Pendahuluan

Epstein-Barr Virus (EBV) (Gambar 1) adalah virus herpes manusia umum yang
dapat menyebabkan penyakit mononukleosis dan limfoproliferatif. EBV unik karena
menginfeksi sekitar 95% populasi dewasa antara 35-40 tahun di AS [1]. Dalam kebanyakan
kasus, EBV menular tidak menimbulkan gejala, terutama jika pasien terinfeksi saat masih
anak-anak [1,8]. Infeksi selama masa remaja dikaitkan dengan mononukleosis sekitar separuh
waktu [1]. EBV dikaitkan dengan kanker seperti Limfoma Burkitt dan karsinoma nasofaring
[1,2]. Virus ini mampu menginfeksi sel-sel B dan epitel, dan terutama berproliferasi melalui
mekanisme non-litik [2]. Selama proses laten ini, protein inti virus yang diturunkan (EBNAs)
dan protein membran (LMPs) diekspresikan oleh sel inang yang terinfeksi [2].

Gambar 1. Mikrograf elektron asli jaringan limfoma Burkitt yang dikultur yang diterbitkan oleh Epstein dan
Barr pada tahun 1964. V menunjukkan keberadaan virion EBV. [1]

Bidang penelitian yang maju bertujuan untuk memahami bagaimana protein virus
dapat berperan dalam penyakit limfoproliferatif. LMP-1 adalah salah satu protein
membranosa virus yang dapat menginduksi replikasi tumorigenic yang tidak terbatas pada sel
B yang terinfeksi [2,3]. Dalam arti, LMP-1 bertindak untuk "mengubah" sel-sel B menjadi
garis yang diabadikan dan berkembang biak. Sementara infeksi EBV biasanya hanya
menyebabkan gejala ringan, upaya untuk mengembangkan perawatan dan antivirus umumnya
tidak berhasil [1]. Sangat sulit untuk mengontrol penyebaran antara inang karena infeksi
kronis dapat kembali aktif, memungkinkan operator bebas gejala untuk terus menularkan

1
virus beberapa tahun setelah infeksi awal [1]. Sementara siklus hidup laten tampaknya
menjadi penyumbang utama kejadian penyakit limfoproliferatif pada infeksi EBV, sistem
litik memberikan kontribusi yang signifikan. Mekanisme litik sangat penting untuk
penyebaran virus secara horizontal, dan beberapa mekanisme terkait siklus litik berkontribusi
pada proliferasi sel B atau tingkat keberhasilan infeksi [2,9,11].
Dalam arti, mekanisme litik digunakan untuk infeksi primer manusia, tetapi sekali
didirikan di tubuh, mekanisme laten berlaku dalam mempertahankan infeksi pada inang
[2,22]. Juga penting bagi keberhasilan EBV sebagai patogen manusia adalah kemampuannya
untuk menghindari sistem kekebalan inang. Protein EBV terlibat dalam serangkaian jalur
pensinyalan yang mencegah deteksi oleh komponen intraseluler dan ekstraseluler dari sistem
kekebalan. Karena peran putatif EBV dalam karsinogenesis dan keberhasilan yang terbatas
dalam pengembangan antivirus untuk memerangi infeksi, penting untuk mengembangkan
pemahaman yang lebih dalam tentang mekanisme di mana virus mengubah karakter sel
inang, dan menghindarkan pertahanan kekebalan manusia. Ulasan ini akan fokus pada
aktivitas viral LMP-1 dan EBNA1, dan peran yang mereka mainkan dalam penyakit terkait
Epstein-Barr. Fokus juga akan ditempatkan pada bagaimana siklus hidup litik dan laten dari
EBV berkontribusi pada infeksi yang sukses. Beberapa teknik pencegahan-imun umum EBV
akan diuraikan. Dalam konteks mekanisme ini, gambaran singkat patologi EBV akan dibahas.

Klasifikasi Virus dan Genom

Virus Epstein-Barr adalah virus Kelas I Baltimore dari keluarga Herpesviridae. Ini
adalah gammaretrovirus yang juga ditetapkan sebagai Human Herpes Virus 4 (HHV-4).
M.A. Epstein dan Yvonne Barr adalah yang pertama mengidentifikasi EBV dalam jaringan
tumor yang berhubungan dengan Limfoma Burkitt. Para peneliti menggunakan mikroskop
elektron untuk menentukan bahwa partikel-partikel virus ini sangat mirip dalam struktur
Herpes simplex virions (Gambar 1) [4]. Genom EBV terdiri dari DNA beruntai ganda dan
172.282 pasangan basa panjang [5]. Genom yang relatif panjang ini adalah karakteristik virus
Herpes; Herpes simplex memiliki genom 152-kilobase [6]. Frame membaca terbuka (ORFs)
atau EBV umumnya dipecah menjadi bagian litik dan laten terpisah [7]. Sementara sebagian
besar gen virus mengkodekan protein, beberapa gen laten tetap tidak diterjemahkan (EBERs:
ENV encoded RNAs) dan beberapa RNA mikro dikodekan untuk [7]. Relativitas genom
dsDNA besar dari virus Epstein-Barr memamerkan pemisahan bagian ORF yang mengkode
gen yang terkait dengan dua strategi replikatifnya yang berbeda. Selama infeksi laten, genom

2
EBV ada dalam bentuk sirkuler yang terlokalisasi di nukleus sel inang [2]. Bingkai
pembacaan untuk protein LMP dan EBNA dikelompokkan secara terpisah dalam episom
(Gambar 2)

Gambar 2. Diagram Epitome virus dsdNA Epstein-Barr. Perhatikan pengelompokan bingkai

bacaan untuk protein EBNA dan LMP terkait. Perhatikan lokasi asal replikasi, oriP. Panah
hijau menunjukkan arah transkripsi selama latensi III. Panah merah pendek menunjukkan
arah transkripsi untuk EBNA1, yang diaktifkan selama latensi I dan II. Sumber: [2]. .

Struktur Virion EBV

Epstein dan Barr mengamati bahwa virus yang terkait dengan limfoma ini sekitar
20% lebih kecil dari tipikal Herpes simplex virions [4]. Mirip dengan Herpesvirus lain,
bagian paling dalam dari virion EBV terdiri dari DNA yang membungkus inti inti-protein
nukleus (Gambar 3) [8]. Inti virion dikelilingi oleh nukleokapsid, lapisan protein tegument,
dan akhirnya dan envelope luar dengan glikoprotein lonjakan [8]. Mirip dengan banyak virus
lainnya, banyak glikoprotein ini penting untuk mekanisme masuk sel inang. Sel induk yang
terinfeksi melepaskan virion EBV secara eksklusif selama siklus litik [7].

3
Gambar 3. Diagram umum virion virus herpes. Perhatikan bahwa genom dsDNA dililitkan di
sekitar nukleosida pusat. Spike glikoprotein (tidak berlabel) di permukaan memainkan peran
dalam entri sel inang. [2].

Siklus Hidup Litik

Sementara siklus hidup litik EBV lebih jarang diamati daripada modus laten
replikasi, itu sangat penting karena ini adalah satu-satunya cara bahwa virus dapat membuat
virion dan ditransfer secara horizontal antara host (atau sel) [8,9]. Penyakit imunosupresif
seperti AIDS biasanya menunjukkan peningkatan kadar virion bebas dalam darah, penanda
peningkatan aktivitas litik [9]. Sementara virion sering ditemukan di air liur dari inang yang
terinfeksi, sedikit atau tidak ada sel yang terinfeksi litik biasanya terdeteksi di dalam tubuh
[9]. T-sel sitotoksik manusia sangat mahir dalam mengenali dan menghancurkan sel-sel yang
terinfeksi secara litik yang mengekspresikan gen litik tahap awal tertentu [10]. Oleh karena
itu, aktivitas litik tampaknya mendorong EBV menyebar pada populasi manusia. Namun,
siklus replikatif laten disukai di bawah kondisi normal dalam inang, mungkin sebagai sarana
untuk menghindari respon imun pejamu. Alfa dan Beta herpesvirus memiliki mekanisme
yang rumit untuk penyembunyian gen lytic dari sistem imun host sementara EBV memiliki
beberapa mekanisme untuk mencegah kerusakan immunomediated sel yang terinfeksi litik
[10]. Sebagai contoh, Herpes simplex mungkin mampu menghambat host Major
Histocombatibility Complex, yang mengurangi presentasi antigen sel-B dan pengakuan oleh
sel T sitotoksik [10]. Berbeda dengan herpesvirus lainnya, virus gammaherpes seperti EBV
memiliki mekanisme berbeda untuk menghindari respon imun pejamu. EBV terutama
bergantung pada siklus replikasi laten di mana genomnya berproliferasi melalui replikasi
klonal dalam membagi sel B-host [10]. Oleh karena itu, tidak seperti virus herpes lain yang

