IJBPAS, Mei, 2018, 7(5): 938-952

ISSN: 2277–4998

EFEK FITOKIMIA DAN TERATOLOGIS EKSTRAK AIR KUTIH BUAH

PILIHAN

ROBERT I. PALAMBERGO, RICH MILTON R. DULAY DAN EDEN S. DAVID*

Jurusan Biologi Sciences, College of Arts and Sciences, Central Luzon State
University, Science City of Munoz, Nueva Ecija, Filipina
*Penulis Koresponden, E-mail: eusdavid@yahoo.com

Menerima 20th Januari 2018; Direvisi 24th Februari 2018; Diterima23tanggal Maret 2018; Tersedia online 1st Mei
2018DOI: https://doi.org/10.31032/IJBPAS/2018/7.5.4452
ABSTRAK
Makalah ini melaporkan aktivitas fitokimia dan teratogenik ekstrak kulit buah Annona
muricata, Annona squamosa, dan Garcinia mangostana. Embrio ikan zebra (Danio rerio)
pada fase segmentasi dipapar berbagai konsentrasi dari ketiga ekstrak. Kematian, tingkat
detak jantung, daya tetas, pertumbuhan tertunda dan malformasi ikan zebra ditentukan.
Skrining fitokimia mengungkapkan bahwa tanin, saponin, flavonoid, terpenoid, dan
glikosida jantung hadir dalam A. squamosa, dan A. muricata. Namun, hanya flavonoid
yang tidak terdeteksi pada G. mangostana. Efek toksik dari ekstrak ditemukan tergantung
pada waktu pemaparan, dan konsentrasi ekstrak. Efek toksik yang paling umum dari
ketiga ekstrak tersebut adalah koagulasi. Tidak ada detak jantung yang diamati pada
embrio dalam konsentrasi ekstrak A. muricata dan G. mangostana 1% dan lebih tinggi
dan ekstrak A. squamosa konsentrasi 0,5% dan lebih tinggi. Embrio yang diberi ekstrak A.
muricata 0,1% memiliki daya tetas 33,33%, sedangkan embrio yang terpapar semua
konsentrasi ekstrak A. squamosa dan G. mangostana tidak tercatat. Embrio menunjukkan
pertumbuhan tertunda 100% ketika terpapar dalam 0,5% ekstrak A. muricata dan A.
squamosa, dan dalam 0,1% ekstrak G. mangostana. Embrio ujung ekor bengkok adalah
kelainan yang paling umum dan diamati pada 0,1% dari kedua ekstrak A. muricata dan A.
muricata.
 938
IJBPAS, Mei, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkk Artikel Penelitian

squamosa. Secara keseluruhan, ekstrak kulit dari ketiga buah tersebut mengandung
senyawa bioaktif dan menunjukkan efek toksik embrio dan teratogenik dalam
perkembangan embrio ikan zebra. Kata kunci: Annona muricata, Annona squamosa, Garcinia
mangostana, ikan zebra, fitokimia PENDAHULUAN
Obat nabati sebagai obat yang berharga untuk sebagai zat, dan akarnya adalahdrastis
beberapa penyakit telah digunakan selama pencahar. Ekstrak kulit buahnya mengandung
beberapa tahun terakhir. Tumbuhan alkaloid, flavonoid, fenol, saponin, steroid,
mengandung berbagai fitokimia seperti alkaloid, terpenoid, kumarin [3], dan asetogenin [4].
tanin, flavonoid, terpen, saponin, kumarin, Annona muricata Lin., di sisi lain, umumnya
glikosida, fenolat, minyak atsiri dan lain-lain dikenal sebagai guyabano di Filipina. Buahnya
yang pada dasarnya berkontribusi terhadap digunakan untuk mengobati disentri, sariawan,
efek biologisnya. Fitokimia telah menunjukkan demam, dan diabetes. Ini mengandung alkaloid,
peran penting dalam mencegah penyakit kronis flavonoid, karbohidrat, glikosida, saponin,
seperti kanker, diabetes, dan penyakit jantung terpenoid, dan protein [5]. Dengan komposisi
koroner [1]. Oleh karena itu, banyak produk penting dan aktivitas biologis yang signifikan
nabati telah dikembangkan dan tersedia tidak dari ketiga tanaman obat, efek toksik dan
hanya di pasar lokal tetapi juga di pasar teratogeniknya, jika ada, belum dipelajari, oleh
internasional. karena itu, penelitian ini dilakukan.
Garcinia mangostana Lin., umumnya dikenal Zebrafish (Danio rerio), anggota famili
sebagai manggis, adalah pohon berbuah yang Cyprinidae, digunakan dalam studi toksikologi
dibudidayakan di Filipina. Ini digunakan untuk dan teratologi terutama karena berbagai
mengobati demam, penyakit kulit, diare, keunggulannya seperti transparansi embrio,
diabetes, sakit perut dan penyakit usus. Hal ini fekunditas tinggi, mudah ditangani, dan murah
juga dilaporkan mengandung berbagai metabolit untuk dipelihara. Teratogen adalah zat yang
sekunder, seperti xanthone teroksigenasi dan dapat menyebabkan cacat pada perkembangan
terprenilasi [2]. Annona squamosa Lin., yang embrio normal tetapi belum tentu beracun pada
biasa disebut atis oleh banyak orang Filipina, orang dewasa [6]. Beberapa teratogen seperti
sudah menjadi bagian dari makanan manusia thalidomide [7] dan arsenic [8] saat ini
karena nilai nutrisi dan obatnya. Dalam digunakan sebagai obat antikanker.
pengobatan folkloric, buah mentah digunakan

