami daripada menggunakan bahan artifisial atau
zat kimia berbahaya lainnya. Pengawetan bahan pangan secara alami salah
satunya dengan memanfaatkan bakteri yang bersifat antagonis terhadap bakteri
pembusuk dan patogen pada bahan pangan, misalnya Bakteri Asam Laktat (BAL).
Larutan fermentasi kubis dapat digunakan sebagai starter Bakteri Asam
Laktat. Selain memproduksi Bakteri Asam Laktat, larutan fermentasi kubis juga
mengandung senyawa antibakteri seperti asam organik dan hasil metabolit lainnya
20
21
yang dapat berfungsi secara langsung untuk menghambat atau membunuh bakteri
pembusuk.
Mengingat betapa pentingnya untuk mengetahui teknologi fermentasi dan
teknologi pengawetan ikan, maka praktikum mikroba antagonis ini dilakukan agar
mahasiswa mampu memanfaatkan kubis sebagai alternatif bahan pengawet alami
pada produk perikanan yang murah dan efisien serta bisa diterapkan dalam
penanganan ikan sehingga dapat meningkatkan masa simpan produk perikanan
pada suhu rendah.
3.2
Tujuan Praktikum
Tujuan dari praktikum ini adalah untuk memberikan pemahaman kepada
praktikan mengenai teknologi fermentasi dan teknologi pengawetan ikan.
3.3
Landasan Teori
3.3.1
Mikroba Antagonis
Mikroba antagonis adalah mikroba yang memiliki sifat berlawanan dengan
mikroba merugikan seperti mikroba pembusuk, pathogen, atau yang tidak

diharapkan. Mikroba antagonis sering disebut sebagai mikroba menguntungkan
karena dapat digunakan untuk mencegah aktivitas mikroba pembusuk yang
merugikan.
Mikroba antagonis telah digunakan untuk berbagai keperluan manusia.
Banyak manfaat telah diperoleh, baik untuk kesehatan, menghambat aktivitas
penyakit, atau menghambat proses pembusukan. Penggunaan mikroba antagonis
sebagai mikroba pengawet sangat mudah. Bakteri ini dapat diperoleh dalam
bentuk biakan murni atau diproduksi secara sederhana
Pemanfaatan mikroba antagonis dapat dilakukan secara langsung dan tidak
langsung. Pemanfaatan secara langsung yaitu dengan cara memasukkan
(menginokulasi) biakan jasad renik antagonis ke dalam substrat melalui inokulasi
starter. Sedangkan secara tidak langsung diakukan dengan memacu timbulnya
antagonism secara alami misalnya dengan mengubah atau memodifikasi
lingkungan dengan menambahkan bahan organic, atau bahan-bahan mineral yang
22
dapat memacu pertumbuhan dan kegiatan jasad antagonis dan menekan jasad
renik penyebab penyakit atau pembusuk.
Mekanisme kerja mikroba antagonis yaitu sebagai berikut :
1.
Menimbulkan persaingan makanan atau nutrisi sedemikian rupa sehingga

mikroba yang merugikan atau mikroba pembusuk sulit mendapatkan
makanan
2.
Menurunkan pH lingkungan sehingga aktivitas mikroba pembusuk

terganggu dan menjadi tidak dapat bertahan hidup
3.
Menghasilkan produk metabolit yang bersifat racun bagi mikroba-mikroba

merugikan
Mikroba antagonis banyak jenisnya. Bakteri Asam Laktat termasuk ke
dalam mikroba antagonis. Bakteri Asam Laktat (BAL) adalah kelompok bakteri
gram positif berbentuk kokus atau batang, tidak membentuk spora, suhu optimum
400oC, pada umumnya tidak motil, bersifat anaerob, katalase negatif dan
oksidase positif, dengan asam laktat sebagai produk utama fermentasi karbohidrat.
Sifat-sifat khusus Bakteri Asam Laktat adalah mampu tumbuh pada kadar gula,
alkohol, dan garam yang tinggi, mampu memfermentasikan monosakarida dan
disakarida (Syahrurahman dkk, 1994).
Sebagian besar BAL dapat tumbuh sama baiknya di lingkungan yang
memiliki dan tidak memiliki O2 (tidak sensitif terhadap O2), sehingga termasuk
anaerob aerotoleran. Bakteri yang tergolong dalam BAL memiliki beberapa
karakteristik tertentu seperti tidak memiliki porfirin dan sitokrom, katalase
negatif, tidak melakukan fosforilasi transpor elektron, dan hanya mendapatkan
energi dari fosforilasi substrat. Berikut merupakan beberapa jenis Bakteri Asam
Laktat Sumanti (2008) antara lain sebagai berikut:
1. Streptococcus thermophilus, Streptococcus lactis, dan Streptococcus cremoris.
Semuanya ini adalah bakteri gram positif, berbentuk bulat (coccus) yang
terdapat sebagai rantai, dan semuanya mempunyai nilai ekonomis penting
dalam industri susu.
23
2. Pediococcus cerevisae.
Bakteri ini adalah gram positif berbentuk bulat, khususnya terdapat
berpasangan atau berempat (tetrads). Walaupun jenis ini tercatat sebagai
perusak bir dan anggur, bakteri ini berperan penting dalam fermentasi daging
dan sayuran.
3. Leuconostoc mesenteroides dan Leuconostoc dextranicum.
Bakteri ini adalah gram positif berbentuk bulat yang terdapat secara
berpasangan atau rantai pendek. Bakteri-bakteri ini berperanan dalam
perusakan larutan gula dengan produksi pertumbuhan dekstran berlendir.
Walaupun demikian, bakteri-bakteri ini merupakan jenis yang penting dalam
18 permulaan fermentasi sayuran dan juga ditemukan dalam sari buah, anggur,
dan bahanpangan lainnya.
4. Lactobacillus lactis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus,
Lactobacillus plantarum, dan Lactobacillus delbrueckii.
Organisme-organisme ini adalah bakteri berbentuk batang, gram positif, dan
sering berbentuk pasangan dan rantai dari sel-selnya. Jenis ini umumnya lebih
tahan terhadap keadaan asam dari pada jenis-jenis Pediococcus atau
Streptococcus dan oleh karenanya menjadi lebih banyak terdapat pada
sayuran. Pada hewan ternak lain seperti sapi bali dapat ditemukan Bakteri
Asam Laktat seperti Lactobacillus lactis dan Lactobacillus brevis (Suardana,
2007).
Salah satu jenis
Bakteri Asam Laktat (BAL) adalah Lactobacillus
plantarum. Bakteri ini termasuk ke dalam Bakteri Asam Laktat (BAL) yang
paling kuat diantara lainnya sehingga banyak digunakan sebagai pengawet.
Nowroozi et al. (2004) menyatakan bahwa L. plantarum mempunyai aktivitas
antimikroba lebih besar terhadap S. aureus dan E. coli dibandingkan dengan
beberapa BAL lainnya, seperti Lactobacillus brevis, Lactobacillus casei,
Lactobacillus delbruekii, dan Lactobacillus acidophilus. Toksoy et al. (1999)
menyatakan bahwa L. plantarum dapat menghambat E. coli, S. aureus dan B.
subtilis karena L. plantarum mampu menghasilkan H2O2, asam laktat sebesar
0.88%, dan bakteriosin plantarisin.
24
Gambar 5. Lactobacillus plantarum