4
bergantung pada replikasi litik untuk menyebar di dalam inang, EBV lebih mengandalkan
pada mekanisme latennya. Produksi Virion oleh EBV mengambil peran khusus "niche" yang
penting untuk infeksi awal dari host manusia baru. Karena mekanisme laten bertanggung
jawab untuk infeksi berkelanjutan, EBV tidak berada di bawah tekanan selektif yang
signifikan untuk "mengembangkan" menguraikan karakteristik penghindaran kekebalan litik
yang rumit.
Aktivitas laten adalah kontributor utama perkembangan limfoproliferative diesease
(LPD) pada individu yang terinfeksi EBV. Namun, strain EBV yang tidak kompeten adalah
generator yang kurang efektif dari LPD terkait lesi dibandingkan tipe liar [2,11]. Selain itu,
infeksi litik menghasilkan sekresi faktor parakrin yang dapat menstimulasi pertumbuhan garis
B-sel yang terinfeksi secara laten [9, 11]. Meskipun mungkin memiliki efek yang lebih
menyebar daripada mekanisme laten, EBV lytic infection mediated signaling dapat
berkontribusi pada perkembangan penyakit limfoproliferatif (sebagian melalui peningkatan
infeksi laten). Untuk keperluan ulasan ini, fokus akan ditempatkan pada infeksi virus limfosit
B. Siklus litik dimulai dengan virion EBV matang yang mencapai sel inang target, seperti sel-
B. Kontak antara virion dan sel B dimulai dengan pengikatan EBV glikoprotein 350 ke CD-
21 sel B [12]. Untuk sebagian besar, infeksi EBV adalah spesifik untuk sel-sel
mengekspresikan membran-CD 21 (yaitu B-sel dan beberapa epitel), meskipun beberapa
mekanisme lampiran independen CD-21 adalah mungkin meskipun dengan kemanjuran
rendah [8]. EBV 350 adalah contoh gen yang diekspresikan secara lite yang secara khusus
ditargetkan oleh sistem kekebalan manusia [13]. Pengikatan gp350 ini dilengkapi dengan
pengikatan EBV gp42 ke B-cell MHC-II [14]. Agar selaput virus dan membran sel B menjadi
sekering, virion EBV harus memiliki glikoprotein lonjakan fungsional, gL, dan gp42 lonjakan
(Gambar 4) [15]. Ada juga bukti bahwa glikoprotein ketiga, gB, berkontribusi terhadap fusi
membran [21].

5
Gambar 4. Diagram protein EBV yang terlibat dalam pengikatan sel target dan fusi membran. Perhatikan bahwa
pengikatan sel host dan fusi tampaknya menjadi mekanisme yang berbeda, karena fusi dapat terjadi tanpa ligan
yang mengikat aktif. Sel tersebut mewakili host EBV yang khas, seperti sel B manusia.

Setelah kompleks gH / gL / gp42 menembus membran sel B, kapsid virus dilarutkan,

memungkinkan genom virus dsDNA untuk memasuki sitoplasma. Menarik, viral RNA sering
dikemas dalam virion selain genom dsDNA. Elemen-elemen yang ditransduksi ini disebut
sebagai tvRNA dan termasuk RNA dan mRNA non-coding [16].

EBV tvRNA berkontribusi terhadap infeksi yang sukses, pensinyalan sitokin, dan memulai
transisi menuju siklus kehidupan laten [16] (Gambar 5). Salah satu mRNA, BZLF1 (faktor
transkripsi) membantu mengaktifkan promotor virus yang memicu transisi ke fase pra-laten
[16]. Virion lain membawa RNA, transkrip BNLF2a, berkontribusi pada perlindungan sel B
yang terinfeksi dari sel T sitotoksik [16]. Sementara sel T sitotoksik kurang mahir dalam
mendeteksi sel yang terinfeksi BNLF2a (+) EBV [16], mekanisme yang tepat dimana tvRNA
ini mengurangi pengenalan sel-B tidak diketahui.

Selain perubahan b-sel yang dimediasi tvRNA, protein tegument virus juga
berkontribusi terhadap perkembangan infeksi. EBV tegument dilepaskan ke sitoplasma sel
inang upregulates transkripsi gen IE (intermediate-early) yang biasanya kode untuk faktor
transkripsi lainnya [9]. Faktor-faktor ini kemudian meningkatkan gen yang terlibat dalam
replikasi DNA virus [9]. Oleh karena itu, virion mengangkut RNA virus dan protein
tegument memainkan peran langsung dalam mengubah karakter sel B untuk memastikan

6
keberhasilan infeksi awal dan penghindaran sistem kekebalan tubuh. EBV tvRNA tampaknya
secara langsung berkontribusi pada transisi dari siklus hidup litik ke mode proliferasi laten.
Dalam siklus hidup litik, virus dsDNA umumnya melokalisasi ke inti untuk
replikasi [17]. Viral dsDNA direplikasi menggunakan mesin host, yang merangsang produksi
protein struktural virus. Partikel virus kemudian dirakit dalam nukleus [9,18]. Setelah partikel
penuh dirakit, mereka keluar dari membran nuklir, kemudian membran sel. Ketika keluar dari
sel inang, virion ini dapat memperoleh amplop primer mereka dari membran nuklir, dan
amplop luar dari membran sel [19]. Tidak seperti banyak herpesvirus lainnya, mekanisme
keluar ini tidak memulai kematian sel wajib [19,20].
Kesimpulannya, siklus hidup litik dari virus Epstein-Barr memainkan peran kurang
sentral dalam pemeliharaan infeksi virus daripada apa yang terlihat pada virus herpes yang
terkait erat. Namun, siklus hidup litik sangat diperlukan untuk penyebaran tuan rumah-host
dan transmisi antar sel yang horizontal. Di Epstein-Barr, mekanisme penghindaran respons
imun litik kurang kuat dibandingkan yang terlihat pada virus herpes lainnya. Ini
mencerminkan fakta bahwa EBV lebih mengandalkan replikasi klonal dari sel B yang
terinfeksi (laten dimediasi) untuk pemeliharaan infeksi di dalam inang. Virion membawa
protein dan RNA mengubah karakter sel B yang terinfeksi sehingga memaksimalkan
kemungkinan infeksi yang berhasil, dan dalam beberapa kasus untuk memulai mekanisme
laten. Menariknya, tunas virion litik oleh EBV tidak terlalu mematikan untuk sel inang,
sebuah temuan yang memiliki aplikasi potensial terhadap agen anti-EBV yang diduga.

7
Gambar 5. Diagram protein EBV (kuning), DNA (merah), RNA (ungu) yang ditransduksi oleh virion ke host B-
cell. Faktor tuan rumah manusia ditunjukkan dengan warna biru. RNA EBV yang dikemas dalam virion dapat
berkontribusi terhadap infeksi yang berhasil, penghindaran respons imun, dan transisi ke mekanisme replikatif
laten. Oleh karena itu mekanisme litik ini dapat memperkuat penyakit limfoproliferatif melalui mendukung
mekanisme laten. Panah hijau menunjukkan regulasi atau stimulasi, dan panah merah menunjukkan proses
penghambatan.

Siklus Hidup Laten

Sementara siklus hidup litik EBV sangat penting untuk transmisi host-host dan
memiliki mekanisme yang mendukung infeksi yang sukses dalam manusia host, siklus hidup
laten membuat kontribusi lebih langsung ke penyakit limfoproliferatif. Dalam kebanyakan
kasus, setelah virion EBV mencapai infeksi primer B-limfosit, virus terutama bereplikasi
dengan mekanisme laten [2,16]. Hal ini menghasilkan transformasi sel-B menjadi jalur sel
limfoblastoid yang terus berkembang (LCL's) [2]. Fase laten dalam siklus kehidupan virus
EBV didefinisikan oleh: 1) Tidak ada produksi virion, dan 2) produksi beberapa protein dan
transkrip virus tertentu [22]. Banyak dari protein protein laten pilihan ini memodulasi
karakter sel-sel B inang dan berkontribusi terhadap limfoproliferasi [2,22]. Berbeda dengan
siklus litik di mana genom virus dibawa ke nukleus dan disalin, di bawah litik yang terinfeksi
sel B mengandung beberapa salinan EBV episom ekstrachromosomal [2]. Oleh karena itu,
ketika sel-sel B berproliferasi, begitu juga dengan virus.

