Perspektif Vol. 17 No. 2 /Des 2018. Hlm 139- 149 DOI: http://dx.doi.org/10.21082/psp.v17n2.

2018, 139 -149

ISSN: 1412-8004

PERBANYAKAN NILAM (Pogostemon cablin Benth) MENGGUNAKAN

MEDIA DASAR ALTERNATIF SECARA IN VITRO
In vitro multiplication of Patchouli uses alternative primary medium

AMALIA dan ENDANG HADIPOENTYANTI

Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat
Indonesian Spice and Medicinal Crops Research Institute
Jl. Tentara Pelajar No. 3, Bogor 16111, Indonesia
Email : amalia_achi@yahoo.co.id

ABSTRAK media pengganti kultur jaringan karena relatif

Benih sangat menentukan dalam keberhasilan
usahatani nilam. Perbanyakan benih secara
konvensional vegetatif sangat mudah
menularkan penyakit dan membutuhkan waktu
yang relatif lama, seperti benih nilam yang
diperbanyak selama ini dengan setek. Cara ini
memiliki kendala, yang diharapkan dapat diatasi
dengan teknik kultur jaringan. Media merupakan
faktor utama dalam perbanyakan kultur jaringan.
Perbanyakan dan perkembangbiakan tanaman
nilam dengan metode kultur jaringan secara
umum sudah dapat dilakukan tetapi untuk
keberhasilannya sangat tergantung pada jenis
media, terutama bila ditinjau dari sisi ekonomi.
Karena aplikasi teknologi kultur jaringan untuk
tanaman nilam masih dirasakan mahal. Tulisan
ini mengulas tentang penggunaan media untuk
menekan biaya media kultur jaringan yaitu
dengan menggantikan media dasar MS
(Murashige-Skoog), ZPT dan vitamin dengan
media dasar alternatif dan air kelapa 10%. Air
kelapa merupakan salah satu diantara beberapa
persenyawaan kompleks alamiah yang sering
digunakan dalam kultur jaringan. Sedangkan
media dasar alternatif berupa pupuk daun dapat
berfungsi sebagai penyedia unsur hara makro
mikro dengan komposisi N:P:K (20:20:20). Hal
ini untuk mengatasi permasalahan, agar media
kultur jaringan menjadi relatif murah, dan harga
jual benih lebih terjangkau. Air kelapa yang
digunakan berasal dari kelapa hijau yang
dicirikan dengan volume air masih memenuhi
buah dan keadaan endosperm (daging kelapa)
yang belum menebal. Tetapi meski bahan
alternatif ini sudah banyak digunakan untuk
mudah tersedia, murah, menghasilkan benih
seragam dan sehat, ternyata belum dapat
menunjukkan hasil yang setara dibandingkan
dengan penggunaan media MS dalam
perbanyakan tunas nilam secara kultur jaringan.
Oleh karena itu berbagai penelitian perbanyakan
tanaman nilam dengan berbagai metode kultur
jaringan agar menghasilkan benih yang murah,
sehat, seragam dan dalam jumlah besar masih
perlu terus diupayakan.
Kata Kunci : Nilam, media dasar alternatif,
perbanyakan, ZPT
ABSTRACT
The quality of seeds are very important in
patchoulli cultivation. Cutting multiplication
seeds are usually easy in transmitting diseases
and relatively need a long time to grow. So far
patchouli seeds obtained conventionally with
cutting has some constraints, hence tissue culture
techniques becomes the solution once. The
success of propagation and breeding of plants
with tissue culture methods in patchouly is
already conducted but is still expensive to be
implemented. The paper review patchouli tissue
culture propagation by replacing basic media MS
(murashige-skoog, Growth Regulating
Substances (GRS) and vitamine with alternate
basic medium and 10% coconut water Coconut
water is one of several natural complex
compounds that are often used in tissue culture.
The alternative medium as leaf fertilizer can serve
as a micro and macro nutrient provider with
composition N: P: K (20:20:20). Hopefully, It

