Pengukuran Gravitasi Khusus Darah Dan Plasma Dengan Solusi Sulfat Tembaga Standar

PENGUKURAN GRAVITASI KHUSUS DARAH DAN PLASMA DENGAN SOLUSI
SULFAT TEMBAGA STANDAR *
OLEH ROBERT A. PHILLIPS, ** t DONALD D. VAN SLYKE, t PAUL B. HAMILTON, §

VINCENT P. DOLE, \ l KENDALL EMERSON, JR., \ L� DAN REGINALD M.
ARCHIBALD
BANTUAN TEKNIS EMILY G. STANLEY
(Dari Unit Penelitian Angkatan Laut Amerika Serikat di Rumah Sakit Institut Penelitian Medis
Rockefeller, New York)
(Diterima untuk publikasi, 18 Juli 1949)
Pengukuran berat jenis dilakukan dengan membiarkan tetesan plasma atau darah utuh jatuh ke
dalam rangkaian gradasi larutan tembaga sulfat dengan berat jenis yang diketahui, dan mencatat
apakah tetesan naik atau turun dalam larutan. Setiap tetes, saat memasuki larutan, menjadi
terbungkus dalam kantung tembaga proteinat dan tetap terpisah, tanpa perubahan gravitasi,
selama 10 atau 15 detik, di mana kenaikan atau penurunannya mengungkapkan hubungan
gravitasinya dengan larutan. Tetesan air tidak harus berukuran pasti; sehingga tidak diperlukan
pipet khusus untuk mengirimkannya. Koreksi suhu tidak diperlukan, karena koefisien suhu
pemuaian larutan tembaga sulfat mendekati koefisien suhu darah dan plasma; terlepas dari suhu
saat analisis dilakukan, gravitasi tetaplah demikian
diberikan dalam istilah D�t Larutan tembaga sulfat secara otomatis membersihkan
sendiri setelah setiap tes, karena dalam satu atau dua menit materi tersebut
drop mengendap ke dasar sebagai endapan.
Prinsip penambahan tetesan darah ke rangkaian cairan dengan kepadatan bergradasi dan
mencatat apakah tetesan naik atau turun telah lama diterapkan, tetapi sampai sekarang
mengalami keterbatasan tertentu. Roy (3) pada tahun 1884 menggunakan larutan garam berair
standar untuk mengukur gravitasi seluruh darah, dan standar serupa digunakan untuk darah oleh
Rogers (4) dalam studi klasiknya tentang dehidrasi pada kolera. Gravitasi darah utuh dapat
diperkirakan
• Pekerjaan yang dijelaskan dalam makalah ini dilakukan di bawah kontrak, direkomendasikan
oleh Komite Penelitian Medis, antara Kantor Penelitian dan Pengembangan Ilmiah dan Institut
Rockefeller untuk Penelitian Medis.
METODE CUS04 UNTUK DARAH DAN GRAVITASI PLASMA
PHILLIPS, VANSLYKE, HAMILTON, DOLE, EMERSON,
Publikasi awal metode ini muncul di jurnal medis

Angkatan Bersenjata (1, 2).
** Komandan, Korps Medis, Angkatan Laut Amerika Serikat.
t Alamat saat ini, United States Naval Medical Research Unit No. 3, care of the
Kedutaan Besar Amerika, Kairo, Mesir.
t Alamat saat ini, Brookhaven National Laboratory, Upton, New York.
§ Pidato yang sekarang, Alfred I. du Pont Institute, Wilmington, Delaware.
Letnan Komandan 1J, Korps Medis, Cadangan Angkatan Laut Amerika Serikat.
, saya Hadir alamat, Rumah Sakit Peter Bent Brigham, Boston, Massachusetts.
dikawinkan dengan cukup baik dengan larutan garam atau gliserol berair standar, tetapi tetesan
plasma menyebar begitu cepat dalam larutan tersebut sehingga sulit untuk mengamati secara
akurat. Untuk mengatasi kesulitan ini, standar yang terdiri dari cairan yang tidak dapat larut
dalam air, seperti benzena dan kloroform, telah digunakan, tetapi cairan tersebut memiliki
koefisien suhu beberapa kali lipat dari plasma atau darah, dan karenanya tidak dapat digunakan
untuk hasil yang tepat tanpa • keluar kontrol suhu yang akurat. Selanjutnya, campuran organik
yang telah digunakan secara umum dapat berubah dari laju penguapan komponen yang berbeda.
Kerugian dari standar densitas bergradasi di atas telah, dalam metode sekarang, telah diatasi
dengan penggunaan larutan standar encer yang membekukan protein, dan yang memiliki
koefisien pemuaian suhu yang hampir persis sama dengan darah atau plasma dengan densitas
yang sesuai. Tembaga sulfat dapat diganti dengan zat terlarut koagulasi protein lainnya, seperti
seng sulfat, atau natrium klorida ditambah asam pikrat.
Untuk pengukuran gravitasi darah dan plasma dengan sampel tetes, dua metode yang akurat dan
elegan telah tersedia, metode tetesan jatuh dari Barbour dan Hamilton (5) dan metode tabung
gradien dari Jacobsen dan Linderstrem-Lang (6) seperti yang diterapkan oleh Lowry dan
Hastings (7) dan Lowry dan Hunter (8). Masing-masing metode ini memiliki keunggulan
dibandingkan metode tembaga sulfat yang hanya membutuhkan satu tetes darah atau plasma,
bukan 3 atau 4 tetes. Namun, prosedur tembaga sulfat memiliki • keuntungan tertentu: tidak
diperlukan basis yang stabil (hasil yang akurat dapat diperoleh di kapal), kalibrasi tidak
diperlukan, peralatan (rangkaian standar) dapat disuplai siap untuk operasi dari laboratorium
pusat dan dapat digunakan tanpa modifikasi teknik, restandardisasi, atau penggunaan koreksi
suhu, pada suhu dari 4-40 °. Tetesan dengan ukuran yang diukur secara akurat dan konstan,
seperti yang disyaratkan oleh metode Barbour • Hamilton, tidak diperlukan untuk prosedur
tembaga sulfat, juga tidak diperlukan standar ulang harian seperti yang disyaratkan oleh tabung
gradien.
Larutan stok tembaga sulfat pertama kali disiapkan yang memiliki kepadatan 25 °
1,1000 kali lipat dari air pada suhu tersebut. Dari larutan stok ini rangkaian larutan standar dibuat
dengan pengenceran.
PERSIAPAN SOLUSI SAHAM D�! = 1.1000
Larutan stok mengandung, pada 25 °, 159.0 gm. dari CuS04 · 5H20 per liter. Pada suhu berapa
pun mengandung 5,897 gram. air pelarut per 1 gram. dari CuS04 · 5H20.
Untuk persiapan larutan menurut beratnya, sulfat harus memiliki yang tepat
komposisi CuS04 · 5H20, dengan kandungan H20 teoritis. H20 ditentukan dengan memanaskan
2 atau 3 gram. sulfat dalam botol penimbangan Pyrex terbuka pada 300-350 ° sampai berat
konstan, yang membutuhkan 2 atau 3
DAN ARCHIBALD
jam. Penurunan berat badan harus 36,06 ± 0,2 persen. Kristal U. S. P. sulfate biasanya tidak
memenuhi persyaratan ini. Kelas "agen analitik" biasanya memiliki komposisi yang benar.
CuS04 · 5H20 dan air dicampur dengan perbandingan 170 gram. kristal menjadi 1002,5 gm. air.
Lebih mudah menggunakan botol berisi tertutup
170 ± 0,1 gram. dari "kristal halus" dengan kemurnian yang dianalisis.1
TABEL I
Volume Air Menambah 170,0 Gm. dari CuS0, · 6H20 untuk Menyiapkan Larutan Stok
D "= 1,1000 *
"
Suhu air
-c. Ml. air sampai 170 gram. CuS <km.O

10 1003.6
12 1003.8
14 1004.0
16 1004.3
18 1004.7
20 1005.1
22 1005.5
24 1006.0
26 1006.5
28 1007.0
30 1007.7
32 1008.3
34 1008.9
36 1009.6
38 1010.4
40 1011.2
* Solusinya mengandung 1002,5 gram. air per 170 gram. dari CuS0, · 5H2. Itu
volume air yang diberikan dalam tabel adalah 0,8 ml. lebih dari sekedar teori untuk
rendah untuk kepatuhan jumlah ini ke bagian dalam labu setelah drainase 2 menit.
Untuk membuat 3,2 liter larutan stok, cukup untuk satu set 100 ml. berdiri•
ards, transfer tiga dari 170 gram. porsi sulfat secara kuantitatif menjadi a
Botol 4 liter. Isi labu ukur 1 liter sampai tanda tersebut dengan air suling. Ukur suhu air.
Kemudian tambahkan dari buret
1 Botol berisi 170.0 gram. "kristal halus" yang ditimbang dapat diperoleh dari E. H. Sargent and
Company, 155-165 East Superior Street, Chicago 11, Illinois. CuS0, · 5H20 dijual sebagai
"kristal halus", lebih kecil dari butiran gandum, lebih disukai daripada kristal besar, karena lebih
mudah melarutkan kristal yang lebih kecil.
tambahan air secukupnya ke dalam liter di dalam labu untuk menaikkan volume seperti yang
ditunjukkan pada Tabel I untuk penambahan 170 gram. sulfat. Kosongkan air dari labu tersebut
ke dalam botol yang berisi sulfat. Biarkan air dari labu yang dibalik mengalir ke dalam botol
selama 2 menit. Dengan cara ini ukur ke dalam botol satu porsi air dari labu 1 liter untuk masing-
masingnya
170 gram porsi tembaga sulfat.
Khususnya jika ada keraguan mengenai kadar air dari kristal CuS04 · 5H20, maka diinginkan
untuk memeriksa berat jenis larutan dengan piknometer dengan teknik yang dijelaskan di bagian
percobaan. Jika diperoleh berbeda lebih dari 0,0001 dari 1,1000, itu disesuaikan dengan
menambahkan, per liter larutan, 1 ml. air untuk setiap 0,0001 dimana D�� terlalu tinggi, atau
kira-kira 1 ml. dari tembaga jenuh
larutan sulfat untuk setiap 0,0001 dimana Di: terlalu rendah
PERSIAPAN SOLUSI SULFAT TEMBAGA STANDAR BERDASARKAN DILU'I SOLUSI