(Sumber: microbewiki.kenyon.edu)
Peranan Bakteri Asam Laktat dalam bahan pangan lebih banyak

menguntungkan daripada merugikan. Bakteri Asam Laktat yang aktif dalam
fermentasi makanan akan memberikan daya simpan produk yang lebih lama
dibandingkan tanpa Bakteri Asam Laktat. Daya simpan produk ini disebabkan
oleh asam laktat khususnya dan senyawa asam lain yang diproduksi sebagai hasil
metabolisme Bakteri Asam Laktat. Senyawa tersebut disebut juga antimikroba
yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri pembusuk maupun patogen
makanan. Selain menghasilkan senyawa-senyawa organik, beberapa galur Bakteri
Asam Laktat juga menghasilkan senyawa protein yang bersifat bakterisidal
terhadap bakteri gram positif dan gram negatif yang disebut bakteriosin (Tahara et
al., 1996).
Peran lain dari BAL adalah mampu meningkatkan keamanan pangan
dengan cara menghambat pertumbuhan bakteri pembusuk makanan dan bakteri
patogen, baik bakteri Gram positif maupun Gram negatif (Robredo dan Torres,
2000). Penghambatan yang dilakukan oleh BAL terhadap mikroorganisme yang
lainnya dimungkinkan karena BAL menghasilkan produk metabolit yang bersifat
antimikroba antara lain diasetil, hidrogen peroksida, asam-asam organik dan
bakteriosin (Surono, 2004).
Penggunaan bakteri antagonis sebagai mikroba pengawet sangat mudah.
Bakteri ini dapat diperoleh dalam bentuk biakan murni atau diproduksi secara
sederhana. Asinan sawi, asinan kubis, atau acar mentimun adalah sumber Bakteri
25
Asam Laktat (BAL). Penambahan mikroba antagonis dapat dilakukan pada hasil
perikanan segar maupun olahannya.
3.3.2
Fermentasi Kubis
Kubis (Brassica oleracea) merupakan salah satu jenis sayuran yang
banyak tumbuh di daerah dataran tinggi. Sayuran ini bersifat mudah layu, rusak
dan busuk. Namun, kubis mempunyai peranan yang penting untuk kesehatan
karena cukup banyak mengandung vitamin, mineral, karbohidrat, protein dan
sedikit lemak yang sangat diperlukan tubuh manusia (Pracaya, 1994).
Gambar 6. Kubis
(Sumber: idws.id)
Pada umumnya yang dimaksud dengan kata kubis adalah kol yang
berbentuk kepala, sebenarnya varietas kubis ada bermacam-macam. Namun
secara umum kubis terbagi dalam 3 kelompok besar, yaitu kubis putih, kubis
merah, dan kubis savoy.
Fermentasi adalah suatu aktivitas mikroorganisme baik aerob maupun
anaerob untuk mendapatkan energi diikuti terjadinya perubahan kimiawi substrat
organik. Proses fermentasi dapat menggunakan perlakuan penambahan inokulum
dan ada yang secara alami (Rahman,1989). Prinsip utama pembuatan asam laktat
dengan proses fermentasi adalah pemecahan karbohidrat menjadi bentuk
monosakaridanya dan dari monosakarida tersebut dengan bantuan enzim yang
dihasilkan oleh Lactobacillus sp. akan diubah menjadi asam laktat. Bakteri ini
secara alami banyak terdapat pada permukaan tanaman (sayur) dan produkproduk susu (Buckle et al.,1987).
26
Proses fermentasi asam laktat berlangsung ditandai dengan timbulnya gas

dan meningkatnya jumlah asam laktat yang diikuti dengan penurunan pH. Sifat
Bakteri Asam Laktat tumbuh pada pH 3-8 serta mampu memfermentasikan
monosakarida dan disakarida sehingga menghasilkan asam laktat (Stamer, 1979).
Reaksi kimia dalam fermentasi Asam laktat adalah sebagai berikut:
C6H12O6
Gula
> 2 CH3CHOHCOOH
Asam laktat
(Agus, 2004)
Bakteri Asam Laktat merupakan bakteri yang diperlukan dalam fermentasi

sayuran. Bakteri ini secara alami terdapat pada sayuran itu sendiri. Hampir semua
jenis sayuran dapat difermentasi secara alami oleh Bakteri Asam Laktat, karena
sayuran mengandung gula yang diperlukan untuk pertumbuhan bakteri tersebut
(Apandi 1984). Bakteri Asam Laktat merupakan bakteri yang diperlukan dalam
fermentasi sayuran.
Winarno et al. (1981) menyatakan bahwa fermentasi dapat terjadi karena
aktivitas mikroorganisme fermentative yang terdapat pada substrat organik yang
sesuai, sehingga menyebabkan perubahan sifat bahan akibat pemecahan
kandungan bahan tersebut. Jumlah mikroorganisme dalam proses fermentasi
diperbanyak dan digiatkan metabolismenya di dalam bahan tersebut dalam batas
tertentu. Proses fermentasi menyebabkan terjadinya perubahan terhadap
komponen kimia bahan.
Winarno et al. (1981) menyatakan bahwa bahan yang mengalami proses
fermentasi akan mempunyai nilai nutrient yang lebih baik dari bahan asalnya
karena adanya mikroorganisme yang mempunyai sifat katabolik terhadap
komponen kompleks dan mengubahnya menjadi komponen yang lebih sederhana
3.3.3
Penyimpanan Ikan pada Suhu Rendah

Suhu lingkungan merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi
kecepatan pembusukan pada daging ikan. Penyimpanan pada suhu rendah

diketahui dapat memperlambat proses kemunduran mutu dan memperpanjang
masa hidup jaringan-jaringan di dalam bahan pangan dengan menghambat
aktivitas enzim dan bakteri pembusuk. Namun, beberapa bakteri pembusuk
27
mampu bertahan pada penyimpanan suhu rendah karena proses ini bersifat
menghambat
pertumbuhan
bukan
untuk
membunuh
atau
menghentikan
mikroorganisme sama sekali.

Proses penanganan ikan dengan pendinginan merupakan metode yang
paling efektif serta banyak dilakukan. Penggunaan es untuk mendinginkan ikan
telah dianggap sebagai metode paling efektif untuk mempertahankan kesegaran
ikan, selain itu juga tidak menimbulkan perubahan fisik pada ikan (Ilyas, 1983).
Selama pendinginan, kadar air daging ikan akan berkurang. Penurunan
kadar air tersebut disebabkan karena adanya peristiwa desikasi, yaitu penguapan
air pada suhu rendah, dan adanya peristiwa penetesan (drip) cairan sel selama
pelelehan. Tingginya penguapan air selama pendinginan tergantung pada
beberapa hal, antara lain besar kecilnya ikan, tipe pengepakan, macam bahan
pengepak, kelembaban ruang penyimpan, dan suhu bahan pendingin (Hadiwiyoto,
1993).
3.4
Peralatan dan Bahan
3.4.1
Alat
Timbangan digital yang digunakan untuk mengukur bobot ikan
Lemari pendingin yang digunakan untuk menyimpan ikan selama

pengamatan dilakukan
3.4.2
Bahan
Ikan sebagai objek yang diamati
Sayuran kubis sebagai bahan untuk membuat cairan fermentasi
Buffer phosphate (K2HPO4) sebagai larutan penyangga
Piring stirofoam sebagai wadah ikan selama penyimpanan dalam

lemari pendingin
Wrapping film sebagai pembungkus ikan saat diletakkan dalam Piring

stirofoam
28
3.5
Prosedur Kerja
a. Fermentasi sayuran
Dipotong halus 100 g kubis dengan panjang 2 cm
Dimasukan ke dalam wadah plastik dan ditambahkan 1000 ml air

bersih
Ditambahkan garam hingga menghasilkan konsentrasi yang sesuai

untuk fermentasi kubis.
Diaduk hingga rata dan ditutup rapat
b. Perendaman Ikan
Dibersihkan ikan dengan mencucinya dalam air mengalir
Direndam ikan dalam wadah berisi cairan fermentasi kubis dengan

perlakuan sebagai berikut :
Tabel 2. Perlakuan perendaman ikan
Kelompok
Bentuk Ikan
Utuh dicuci
Utuh dicuci
Utuh dicuci
Siangi
Siangi
Siangi
Siangi potong
Siangi potong
Tidak
direndam
Direndam dalam
Cairan Kkubis
15 Menit
20 Menit
v
v
v
v
v
v
v
Ditiriskan ikan selama 3 menit
Ditimbang ikan
Dikemas ikan dalam piring stirofoam dengan wrapping film
29
c. Penyimpanan Ikan
Disimpan ikan dalam lemari pendingin
d. Penentuan Tingkat Kesegaran

