Penggunaan minikit tanaman asli untuk ekstraksi RNA dari sampel rumput yang kami miliki secara

spesifik. Selama fase perkecambahan memulai dengan mentransfer 480 mikroliter buffer rlt menjadi 2
(transfer 480 mikroliter of buffer RLT into the 1,5 ml tube), kemudian memindahkan sebagian kecil
sampel jaringan ke dalam tabung. ( transfer a approximately 200 micrograms of plant tissue into the
tube) menghomogenkan sampel jaringan menggunakan waring. Lander atau homogenizer dalam hal
ini kita akan menggunakan blender bermotor. (homogenize the sample in the tube), setelah itu
menghasilkan asam nukleat, DNA dan RNA tanaman mudah didapat. Kemudian memasukkan dalam
QIA shredder column, kolom terdiri dari 2 bagian yaitu bagian atas berwarna ungu yang berisi katrid
dan bagian bawah yang ada pada dasarnya adalah koleksi untuk mentransfer potongan ke sampul atas.
(transfer the cell lysate into the upper column), untuk sentrifugasi diatur dengan 12.000 G selama 1
menit (centrifuge at 12,000 xg for 1 minute at 25 C) (add an equal volume of absolute (98%) ethanol
to the centrifugate), kemudian memindahkan hasil tersebut ke kolom, dengan pipet, sekarang RNA
seq dilengkapi dengan kolom merah (Rneasy Spin column), putar kolom potensial dan kolom ini
terdiri dari dua bagian yang lebih rendah. Bagian yang ata adalah membran yang mengandung
elemen, kemudian memasukkan campuran tersebut kedalamnya. (transfer the centrifugate into the
colmn), kemudian melakukan sentrifugasi tabung pada 13.000 G selama 15 second. (centrifuge at
13,000 xg for 15s), mentrasfer 500 mikroliter buffer rw1 (tranfer 500 microliter of buffer RW1 into
the column), sentrifugasi lagi selama 15 second pada 13,000 g (centrifuge at 13,000 xg for 15s),
ulangi sekali lagi langkah tersebut sehingga memiliki sisipan tabung koleksi yang baru, (transfer 500
microlitere buffer RPE) memberikan buffer RPE untuk pencucian yang mengandung ethanol,
kemudian sentrifugasi kembali selama 15 second pada 13,000 g (centrifuge at 13,000 xg for 15s),
prosedur ini dapat diulangi 2 kali, selanjutnya melibatkan pengeringan kolom untuk menghilangkan
sisa kelembaban atau alkohol yang dapat mengganggu proses hilir ironi (tranfer pink column to a
fresh collection tube) untuk melakukan ini, ganti tabung dalam koleksi baru untuk dipindahkan dan
putar kemudian disentrifugasi lagi, selama 2 menit 13,000 g (centrifuge at 13,000 xg for 2 minutes)
setelah sentrifuge dapat secara visual periksa bagian dalam tabung untuk mencari jejak pelarut pada
langkah selanjutnya pemulihan RNA untuk melakukan ini menggunakan tabung sentrifus steril baru,
(transfer the pink column to afresh sterile 1,5 ml collection tube) kasus ini ialah 1,5 ml memindahkan
kolom merah ke dalam tabung baru, hidrasi dapat dilakukan dengan menggunakann air bebas
arrhenius yan disuplai dengan kit, Anda dapat menambahkan hingga 50 mikroliter air arrhenius, ( add
50 microliters of Rnase free water of the center of the column) ketika mentransfer aie ke atas tabung
harus tidak menyentuh membran dikarenakan dapat menyebabkan gangguan pada selaput, setelah
hidrasi membran Anda perlu mempertahankan keadaan terhidarasi (let the column stand on the rack
for 2 minutes) selama 2 menit hidrasi kemudian inkubasi memutar selama satu menit (centrifuge at
13,000 xg for 1 minute), kunci RNA Anda tidak dapat dipulihkan dalam koleksi ini ke pemrosesan
hilir (RNA is now ready for quantification and downstream processes such as reverse transcription
into cDNA) RNA melibatkan pengujian kualitas menggunakan spektrofotometer diikuti oleh sintesis
DNA untuk pengurutan