8
 Latensi dapat dibagi menjadi 3 tahap berbeda yang ditentukan oleh gen laten yang
diekspresikan (Gambar 6). Dalam latensi I, hanya EBNA1 yang diekspresikan [22],
sedangkan pada latensi II EBNA1 diekspresikan bersama dengan tingkat intermediate
EBNAs dan protein LMP lainnya [2,22]. Latency II dapat dibagi lagi menjadi IIa, di mana
EBNA2, tetapi tidak LMP1 diekspresikan, dan IIb, di mana ekspresi kedua protein ini
terbalik [23] .Latency III ditandai oleh ekspresi yang tidak diatur dari proteom virus laten
lengkap yang mencakup EBNAs 1 -6, serta 3 protein LMP (1,2A, dan 2B) [22]. Transkripsi
dari genom virus yang beredar dimulai pada promotor Wp atau Cp (Gambar 2) [2].
Diferensial splicing dari transkrip panjang yang sama (hijau, gambar 2) menghasilkan mRNA
EBNA yang berbeda. In vivo LCLs biasanya menampilkan profil ekspresi latency III-like
[22]. Sel-B harus memiliki profil ekspresi latensi III untuk generasi sukses LCL in vitro [23].
Selain protein virus ini, beberapa RNA non-coding (EBERs) dan mikro-RNA juga diproduksi
selama semua tiga tahap latensi [2,7,22,24].

Bidang penelitian yang luas dan terus berkembang berpusat pada penentuan bagaimana
faktor-faktor virus laten mengubah host sel B mereka. Apakah faktor laten berkontribusi pada
penghindaran respons imun? Apakah profil ekspresi laten yang berbeda menghasilkan
keganasan yang berbeda? Apa sinyal kaskade di balik viral protein laten modulasi karakter
sel B? Mengapa modus replikasi laten EBV sangat berhasil dalam mempertahankan infeksi
yang tahan lama pada inang manusia? Pertanyaan seperti ini telah dipelajari dengan baik,
mengungkapkan cara manipulasi B-sel yang luas dan rumit oleh EBV.

9
Gambar 6. Spektrum ekspresi gen laten viral pada EBV yang terinfeksi B-cells. Di bawah skema untuk setiap
pola latensi adalah gangguan limfoproliferatif yang terkait dengan setiap jenis ekspresi. Sumber: [22].

Mekanisme Laten Berkontribusi pada Penghindaran Respons Imun

Sebagaimana dicatat di atas, setelah infeksi EBV primer membentuk populasi sel B
terinfeksi kecil di host, proliferasi virus lebih lanjut terjadi terutama dengan mekanisme laten
di mana EBV direplikasi dalam hubungan dengan limfoproliferasi. Meskipun mekanisme
laten mungkin memiliki risiko deteksi yang lebih rendah oleh sistem imun host daripada
produksi virion, semua protein virus EBV adalah imunogenik [22]. Dengan demikian,
penyakit limfoproliferatif terkait dengan latensi high-expression tipe III terjadi terutama pada
host immunocompromised [22]. Infeksi laten tipe I dan II mungkin berhasil pada host
imunokompeten karena presentasi antigen yang berkurang. Menariknya, EBNA1 lebih lanjut
mengurangi presentasi antigen dengan menghambat aktivitas HLA-1 host (manusia MHC)
[25,26]. EBNA1 memiliki pengulangan alanine-glisin panjang yang mencegah protease tuan
dari memecah protein menjadi antigen yang dapat disajikan oleh HLA-1 [25,27]. EBNA1
juga mampu menghambat sintesisnya sendiri [27]. Penyetelan yang baik ini mencegah tingkat
EBNA1 menjadi terlalu tinggi di sel pejamu, yang menurunkan kemungkinan bahwa respon

10
imun akan terpicu. Karena mekanisme ini, tampak bahwa T-sel sitotoksik umumnya tidak
mampu mengenali EBNA1, yang meningkatkan ketahanan infeksi laten tipe I EBV pada
manusia [26].

Epstein-Barr Virus juga menghindar sistem kekebalan tubuh host melalui

penghambatan beberapa jalur sinyal intraseluler. Contohnya adalah penghambatan modulasi
EBNA1 dari aktivitas protein ProMyelocytic Leukemia (PML) dalam Nasopharyngeal
Carcinoma. PML memainkan peran kunci dalam memicu respon anti-viral intraseluler dan
telah diidentifikasi sebagai tumor-suppressor (mungkin melalui mekanisme apoptosis)
[27,42]. Aktivitas EBNA1 memicu fosforilasi dan degradasi kompleks PML yang disebut
PML Nuclear Bodies (PML-NBs) [43]. Fosforilasi ini memicu penghambatan PML melalui
jalur ubiquitinasi kompleks yang digariskan oleh Sivachandran et al. [43]. Sivachandran et al.
menunjukkan bahwa EBNA1 penghambatan dimediasi aktivitas PML-NB mendorong saya
interaksi protein virus dengan kinase host yang disebut CK-2. Para peneliti menunjukkan
bahwa strain EBV yang mengekspresikan EBNA1 dengan domain ikatan CK-2 mutan tidak
mampu menurunkan PML-NB (Gambar 7a, b). Ini menunjukkan bahwa interaksi EBNA1-
CK2 ini sangat diperlukan dalam aktivitas anti-PML yang didorong EBNA1. Peran apa yang
dimainkan CK-2? Sivachandran juga menunjukkan bahwa knockdown siRNA (oleh siCK2α)
dari CK-2 menghapuskan aktivitas anti-PML dari EBNA1 (Gambar 8). Jelas, CK-2 adalah
pemain kunci di jalur ini. Sivachandran et al. melanjutkan untuk menemukan bahwa PML,
EBNA1, dan USP7 colocalize dalam inti sel yang terinfeksi. Dengan demikian, mereka
mengusulkan mekanisme saya yang EBNA1 menyingkap CK-2 ke PML-NBs dalam nukleus,
yang menghasilkan fosforilasi protein-protein ini. Bahkan, para peneliti menemukan bahwa
PML ada terutama dalam bentuk fosforasinya pada sel positif EBNA1 (Gambar 8F). CK-2
fosforilasi sinyal PML untuk protein menjadi polyubiquinated, yang menargetkan untuk
pencernaan oleh protease [43,44]. Menariknya, pekerjaan awal yang tidak dipublikasikan
oleh penulis yang sama menunjukkan bahwa EBNA1 dapat mengubah aktivitas USP7 dalam
mekanisme anti-PML independen [43]. EBNA1 penghambatan mediasi PML-NB manusia
memberikan contoh yang kuat dari kemampuan EBV untuk membajak jalur sinyal
intraseluler host vital. Dalam hal ini, EBNA1 mendorong degradasi protein pro-apoptosis
diduga terlibat dalam respon imun. EBV memanipulasi jalur sinyal lainnya sebagai sarana
untuk mengurangi respon imun tuan rumah. Infeksi laten dapat menginduksi transkripsi c-
myc oncogene, menghasilkan pengurangan sinyal imun-stimulasi host [28].

11
Gambar 7. (A) Immunostaining sel karsinoma Nasopharyngeal manusia ditransfeksikan dengan plasmid yang
mengandung EBNA1 atau EBNA1 ikatan mengikat CK-2 (Δ387-394). Pewarnaan merah untuk EBNA1, hijau
untuk PML dan biru (kontrol) adalah pewarnaan DAPI. Perhatikan penurunan yang signifikan dalam tingkat
PML antara sel EBNA1 yang terinfeksi dan sel CK-2 yang mengikat sel EBNA1 yang tidak kompeten. (B)
Jumlah PML-NBs yang terdeteksi per sel berkurang secara signifikan pada sel yang terinfeksi EBNA1. Efek ini
dibatalkan ketika EBNA1 tidak dapat mengikat CK-2. OriP adalah kontrol vektor kosong. (C) Western blot
yang menunjukkan bahwa kadar protein PML secara signifikan lebih rendah pada sel EBNA-1 yang terinfeksi
liar dibandingkan dengan strain CK-2 mengikat-tidak kompeten (Δ387-394). Mutan EBNA1 kedua (Δ395-450)
tidak dapat mengikat manusia USP7 (protease spesifik Ubiquitin), tidak muncul untuk mengurangi tingkat
PML. Ini menunjukkan bahwa EBNA1-CK-2 interaksi diperlukan untuk EBV dimediasi degradasi PML,
sementara hubungan dengan USP7 tidak diperlukan. Namun, pekerjaan sebelumnya menunjukkan bahwa
hubungan dengan USP7 diperlukan untuk penghambatan kompleks PML-NB. Sumber: [41]. [5]