1. Pada penyimpanan jam ke-1
Ditimbang bobot ikan, ditimbang piring stirofoam
Diamati kesegaran ikan berdasarkan aroma dan tekstur
2. Pada penyimpanan hari ke-7
Diambil ikan dalam wadah penyimpanan dan
dibuka
kemasannya
Diambil ikan dan ditimbang untuk mengetahui bobotnya
Diperhatikan warna dan ditimbang bobot drip yang ada di

piring stirofoam
3.6
3.6.1
Hasil Pengamatan
pengamatan mikroba antagonis sebagai berikut :

Tabel 3. Bobot ikan dan drip berdasarkan perlakuan lama perendaman dalam
larutan fermentasi
Perlakuan
Bobot Ikan (gram)
Bobot Drip (gram)
Jam ke-1
Hari ke-7
Jam ke-1
Hari ke-7
69 dan 75
66 dan 72
3 dan 3
72 dan 81
68 dan 77
4 dan 4
85 dan 70
81 dan 66
4 dan 4
67 dan 126
67 dan 126
0 dan 0
76 dan 58
71 dan 55
5 dan 3
Karakteristik Organoleptik
Warna
Tekstur
Merah
Sedikit
kekuningan
lembek
Kemerahan
Lembek
Mata dan
tubuh pucat
Masih kenyal
Kuning
Sedikit
kemerahan
lembek
Kuning
kemerahan
Lembek
30
Kenyal dan
105 dan 130
98 dan 132
7 dan 2
Lebih pucat
60 dan 62
57 dan 138
3 dan 4
Lebih pucat
Lembek
66 dan 136
73 dan 136
Segar dan
Biasa dan
7 dan 0
pucat
lebih pucat
3.6.2
lembek
Pembahasan
Berdasarkan kegiatan praktikum yang telah dilakukan, diketahui bahwa
teknologi fermentasi yang juga disertai dengan proses pendinginan dapat

menambah masa simpan ikan. Cairan fermentasi yang digunakan berasal dari
sayuran kubis yang ditambah garam. Dipilihnya sayuran kubis sebagai bahan
untuk membuat cairan fermentasi karena kubis mempunyai tingkat kandungan
nutrisi yang dapat memacu pertumbuhan berbagai jenis bakteri asam laktat dalam
proses fermentasi. Kubis juga merupakan isolat yang menghasilkan persentase
asam laktat yang tinggi. Sedangkan penambahan garam berfungsi sebagai bahan
untuk menarik air dan zat gizi dari jaringan bahan yang difermentasi untuk
pertumbuhan bakteri pembentuk asam laktat (Apriyanto, 1984). Perendaman ikan
dalam cairan fermentasi kubis dapat menambah masa simpan ikan karena
fermentasi kubis akan menghasilkan Bakteri Asam Laktat (BAL). Bakteri tersebut
dapat menurunkan pH daging ikan dan dapat memperlambat pertumbuhan bakteri
pembusuk sehingga penguraian protein oleh bakteri pembusuk terhambat juga.
Dengan terhambatnya pertumbuhan bakteri pembusuk serta penyimpanan ikan
pada suhu rendah tersebut maka masa simpan ikan akan menjadi lebih lama.
Pada kelompok enam, dua ekor ikan yang dijadikan objek pengamatan
mendapat perlakuan penyiangan dan perendaman pada cairan fermentasi selama
20 menit. Setelah penyimpanan dalam lemari pendingin, terjadi perubahan warna,
tekstur, dan bau pada ikan tersebut. Warna ikan menjadi lebih pucat dan bau ikan
yang pada awalnya berbau kubis menjadi bau amis ikan pada umumnya. Untuk
tekstur, ikan yang berukuran lebih kecil tetap kenyal sedangkan ikan yang
berukuran lebih besar menjadi lembek. Diantara dua ekor ikan tersebut, ikan yang
berukuran lebih kecil mengalami penurunan bobot, sedangkan ikan yang
31
berukuran lebih besar mengalami penambahan bobot. Terjadinya penurunan bobot

disebabkan berkurangnya kadar air pada daging ikan selama proses pendinginan.
Penurunan kadar air tersebut disebabkan karena adanya peristiwa desikasi, yaitu
penguapan air pada suhu rendah, dan adanya peristiwa penetesan (drip) cairan sel
selama pelelehan. Sedangkan penambahan bobot pada ikan yang berukuran lebih
besar karena kadar air pada ikan mengalami kenaikan, hal ini berhubungan
dengan tekstur ikan yang mengalami pelunakan sehingga kandungan partikel cair
meningkat. Selain itu tingginya kadar air dipengaruhi oleh kelembaban
lingkungan.
Jika dibandingkan dengan seluruh kelompok dengan beberapa perlakuan
yang berbeda, maka diketahui bahwa ikan yang mempunyai masa simpan lebih
lama adalah ikan yang mendapat perlakuan berupa penyiangan, pemotongan, dan
peremdaman dalam cairan fermentasi selama 20 menit. Hal ini dikarenakan lama
waktu perendaman ikan dalam larutan fermentasi kubis akan berpengaruh
terhadap masa simpan yang dihasilkan. Semakin lama waktu kontak ikan dengan
larutan fermentasi kubis, maka semakin lama masa simpan yang dihasilkan karena
total asam laktat yang dihasilkan semakin tinggi dan semakin rendah pH yang
dihasilkan sehingga semakin bersifat asam dan dapat menyebabkan pertumbuhan
bakteri perusak dan pembusuk pada ikan menjadi terhambat. Selain itu,
penyiangan dan pemotongan ikan akan membuat BAL dapat menjangkau seluruh
bagian ikan dan dapat menghambat aktivitas bakteri pembusuk yang ada diseluruh
bagian ikan sehingga dapat menghasilkan masa simpan lebih lama pada ikan.
3.7
Pendalaman
Untuk meningkatkan pemahaman terhadap kegiatan fermentasi dan
pengawetan ikan yang telah dilaksanakan, praktikan wajib menjawab pertanyaan

berikut ini :
1. Berdasarkan teori yang saudara baca, sebutkan bakteri apa yang tumbuh
selama proses fermentasi sayuran ? Jelaskan sifat utama bakteri tersebut.
Jawaban: Bakteri yang tumbuh selama proses fermentasi sayuran adalah
Bakteri Asam Laktat (BAL). Salah satu jenis bakteri tersebut
32
adalah Lactobacillus plantarum yang memiliki daya hambat paling

tinggi terhadap pertumbuhan bakteri pembusuk dan patogen pada
bahan pangan dibandingkan spesies Bakteri Asam Laktat lainnya,
penghambatannya terkait dengan produksi senyawa metabolit
(asam laktat, bakteriosin dan hidrogen peroksida). Sifat utama dari
Bakteri Asam Laktat (BAL) ini adalah dapat tumbuh sama baiknya
di lingkungan yang memiliki dan tidak memiliki O2 (tidak sensitif
terhadap O2), sehingga termasuk anaerob aerotoleran. Selain itu,
Bakteri Asam Laktat memiliki beberapa karakteristik tertentu yaitu
tidak memiliki porfirin dan sitokrom, katalase negatif, tidak
melakukan fosforilasi transpor elektron, dan hanya mendapatkan
energi dari fosforilasi substrat.
2. Bagaimana mekanismenya, hasil fermentasi sayuran dapat memperpanjang
masa simpan ikan ?
Jawaban: Hasil fermentasi sayuran akan menghasilkan Bakteri Asam Laktat
(BAL). Bakteri tersebut dapat menurunkan pH daging ikan dan
dapat memperlambat pertumbuhan bakteri pembusuk sehingga
penguraian protein oleh bakteri pembusuk terhambat juga. Dengan
terhambatnya pertumbuhan bakteri pembusuk serta penyimpanan
ikan pada suhu rendah tersebut maka masa simpan ikan akan
menjadi lebih lama.
3. Dari hasil percobaan, perlakuan mana yang memberikan masa simpan lebih
lama. Jelaskan mengapa demikian.
Jawaban: Berdasarkan hasil dari percobaan yang telah dilakukan, diketahui
bahwa perlakuan yang memberikan masa simpan lebih lama adalah
ikan yang diberi perlakuan berupa penyiangan, pemotongan, dan
perendaman selama 20 menit. Hal ini dikarenakan lama waktu
perendaman ikan dalam larutan fermentasi kubis akan berpengaruh
terhadap masa simpan yang dihasilkan. Semakin lama waktu
kontak ikan dengan larutan fermentasi kubis, maka semakin lama
masa simpan yang dihasilkan karena total asam laktat yang
33
dihasilkan semakin tinggi dan semakin rendah pH yang dihasilkan.