STOK
Prosedurnya akan dijelaskan untuk membuat 100 ml. bagian dari stand. solusi ard dengan
gravitasi 0,001 unit terpisah. Untuk menerima larutan 100 ml. Botol resep silinder dengan tutup
ulir adalah murah dan satis pabrik, 64 diperlukan untuk set. Setiap botol diberi label di samping
dan juga ditandai di tutupnya dengan gravitasi larutan yang dituju
mengandung, ditunjukkan pada Tabel II sebagai D�t Untuk mengukur larutan stok itu
nyaman untuk memiliki 25 ml. buret dan 25 ml. pipet terpasang ke
botol larutan stok dengan mengisi perangkat. Satu 100 ml. labu ukur melengkapi peralatan yang
dibutuhkan; tandanya tidak boleh lebih dari
25 mm. di atas level di mana leher melebar menjadi bohlam.
Untuk menyiapkan setiap standar volume larutan stok yang ditunjukkan pada Tabel II diukur ke
dalam 100 ml. labu, volume sampai 25 atau 50 ml. diukur dengan pipet, sisanya menggunakan
buret. Setelah larutan berada di dalam labu, air ditambahkan dengan aliran deras hingga
permukaan mendekati leher labu. Selama penambahan ini air dicampur dengan larutan dengan
cara memutar labu. Kemudian penambahan air dilanjutkan tanpa rotasi sampai 100 ml. tanda
tercapai, dan labu dibalik untuk menyelesaikan pencampuran. Pencampuran awal dicapai
sebelum leher
2 Simbol kepadatan mg atau n: yang digunakan dalam makalah ini menunjukkan rasio (berat
larutan) / (berat air), kedua bobot adalah volume yang sama dari fluida pada
suhu yang sama bila ditimbang dalam kondisi yang sama, tanpa koreksi salah satu bobot untuk
efek apung udara, yang kira-kira akan mencapai 1,06 mg. per ml. cairan. Unit yang tidak
dikoreksi digunakan karena hal ini umum dalam pekerjaan biologis. Seperti yang terlihat dari
Tabel IV, efek koreksi untuk efek apung nilai udara dalam kisaran darah dan plasma hanya
signifikan pada urutan kelima.
tempat desimal.
TABEL II
,;
Volume Stok CuSO, Larutan D ,. = 1.1000 untuk Encerkan menjadi 100 Ml. untuk Membuat
Standar
Solusi untuk Plasma dan Darah
Larutan standar untuk plasma, "Larutan standar untuk darah utuh"
Gravitasi plasma seimbang dengan standar
Volume larutan stok per 100 ml. standar
Gravitr:, _ kebutuhan ba darah menurut standar

Gravit [. dari darah berdasarkan standar
"ml. ml. ml.

"
1.015
13.9
1.035 34.3
1.055
54.3
16 14.9 36 35.3 56 55.3

17 15,85 37 36,3 57 56,3
18 16.8 38 37.25 58 57.3
19 17,8 39 38,2 59 58,3
20 18.8 40 89.2 60 59.3
21 19.8 41 40.2 61 60.3
22 20.75 42 41.2 62 61.3
23 21. 7 43 42.2 63 62.3
24 22.7 44 43.2 64 63.35

25 23.7 45 44.2 65 64.4
26 24.7 46 45.2 66 65.4
27 25.7 47 46.2 67 66.4
28 26.65 48 47.2 68 67.4
29 27.6 49 48.2 69 68.4
30 28,6 50 49,2 70 69,4
31
32 29.6
30.6
Saya 51
52 50.2
51.25 71
72 70.4
71.45
33 31.6 53 52.25 73 72.5
34 32.6 54 53.3 74 73.5
35 33.6 55 54.3 75 74.5
36 34.6
* Untuk alasan yang dibahas di bawah "Persiapan larutan tembaga sulfat standar dengan
pengenceran larutan stok," larutan standar untuk plasma dibuat lebih ringan dengan 0,0006 unit
gravitasi daripada tetes plasma yang seimbang, dan larutan standar untuk busur darah utuh dibuat
0,0001 unit lebih berat dari tetes darah utuh yang mereka keseimbangan.
termos tercapai cukup untuk mencegah penyusutan terukur dalam pencampuran akhir. Solusinya
dituangkan ke dalam botol berlabel.
Setelah transfer masing-masing standar, 100 ml. labu dibilas dengan air,
dan digunakan untuk menyiapkan standar seri berikutnya.
Untuk menyimpan botol standar selama penggunaan, rak yang nyaman dapat dibuat dari kotak
berukuran sekitar 35 kali 60 kali 6 cm., Dengan potongan melintang tipis yang membaginya
menjadi empat puluh lima bagian untuk menahan standar yang mencakup kisaran yang biasanya
digunakan, yaitu, gravities 1.018 sampai 1.062. Di tengah masing-masing ujung dipasang papan
tegak 6 kali 40 cm. Kedua papan dihubungkan di bagian atas oleh yang lain yang berfungsi
sebagai pegangan untuk membawa set, dan juga berfungsi sebagai platform untuk meletakkan
botol di dekat ketinggian mata saat digunakan untuk penentuan gravitasi.
Ketika analisis tidak banyak, tabung reaksi berdinding tebal tidak kurang
dari 15 ml. diameter dalam, diisi hingga 3 cm. bagian atas, dan ditutup dengan sumbat karet,
mungkin lebih nyaman daripada botol sebagai wadah larutan standar selama analisis.
Asalkan larutan stok dan air memiliki suhu yang sama saat dicampur sesuai dengan Tabel II,
rasio berat air pelarut terhadap tembaga sulfat tidak dipengaruhi secara signifikan oleh variasi
suhu antara 10 ° dan 40 °. Karena koefisien muai larutan stok lebih besar dari pada air, ada
sedikit pengaruh, tetapi campuran larutan stok dan air dengan volume yang akan
memiliki, ketika disiapkan pada 25 °, D; � dari 1,050, akan memiliki, jika disiapkan dengan
volume yang sama diukur pada 10 °, sebuah :: dari 1,05005.
Larutan standar yang disiapkan menurut Tabel II memiliki gravitasi yang sedikit berbeda dari
nilai n ;: plasma dan darah yang ditunjukkan dalam
Tabel II sebagai "diimbangi" dengan standar. Seperti yang ditunjukkan pada bagian percobaan
(Tabel VI), plasma menjatuhkan keseimbangan (tidak naik atau turun) dalam larutan tembaga
sulfat yang rata-rata lebih ringan dari plasma sebesar 0,0007 unit gravitasi. Oleh karena itu,
untuk menunjukkan gravitasi plasma yang benar, larutan standar
ion untuk plasma disiapkan oleh Tabel II untuk memiliki D ;! nilai 0,0007 ±
0,0001 lebih ringan dari nilai yang ditampilkan di kolom pertama tabel. Setiap
standar disiapkan untuk memiliki, sebelum digunakan, gravitasi lebih rendah 0,0006 unit
daripada yang diberi label, dan selama penggunaan gravitasi turun 0,0002 unit lebih banyak
sebelum standar dibuang (lihat "Pembaruan solusi standar") sehingga kisaran setiap standar
selama periode penggunaannya adalah 0,0007
± 0.0001 lebih rendah dari yang diberi label. Sebuah plasma gravitasi 1,0270 seimbang
dalam larutan standar tembaga sulfat bertanda 1,0270, tetapi gravitasi sebenarnya dari standar
tersebut adalah 1,0263.
Penurunan keseimbangan darah utuh dalam larutan tembaga sulfat yang di
rata-rata memiliki gravitasi yang sama dengan darah (Tabel VII). Untuk memungkinkan
penurunan 0,0002 dalam gravitasi standar untuk seluruh darah selama penggunaan,
standar dibuat lebih berat dengan 0,0001 unit dari nilai D ;: yang ditunjukkan
pada Tabel Il.3
i Tabel pengenceran yang diberikan untuk persiapan larutan tembaga sulfat di