12
Gambar 8. Immunostaining sel Karsinoma Nasopharyngeal manusia (CNE2E) yang secara stabil
mengekspresikan EBV EBNA1 (dan dengan demikian meniru Latensi 1). Sel diobati dengan dua siRNA untuk
tingkat protein knockdown. siGFP digunakan sebagai kontrol. siCK2α digunakan untuk menghambat aktivitas
kinase manusia CK-2. CK2 berwarna merah, dan PML berwarna hijau (dengan DAPI sebagai kontrol).
Penghambatan CK2 di EBNA1 sel positif menunjukkan pembatalan PML knockdown. Ini mengimplikasikan
CK2 sebagai kekuatan pendorong dalam degradasi PML diperantarai EBNA1. (F) Perbandingan fosforilasi
PML di EBNA1 positif (CNE2E) dan negatif (CNE2) Nasopharyngeal Carcinoma cell lines. PML ada terutama
dalam bentuk terfosforilasi (p517 bernoda, merah) di EBNA1 sel positif. Sumber: [41]. [6

Supresi dari apoptosis tidak hanya memungkinkan untuk infeksi yang

berkelanjutan, tetapi juga memungkinkan untuk menghindari respon imun pejamu. Apoptosis
tidak hanya menghilangkan EBV dari tuan rumah yang dibutuhkan untuk bertahan hidup,
tetapi juga memicu pelepasan "sinyal bahaya" termasuk sitokin dan partikel virus yang
mungkin lebih mudah dideteksi oleh sistem kekebalan manusia [27,37,38]. Salah satu
mekanisme yang dengannya EBV mencegah apoptosis adalah melalui upregulation jalur-jalur
yang menekan-apoptosis yang ada pada sel-sel inang [27]. EBV meregulasi ekspresi protein
anti-apoptosis seperti Bcl-2, A20, dan Surivin [27]. Penelitian telah menunjukkan bahwa
transfeksi sel limfoma Burkitt dengan LMP-1 mengekspresikan vektor menghasilkan
peningkatan yang ditandai dalam ekspresi Bcl-2 [39]. Oleh karena itu, tampak bahwa LMP-1
dapat bertindak sebagai stimulan aktivitas Bcl-2 yang bertindak untuk mencegah apoptosis
pada sel host terinfeksi Latency II / III. Virus Epstein-Barr juga menghasilkan homolog Bcl-2
sendiri, BHRF1, yang berkontribusi terhadap pencegahan apoptosis selama siklus hidup litik
[40] dan laten [41]. Mekanisme dimana Bcl-2 (atau BHRF1) memblokir apoptosis tetap
menjadi subyek perdebatan. Namun, penelitian molekuler telah menetapkan bahwa Bcl-2

13
(atau homolog viral yang relevan) mencegah cytochrome-c eflux dari mitokondria, yang pada
gilirannya mencegah pelepasan caspases sel-menghancurkan [42]. Dengan demikian, EBV
memediasi pensinyalan Bcl-2 dalam sel yang terinfeksi untuk mencegah apoptosis, yang pada
gilirannya mengurangi kemungkinan deteksi oleh sistem kekebalan. Selain modulasi protein
sel host atau jalur sinyal, EBV juga dapat memoderasi ekspresi gennya sendiri untuk
meredam kemampuan sistem kekebalan untuk mendeteksi infeksi.

EBV dapat mempertahankan keberhasilan infeksi bahkan dalam menghadapi respon

imun host ekstrim melalui mengadopsi latensi 0. Selama latensi 0, genom EBV diasingkan ke
inti sel yang terinfeksi dan semua ekspresi dimatikan, yang pada dasarnya menjadikan virus
tidak terdeteksi [27 ]. Hal ini memungkinkan untuk pembentukan reservoir EBV (non-
pembagi) di sel-sel B inang yang dapat bertahan dari badai respons imun.

Secara kolektif, mekanisme ini memungkinkan infeksi EBV untuk bertahan hidup
dan menghindari pertahanan kekebalan tubuh. The Epstein-Barr Virus menghindarkan respon
imun melalui modulasi dari gen jalur seluler yang ada serta modulasi dari ekspresi gennya
sendiri. Area fokus utama tampaknya adalah penghambatan apoptosis dan penghambatan
presentasi antigen. Pada intinya, apoptosis adalah respon imun anti virus karena mencegah
virus mengakses mesin yang dibutuhkan untuk mempertahankan dirinya dan berkembang
biak. EBNA1 mediated inhibition of PML-NBs dan LMP1 mediated upregulation dari Bcl-2
hanyalah dua dari banyak cara dimana EBV mencoba untuk mencegah apoptosis. EBV juga
secara hati-hati mengatur ekspresi gennya sendiri. Gen seperti EBNA1 dapat mengatur
ekspresi mereka sendiri. Selain itu, EBV dapat sepenuhnya mematikan ekspresinya di Latensi
0, dan dengan melakukannya, "tetap membuat profil rendah." Ada pasti tradeoffs untuk
strategi ini karena sementara downregulation of expression mengurangi kemungkinan respon
imun yang sukses, itu juga mengurangi kemampuan virus untuk berkembang biak. Sementara
mekanisme ini memberi kita wawasan tentang bagaimana EBV melawan pertahanan
manusia, penting untuk mengembangkan pemahaman tentang bagaimana protein virus
latennya seperti EBNA1 [31] dan LMP1 [2,29,30] berkontribusi pada karsinogenesis.

EBNA1 dan Perannya dalam Limfoproliferasi

Seperti disebutkan di atas, EBNA1 adalah satu-satunya protein virus EBV yang
diekspresikan pada semua jenis utama infeksi laten, dan merupakan satu-satunya protein

14
virus yang diekspresikan pada infeksi laten I [22,31]. EBNA1 adalah antigen nuklir virus
yang berikatan khusus dengan episome EBV di sel inang. Menariknya, EBNA1 terutama ada
dalam bentuk dimer di vivo. EBNA1 memiliki dua domain utama: domain khusus DNA yang
mengikat ke asal virus replikasi (oriP), dan domain tethering DNA host yang berhubungan
dengan genom B-sel manusia [32]. Struktur kristal EBNA1 telah diselesaikan [33] dan
menunjukkan adanya dua domain yang mengikat unik (Gambar 8). Menariknya, wilayah N-
terminal EBNA1 muncul untuk membungkus bagian dari heliks DNA EBV.

Gambar 8. Model pita dimer EBNA1 yang berasosiasi dengan episome EBV. Perhatikan keberadaan domain
pengikat DNA N-terminal primer (dalam emas). DNA virus berwarna hijau. Sumber: [33].

Pengikatan antara EBNA1 dan episom viral mencerminkan hubungan struktur-

fungsi yang kuat. EBNA1 telah terbukti bertindak sebagai "manajer" penting dari episome
EBV pada sel yang terinfeksi secara laten. Sebagai contoh, EBNA1 sangat penting untuk
replikasi episome EBV dalam mereplikasi garis-sel B [2,32,34]. Oleh karena itu, EBNA1
tampaknya secara tidak langsung membantu dengan karsinogenesis dalam hal itu memastikan
bahwa genom EBV dipertahankan dalam jalur sel B yang berproliferasi. Namun, apakah
EBNA1 memainkan peran yang lebih langsung dalam onkogenesis tetap menjadi bahan
perdebatan.
Baru-baru ini, sepasang mekanisme telah diusulkan oleh mana EBNA1 dapat
berkontribusi pada onkogenesis. Gruhne dan rekan-rekannya di Karolinska Institute baru-
baru ini mempresentasikan sebuah studi di mana mereka memberikan bukti bahwa EBNA1
mungkin memainkan peran dalam reaktif spesies oksigen (ROS) stres pada sel B yang
terinfeksi [31]. Para penulis menyarankan bahwa generasi ini ROS menginduksi kerusakan
oksidatif pada genom sel inang, yang telah ditunjukkan di masa lalu untuk mendukung
pembentukan tumor dan immortalisasi jalur sel B [35]. Pertama, Gruhne et al. menggunakan
tes komet untuk menunjukkan bahwa kerusakan genom pada sel-B secara signifikan lebih
tinggi pada sel yang terinfeksi EBNA1 dibandingkan dengan kontrol (Gambar 9).

15
Menggunakan penanda neon untuk DNA, uji komet memungkinkan kuantifikasi fragmentasi
DNA pada skala seluler. Komet ini terbentuk setelah pemisahan lisat sel menggunakan
elektroforesis gel. Semakin besar tingkat fragmentasi genomik, semakin besar "ekor"
kometnya. Meskipun penelitian sebelumnya telah menemukan kaitan antara EBNA1 dan
kerusakan genom sel inang, tidak ada yang menetapkan mekanisme komprehensif yang
dengannya protein menginisiasi kerusakan ini.

