SLIDE 1

ASSALAMUALAIKUM DEK JADI DISINI AKU PENGEN NGESHARE APA YANG AKU TAU TTG SDS PAGE
SECARA TEORI DAN METODE. SAMA SAMA BELAJAR YA SOALNYA AKU JUGA BELOM PERNAH
NGELAKUIN HEHE

SLIDE 2

SECARA GARIS BESAR SDS PAGE SENDIRI MERUPAKAN SUATU METODE UNTUK MEMISAHKAN
PROTEIN YANG DIDASARKAN PADA PERGERAKAN PARTIKEL YANG BERMUATAN MELALUI MATRIKS
GEL DENGAN MENGGUNAKAN ARUS LISTRIK

KEPANJANGAN DARI SDS PAGE (SODIUM DODECYL SULFATE POLYACRYLAMIDE GEL

ELECTROPHORESIS) SDS ATAU SODIUM DODECYL SULFATE MERUPAKAN SALAH SATU BAHAN
BERUPA DETERJEN ANIONIK YANG MAMPU MELAPISI PROTEIN DAN MEMBERIKAN MUATAN
NEGATIF PADA SAMPEL PROTEIN. SDS MAMPU MEMECAH IKATAN DISULFIDA DENGAN CARA
MERUSAK STRUKTUR TIGA DIMENSI MENJADI PROTEIN YANG DAPAT BERMIGRASI DALAM GEL

PAGE YANG MERUPAKAN POLIAKRILAMID MERUPAKAN SUATU PROTEIN DARI MONOMER

AKRILAMID YANG AKAN DIGUNAKAN UNTUK MEDIA PROTEIN BERMIGRASI YANG DIBUAT DALAM
BENTUK GEL. POLIAKRILAMID INI MEMILIKI PORI-PORI KECIL SEHINGGA GERAKAN MOLEKUL NYA
LAMBAT. UNTUK SDS PAGE KITA MEMAKAI 2 JENIS GEL POLIAKRILAMID YANG PERTAMA RESOLVING
GEL DIMANA TEMPAT PROTEIN AKAN BERMIGRASI MENUJU ANODA DAN STACKING GEL
MERUPAKAN TEMPAT PELETAKAN SAMPEL . SEBENARNYA UNTUK ELEKTROFORESIS JUGA BISA
MEMAKAI GEL AGAROSE NAMUN GEL AGAROSE INI DIGUNAKAN UNTUK PEMISAHAN, IDENTIFIKASI
DAN PEMURNIAN FRAGMEN DNA. KALO YG KITA PAKE KAN PROTEIN JADI KITA MAKE GEL
POLIAKRILAMID

SLIDE 3

PRINSIP KERJA SDS PAGE YG PERTAMA MENDENATURASI PROTEIN OLEH SODIUM DODECYL SULFATE
YANG DILANJUTKAN DENGAN PEMISAHAN MOLEKUL BERDASARKAN BERAT MOLEKULNYA DENGAN
METODE ELEKTROFORESIS MENGGUNAKAN GEL POLIAKRILAMID YG KEDUA MAKROMOLEKUL YG
BERMUATAN LISTRIK DITEMPATKAN PADA MEDIA BERISI TENAAGA LIRSTRIK. MOLEKUL AKAN
BERMIGRASI MENUJU KUTUB POSITIF KE NEGATIF