laporan terbatas dari metode tembaga sulfat (1, 2) diberikan untuk plasma dan bl
GAMBAR DAN PERSIAPAN DARAH
Untuk sampel yang memungkinkan pengukuran gravitasi plasma atau serum serta darah utuh,
prosedur dijelaskan untuk darah vena dalam porsi 1 sampai 5 ml, dan untuk darah kapiler dalam
porsi 0,5 ml. Untuk gravitasi whole blood saja, prosedur untuk digunakan dengan porsi darah jari
sekitar 0,1 ml. rinci.
Suasana hati vena, Porsi 1 sampai 5 Ml.
Persiapan Tabung Tes Ozalated atau Heparinized atau Tabung Centrifuge • Tabung reaksi dari
kaca Pyrex berdinding tebal atau dari plastik, dengan kapasitas yang sama dengan sekitar dua
kali volume darah yang digunakan, disiapkan terlebih dahulu dengan memipet ke dalam setiap
tabung 0,05 ml. baik larutan 0,4 persen heparin atau larutan 2 persen campuran Heller dan Paul
(11) oksalat (12 gram am • monium oksalat dan 8 gram kalium oksalat menjadi 1 liter), untuk
setiap ml. darah yang akan diterima tabung. Solusinya disebarkan dalam film di bagian bawah
tabung, dan dikeringkan dalam inkubator, atau di udara hangat sampai tidak berlebihan.
60 °, atau dalam desikator vakum. Tiap tabung, yang diisi dengan anti koagulan, di bagian luar
diberi tanda untuk menunjukkan volume darah yang akan diterima. Penting untuk
mempertahankan proporsi antikoagulan di atas terhadap volume darah; yaitu, 1 mg. oksalat atau
0,2 mg. dari heparin per ml. darah. Jika antikoagulan yang digunakan lebih sedikit, koagulasi
dapat terjadi. Jika lebih banyak antikoagulan dalam bentuk oksalat digunakan, itu akan
meningkatkan secara signifikan gravitasi darah dan plasma (lihat Tabel VIII). Proporsi oksalat
yang tidak terukur tidak boleh digunakan, atau kesalahan besar dapat menyebabkan gravitasi
darah dan plasma, dan konsentrasi protein plasma dan hemoglobin yang dihitung dari gravitasi.
standar 0.0001 hingga 0.0002 unit gravitasi lebih ringan daripada yang ditunjukkan dalam
laporan ini, bukan 0.0007 lebih ringan untuk plasma dan identik untuk darah seperti pada
makalah ini. Perbandingan gravitasi plasma dan darah yang ditentukan oleh piknometer dengan
gravitasi larutan tembaga sulfat di mana keseimbangan tetes (Tabel VI dan VII) telah
menyebabkan perubahan sediaan standar (Tabel II) sehingga akan menunjukkan tanpa koreksi
darah dan gravitasi plasma ditentukan dengan piknometer. Penggunaan standar sebelumnya tidak
menyebabkan ketidakakuratan dalam kalkulasi protein plasma dan konsentrasi hemoglobin
darah, karena formula kalkulasi didasarkan pada perbandingan konsentrasi protein dan Hb
dengan gravitasi yang diperkirakan dengan standar tembaga sulfat yang sama. Labora • cerita
menggunakan standar sebelumnya, dan rumus serta nomogram yang dikembangkan untuk
kalkulasi protein plasma (1, b) dan Hb darah dari gravitasi yang diperoleh dengan mereka, dapat
terus melakukannya tanpa kesalahan. Jika standar sekarang digunakan, • bagaimanapun, rumus
dan nomogram yang dikembangkan dalam makalah berikutnya (9, 10) akan digunakan.
Penggunaan rumus sebelumnya dengan gravitasi yang ditentukan oleh standar saat ini akan
menyebabkan kesalahan sekitar +0,2 gm. dari protein plasma yang dihitung per
100 ml. plasma dan -0,2 gram. dari Hb per 100 ml. darah.
Sehubungan dengan pilihan antara heparin dan oksalat, heparin lebih disukai jika pengukuran
gravitasi akan dilakukan dalam beberapa jam, karena heparin tidak mempengaruhi gravitasi
secara terukur. Namun, jika darah heparinisasi bertahan hingga hari berikutnya, gumpalan kecil
dapat terbentuk yang mengganggu pengukuran gravitasi. Selain itu, pada beberapa spesimen
darah heparin yang telah disimpan lebih dari 18 jam di lemari es, beberapa perubahan telah
terlihat terjadi sebagai akibat dari tetesan darah, ketika dibiarkan jatuh ke dalam larutan tembaga
sulfat, gagal menembus permukaan. film larutan, tetapi tetap melekat pada film dengan pita yang
mencegah pengamatan gravitasi. Fenomena ini belum diamati pada darah yang teroksidasi, atau
pada darah yang baru diheparinisasi.
Menggambar Venous Blood-Tourniquets tidak boleh diterapkan lebih dari
1 menit. Aplikasi yang lebih lama dapat memaksa begitu banyak cairan keluar dari darah
sehingga konsentrasi protein plasma dan hemoglobin darah meningkat secara terukur.
Penanganan Darah Vena; tanpa Antikoagulan-Jika berat jenis
hanya darah utuh, atau darah utuh dan serum, yang akan diukur, darah ditarik ke dalam semprit,
dan tetes segera dikirim dari jarum ke dalam larutan tembaga sulfat untuk menentukan gravitasi
seluruh darah. Kemudian sisa darah dipindahkan ke tabung sentrifus dan dibiarkan menggumpal
untuk mendapatkan serum.
Dengan Antikoagulan-Jika diinginkan hasil untuk seluruh darah dan plasma,
sejumlah antikoagulan yang diukur ditambahkan, seperti dijelaskan di atas, ke tabung yang akan
menerima darah. Gravitasi darah lengkap dapat ditentukan baik segera setelah pengambilan,
dengan meneteskan darah dari jarum suntik ke standar tembaga sulfat, atau setelah dipindahkan
ke tabung teroksalat atau heparin, sebelum sentrifugasi. Dalam kasus terakhir ini perlu untuk
mencampur sel dan plasma secara menyeluruh sebelum sampel darah ditarik dari tabung ke pipet
atau jarum suntik. Untuk mencapai pencampuran sempurna, balikkan tabung berisi darah
teroksalat atau heparinisasi sepuluh kali, atau aduk dengan batang gelas dengan ujung jamur,
yang dinaikkan dan diturunkan melalui darah sepuluh kali, tepat sebelum sampel ditarik ke
dalam pipet atau jarum suntik. . Kesalahan besar dalam estimasi gravitasi darah dan hemoglobin
yang dihitung secara gravitasi dapat terjadi jika sampel darah diambil dari darah di mana terjadi
pengendapan parsial sel.
Darah Kapiler, 0,5 Porsi untuk Gravitasi Darah Utuh dan Plasma4
Sebuah tabung reaksi kecil disiapkan, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 1, dengan tutup
karet yang melewati dua tabung kapiler pendek sekitar 1 mm. membosankan. Itu
4 Prosedur yang dibuat oleh L. E. Farr (komunikasi pribadi). Tutup karet terbuat dari sumbat
yang dikatalogkan sebagai No. 2319-B oleh Arthur H. Thomas Com-
kapiler yang lebih panjang berfungsi untuk menerima darah, yang lain untuk mengeluarkan
udara yang diganti. Kapiler saluran masuk harus dibersihkan dengan asam kromat sebelum
ditempatkan di tutup karet; jika tidak, darah mungkin tidak langsung mengalir melaluinya.
Tabung reaksi ditandai pada level yang menunjukkan 0,5 ml, dan dilapisi di dalam oleh film
kering dari 0,025 ml. larutan heparin atau oksalat yang dijelaskan di atas untuk darah vena.
Potongan dalam dibuat dengan jari, atau di bagian belakang ibu jari tepat di bawah
kuku, dan darah yang keluar ditarik oleh tarikan kapiler ke dalam kapiler saluran masuk yang
panjang, sedangkan tabung reaksi ditahan pada kemiringan ke bawah yang cukup untuk
menyebabkan darah turun ke dalam tabung. Segera setelah 0,5 ml. darah telah dikumpulkan,
diaduk dengan baik dengan tongkat kecil, dan sebagian dengan- ARA. 1. Tabung Farr, 6 kali 50
mm. pengukuran luar, diatur untuk menerima 0,5 ml. darah kapiler, untuk berat jenis darah dan
plasma.
ditarik dengan jarum suntik kecil atau penetes obat, dan digunakan untuk menentukan gravitasi
seluruh darah.
Sisa darah disentrifugasi, dan plasma supernatan juga diambil untuk estimasi gravitasi.
Capirlary Blood, 4 atau 5 Drops, untuk Gravity of Whole Blood
Tabung kapiler kaca, berukuran 1 sampai 1,5 mm. lubang dan sekitar 150 mm. panjangnya,
digunakan.5 Lebih mudah, untuk pengeluaran tetes darah, untuk menyediakan
pany untuk botol serum. Bagian sumbat yang akan dimasukkan ke dalam botol dipotong untuk
membentuk tutup yang ditunjukkan pada Gambar 1. Tutup ditusuk dengan jarum untuk membuat
lubang untuk menerima tabung kapiler. Tabung reaksi adalah tabung fermentasi, dan
dikatalogkan oleh Thomas sebagai No. 9446, dinding tebal, tanpa bibir, 50 x 6 mm. dimensi luar.
6 Dapat diperoleh dari Kimble Glass Company, Vineland, New Jersey. Kapiler yang dijual untuk
tabung titik leleh juga dapat digunakan.
314 CUSO • METODE GRAVITASI DARAH DAN PLASMA
tabung dengan umbi karet kecil, ditunjukkan pada Gambar. 2, terbuka di kedua ujungnya,
digunakan dengan "tabung vaksin". 6 Lubang kapiler kaca harus bersih untuk menarik darah
melalui tarikan kapiler. Pembersihan tabung dapat dilakukan dengan cara merendamnya dalam
campuran pembersih asam kromat-sulfat dalam tabung reaksi, kemudian dibilas dua puluh kali
dengan air suling, dan dikeringkan dalam oven.

Lampu karet yang ditunjukkan pada Gbr. 2 nyaman digunakan, tetapi tidak perlu.
Tanpa mereka seseorang dapat mengeluarkan sebagian besar darah dari kapiler yang terisi
dengan mengangkatnya ke atas, dan tetes terakhir dapat dikeluarkan dengan tekanan lembut dari
nafas.
Jari atau cuping telinga dibersihkan dengan alkohol 70 persen, dilap hingga kering sempurna
dengan kain kasa atau kapas steril, dan ditusuk dengan lancet. Harus dipotong
ARA. 2. Menggambar darah kapiler dari jari untuk mengetahui berat jenis darah utuh
cukup dalam untuk menghasilkan setetes darah. Ukuran tetesan dapat ditingkatkan dengan
memijat jari dari pangkal ke arah ujung. Salah satu ujung kapiler kaca terbenam di tetesan
sementara kapiler ditahan secara horizontal. Jika lubangnya bersih, bagian pertama akan terisi
tanpa memiringkan tabung ke bawah sama sekali. Untuk mengisi setengah bagian terakhir,
tabung harus sedikit miring ke bawah dari jari (Gbr. 2), tetapi digunakan sesedikit mungkin
kemiringan atau gelembung dapat ditarik masuk.
Dengan vaselin sedikit, pengiriman berakhir sebelum tetes diberikan, itu

ukuran tetesan dapat dikurangi sehingga diperoleh 1 atau 2 tetes lagi dari tabung. Darah segera
digunakan untuk uji gravitasi, sebelum ada waktu untuk pembekuan dimulai. Ini berfungsi untuk
perkiraan • hemo globin (10).
6 Bola lampu bisa didapatkan dari West Rubber Company, 117 Shackamaxon
Jalan, Philadelphia, Pennsylvania.
PENENTUAN GRAVITASI KHUSUS