Perbanyakan Nilam (Pogostemon cablin Benth) Menggunakan Media Dasar Alternatif Secara In Vitro 139
(AMALIA dan ENDANG HADIPOENTYANTI)
could become the solution to make tissue culture dilakukan untuk memecahkan kendala tersebut
of patchoulli seeds cheaper and more available. adalah dengan melakukan perbanyakan benih
Actually, eventhough the overall substitution of dengan teknik kultur jaringan, yaitu perbanyakan
MS medium with full alternative media has pada media yang kaya nutrisi dalam kondisi
already used in limited areas, it has not able yet aseptik. Penggunaan teknik ini dibutuhkan
showing equal results with the use of basic modal besar untuk pengadaan alat-alat
medium MS media in tissue culture patchouli laboratorium seperti Laminar Air Flow dan
multiplication. Therefore, the researches on autoclave dan lain-lain. Walaupun sekarang sudah
patchouli tissue culture should be continued to banyak penggunaan LAF yang lebih sederhana
achieve the huge number, healthy, unity, and untuk skala kecil dengan harga yang lebih
unexpensive seeds. murah, akan tetapi modal awal yang dikeluarkan
masih terhitung besar dibandingkan dengan cara
Keywords: Patchouli, alternative primary
konvensional.
medium, multiplication, SGR
Upaya untuk mengatasi permasalahan
pengembangan tanaman nilam yaitu dengan
PENDAHULUAN
melakukan teknik pendekatan bioteknologi,
untuk pelestarian plasma nutfah, peningkatan
Nilam (Pogostemon cablin Benth.) merupakan
keragaman genetik, perakitan varietas, maupun
tanaman aromatik penghasil minyak atsiri.
perbanyakan tanaman. Salah satu teknik
Minyak nilam dalam dunia perdagangan disebut
perbanyakan tanaman tersebut adalah dengan
patchouli oil yang dibutukan dalam industri
cara kultur jaringan (in vitro). Keuntungan
kimia, parfum, kosmetik, dan kesehatan
perbanyakan kultur jaringan melalui
(aromaterapi). Selain itu, minyak nilam memiliki
organogenesis atau induksi langsung ini adalah
daya pestisida sehingga dapat digunakan sebagai
1) waktu perbanyakan lebih cepat, 2) jumlah
pengusir serangga (Nuryani et al 2003). Fungsi
benih yang dihasilkan tidak terbatas jumlahnya,
utama minyak nilam yaitu sebagai fiksatif
3) jumlah eksplan yang digunakan kecil (tunas
(pengikat) minyak atsiri lain yang sampai
terminal/aksilar), 4) mendapatkan tanaman yang
sekarang belum ada subsitusinya
bebas patogen, virus, hama dan penyakit, 5) tidak
(Hadipoentyanti et al 2009). Indonesia adalah
memerlukan lahan yang luas, dan 6) genotip
pengeskspor minyak nilam terbesar di dunia.
sama dengan induk, 7) pengaturan faktor-faktor
Sampai saat ini hampir 90% pemenuhan
lingkungan lebih dapat dikontrol (kultur in vitro)
kebutuhan minyak nilam dunia disediakan oleh
serta dapat dilakukan sepanjang tahun tanpa
Indonesia dari tahun ke tahun (Djazuli, 2011)
terpengaruh iklim (Santoso and Nursandi 2003;
Daerah nilam pada tahun 2017 tersebar di 29
Hadipoentyanti at al 2008).
provinsi, dengan luas areal tanaman 21.754 ha,
Benih sebagai salah satu faktor produksi
produksi minyak nilam 2.275 ton/ha dari
yang sangat menentukan dalam keberhasilan
produktivitas 105 kg/ton daun nilam dengan
usahatani nilam. Salah satu kendala yang
rata-rata volume 1.300 – 1.500 ton/th (Ditjenbun,
dihadapi adalah penyediaan benih yang tepat
2017). Menurut Nuryani et al (2005), terdapat 3
waktu dan tepat jumlah. Selama ini pengadaan
varietas unggul yang mempunyai produksi terna,
benih nilam dilakukan secara konvensional
kadar, dan mutu minyak yang tinggi yaitu
dalam bentuk setek atau benih di polibag,
Sidilakang, Lhoukseumwe, dan Tapak Tuan.
sehingga dalam satuan waktu ketersediaannya
Pada tahun 2013 telah dilepas varietas unggul
sangat terbatas. Biaya produksi benih yang
baru Patchoulina 1 dan Patchoulina 2 yang tahan
cukup tinggi terutama karena mahalnya media
terhadap layu bakteri yang menjadi penyakit
kultur yang digunakan, pada akhirnya juga
utama pada nilam (Hadipoentyanti, 2014).
mempengaruhi harga jual pada benih.
Perbanyakan nilam yang dilakukan secara
Media merupakan faktor utama dalam
vegetatif dengan setek sangat mudah
perbanyakan dengan teknik kultur jaringan.
menularkan penyakit apabila tanaman induk
Keberhasilan perbanyakan dan perkembang-
terinfeksi patogen. Salah satu usaha yang

