SKRIPSI
Oleh :
Joice Sola Gratia Sitepu
NIM : 068114103
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2010
PENGARUH VARIASI METODE EKSTRAKSI SECARA
MASERASI DAN DENGAN ALAT SOXHLET TERHADAP
KANDUNGAN KURKUMINOID DAN MINYAK ATSIRI
DALAM EKSTRAK ETANOLIK KUNYIT
(Curcuma domestica Val.)
SKRIPSI
Oleh :
Joice Sola Gratia Sitepu
NIM : 068114103
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2010
ii
iii
iv
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN
PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPERLUAN AKADEMI
Dibuat di Yogyakarta
Pada tanggal : 16 Agustus
2010 Yang nyattikan
h kepada- MU untuk langkah apapun yang kuambil demi masa depanku, aku percaya ada rencana Tuha
Kesabaran,
Kemurahan,
Kebaikan,
Kesetiaan,
Kelemahlembutan,
Penguasaan diri.
vi
PRAKATA
Terpujilah nama Tuhan kita Yesus Kristus, karena begitu besar Kasih-
Nya kepada penulis sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
”Pengaruh Variasi Metode Ekstraksi Secara Maserasi dan Dengan Alat Soxhlet
Kunyit”.
sangat dalam atas bantuan yang diberikan kepada penulis baik bantuan secara
1. Erna Tri Wulandari M.Si., Apt. selaku Dosen Pembimbing yang dengan sabar
2. Dr. C. J. Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Penguji yang telah meluangkan waktu
3. Lucia Wiwid Wijayanti, M. Si., selaku Dosen Penguji yang telah meluangkan
waktu untuk menguji serta memberi kritik dan saran yang membangun.
4. Prof. Dr. Sudibyo Martono, M. S., Apt yang amat sangat membantu penulis
dalam menggoreskan buah pikiran ke dalam naskah ini, yang telah dengan
vii
5. Teman-teman akrabku: Maria Intan Josi, Maria Diyan Monika, Valentina
sangat berarti untukku. Terimakasih untuk semangat anak muda yang kita
6 Teman- teman payungku: Felicia Wulan Apsari, Dwi Priharyanti, Ignatius Eka
Wibowo, Thomas Anggun. Teristimewa Melia Sari Dewi yang sudah seperti
saudaraku sendiri, dan partner laboratoriiim yang handal, dan akhirnya kita bisa
7. Teman-teman di FST 2006 dan adik-adik kelasku 2007, 2008, dan 2009 atas
8. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu, tanpa pihak-pihak
yang tidak dapat saya tuliskan namanya satu persatu, saya tidak mungkin dapat
itu penulis sangat mengharapkan adanya kritik dan saran yang dapat berguna bagi
ilmu pengetahuan.
enulis,
Saya menyatakan bahwa sesungguhnya skripsi yang saya tulis ini tidak
memuat karya atau bagian dari orang lain, kecuali yang telah disebutkan dalam
kutipan daftar pustaka, sebagaimana layaknya karya ilmiah.
VIIt
INTISARI
x
ABSTRACT
xi
DAFTAR ISI
xii
D. Penyulingan Minyak Atsiri ……………………………………………. 15
1. Penyulingan dengan air…………………………………………… 15
2. Penyulingan dengan air dan uap………………………………….. 16
3. Penyulingan dengan uap………………………………………….. 16
E. Uraian Metode Ekstraksi ……………………………………………… 17
1. Tujuan ekstraksi …………………………………………………. 17
2. Jenis – jenis ekstraksi ……………………………………………. 17
a. Cara dingin…………………………………………………….. 17
b. Cara panas……………………………………………………... 18
3. Uraian maserasi…………………………………………………... 19
4. Uraian dengan alat Soxhlet……………………………………….. 20
5. Cairan penyari……………………………………………………. 22
a. Kriteria cairan penyari………………………………………… 22
b. Etanol………………………………………………………….. 22
F. Uraian Ekstrak ……………………………………………………....... 23
1. Definisi ekstrak …………………………………………………... 23
2. Pengelompokan ekstrak ………………………………………….. 23
3. Ekstrak kunyit…………………………………………………….. 24
G. Penguapan Ekstrak Cair……………………………………………….. 24
H. Uraian Spektrofotometri …..………………………………………….. 25
I. Validasi Metode .……………………………………………………… 26
1. Akurasi…………………………………………………………… 26
2. Presisi…………………………………………………………….. 26
3. Linieritas dan rentang……………………………………………. 27
4. Spesifisitas………………………………………………………... 27
5. Limit of Detection dan Limit of Quantitation..……………….…… 28
J. Keterangan Empiris………………………………………………….... 28
BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ……………………..……………... 30
A. Jenis dan Rancangan Penelitian .....………………………………........ 30
1. Jenis penelitian.. …………………………………………...…….. 30
2. Tahapan penelitian ……..………………………………………... 30
xiii
B. Variabel dan Definisi Operasional ……………………………………. 31
1. Klasifikasi variabel…………………………………..……………. 31
a. Variabel bebas…………………………………………………. 31
b. Variabel tergantung……………………………………………. 31
c. Variabel pengacau tidak terkendali.............................................. 31
d. Variabel pengacau terkendali....................................................... 31
2. Definisi operasional………………………………………………. 31
a. Maserasi………………………………………………..………. 31
b. Dengan alat Soxhlet…………………………………………..... 32
c. Ekstrak kunyit maserasi………………………………………... 32
d. Ekstrak kunyit dengan alat Soxhlet..………..…………………. 32
e. Penetapan minyak atsiri……………………………………….. 32
f. Penetapan kadar kurkuminoid dalam ekstrak rimpang kunyit… 32
g. Pengaruh variasi metode ekstraksi……………………..……… 33
C. Bahan atau Materi Penelitian .………………………………………... 33
D. Alat atau Materi Penelitian…………………………………………… 33
E. Jalannya Penelitian ……….…..……………………………………….. 33
1. Identifikasi rimpang kunyit.......…………..……………………… 34
2. Pembuatan simplisia ..............................………………………….. 34
a. Pengumpulan bahan…………………………………………… 34
1) Sortasi basah………………………………………………. 34
2) Pencucian…………………………………………………. 34
3) Perajangan………………………………………………… 35
4) Pengeringan………………………………………………. 35
5) Sortasi kering……………………………………………… 35
6) Pembuatan serbuk simplisia……………………………….. 35
b. Pembuatan ekstrak rimpang kunyit..................……………….. 36
1) Metode maserasi………………………………………….... 36
2) Metode dengan alat Soxhlet……………………………….. 36
c. Pengentalan ekstrak rimpang kunyit.......................................... 37
d. Penetapan kadar minyak atsiri........….………………………... 37
xiv
e. Penetapan kadar kurkuminoid yang dihitung dalam persen
kurkumin……………………………………………………….. 37
1) Pembuatan larutan stok…………………………………….. 37
2) Pembuatan larutan intermediet…………………………….. 37
3) Penetapan panjang gelombang maksimum (λ maks)……… 37
4) Validasi metode…………………………………………… 38
a) Akurasi………………………………………………… 38
b) Presisi………………………………………………….. 39
c) Linieritas dan rentang………………………………….. 39
d) Spesifisitas……………………………..………………. 39
e) Limit of Detection dan Limit of Quantitation..………… 40
5) Pembuatan kurva baku…………………………………….. 40
6) Penetapan kadar kurkuminoid dalam sampel……………… 41
f. Analisa data……………………..……………………………... 41
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ……….…..………………………… 42
A. Identifikasi Rimpang Kunyit………................……….…..………….... 42
1. Organoleptik………………………………………………………. 42
2. Makroskopis………………………………………………………. 43
3. Mikroskopis……………………………………………………….. 44
B. Pembuatan Simplisia ……….…..……………………………………... 45
1. Pengumpulan rimpang kunyit…………………………………….. 45
2. Sortasi basah ……….…..………………………………………… 45
3. Pencucian rimpang kunyit.……………………………….............. 46
4. Perajangan rimpang kunyit ………………………………………. 46
5. Pengeringan rimpang kunyit .……………………………............. 47
6. Sortasi kering ……….…..………………………………………... 48
7. Pembuatan serbuk ……….…..…………………………………… 48
C. Cara Maserasi ……...…..……………………………………………... 49
D. Cara Dengan Alat Soxhlet…..…………………………………………. 51
E. Pengentalan Ekstrak Rimpang Kunyit.………………………….......... 52
F. Penetapan Kadar Minyak Atsiri..…………….……………………...... 53
xv
G. Penetapan Kadar Kurkuminoid dengan Spektrofotometri Visible…….. 55
1. Penetapan panjang gelombang maksimum (λ maks)……………… 56
2. Validasi metode…………………………………………………… 56
a. Akurasi……………………………………………...………. 57
b. Presisi……………………………………………….………. 57
c. Linearitas……………………………………………………. 58
d. Spesifisitas………………………………………….……….. 59
e. Limit of Detection dan Limit of Quantitation..……………… 59
3. Pembuatan kurva baku……………………………………………. 60
4. Penetapan kadar kurkuminoid dalam sampel…………………….. 61
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN…..…………………………………. 68
A. Kesimpulan .…..………………………………………………………. 68
B. Saran .…..…………………………………………………………....... 68
DAFTAR PUSTAKA .…..……………………………………………………. 69
LAMPIRAN .…..……………………………………………………………… 75
BIOGRAFI PENULIS .…..…………………………………………………… 101
xvi
DAFTAR TABEL
Tabel III. Data hasil penetapan kadar minyak atsiri metode ekstraksi
maserasi................................................................................. 55
Tabel IV. Data hasil penetapan kadar minyak atsiri metode ekstraksi
penentuan akurasi……………………………….................. 57
koefisien variasi.................................................................... 58
alat Soxhlet........................................................................... 66
ekstraksi maserasi................................................................. 76
xvii
tiga replikasi kurkumin..........................................................