Prosedur
Setetes serum, plasma, atau darah utuh dialirkan dari ketinggian sekitar 1 cm. di atas larutan7
dari penetes obat, kapiler,
== - a
F10. 3. Meneteskan darah ke dalam larutan tembaga sulfat standar
atau jarum suntik. Lebih disukai menggunakan tetes kecil dengan alasan bahwa mereka
mengizinkan lebih banyak pengujian sebelum larutan standar harus diubah. Sana-
7 Jika jatuh mengenai dengan kekuatan terlalu kecil, itu mungkin tidak menembus lapisan
permukaan. Di sisi lain, jika tetesan jatuh dari ketinggian yang terlalu tinggi, ia dapat putus saat
menabrak solusi, atau momentumnya dapat membawanya terlalu jauh ke bawah permukaan;
momentum seharusnya hanya cukup untuk membawa penurunan, gravitasi sedikit kurang dari itu
depan jarum suntik berfungsi dengan baik, dan pipet obat dengan ujung halus lebih disukai
daripada yang ujungnya kasar.8 Mengolesi bagian luar ujung dengan vaseline juga mengurangi
ukuran tetesan. Saat tetesan dikirim, akan lebih mudah untuk menstabilkan semprit atau pipet di
tepi botol (Gbr. 3).
Penurunan yang disampaikan menembus lapisan permukaan larutan dan momentumnya

membawanya 1 atau 2 cm. di bawah permukaan; dalam 5 detik momentum jatuh hilang, dan
penurunan kemudian mulai naik, menjadi diam, atau terus turun. Gravitasi tetesan relatif
terhadap larutan tidak berubah secara berarti sampai tetesan dibenamkan ke dalam larutan selama
10 atau 15 detik lagi, dan ada cukup waktu untuk mencatat perilakunya selama interval ini. Jika
jatuh lebih ringan dari larutan uji, ia akan naik, mungkin hanya beberapa mm, dan mungkin
mulai tenggelam segera setelahnya. Jika penurunan adalah gaya berat untuk diseimbangkan
dalam larutan uji standar, ia akan menjadi diam selama beberapa detik dan kemudian jatuh. Jika
penurunan lebih berat, itu akan terus turun selama seluruh interval. Singkatnya, perilaku selama
10 detik setelah penurunan kehilangan momentum kejatuhannya ke dalam larutan menunjukkan
apakah penurunan tersebut lebih ringan atau lebih berat daripada larutan uji; jika naik sama
sekali selama periode ini, itu lebih ringan dari standar.
Urutan penggunaan larutan dengan plasma berikut biasanya adalah sebagai berikut:
merendahkan. Tempatkan tetes pertama pada standar 1.027, dengan gravitasi plasma normal
rata-rata. Menurut apakah penurunan turun atau naik, tempatkan penurunan kedua empat poin, di
1.031 atau 1.023. Jika gravitasi plasma berada dalam kisaran 1,023 hingga 1,031, uji titik-titik
antara dua yang pertama seperti pada contoh yang diberikan di bawah ini. Jika gravitasi plasma
berada di luar kisaran 1,023 hingga 1,031, lakukan pengujian kedua pada 1,019 atau 1,035.
Urutan serupa diikuti dengan darah lengkap, tes pertama dilakukan dengan standar gravitasi
1,056 jika darah tersebut adalah darah wanita, 1,059 jika darah pria. Jika sebelumnya diketahui
bahwa subjek rendah protein plasma atau hemo globin, tes awal dapat dilakukan dengan standar
gravitasi yang lebih rendah; misalnya, 1.023 untuk plasma, 1.050 untuk darah.
Contoh-Contoh berikut menunjukkan bagaimana, dengan tanda kurung pada prob •
mampu ekstrim dari rentang gravitasi plasma dan kemudian menguji titik tengah, satu dapat
dengan 4 tetes memperkirakan berat jenis dengan presisi yang dapat digandakan dalam 0,0002
unit.
solusinya, 1 atau 2 cm. di bawah permukaan. Jatuh sekitar 1 cm. biasanya memberikan kekuatan
serangan yang tepat. Jika suhu ruangan di atas 30 °, penurunan kurang dari 1 cm. cukup, karena
viskositas larutan dan kekuatan lapisan tipis permukaan kurang dari pada suhu yang lebih
rendah.
8 Saat pipet obat digunakan, akan lebih mudah untuk memasang penjepit sekrup ke bola karet.
Dengan memanipulasi sekrup, seseorang dapat dengan mudah menarik sampel dengan volume
yang diinginkan, dan mengeluarkan serangkaian tetesan tanpa membentuk gelembung dengan
memasukkan udara ke dalam ujung setelah pengeluaran tetesan apa pun.
4 tetes berturut-turut memberikan hasil sebagai berikut, di mana angka-angka itu menunjukkan
gravitasi standar, dan plus atau minus setelah setiap angka gravitasi menunjukkan bahwa
gravitasi plasma lebih besar atau lebih kecil dari yang ditunjukkan oleh gambar sebelumnya:
1,027 +, 1,031 -, 1,029 +, 1,030 -. Gravitasi plasma lebih besar dari 1,029
dan kurang dari 1,030, dan karena itu dapat ditempatkan pada 1,0295, dalam waktu kurang dari ±
0,0005.
Dengan mencatat laju penurunan atau kenaikan relatif dalam dua solusi yang berdekatan, 1,029
dan
1.030, lebih jelas terlihat bahwa plasma lebih dekat 1.029 dari 1.030. Menjadi kurang dari 1.0295
dan lebih besar dari 1.0290, itu bisa ditempatkan di 1.0293, dalam ± 0.0002.
Poin Khusus dan Tindakan Pencegahan
1. Efek Film Permukaan dalam Analisis-Kadang-kadang setetes akan gagal membuat terobosan
bersih melalui permukaan larutan tembaga sulfat, dan tetap melekat oleh tentakel ke film. Dalam
hal ini tetesan diangkat dari permukaan dengan tongkat atau tongkat, atau dibuat tenggelam
dengan mengetuk tabung, dan tetes baru dicoba.
Setelah setiap pengujian, seseorang memastikan bahwa film permukaan dibiarkan bersih dan
bebas
dari fragmen. Jika ada yang tertinggal di film, mereka cenderung mencegah tembus bersih dari
penurunan di tes berikutnya. Fragmen yang terperangkap dalam film permukaan biasanya dapat
dilepaskan dengan mengetuk tabung; mereka kemudian tenggelam ke dasar. Namun terkadang,
fragmen yang bersifat berlemak atau memegang gelembung akan terus mengapung di
permukaan. Fragmen seperti itu dihilangkan dengan tongkat atau tongkat.
2. Menghindari Gelembung-Bahkan gelembung udara menit melekat pada setetes
darah atau plasma akan membuatnya mengapung. Saat memasukkan darah jari ke dalam tabung
kapiler (Gbr. 2), pastikan ujungnya tetap terendam, sehingga tidak ada gelembung udara yang
masuk, dan pegang tabung secara horizontal atau hanya sedikit miring ke bawah dari jari. Ketika
setetes dikeluarkan ke dalam larutan tembaga sulfat, darah atau plasma berlebih yang cukup
harus ada untuk menyisakan sebagian pipet. Setelah melepaskan setetes dari pipet obat tanpa
penjepit sekrup, seseorang mungkin akan menarik gelembung ke ujungnya, yang mungkin
menempel pada tetes berikutnya; penggunaan jarum suntik, atau alat tetes obat yang dilengkapi
dengan penjepit sekrup, menghilangkan sumber kesalahan ini.
3. Temperatur-Temperatur dapat bervariasi dari 4-40 ° tanpa signifikan •
mempengaruhi hasil secara signifikan, selama larutan tembaga sulfat dan darah atau plasma
berada dalam 5 ° dari suhu yang sama.
Perubahan gravitasi per 1 ° perubahan suhu adalah sekitar 0,0003. Namun, kesalahan tersebut
disebabkan oleh perbedaan suhu awal antara
darah atau plasma dan larutan tembaga sulfat standar jauh lebih sedikit, karena ketika setetes
darah atau plasma memasuki larutan tembaga sulfat, penurunan tersebut mendekati suhu larutan
begitu cepat sehingga efek dari beberapa derajat perbedaan awal hampir dihilangkan. Jadi ketika
plasma pada 16 ° dijatuhkan dari jarum suntik (tetesan kecil) menjadi larutan tembaga sulfat
pada 26 °, kesalahan dalam memperkirakan gravitasi plasma adalah
hanya 0,0004, atau seperdelapan dari yang akan terjadi jika tetesan itu tidak memindahkan
suhunya ke arah larutan. Saat 5 ml. darah pada 37 ° diambil dari vena menjadi 10 ml. jarum
suntik pada 26 °, dan sekaligus diuji dengan larutan tembaga sulfat pada 26 °, gravitasi darah
tidak pernah ditemukan lebih dari 0,0002 lebih ringan daripada ketika tes dilakukan setelah darah
didinginkan hingga 26 °.
Darah yang diambil dari vena ke dalam semprit dapat dialirkan sekaligus dari jarum suntik ke
dalam larutan standar pada suhu 20 °, atau lebih, tanpa kesalahan dari suhu yang biasanya
melebihi 0,0003 dalam pengukuran gravitasi. Namun, darah atau plasma yang ditarik ke dalam
penetes obat dan dikirim ke dalam larutan tembaga sulfat harus berada dalam 5 ° suhu larutan.
Darah dari lemari es harus dihangatkan hingga mencapai suhu kamar sebelum gravitasi diukur.
Jika larutan standar tembaga sulfat dingin dibawa ke ruangan yang lebih hangat, biarkan larutan
mencapai 1 ° atau 2 ° dari suhu kamar dan kemudian kocok kuat-kuat selama beberapa detik
sebelum digunakan. Tindakan pencegahan ini diperlukan karena tiga alasan: (1) Perbedaan suhu
antara larutan dan darah atau plasma dapat melebihi 5 ° yang diizinkan. (2) Jika larutan
digunakan saat pemanasan, larutan dapat mengembangkan arus konveksi yang mengganggu
penentuan. (3) Larutan saat dingin melarutkan sejumlah udara yang membuatnya jenuh saat
dipanaskan. Pemanasan dapat dipercepat dengan membenamkan standar dalam air beberapa
derajat di atas suhu kamar. Solusinya dikocok setelah pemanasan untuk membuang udara terlarut
yang berlebih. Jika tidak, gelembung udara dapat terbentuk saat larutan berdiri, dan menempel
pada tetesan darah atau plasma yang jatuh ke dalam larutan.
Sebagai pencegahan terhadap arus konveksi, jangan tinggalkan standar
larutan di dekat kompor, di ambang jendela, dll. Jika wadah dipegang di tangan selama
penentuan, pegang hanya di bagian atasnya untuk menghindari pemanasan larutan dengan
tangan.
4. Pembaruan Larutan Standar-A 100 ml. Larutan standar harus diganti dengan larutan segar
setelah menerima 50 tetes darah atau plasma, jika kesalahan dalam pengukuran darah atau
gravitasi plasma karena standar harus dijaga dalam ± 0,0001 satuan gravitasi. Pengujian telah
menunjukkan bahwa penambahan 50 tetes kecil, sekitar 1,5 ml, darah atau plasma ke 100 ml.
dari larutan standar CuS04, menyebabkan gravitasi dari stand tembaga sulfat • larutan ard
berkurang sekitar 0,0002 unit. Larutan standar yang disiapkan sesuai dengan Tabel II dibuat
0,0001 unit gravitasi terlalu tinggi untuk memberikan plasma atau gravitasi darah rata-rata yang
benar bila digunakan segar. Setelah menerima 50 tetes, standar menjadi 0,0001 unit gravitasi
terlalu rendah. Kesalahan yang dihasilkan dalam darah atau gravitasi plasma dalam arah yang
berlawanan dengan deviasi standar, menjadi -0,0001 dengan standar baru dan
+0.0001 dengan standar yang telah menerima 50 tetes. Kesalahan ± 0,0001 di
gravitasi sesuai dengan ± 0,04 gm. protein per 100 ml. plasma atau
± 0,06 gram. hemoglobin per 100 ml. darah, yang biasanya dapat diabaikan. Sebaiknya
tempelkan pada setiap tabung atau botol standar selembar kertas • penampang yang berisi
sejumlah kotak yang sama dengan jumlah tetes darah atau plasma yang dapat diterima larutan.
Tandai dengan pensil satu persegi untuk setiap tetes ditambahkan, dan ganti solusinya ketika
semua
kotak telah ditandai.
Kontrol kasar dapat dilakukan dengan menambahkan 1,5 ml. plasma sampai 100 ml. standar
1,027 gravitasi dan 1,5 ml. darah menjadi 100 ml. standar
1.058 gravitasi. Jumlah endapan proteinat tembaga yang mengendap di bagian bawah kontrol
menunjukkan jumlah maksimum yang diizinkan.
Jika kesalahan maksimal sesuai dengan +0.12 gm. protein plasma, atau
+0.18 gm. hemoglobin, per 100 ml., dari penggunaan larutan standar secara berlebihan
diperbolehkan, jumlah tetes darah atau plasma yang diizinkan dinaikkan menjadi 100 per 100 ml.
solusi standar; efeknya adalah untuk mengurangi gravitasi standar sekitar 0,0004 unit sebelum
dibuang, dengan kesalahan resultan +0,0003 pada pengukuran gravitasi darah atau plasma
terakhir yang dibuat.
Jika, karena alasan apa pun, tidak mungkin memperbarui larutan standar setelah cukup sering
digunakan untuk mengurangi gravitasinya sebesar 0,0002 atau 0,0004, standar tersebut dapat
dikembalikan ke gaya berat aslinya dengan menambahkan 0,2 atau 0,4 ml. , dari stok larutan
CuS04 per 100 ml. standar. Atau, jika larutan stok tidak tersedia, standar dapat diberi label
ulang; misalnya, standar 1.0270 diberi label ulang 1.0268 atau 1.0266. Penulis tidak
merekomendasikan salah satu dalih, tetapi mereka dapat digunakan dalam keadaan darurat.
Meski standar 100 ml. volume harus diganti setelah menerima
50 atau 100 tetes darah atau plasma, hanya beberapa standar set yang perlu diganti setelah 50
atau 100 analisis darah, karena hanya yang berada dalam kisaran normal yang digunakan dalam
sebagian besar analisis. Standar di luar kisaran normal, 1.025 sampai 1.029 untuk plasma dan
1.052 sampai 1.064 untuk whole blood, biasanya membutuhkan penggantian yang jarang.
5. Menghindari Penguapan Larutan Standar-Kecuali jika larutan standar ditutup rapat saat tidak
digunakan, penguapan dapat terjadi sedemikian rupa sehingga hasil gravitasi darah dan plasma
yang diperoleh keliru • sangat rendah. Botol atau tabung larutan standar dibuka hanya selama
jangka waktu yang diperlukan untuk penentuan dan kemudian ditutup rapat. Untuk setiap
penentuan, hanya standar yang dibuka yang kemungkinan besar akan digunakan.
6. Koreksi untuk Antikoagulan Tambahan-Tidak diperlukan koreksi jika heparin, 0,1 atau 0,2
mg. per ml. darah, digunakan.
Untuk setiap mg. dari campuran amonium-kalium oksalat ditambahkan per ml.
darah, kurangi 0,0004 dari Gs yang diamati dan GP yang diamati (lihat Tabel VIII). Jika tabung
reaksi disiapkan dengan 5 mg. amonium-kalium oksalat menerima 5 ml yang diharapkan. darah,
koreksi GP dan GB adalah 0,0004. Mengabaikan koreksi 0,0004 akan menyebabkan estimasi
berlebihan dari protein plasma sebesar 0,15 gram. per 100 ml. plasma, dan hemoglobin sebesar
0,1 gram. per 100 ml. darah, kesalahan yang mungkin untuk beberapa tujuan diabaikan.
Namun, jika volume darah yang ditempatkan dalam tabung reaksi teroksalat sebelum
dikupas untuk menerima 5 ml. kurang dari 5 ml., konsentrasi oksalat akan lebih besar, dan
koreksi GP dan GB adalah sebagai berikut: untuk 4 ml. dari darah tambahan, -0,0005; untuk 3
ml., -0,0007; untuk 2 ml., -0,0010; untuk 1 ml.,
-0,0020.
7. Solusi Standar yang Dilakukan di Ketinggian-Dr. R. A. Johnson (komunikasi pribadi)
melaporkan bahwa ketika larutan tembaga sulfat standar dibawa dari tempat yang rendah ke
tempat yang tinggi, larutan tersebut harus diguncang sebelum digunakan, untuk membuang udara
terlarut yang menyebabkan • super jenuh. Jika tidak, gelembung udara dapat terbentuk, seperti
saat larutan dingin dihangatkan, dan mengganggu pengukuran gravitasi.
8. Bahan yang Tidak Dapat Diterapkan Metode Tembaga Sulfat-Seperti disebutkan sebelumnya,
darah heparinisasi, atau plasma, setelah dibiarkan lebih dari 18 jam di dalam kotak es dapat
berubah sifat permukaan sehingga tetesan tidak akan menembus lapisan permukaan larutan
tembaga sulfat.
Quigley dan Muraschi (12) menemukan bahwa dua serum yang telah
disajikan selama 5 tahun gagal membentuk kantung proteinat tembaga ketika dijatuhkan ke
dalam larutan tembaga sulfat. Mereka menghubungkan perilaku ini dengan pembentukan asam
amino dalam serum, yang mengandung 46 dan 105 mg. nitrogen-amino, masing-masing, per 100
ml. dengan ninhydrin-Cf), metode (13), sekitar 10 dan 25 kali jumlah normal. Penambahan asam
amino dalam jumlah yang sama ke serum normal memiliki efek yang serupa.
Metode ini tidak berlaku untuk larutan yang mengandung kurang dari 2
gm. protein per 100 ml., karenanya tidak dapat digunakan untuk transudat dan
tanggal.
9. Bahan Selain Darah dan Plasma yang Diterapkan Metode Tembaga Sulfat-Agaknya prosedur
ini dapat digunakan dengan larutan encer yang mengandung cukup protein untuk membentuk
kantung proteinat tembaga yang memadai. Eugene Opie (komunikasi pribadi) telah
menggunakannya dengan potongan jaringan untuk memperkirakan perubahan kadar air.
EKSPERIMENTAL
Hubungan Gravitasi Spesifik dengan Konsentrasi dalam Larutan Tembaga Sulfat