140 Volume 17 Nomor 2, Des 2018 :139 - 149

biakan tanaman dengan metode kultur jaringan
secara umum sangat tergantung pada jenis media
yang digunakan. Media tumbuh pada kultur
jaringan sangat besar pengaruhnya terhadap
partumbuhan dan perkembangan eksplan serta
benih yang dihasilkannya.
Penggunaan media tanam berupa pupuk
majemuk komersial yang harganya lebih
terjangkau, menjadi salah satu solusi yang akan
dicoba, sehingga diharapkan harga jual benih
nilam hasil kultur jaringan akan lebih murah
(Hadipoentyanti et al. 2009). Penggunaan pupuk
sebagai sumber nutrisi aternatif pada teknik
kutur jaringan telah dilakukan oleh Ogreo et al
(2012) pada komoditas kentang. Pupuk dapat
dimanfaatkan sebagai sumber mikro serta makro
nutrient yang dapat menurunkan biaya sebesar
92,2%. Aplikasi pupuk pada teknik kultur
jaringan sering disebut dengan istilah LCM (Low
Cost Medium ).
Tulisan ini bertujuan untuk membahas
kemungkinan perbanyakan nilam melalui kultur
jaringan dengan pendekatan menggunakan
kombinasi berbagai media dasar alternatif yang
Tabel 1. Komposisi Media Dasar MS (Murashige
and Skoog)
Jenis Kandungan Bahan Kimia Mg/L)
Unsur Makro Mg SO 4 7H2O
KH2PO4
CaCl22H2O
NH4NO3
KNO3
Unsur Mikro NaMoO42H2O
H3BO3
MnSO44H2O
ZnSO4 .7N2O
CuSO4.5H2O
KI
CoCl2.6H2O
Vitamin Thiamin
Piridoksin
Asam nikotinat
Glisin
Myo inositol
Sumber : George and Sherington , 1984
Perbanyakan Nilam (Pogostemon cablin Benth) Menggunakan Media Dasar Alternatif Secara In Vitro
(AMALIA dan ENDANG HADIPOENTYANTI)
lebih terjangkau secara ekonomi, tetapi tetap
diharapkan sesuai dengan sasaran perbanyakan
benih sehat, seragam dan dalam julah banyak.
Media perbanyakan kultur jaringan yang diulas
adalah media dasar alternatif dan media
tambahan meliputi zat pengatur tumbuh, air
kelapa, media dasar alternatif.
MEDIA DASAR KULTUR JARINGAN
Media adalah salah satu faktor penentu
keberhasilan dalam perbanyakan dengan teknik
kultur jaringan. Komposisi media yang
digunakan tergantung jenis tanaman yang
diperbanyak (Andiani 2008). Media yang
digunakan untuk kultur in vitro tanaman dapat
berupa media padat atau cair. Media padat
digunakan untuk menghasilkan kalus, sedangkan
media cair digunakan untuk kultur sel. Media
kultur in vitro mengandung lima komponen
utama yaitu senyawa anorganik, sumber karbon,
vitamin, zat pengatur tumbuh dan suplemen
organik (Yuwono 2012). Komponen-komponen
tersebut digunakan untuk memenuhi kebutuhan
zat hara dan mengarahkan pertumbuhan eksplan
(Andiani 2008). Eksplan tidak dapat bertahan
lama pada suhu simpan 4oC karena mengalami
chilling injury, suhu simpan yang lebih baik
adalah 25 oC (Kishi dan Takagi 1997).
370 Media dasar kultur in vitro yang sering
digunakan untuk perbanyakan tanaman nilam
170
adalah media MS (Murashige dan Skoog). Media
440
ini mengandung unsur hara makro dan unsur
1650 hara mikro seperti myoinositol, niacin, pyridoxin
1900 HCl, thiamin HCl, glycine dan glukosa
0,25 (Gunawan 1987). Air kelapa mengandung
6,2 komponen yang dibutuhkan dalam pertumbuhan
22,3 tanaman kultur in vitro. Bahan organik yang
8,6 dikandung air kelapa hampir sama seperti pada
media MS, yaitu gula, gula alkohol, asam amino,
0,025
asam organik, vitamin dan fitohormon (Mandang
0,83
1995). Muawanah (2005) pada pembuatan media
0,025
dapat ditambahkan bahan organik seperti air
0,1
kelapa, ekstrak tomat, ekstrak tauge dan ekstrak
0,5
buah pisang sebagai sumber gula, vitamin, ZPT
0,5
dan asam amino menggunakan tambahan ekstrak
2
pisang pada media kultur anggrek Dendrobium
100
canayo.
141
 Media kultur jaringan dapat dimodifikasi
dengan menggunakan media berbahan dasar
pupuk. Media kultur dengan bahan dasar pupuk
anorganik telah menghasilkan pertumbuhan
pada tanaman nilam, sehingga media pupuk
anorganik dapat menjadi alternatif pengganti
media dasar kultur jaringan (Soedjono dan
Kamidjono, 1992). Pupuk anorganik yang biasa
digunakan dalam kultur jaringan adalah
growmore, vitabloom, hyponex dan gandasil.
Pupuk tersebut berbentuk butiran dan memiliki
keunggulan yaitu, baik untuk pertumbuhan
vegetatif, komposisi lengkap terdiri dari unsur
hara makro dan mikro. Selain media, faktor lain
yang menentukan.
ZAT PENGATUR TUMBUH
Dalam kultur jaringan, dua golongan zat
pengatur tumbuh (ZPT) yang sangat penting
adalah sitokinin dan auksin. Sitokinin berperan
penting untuk merangsang pembelahan sel dan
auksin digunakan secara luas dalam kultur
jaringan untuk merangsang pertumbuhan kalus,
suspensi sel dan organ. Berdasarkan penelitian
Rahman et al (2003) menyatakan bahwa ZPT
dalam konsentrasi rendah dapat mempengaruhi
proses fisiologis tumbuhan. Hal ini disebabkan
karena adanya asam yang langsung
mempengaruhi sintesis protein dan mengatur
aktivitas enzim.
Zat pengatur tumbuh (zpt) merupakan
senyawa organik bahan nutrisi yang aktif dalam
konsentrasi rendah dan menimbulkan tanggap
secara biokimia, fisiologis dan morfologis
(Wattimena, 1988). Perbanyakan nilam melalui
kultur jaringan dengan media dasar MS dan
penambahan zpt BAP telah berhasil dilakukan
dengan hasil multiplikasi yang signifikan yaitu
lebih sepuluh tunas per eksplan. Namun zpt