Tabel XVI. Data bobot ekstrak orientasi metode ekstraksi dengan alat
Soxhlet................................................................................... 82
Tabel XIX. Data bobot ekstrak replikasi III metode ekstraksi maserasi.. 84
Tabel XXII. Data bobot ekstrak replikasi I metode ekstraksi dengan lat
Soxhlet.................................................................................. 86
alat Soxhlet............................................................................ 86
Tabel XXIV. Data bobot ekstrak replikasi III metode ekstraksi dengan
alat Soxhlet............................................................................ 87
Alat Soxhlet........................................................................... 87
Alat Soxhlet........................................................................... 88
xviii
Tabel XXVIII. Analisis hasil kurkuminoid menggunakan statistik t–test…. 90
xix
DAFTAR GAMBAR
sokletasi (kiri)…………………………………………... 92
xx
replikasi 2 kadar 0,2856 mg%.......................................... 95
0,1632 mg%...................................................................... 96
replikasi I..….................................................................... 98
replikasi II………………………………………………. 99
xxi
DAFTAR LAMPIRAN
standar………………………………………………. 79
kunyit........................................................................... 83
Alat Soxhlet.................................................................. 92
xxii
Stahl…………………………………………………..
………………………...………… 93
xxiii
DAFTAR SINGKATAN
xxiv
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
terutama tanaman obat. Tanaman obat penggunaannya dapat dalam bentuk segar,
tunggal maupun campuran, serta dapat berupa ramuan yang lebih dikenal sebagai
tradisional adalah bahan atau ramuan bahan yang berupa bahan tumbuhan, bahan
hewan, bahan mineral atau campuran dari bahan tersebut yang secara turun-
1992).
diminati oleh industri, salah satunya rimpang kunyit (RK) (Rukmana, 1994).
Simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai obat yang belum
mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dinyatakan lain, berupa bahan
1
2
jumlahnya yang diserap oleh industri obat tradisional di Jawa Timur menduduki
peringkat pertama dan di Jawa Tengah termasuk lima besar bersama-sama dengan
Sebagian besar jamu yang beredar di Indonesia, Malaysia, dan beberapa Negara
lain selalu menggunakan kunyit sebagai salah satu bahan baku (Nugroho, 1998).
berkhasiat untuk mengobati sakit perut, diare, asma, sakit kepala, keputihan, haid
kurkuminoid (Oomah, 2000) dan minyak atsiri (MA) (Rukmana, 1994). Warna
komponen utama tumbuhan kunyit dan memiliki peran penting dalam aktivitas
dan Adnyana, 2004). Zat warna kuning tersebut larut dalam alkohol dan asam
asetat glasial, tetapi tidak dapat larut dalam air dan eter (Tarujaya, 1992;
60% dari total kurkuminoid. Kadar total kurkuminoid sering dihitung sebagai
simetris dan dihubungkan dengan satu rantai heptadiena (Suwanto, 1983 yang
Kunyit mengandung senyawa minyak atsiri (MA) (6%) yang terdiri dari
keluarnya asam lambung yang berlebihan dan mengurangi peristaltik usus yang
telah disebutkan (Sumiati et al, 2004), kunyit juga mengandung protein, fosfor,
tradisional maju pesat, sehingga obat tradisional pun telah berhasil membuat
agar zat berkhasiat yang terdapat di simplisia terdapat dalam bentuk yang
mempunyai kadar yang tinggi dan hal ini memudahkan zat berkhasiat dapat diatur
ekstrak. Bila kualitas ekstrak meningkat, maka kualitas sediaan obat tradisional
ikut meningkat. Peningkatan kualitas ekstrak dapat dimulai dari metode ekstraksi
4
larut sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair
(Anonim, 1986). Metode ekstraksi dibagi menjadi dua jenis, antara lain cara
dingin dan cara panas. Metode ekstraksi yang tergolong cara dingin adalah
maserasi dan perkolasi sedangkan metode ekstraksi yang tergolong cara panas
adalah refluks, dengan alat Soxhlet, digesti, dan infus (Anonim, 2000).
ekstrak dengan kandungan senyawa aktif secara maksimal, maka pada penelitian
secara maserasi dan sokletasi yang akan memberikan hasil yang berbeda, sehingga
dari perbedaan tersebut dapat diketahui metode pembuatan ekstrak yang paling
baik. Senyawa aktif yang diekstraksi dengan kedua metode ekstraksi tersebut
direndam hingga meresap dan melunakkan susunan sel, sehingga zat –zatnya akan
larut (Ansel, 1985; Voigt, 1971) dan digunakan untuk penyarian simplisia yang
5
mengandung zat aktif yang mudah larut dalam cairan penyari (Anonim, 1986).
bertekstur lunak dan tidak tahan pemanasan secara langsung karena suhu
tahan pemanasan secara langsung karena akan terurai sehingga metode dengan
dengan alat Soxhlet (cara panas) untuk mengetahui metode ektraksi terbaik di
dengan membaca jumlah volume MA yang tertampung dalam buret berskala pada
rangkaian alat destilasi air dengan metode destilasi Stahl. Kemudian banyaknya
Digunakan etanol sebagai pelarut karena etanol merupakan pelarut yang universal
6
yang dapat menarik hampir sebagian besar senyawa kimia yang terkandung di
dalam herba (Runadi, 2007). Pertimbangan lainnya adalah etanol sebagai penyari
karena lebih selektif, kapang dan kuman sulit tumbuh, tidak beracun, netral, dan
panas yang diperlukan untuk pemekatan relatif lebih sedikit (Anonim, 1986), juga
1. Rumusan masalah
a. Adakah pengaruh metode yaitu maserasi dan dengan alat Soxhlet terhadap
b. Adakah pengaruh variasi metode yaitu maserasi dan dengan alat Soxhlet
2. Keaslian penelitian
keterangan penelitian tentang pengaruh cara ekstraksi maserasi dan dengan alat
Dibuat Secara Maserasi Dan Perkolasi (Kartika Noor Endah, 1998), dan Ekstraksi
Yamrewav, 2004).
3. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis
dalam bidang pembuatan sediaan galenika untuk produsen obat tradisional dalam
b. Manfaat praktis
B. Tujuan Penelitian
1. Tujuan umum
paling baik di antara kedua metode ekstraksi, yaitu maserasi dan dengan alat
soxhlet.
2. Tujuan khusus
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Uraian Kunyit
1. Keterangan botani
Kunyit merupakan tanaman obat berupa semak dan bersifat tahunan
(perenial) yang tersebar di seluruh daerah tropis. Tanaman kunyit tumbuh subur
dan liar di sekitar hutan/bekas kebun. Tanaman ini banyak dibudidayakan di Asia
Selatan khususnya di India, Cina Selatan, Taiwan, Indonesia (Jawa), dan Filipina
(Anonim, 2006).
Divisio : Spermatophyta
Subdivisio : Angiospermae
Classis : Monocotyledonae
Ordo : Zingiberales
Familia : Zingiberaceae
(Anonim, 2006).
Pemerian. Bau khas aromatik; rasa agak pahit, agak pedas, lama kelamaan
jingga kemerahan sampai kuning jingga kecoklatan; bentuk hampir bundar sampai
dinding sel menggabus. Korteks dan silinder pusat: parenkimatik, terdiri dari sel-
sel besar, penuh berisi pati. Butir pati: Tunggal, bentuk lonjong atau bulat telur
dengan satu sisi membulat; Sel sekresi: Banyak tersebar, bentuk bulat atau
lonjong berisi minyak berwarna kuning jingga yang sebagian mendamar dan
pada korteks dan pada silinder pusat, berkas pembuluh di bawah endodermis
3. Kandungan kimia
turmeron, alfa dan beta turmeron, curlon, curcumol, atlanton, turmerol (minyak
glukosa, pati, tanin dan damar serta mineral, yaitu Mg, Mn, Fe, Cu, Ca, Na, K, Pb,
senyawa MA (6%) yang terdiri dari sejumlah monoterpen dan keton seskuiterpen,
selain yang telah dijelaskan oleh Sudarsono, 1996 (Wikipedia, 2007). Basis warna
1999), kunyit juga mengandung protein, fosfor, kalium, besi, dan vitamin C
(Soedibjo, 1998).
keputihan, haid tidak lancar, dan sebagai ekspektoran (Duke, 2008). Selain itu
sebagai penawar racun (antidota), penguat lambung dan penambah nafsu makan
(Rukmana, 2004).