Gambar 9. Uji Comet menunjukkan peningkatan kerusakan DNA yang terkait dengan aktivitas EBNA1. BJAB-
E1 (B-Cell line) adalah EBNA1 positif, sementara BJAB adalah EBNA1 (-). Komet tes mengukur fragmentasi
DNA dengan menggunakan tag fluorescent untuk menandai molekul DNA. Jika genom pecah, potongan akan
putus selama proses elektroforesis. Semakin panjang "komet" semakin banyak fragmentasi dalam DNA. DNAse
digunakan sebagai kontrol positif. Sumber: [31]. [7]

Gruhne membuat kasus yang kuat bahwa EBNA1 memanipulasi komponen seluler
yang ada untuk mendorong destabilisasi genomik. Para penulis menyarankan bahwa
modulasi ini dimulai dengan EBNA1 yang dimediasi aktivasi dari protein kecil yang
tampaknya tidak berbahaya. Secara khusus, Gruhne menunjukkan bahwa EBNA1 meregulasi
tingkat GTP mengikat Rac1 dalam sel tuan rumah. Rac1 adalah G-protein kecil yang
ditemukan dalam sel manusia yang harus diaktifkan oleh GTP untuk berkontribusi pada
pembentukan oksidase NADPH aktif yang disebut NOX2. Gruhne et al. menunjukkan bahwa
EBNA1-positif B-sel menunjukkan peningkatan kadar NOX2 aktif. NOX2 adalah protein
membranosa yang menghasilkan spesies oksigen reaktif superoksida. Gruhne dan rekan-

16
rekannya melanjutkan untuk menunjukkan bahwa aktivitas NOX2 menginduksi kerusakan
genom pada EBNA1-positif EBV yang terinfeksi B-sel [31]. Para peneliti menggunakan
DCFDA untuk mendeteksi aktivitas ROS karena molekul ini berfluoresensi ketika
teroksidasi. Intensitas fluoresensi DCFDA (dan dengan demikian aktivitas ROS) lebih tinggi
pada jalur sel positif EBNA1 dibandingkan dengan kontrol (Gambar 10A). Menariknya,
ketika sel EBNA1-positif diobati dengan inhibitor NOX2 seperti difenilena iodonium (DPI)
dan apocynin (Apo), ada penurunan yang signifikan dalam aktivitas ROS ke tingkat yang
mendekati kontrol (Gambar 10A). Oleh karena itu, EBNA1 menengahi regulasi dari NOX2
menghasilkan ROS stres. Menariknya, penurunan aktivitas ROS melalui penghambatan
NOX2 juga disertai dengan pengurangan fragmentasi genomik. Gruhne dan rekan-rekannya
menggunakan uji komet (Gambar 10B) untuk mengkonfirmasi bahwa DPI dan Apo inhbition
dari NOX2 menyebabkan pengurangan fragmentasi genomik.

Gambar 10. (A) DCDFA tes fluoresensi menunjukkan peningkatan aktivitas ROS yang terkait dengan aktivitas
EBNA1. DCDFA berfluoresensi ketika teroksidasi, dan dengan demikian merupakan ukuran yang baik dari
aktivitas ROS atau stres oksidatif. BJAB-E1 (B-Cell line) adalah EBNA1 positif. Strain BJAB-tTAE1
mengekspresikan EBNA1 hanya dengan tidak adanya tetrasiklin. BJAB adalah EBNA1 (-). Perhatikan
penghapusan induksi ROS oleh EBNA1 setelah perawatan dengan obat anti-NOX2 Apocynin dan DPI. (B)
Demikian pula, tes komet menunjukkan pengurangan yang signifikan dalam fragmentasi DNA di EBNA1 garis
positif pada perlakuan dengan Apo atau DPI. Sumber: [31]. [9]

Oleh karena itu, para peneliti memetakan kaskade di mana EBNA-1 mengaktifkan
generator ROS NOX2, yang pada gilirannya menginduksi kerusakan DNA ke host B-sel
(Gambar 11). Secara keseluruhan, para peneliti membangun hubungan yang kuat antara
produksi ROS yang dimediasi EBNA1 dan ketidakstabilan genomik. Namun, masih harus
ditentukan apakah ketidakstabilan ini adalah agen penyebab limfoproliferasi [34]. Sementara
Gruhne mencatat bahwa kerusakan DNA ada di mana-mana dalam sel tumor positif EBV,
tidak diketahui apakah ini berevolusi sebagai mekanisme untuk memastikan proliferasi virus

17
atau apakah kerusakan ini memiliki beberapa peran lain. Gruhne bahkan menyatakan bahwa
kerusakan ROS yang dimediasi ini mungkin merupakan "kecelakaan" dalam jalur evolusioner
EBV [31]. Studi telah menunjukkan bahwa host NF-kB (terlibat dalam karsinogenesis, lihat
bagian berikutnya) dapat diregulasi oleh kerusakan genom [48]. Tampaknya EBNA1 yang
diperantarai kerusakan DNA mendukung proliferasi sel-B, yang memungkinkan EBV untuk
berhasil dan secara permanen menjajah kolam sel B host. Berlebihan replikasi B-sel oleh
mekanisme yang didorong EBNA1 ini umumnya disimpan di cek pada individu yang
kompeten terhadap kekebalan [31].

Gambar 11. Ringkasan dari kaskade onkogenesis EBNA1-dimediasi digariskan oleh Gruhne et al .. [31]
Perhatikan bahwa itu tetap menjadi subyek perdebatan apakah EBNA1 aktivitas langsung berkontribusi untuk
onkogenesis.

Namun, EBNA1 kemungkinan bukan penyumbang utama untuk onkogenesis dan

immortalisasi sel-B di sebagian besar host yang terinfeksi EBV. Sementara bukti yang
disajikan oleh Gruhne dan rekan-rekan kerjanya tentu meyakinkan, beberapa penelitian telah
menemukan bahwa EBNA1 tidak cukup untuk onkogenesis. Misalnya, Kang et al.
menemukan bahwa ekspresi EBNA1 yang tinggi pada sel B yang dikenalkan pada beberapa
garis keturunan tikus gagal menginduksi limfoma [45]. Selain itu, telah ditunjukkan bahwa
beberapa "B-sel" garis abadi mampu proliferasi tanpa EBNA1, meskipun pada tingkat yang
lebih lambat [46]. Oleh karena itu, masih belum jelas seberapa penting EBNA1 terhadap
transformasi sel-B. Namun, karena EBNA1 adalah satu-satunya protein virus yang
dinyatakan dalam keganasan Latency I seperti Limfoma Burkitt, kemungkinan EBNA1
memainkan peran sentral dalam transformasi sel B pada beberapa kanker terpilih. Sementara
EBNA1 telah terbukti menginduksi kerusakan DNA pada sel-B [31,36], efek ini sangat
diperbesar dalam Latency III mengekspresikan sel [36]. Dengan demikian, penting untuk
mempertimbangkan peran latency II / III protein LMP-1 dalam karsinogenesis.

18
Latent Membrane Protein 1 (LMP1) dan Perannya dalam Limfoproliferasi

Latent Membrane Protein 1 mungkin salah satu gen laten yang paling banyak
dipelajari yang diekspresikan oleh Virus Epstein-Barr. Protein ini adalah penginduksi ampuh
penyakit limfoproliferatif melalui berbagai kaskade yang melibatkan interaksi dengan protein
sel inang. LMP1 diekspresikan pada membran sel B yang terinfeksi selama latensi tipe II dan
III [22]. Menariknya, aktivitas LMP1 meniru reseptor faktor nekrosis tumor yang konstitutif,
CD40 [22,2,29]. Kemampuan limfoproliferatif dari LMP1 terutama berpusat di sekitar
kemampuannya untuk meniru profil sinyal dari CD40 konstitutif aktif. Oleh karena itu, LMP-
1 memodulasi beberapa kaskade sinyal kompleks dalam sel inang, banyak yang berkontribusi
terhadap proliferasi sel, pertumbuhan, atau supresi apoptosis [2] (Gambar 12).