tersebut mahal harganya, sehingga harga benih
asal kultur jaringan sangat mahal dibanding
benih konvensional. Metode perbanyakan nilam
dengan media padat menggunakan media dasar
alternatif dan subsitusi vitamin alami diharapkan
dapat menekan harga jual benih sekaligus
menghasilkan benih sehat dalam jumlah yang
banyak dan seragam serta murah harganya.
142
Menurut Hendaryono (2000) berkaitan
dengan tujuan perdagangan skala besar,
pemakaian hormon ini sangat mahal. Hormon
dan vitamin merupakan bahan yang diperlukan
dalam jumlah sedikit, tetapi harganya sangat
mahal (Sandra, 2003). Maka sebagai
penggantinya, bisa digunakan hormon alami,
misalnya hormon alami golongan sitokinin yaitu
hormon zeatin, yang dapat diperoleh dari jagung.
Hormon alami lain yang dapat digunakan adalah
diphenyl urea yang terkandung dalam air kelapa
yang aktivitasnya seperti sitokinin (Hendaryono,
2000).
AIR KELAPA
Air kelapa merupakan salah satu diantara
beberapa persenyawaan kompleks alamiah yang
sering digunakan dalam kultur jaringan untuk
perbanyakan. Penggunaan air kelapa sebagai
bahan organik merupakan salah satu cara untuk
menggantikan penggunaan bahan sintetis yang
dipakai dalam pembuatan media kultur, seperti
kinetin. Hal ini disebabkan karena, buah kelapa
yang mudah diperoleh dan harganya terjangkau
lebih murah dibandingkan bahan sintetis yang
sulit didapatkan dan harganya yang relatif lebih
mahal. Selain itu, keunggulan air kelapa juga
sepadan dengan bahan sintetis yang
mengandung sitokinin atau merupakan hormon
pengganti sitokinin. Kristina dan Syahid (2012)
menyebutkan bahwa dalam 1 liter air kelapa
muda mengandung ZPT kinetin (sitokinin)
sebesar 273,62 mg dan beberapa mineral lainnya.
Penggunaan media dasar sebagai pengganti
zpt dan vitamin dapat digunakan bahan alami,
seperti zat yang terkandung dalam air kelapa. Air
kelapa merupakan endosperm atau cadangan
makan cair sebagai sumber energi yang banyak
mengandung zat pengatur tumbuh. Air kelapa
yang baik untuk kultur jaringan adalah dari
kelapa hijau yang masih muda diperkirakan
berumur 7-8 bln. Menurut Letham (1974) air
kelapa dikenal sebagai salah satu sumber
sitokinin dan mengandung IAA (Indole Acetic
Acid) yang merupakan kelompok auksin
(Mandang, 1993). Beberapa zat yang terkandung
dalam air kelapa adalah vitamin C, asam
Volume 17 Nomor 2, Des 2018 :139 - 149
Tabel 2. Kandungan air kelapa dalam 100 ml
Jenis Kandungan Bahan Kimia %/100 ml
Unsur utama Zeatin 290,47 ppm
Kinetin 273,62 ppm
Auksin 198,55 ppm
Sumber : Pierik, 1987
nikotianat, asam folat, asam pantotenat, biotin
dan riboflafin (Anonim, 2007).
George and Sherrington (1984) menyatakan
bahwa penambahan air kelapa pada media kultur
jaringan dapat meningkatkan pertumbuhan kalus
maupun tunas. Menurut Pierik (1987) air kelapa
yang telah berhasil dan banyak digunakan
dengan konsentrasi 5-15%. Kandungan IAA,
Kinetin, dan Zeatin tersebut sebesar 198,55 ppm
273,62 ppm, dan 290,47 ppm. Hasil penelitian
terdahulu menunjukkan bahwa penambahan zpt
air kelapa konsentrasi 10% di dalam media MS
merupakan media terbaik untuk induksi tunas
tanaman nilam (Hadipoentyanti et al. 2009).
Widiastoety et al., (1997) menyebutkan
bahwa air kelapa mengandung zeatin, ribozeatin
yang juga merupakan kelompok ZPT sitokinin,
disamping itu kandungan gula alkohol yang
berfungsi sebagai bahan baku menghasilkan
energi untuk proses respirasi dan juga sebagai
bahan pembentukan sel-sel baru yang dalam
konsentrasi tertentu dapat merangsang
pertumbuhan perakaran. Modifikasi media ½
MS dan penambahan air kelapa merupakan
media yang baik untuk induksi akar eksplan
tanaman kentang (Purwanto et al., 2007).
RESPON PERTUMBUHAN EKSPLAN
PADA MEDIA DASAR ALTERNATIF
DENGAN PENAMBAHAN AIR KELAPA
Percobaan Hadipoentyanti et al. (2010) yang
dilakukan untuk menguji pengaruh media dasar
alternatif yang dikombinasikan dengan air kelapa
10% (AK) dan BAP 0,5 mg/l dibanding dengan
media dasar alternatif (H) konsentrasi 0,5; 1; 1,5;
2 g/l. Pada media MS dengan penambahan air
kelapa 10%, tunas yang terbentuk cenderung
lebih tinggi dengan daun yang lebih lebar dan
berwarna hijau (Tabel 2), karena nilam termasuk
yang rakus hara, mampu menyerap unsur hara
yang cukup tinggi. Hasil analisis hara utama
tanaman nilam menunjukkan kandungan N,
P2O5, K2O, CaO dan MgO masing-masing sebesar
5,8; 4,9; 2,8; 5,3; dan 3,4% (Trisilawati. O, 2007).
Andini (2016) dari penelitiannya pada temulawak
bahwa penggunaan air kelapa 150 - 200 mL/L
cenderung meningkatkan multiplikasi tunas
dengan kisaran jumlah tunas 4 - 7 per eksplan.
Menurut Hadipoentyanti et. al (2010) media dasar
alternatif dengan penambahan air kelapa 10%,
menghasilkan daun yang berwarna kekuningan-
kuningan hanya sebagian kecil menghasilkan
daun berwarna hijau. Pertumbuhan tunas nilam
pada media alternatif terlihat kurang baik bila
dibandingkan dengan perlakuan media MS
(kontrol). Hal ini karena kandungan N dalam
media MS sebesar 821,5 mg/l, sedangkan
kandungan N dalam media dasar alternatif lebih
rendah yaitu hanya sebesar 200 mg/l (Muawanah,
2005). Adapun menurut Kasutjianingati dan
Irawan, 2013) penggunaan pupuk organik cair