B. Uraian Kurkuminoid
kunyit (Chattopadhyay et al, 2004 ; Sumiati et al, 2004; Dandekar dan Kaikar,
2002) oleh sebab itu kurkuminoid (kebanyakan berupa kurkumin) banyak menjadi
2004). Kurkumin murni sangat sulit diperoleh langsung dari RK karena seringkali
xanthorrhiza, Roxb.) dan pada tanaman temugiring (Curcuma heyneana, Val. &
(Jaruga, 1998 ; Pan, 1999) memiliki berat molekul 368, 126 (Tonnesen, &
12
Pertama kali kurkumin ditemukan pada tahun 1815 oleh Vogel dan
Pelletier (van der Goot, 1997). Kristalisasi kurkumin pertama kali dilakukan oleh
Daube pada tahun 1870 dan elusidasi struktur kimia dilakukan pada tahun 1910
oleh Lampe. Sintesis kurkumin pertama kali dilakukan oleh Lampe dan
Milobedzka pada tahun 1913 (Roughly and Whiting, 1973). Struktur kimia
H
O O
H3CO OCH3
R1 R2
Keterangan :
R1=R2= H Bisdemetoksikurkumin
degradasi pada gugus metilen aktif pada senyawa tersebut (Tonnesen et al., 1985).
dan Ma’mun, 2005). Instabilitas kurkumin juga dipengaruhi oleh adanya cahaya
13
Goot, 1997; Supardjan, dan Meiyanto, 2002) dan oleh sinar ultraviolet
Tarujaya, 1992) dan aseton (Joe, Vijaykumar, Lokesh, 2004; Chattopadhyay et al,
2004; Araujo dan Leon, 2001) tetapi tidak dapat larut dalam air, eter (Windholz,
Venkatesan, Babu, 2000; Siddiqui, Cui, Wu, Dong, Zhou, Hu, Simms, Wang,
Kawakishi, 1995) karena memiliki dua cincin fenol simetris dan dihubungkan
dengan satu rantai heptadiena (Suwanto, 1983 yang diacu dalam Sihombing,
2007). Kurkumin memiliki dua gugusan hidroksi atau dua gugusan fenol, maka
14
Wikipedia, 2007).
Anonim, 1993).
(Anonim, 1985). MA adalah zat berbau yang terdapat dalam berbagai bagian
tanaman, karena menguap bila dibiarkan di udara pada suhu kamar, maka disebut
1988).
pewangi atau penyedap (flavoring). Selain itu, MA juga banyak digunakan dalam
analgesik, haemolitik, sedatif, stimulan untuk obat sakit perut, dan bakterisida
parfum dan kosmetik, sebagai penyedap rasa makanan (Tyler et al, 1988).
15
curcumen, humulen, Arabinosa, fruktosa, glukosa, pati, tanin dan damar serta
mineral, yaitu Mg, Mn, Fe, Cu, Ca, Na, K, Pb, Zn, Co, Al, dan Bi (Sudarsono,
1996).
MA kunyit memiliki berat jenis 0,941, rotasi optik pada suhu 20°C
adalah -190.18, indeks bias pada suhu 20°C adalah 1.5025. Warna MA kuning
dan mempunyai bau yang khas dan rasa pedas (Guenther, 1952).
berlebihan dan mengurangi peristaltik usus yang terlalu kuat (Tampubolon, 1981).
campuran dari dua jenis cairan atau lebih berdasarkan perbedaan tekanan uap dari
Pada metode ini, bahan yang akan disuling kontak langsung dengan air
mendidih. Bahan tersebut mengapung di atas air atau terendam secara sempurna
tergantung dari bobot jenis dan jumlah bahan yang disulng. Air dipanaskan
16
dengan metode pemanasan yang biasa dilakukan, yaitu dengan panas langsung,
mantel uap, pipa uap melingkar terbuka atau berlubang. Ciri khas dari metode ini
ialah kontak langsung antara bahan dengan air mendidih (Guenther, 1948).
Penyulingan ini dilakukan pada material basah ataupun kering yang bisa
rusak karena perebusan. Pada metode penyulingan ini, bahan olah diletakkan di
atas rak –rak atau saringan berlubang. Ketel suling diisi dengan air sampai
permukaan air berada tidak jauh di bawah saringan. Air dapat dipanaskan dengan
berbagai cara yaitu dengan uap jenuh yang basah dan bertekanan rendah. Ciri khas
dari metode ini adalah: 1) uap selalu dalam keadaan basah, jenuh dan tidak terlalu
panas; 2) bahan yang disuling hanya berhubungan dengan uap dan tidak dengan
Penyulingan cara ini tidak memerlukan air, uap air panas yang biasanya
bertekanan lebih dari 1 atmosfer dialirkan melalui suatu pipa uap. Peralatan yang
dipakai tidak berbeda dengan penyulingan dengan air dan uap, hanya diperlukan
alat tambahan untuk memeriksa suhu dan tekanan (Anonim, 1985). Uap yang
digunakan adalah uap jenuh, uap dialirkan melalui pipa uap berlingkar yang
berpori yang terletak di bawah bahan, dan uap bergerak ke atas melalui bahan
yang terletak di atas saringan (Guenther, 1948). Penyulingan ini baik digunakan
untuk membuat MA dari biji, akar, kayu yang umumnya mengandung komponen
1. Tujuan ekstraksi
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut
sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair (Anonim,
1986).
Ekstraksi dilakukan untuk menyari zat –zat berkhasiat atau zat –zat aktif
dari bagian tanaman obat, hewan dan beberapa jenis ikan termasuk biota laut.
Zat–zat aktif terdapat di dalam sel, namun sel tanaman dan hewan berbeda
yang terdapat pada bahan alam. Ekstraksi ini didasarkan pada prinsip perpindahan
massa komponen zat ke dalam pelarut, dimana perpindahan mulai terjadi pada
lapisan antar muka kemudian berdifusi masuk ke dalam pelarut (Anonim, 1986).
a. Cara dingin.
1) Maserasi
2) Perkolasi
b. Cara panas
1) Refluks
didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan
alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinyu dengan jumlah pelarut relatif
3) Digesti
temperatur yang lebih tinggi dari temperatur kamar, secara umum dilakukan pada
temperatur 40-50 C.
19
4) Infus
selama waktu 15-20 menit di penangas air, berupa bejana infus tercelup dalam
3. Uraian maserasi
Istilah maceration berasal dari bahasa latin macerare, yang artinya
“merendam”. Merupakan proses paling tepat dimana obat yang sudah halus
susunan sel, sehingga zat –zat yang mudah larut akan melarut (Ansel, 1985).
simplisia yang mengandung zat aktif yang mudah larut dalam cairan penyari.
Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari.
Cairan penyari akan menembus dinding sel dan masuk kedalam rongga
sel yang mengandung zat aktif. Zat aktif akan larut dan karena adanya perbedaan
konsentrasi antara larutan zat aktif di dalam sel dan di luar sel, maka larutan yang
konsentrasi antara larutan di luar dan di dalam sel. Cairan penyari yang digunakan
Bila cairan penyari yang digunakan adalah air maka untuk mencegah
timbulnya kapang dapat ditambahkan bahan pengawet, yang diberikan pada awal
terhadap simplisia, akan semakin banyak hasil yang diperoleh (Voigt, 1994).
luar sel. Hasil penyarian dengan cara maserasi perlu dibiarkan selama waktu
diperlukan tetapi ikut terlarut dalam cairan penyari seperti penyari malam dan
lain-lain (Anonim, 1986). Cara ekstraksi maserasi ini dilakukan 3 x 24 jam, hal ini
dilakukan supaya senyawa yang terkandung dalam herba tertarik (Runadi, 2007).
secara kontinyu dalam menyari. Pada proses ini sampel yang akan disari
dimasukkan pada alat Soxhlet, lalu setelah dielusi dengan pelarut yang cocok
sedemikian rupa sehingga akan terjadi dua kali sirkulasi dalam waktu 30 menit
(Harborne, 1987).
diembunkan oleh pendingin udara menjadi tetesan –tetesan yang akan terkumpul
kembali dan bila melewati batas lubang pipa samping Soxhlet, maka akan terjadi
1987).
21
(kertas, karton, dan sebagainya) di dalam sebuah alat ekstraksi dari gelas yang
bekerja kontinyu. Wadah gelas yang berisi sampel diletakkan di antara labu suling
dan suatu pendingin aliran balik. Labu tersebut berisi bahan pelarut yang menguap
dan mencapai ke dalam pendingin aliran balik melalui pipa pipet, berkondensasi
di dalamnya, menetes ke atas bahan yang akan diekstraksi dan membawa keluar
bahan yang diekstraksi. Larutan yang terkumpul dalam wadah gelas dan setelah
pelarut murni berikutnya. Pada cara ini bahan terus diperbaharui artinya
Kelemahannya adalah waktu yang dibutuhkan untuk ekstraksi cukup lama sampai
beberapa jam, sehingga kebutuhan energinya tinggi dan dapat berpengaruh negatif
(Lenny, 2006). Ekstraksi sempurna ditandai bila cairan di sifon tidak berwarna
5. Cairan penyari
Cairan penyari yang baik harus memenuhi kriteria berikut ini: murah dan mudah
diperoleh, stabil secara fisika dan kimia, bereaksi netral, tidak mudah menguap
dan tidak mudah terbakar, selektif yaitu hanya menarik zat yang berkhasiat yang
Cairan penyari yang biasa digunakan adalah air, eter atau campuran
etanol dan air (Anonim, 1979). Air atau etanol menjadi acuan cairan
pengekstraksi, karena banyak bahan tumbuhan larut dengan air atau etanol (Voigt,
1971).
b. Etanol
universal yang dapat menarik hampir sebagian besar senyawa kimia yang
Etanol 95% sangat efektif dalam menghasilkan jumlah bahan aktif yang
optimal, di mana bahan pengganggu hanya skala kecil yang turut ke dalam cairan
pengekstraksi, selain itu ekstrak etanol sulit ditumbuhi kapang dan kuman, dan
F. Uraian Ekstrak
1. Definisi ekstrak
Ekstrak adalah sediaan yang dapat berupa kering, kental, dan cair
kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang
zat berkhasiat yang terdapat di simplisia terdapat dalam bentuk yang mempunyai
2. Pengelompokan ekstrak
encer (extractum tenue) sediaan ini memiliki konsistensi seperti madu dan dapat
dituang, (b) ekstrak kental (EK) (extractum spissum) sediaan ini liat dalam
keadaan dingin dan tidak dapat dituang. EK mengandung air tidak lebih dari 30%,
24
(c) ekstrak kering (extractum siccum) memiliki konsistensi kering dan mudah
terbentuk suatu produk, yang mengandung air tidak lebih dari 5%, (d) Ekstrak cair
(extractum fluidum), memiliki konsistensi cair dan mudah dituang (Voigt, 1994).