Selain itu, penyiangan dan pemotongan ikan akan membuat BAL
dapat menjangkau seluruh bagian ikan dan dapat menghambat
aktivitas bakteri pembusuk yang ada diseluruh bagian ikan
sehingga dapat menghasilkan masa simpan lebih lama pada ikan.
4. Apakah perlakuan yang diberikan berpengaruh terhadap bobot drip. Jelaskan.
Jawaban: Perlakuan yang diberikan akan berpengaruh terhadap bobot drip,
terutama pada saat penyimpanan ikan pada suhu rendah
(penyimpanan dalam lemari pendingin). Selama pendinginan,
kadar air daging ikan akan berkurang. Penurunan kadar air tersebut
disebabkan karena adanya peristiwa desikasi, yaitu penguapan air
pada suhu rendah, dan adanya peristiwa penetesan cairan yang
keluar dari daging (drip) selama pelelehan. oleh karena itu,
perlakuan pendinginan akan mempengaruhi bobot drip.
PRAKTIKUM IV
IDENTIFIKASI MIKROBA
4.1
Pendahuluan
Di
dalam
bidang
ilmu
mikrobiologi,
untuk
dapat
menelaah
mikroorganisme khususnya dalam skala laboratorium, maka terlebih dahulu kita

dapat menumbuhkan mikroorganisme dalam suatu biakan yang mana di dalamnya
hanya terdapat mikroorganisme yang kita tumbuhkan tersebut tanpa adanya
kontaminasi dari mikroba lain. Biakan yang semacam ini biasanya dikenal dengan
biakan murni. Untuk melakukan hal ini harus dimengerti jenis-jenis nutrient yang
disyaratkan bakteri dan juga macam lingkungan fisik yang menyediakan kondisi
optimum bagi pertumbuhan bakteri tersebut.
Dalam
ilmu
biologi
cabang
ilmu
yang
mempelajari
tentang
mikroorganisme disebut sebagai mikrobiologi yang merupakan salah satu ilmu

tentang makluk hidup. Mikroorganisme terdapat disegala macam lingkungan dan
sebagai bagian dari ekosistem alam. Sebagian dari mikroorganisme itu adalah
produsen, sebagian konsumen pertama, sebagian lagi konsumen kedua dan ketiga.
Mikroorganisme dapat ditemukan dikutup, di daerah tropik, dalam air, dalam
tanah, dalam debu, diudara, pada tumbuhan, tumbuhan hewan dan manusia.
Mokroorganisme ini mempunyai peran penting dalam jenis-jenis makanan, yaitu
berperan sebagai pengurai utama (dekomposer) dari berbagai zat dan senyawa,
(Soemartoto, 1980).
Mikroorganisme dibagi dibagi menjadi dua yaitu mikroorganisme autotrof
dan mikroorganisme heterotof. Sebagian besar merupakan fotoautotrof dan hanya
sebagian kecil yang merupakan heterotof. Mikroba dapat dipelajari berdasarkan
sifat fisik, kimiawi dan fisiologisnya.
Secara fisik, mikroba dapat dipelajari
berdasarkan bentuk morfologis dari koloninya.
Bentuk yang diamati adalah
bentuk keseluruhan koloni, bentuk pinggir, bentuk elevasi, tekstur permukaan,

pola pertumbuhan, dan pigmentasi. Bentuk keseluruhan koloni adalah sirkular,
irregular, punctiform, dan rhizoid
34
35
Mikroorganisme di muka bumi sangat beragam macamnya, bahkan

dengan ukuran yang berbeda-beda dan jenis yang berbeda. Identifikasi mikroba
merupakan salah satu tugas yang lazim dilakukan dilaboratorium mikrobiologi.
Dalam pengklasifikasian mikroorganisme, akan sulit mendeteksi mikroorganisme
dalam
lingkungan
terbuka
tanpa
bantuan
alat
pembesar
untuk
dapat
mengidentifikasi mikroorganisme, digunakan kaca pembesar atau mikroskop

barulah mikroorganisme dapat di lihat dan di identifikasikan sehingga dapat
membedakan golongan-golongan dari mikroorganisme.
4.2
Tujuan Praktikum
Tujuan dari praktikum ini adalah untuk memberikan pemahaman kepada
praktikan mengenai cara identifikasi mikroba.
4.3
Landasan Teori
4.3.1
Pengertian Mikroorganisme
Keanekaragaman mikroorganisme mikrobiologi adalah suatu ilmu yang
mempelajari makhluk hidup yang sangat kecil yang tidak dapat dilihat dengan
kasat mata biasa tanpa bantuan suatu peralatan khusus. Makhluk ini yang disebut
jasad renik atau mikroorganisme, terdapat di mana-mana. Di antaranya ada yang
bermanfaat bagi kehidupan manusia, tetapi ada pula yang merugikan seperti
menimbulkan penyakit.
4.3.2
Macam-Macam Mikroorganisme
Mikroorganisme dapat diklasifikasikan menjadi beberapa macam. Macam-
macam mikroorganisme adalah sebagai berikut :

1.
Fungi
Fungi adalah nama regnum dari sekelompok besar makhluk hidup
eukariotik heterotrof yang mencerna makanannya di luar tubuh lalu
menyerap molekul nutrisi ke dalam sel-selnya. Fungi memiliki bermacammacam bentuk. Awam mengenal sebagian besar anggota fungi sebagai
jamur, kapang, khamir, atau ragi, meskipun seringkali yang dimaksud
adalah penampilan luar yang tampak, bukan spesiesnya sendiri.
36
Gambar 7. Contoh Fungi (Zigospora)

(Sumber: biology.umm.ac.id)
Fungi
memperbanyak
diri
secara
seksual
dan
aseksual.
Perbanyakan seksual dengan cara :dua hifa dari jamur berbeda melebur
lalu membentuk zigot lalu zigot tumbuh menjadi tubuh buah, sedangkan
perbanyakan aseksual dengan cara membentuk spora, bertunas atau
fragmentasi hifa. Jamur memiliki kotak spora yang disebut sporangium. Di
dalam sporangium terdapat spora. Contoh jamur yang membentuk spora
adalah Rhizopus. Contoh jamur yang membentuk tunas adalah
Saccharomyces. Hifa jamur dapat terpurus dan setiap fragmen dapat
tumbuh menjadi tubuh buah.
2.
Virus
Virus adalah parasit berukuran mikroskopik yang menginfeksi sel
organisme biologis. Virus bersifat parasit obligat, hal tersebut disebabkan
karena virus hanya dapat bereproduksi di dalam material hidup dengan
menginvasi dan memanfaatkan sel makhluk hidup karena virus tidak
memiliki perlengkapan selular untuk bereproduksi sendiri. Biasanya virus
mengandung sejumlah kecil asam nukleat (DNA atau RNA, tetapi tidak
kombinasi keduanya) yang diselubungi semacam bahan pelindung yang
terdiri atas protein, lipid, glikoprotein, atau kombinasi ketiganya. Genom
virus menyandi baik protein yang digunakan untuk memuat bahan genetik
maupun protein yang dibutuhkan dalam daur hidupnya. Istilah virus
biasanya merujuk pada partikel-partikel yang menginfeksi sel-sel
37
eukariota (organisme multisel dan banyak jenis organisme sel tunggal),

sementara istilah bakteriofag atau fage digunakan untuk jenis yang
menyerang jenis-jenis sel prokariota (bakteri dan organisme lain yang
tidak berinti sel).
3.
Bakteri
Bakteri, dari kata Latin bacterium (jamak, bacteria), adalah
kelompok besar organismeprokariota, selain archaea, yang berukuran
sangat kecil serta memiliki peran besar dalam kehidupan di bumi.Struktur
sel bakteri relatif sederhana: tanpa nukleus/inti sel, kerangka sel, dan
organel-organel lain seperti mitokondria dan kloroplas.
Gambar 8. Bakteri Escherichia coli