Tabel 3. Respon media dasar dengan penambahan air kelapa 10% terhadap jumlah daun, jumlah tunas,
dan tinggi tunas nilam (umur 12 minggu)
Media Parameter yang diamati
Perlakuan Jumlah Daun Jumlah Tunas Tinggi Tunas (cm)
MS + AK 10% (kontrol) 35,00 a 18,00 a 3,94 a
H + AK 10% 12,40 c 6,70 c 2,92 a
H0,5 + AK 10% 13,60 c 6,40 c 3,12 a
H1 + AK 10% 15,40 b 8,50 b 3,14 a
H1,5 + AK 10% 17,80 b 9,30 b 3,24 a
H2 + AK 10% 27,00 b 12,90 b 3,60 a

Sumber : Hadipoentyanti et al., 2010

Ket : AK = Air kelapa ; H = media dasar alternatif

Perbanyakan Nilam (Pogostemon cablin Benth) Menggunakan Media Dasar Alternatif Secara In Vitro 143
(AMALIA dan ENDANG HADIPOENTYANTI)
sebagai media mampu menjadi media kultur in
vitro anggrek bulan (Phalaenopsis amabilis).
Pada perbanyakan in vitro temulawak,
aplikasi air kelapa muda konsentrasi 15%
memberikan respon tumbuh lebih baik (Seswita.
2010). Sedangkan menurut Bey et al. (2006)
perlakuan air kelapa secara tunggal pada
konsentrasi 250 ml/l mampu menghasilkan daun
dan akar lebih cepat pada kultur in vitro anggrek
(Phalaenopsis amabilis BL.) serta untuk tanaman
kentang dengan konsentrasi 30% (Nadapdap,
2000). Sedangkan menurut (Kasutjianingati, 2013)
bahwa kandungan komposisi dari air kelapa dan
pisang ambon pada media dasar pada hasil
penelitian pengaruhnya diperkirakan setara
dengan BAP 2 mg/L terhadap metabolisme
anggrek bulan.
Media dasar alternatif mengandung unsur
esensial yang dibutuhkan oleh tanaman yang
umum digunakan yang mengandung sedikitnya
3 unsur makro esensial, yaitu nitrogen, fosfor dan
kalium. Pada media dasar alternatif yang
digunakan, unsur hara makro yang terkandung
di dalamnya yaitu N20%, P20%, dan K20%, dan
beberapa unsur makro lain seperti S, Ca, dan Mg,
sedangkan unsur hara mikro terdiri dari B, Fe,
Zn, Co, Cu, Mn, dan Mo. Pemberian unsur N, P
dan K sangat penting untuk memperkuat akar,
memperbanyak daun dan meningkatkan
kandungan minyak dalam nilam (Najmi, 1995).
Unsur hara N dapat merangsang pertumbuhan
vegetatif sehingga dapat menyokong
perkembangan batang dan daun. Kalium yang
berfungsi sebagai aktivator berbagai enzim dan
merangsang pertumbuhan tunas lebih cepat,
sehingga kekurangan unsur kalium
Tabel 4. Respon media dasar alternatif dengan penambahan BAP 0,5 mg/l terhadap jumlah daun,
jumlah tunas, dan tinggi tunas nilam (umur 12 minggu)
Media
Perlakuan Jumlah Daun
MS + B 0,5 (kontrol) 54,40 a
H + B0,5 17,40 c
H0,5 + B0,5 18,60 c
H1 + B0,5 22,40 b
H1,5 + B0,5 27,80 b
H2 + B0,5 35, 55 ab
Sumber : Hadipoentyanti, et al. 2010
Keterangan : H =Media dasar alternatif ; B =BAP
144
menyebabkan pertumbuhan tanaman menjadi
kerdil (Najmi, 1995).
Berdasarkan komposisi diatas, perbedaan
yang mendasar antar media MS dan media dasar
alternatif adalah pemberian vitamin kedalam
media MS, sedangkan pada media dasar
alternatif tidak ditambahkan vitamin. Kedua
media tersebut menggunakan sumber karbon
berupa sukrosa sebanyak 30 g/l dan ZPT yang
sama (air kelapa 10% dan BAP 0,5 mg/l). Salah
satu faktor yang mempengaruhi pertumbuhan
dan perkembangan dalam perbanyakan
(multiplikasi) tunas in vitro adalah sukrosa.
Sukrosa diserap oleh jaringan tanaman melalui
transpor aktif maupun transpor pasif, dan
biasanya dihidrolisis sebagian atau seluruhnya
menjadi komponen monosakarida glukosa dan
fruktosa (Ardian dan Desery, 2006).
PEMBENTUKAN TUNAS PADA
MEDIA DASAR ALTERNATIF DENGAN
PENAMBAHAN ZPT
Pada media dasar MS dengan penambahan
BAP 0,5 mg/l (kontrol), pertumbuhan kultur
terkonsentrasi pada pembentukan tunas-tunas
terlebih dahulu, daun yang terbentuk berukuran
kecil-kecil tetapi jumlahnya banyak dan
berwarna hijau. Kandungan mineral hara K yang
terdapat pada air kelapa dapat mempengaruhi
pertumbuhan tanaman (Nihayati et al, 2013)
(Romeida et al. 2013) juga menyatakan bahwa
sumber sitokinin dari penggunaan air kelapa
mempercepat multiplikasi PLBs (Protocorm like
bodies) anggrek dibandingkan dengan
menggunakan kinetin maupun BAP (Tabel 4).
Parameter yang diamati
Jumlah Tunas Tinggi Tunas (cm)
19,50 a 4,24 a
8,40 b 2,92 a
9,30 b 3,34 a
11,50 b 3,74 a
12,90 b 3,20 a
15,60 a 3,87 a
Volume 17 Nomor 2, Des 2018 :139 - 149
Tabel 5. Komposisi Media dasar alternatif (H)
Jenis Kandungan Bahan Kimia % /100 g
Unsur utama Total Nitrogen 20
-Nitrat 4 gradual menjadi abu-abu lalu coklat. Kekurangan
-Notrogen cair 4 nutrisi dari media dan akumulasi racun pada
-Ammonical 12
nitrogen
P2O5 20
K2O 20
Sumber: Nadapdap, C. 2000
Menurut penelitian Hadipoentyanti et al.
(2008) penambahan BAP 0,5 mg/l dan air kelapa
10% terhadap media dasar alternatif kurang
memberikan hasil yang diharapkan. Tunas yang
terbentuk sedikit dengan daun yang menguning.
Ada tiga kemungkinan yang menyebabkan
eksplan gagal berorganogenesis. Pertama, sel-sel
pada eksplan kehilangan totipotensi. Kedua, sel-