3. Ekstrak kunyit
a. Pemerian :Bentuk: kental; warna: kuning; bau: khas; rasa: agak pahit.
yang masih tinggi dapat diubah menjadi bentuk EK yang konsistensinya liat dan
kandungan air yang lebih rendah dibandingkan dengan ekstrak cair. Proses
larutan pengekstraksi yang lebih cepat karena adanya tekanan dan suhu yang
diatur tidak terlalu tinggi untuk menjaga stabilitas senyawa (Voigt, 1994). Tujuan
(Anonim, 2000).
H. Uraian Spektrofotometri
radiasi elektromagnetik dengan materi. Materi dapat berupa atom, ion, atau
molekul, sedang variasi elektromagnetik merupakan salah satu jenis energi yang
ultraviolet (200 nm-400 nm) dan sinar tampak (400 nm-800 nm) akan
atau alat. Hukum Beer mungkin tidak cocok disebabkan oleh adanya perubahan
kadar zat yang dilarutkan, karena adanya asosiasi antar molekul zat atau antara
oleh sinar polikromatik, lebar cerah atau sinar menyimpang. Larutan yang
(Anonim, 1974).
I. Validasi Metode
2004).
1. Akurasi
kedekatan hasil analisis dengan kadar analit yang sebenarnya. Akurasi dinyatakan
2004).
2. Presisi
kesesuaian antara hasil uji individual, diukur melalui penyebaran hasil individual
dari rata –rata jika prosedur diterapkan secara berulang pada sampel – sampel
yang diambil dari campuran yang homogen (Harmita, 2004). Presisi biasanya
memiliki presisi yang baik apabila memiliki KV < 2% tetapi kriteria ini fleksibel
tergantung dari kondisi analit yang diperiksa, jumlah sampel dan kondisi
konsentrasi (jumlah) analit dalam sampel. Rentang adalah jarak antara level
terbawah dan teratas dari metode analisis yang telah dipakai untuk mendapatkan
presisi, linieritas, dan akurasi yang bisa diterima (Harmita, 2004). Persyaratan
data linearitas yang bisa diterima jika memenuhi nilai koefisien korelasi (r) > 0,99
4. Spesifisitas
zat tertentu saja secara cermat dan seksama dengan adanya komponen lain yang
senyawa sejenis, senyawa asing lainnya atau membawa placebo dengan hasil
LOD adalah jumlah terkecil analit dalam sampel yang dapat dideteksi
merupakan kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi
28
criteria akurasi dan presisi. LOD dan LOQ dapat dihitung secara statistik melalui
garis regresi linier dari kurva kalibrasi. Nilai pengukuran akan sama dengan nilai
sama dengan simpangan baku residual (Sy/x), sehingga LOD dan LOQ dapat
(Harmita, 2004).
J. Keterangan Empiris
(Rukmana, 2004). Kurkuminoid larut dalam alkohol dan asam asetat glasial, tetapi
tidak dapat larut dalam air dan eter (Windholz, 1981; Tarujaya, 1992).
sedangkan dengan alat Soxhlet dilakukan dengan cara mengalirkan cairan penyari
secara kontinyu sehingga pelarut menjadi selalu baru ketika melalui kantong
Dengan alat Soxhlet lebih unggul daripada maserasi. Dalam hal ini
keunggulan yang dapat diperoleh dari MES adalah jumlah pelarut yang jauh lebih
sedikit (Lenny, 2006; Voigt, 1971) dibandingkan dengan jumlah pelarut untuk
selain itu kadar kurkuminoid yang diperoleh dengan MES lebih banyak
29
dibandingkan MEM hal ini dikarenakan proses ekstraksi dengan dengan alat
MA kunyit memiliki berat jenis 0,941, rotasi optik pada suhu 20°C
adalah -190.18, indeks bias pada suhu 20°C adalah 1.5025. Warna MA kuning
dan mempunyai bau yang khas dan rasa pedas (Guenther, 1952). MA ditetapkan
dengan variasi metode, yaitu ekstraksi maserasi dan dengan alat Soxhlet.
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
1. Jenis penelitian
metode secara maserasi dan dengan alat Soxhlet sebagai perlakuan. Penelitian ini
2. Tahapan penelitian
b. Pembuatan Simplisia
c. Pembuatan ekstrak RK
d. Pengentalan ekstrak RK
30
31
1. Klasifikasi variabel
a. Variabel bebas
b. Variabel tergantung
Umur RK.
bila tanaman kunyit berasal dari satu daerah memiliki kandungan kurkuminoid
dan MA yang sama. Bila berbeda daerah asal, maka dapat mempengaruhi kadar
kurkuminoid dan MA hal ini dikarenakan adanya perbedaan iklim, suhu tanah,
kandungan tanah, keasaman tanah, jenis tanah, umur tanaman, dan faktor lainnya
yang dapat mempengaruhi kadar zat aktif tanaman kunyit (Mariastuty, 2002).
2. Definisi operasional
a. Maserasi
serbuk RK dengan pelarut etanol 95% sebanyak 1000 ml selama 3 x 24 jam dan
32
setiap 24 jam sekali diganti dengan pelarut etanol 95% sebanyak 1000 ml yang
masih baru.
baru membasahi sampel. Ekstraksi dihentikan apabila warna pelarut dalam tabung
telah dikentalkan dengan alat VRE sampai volum ekstrak cairnya seperlima dari
yang telah dikentalkan dengan alat VRE sampai volum ekstrak cairnya setengah
ekstraksi yakni maserasi dan dengan alat Soxhlet yang dihasilkan dari setiap bobot
sebagai % v/b.
1. Bahan utama yang digunakan adalah ekstrak kental RK yang diperoleh dari
2. Bahan lain yang digunakan antara lain yaitu Aquadest, aseton p.a. (Merck),
asam borat p.a.(Merck), asam oksalat p.a., etanol teknis 95% (Merck), dan
3000, pompa vacuum, timbangan, alat-alat gelas, labu alas bulat 1 L, alat Soxhlet,
E. Jalannya Penelitian
data berupa kadar kurkuminoid yang dihitung sebagai persen kurkumin dan kadar
minyak astsiri dari ekstrak RK dengan variasi MEM dan dengan alat Soxhlet,
a. Pengumpulan bahan
sebagai bahan utama karena merupakan bagian tanaman yang paling banyak
1) Sortasi basah
2) Pencucian
bersih untuk menghilangkan tanah dan pengotor lainnya yang melekat pada RK.
3) Perajangan
RK yang telah kering, dirajang dengan pisau stainless steel sehingga diperoleh
irisan tipis dengan ukuran kira-kira 0,5 cm agar rimpang cepat mengering bila
djemur.
4) Pengeringan
ditutupi kain hitam agar tidak merusak kandungan dalam RK yang bersifat
fotodegradasi, misalnya kurkuminoid. Irisan tipis dijemur dan tidak lupa untuk
5) Sortasi kering
seperti bagian-bagian tanaman asing lainnya yang tidak diinginkan yang masih
tertinggal.
Simplisia kunyit yang telah kering diserbuk dengan mesin penyerbuk dan
diayak dengan ayakan 8/14 sehingga didapatkan serbuk yang homogen. Serbuk
Bermawie, 2005).
36
1) Metode maserasi
setiap 24 jam sekali pelarut diganti dengan pelarut yang baru, prosedur per
harinya adalah bahan dalam alat gelas (Erlenmeyer) digojog dengan alat maserasi
yang telah diatur untuk menggojog selama 6 jam, kemudian alat dengan otomatis
berhenti, kemudian bahan didiamkan sampai mencapai waktu 24 jam. Setelah itu
hasil ekstraksi dimasukkan ke dalam wadah dengan cara disaring dengan kain
katun agar serbuk tidak ikut masuk ke dalam wadah tertentu. Setelah tiga kali
penggantian pelarut, hasil ekstraksi yang telah ditampung dalam wadah tertentu
biasanya larutan penyari dalam tabung sifon menjadi jernih bila telah mengalami
statistik.
37
Ekstrak cair yang diperoleh dari proses ekstraksi dengan metode maserasi
dan dengan alat Soxhlet dikentalkan dengan menggunakan VRE pada suhu 50 0C
labu alas bulat, kemudian ditambahkan aquadest 200 ml. Labu dipanaskan dengan
dibiarkan selama tidak kurang dari 15 menit, volume MA pada labu berskala
dimasukkan ke dalam labu ukur 100,0 ml, kemudian diencerkan dengan aseton
%.
Larutan intermediet dengan kadar 5 mg % diambil 0,8 ml; 1,4 ml; 2,0ml
dan dimasukkan ke dalam labu 25,0 ml, kemudian diencerkan dengan aseton
38
dan 0,4080 mg % ini kemudian dibaca serapannya pada panjang gelombang 400
4) Validasi metode
Larutan intermediet dengan kadar 5 mg % diambil 0,8 ml; 1,4 ml; 2,0ml
dengan pipet ukur dan dimasukkan ke dalam labu 25 ml, kemudian diencerkan
dengan aseton sampai tanda. Larutan kurkumin dengan konsentrasi 0,1632 mg%,
kurva baku.