Solusi disiapkan berdasarkan berat. Menjadi 50 ml. termos ditimbang dengan jumlah CuS04 ·
5H20 yang telah disusun
PHILLIPS, VAN SLYKE, HAMILTON, DOLE, EMERSON1 321
DAN ARCHIBALD
diperiksa dengan pengeringan 3 gram. sampel pada 300 ° dengan berat konstan. 40 ml. air
kemudian dipipet ke dalam setiap labu, dan labu-labu tersebut ditimbang kembali. Labu ditutup
dan diputar dengan tangan sampai tembaga sulfat larut.
Untuk penentuan densitas, piknometer 12,8 ml. kapasitas dari
jenis Ostwald-Sprengel, dari kaca Pyrex, digunakan. Bentuknya seperti yang ditunjukkan pada
Gambar 4 dengan perubahan sebagai berikut: Masing-masing lengan horizontal
40 mm. panjang; tidak ada ayam yang terpasang ke A; cincin terukir melingkari lengan B sekitar
25 mm. dari ujungnya. Piknometer yang diisi dengan air atau larutan ditempatkan dalam
penangas air yang diaduk pada 25 ° ± 0,05 ° sampai keteguhan lokasi meniskus di lengan yang
ditandai menunjukkan bahwa suhu konstan telah tercapai, yang membutuhkan sekitar 5 menit.
Meniskus kemudian dibawa ke tanda dengan menyentuh saluran keluar dari lengan yang tidak
bertanda dengan potongan kertas noda yang runcing. Meniskus diamati dengan lensa, dan jika
tidak tepat pada tanda, koreksi
0,7 c.mm. per mm. perpindahan dilakukan. Piknometer kemudian dikeringkan dan ditimbang.
Selama penimbangan piknometer digantung dari kait keseimbangan pada sudut sedemikian rupa
sehingga meniskus mundur
15 mm. dari ujung kapiler A; dengan tindakan pencegahan ini tidak ada penurunan berat badan
dapat dideteksi selama 30 menit dalam kotak keseimbangan. Untuk mencegah kesalahan dari
muatan statis pada piknometer yang diseka (yang pada hari kering bisa beberapa mg.) Dua pelat
tembaga dicat dengan radium bromida untuk mengionisasi udara ditempatkan di kotak
keseimbangan. Dengan ini, kesalahan statis menghilang dalam waktu sekitar 1 menit. Sebelum
menimbang rangkaian larutan tembaga sulfat, piknometer yang kosong direndam dalam bak
mandi, diseka, dan ditimbang dengan cara yang sama. Sebelum dan sesudah serangkaian
penimbangan larutan tembaga sulfat, air pada suhu 25 ° ditimbang di piknometer. Bobot yang
diperiksa oleh Biro Standar digunakan. Penimbangan ganda biasanya disetujui dalam 0,2 mg.
Koreksi untuk efek apung udara dilakukan dengan menambahkan, berat fluida yang tidak
dikoreksi dalam piknometer, 1,06 mg. per ml. cairan. Variasi dalam koreksi karena kondisi
atmosfer dapat diabaikan dengan pemeriksaan harian dengan air. Hasilnya diplot pada kertas
koordinat skala besar dengan nilai
rasio, R = (D ;: - 1): C, sebagai ordinat dan n ;: sebagai absissae, C menjadi
gm. dari CuS04 · 5H20 per 100 gram. solusi. Variasi kecil dari R
dengan kerapatan memungkinkan estimasi grafis R untuk kerapatan tertentu
menjadi 1 bagian per 5000, di mana C dapat dihitung sebagai R / (D�: - 1). Hasilnya diberikan
dalam Tabel III, yang berfungsi sebagai tabel kunci untuk perhitungan Tabel II.
Nilai D! 5 dari Tabel III dibandingkan dengan nilai yang diinterpolasi
dari data di International Critical Tables (14), dan menunjukkan setuju-
ment dalam 1 bagian dalam 500 dalam konsentrasi tembaga sulfat dari kepadatan yang
ditunjukkan.
Untuk memeriksa keakuratan prosedur yang dijelaskan sebelumnya untuk • larutan standar
pengupas awal dengan pengenceran larutan stok, volume yang terakhir dari 10 hingga 80 ml.
diukur menjadi 100 ml. labu dari pipet dikalibrasi dengan akurasi 1 per 1000, dan air
ditambahkan ke 100 ml. tandai dengan cara yang dijelaskan untuk persiapan larutan standar.
Densitas diukur dengan piknometer, seperti dijelaskan di atas, dan diinterpretasikan pada kurva
yang diperoleh dari larutan yang dibuat berdasarkan berat. Interpolasi menunjukkan kesepakatan,
dengan solusi yang disiapkan berdasarkan berat,
TABEL III
Hubungan Konsentrasi dengan Densitas dalam Larutan Tembaga Sulfat pada 25 °
Kepadatan larutan standar