sel pada eksplan tidak mampu berdiferensisi.
Ketiga, eksplan mempunyai batasan fisiologi
untuk dapat berdiferensisi karena konsentrasi
zat pengatur tumbuh dan komposisi media yang
tidak tepat. Karena itu jika ketersediaan unsur
hara yang dalam hal ini tidak tercukupi maka
pertumbuhan eksplan tidak akan optimal (Tabel
5).
Kultur yang dihasilkan pada media dasar
alternatif memiliki daun yang menguning dan
ukuran yang kecil jika dibandingkan dengan
kontrol. Warna kekuningan pada plantlet
merupakan suatu proses fisiologis yang disebut
klorosis. Selain itu terdapat pula kultur yang
Sumber : Amalia (koleksi pribadi)
Gambar 1. Planlet nilam umur 12 minggu pada media
(a) MS + AK 10% warna daun hijau
(b) MS + B0,5 warna daun hijau
(c) Media dasar alternatif (H) warna daun hijau kekuningan
Perbanyakan Nilam (Pogostemon cablin Benth) Menggunakan Media Dasar Alternatif Secara In Vitro
(AMALIA dan ENDANG HADIPOENTYANTI)
megalami gejala penuaan dini/senesensi lebih
cepat. Proses senesensi pada kultur in vitro dapat
terjadi melalui bentuk yang berbeda seperti daun
menguning atau kalus berubah warna secara
kultur juga merupakan penyebab senesensi
(Prihatmani dan Mattjik 2004). Secara
keseluruhan, pertumbuhan kultur nilam yang
dihasilkan pada konsentrasi 2 g/l merupakan
hasil terbaik diantara konsentrasi lainnya
(Gambar 1).
PERTUMBUHAN TUNAS PADA
MEDIA DASAR MS DENGAN
PENAMBAHAN ZPT DAN AIR KELAPA
Pertumbuhan tunas pada media dasar MS
dengan penambahan BAP 0,5 mg/l (kontrol)
menunjukkan hasil yang lebih baik dibandingkan
pada media dasar alternatif. Hal ini terbukti
dengan banyaknya tunas yang terbentuk serta
daun yang berwarna hijau. Media MS merupakan
media yang mengandung unsur hara makro dan
mikro esensial yang tinggi yang mampu
menjamin pertumbuhan jaringan tanaman
(Matatula 2003). Menurut Gamborg (1981) unsur
hara esensial adalah unsur hara yang
mengandung garam anorganik, garam dan
sumber energi, vitamin dan fitohormon. Garam
organik meliputi N, P, K, Ca, S, dan Mg. Media
MS mengandung hara makro berupa N, P, K, Ca,
S, dan Mg, serta hara mikro yaitu Na, Mo, Mn,
145
Zn, Cu, Co, dan B. Selain unsur hara dan mikro,
media MS dilengkapi dengan vitamin untuk
menunjang pertumbuhan tanaman.
Pertumbuhan kultur pada media MS dengan
penambahan air kelapa 10% menghasilkan tunas
berukuran lebih tinggi dan daun lebih lebar.
Menurut Matatula (2003), air kelapa telah lama
diketahui sebagai sumber yang kaya akan zat-zat
aktif untuk perkembangan embrio, diantaranya
sitokinin dan giberelin. Kebanyakan tanaman
memberikan respon terhadap pemberian
giberelin dengan pertambahan panjang batang.
Pemacuan pemanjangan batang pada
keseluruhan tumbuhan, disebabkan oleh
sedikitnya tiga peristiwa, yaitu 1) pembelahan
sel terpacu di apeks tajuk, 2) kadang giberelin
memacu pertumbuhan sel karena zat itu
meningkatkan hidrolisis pati, fruktan, dan
sukrosa menjadi molekul glukosa dan fruktosa,
dan 3) giberelin sering meningkatkan plastisitas
dinding sel (Salisbury and Roos 1995).
Peningkatan tinggi tanaman bisa jadi
mempengaruhi jumlah daun yang terbentuk.
Meningkatnya tinggi tanaman dan jumlah daun
akan mempengaruhi berat basah tunas (Tulecke
dalam Matatula 2003). Selain itu daun yang
tumbuh lebar boleh jadi dipengaruhi fitohormon
sitokinin yang terdapat dalam air kelapa, yang
memiliki fungsi untuk memacu pembelahan sel
pada kotiledon dan daun tumbuhan dikotil
(Salisbury and Roos 1995).
Media MS yang ditambahkan dengan BAP
0,5 mg/l menghasilkan petunasan yang banyak
tetapi memiliki daun yang berukuran kecil.
Menurut Hutabarat (2003) penambahan BAP
sangat mempengaruhi jumlah tunas nilam yang
terbentuk. Dosis BAP 0,5 mg/l menyebabkan
kenaikan jumlah tunas dengan sangat nyata bila
dibandingkan tanpa BAP. Seperti yang telah
dilaporkan Hadipoentyanti et al. (2009) bahwa
media MS dengan penambahan BAP 0,5 mg/l
merupakan media terbaik untuk induksi tunas
tanaman nilam. BAP merupakan zat pengatur
tumbuh sitokinin yang berpengaruh pada
proliferasi tunas, pemecah dormansi, dapat
meningkatkan pembelahan sel, tetapi
penghambat pembentukan akar.
Tunas yang terbentuk merupakan tunas
adventif, yaitu tunas yang tumbuh bukan dari
146
tempat asal tumbuhnya (buku atau mata tunas).
Tunas adventif ini dapat terbentuk karena
adanya pembelahan meristem selain dari
meristem apikal dan lateral. Jaringan meristem
tersebut adalah jaringan meristem interkalar
yang dapat menghasilkan batang atau akar pada
bagian yang tidak biasa misalnya pada bagian
yang terluka. Selain itu sel-sel parenkima
diseluruh tumbuhan dapat dan berdiferensiasi
menjadi berbagai jenis sel terspesialisasi, yang
memungkinkan tumbuhan menumbuhkan
kembali bagian-bagian yang hilang seperti tunas
dan akar (Campbell et al., 2002).
Perbedaan mendasar yang tampak antara