939
IJBPAS, Mei, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo et al Artikel Penelitian
Di sini, kami menyelidiki komposisi fitokimia dan
efek toksik dan teratogenik dari ekstrak air
panas kulit buah tanaman obat tertentu dalam
mengembangkan embrio D. rerio.
BAHAN DAN METODE Sumber
Bahan Tanaman
Buah matang A. squamosa, A. muricata, dan G.
mangostana dibeli dari Science City of Munoz,
Nueva Ecija, Filipina. Buah yang masak dicuci
dan dikupas kulitnya, kemudian kulit buah
dipotong kecil-kecil dan dijemur selama 5 hari.
Buah-buahan kering dihaluskan menggunakan
blender dan bubuknya diekstraksi.
Skrining Fitokimia
Komponen bioaktif dari setiap kulit
ditentukan berdasarkan uji kimia
dijelaskan oleh Sofowora [9], Trease dan Evans
[10], dan Harborne [11]. Tiga ulangan disiapkan
di setiap tes. Hasil ditentukan berdasarkan
warna dan intensitas aksi dan dicatat ada atau
tidak terdeteksi.
Ekstraksi Air Panas
Bahan tanaman diekstraksi secara terpisah
melalui protokol ekstraksi air panas. Di setiap
kulit buah, 300 ml air suling ditambahkan ke 10
gram kulit buah bubuk dalam labu kapasitas
1000 ml. Campuran
ditempatkan ke dalam penangas air ketel ganda
pada 80 sampai 90 ° C selama 2 jam. Ekstrak
IJBPAS, Mei, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkk Artikel Penelitian
ditempatkan di cawan Petri untuk memeriksa
keseragaman dan kondisi normal
menggunakan mikroskop majemuk. Telur yang
disaring menggunakan kertas saring Whatman
No. 2 dan filtratnya diencerkan dengan air
embrio [12] untuk membuat 10 ml konsentrasi
yang berbeda (3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,1%, dan
0%, kontrol) yang berfungsi sebagai perlakuan.
Pemeliharaan dan Aklimatisasi Zebrafish
Sebuah akuarium yang terdiri dari air bersih dan
tidak diolah dengan aerasi terus menerus pada
26±1°C dipelihara untuk ikan zebra dewasa
betina dan jantan dengan rasio1:2, masing-
masing. Ikan kemudian diaklimatisasi selama
satu minggu sebelum pemijahan dan
pembuahan. Mereka diberi makan setiap hari
dengan serpihan diet protein tinggi. Kualitas air
buah yang tinggi tetap terjaga.
yang Pemijahan dan Pemupukan Zebrafish Zebrafish
dikurung dalam jaring plastik untuk mencegah
kanibalisme. Setelah itu, ikan zebra dijadikan
sasaran dalam kondisi gelap dengan
membungkus akuarium dengan kantong plastik
hitam untuk memungkinkan pemijahan. Setelah
12 jam dalam kondisi gelap, akuarium disinari
dengan kondisi terang selama 12 jam lagi.
Pemupukan terjadi 30 menit setelah lampu