..
Solusi stok
D ,,, CuSO, · SH, O CuSO, per 100 per 100 ml.

D ,,,.
ion
untuk efek apung udara udara
0.99701
(a) (b) (c) (d) (e) (f)
--- ·
gm. gm. ml.
1.010 1.00999 1.00703 1.520 1.531 9.63
20 1.01998 1699
30 2997 2699
3.031 3.082 19.38

Saya 4.523 4.646 29.22
40 3996 3695 Saya 6.001 6.222 39.13
50 4995 I 4691 I 7.465 7.814 49.13
60 5994 Saya 5683 8.910 9.415 59.21
70 6993
80 7992
1.100 1.09990
6679 10,53 11,02 69,31

Saya 7675 11,74 12,64 79,50
1.09667 14.50 15.90 100.0
saya
* Larutan stok pada 25 ° mengandung 0,1590 gram. dari CuS04 · 5H20 per ml.
dalam batas kesalahan pengukuran; yaitu, teknik yang dijelaskan untuk menyiapkan larutan
standar tidak melibatkan kesalahan volume yang dapat diukur dari pencampuran yang tidak
lengkap selama penambahan air.
Koefisien Suhu Ekspansi Plasma dan Darah, dan Tembaga

Larutan Sulfat dengan Gravitas Spesifik yang Mirip
Koreksi suhu tidak diperlukan dalam penentuan gravitasi darah dan plasma dengan metode
tembaga sulfat karena fakta bahwa darah dan plasma memiliki koefisien suhu yang hampir
identik dengan koefisien suhu tembaga sulfat dengan gravitasi serupa.
Koefisien ekspansi plasma, whole blood, dan larutan tembaga sulfat ditentukan dalam
dilatometer sekitar 18 ml. kapasitas dan bentuk yang ditunjukkan pada Gbr. 4. Lengan kiri
adalah 4 cm. panjang dan memiliki tanda terukir di A. Lengan kanan, B, adalah 40 cm. panjang
dan memiliki skala yang menunjukkan volume fluida yang ditahan di antara titik-titik pada skala
dan tanda A. Kedua lengan berada pada ketinggian yang sama untuk menyamakan tekanan
hidrostatis dan disambungkan dengan jembatan kaca padat untuk memberikan kekuatan dan
kekakuan. Skala pada B cukup panjang untuk membaca perubahan volume pada kisaran suhu 10-
40 °. Skala pada B dikalibrasi dengan merkuri.
Aparat diisi dengan mencelupkan ujung A ke dalam cairan (yang berada pada suhu kamar, 22-26
°) dan menerapkan pengisapan ke ujung B sampai meniskus fluida terletak kira-kira di tengah
skala. A B
- - Air> level
Fro. 4. Dilatometer untuk mengukur koefisien muai fluida
A kemudian dikeringkan dan pipa karet panjang pendek dengan penahan kaca • penjepit sekrup
dan sekrup, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 4, diselipkan di ujungnya. Saat ayam ditutup,
meniskus di A disesuaikan dengan tanda tergores dengan memutar penjepit sekrup. Bola
dilatometer kemudian dibenamkan di tengah bak air berkapasitas sekitar 9 liter hingga
kedalaman yang ditunjukkan oleh garis putus-putus, dan ditopang sehingga kedua lengannya
horizontal. Termometer standar ditempatkan di samping dilatometer, dengan bagian tengah
bohlam termometer berada pada ketinggian yang sama dengan bagian tengah bohlam
dilatometer.
Untuk menentukan koefisien muai pada rentang 40-25 °, bak dihangatkan hingga 40 ° dan
dipertahankan pada suhu tersebut selama sekitar satu jam, sampai cairan dalam piknometer
mencapai kesetimbangan termal.
Panas dimatikan dan setelah sekitar 15 menit meniskus di lengan A disesuaikan dengan tanda,
volume dibaca dari skala di lengan B, dan suhu dibaca di termometer. Suhu dan volume
kemudian dibaca bersama setiap 20 sampai 30 menit, meniskus di A disesuaikan dengan tanda
terukir bila perlu, secara tidak langsung sebelum setiap pembacaan; pembacaan dilanjutkan
sampai suhu turun
25 °. Untuk kisaran 10-25 °, rendaman yang berisi piknometer didinginkan
dengan penambahan es hingga 8 ° atau 9 °, dipertahankan di sana selama sekitar satu jam, dan
kemudian dibiarkan menghangat hingga suhu kamar. Pembacaan volume dan suhu dimulai saat
suhu naik menjadi 10 °. Tentang
6 jam diambil agar suhu bak turun dari 40 ° menjadi 25 °,
TABEL IV
Koefisien Ekspansi Air, Plasma, Darah, dan Larutan Tembaga Sulfat dari Gravitas Spesifik yang
Mendekati Gravitas Spesifik Plasma dan Darah
Suhu
Koefisien rata-rata ejfnsion selama interval suhu; ml. peningkatan volume o 1 ml. disebabkan
oleh kenaikan suhu 1 °
selang
Larutan tembaga sulfat dari
Darah dari
Larutan tembaga sulfat dari

air
Hai"
1,02 "64
v "'
v "'
1,05 "69
D. "."
1,02 "70 1,0597
35-40 37 39 38 40 40
dan interval yang hampir sama untuk naik dari 10 ° menjadi 25 °. Variasi suhu kamar tidak
cukup untuk menyebabkan, pada volume cairan yang relatif kecil di lengan kapiler, perubahan
volume yang signifikan dalam kaitannya dengan perubahan total cairan di dilatometer.
Dari fakta yang ditunjukkan pada Tabel IV, bahwa teknik memberikan, dalam batas
ketelitiannya, koefisien suhu untuk air yang sesuai dengan yang ada dalam Tabel Kritis
Internasional, tampak bahwa kesalahan, dari keterlambatan perubahan suhu dilatometer di
belakang perubahan bak mandi, dan dari sumber lain, diabaikan di tempat desimal kelima.
Non-Pengaruh Suhu pada Hasil Plasma dan Gravitasi Spesifik Darah
Penentuan dengan Metode Tembaga Sulfat
Penentuan berat jenis dilakukan dengan metode yang dijelaskan pada sampel darah dan salah
satu plasma pada suhu kamar, dan
kemudian digandakan di ruangan pada 4 ° dan pada 38 °, sampel dan larutan tembaga sulfat
standar dibiarkan di setiap ruangan cukup lama untuk mencapai IO suhunya. Untuk memeriksa
pembacaan ke tempat desimal keempat, setelah setiap gravitasi diperkirakan ke tempat keempat
dengan metode interpolasi biasa, dengan penggunaan standar tembaga sulfat yang dinilai pada
interval 0,001, campuran dari dua standar terdekat adalah dibuat, sehingga campuran tersebut
memiliki perkiraan gravitasi darah atau plasma yang tepat, dan darah atau plasma diperiksa
dengan standar ini. Hasil diberikan pada Tabel V.
TABEL v
Non-Pengaruh Suhu pada Hasil Perkiraan Gravitas Plasma dan Darah oleh
Metode Tembaga Sulfat
Suhu
Gravitas ditemukan dengan metode tembaga sulfat