kultur dengan pemberian air kelapa 10% dan
BAP 0,5 mg/l adalah banyaknya tunas yang
terbentuk serta bagaimana tunas tersebut
terbentuk. Pada media dengan penambahan air
kelapa 10%, tunas yang terbentuk adalah tunas
aksilar. Menurut Hadipoentyanti et al. (2008), air
kelapa mengandung hormon zeatin sebanyak
0,0067% yang mempengaruhi pertumbuhan
tunas. Nisbah sitokinin-auksin yang tidak terlalu
besar menyebabkan tunas terbentuk secara
langsung tanpa pembentukan kalus terlebih
dahulu. Selain itu tunas yang terbentuk pada
media air kelapa 10% memiliki ruas-ruas yang
panjang sebagai akibat dari aktifitas hormon
giberelin yang terkandung dalam air kelapa.
Pada media dengan penambahan BAP 0,5 mg/l,
tunas yang terbentuk kebanyakan berasal dari
organogenesis tidak langsung yaitu dengan
pembentukan kalus terlebih dahulu. Nilam
merupakan tanaman perdu sehingga pemberian
konsentrasi BAP 0,5 mg/l sudah cukup kuat
untuk pembentukan kalus yang diikuti dengan
tumbuhnya tunas adventif.
KESIMPULAN
Media dasar MS merupakan media kultur
jaringan yang telah secara luas dan cocok
digunakan untuk perbanyakan tanaman secara in
vitro, karena memiliki kandungan garam dan
nitrat yang tinggi. Penambahan air kelapa pada
media kultur ini sangat membantu dalam
menstimulir perkecambahan, mendorong
pembelahan sel dan membantu pertumbuhan
tunas. Sedangkan penggunaan media dasar
Volume 17 Nomor 2, Des 2018 :139 - 149
alternatif (pupuk daun) berpengaruh pada
penyerapan unsur hara. Semakin cepat unsur
hara (N,P,K) diserap maka pertumbuhan tunas
akan semakin cepat dalam meningkatkan tinggi
tanaman, jumlah daun dan jumlah anakan.
Walaupun secara keseluruhan hasil yang didapat
bervariasi, akan tetapi penggunaannya sebagai
media dasar alternatif pada multiplikasi nilam
masih bisa digunakan walaupun tidak
direkomendasikan. Penambahan bahan substitusi
seperti air kelapa dan pupuk daun dengan
konsentrasi yang tepat (2 mg/l) cenderung
menghasilkan komponen pertumbuhan lebih
baik, walaupun hasil yang didapat masih lebih
rendah dibandingkan dengan kontrol. Meskipun
dalam segi pembiayaan lebih ekonomis
dibandingkan dengan penggunaan media dasar
MS, akan tetapi tunas yang terbentuk cenderung
sangat rendah. Untuk itu tetap diperlukan ZPT
kimiawi yang dikombinasikan dengan pupuk
daun sebagai alternatif media tanam agar hasil
eksplan yang didapat maksimal walaupun tetap
dengan biaya terjangkau.
DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 2007. Khasiat Kelapa.
http://tabulampot.wordpress.com/page21
. Diakses 02 Pebruari 2009.
Andini, N. 2016. Penggunaan air kelapa dan
ekstrak pisang terhadap multiplikasi
tunas temulawak (Curcuma xanthorriza
Roxb.) secara in vitro. Tesis Program
Pascasarjana. Universitas Sebelas Maret.
Surakarta.
Ardian, Desery DD. 2006. Pertumbuhan dan
Perbanyakan Tunas Mikro Tanaman
Nilam Aceh Secara In Vitro pada 5
Konsentrasi Sukrosa. Jurnal Agrotrop
(11): 110-114.
Bey, Y., W. Syafii dan Sutrisna. 2006. Pengaruh
Pemberian GA3 dan Air Kelapa
Terhadap Perkecambahan bahan biji
Anggrek Bulan (Phalaeopsis amabilis BL.)
secara in vitro. Jurnal Biogenesis 2(2): 41-
46.
Campbeli, NA, Reece JB, Mitchell LG. 2002.
Biologi. Amalia S, Lemeda S, Hilarius
Perbanyakan Nilam (Pogostemon cablin Benth) Menggunakan Media Dasar Alternatif Secara In Vitro
(AMALIA dan ENDANG HADIPOENTYANTI)
WH, editor. Jakarta: Penerbit Erlangga.
Terjemahan dari: Biology.
Djazuli M., 2011. Budidaya Nilam Organik. Status
Teknologi Hasil Penelitian Nilam. Balai
Penelitian Tanaman Rempah dan Obat.
Hlm. 17-26.
Gamborg OL. 1981. Nutrition, Media and
Charateristics of Plant Cell and Tissue
Culture. di dalam: Trevor AT, editor.
Plant Tissue Culture: Methods and
Application in Agriculture. New York:
Academic Press.
George, E.H. and Sherrington. 1984. Plant
Propagation by Tissue Culture.
Handbook and Directory of Commercial
Laboratories. Eastern Press, England.
257p.
Hadipoentyanti, E, Amalia, Nursalam, Hartati
SY, Suhesti S. 2008. Perakitan Varietas
untuk Ketahanan Nilam Terhadap
Penyakit Layu Bakteri. Di dalam: Industri
Minyak Atsiri yang Berkelanjutan :
Peluang dan Tantangan. Prosiding
Konferensi Nasional Minyak Atsiri 2008;
Surabaya, 2-4 Desember 2008. Surabaya:
Departemen Perindustrian. hlm 17-28.
Hadipoentyanti, E, Amalia, Sirait N, Pribadi ER.
2009. Benih Nilam Varietas Unggul
Sidikalang (Produksi Minyak >300
kg/Ha), Sehat dan Murah Hasil Kultur
Jaringan (30% dari Biaya Standar)
[laporan hasil penelitian]. Bogor : Balai
Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik,
Puslitbang Perkebunan.
Hadipoentyanti, E,. N. Sirait dan Amalia. 2010.
Multiplikasi nilam (Pogostemon cablin
Benth.) var Sidikalang menggunakan zpt
alternatif secara kultur jaringan.
Prosiding Konferensi Nasional.
Membangun Kelembagaan dan Sistem
Produksi Minyak Atsiri Ramah