dinyalakan. Dua belas jam setelah embrio
dibuahi disedot keluar dari akuarium
menggunakan selang dan dipindahkan ke
dalam gelas kimia. Embrio dibilas tiga kali
dengan air suling dan
940
tidak dibuahi atau dikoagulasi tidak
embrio dipertimbangkan.
Uji Teratogenisitas dan Toksisitas Dua ml dari
masing-masing konsentrasi perlakuan ekstrak perlakuan pada taraf signifikansi 5%. HASIL
dibagikan ke masing-masing sumur dari pelat DAN PEMBAHASAN
ELISA 12-sumur. Disiapkan rangkap tiga setiap Komponen Fitokimia Kulit Buah Sejumlah
konsentrasi perlakuan. Empat embrio pada fase fitokimia terdapat pada tumbuhan. Dalam
segmentasi dipindahkan ke masing-masing penelitian ini, lima fitokimia disaring
sumur yang berisi perlakuan yang berbeda. menggunakan analisis kualitatif di tiga sampel
Plate diinkubasi pada suhu 26°C±1°C. Tingkat dan hasilnya disajikan pada Tabel 1. Ternyata,
kematian, detak jantung, dan daya tetas dicatat. semua fitokimia yang disaring ada di A.
Aktivitas teratogenik diperiksa di bawah squamosa, dan A. muricata. Namun, flavonoid
perbesaran 40X menggunakan mikroskop tidak terdeteksi pada G. mangostana. Fitokimia
majemuk. Evaluasi titik akhir morfologi ikan ini bertanggung jawab untuk beberapa aktivitas
zebra yang diobati didasarkan pada parameter biologis. Hasil kualitatif ekstrak A. muricata, A.
yang ditetapkan oleh Schulte dan Nagel [13] squamosa dan G. mangostana ini sesuai
dan Nagel [14]: letal (koagulasi, ekor tidak dengan temuan dari penelitian yang dilaporkan
terlepas, tidak ada somit, dan tidak ada detak sebelumnya. Ekstrak etanol kulit buah A.
jantung), teratogenik (malformasi kepala dan muricata menunjukkan adanya saponin,
ekor, skoliosis , retardasi pertumbuhan, ekor terpenoid, tanin, flavonoid, dan glikosida jantung
kerdil, dan gerak terbatas), dan normal. [15]. Menggunakan petroleum eter, etil asetat,
Persentase pertumbuhan tertunda dan dan ekstraksi alkohol, A. squamosa mendeteksi
malformasi ditentukan. hampir semua fitokimia yang disaring [16].
Analisis Statistik Namun, dalam studi Kaladhar et al. [3], pericarp
Percobaandisusun dalam Rancangan Acak A. squamosa menunjukkan hasil positif
Lengkap (RAL). Analisis data menggunakan terpenoid. Selain itu, pericarp G. mangostana
analisis varians (ANOVA). Uji Jarak Berganda juga mengandung beberapa fitokimia. Ekstrak
Duncan kloroform dari pericarp menunjukkan hasil
(DMRT) dilakukan untuk membandingkan efek positif terpenoid dan flavonoid [17]. Namun,