-c.
4
23
35
Darah
D ,.
26
1.0585
1.0585
1.0588
Plasma
Hai.".
1.0255
1.0252
1.0252
Perbandingan Gravitas Darah dan Plasma yang Diukur dengan Piknometer dengan
Gravitasi Diukur dengan Metode Tembaga Sulfat dan Tabung Gradien
Pengukuran piknometer dibuat seperti yang dijelaskan di atas untuk larutan tembaga sulfat dari
Tabel III, kecuali bahwa pengukuran dilakukan di ruangan dengan suhu sekitar 25 °, dan
penangas air tidak digunakan. Semua tambalan dan penimbangan dilakukan rangkap dua atau
rangkap tiga. Suhu kotak keseimbangan dipertahankan biasanya pada 25 ° ± 1 °. Jika suhu
larutan uji tidak sama dengan suhu air, berat air yang diamati dikoreksi untuk perbedaan suhu.
ence, yang selalu kecil. Berat jenis dihitung langsung dari bobot sebagai mt = (berat larutan uji) /
(berat air),
kedua bobot menjadi bobot semu, tidak dikoreksi untuk efek apung udara.
Penimbangan ganda secara rutin disetujui untuk ± 0,1 mg. Pengukuran
berat jenis secara rutin disetujui dalam ± 0,00002 unit.
Untuk metode tabung gradien dua 500 ml. silinder disiapkan seperti yang dijelaskan oleh Lowry
dan Hunter (8), satu untuk kisaran plasma dan satu untuk darah utuh. Satu-satunya perbedaan
yang diperkenalkan dari teknik
Lowry adalah bahwa larutan tembaga sulfat standar Dit akurat untuk
± 0,0001 (Tabel III) digunakan untuk menstandarisasi tabung gradien, bukan larutan kalium
sulfat yang digunakan oleh Lowry. Untuk menjamin keakuratan yang maksimal, ketika gravitasi
darah atau plasma telah diukur, akurasi dari kurva standarisasi tabung gradien pada saat itu
diperiksa ulang dengan 2 tetes larutan tembaga sulfat dalam 0,001 dari gravitasi yang ditentukan.
Bacaan pada tabung gradien dapat direproduksi hingga ± 0,0001, dan penyimpangan dari
gravitasi sebenarnya yang melebihi batas ini dapat dikaitkan dengan faktor-faktor, seperti
penyerapan bromobenzena oleh tetesan darah atau plasma, selain ketepatan pembacaan.
Metode tembaga sulfat dilakukan seperti yang dijelaskan di halaman sebelumnya, kecuali bahwa
larutan standar dinilai pada interval 0,0005, bukan interval 0,0010 yang digunakan dalam analisis
rutin. Standar disiapkan dari Tabel III, bukan dari Tabel II. Larutan stok disiapkan berat dari
Cu804 yang dianalisis. 5H20; baik itu dan beberapa standar berulang kali diperiksa dengan
piknometer dan nilai ditemukan tepat dalam ± 0,0001. Perkiraan gravitasi duplikat dari plasma
dan tetesan darah dapat diperiksa dalam 0,0001, dan penyimpangan dari gravitasi sebenarnya
yang melebihi batas ini dapat dikaitkan dengan faktor selain ketepatan pembacaan.
Hasil yang diperoleh dengan dua puluh dua sampel plasma diberikan pada Tabel VI, dan hasil
dengan darah utuh dari dua puluh subjek yang sama pada Tabel VII. Terbukti dari perbandingan
dengan nilai piknometer bahwa pembacaan dengan metode tembaga sulfat dan tabung gradien
sedikit tetapi dapat diukur dipengaruhi oleh sumber kesalahan selain presisi pembacaan. Dalam
pembacaan tembaga sulfat, tetesan plasma diimbangi dalam larutan yang rata-rata 0,0007 unit
lebih ringan dari plasma. Ketika koreksi dibuat untuk perbedaan rata-rata ini, deviasi standar dari
pembacaan tembaga sulfat yang dikoreksi dari nilai piknometer adalah ± 0,0003. Sebaliknya,
pembacaan tabung gradien menunjukkan rata-rata gravitasi 0,0002 lebih berat daripada nilai
piknometer; ketika koreksi dibuat untuk perbedaan rata-rata ini, deviasi standar dari pembacaan
tabung gradien yang dikoreksi dari nilai piknometer adalah
± 0,0003, sama dengan pembacaan tembaga sulfat yang dikoreksi. Deviasi standar ± 0,0003
sesuai dengan ± 0,1 gm. protein per 100 ml. plasma.
Lowry dan Hunter (8), bekerja dengan serum (sepuluh sampel) dan Hoch dan
Marrack (15) dengan plasma menemukan bahwa penurunan serum dan plasma seimbang dalam
larutan tembaga sulfat yang rata-rata 0,0010 lebih rendah daripada plasma atau gravitasi serum
yang diukur dengan piknometer. Lowry dan Hunter (8) menemukan bahwa metode tabung
gradien mereka menunjukkan gravitasi serum 0,0005 lebih tinggi daripada piknometer.
Penyimpangan dari nilai serum piknometer yang ditunjukkan oleh hasil kami adalah, untuk
Cu804 dan metode gradien, di
TABEL VI
Perbandingan Gravitasi Plasma (D •.) Diukur dengan Piknometer, Tabung Gradien, dan
Metode Tembaga Sulfat
Nilai v: diukur dengan tiga metode
Metode tembaga sulfat tabung Gradien
Nomor sampel
Piknometer
v • v. •.
Diperbaiki
211
solusi
Deviasi plasma, Un- oleh sub- Deviasi,

menyeimbangkan perkiraan tl • & -11 dikoreksi "traktat d-f- •
plasma'
& 8 b + 0,0002
0,0007
(a) (b) (e) (4) (1) CJ) (4)
lt 1.0200 1.0195 1.0202 +0.0002

2t 233 226233 0 1,0233 1,0231 -0,0002
3 247247254 + 7255253 + 6
4t 248241 248 0249247 - 1
5 256 251 258 + 4 254 252 - 4
6 257 254 261 + 4 262 260 + 3
7 259 253 260 + 1262 260 + 1
St 262 255 262 0264262 0
9 264 254 261 3 260258 6
10264258265-1267265 + 1
12 267 255 262 - 5 270 268 + 1
13 270 263 270 0270268 - 2
14271 263 270 - 1 270 268 - 3
15272265272 0 278276 + 4
16273264 271 - 2 279 277 + 4
18 276 270 277 + 1280 278 + 2
19277265272 - 5 277 275 - 2
20278 271 278 0 279 277 - 1
21287276283 - 4288286 - l
22 * 401399406 + 5
Deviasi rata-rata dari -0,00070 0,0000 0,0000 +0,00021 0,0000 0,0000

piknometer
Simpangan baku, ± 0,00029 ± 0,00029
Vd2 / (N - 1)
* Diukur seperti yang dijelaskan oleh Lowry dan Hunter (8) kecuali bahwa kurva kalibrasi
kolom gradien dibuat dengan tetesan larutan tembaga sulfat yang telah diketahui alih-alih dengan
tetes larutan standar K2SO.
t Sampel 1, 2, 4, 8, dan 22 berasal dari pasien. Tujuh belas plasma lainnya normal.
arah yang sama dengan Lowry dan Hunter tetapi tidak terlalu hebat. Hoch dan Marrack
menyarankan bahwa penutup film udara tentang penurunan plasma
dapat menyebabkannya tampak lebih ringan daripada larutan tembaga sulfat, dan menyatakan
bahwa ketika mereka mengirimkan plasma di bawah larutan, alih-alih membiarkan tetesan jatuh
di udara, perbedaannya menghilang.
TABEL VII
Perbandingan Gravitas Spesifik (D2) Darah Utuh yang Diukur dengan Piknometer, Gradien
Tube, dan Metode Tembaga Sulfat
Nilai D :: diukur dengan tiga metode
Metode tembaga sulfat tabung Gradien
Nomor Sampel D. ,,. Diperbaiki

Piknometer oleh
solusi Tidak dikoreksi * mengurangi penyeimbangan
darah 0,0003
(a) (b) (d) (e) (!) {d)
2t 1,0464 1,0471 +0,0007 1,0475 1,0472 +0,0008

3554554 0556553 - 1
9 572 571 - 1575 572 0

10 563 558 - 5 563 560 - 3
11 581584 + 3 583 580 - 1
12605607 + 2608605 0
13605600 - 5606603 - 2
17 Saya
537 540 + 3 539 536 - 1
21 Saya 563 558 - 5 563 560 - 3

saya
Penyimpangan rata-rata dari I +0.00004 0.0000 +0.00028 0.0000 0.0000
saya
piknometer
Simpangan baku, I
, Vd2 / (N - 1) I
± 0,00038 ± 0,00031
t Lihat catatan kaki Tabel VI. Angka-angka di kolom sebelah kiri menunjukkan darah dari mana
plasma dengan nomor yang sama diperoleh pada Tabel VI.
Tetesan darah utuh (Tabel VII) seimbang dalam larutan tembaga sulfat dengan gravitasi rata-rata
yang sama dengan darah. Perbedaan yang konsisten dari gravitasi larutan tembaga sulfat
penyeimbang, dicatat dalam plasma, tidak terlihat dalam darah utuh.
Pengaruh Oksalat Ditambahkan ke Seluruh Darah pada Berat Jenis Darah dan
Plasma Dipisahkan dari Darah
Amonium oksalat, kalium oksalat, dan campuran Heller dan Paul (3 bagian berat amonium
oksalat hingga 2 bagian kalium oksalat) ditambahkan ke darah dalam jumlah yang bervariasi dari
1 hingga 10 mg. per ml. Gravitas spesifik darah, dan juga plasma yang dipisahkan dengan •
trifugasi, kemudian diukur dengan metode tembaga sulfat. Efek oksalat pada gravitasi kira-kira
merupakan fungsi linier
TABEL VIII
Perubahan Gravitasi Darah Utuh dan Plasma Disebabkan oleh Penambahan Amonium dan
Kalium Oksalat
Tingkat perubahan per mg. oksalat ditambahkan ke 1 ml. darah
Oksalat
Ubah campuran terukur
Amonium Kalium amonium
oksalat oksalat oksalat +
2 gram. kalium oksalat)
Gravitasi plasma ................................... +0,0007 +0,0002 +0,0003

Gravitasi darah utuh .............................. +0,0003 +0,0006 +0,0004
Protein plasma dihitung dari Gp *

Gm. per 100 ml. plasma ......................... +0.26 +0.07 +0.11

% dari rata-rata normal .............................. +3.5 +1.0 +1.4
Hemoglobin dihitung dari Gp dan GBt