(a) Akurasi
kedekatan hasil analisis dengan kadar analit yang sebenarnya. Akurasi dinyatakan
II, dan III dihitung rata –rata persen recoverynya. Demikian pula untuk 2
ratanya, hitung persen recovery rata –rata untuk tiga konsentrasi. Dari perhitungan
persen recovery rata –rata ini dapat diketahui apakah angka yang didapatkan
39
masuk rentang persen recovery yang dipersyaratkan atau tidak. Bila masuk
(b) Presisi
yang diperoleh. Prosedurnya hampir sama dengan akurasi, yaitu tiga konsentrasi
dengan tiga replikasi, namun dalam presisi yang dihitung adalah Simpangan
Deviasi (SD) masing–masing replikasi dan konsentrasi dibagi dengan harga rata –
yang baik untuk suatu metode. Bila angka presisi masuk dalam persyaratan maka
antara absorbansi dengan konsentrasi. Dalam hal ini, dihitung 5 konsentrasi yang
replikasi. Kemudian masing –masing replikasi dihitung secara regresi linier dan
didapatkan r. Bila nilai suatu r semakin mendekati 1, maka linieritas dan rentang
(d) Spesifisitas
LOD dan LOQ dihitung secara statistik melalui garis regresi linier, dari
absorbansi seharusnya pada konsentrasi baku yang tepat 0,1632 mg% dikurangi
Sb ( y/x) =
dihitung LOD dengan rumus 3Sb(y/x) dan LOQ dengan rumus 10 Sb(y/x).
Larutan intermediet dengan kadar 5 mg % diambil 0,8 ml; 1,0 ml; 1,4 ml;
1,6 ml; 2,0 ml dan dimasukkan ke dalam labu 25,0 ml, kemudian diencerkan
aseton. Ekstrak yang telah larut aseton dituang ke dalam labu ukur 50,0 ml
melalui kertas saring, diteruskan dengan penambahan aseton hingga tanda batas.
tanda. Diambil 1,0 ml dimasukkan dalam labu ukur 25,0 ml dan ditambahkan
aseton hingga tanda. Kemudian dibaca serapannya. Hitung kadar dalam % b/b
f. Analisa data
metode maserasi dan metode dengan alat Soxhlet adalah metode analisis two
sample t-test dengan taraf kepercayaan 95%. Analisis two sample T-test
merupakan suatu analisis untuk menguji perbedaan dari data dependent (sampel
Dimana :
t = t-test
s2p
= VariansiKadarKurku min oidMetodeMaserasi
n1 JumlahSampelMetodeMaserasi
s2p
= VariansiKadarKurku min oidMetodeSokletasi
n2 JumlahSampelMetodeSokletasi
Kriteria uji :
perbedaan yang bermakna antar pasangan kelompok percobaan. Jika t hitung <
dalam hal ini RK. Apakah RK tersebut setelah diidentifikasi benar- benar
1. Organoleptik
diidentifikasi merupakan rimpang tanaman kunyit karena bau, rasa, warna, dan
42
43
2. Makroskopis
bentuk rimpang sampel telah memenuhi kriteria pada RK pada MMI, yaitu bentuk
kepingan bulat, pada MMI disebutkan kepingan hampir bundar sampai bulat
memenuhi syarat diameter RK pada MMI, yaitu diameter 0,5 – 3 cm, dan tebal 1-
5 mm. Warna rimpang sampel telah sama dengan kriteria warna RK pada MMI.
MMI.
3. Mikroskopis
RK. Terlihat bahwa epidermis terdiri dari satu lapis sel hal ini telah sesuai dengan
Materia Medika Indonesia pada Gambar 4, yaitu, epidermis; satu lapis sel. Butir
pati yang terlihat berbentuk bulat telur sesuai dengan MMI, yaitu butir pati bentuk
lonjong atau bulat telur. Sel sekresi dikelilingi oleh parenkim korteks. Berkas
45
pembuluh atau berkas pengangkut sama – sama tersebar tidak beraturan pada
parenkim korteks. Hal ini menunjukkan bahwa rimpang yang diidentifikasi secara
B. Pembuatan Simplisia
RK (10 kg) yang digunakan dalam penelitian ini adalah rimpang utuh dan
masih segar yang dibeli dari Pasar Bringhardjo karena Pasar Bringhardjo
Pembelian rimpang dilakukan pada musim kemarau (18 Mei 2009) karena pada
(Anonim, 2008) sehingga dapat dipastikan kandungan kunyit yang dipakai pada
masih banyak terdapat bahan pengotor seperti tanah yang menempel pada
rimpang, kerikil, dan pasir yang menempel pada tanah yang menempel pada
rimpang, oleh karena itu dilakukan sortasi basah terlebih dahulu agar kotoran
2. Sortasi basah
kotoran yang melekat atau bahan – bahan asing yang dimaksud antara lain tanah,
46
kerikil, pasir, dan sebagainya sebagai langkah awal pengurangan jumlah mikroba.
dapat membersihkan RK hasil sortasi basah dengan baik. Air bersih kemudian
Setelah semua RK dibersihkan, air yang telah keruh diganti dengan air
bersih, hal ini dilakukan agar didapatkan RK yang bersih. Penggantian air bisa
dilakukan beberapa kali sampai akhirnya air pencucian RK tidak keruh setelah
membilas RK.
cara diangin–anginkan. Hal ini bertujuan agar rimpang mengering karena dengan
diangin -anginkan dapat mempercepat penguapan air. RK yang kering lebih sulit
ditempeli oleh partikel –partikel asing bila dibandingkan dengan RK yang masih
basah sehingga RK yang kering lebih awet atau lebih sulit membusuk karena
cepat.
47
mendapatkan simplisia agar tidak mudah rusak, sehingga dapat disimpan dalam
wadah yang lebih lama. Penurunan mutu atau perusakan simplisia dapat dihambat
dengan pengurangan kadar air dan penghentian reaksi enzimatik. Kandungan air
dalam simplisia pada kadar tertentu dapat merupakan media pertumbuhan kapang
langsung di bawah sinar matahari dengan cara ditutupi dengan kain hitam.
terkandung dalam RK. Kurkumin mudah terdegradasi oleh sinar ultraviolet, untuk
memberikan hasil simplisia dengan warna yang baik, pengeringan ditutup dengan
kain hitam hasilnya lebih baik (Bermawie et al, 2005). RK yang sedang dijemur
tersebut kemudian dibolak–balik secara berkala, hal ini bertujuan agar pemanasan
berlangsung bila kadar air dalam simplisia kurang dari 10% (Anonim, 1985).
48
6. Sortasi kering
kering. Tujuan sortasi kering untuk memisahkan benda – benda asing seperti
kerikil atau batu –batu kecil atau juga bagian dari simplisia selain rimpangnya
dari RK, bukan dari bagian lain tanaman kunyit (Nurfina, 1998; Oomah, 2000;
Rukmana, 1994).
7. Pembuatan serbuk
digunakan karena hasil ayakan dengan nomor tersebut merupakan ukuran optimal
butir serbuk kunyit untuk diekstraksi. Bila ukuran serbuk terlalu besar maka akan
sulit diekstraksi oleh pelarut karena semakin sempit luas permukaannya yang
bersentuhan dengan pelarut dan bila ukuran serbuk terlalu halus maka tidak
menguntungkan sebab pelarut akan sulit dipisahkan dari ampas serbuk yang
tertutup rapat untuk melindungi isi dari masuknya bahan padat dan mencegah
C. Cara Maserasi
penyari etanol 95% (Anonim, 2004). Digunakan etanol sebagai pelarut karena
etanol merupakan pelarut yang universal yang dapat menarik hampir sebagian
besar senyawa kimia yang terkandung di dalam herba (Runadi, D., 2007) dalam
kapang dan kuman sulit tumbuh, tidak beracun, netral, dan panas yang diperlukan
untuk pemekatan relatif lebih sedikit (Anonim, 1986), juga etanol tidak
dan menghambat kerja enzim (Voigt, 1994). Digunakan konsentrasi 95% karena
etanol 95% sangat efektif dalam menghasilkan jumlah bahan aktif yang optimal,
dalam hal ini kurkuminoid dan MA dimana bahan pengganggu hanya skala kecil
distribusi cairan penyari sehingga konsentrasi akan tetap terjaga karena adanya
derajat perbedaan konsentrasi antara larutan di dalam sel dengan larutan di luar sel
(Anonim, 1986).
50
sebanyak 100 gram serbuk menggunakan etanol 95% sebanyak 1000 ml untuk 24
jam, karena maserasi membutuhkan waktu 3 x 24 jam, maka total pelarut yang
diperlukan adalah 3000 ml untuk satu kali replikasi. (Anonim, 2004). Penggantian
pelarut dilakukan karena larutan telah menjadi jenuh (Anonim, 1986) ditandai
dengan pekatnya warna cairan ekstrak 24 jam pertama yaitu jingga tua sehingga
dilakukan penggantian pelarut yang baru untuk 24 jam kedua, dan 24 jam ketiga
penyaringan. Hal ini bertujuan agar sisa ampas serbuk RK tidak terikut ke dalam
maserat, sehingga didapatkan maserat yang murni bebas partikel serbuk. Bebas
serbuk karena yang akan kita gunakan pada tahap selanjutnya untuk penetapan
penyaringan.
saringan ditampung dalam satu wadah untuk per replikasi. Per replikasi agar
diketahui bobot EKnya setelah dilakukan penguapan dengan VRE. Dari ekstrak
hasil maserasi (EHM) ini diperoleh rata – rata bobotnya untuk 5 replikasi
sebanyak 14,7732 gram. Angka ini didapatkan dari membagi total bobot seluruh
dengan cairan penyari etanol 95%. 100 gram serbuk RK dimasukkan ke dalam
dialirkan dengan etanol 95% sebanyak dua sirkulasi (Harborne, 1987), cairan
penyari akan tertampung di dalam labu alas bulat. Rata –rata jumlah total cairan
Metode dengan alat Soxhlet dapat dikatakan lebih hemat dalam hal
jumlah pelarut (Lenny, 2006), hal ini dikarenakan prinsip alat ini yaitu pelarutnya
yang setelah menarik kurkuminoid, menguap karena pemanasan (tanpa ada zat
aktif yang ikut menguap) lalu mengalami kondensasi kemudian menetes kembali
sebagai etanol 95% yang baru dan membasahi kembali kertas saring yang berisi
serbuk RK, begitu seterusnya dan pelarutnya tidak pernah habis (Harborne, 1987;
Voigt, 1995). Suhu yang digunakan adalah 50°C karena dianggap optimal dalam
menguapkan pelarut dan tidak merusak senyawa aktif yang terkandung dalam
simplisia. Proses ekstraksi dihentikan apabila pelarut dalam tabung sifon yang
berisi kertas saring berisi serbuk RK telah bening secara visual, bila telah bening
berarti proses ekstraksi telah menempuh 20 -25 kali sirkulasi (Utami, 2006).
ditampung dalam suatu wadah yang terpisah. Hal ini dilakukan agar diketahui
masing –masing bobot ekstrak per replikasinya sehingga didapatkan rata–rata EK-
nya yaitu 17,3418 gram. Angka ini didapatkan dari membagi total bobot seluruh
52
Ekstrak cair yang telah didapatkan dari kedua jenis metode ekstraksi
Prinsip kerja dari VRE adalah memindahkan pelarut dari sampel dengan
berbentuk cair namun volumenya jauh lebih sedikit dari volume ekstrak cair awal.