(Sumber: helpingpeopleideas.com)
Bakteri dapat ditemukan di hampir semua tempat: di tanah, air,

udara, dalam simbiosis dengan organisme lain maupun sebagai agen
parasit (patogen), bahkan dalam tubuh manusia.Pada umumnya, bakteri
berukuran 0,5-5 m, tetapi ada bakteri tertentu yang dapat berdiameter
hingga 700 m, yaitu Thiomargarita.Mereka umumnya memiliki dinding
sel, seperti sel tumbuhan dan jamur, tetapi dengan bahan pembentuk
sangat berbeda (peptidoglikan).Beberapa jenis bakteri bersifat motil
(mampu bergerak) dan mobilitasnya ini disebabkan oleh flagel.
38
4.3.3
Bentuk Koloni Mikroba

Bentuk koloni mikroba adalah bundar (circular), tidak beraturan
(irregular), berbentuk benang (filamentous), rhizoid, dan curled. Koloni tersebut

berukuran besar, namun ada koloni ada yang berukuran sangat kecil (< 1mm).
Koloni demikian disebut punctiform.
Gambar 9. Bentuk-bentuk koloni mikroba

(Sumber: Modul praktikum mikrobiologi perikanan)
4.3.4
Bentuk Pinggir (Margin) Koloni Mikroba

Untuk mengamati pinggiran koloni mikroba dapat digunakan mikroskop
atau kaca pembesar sebagai alat bantu. Berikut adalah macam-macam bentuk
pinggir dari suatu koloni mikroba:
Gambar 10. Bentuk pinggir koloni mikroba

4.3.5
Bentuk Elevasi Koloni Mikroba

Untuk mengamati bentuk elevasi koloni mikroba, dapat dilakukan dengan
mengangkat cawan petri hingga sejajar mata.
Elevasi merupakan sudut
penonjolan pertumbuhan koloni pada permukaan agar. Bentuk-bentuk elevasi

koloni mikroba adalah sebagai berikut:
Gambar 11. Bentuk elevasi koloni mikroba

39
4.3.6
Tekstur Permukaan Koloni Mikroba

Tekstur permukaan koloni mikroba dapat diamati dengan menggunakan
mikroskop atau kaca pembesar sebagai alat bantuk. Tekstur permukaan koloni
diantaranya adalah smooth, glistening, rough, dull (opposite of glistening), dan
rugose (wrinkled).
Gambar 12. Tekstur permukaan koloni mikroba

40
4.3.7
Alat Gerak Bakteri

Beberapa bakteri mampu bergerak karena memiliki flagel atau bulu
cambuk sebagai alat gerak. Dengan alat ini, bakteri dapat berpindah tempat dari
lokasi yang tidak disukai menuju lokasi yang diinginkan. Berdasarkan jumlah dan
lokasi alat geraknya, bakteri dapat dibagi menjadi empat golongan, yaitu monotrik
apabila bakteri hanya memiliki satu alat gerak; lofotrik apabila bakteri memiliki
lebih dari satu alat gerak yang berkumbul di satu sisi; amfitrik apabila bakteri
memiliki banyak alat gerak di kedua sisinya; dan paritrik apabila alat gerak
tersebar di seluruh permukaan sel bakteri.
Gambar 13. Golongan bakteri

berdasarkan jumlah dan lokasi
alat geraknya
(Sumber: Modul praktikum
mikrobiologi perikanan)
4.3.8
Pola Pertumbuhan Mikroba
1.
Pola Pertumbuhan pada Media Agar Miring

Mikroba memiliki pola pertumbuhan yang khas pada media kultur
agar miring. Pola pertumbuhan pada media agar miring adalah sebagai
berikut:
Gambar 14. Pola
pertumbuhan pada
mikroba pada media
agara miring
(Sumber: Modul
praktikum mikrobiologi
perikanan)
41
2.
Pola Pertumbuhan pada Agar Tegak

Mikroba memiliki pola pertumbuhan yang khas pada media kultur
agar tegak. Pola pertumbuhan pada agar tegak adalah sebagai:
Gambar 15. Pola pertumbuhan pada mikroba pada media agar tegak
3.
Pigmentasi
Pigmen yang terkandung pada mikroba dapat digunakan untuk
membantu proses identifikasi. Mikroba ada yang memiliki pigmen
berwarna putih, buff, merah, ungu dan sebagainya.
Sebagian pigmen
dapat larut dalam air dan sebagian lainnya tidak. Berikut adalah
pigmentasi pada mikroba:
Gambar 16. Pigmentasi pada mikroba

42
4.4
Peralatan dan Bahan
4.4.1
Alat
Alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah sebagai berikut:
Cawan petri
: untuk membiakan mikroorganisme
Inkubator
: untuk menginkubasi atau memeram mikroba pada suhu

yang terkontrol
Colony counter
: untuk mempermudah perhitungan koloni yang tumbuh

setelah diinkubasi di dalam cawan
Kaca pembesar
: untuk memperbesar bayangan benda
Lampu bunsen
: untuk menciptakan suasana steril
Pisau
: untuk memotong daging ikan
Pipet volume
: untuk memindahkan larutan dengan volume yang

diketahui.
Tabung reaksi
: untuk uji-uji biokimiawi dan menumbuhkan mikroba
Gelas kimia
: tempat untuk melarutkan zat yang tidak butuh ketelitian

tinggi
4.4.2
Rak tabung
: untuk meletakan tabung-tabung reaksi
Spatula
: untuk mengaduk/mengambil sampel
Talenan
: sebagai alas saat memotong ikan
Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah sebagai berikut:
Ikan yang telah disimpan : sebagai sampel uji yang akan ditumbuhkan
selama 7 hari
Nutrient agar
4.5
mikroorganisme
: sebagai media tumbuh mikroorganisme
Prosedur Kerja
1. Diambil daging ikan sebanyak 5 gram.
2. Dilumat daging tersebut dalam beaker glass dan ditambahkan 10 ml
akuades.
3. Diambil 1 ml larutan tersebut dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi
yang telah diisi 9 ml akuades, sehingga terbentuk larutan 10-1.
43
4. Diambil 1 ml larutan 10-1 dan dimasukkan ke tabung reaksi yang telah

diisi 9 ml akuades, sehingga terbentuk larutan 10-2.
5. Diakukan hingga terbentuk larutan 10-6.
Gambar 17. Prosedur pengenceran