Lingkungan. Hotel Grand Pasundan
Bandung. 20-21 Oktober 2010.
Hadipoentyanti, E., 2014. Patchoulina Nilam
Unggul Toleran Layu Bakteri. Warta
Penelitian dan Pengembangan Pertanian.
36(5):4-5.
Hendaryono, D. P. S. 2000. Pembibitan anggrek
dalam botol. Kanisius. Yogyakarta.
147
Hutabarat, D. 2003. Pengaruh Bensil Adenin,
Macam eksplan, Lama Inkubasi Eksplan
dan Cahaya pada Sub Kultur Tanaman
Nilam (Progostemon Cablin Benth) Secara
In Vitro. Agrivet 7(2): 95-103.
Yuwono T. 2012. Boteknologi Pertanian
Yogyakarta (ID): Gajah Mada University
Press.
Kasutjianingati., Rudi Irawan. 2013. Media
Alternatif perbanyakan in vitro anggrek
bulan (Phalaenopsis amabilis). Jurnal
Agroteknos. Nopember 2013. 3(3):184-
189.
Kishi F, Takagi K. 1997. Efficient method for the
preservation and regeneration of orchid
protocorm-like bodies. Scientia
Horticulture. 68:149-156.
Kristina, N. N dan S.F Syahid. 2012. Pengaruh air
kelapa terhadap multiplikasi tunas in
vitro, produksi rimpang, dan kandungan
xanthorrhizol temulawak di lapangan .
Jurnal Litri 18(3) : 125 - 134. ISSN 0853 -
8212.
Letham, D.S. 1974. Regulators of Cell Division
Plant Tissue XX. The Cytokinins of
Coconut Milk. Physiol. Plant. 32: 66-70.
Mandang, J.P. 1993. Perananan air kelapa dalam
kultur jaringan krisan. Disertasi IPB,
Bogor. 157 hlm.
Mandang, J.P. 1995. Air kelapa sebagai bahan
substitusi media MS pada kultur jaringan
krisan. Eugenia 1(1):1-11.
Matatula, AJ. 2003. Substitusi Media MS dengan
Air Kelapa dan Gandasil-D pada Kultur
Jaringan Krisan. Eugenia 9(4): 203-211.
Muawanah, G. 2005. Penggunaan pupuk
Hyponex, ekstak tomat dan akstrak
pisang dalam perbanyakan dan
perbesaran planlet anggrek dendrobium
(Dendrobium canayo) secara in vitro.
Nadapdap, C. 2000. Penggunaan pupuk
komersial dan air kelapa sebagai media
perbanyak in vitro tanaman kentang
(Solanum tuberosum L.) Skripsi. IPB,
Bogor, 41 hlm.
Najmi. 1995. Pengaruh Posisi Ruas Bahan Setek
dan Pupuk N terhadap Pertumbuhan
Tanaman Nilam (Sripsi). Bogor: Fak.
Pertanian. IPB
148
Nihayati, E., Wardiyati, T., Retnowati, R., and
Soemarmo. 2013. the curcumin content of
temulawak (Curcuma xanthorriza roxb)
rhizome as afected by N, K and
Micronutrients B, Fe, Zn. Jurnal Agrivita
35(3) : 218-226.
Nuryani, Y., Hobir, Syukur C. 2003. Satus
Pemuliaan Tanaman Nilam (Pogostemon
Cablin Benth). Perkemb Teknol Tan Remp
Obat 15(2): 57-67.
Nuryani, Y., Emmyzar, Wiratno. 2005. Budidaya
Tanaman Nilam. Bogor : Balai Penelitian
Tanaman Obat dan Aromatik, Balitbang
Pertanian.
Ogreo. O. K., N. Gitonga. Mburugu, M. Mwangi,
O. Ombori and M. Ngugi. 2012. In vitro
micropropagation of cassava through low
cost tissue culture. Asian Journal of
Agricutural Sciences 4(3) : 205 – 209
Purwanto ASD, Mardin S. 2007. Modifikasi
media ms dan perlakuan penambahan air
kelapa untuk menumbuhkan eksplan
tanaman kentang. Jurnal Penelitian dan
Informasi Pertanian “Agrin” 1(1) : 36-42.
Prihatmani, D, Mattjik NA. 2004. Penggunaan Zat
Pengatur Tumbuh NAA (Naphtaleine
Acetic Acid) dan BAP (6-Benzyl Amino
Purine) serta Air Kelapa untuk
Menginduksi Organogenesis Tanaman
Anthurium (Anthurium andraeanum
Linden Ex Andre). Bul Agron 23(1):20-25.
Pierik, R.L.M. 1987. In vitro Culture of Higher
Plant. Martinus Nijhoff Publ. Netherland.
344p.
Rahman, M.M. Islam, and R. Alan. 2003. Effecs of
different plant growth regulator on in
vitro shoot multiplication of
Chrysantemum morifolium. J. Biological
Science 3(6):553-560.
Salisbury, FB, Ross CW. 1995. Fisiologi Tumbuhan.
Diah RL, Sumaryono, penerjemah. Jilid
ke-1 dan 3. Bandung: Penerbit ITB.
Terjemahan dari : Plant Physiology.
Santoso, U., Nursandi F. 2003. Kultur Jaringan
Tanaman. Malang: UMM Press.
Sandra, E. MS. 2003. Kultur jaringan anggrek
skala rumah tangga. Agromedia Pustaka.
Bogor.
Volume 17 Nomor 2, Des 2018 :139 - 149
Seswita, D. 2010. Penggunaan air kelapa sebagai
zat pengatur tumbuhpada multiplikasi
temulawak (Curcuma xanthorrhiza Roxb.)
in vitro. Jurnal Littri 16(4): 135-140.
Soedjono, S dan Kamidjono. 1992. Penggunaan
medium pupuk daun dan konsentrasi air
kelapa bagi perumbuhan protocorm
anggrek Dendrobium ekapol Panda In
Vitro. Thorpe, T.A. 1987. Micropro-
pagation. Jurnal Hortikultura 2(1).
Trisilawati, O. 2007. Pengaruh pupuk organik
terhadap produksi dua varietas nilam.
Perbanyakan Nilam (Pogostemon cablin Benth) Menggunakan Media Dasar Alternatif Secara In Vitro
(AMALIA dan ENDANG HADIPOENTYANTI)
Prosiding Seminar Nasional dan Pameran
Perkembangan Teknologi Tanaman Obat
dan Aromatik, Bogor 6 September 2007.
Hlm. 397-404
Wattimena, G.A.1988. Zat Pengatur Tumbuh
Tanaman. Pusat antar Universitas IPB.
Bogor. 14 hlm.
Widiastoety, D., S. Kusumo, dan Syafni.1997.
Pengaruh tingkat ketuaan air kelapa dan
jenis kelapa terhadap pertumbuhan
plantet anggrek Dendrobium. Jurnal
Hortikultura 7(3):768-772.
149