Gambar 12. Ringkasan interaksi EBV LMP-1 dengan protein inang manusia. Perhatikan bahwa banyak cascades
berakhir dengan stimulasi kompleks Nf-kB. Modulasi EBV dari Nf-kB adalah salah satu mode utama
karsinogen yang diinduksi oleh virus. [10]

Seberapa penting LMP1 untuk membentuk garis sel limfoblastoid? Kegiatan

karsinogenik LMP1 pertama kali dijelaskan oleh Wang, Liebowitz, dan Kieff [3]. Para
peneliti menemukan bahwa jalur sel Rat-1 yang dibangun untuk mengekspresikan LMP-1
menunjukkan peningkatan yang signifikan dalam tingkat proliferasi dan resistensi terhadap
penghambatan pertumbuhan [3]. Selanjutnya, suntikan garis sel ini ke dalam pembentukan
tumor tikus yang diinduksi tikus (Gambar 13). Dalam studi awal yang lain, Kaye et al.
menemukan bahwa sel-B diinokulasi dengan episome EBV yang mengandung protein LMP1
mutan tidak mampu menginduksi transformasi yang mengindikasikan kanker terkait EBV

19
[46]. Transformasi sel-B dipulihkan pada saat pengenalan dengan LMP1 tipe liar melalui ko-
infeksi strain EBV P3HR-1.

Gambar 13. Tikus yang disuntik dengan LMP-1 mengekspresikan sel RAT-1. Perhatikan pembentukan tumor di
kaki kanan dan dekat kepala. Ini memberikan bukti bahwa LMP1 merupakan faktor kunci dalam karsinogenesis
diperantarai EBV. Sumber: [3]. [11]

Sudah diterima secara luas bahwa LMP-1 secara langsung berinteraksi dengan
Tumor Manusia Necrosis Factor Receptor associated proteins (TRAFs) [2]. TRAFs ini
mengikat ujung karboksi sitoplasma LMP-1, yang disebut daerah aktivasi C-terminal [2,30].
Protein LMP1 dapat dibagi menjadi 3 subdomain: membran membentang, N-Terminal
sitoplasma, dan C-terminal sitoplasma, semua yang diperlukan untuk induksi limfoproliferasi
in vivo [30] (Gambar 12). LMP-1 mengelola kaskade sinyal kompleks dengan merekrut
TRAF ke CTAR-1 (wilayah aktivasi terminal-C) dan TRADD (domain kematian yang
mengandung protein) [2]. TRADD berkontribusi terhadap pensinyalan LMP1-TRAF tidak
langsung karena ia mengikat TRAF2 [2]. Oleh karena itu, sementara sebagian besar sinyal
TRAF oleh LMP1 dilokalkan ke CTAR1, sinyal tidak langsung dapat terjadi secara tidak
langsung pada CTAR-2. Perekrutan LMP1 dari TRAFs memicu sejumlah jalur yang pada

20
akhirnya berkontribusi pada pemblokiran apoptosis dan inisiasi pertumbuhan dan
pembelahan sel.
Salah satu jalur utama dimana LMP1 memediasi limfoproliferasi adalah melalui
peningkatan regulasi faktor transkripsi manusia NF-kB. Penghambatan kimia NF-kB di
beberapa jalur limfosit yang berproliferasi telah terbukti dapat menghilangkan pertumbuhan
dan pembelahan sel yang cepat [47]. NF-κB tampaknya mendorong pembentukan peradangan
pertumbuhan tumor dan proliferasi [48]. NF-κB tampaknya memiliki beragam fungsi,
terutama yang melibatkan peradangan, induksi pertumbuhan, dan respon imun terhadap
rangsangan seperti sitokin, radikal bebas, dan infeksi virus [49]. NF-κB juga telah dikaitkan
dengan respon inflamasi pada sistem kardiovaskular [49]. Ada kemungkinan bahwa EBV
"membajak" ekspresi NF-κB dapat memperbesar peran fungsi induksi pertumbuhan normal,
yang mengakibatkan kanker. Bagaimana cara LMP1 memanipulasi jalur sinyal untuk
meningkatkan ekspresi Nf-kB?

Seperti disebutkan di atas, jalur pensinyalan LMP1-Nf-kB dimulai dengan interaksi

TRAF dengan wilayah CTAR-1 dari LMP1. Beberapa protein LMP1 dapat berkumpul
bersama pada membran untuk menyajikan beberapa domain sitoplasma dalam satu area, yang
memungkinkan untuk interaksi LMP1-TRAF yang lebih efisien [50]. Mutasi daerah CTAR-1
menghambat ikatan LMP1-TRAF dan berhubungan dengan penurunan yang signifikan dalam
kemampuan LMP1 untuk menginduksi limfoproliferasi (13,9% dari induksi proliferasi sel-B
tipe liar) [51]. Dalam EBV terinfeksi B-sel, sebagian besar TRAF1 dan 3 ada dalam
hubungan langsung dengan LMP1, sementara TRAF 3 lebih jarang mengikat LMP1 [52].
Oleh karena itu, asosiasi LMP1-TRAF1 muncul atas menjadi asosiasi pertama dalam kaskade
primer yang digunakan oleh EBV untuk mengubah manusia B-sel menjadi garis
limfoblastoid abadi.
Di luar langkah pertama ini, kaskade LMP1-NF-kB menjadi sedikit kurang jelas.
Ada beberapa mekanisme yang diusulkan dimana LMP1 mengaktifkan TRAFs akhirnya
sinyal untuk aktivasi NF-kB [53]. Jalur yang diterima secara luas digambarkan pada gambar
12. Dengan jalur ini, LMP1 mengaktifkan TRAFs merekrut protein host yang disebut NIK
(NF-κB-inducing kinase). Telah disarankan bahwa agregasi TRAF2 ganda ke TRAF1 atau
TRADD terikat pada aktivasi drive LMP1 dari NIK [54] (Gambar 13). NIK kemudian
memfosforilasi IKKα, kinase manusia lainnya. IKKα selanjutnya memfosforilasi IκBα [54].
IκBα biasanya menghambat NF-kB dengan mengasingkannya ke sitoplasma [54]. Setelah itu
terfosforilasi oleh IKKα, IκBα adalah ubiquitinated dan terdegradasi, yang memungkinkan

21
NF-kB (sebagai heterodimer p65-p50) untuk memasuki nukleus dan memulai modulasi
transkripsi [2,54]. Mekanisme lain yang diterima dengan baik adalah pemrosesan host p100
(pendahulu) ke NK-kB melalui kegiatan IKKα / NIK (Gambar 12). Sementara mekanisme ini
sangat kompleks dan seluk-beluk baru terus ditemukan, titik utama "mengambil" adalah
bahwa modus utama EBV-dimulai limfoproliferasi adalah kaskade yang dimulai LMP-1 yang
berakhir dengan peningkatan regulasi NF-kB. Penting untuk dicatat bahwa LMP1 juga
meningkatkan regulasi jalur sinyal tumorigenik lain yang tidak melibatkan NF-kB, seperti
jalur kinase JNK [55] (Gambar 12).
Namun, EBV dapat menginduksi onkogenesis bahkan tanpa LMP1, meskipun
dengan kemanjuran rendah. KO lengkap dari LMP1 mengurangi kemampuan EBV untuk
mengubah B-sel menjadi 1,2% (signifikan non-0) dari tingkat kontrol [51]. Ini memberikan
bukti langsung bahwa LMP-1 bukan satu-satunya faktor karsinogenik yang dikodekan oleh
EBV, dan mekanisme "cadangan" ada.
Kesimpulannya, EBV terkait penyakit limfoproliferatif tampaknya sebagian besar didorong
oleh pembajakan LMP1 jalur sinyal host. Efek onkogenik langsung dari EBNA1 tetap
menjadi bahan perdebatan, tetapi perannya sebagai manajer episom virus pada infeksi laten
berkelanjutan sudah terbukti. Banyak faktor EBV litik dan laten berkontribusi pada
penghindaran sistem kekebalan tubuh. Mekanisme penting adalah pencegahan apoptosis oleh
protein viral seperti LMP1. Sementara pemahaman tentang mekanisme molekuler di
belakang kanker terkait EBV adalah penting, penting untuk mengatasi pertanyaan saat ini
yang dihadapi para profesional medis saat ini. Bagaimana infeksi EBV bermanifestasi? Siapa
yang berisiko?

Patologi EBV

Infeksi Epstein-Barr sangat sulit untuk dipahami karena sebagian besar dari mereka
sebagian besar asimtomatik [23]. Namun, penyakit mengerikan seperti karsinoma nasofaring,
limfoma Burkitt, dan karsinoma lambung juga dapat dikaitkan dengan aktivitas EBV.
Mononucleosis adalah semacam jalan tengah, yang biasanya dapat dibiarkan tanpa perawatan
tetapi kadang-kadang menyebabkan komplikasi yang mengancam jiwa. Bahkan lebih dari
90% populasi orang dewasa di dunia memiliki semacam infeksi EBV [1]. Jika begitu banyak
orang terinfeksi, mengapa tingkat kanker tidak setinggi langit?