6. Tuangkan 1 ml larutan 10-6 ke dalam cawan petri. Tuangkan media

agar cair yang sudah hangat. Aduk dengan cara menggeserkan cawan
petri di atas meja membentuk pola angka delapan.
7. Lakukan inkubasi pada suhu 37oC dan lakukan pengamatan karakter
fisik mikroba yang tumbuh.
4.6
4.6.1
Hasil Pengamatan
pengamatan mengenai karakteristik fisik mikroba pada ikan kembung sebagai

berikut :
Tabel 4. Hasil pengamatan kelompok karakteristik fisik mikroba
Deskripsi
Mikroba
Ke-
Gambar /Foto
Bentuk
Koloni
Bentuk
Bentuk
Warna
Pinggiran
Permukaan
Koloni
Koloni
Koloni
Mikroba
44
1.
2.
3.
4.
5.
Curled
Irregular
Round
Irregular
Round
Curled
Smooth
Lobate
Rough
Entire
Rugose
Undulate
Smooth
Entire
Smooth
Putih
Kekuningan
Putih
Kekuningan
Kuning
Putih
Kekuningan
Putih
45
6.
Curled
Curled
Smooth
Putih
Tabel 5. Hasil pengamatan (data kelas) karakteristik fisik mikroba
Kelompok
Deskripsi
Mikroba
Ke-
Bentuk
Koloni
Bentuk
Pinggiran
Koloni
Bentuk
Permukaan
Koloni
Irregular
Undulate
Umbonate
Irregular
Lobate
Conver
Irregular
Undulate
Flate
Irregular
Lobate
Flate
Irregular
Undulate
Umbate
Irregular
Undulate
Umbate
Round
Entire
Rugose
Irreguller
Undulate
Dull
Filamentous
Filiform
Rugose
Filamentous
Filiform
Dull
Curled
Undulate
Rough
Round
Entire
Rugose
Warna
Koloni
Mikroba
Putih
kekuningan
Putih
kekuningan
Putih
kekuningan
Putih
kekuningan
Putih
kekuningan
Putih
kekuningan
Putih
Putih
kekuningan
Putih pekat
Putih
Putih
Putih
46
Undulate
Crateriform
Curled
Umbonate
Filiform
Flat
Entire
Flat
Irregular
Curled
Raised
Irregular
Undulate
Convex
Irregular
Undulate
Dull
Filamentous
Filiform
Rugose
Irregular
Undulate
Glistening
Irregular
Lobate
Rough
Round
Rurled
Rugose
Round
Entire
Rugose
Curled
Undulate
Dull
Round
Entire
Dull
Irregular
Undulate
Dull
Round
Entire
Glistening
Irregular
Undulate
Glistening
Round
Entire
Dull
Curled
Curled
Smooth
Irregular
Lobate
Rough
Round
Entire
Rugose
Irregular
Undulate
Smooth
Filamentous
Round
Round
Round
Bening
Putih
Putih
Putih
Putih
Putih
Putih
Putih
Putih pekat
Putih
Putih
Putih
Putih
Putih
kusam
Putih
bagian sisi
Biru
Biru
Cream
sedikit
merah
Putih
kekuningan
Putih
kekuningan
Kuning
Putih
kekuningan
47
Round
Entire
Smooth
Curled
Curled
Smooth
Irregular
Undulate
Dull
Round
Entired
Dull
Round
Entired
Dull
Round
Entired
Dull
Round
Entired
Dull
Round
Entired
Dull
Irregular
Undulate
Smoth
Putih
Irregular
Undulate
Smoth
Putih
Filamentous
Filiform
Smoth
Putih
Rizoid
Lobate
Smoth
Putih
Irregular
Undulate
Smoth
Putih
Round
Entired
Smoth
Putih
4.6.2
Putih
Putih
Coklat
keemasan
Putih
kusam
Putih
kusam
Putih
kusam
Putih
kusam
Putih
kusam
Pembahasan
Tubuh ikan mengandung sejumlah mikroba, terutama di lapisan lendir
permukaan tubuh, insang, dan saluran pencernaan. Jenis dan jumlah mikroba yang
terdapat pada tubuh ikan dapat menggambarkan jenis dan jumlah mikroba di
perairan dimana ikan tersebut berasal. Informasi mengenai jumlah mikroba yang
terdapat pada tubuh ikan sangat penting bagi pengusaha ikan. Informasi ini dapat
digunakan sebagai dasar dalam aktivitas budidaya, pencegahan penyakit dan
penanganan serta pengolahan hasil perikanan.
48
Informasi mengenai mikroba yang terdapat pada ikan dapat diambil

dengan cara swab, dari air cucian ikan dan air media budidaya. Cara swab
(swabbing) adalah pengambilan sampel mikroba dengan cara mengusap
permukaan tubuh ikan dengan kapas dan menginokulasikannya ke media agar.
Mikroorganisme dapat ditumbuhkan dan dikembangkan pada suatu
substrat yang disebut medium. Medium yang digunakan untuk menumbuhkan dan
mengembangbiakkan mikroorganisme tersebut harus sesuai susunanya dengan
kebutuhan
jenis-jenis
mikroorganisme
yang
bersangkutan.
Beberapa
mikroorganisme dapat hidup baik pada medium yang sangat sederhana yang
hanya mengandung garam anargonik di tambah sumber karbon organik seperti
gula. Sedangkan mikroorganime lainnya memerlukan suatu medium yang sangat
kompleks yaitu berupa medium ditambahkan darah atau bahan-bahan kompleks
lainnya (Volk dan Wheeler 1993).
Media yang akan digunakan itu harus mengandung zat hara untuk
mikroba, mempunyai tegangan osmosis, tegangan pemukaan, pH, dan lingkungan
yg sesuai, tidak toxic, harus steril. Hal ini, dapat dilakukan dengan
menumbuhkannya dalam media padat sel-sel mikroba yang akan membentuk
suatu koloni sel yang tetap pada tempatnya dan dalam melakukan konfirmasi
suatu bakteri dapat dilakukan dengan menggunakan berbagai pewarnaan, reaksi
ensimatis atau reaksi biokimia. Macam medium berdasarkan tujuan yaitu, media
untuk isolasi, media selektif/penghambat, media diperkaya (enrichment), media
untuk peremajaan kultur, media untuk menentukan kebutuhan nutrisi spesifik,
media untuk karakterisasi bakteri, media diferensial.
Identifikasi mikroba dapat dilakukan secara fisik, kimiawi dan biologis.
Secara fisik, identifikasi dapat dilakukan berdasarkan bentuk morfologis mikroba.
Secara kimiawi, identifikasi mikroba dapat dilakukan berdasarkan kekhasan
mikroba bereaksi terhadap senyawa kimia tertentu. Secara biologis, identifikasi
mikroba dapat dilakukan berdasarkan sifat-sifat biologisnya.
Bakteri yang ditumbuhkan dalam medium agar akan membentuk suatu
penampakan berupa koloni. Koloni bakteri ini merupakan sekelompok masa sel
yang dapat dilihat dengan mata langsung. Satu koloni bakteri yang berada didalam
49
cawan petri adalah sama dan dianggap semua sel yang berada dalam satu koloni
tersebut adalah keturunan (progeny) satu mikroorganisme dan karena itu mewakili
sebagai biakan murni (Kusnadi
dkk 2003). Dalam melakukan pengamatan
morfologi koloni harus dengan baik mengamati sifat-sifat suatu koloni. Sifat-sifat
suatu koloni ialah sifat-sifat yang ada sangkut pautnya dengan bentuk, susunan,
permukaan, pengkilatan, dan sebagainya. Menurut Dwidjoseputro (2005),
pengamatan sifat-sifat ini dapat dilakukan dengan pandangan biasa tanpa
menggunakan mikroskop. Supaya sifat-sifat tersebut tampak jelas, bakteri perlu
ditumbuhkan pada medium padat.
Dalam praktikum ini, mikroba yang teridentifikasi berbeda-beda dari
masing-masing kelompok. Menurut Hastuti (2012), bakteri memiliki bentuk dan
struktur yang berbeda. Bentuk dan struktur ini yang disebut dengan morfologi
bakteri. Setiap bakteri memiliki bentuk yang berbeda. Ini juga dipengaruhi oleh
kondisi tempat hidupnya.
Dwidjoseputro (2005) menjelaskan bahwa besar ke kecilnya koloni dapat
hanya serupa suatu titik, adapula yang sampai menutup permukaan medium. Hal
ini,dapat dilihata dari hasil pengamatan yang didapat dari kelompok 6. Mikroba
ke-2 terlihat jelas dan lebih besar dari mikroba lainnya. Dakurni (2014)
menjelaskan, beberapa faktor yang berpengaruh terhadap pertumbuhan mikroba
yang di dalamnya
termasuk bakteri
ialah: (1) Konsentrasi nutrient, makin
banyak bahan nutrisi yang diperlukan makin cepatpertumbuhan mikroba; (2) pH