Masih berupa ekstrak cair agar ekstrak lebih mudah dituang dan tidak lengket
dengan oven yang telah diatur suhunya yakni 40°C. selama ± 72 jam. Suhunya
jumlah volume ekstrak cair hasil VRE jauh lebih sedikit bila dibandingkan dengan
gram dan ekstrak kental dengan alat Soxhlet (EKS) 17,3418 gram. Beda jumlah
alas bulat, kemudian dengan pemanasan menguapkan etanol tanpa ada zat aktif
yang terikut menguap dan kemudian mengalami kondensasi menjadi tetesan yang
1994).
Kadar MA ini dihitung dalam persen v/b yang dilakukan dengan cara
destilasi air dengan alat Stahl karena merupakan metode isolasi MA yang paling
mengisolasi MA. Penggunaan destilasi air dengan alat Stahl selama 6 jam
bawah ini, yaitu dengan memasukkan volume MA yang dibaca pada buret
berskala pada rangkaian alat destilasi air kemudian dibagi dengan bobot ekstrak
MA%v / b VolumeMA(ml)
x100%
BobotEkstrakKunyit(gram)
Kadar MA yang didapatkan dari kedua metode ini telah sesuai dengan
standar Monografi Ekstrak Tumbuhan Obat Indonesia yaitu tidak kurang dari
maserasi tidak menggunakan panas ketika proses ekstraksi, sedangkan dengan alat
jadi MA pada metode dengan alat Soxhlet lebih banyak yang menguap.
Ekstrak kunyit
2,0182 2,0398 2,0734 2, 3372 2,0247
(gram)
Volume MA
0,3700 0,3500 0,3200 0,3600 0,3600
(gram)
Kadar ( v %) 20,3297 17,1585 15,4336 15,4030 17,7804
b
Dengan menggunakan uji statistik t-test maka dapat diketahui apakah ada
–test yaitu dengan derajat kepercayaan 95% yaitu 1,3594, dimana ttabel = (n1+n2)
= -1,859 sampai 1,859, jadi thitung < t tabel → 1,3594 < 1,859 maka Hnull diterima
yaitu kadar MA dari ekstrak RK dengan MEM dan MES tidak berbeda.
Dari hasil perhitungan statistik dapat diketahui bahwa tidak ada pengaruh
hasil sintesis, bukan hasil isolasi dari RK. Kurkuminoid total yang ditetapkan
maksimum sebesar 420 nm. Panjang gelombang teoritis kurkuminoid adalah 420
nm (Tonnesen et al, 1983; Anonim, 1993). Berarti hal ini telah sesuai dengan
gelombangnya ada pada 400 nm – 435 nm (Day, A. JR. dan Lunderwood A.,
1958).
2. Validasi metode
antaranya akurasi, presisi, linieritas dan rentang, spesifisitas, LOD dan LOQ
yang digunakan telah memenuhi syarat dan dapat memberikan hasil yang valid
dalam penetapan kadar suatu zat dalam sampel. Berikut adalah hasil dari
a. Akurasi
Semakin sedikit selisih antara keduanya maka akurasi metode analisis semakin
baik. Akurasi metode analisis dinyatakan dalam recovery. Akurasi yang baik
dengan kadar 10-4 - 10-5 % dinyatakan dalam recovery antara 80 - 110% (Harmita,
2004). 10-1 mg% artinya sama dengan 10-4 % b/v. Dari hasil percobaan yang telah
masuk dalam range 80 – 110% sehingga dapat dikatakan bahwa metode analisis
b. Presisi
Presisi suatu metode analisis untuk recovery 80 – 110% dikatakan baik jika nilai
presisi < 5,8% untuk keterulangannya (Harmita, 2004). Dipakai presisi karena
58
sampel diukur oleh analis yang sama pada kondisi yang sama dan dalam interval waktu
yang pendek. Semakin kecil KV yang diperoleh maka semakin baik presisi metode yang
digunakan. Berdasarkan pengukuran yang dilakukan diperoleh KV : Tabel VI. Hasil rata
0,1632 8,7259
0,2856 3,4643
0,4080 1,7118
yang baik meskipun ada satu replikasi yang melebihi syarat KV yaitu pada
konsentrasi 1, Namun secara keseluruhan sudah memiliki presisi yang baik untuk
dapat dilihat dari rata –rata KVnya yaitu 4,6340% berada di bawah 5,8%.
c. Linearitas
Linearitas dinyatakan dari nilai r yang diperoleh dari kurva baku. Semakin baik
nilai r maka linearitas semakin baik, dimana dengan adanya peningkatan kadar
dikatakan memiliki linearitas yang baik jika r>0,99 atau r 2 ≥ 0,997 (Harmita,
2004). Dari hasil yang diperoleh nilai r = 0,9997, jadi metode yang dipakai
d. Spesifisitas
senyawa tertentu saja secara akurat dan presisi dalam sampel yang terdiri dari
Apabila diperoleh hasil yang lebih kurang sama serta memiliki akurasi
dan presisi yang baik maka metode yang digunakan tersebut dapat dikatakan telah
memenuhi syarat, presisi dari metode tersebut baik. Hal ini bisa membuktikan
bahwa metode penetapan kadar kurkumin memiliki spesifisitas yang tinggi, hal ini
senyawa yang berwarna, yang memiliki panjang gelombang sinar tampak yaitu
diperoleh adalah sebesar 4, 3777 x 10-3 mg %. Kadar kurkumin agar masih dapat
metode analisis. Berdasarkan hasil pengukuran dan perhitungan nilai LOQ yang
-2
diperoleh 1, 4592 x 10 mg %. Maka kadar kurkumin agar masih mampu
Metode ini valid karena dengan LOD 4, 3777 x 10-2 mg %. masih dapat
-2
dideteksi oleh metode analisis dan dengan LOQ 1, 4592 x 10 mg % masih
pada kurkumin baku yang paling rendah adalah 0,1516 mg %. Angka ini jauh
lebih besar dari angka LOD dan LOQ yang telah didapat, maka pastilah metode
tersebut nilai absorbansi didapatkan nilai absorbansi yang berkisar antara 0,2 -0,8.
Pada rentang nilai tersebut memberikan linearitas yang tinggi sehingga dengan
adanya penambahan kadar maka akan diikuti oleh kenaikan nilai absorbansi yang
sebanding.
Dari seri konsentrasi baku diperoleh persamaan kurva baku yang dapat
digunakan untuk menghitung kadar kurkumin dalam sampel ekstrak RK. Berikut
0,9997.
maka linieritasnya akan semakin tinggi, garis yang terbentuk akan semakin linier.
sehingga data yang didapatkan lebih valid bila dibandingkan dengan r yang
penambahan konsentrasinya.
KURVA BAKU
0,8
0,7
0,6
ABSORBANSI
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
KONSENTRASI (mg%)
mendeteksi senyawa yang berwarna, yang berada pada panjang gelombang sinar
berwarna kuning yang ada pada panjang gelombang 420 nm, sehingga alat ini
visible. Gugus kromofor dan auksokrom tersebut yang mampu menyerap radiasi
analysis) (Joe et a., 2004; Chattopadhyay et al, 2004; Araujo et al, 2001). yang
gelombang ini berada di bawah panjang gelombang kurkuminoid yaitu 420 nm.
kurkuminoid yang mungkin kadarnya berbeda dari replikasi yang satu dengan
replikasi lainnya dalam satu metode dan juga untuk menjamin agar pada saat
pengambilan ekstrak RK, kadar kurkuminoid pada tiap bagiannya sama untuk
setiap metode.
kurkuminoid dianggap akan memberikan serapan pada range 0,2 -0,8 yang
bahwa cuplikan 50 mg memang berada pada range 0,2 -0,8 karena bisa saja
hasilnya berbeda dengan apa yang tertulis dalam MMI karena kondisi percobaan
dan menghasilkan absorbansi 0,6370, dan cuplikan EHS sebanyak 148,39 mg dan
dapat dipelajari bahwa EHM dengan bobot ekstrak 102,45 mg masih masuk dalam
range 0,2-0,8, sedangkan untuk EHS sebanyak 148,39 telah melewati range yang
ditetapkan. Maka benarlah bahwa dengan bobot ekstrak RK baik dari metode
rentang 0,2- 0,8. Untuk selanjutnya diambil ± 50 mg ekstrak dari setiap replikasi
ditimbang ± 50 mg dan dilarutkan dengan aseton sampai batas tanda labu ukur
50,0 ml dan langsung ditutup agar tidak menguap dan tidak ada partikel –partikel
kurkuminoid.
hingga tanda. Dari larutan 10 ml, diambil 1 ml dimasukkan ke dalam labu ukur
25,0 ml, ditambahkan aseton hingga tanda. Prosedur diulangi hingga 5 replikasi
replikasi karena dipercayai hasil yang diberikan akan valid. Menurut Anonim,
2005 untuk mendapatkan hasil yang valid, harus dilakukan minimum 9 kali
direplikasi sebanyak 3 kali. Atas dasar inilah maka hasil penelitian ini valid
65
yang memiliki r yang paling mendekati 1, yaitu 0,9997 yang artinya persamaan
ekstraksi baik maserasi maupun dengan alat Soxhlet telah memberikan hasil yang
Indonesia yaitu sebesar 33, 9%. Perhitungan kadar kurkuminoid terlampir pada
ekstraksi.