22
Jawabannya mungkin terletak pada strategi bertahan hidup EBV. Tanpa inangnya, EBV akan
mati, sehingga ia memiliki dorongan evolusioner untuk menjaga inangnya tetap hidup. Untuk
sebagian besar, operator EBV memiliki infeksi yang jatuh ke dalam latensi yang lebih
rendah, yang berarti bahwa beberapa protein virus diekspresikan [23]. Ini berarti bahwa
sementara episom virus akan terus bertahan hidup di sel inang, itu tidak mengekspresikan
banyak protein untuk menghindari deteksi oleh sistem kekebalan tubuh. Infeksi beraktivitas
rendah seperti ini biasanya asimtomatik [23]. Kanker cenderung muncul terutama pada
individu imunosupresi: mereka yang menderita AIDS, kekurangan gizi, atau infeksi lainnya
[23]. Sebagian besar infeksi ini biasanya mengadopsi profil ekspresi latensi III dan jauh lebih
umum di negara berkembang. Pasien transplantasi baru juga berisiko tinggi untuk
mengembangkan kanker terkait EBV [2,31]. Menariknya, efek ini mungkin karena sinergi
antara aktivitas EBNA1 dan aktivitas obat imunosupresif yang digunakan selama
transplantasi [31]. Beberapa obat imunosupresif yang digunakan dalam pembedahan ini
seperti siklosporin A menghasilkan stres ROS [31]. Hal ini dapat menciptakan situasi di mana
obat tersebut menyatukan kerusakan DNA yang diinduksi EBNA1, secara teoritis
berkontribusi terhadap transformasi sel-B.
Sebagian besar kanker yang terkait EBV diidentifikasi oleh biopsi jaringan tumor
menggunakan probe untuk protein virus. Antibodi monoklonal yang digunakan bersama
dengan mikroskopi fluoresensi telah memungkinkan para profesional medis untuk lebih
mudah mengidentifikasi berbagai jenis kanker terkait EBV dalam beberapa tahun terakhir
[56].
Limfoma Burkitt mungkin adalah sel kanker EBV terkait sel B yang paling menarik
karena memiliki prevalensi yang menonjol di dunia "berkembang" dan "berkembang".
"Endemik" limfoma Burkitt sangat prevalen di sub-Sahara Afrika khususnya di daerah yang
menunjukkan tingkat malaria yang sangat tinggi [2]. EBV ditemukan hampir 100% dari
kasus-kasus ini. Kanker dapat bermanifestasi sebagai tumor besar biasanya terletak di dekat
mulut (Gambar 14) [2,57]. Ada kemungkinan bahwa tingkat malaria yang tinggi
berkontribusi pada tingginya tingkat imunosupresi pada populasi ini. Menariknya, limfoma
Burkitt juga sangat prevalen pada pasien AIDS di dunia pertama, dengan EBV ditemukan
pada sekitar 40% kasus [2].

23
Gambar 14. Seorang anak yang menderita Limfoma Burkitt. [12].

24
 DAFTAR PUSTAKA

[1]"Epstein-Barr Virus and Infectious Mononucleosis." Centers for Disease Control.

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/ebv.htm.

[2]Young LS,Rickinson AB. 2004. Epstein-Barr Virus: 40 Years On. Nature Reviews. 4:757-
768.

[3]Wang D, Liebowitz D, Kieff E. 1985. An EBV Membrane Protein Expressed in

Immortalized Lymphocytes Transforms Established Rodent Cells. Cell. 43: 831-840.

[4]Epstein MA, Achong BG, Barr YM. 1964. Virus Particles In Cultured Lymphoblasts from
Burkitt's Lymphoma. The Lancet. 283:702-703.

[5] Baer R, Bankier AT, Biggin MD, Deininger DL, Farrell PJ, Gibson TJ, Hatfull G, Hudson
GS, Satchwell SC, Seguin C, Tuffnell PS, Barrell BG. 1984. DNA sequence and expression
of the B95-8 Epstein-Barr Virus Genome. Nature. 310: 207-211.

[6] Mahiet C, Ergani A, Huot N, Alende N, Azough A, Salvaire F, Bensimon A, Conseiller E,

Wain-Hobson S, Labetoulle M, Berradeau S. 2012. Structural Variability of the Herpes
Simplex Virus 1 Genome in Vitro and In Vivo. Journal of Virology. 86(16): 8592-8601.

[7] "Epstein-Barr Virus." International Agency for Research on Cancer. IARC Monographs.
1997. 49-92. http://monographs.iarc.fr/ENG/Monographs/vol100B/mono100B-6.pdf.
Accessed: 11/3/12.

[8]Liebowitz D, Kieff E. 1993. Epstein-Barr virus. In: The Human Herpesvirus. Roizman B,
Whitley RJ, Lopez C, editors. New York. 107–172.

[9] Swaminathan S, Kenney S. "The Epstein-Barr Virus Lytic Life Cycle." 2009. In: DNA
Tumor Viruses. 285-315.

25
[10] Steven, N. M., Annels, N. E., Kumar, A., Leese, A. M., Kurilla, M. G. and Rickinson, A.
B. 1997. Immediate early and early lytic cycle proteins are frequent targets of the EpsteinBarr
virus-induced cytotoxic T cell response. J Exp Med. 185: 1605–1617.

[11] Hong, G. K., Gulley, M. L., Feng, W. H., Delecluse, H. J., Holley-Guthrie, E. and
Kenney, S.C. 2005. Epstein-Barr virus lytic infection contributes to lymphoproliferative
disease in a SCID mouse model. Journal of Virology. 79: 13993–14003.

[12] Nemerow, G. R., Mold, C., Schwend, V. K., Tollefson, V. Cooper, N. R. 1987.
Identification of gp350 as the viral glycoprotein mediating attachment of Epstein–Barr
virus(EBV) to the EBV/C3d receptor of B cells: sequence homology of gp350 and C3
complment fragment C3d. J. Virol. 61: 1416–1420.

[13] Khyatti M, Patel PC, Stefanescu I, Menezes J. 1991. Epstein-Barr virus (EBV)
glycoprotein gp350 expressed on transfected cells resistant to natural killer cell activity
serves as a target antigen for EBV-specific antibody-dependent cellular cytotoxicity. Journal
of Virology. 65(2): 996-1001.

[14] Borza, C. M. Hutt-Fletcher, L. M. 2002. Alternate replication in B-cells and epithelial

cells switches tropism of Epstein–Barr virus. Nature Med. 8: 594–599.

[15] Kirschner AN, Omerovic J, Popov B, Longnecker R, Jardetzky TS. 2006. Soluble
Epstein-Barr Virus Glycoproteins gH, gL, and gp42 Form a 1:1:1 Stable Complex That Acts
Like Soluble gp42 in B-Cell Fusion but Not in Epithelial Cell Fusion. Journal of Virology.
80(19): 9444-9454.

[16]Jochum S, Ruiss R, Moosman A, Hammershmidt W, Zeidler R. 2012. RNAs in Epstein-

Barr virions control early steps of infection. PNAS. 109(21): 7970-7971.

[17] Daikoku T, Kudoh A, Fujita M, et al. 2005. Architecture of replication compartments

formed during Epstein-Barr virus lytic replication. Journal of Virology.79(6):3409–3418.

[18] Henson BW, Perkins EM, Cothran JE, Desai P. 2009. Self-assembly of Epstein-Barr
virus capsids. J Virol. 83:3877–90.

26
[19]Gong M, Kieff E. 1990. Intracellular trafficking of two major Epstein-Barr virus
glycoproteins, gp350/220 and gp110. Journal of Virology. 64(4):1507-1516.

[20] "Epstein-Barr Virus." http://virology-online.com/viruses/EBV.htm

[21] Spear PG, Longnecker R. 2003. Herpesvirus Entry: An Update. Journal of Virology.
77(19): 10179.

[22] Cesarman E. 2011. Gammaherpesvirus and lymphoproliferative disorders in

immunocompromised patients.Cancer Letters. 305: 163-174.

[23] E Klein, LL Kis, G Klein. 2007. Epstein-Barr virus infection in humans: from harmless
to life endangering virus-lymphocyte interactions.Oncogene. 26:1297–1305.

[24] Fok V, Friend K, Seitz JA. 2006. Epstein-Barr virus noncoding RNAs are confined to
the nucleus, whereas their partner, the human La protein, undergoes nucleocytoplasmic
shuttling. Journal of Cell Biology. 173(3): 319-325.

[25] Apcher A, Daskalogianni C, Manoury B, Fahraeus R. 2010. Epstein Barr Virus-Encoded

EBNA1 Interference with MHC Class I Antigen Presentation Reveals a Close Correlation
between mRNA Translation Initiation and Antigen Presentation. PLoS Pathogens. 6(10):
e1001151.