(keasaman dan kebasaan), beberapa mikroba mempunyai sifat pH yang berbedabeda untuk menunjang pertumbuhannya; (3) konsentrasi air, untuk pertumbuhan
mikroba memerlukan konsentrasi yang cukup dan sangat spesifik; (4) bahan
alami, bahan alami tertentu bersifat antimikrobia, yaitu
pertumbuhan
mikrobia,
misalnya
golongan
sifat
rempah-rempah;
menghambat
(5)
suhu,
mikrobia mempunyai sifat spesifik terhadap suhu untuk pertumbuhannya;

dan (6) tekanan osmosis, mempengaruhi kestabilan dari dinding dan membrane
sel mikroba.
Warna koloni yang teramati kebanyakan adalah putih, putih kekuningan
ataupun kuning pucat. Warna pucat seperti ini biasanya mengindikasikan jika
50
koloni yang teramati adalah koloni dari bakteri. Sedangkan, warna cerah seperti
hijau atau coklat keemasan yang juga teramati pada sampel di kelompok lain
kemungkinan warna koloni dari jamur yang merupakan kontaminan dari
praktikum kali ini. Menurut Srikandi (1992), warna koloni juga dipengaruhi oleh
warna spora misalnya spora warna hijau maka koloni berwarna hijau.
Sampel ikan yang digunakan adalah ikan kembung. Ikan kembung
termasuk ikan benthopelagik, yang kadang-kadang hidup bentik (hidup di dasar
daerah tepian landasan benua bawah air, antara jurang continental shelf dan tepi
pantai) dan kadang-kadang hidup dekat permukaan laut bergantung kepada
musim. Ikan ini seringkali berkumpul bergerombolan dan banyak sekali ke
muncul permukaan pada musim tertentu, hingga mudah ditangkap secara besarbesaran dengan purse seine (Soeseno 1982). Mikroflora yang umum terdapat pada
sisik, insang dan usus ikan kembung adalah bakteri Gram Negatif, tidak berspora
dan
berbentuk
batang.
Contohnya
Vibrio,
Pseudomonas,
Maraxella,
Acinetobacter dan Flavobacterium.

Vibrio sp. mempunyai sifat-sifat umum yaitu berbentuk batang yang
bengkok, mempunyai satu batang cambuk yang yang terletak pada salah satu
ujung batangnya. Pseudomonas aeruginosa berbentuk batang dengan ukuran
sekitar 0,6 x 2 m. Bakteri ini terlihat sebagai bakteri tunggal, berpasangan, dan
terkadang membentuk rantai yang pendek. Koloni halus dan mukoid sebagai hasil
produksi berbahan dari alignat.
Koloni Moraxella dapat diidentifikasi pada
mediaagar coklat atau media agar darah. Koloni biasanya smooth, flat, diameter
berukuran1-2 mm. Bentuk sel Acinetobacter sp. batang, diameter koloni 0,1-0,3
m, koloni muncul di atas permukaan media NA, koloni berwarna putih dan
permukaan koloni mengkilat. Bentuk sel Flavobacterium sp. berupa batang.
diameter koloni mulai dari 0,2-2m, koloni muncul di atas permukaan media NA,
koloni berwarna kuning tua.
51
4.7
Pendalaman
Untuk meningkatkan pemahaman terhadap kegiatan identifikasi mikroba
yang telah dilaksanakan, praktikan wajib menjawab pertanyaan berikut ini :

1. Berdasarkan teori yang saudara baca, apa tujuan dilakukannya pengenceran
hingga 10-6?
Jawaban: Pengenceran merupakan proses yang dilakukan untuk menurunkan
atau memperkecil konsentrasi larutan dengan menambah zat
pelarut ke dalam larutan sehingga volume larutan menjadi berubah
(Waluyo 2005). Pengenceran adalah melarutkan atau melepasan
mikroba dari substratnya ke dalam air sehingga lebih mudah
penanganannya. Tujuan pengenceran yaitu untuk mengurangi
kepadatan bakteri yang ditanam.
2. Apakah karakter fisik sudah dapat membantu menentukan jenis mikroba?
Jelaskan pendapat saudara.
Jawaban: Jenis mikroba memang dapat ditentukan dari karakter fisik yaitu
dari perbedaan bentuk dan warna seperti pada bakteri yang
umumnya berbentuk bulat dan batang. Sedangkan, pada jamur
biasanya tidak berbentuk jelas. Bakteri yang hidup umumnya tidak
berwarna sedangkan, jamur berwarna putih kekuningan. Tetapi hal
ini sulit dilaksanakan pada bakteri, banyak bakteri di bawah
mikroskop menunjukkan bentuk morfologi yang sama, tetapi sifatsifat fisiologi mereka berlainan sama sekali. Ada beberapa
golongan bakteri yang sama bentuknya, tetapi yang satu dapat
mencernakan asam amino tertentu, sedangkan yang lainnya tidak.
Ada pula suatu golongan yang dapat menyebabkan suatu penyakit,
sedang golongan yang lain tidak
DAFTAR PUSTAKA
Agalloco, James. 2008. Validation of Pharmaceutical Processes (electronic

version). USA: Informa Healthcare Inc.
Agus Syahrurachman, dkk. 1994. Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran Edisi
Revisi. Jakarta : Bina Rupa Aksara.
Apandi, M. 1984. Teknologi Buah dan Sayur. Bandung: Alumni.
Apriyanto. 1984. Pengolahan Berbagai Macam Tanaman. Bogor: Institut
Pertanian Bogor.
Bambang. 2004. Mikrobiologi. Semarang: Fakultas Matematika dan Ipa
Universitas Dipenogoro.
Buckle, Edwards, Fleet, Wooton. 1987. Ilmu Pangan (Terjemahan). Jakarta:
Universitas Indonesia Press.
Dwijoseputro. 1998. Biologi Jilid 2. Jakarta: Erlangga.
Dwidjoseputro, D. 2005. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Djambatan.
Fardiaz. 1992. Mikrobiologi Pangan. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama.

Hadioetomo, R. S. 1990. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek. Jakarta: PT.
Gramedia Pustaka Utama.
Hadioetomo, R. S. 1993. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek : Teknik dan
Prosedur Dasar Laboratorium. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama.
Hadiwiyoto S. 1993. Teknologi Pengolahan Hasil Perikanan Jilid 1. Yogyakarta:
Liberty.
Hastuti, Utami Sri. 2012. Petunjuk Praktikum Mikrobiologi. Malang: UMM Press.
52
Ilyas S. 1983. Teknologi Refrigerasi Hasil Perikanan Jilid 1 - Teknik Pendinginan

Ikan. Jakarta: CV Paripurna.
Krisno, Agus. 2004. Mikrobiologi Terapan. Malang: Universitas Muhammadiyah
Malang.
Kusnadi, dkk. 2003. Common TextBook Mikrobiologi. Bandung: JICAIMSTEP,DGHE, dan FPMIPA UPI.
Lay dan Hatowo. 1992. Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta: Raja Grafindo
Persada.
Nowroozi, J., M. Mirzaii & M. Norouzi. 2004. Study of Lactobacillus as probiotic
bacteria. Iranian J. Publ. Health 33:1-7.
Nuraini, Eni. 2002. Bahan Ajar Mikrobiologi. Bogor: Fakultas Matematika dan
Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Pendidikan Indonesia.
Oetomo Hadi, Ratnasari. 1990. Mikrobiologi Dasar. Jakarta: PT Gramedia.
Pelczar, Michael, J. Jr. 1988. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: UI-Press.
Pracaya. 1994. Kol Alias Kubis. Jakarta: Penebar Swadaya.
Pratiwi, S. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Erlangga.
Rachman, A. 1989. Pengantar Teknologi Fermentasi. Bogor: IPB Pr.
Ratna. 1985. Mikrobiologi Dasar. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama.
Soeseno, 1982. Dasar Perikanan Umum. Jakarta: Jasa Guna.
Srikandi, Fardiaz. 1992. Mikrobiologi Pangan 1. Jakarta: Gramedia Pustaka

Utama.
53
Suardana, W. 2007. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat dari Cairan
Rumen Sapi Bali sebagai Kandidat Biopreservatif. Jurnal Veteriner, 8 (4):
155-159.
Sumanti. 2008. Penuntun Praktikum
Padjajaran. Jatinangor.
Mikrobiologi
Pangan.
Universitas
Suriawiria, U. 1999. Mikrobiologi. Jakarta: Universitas Terbuka.