Hasil statistik dengan uji T diperoleh thitung yaitu -6,3702 dimana ttabel =
(n1+n2) = (-1,859) - 1,859, jadi thitung > t tabel → -6,3702 > -1,859 maka Hnull
ditolak, hal ini berarti kadar kurkuminoid dari ekstrak RK dengan MEM dan MES
berbeda signifikan. Dari uji T ini dapat diketahui bahwa ada pengaruh variasi
metode ekstraksi yang terjadi pada proses pembuatan ekstrak RK terhadap kadar
MES lebih baik daripada MEM. Dalam hal jumlah volume pelarut
misalnya, satu replikasi metode dengan alat Soxhlet hanya membutuhkan ± 544,6
pemanasan dan pelarut akan dapat dihemat karena terjadinya sirkulasi pelarut
67
pelarut yang selalu baru tanpa ada zat aktif yang terikut ketika proses penguapan,
Metode dengan alat Soxhlet ini mengekstraksi dengan baik serbuk kunyit
yang terbungkus dalam kertas saring, indikator baik yang dimaksud di sini adalah
bahwa warna pelarut yang telah melewati kertas saring telah menjadi bening
kembali seperti semula, ini artinya pigmen kunyit terekstraksi dengan baik
menggunakan metode ini. Warna kuning larutan hasil ekstraksi dengan alat
Soxhlet lebih pekat bila dibandingkan dengan metode maserasi, ini menunjukkan
kandungan zat aktifnya lebih tinggi bila dibandingkan dengan metode maserasi.
kekurangan dari metode ekstraksi ini (Anonim, 1986), dikarenakan serbuk RKnya
menjadi sama sehingga larutan menjadi jenuh (Dinda, 2008). Ketika jenuh, maka
pelarut harus diganti dengan pelarut yang baru. Namun penggantian harus dibatasi
karena penggunaan pelarut yang terlalu banyak tidak bersifat ekonomis. Meskipun
telah dilakukan penggantian pelarut untuk ketiga kalinya, kurkuminoid tetap saja
masih belum terekstrasi dengan baik. Hal ini dapat dilihat dari warna pelarut
A. Kesimpulan
maserasi dan dengan alat Soxhlet untuk kadar kurkuminoid dalam ekstrak
rimpang kunyit, dalam hal ini metode ekstraksi yang paling baik adalah
minyak atsiri antara metode ekstraksi maserasi dan dengan alat Soxhlet tidak
berbeda signifikan. Hal ini menunjukkan tidak ada pengaruh variasi metode
ekstraksi antara maserasi dan dengan alat Soxhlet untuk kadar minyak atsiri
dalam ekstrak rimpang kunyit. Kedua metode ekstraksi baik secara maserasi
B. Saran
penetapan kadar minyak atsiri agar didapatkan kadar minyak atsiri yang valid
68
DAFTAR PUSTAKA
Agnam, N., Samhoedi, H., Timmerman, H., Venie, U. A., Sugiyanto, Goot, H.,
1995, The Relationship Between Structure And Inhibition Of
Lipoxygenase Activity of Curcumin Derivatives In International
Symposium On Curcumin Pharmacochemistry ISCP, Yogyakarta
Anief, M., 1997, Ilmu Meracik Obat, Cetakan Ke 6, 169, Gajah Mada University
Press, Yogyakarta
Anonim, 1979, Materia Medika Indonesia, Jilid III, 63, Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta
Anonim, 1995, Farmakope Indonesia, edisi IV, 27, 63, 1134, 1158, Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta
69
70
Anonim, 2004, Monografi Ekstrak Tumbuhan Obat Indonesia, Volume 1, 51, 54,
122 – 123, Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia,
Jakarta
Anonim, 2005, The United States Pharmacopeia 28threvision, 2412- 2413, 2748-
2751, 2854- 2855, United States Pharmacopeial Convention Inc.,
Rockville
Anjariyah, S., 2003, Pengaruh Cara Ekstraksi (Maserasi Dan Perkolasi) Terhadap
Kadar Relatif Glikosida Asiatikosida Pada Ekstrak Pegagan (Centella
asiatica L. Urb), Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Bermawie, N., Rahardjo, M., Wahyuno, D., Ma’mun, 2005, Status Teknologi Dan
Panen Tanaman Kunyit Dan Temulawak Sebagai Penghasil Kurkumin,
85, 96, Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik, Bogor
Bermawie, N., 2006, Mengatasi Demam Berdarah Dengan Tanaman Obat, Vol.
28, 6- 8, Warta Penelitian Dan Pengembangan Pertanian, Balai
Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik, Bogor
Claus, E., 1959, Pharmacognosy, 6th Edition, Lea and Febiger, Philadelphia
71
Day, A. JR., Lunderwood A., 1958, Quantitative Analysis, 11, Prencite Hall, New
Jersey
Endah, K. N., 2002, Perbedaan Kadar Kurkumin Dalam Ekstrak Rimpang Kunyit
(Curcuma domestica Val.) Yang Dibuat Secara Maserasi Dan Perkolasi,
Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Kemala, S., Susiarto, Pribadi, E. R., Yuhono, J. T., Yusron, M., Mauludi, L.,
Rahardjo, M., Ferry, Y., Waskito, B., Nurhayati, H., 2000, Studi Serapan
Pasokan Dan Pemanfaatan Tanaman Obat di Indonesia. Laporan Teknis
Penelitian Bagian Proyek Penelitian Tanaman Rempah Dan Obat APBN
Tahun 2004, 2, 143 – 241, Balai Penelitian Tanaman Rempah Dan Obat,
Jakarta
Kohli, K., Ali, J., Ansari, M. J., Raheman, Z., 2005, Curcumin : A Natural Anti-
inflammatory Agent, 141 -142, In Indian Journal of Pharmacology,
Jamie Hamdard University, New Delhi
Lenny, S., 2006, Isolasi dan Uji Bioaktifitas Kandungan Kimia Utama Puding
Merah dengan Metoda Uji Brine Shrimp, Skripsi, 21, USU Repository,
Medan
Majeed, M., Badmaev, V., Shivakumar, U., Rajendran, P., 1995, Curcuminoids :
Antioxydant Phytonutrients, 32 – 63, Nutri Science Publisher Inc.,
Piscataway, New Jersey
72
Masuda, T., Isobe, J., Jitoe, A., Nakatani, N., 1992, Antioxidative Curcuminoids
From Rhizomes Of Curcuma Xanthorrhiza, Phytochemistry, 31 (10),
3645 -3647
Masuda, T., Jitoe, A., Isobe, J., Nakatani, N., Yonemari, S., 1993, Antioxidative
And Antiiflammatory Curcumin – Related Phenolics from Rhizomes Of
Curcuma domestica, Phytochemistry, 32 (6), 1557 – 1560
Mariastuty, E., 2002, Pengaruh Umur Tanaman Terhadap Kadar, Indeks Bias,
Dan Perbandingan Kadar Relatif Sineol Dan Borneol MA Rimpang
Lempuyang Gajah (Zingiber zerumbet (L.) J. E. Smith), 2, Skripsi,
Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Osawa, T., Sugiyama, Y., Inayoshi, M., Kawakishi, S., 1995, Antioxidative
Activity Of Tetrahydrocurcuminoids, Bioscience Biotechnology
Biochemistry, 59 (9), 1609 - 1612
Pan, M. H., Huang, T. M., Lin, J. K., 1999, Drug Metabolism Dispos, 27, 486
http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com, diakses tanggal 20 Desember
2009
Runadi, 2007, Isolasi Dan Identifikasi Alkaloid Dari Herba Komfrey (Symphytum
officinale L.), 9, Skripsi, Universitas Padjajaran, Bandung
73
Siddiqui, A. N., Cui, X., Wu, R., Dong, W., Zhou, M., Hu, M., Simms, H. H.,
Wang, P., 2006, The Anti – Inflammatory Effect Of Curcumin In An
Experimental Model Of Sepsis Is Medicated By Up Regulation Of
Peroxisome Proliferation - Activated Receptor Gamma, International
Care Magazine, Vol. 34, 1874- 1882,
Skoog, D., A., 1985, Principles of Instrumental Analysis, 3th edition, 183,
Saundees College Publishing, New York
Soedibjo, 1998, Alam Sumber Kesehatan Manfaat dan Kegunaan, 264 – 265,
Balai Pustaka, Jakarta
Sumiati T., Adyana I. K., 2004, Kunyit, Si Kuning yang Kaya Manfaat,
http://iirc.ipb.ac.id/jspui/bitstream/123456789/26968/2/2010mnr.pdf,
diakses tanggal 17 Juni 2010
Tampubolon, Oswald T., 1981, Tumbuhan Obat Bagi Pecinta Alam, Bhatara
Karya Aksara, Jakarta
Tarujaya, I., 1992, Daya Larut, Zat Warna Kurkuminoid Rimpang Temulawak
(Curcuma Xanthorrhiza Roxb.) terhadap Kalsium Batu Ginjal secara In
vitro, Skripsi, 16, Fakultas Farmasi, UGM, Yogyakarta
Tyler, V. E., Brady, L. R., Robbers, J. E., 1988, Pharmacognosy 9th Edition, 103
– 110, Lea and Febiger, Philadelphia
Van der Goot, H., 2002, The Chemistry And Qualitative Structure – Activity
Relationships Of Curcumin In Recent Development In Curcumin
Pharmacochemistry, Procedings of The International Symposium on
Curcumin Pharmacochemistry, 1995, Edited By Suwijyo Pramono,
Aditya Media, Yogyakarta
Voigt, 1994, Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, Edisi 5, 579 – 582, Gajah Mada
University Press, Yogyakarta
Wahyuni, A., Hardjono, Paskalina Y., 2004, Ekstraksi Kurkumin Dari Kunyit,
Prosiding Seminar Nasional Rekayasa Kimia Dan Proses 2004, ISSN:
1411 – 4216, Jurusan Teknik Kimia, Sekolah Tinggi Teknologi Nasional,
Yogyakarta
Willard, H.H, Merritte, Lynne, Dean, John, and Settle, Frank, 1988,
Instrumental Methods Of Analysis 7th ed, 466- 468, Wadsworth Publ.,
Belmont, CA.