[26] Hochberg D, Middeldorp JM, Catalina M, Sullivan JL, Luzuriaga K, Thorley-Lawson

DA. 2004. Demonstration of the Burkitt's lymphoma Epstein-Barr virus phenotype in
dividing latently infected memory cells in vivo. PNAS. 101(1): 239-244.

[27] Ning S. 2001. Innate immune modulation in EBV infection. Herpesviridae. 2:1.

[28]God JM, Haque A. 2010. Burkitt lymphoma: pathogenesis and immune evasion, J.
Oncol.

27
[29] Gires O, Zimber-Strobl U, Gonnella R, Ueffing M, Marschall G, Zeidler R, Pich D,
Hammerschmidt W. 1997.Latent membrane protein 1 of Epstein–Barr virus mimics a
constitutively active receptor molecule. The EMBO Journal. 16(20): 6131–6140.

[30] Brodeur SR, Cheng G, Baltimore D, Thorley-Lawson DA. 1997. Localization of the
Major NF-kB-activating Site and the Sole TRAF3 Binding Site of LMP-1 Defines Two
Distinct Signaling Motifs. Journal of Biological Chemistry. 272(32): 19777–19784.

[31]Gruhne B, Sompalle R, Marescotti D, Kamranvar SA, Gastaldello S, Masucci MG. 2009.

The Epstein-Barr virus nuclear antigen-1 promotes genomic instability via induction of
reactive oxygen species. PNAS. 106(7): 2313-2318.

[32] Saha A, Robertson E. 2011. Epstein-Barr Virus–Associated B-cell Lymphomas:

Pathogenesis and Clinical Outcomes. Clinical Cancer Research. 17(10): 3056-3063.

[33] Bochkarev A, Barwell JA, Pueftzner RA, Furey Jr. W, Edwards AM, Frappier L. 1995.
Crystal Structure of the DNA-Binding Domain of the Epstein-Barr Virus Origin-Binding
Protein EBNA1. Cell. 83: 39-46.

[34] Schulz TF, Cordes S. 2009. Is the Epstein-Barr virus EBNA-1 protein an oncogen?
PNAS. 106(7): 2091-2092.

[35] Ranjan D, Siquijor A, Johnston TD, Wu G, Nagabhuskahn M. 1998. The effect of

curcumin on human B-cell immortalization by Epstein–Barr virus. Am Surg. 64:47–51.

[36] Kamranvar SA, Gruhne B, Szeles A, Masucci MG. 2007. Epstein–Barr virus promotes
genomic instability in Burkitt's lymphoma. Oncogene. 26:5115–5123.

[37]Everett H, McFadden G. 2001. Viruses and Apoptosis: Meddling with Mitochondria.

Virology. 288: 1-7.

[38]Hockenbery E, Nunez G, Milliman C, Schreiber RD, Korsmeyer SJ. 1990. Bcl-2 is an

inner mitochondrial membrane protein that blocks programmed cell death. Nature. 348: 334-
336.

28
[39]Henderson S, Rowe M, Gregory C, Croom-Carter D, Wang F, Longneckr R, Kieff E, and
Rickinson A. 1991. Induction of bcl-2 Expression by Epstein-Barr Virus Latent Membrane
Protein 1 Protects Infected B Cells from Programmed Cell Death. Cell. 65: 1107-1115.

[40] Henderson S, Huen D, Rowe M, Dawson C, Johnson G, Rickinson A. 1993. Epstein-

Barr virus-coded BHRF1 protein, a viral homologue of Bcl-2, protects human B cells from
programmed cell death. PNAS. 90: . 8479-8483.

[41] Oudejans JJ, van den Brule AJ, Jiwa MN, de Bruin PC, Ossenkoppele GJ, van der Valk
P, Walboomers JM, Meijer CJ. 1995. BHRF1, the Epstein-Barr virus (EBV) homologue of
the BCL-2 protooncogene, is transcribed in EBV-associated B-cell lymphomas and in
reactive lymphocytes. Blood. 86(5): 1893-1902.

[42] Yang J, Liu X, Bhalla K, Kim CN, Ibrado AM, Cai J, Peng TI, Jones DP, Wang X.
1997. Prevention of Apoptosis by Bcl-2: Release of Cytochrome c from Mitochondria
Blocked. Science. 275: 1129-1132.

[43] Sivachandran N, Cao JY, Frappier L. 2010. Epstein-Barr Virus Nuclear Antigen 1
Hijacks the Host Kinase CK2 to Disrupt PML Nuclear Bodies. Journal of Virology. 84(21):
11113.

[44] Scaglioni, P. P., T. M. Yung, L. F. Cai, H. Erdjument-Bromage, A. J. Kaufman, B.

Singh, J. Teruya-Feldstein, P. Tempst, and P. P. Pandolfi. 2006. A CK2-dependent
mechanism for degradation of the PML tumor suppressor. Cell 126:269-283.

[45]Kang MS, Lu H, Yasui T, Sharpe A, Warren H, Cahir-McFarland E, Bronson R, Hung

SC, Kieff E.2005.Epstein–Barr virus nuclear antigen 1 does not induce lymphoma in
transgenic FVB mice. PNAS. 102:820–825.

[46] Kaye KM, Izumi KM, Kieff E. 1993. Epstein-Barr Virus latent membrane protein 1 is
essential for B-lymphocyte growth transformation. PNAS. 90: 91.50-9154.

29
[47] Cavallini L, Francesconi MA, Zoccarato F, Alexandre A. 2001. Involvement of nuclear
factor-kappa B (NF-κB) activation in mitogen-induced lymphocyte proliferation: inhibitory
effects of lymphoproliferation by salicylates acting as NF-κB inhibitors. Biochemical
Pharmacology. 62: 141-147.

[48] Karin M, Greten FR. 2005. NF-kB: linking inflammation and immunity to cancer
development and progression. Nature Reviews Immunology. 5: 749-759.

[49] Brasier AR. 2006. The NF-kB Regulatory Network. Cardiovascular Toxicology. 6: 111-
130.

[50] Mosialos G, Birkenbach M, Yalamanchili R, Van ArsDale T, Ware C, Kieff E. 1995.

The Epstein-Barr Virus Transforming Protein LMP1 Engages Signaling Proteins for the
Tumor Necrosis Factor Receptor Family. Cell. 80: 389-399.

[51] Dirmeier U, Neuhierl, Kilger E, Reisbach G, Sandberg ML, Hammerschmidt W. 2003.

Latent Membrane Protein 1 Is Critical for Efficient Growth Transformation of Human B
Cells by Epstein-Barr Virus. Cancer Research. 63: 2982-2989.

[52] Devergne O, Hatzivassilou E, Izumi KM, Kaye KM, Kleijnen MF, Kieff E, Mosialos G.
1996. Activation of TRAF1, TRAF2, and TRAF3 with an Epstein-Barr Virus LMP1 Domain
Important for B-Lymphocyte Transformation: Role in NF-kB Activation. Molecular and
Cellular Biology. 7098-7108.

[53] Luftig M, Yasui T, Kang MS, Jacobson N, Cahir-McFarland E, Seed B, Kieff E. 2003.
Epstein-Barr virus latent infection membrane protein 1 TRAF-binding site induces
NIK/IKKα-dependent noncanonical Nf-kB activation. PNAS. 101(1): 141-146.

[54] Sylla BS, Hung SC, Davidson DM, Hatzivassiliou E, Malinin NL, Wallach D, Gilmore
TD, Kieff E, Mosialos G. 1998. Epstein–Barr virus-transforming protein latent infection
membrane protein 1 activates transcription factor NF-kB through a pathway that includes the
NF-kB-inducing kinase and the IkB kinases IKKa and IKKb. PNAS. 95: 10106-10111.

30
[55] Liljeholm S, Hughes K, Grundstrom T, Brodin P. 1998. NF-kB only partially mediates
Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 activation of B-cells. Journal of general
Virology. 79: 2117-2125.

[56] Lawrence Young, Ph.D., Caroline Alfieri, Ph.D., Kevin Hennessy, Ph.D., Helen Evans,
Carl O'Hara, M.D., Kenneth C. Anderson, M.D., Jerome Ritz, M.D., Ralph S. Shapiro, M.D.,
Alan Rickinson, Ph.D., Elliott Kieff, M.D., Ph.D., and Jeffrey I. Cohen, M.D. 1989.
Expression of Epstein–Barr Virus Transformation–Associated Genes in Tissues of Patients
with EBV Lymphoproliferative Disease. New England Journal of Medicine. 321:1080-1085.

31