SLIDE 4

KITA BAHAS SATU” YA MULAI GEL POLIAKRILAMID NYA. KOMPONEN PENTING YG DAPAT
MEMBENTUK GEL POLIAKRILAMID YG PERTAMA MONOMER AKRILAMID YA PASTI. BIS
AKRILAMIDBERFUNGSI UNTUK CROSSLINKING AGEN YG MEMBENTUK KISI-KISI POLIMER, TEMED
YAITU SEBAGAI KATALISATOR REAKSI POLIMERISASI AKRILAMID MENJADI GEL YG TERAKHIR
AMONIUM PERSULFAT ATAU APS YAITU BERFUNGSI SEBAGAI INISIATOR YG MENGAKTIFKAN
AKRILAMID AGAR BEREAKSI DENGAN MOLEKUL AKRILAMID LAIN SEHINGGA MEMBENTUK POLIMER
PANJANG. JADI DISINI ITU KITA MEMBAHAS TENTANG PEMBUATAN GEL YA. NAH POLIMERISASI IKU
SEBENERE APA SE ? POLIMERISASI ITU PROSES PEMBENTUKAN MONOMER MONOMER UNTUK
MENJADI BENTUK TIGA DIMENSI ( JARINGAN ATAU RANTAI POLIMER) DISINI DISEBUT GEL.
KONSENTRASI AKRILAMID SENDIRI MENENTUKAN UKURAN PORI-PORI GEL YANG TERBENTUK,
MAKIN RENDAH KONSENTRASI AKRILAMID YG DIGUNAKAN MAKIN BESAR UKURAN PORI GEL
NAMUN SEMAKIN LUNAK DAN MUDAH PATAH

SLIDE 5

KENAPA SE HARUS BERMUATAN NEGATIF ? SUPAYA PROTEIN KITA BISA BERMIGRASI DALAM GEL.
NAH PELAPISAN SDS KE PROTEIN KITA ITU MENYEBABKAN INTERAKSI NON KOVALEN TERGANGGU.
ANION SDS BERIKATAN DENGAN RANTAI UTAMA DENGAN RASIO SATU MOLEKUL SDS UNTUK DUA
RESIDU ASAM AMINO. SDS AKAN MENGHILANGKAN KONFORMASI DI ANTARA PROTEIN-PROTEIN
TERSEBUT DENGAN CARA MEMBERI MUATAN NEGATIF. AGAR SELURUH RANTAI TERPAPAR PADA
DETERJEN (SDS) MAKA DILAKUKAN PEMANASAN PADA SUHU 95 DRJT SELAMA 2-5 MENIT.

SLIDE 6

NAH INI BAHAN BAHAN BUAT SDS PAGE NYA YG PERTAMA SAMPEL BUFFER. DARI KOMPOSISI
PEMBUATAN SAMPEL BUFFER INI BISA DIPASTIKAN DIA DIGUNAKAN UNTUK MENGUBAH
KONFORMASI PROTEIN KITA JADI LINIER DAN MELAPISI PROTEIN KITA DENGAN SDS

KALO YG RUNNING GEL ITU JELAS UNTUK PEMBUATAN GEL NYA. KELIATAN KAN KITA BUTUH NYA
DIKIT BANGET DALAM SKALA MIKRO. ALHAMDULILLAH UDAH ADA TIP SAMA MIKRO PIPET NYA JADI
GAUSAH KHAWATIR. CUMA APLIKASI KE ALAT NYA AJA YG AGAK HARU HATI-HATI. SEBENER E
RUMUS E GA SELALU ITU DEK HARU TOTAL 15 ML GITU NGGA. CUMA AKU MAKE DARI BIO RAD NYA
BIAR EMANG DARI STANDAR NYA AJA KITA MAKE ALAT E KAN JUGA DARI BIORAD.

SLIDE 7

ANALISIS MENGGUNAKAN RESOLVING GEL DAN STACKING GEL. RESOLVING GEL ADALAH TEMPAT
DIMANA PROTEIN AKAN BERMIGRASI MENUJU ANODA SEDANGKAN STACKING GEL ADALAH
SEBAGAI GEL TEMPAT MELETAKKAN SAMPEL YG TERDAPAT SUMUR NYA. RESOLVING GEL DAN
STACKING GEL MEMILIKI KOMPOSISI YG SAMA, PERBEDAANNYA HANYA PADA KONSENTRASI GEL
POLIAKRILAMID DAN PH BUFFER YG DIGUNAKAN, KONSENTRASI RESOLVING GEL LEBIH BESAR
DARIPADA STACKING GEL.

SLIDE 8

YOUTUBE

SLIDE 9 YOUTUBE

TERUS TAUNYA ITU KERATIN APA BUKAN GIMANA KALO KITA UDAH TAU BERAT MOLEKULNYA ? YG
AKU DAPET DARI JURNAL YAA.. PROTEIN KERATIN PADA DASARNYA MEMILIKI BERAT MOLEKUL
ANTARA 1-11 Kda