Winarto, W. P., 2003, Khasiat Dan Manfaat Kunyit, 4-5, Agromedia Pustaka,
Jakarta
Windholz, M., 1981, The Merck Index : An Encyclopedia of Chemicals and Drug
Tenth Edition, 2681, Merck & Co, Inc., Rhmany, New York.
LAMPIRAN
75
76
Lampiran 2. Data bobot ekstrak hasil maserasi dan ekstraksi hasil dengan
alat Soxhlet
Tabel X. Data penimbangan ekstrak RK MEM
Ekstrak Kunyit Replikasi Replikasi Replikasi Replikasi Replikasi
I II III IV V
(gram) (gram) (gram) (gram) (gram)
Bobot Wadah+ Label 62,6033 49,0845 48,6689 49,4272 47,1010
Bobot Wadah + ekstrak 77,5270 63,3117 62,9198 64,3503 62,6420
Bobot Ekstrak 14,9237 14,2272 14,2509 14,9231 15,5410
Rata –Rata EK 14,7732 gram
a. Kadar MA KadarMAHasilDestilasi
MEM x100%
BobotEkstrakYangDidestilasi
KadarMAHasilDestilasi
b.Kadar MA MES x100%
BobotEkstrakYangDidestilasi
Diambil 25 ml dari larutan stok dan di add hingga 100 ml, sehingga diperoleh
konsentrasi :
C1 . V1 = C2 . V2
20,4 mg% . 25 ml = C2 . 100 ml
C2 = 5,1000 mg%
Konsentrasi I
C 1 . V1 = C2 . V2
5,1 mg% . 0,8 ml = C2 . 25 ml
C2 = 0, 1632 mg% = 1, 6320 x 10-4 % b/v
Konsentrasi II
C 1 . V1 = C2 . V2
5,1 mg% . 1,0 ml = C2 . 25 ml
C2 = 0,2040 mg% = 2,0400 x 10-4 % b/v
79
Konsentrasi III
C 1 . V1 = C2 . V2
5,1 mg% . 1,4 ml = C2 . 25 ml
C2 = 0,2856 mg% = 2,856 x 10-4 % b/v
Konsentrasi IV
C 1 . V1 = C2 . V2
5,1 mg% . 1,6 ml = C2 . 25 ml
C2 = 0,3264 mg% = 3,2640 x 10-4 % b/v
Konsentrasi V
C 1 . V1 = C2 . V2
5,1 mg% . 2,0 ml = C2 . 25 ml
C2 = 0,4080 mg% = 4,0800 x 10-4 % b/v
0,1516
Replikasi I : %recovery = x100% 92,8922%
0,1632
0,1528
Replikasi II %recovery = x100% 93,6274%
0,1632
0,1764
Replikasi III %recovery = x100% 108,0882%
0,1632
SD = 8,5691
Rata-rata = 98,2026%
KV = 8,7259%
Konsentrasi II 0,2856 mg %
0,2634
Replikasi I : %recovery = x100% 92,2269%
0,2856
0,2480
Replikasi II %recovery = x100% 86,8347%
0,2856
0,2636
Replikasi III %recovery = x100% 92,2969%
0,2856
SD = 3,1336
Rata-rata = 90,4528%
KV = 3,4643%
80
0,3758
Replikasi I : %recovery = x100% 92,1078%
0,4080
0,3728
Replikasi II %recovery = x100% 91,3725%
0,4080
0,3852
Replikasi III %recovery = x100% 94,4118%
0,4080
SD = 1,5857
Rata-rata = 92,6307%
KV = 1,7118%
Absorbansi pada replikasi I dan II untuk konsentrasi 0,1632 mg% berada di bawah
Y = 1,6907X + 0,0507
Contoh perhitungan y’ :
Y = 1,6907X + 0,0507
Y = 1,6907 (0,1632) + 0,0507
Y = 0,3266
Y = 1,6907x + 0,0507
0,6370 = 1,6907x + 0,0507
x = 0, 3468 mg%
82
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,3468 mg% . 25 ml
C2 = 8,6695 mg% = 8,6695 x 10-3 % b/v
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = 8,6695 mg% . 10 ml
C2 = 43,3480 mg%
43,3480mg 50mg
50mg x
2500mg
2
x = 57,6728 mg dilarutkan dalam 50 ml aseton
43,3480m
g
Y = 1,6907x + 0,0507
1,1160 = 1,6907x + 0,0507
x = 0,6618 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,6618 mg% . 25 ml
C2 = 16,5450 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = 16,5450 mg%. 10 ml
C2 = 82,7250 mg%
82,7250mg 50mg
50mg x
2500mg 2
x = 30,2206 mg dilarutkan dalam 50 ml aseton
82,7250mg
83
30,2206mg
Kadar kurkumin x100% 20,3656% b/b
= 148,39mg
1. MASERASI R I
Y = 1,6907x + 0,0507
0,3590 = 1,6907x + 0,0507
x = 0,1823 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,1823 mg% . 25 ml
C2 = 4, 5574 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = mg% . 10 ml
C2 = 22,7868 mg%
22,7868mg
Kadar kurkumin = x100% 42, 3740%
55,22mg
2. MASERASI R II
Y = 1,6907x + 0,0507
0,4000 = 1,6907x + 0,0507
x = 0,2066 mg%
84
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,2066 mg% . 25 ml
C2 = 5,1650 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = 5,1650 mg% . 10 ml
C2 = 25,8251 mg%
3. MASERASI R III
Y = 1,6907x + 0,0507
0,3850 = 1,6907x + 0,0507
x = 0,1977mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,1977mg% . 25 ml
C2 = 4,9432 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = 4,9432 mg% . 10 ml
C2 = 24,7161 mg%
4. MASERASI R IV
Y = 1,6907x + 0,0507
0, 4090 = 1,6907x + 0,0507
x = 0,2119 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,2119mg% . 25 ml
C2 = 5,2971mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = 5,2971 mg% . 10 ml
C2 = 26,4855 mg%
26,4855mg
Kadar kurkumin x100% 41,9059 %
= 58,98mg
5. MASERASI R V
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,1989 mg% . 25 ml
C2 = 4,9728 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = 15,3503 mg%. 10 ml
C2 = 24,8640 mg%
86
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,2433 mg% . 25 ml
C2 = 6,0818 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = 6,0818 mg% . 10 ml
C2 = 30,4090 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,2414 mg% . 25 ml
C2 = 6,0374 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = 6,0374 mg% . 10 ml
C2 = 30,1872 mg%
87
Y = 1,6907x + 0,0507
0,4450 = 1,6907x + 0,0507
x = 0,2332 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,2332 mg% . 25 ml
C2 = 5,8304 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = 5,8304 mg% . 10 ml
C2 = 29,1521 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,2344 mg% . 25 ml
C2 = 5,8606 mg%
88
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = 5,8606 mg% . 10 ml
C2 = 29,3028 mg%
29,3028mg
Kadar kurkumin = x100%
54,2645% 54,00mg
Y = 1,6907x + 0,0507
0,4467 = 1,6907x + 0,0507
x = 0,2342 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 1,0 ml = 0,2342 mg% . 25 ml
C2 = 5,8544 mg%
C1 . V1 = C2 . V2
C1 . 2,0 ml = 5,8544 mg% . 10 ml
C2 = 29,2718mg%
29,2718mg
Kadar kurkumin x100% 54,9705 %
= 53,25mg
89
sampel
a. Penetapan kadar MA
Statistik t-test
thitung < ttabel → 1,3594 < 1,859 maka Hnull diterima yaitu kadar MA dari ekstrak
(%)
45,3740 0,7914 56,5854 3,4939
Statistik t-test
thitung > ttabel → - 6,3702 < -1,859 maka Hnull ditolak yaitu kadar kurkuminoid dari
Lampiran 11. Ekstrak kental hasil maserasi dan ekstrak kental hasil alat
Soxhlet
Gambar 10. Ekstraksi hasil maserasi (Kanan) dan Ekstraksi hasil alat
Soxhlet (Kiri)
Gambar 26. Absorbansi kurva baku larutan standar kurkumin replikasi III
101