Gm. per 100 ml. darah .......................... -0.02 +0.24 +0.10
% dari rata-rata normal. ............................. -0.1 +1.5 + o.6
* Gp = gravitasi plasma. Untuk perhitungan konsentrasi protein dari gravitasi, lihat kertas
terlampir (9).
t Ga = gravitasi darah utuh. Untuk perhitungan hemoglobin dari Ga dan Gp,
lihat kertas terlampir (10).
jumlah yang ditambahkan. Hasilnya, dalam hal efek per mg. oksalat ditambahkan per ml. darah
lengkap, diberikan pada Tabel VIII.
Perbedaan, ditunjukkan pada Tabel VIII, antara amonium dan kalium
oksalat sehubungan dengan efek relatifnya pada plasma dan gravitasi seluruh darah, masing-
masing, mungkin disebabkan oleh perbedaan NH4 + dan K + sehubungan dengan penetrasi ke
dalam sel. Campuran amonium-potas • sium oksalat dari Heller dan Paul dipilih untuk
penggunaan rutin karena pengaruhnya hampir sama pada plasma dan gravitasi seluruh darah
serta pada protein plasma dan nilai hemoglobin yang dihitung darinya.
RINGKASAN
Sebuah teknik sederhana dijelaskan untuk mengukur berat jenis plasma, serum, atau darah utuh.
Metode ini didasarkan pada fakta bahwa setetes plasma atau darah yang jatuh ke dalam larutan
tembaga sulfat dengan gravitasi yang sama langsung terbungkus dalam kantung tembaga
proteinat, dan tetesan tersebut tetap terpisah dan tanpa perubahan gravitasi selama sekitar 10
detik. Selama interval ini naik atau turunnya penurunan menunjukkan hubungan gravitasinya
dengan larutan tembaga sulfat.
3 atau 4 tetes darah atau plasma dan sekitar satu menit cukup untuk a
pengukuran gravitasi. Kontrol atau koreksi suhu tidak diperlukan, karena koefisien suhu darah
dan plasma sangat dekat dengan koefisien suhu larutan tembaga sulfat yang sesuai sehingga
perubahan suhu menjadi • tween 10 ° dan 40 ° tidak secara signifikan mempengaruhi hubungan
gravitasi.
Tetesan darah utuh ditemukan seimbang dalam larutan tembaga sulfat dengan gravitasi yang
sama. Standar deviasi gravitasi darah yang ditentukan dengan metode tembaga sulfat adalah ±
0,0004 satuan gravitasi dari gravitasi darah yang diukur dengan piknometer.
Tetesan plasma manusia ditemukan seimbang dalam larutan tembaga sulfat
tions rata-rata 0,0007 unit gravitasi lebih ringan dari plasma. Larutan tembaga sulfat standar
yang digunakan untuk plasma disiapkan untuk mengoreksi perbedaan ini. Standar deviasi
gravitasi plasma yang ditentukan dengan metode tembaga sulfat adalah ± 0,0003 unit gravitasi
dari gravitasi plasma yang diukur dengan piknometer.
BIBLIOGRAFI
1. Phillips, R. A., Van Slyke, D. D., Hamilton, P. B., Dole, V. P., Emerson, K., Jr., dan
Archibald, R. M., (a) Bur. Med. Surat Berita U. S. Navy, 1, No. 9, 1 (1943); (b) Dicetak ulang
dengan revisi oleh Josiah Macy, Jr., Foundation for the Armed Forces of the Allied Nations
(1945).
2. Phillips, R. A., Van Slyke, D. D., Hamilton, P. B., Dole, V. P., Emerson, K., Jr., dan
Archibald, R. M., Bull. US Arm11 Med. Dept., 71, 66 (1943).
3. Roy, C. S., J. Physiol., 6, hal. ix (1884).
4. Rogers, L., Ann. Trop. Med. dan Parasitol., 10, 129 (1906-07).
5. Barbour, H. G., dan Hamilton, W. F., J. Biol. Chem., 69, 625 (1926).
6. Jacobsen, C. F., dan Linderstram-Lang, K., Acta physiol. Scand., 1, 149 (1940).
7. Lowry, 0. H., dan Hastings, A. B., J. Biol. Chem., 143, 257 (1942).
8. Lowry, 0. H., dan Hunter, T. H., J. Biol. Chem., 169, 465 (1945).
9. Van Slyke, D. D., Hiller, A., Phillips, R. A., Hamilton, P. B., Dole, V. P., Archi •
botak, R. M., dan Eder, H. A., J. Biol. Chem., 183, 331 (1950).
10. Van Slyke, D. D., Phillips, R. A., Dole, V. P., Hamilton, P. B., Archibald, R. M., dan Plazin,
J., J. Biol. Chem., 183, 349 (1950).
11. Heller, V. G., dan Paul, H., J. Lab. dan Clin. Med., 19, 777 (1934).
12. Quigley, J. J., dan Muraschi, T. F., J. Biol. Chem., 168, 463 (1945).
13. Hamilton, P. B., dan Van Slyke, D. D., J. Biol. Chem., 160, 231 (1943).
14. Tabel kritis internasional dari data numerik, fisika, kimia dan teknologi •
ogy, New York, 3, 67 (1928).
15. Hoch, H., dan Marrack, J., Brit. Med. J., 2, 153 (1945).
PENGUKURAN GRAVITASI KHUSUS DARAH DAN PLASMA DENGAN SOLUSI

SULFAT TEMBAGA STANDAR
Robert A. Phillips, Donald D. Van Slyke, Paul B. Hamilton, Vincent P. Dole, Kendall Emerson,
Jr., Reginald M. Archibald dan Dengan bantuan teknis dari Emily G. Stanley
J. Biol. Chem. 1950, 183: 305-330.
Akses versi terbaru artikel ini di http://www.jbc.org/content/183/1/305.citation
Peringatan:
•
•
Kapan artikel ini dikutip

Saat koreksi untuk artikel ini diposting
Klik di sini untuk memilih dari semua peringatan email JBC
Artikel ini mengutip 0 referensi, 0 di antaranya dapat diakses gratis di

http://www.jbc.org/content/183/1/305.citation.full.ht ml # ref-list-1

Pengukuran Gravitasi Khusus Darah Dan Plasma Dengan Solusi Sulfat Tembaga Standar

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Pengukuran Gravitasi Khusus Darah Dan Plasma Dengan Solusi Sulfat Tembaga Standar

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

PENGUKURAN GRAVITASI KHUSUS DARAH DAN PLASMA DENGAN SOLUSI

SULFAT TEMBAGA STANDAR *

OLEH ROBERT A. PHILLIPS, ** t DONALD D. VAN SLYKE, t PAUL B. HAMILTON, §

(Diterima untuk publikasi, 18 Juli 1949)

Publikasi awal metode ini muncul di jurnal medis

-c. Ml. air sampai 170 gram. CuS <km.O

PERSIAPAN SOLUSI SULFAT TEMBAGA STANDAR BERDASARKAN DILU'I SOLUSI

Larutan standar untuk plasma, "Larutan standar untuk darah utuh"

Gravitasi plasma seimbang dengan standar

Volume larutan stok per 100 ml. standar

Gravitr:, _ kebutuhan ba darah menurut standar

Volume larutan stok per 100 ml. standar

Gravit [. dari darah berdasarkan standar

Volume larutan stok per 100 ml. standar

"ml. ml. ml.

16 14.9 36 35.3 56 55.3

24 22.7 44 43.2 64 63.35

pada Tabel Il.3

i Tabel pengenceran yang diberikan untuk persiapan larutan tembaga sulfat di

GAMBAR DAN PERSIAPAN DARAH

sekitar 0,1 ml. rinci.

Suasana hati vena, Porsi 1 sampai 5 Ml.

menyebabkan ketidakakuratan dalam kalkulasi protein plasma dan konsentrasi hemoglobin

pada darah yang baru diheparinisasi.

Menggambar Venous Blood-Tourniquets tidak boleh diterapkan lebih dari

Penanganan Darah Vena; tanpa Antikoagulan-Jika berat jenis

untuk mendapatkan serum.

Dengan Antikoagulan-Jika diinginkan hasil untuk seluruh darah dan plasma,

pengendapan parsial sel.

yang dikatalogkan sebagai No. 2319-B oleh Arthur H. Thomas Com-

Capirlary Blood, 4 atau 5 Drops, untuk Gravity of Whole Blood

digunakan.5 Lebih mudah, untuk pengeluaran tetes darah, untuk menyediakan

tabung titik leleh juga dapat digunakan.

314 CUSO • METODE GRAVITASI DARAH DAN PLASMA

dengan air suling, dan dikeringkan dalam oven.

kemiringan atau gelembung dapat ditarik masuk.

Dengan vaselin sedikit, pengiriman berakhir sebelum tetes diberikan, itu

PENENTUAN GRAVITASI KHUSUS

F10. 3. Meneteskan darah ke dalam larutan tembaga sulfat standar

Penurunan yang disampaikan menembus lapisan permukaan larutan dan momentumnya

Poin Khusus dan Tindakan Pencegahan

Hubungan Gravitasi Spesifik dengan Konsentrasi dalam Larutan Tembaga Sulfat

Kepadatan larutan standar

D ,,, CuSO, · SH, O CuSO, per 100 per 100 ml.

3.031 3.082 19.38

6679 10,53 11,02 69,31

Koefisien Suhu Ekspansi Plasma dan Darah, dan Tembaga

Fro. 4. Dilatometer untuk mengukur koefisien muai fluida

Larutan tembaga sulfat dari

Larutan tembaga sulfat dari

Gravitas ditemukan dengan metode tembaga sulfat

Nilai v: diukur dengan tiga metode

Metode tembaga sulfat tabung Gradien

Deviasi plasma, Un- oleh sub- Deviasi,

lt 1.0200 1.0195 1.0202 +0.0002

Deviasi rata-rata dari -0,00070 0,0000 0,0000 +0,00021 0,0000 0,0000

Metode tembaga sulfat tabung Gradien

Nomor Sampel D. ,,. Diperbaiki

2t 1,0464 1,0471 +0,0007 1,0475 1,0472 +0,0008

9 572 571 - 1575 572 0

537 540 + 3 539 536 - 1

21 Saya 563 558 - 5 563 560 - 3

Tingkat perubahan per mg. oksalat ditambahkan ke 1 ml. darah