Surono, I.S. 2004. Probiotik Susu Fermentasi dan Kesehatan. Jakarta: Yayasan
Pengusaha Makanan dan Minuman Seluruh Indonesia (YAPMMI).
TRICK. p 31-32.
Volk & Wheeler. 1993. Mikrobiologi dasar. Jakarta: Erlangga.
Waluyo, Lud. 1998. Mikrobiologi Umum. Jakarta: MM-Press.
Waluyo. 2004. Mikrobiologi Tanah. Jakarta : CV Rajawali.

Winarni. 1997. Telaah Formulasi Aditif di dalam Peningkatan Daya Simpan
Protease Bacillus sp. [Laporan Penelitian]. Fateta IPB.
Winarno, F. G., S. Fardiaz. 1981. Pengantar Teknologi Pangan. Cetakan Ke-2.
Jakarta: PT Gramedia.
54
LAMPIRAN
55
Lampiran 1. Dokumentasi kegiatan praktikum sterilisasi peralatan
Peralatan yang akan disterilisasi
Kertas coklat
Oven
Peralatan telah dibungkus oleh kertas

coklat
Peralatan siap dimasukkan ke dalam

oven
Memasukkan peralatan yang telah

dibungkus kertas coklat ke dalam oven
Lampiran 2. Dokumentasi kegiatan praktikum inokulasi mikroba
Spidol
Cawan petri
56
Pisau
Jarum ose
Benang
Bunsen
Timbangan
Ikan Kembung
Nutrien agar
Akuades
57
Pengambilan daging ikan
Air cucian ikan
Penimbangan insang ikan
Pembilasan insang dengan akuades
Penuangan agar ke dalam cawan petri
Pemanasan jarum ose pada bunsen
Proses inkubasi
58
Lampiran 3. Dokumentasi kegiatan praktikum mikroba antagonis
Peralatan yang digunakan dalam

praktikum
Peralatan yang digunakan dalam

praktikum
Ikan yang dijadikan objek pengamatan
Cairan fermentasi kubis
Pencucian ikan
Penyiangan ikan
Perendaman ikan di dalam cairan

fermentasi kubis
Penirisan ikan setelah dilakukan

perendaman
59
Penimbangan ikan
Penimbangan ikan
Proses wrapping
Ikan yang telah di wrapping dan siap

untuk disimpan dalam lemari pendingin
Lampiran 4. Dokumentasi kegiatan praktikum identifikasi mikroba
Ikan yang telah difermentasi

Penimbangan ikan
Penimbangan daging ikan sebanyak 5

gram
Pengambilan daging ikan
60
Pengambilan sampel sebanyak 9 ml
61

Laporan Akhir Praktikum Fiks

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Laporan Akhir Praktikum Fiks

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM

Jatinangor, Desember 2015

a. Alat sterilisasi basah (autoklaf); b. Alat sterilisasi kering (oven) ......... 3

Teknik penggoresan ................................................................................ 12

Cawan petri yang telah dibagi menjadi empat kuadran .......................... 14

Metode gores ........................................................................................... 15

Lactobacillus plantarum ......................................................................... 24

Contoh Fungi (Zigospora) ....................................................................... 36

Bakteri Escherichia coli .......................................................................... 37

Bentuk-bentuk koloni mikroba ............................................................... 38

Bentuk pinggir koloni mikroba ............................................................... 38

Bentuk elevasi koloni mikroba ............................................................... 38

Teknik permukaan koloni mikroba ......................................................... 39

Golongan bakteri berdasarkan jumlah dan lokasi alat geraknya............. 40

Pola pertumbuhan pada mikroba pada media agar miring ...................... 40

Pola pertumbuhan pada mikroba pada media agar tegak ........................ 41

Pigmentasi pada mikroba ........................................................................ 41

Prosedur pengenceran ............................................................................. 43

Hasil pengamatan inokulasi mikroba pada ikan Kembung ...................... 15

Perlakuan perendaman ikan .................................................................... 28

Bobot ikan dan drip berdasarkan perlakuan lama perendaman dalam

Hasil pengamatan kelompok karakteristik fisik mikroba ....................... 43

Hasil pengamatan (data kelas) karakteristik fisik mikroba ..................... 45

Dokumentasi kegiatan sterilisasi peralatan ............................................. 56

Dokumentasi kegiatan inokulasi mikroba ................................................ 56

Dokumentasi kegiatan mikroba antagonis ............................................... 59

Dokumentasi kegiatan identifikasi mikroba ............................................ 60

sehingga dapat digunakan untuk melaksanakan pekerjaan yang berkaitan dengan

membebaskan alat ataupun bahan dari berbagai macam mikroorganisme. Suatu

menyingkirkan atau mengahambat pertumbuhan mikroorganisme agar dapat

mikroorganisme; dan mencegah kontaminasi bahan-bahan yang dipakai.

penggunaan panas (fisik), penggunaan bahan kimia (kimiawi), dan penyaringan

Gambar 1. a. Alat sterilisasi basah (autoklaf); b. Alat sterilisasi kering (oven)

Penyaringan atau filtrasi

akan menghilangkan jasad renik yang terdapat di dalam larutan tersebut.

Penggunaan bahan kimia

Peralatan dan Bahan

Oven sebagai alat sterilisasi dengan prinsip panas kering

Keranjang plastik sebagai wadah peralatan yang disterilisasi

Gunting digunakan untuk memotong benang

Peralatan praktikum yang akan disterilisasi yaitu cawan petri, tabung

Benang yang digunakan untuk mengikat pada saat pembungkusan

Kertas coklat sebagai pembungkus peralatan yang akan disterilisasi

Hasil dan Pembahasan

Sterilisasi bertujuan untuk mematikan, menyingkirkan atau menghambat

yang tinggi inilah yang akan membunuh mikroorganisme. Autoklaf terutama

berikut ini diberikan beberapa pertanyaan berkaitan dengan materi praktikum

mikroorganisme. Autoklaf terutama ditujukan untuk membunuh

inokulasi. Inokulasi adalah pekerjaan memindahkan bakteri dan jamur atau

Pemindahan dengan dengan pipet

Pemindahan dengan kawat inokulasi.

Teknik Biakan Murni

Cara penggesekan atau penggoresan

Gambar 2. Teknik Penggoresan

Perbedaan Inokulasi Jamur dan Bakteri

Inokulasi jamur menggunakan jarum ose bentuk batang. Hifa yang

Inokulasi bakteri menggunakan jarum ose bentuk bulat. Pada ujung

Macam-Macam Media Inokulasi

Plate culture yaitu media padat dalam petridish.

Slant culture yaitu media padat dalam tabung reaksi.

Stap culture yaitu media padat dalam tabung reaksi, tetapi

Liquid culture yaitu media cair dalam tabung reaksi.

Shake culture yaitu media cair dalam tabung reaksi

Peralatan dan Bahan