941
IJBPAS, Mei, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkk Artikel Penelitian

Saponin dan tanin tidak terdeteksi dalam
ekstrak. Dalam studi Alvarez et al. [18], ekstrak
metanol dari pericarp menunjukkan hasil positif
tanin dan glikosida jantung. Namun, beberapa
fitokimia termasuk flavonoid terdeteksi dalam
ekstrak kloroform tetapi tidak dalam ekstrak air.
Perbedaan ini disebabkan oleh pelarut yang
digunakan dalam ekstraksi komponen bioaktif.
Tanin merupakan senyawa bioaktif yang secara
alami terdapat pada tumbuhan. Senyawa
bioaktif ini terdeteksi pada ketiga ekstrak yang
ditunjukkan dengan warna hijau kecoklatan atau
biru. Senyawa ini tersebar luas pada tumbuhan
tingkat tinggi dan anggota keluarga kimia
polifenol. Hal ini menunjukkan bahwa menunjukkan aktivitas saponin dalam aplikasi
keberadaan tanin dalam ekstrak cenderung obat seperti antikardiovaskular [26], dananti
bersifat asam karena adanya gugus fenolik dan aktivitasinflamasi [27]. Mereka juga dapat
mungkin bertanggung jawab atas aktivitas mengganggu replikasi DNA seluler dan
antimikrobanya [19]. Tanin dapat menghambat mencegah proliferasi sel kanker [28]. Senyawa
pertumbuhan jamur, khamir, bakteri, dan virus bioaktif lain yang terdapat pada tumbuhan
[20] serta memiliki aktivitas antikanker [21, 22]. adalah flavonoid dan keberadaannya dalam
Ketiga ekstrak tersebut menunjukkan adanya ekstrak tumbuhan dapat dibedakan dengan
saponin melalui pembentukan emulsi atau buih warna kuning. Warna ini diamati pada A.
yang stabil. Hal ini disebabkan campuran muricata dan A. squamosa. Senyawa alami ini
sapogenin non-polar danair memiliki beberapa aktivitas biologis seperti anti
senyawa rantai samping yang larut inflamasi, antimikroba, antikanker, antioksidan
dalammenghasilkan busa yang terlihat [23]. tinggi, dan aktivitas anti tumor [29, 30, 31, 32,
Saponin telah menunjukkan aktivitas biologis. 33].
Saponin yang diisolasi, Terpenoid juga hadir dalam tiga ekstrak dan
gymnemagenol dari Gymnema sylvestre dianggap sebagai salah satu dari banyak
menunjukkan aktivitas sitotoksik (73%) pada sel metabolit sekunder. Senyawa bioaktif ini
HeLa setelah 96 jam [24]. Saponin juga memiliki terdeteksi pada ketiga ekstrak tumbuhan
aktivitas antimikroba dan antijamur yang dengan menunjukkan warna coklat
signifikan terhadap bakteri dan jamur patogen kemerahan.Terpenoid menunjukkan potensi
[25]. Ada beberapa penelitian yang penggunaan dalam aktivitas farmakologi seperti
antivirus, antibakteri, antimalaria, antiinflamasi,

942
IJBPAS, Mei, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkk Artikel Penelitian

penghambatan sintesis kolesterol, dan aktivitas menghambat proliferasi sel dan memiliki
anti kanker [20]. aktivitas sitotoksik dengan menginduksi
Senyawa bioaktif terakhir yang disaring adalah apoptosis [35]. Oleh karena itu, keberadaan
glikosida jantung dan ini terdeteksi di semua senyawa bioaktif dalam tanaman menunjukkan
ekstrak. Pembentukan cincin coklat nilai obatnya. Temuan ini mendukung
menunjukkan adanya glikosida jantung. penggunaan tradisional tanaman dalam
Senyawa bioaktif ini telah digunakan dalam pengelolaan penyakit karena efek
terapi selama bertahun-tahun pada gagal farmakologisnya yang bervariasi.
jantung [34]. Selain itu, glikosida jantung dapat Efek Toksik Ekstrak Kulit Buah Penelitian ini
mengevaluasi efek toksik dan teratogenik dari
ketiga ekstrak kulit buah pada embrio ikan
zebra sebagai model hewan. Embrio diekspos
dalam berbagai konsentrasi perlakuan dan
diamati pada berbagai tahap perkembangan
dari fase segmentasi (12 jam), tahap faringula
(24-36 jam), dan masa penetasan (48-72 jam).
Untuk menentukan efek toksik, koagulasi dan
tidak adanya detak jantung diamati pada embrio
yang dirawat. Tabel 2 menyajikan persentase
kematian embrio setelah 12, 24, 36, dan 48 jam
paparan pada
konsentrasi yang berbeda dari ekstrak air panas
kulit buah A. muricata, A. squamosa, dan G.
mangostana. Efek toksik dari ekstrak ditemukan
tergantung pada waktu pemaparan dan
konsentrasi ekstrak. Efek toksik yang paling
umum dari ketiga ekstrak tersebut adalah
koagulasi (Gambar 1 ACE). Setelah 12 jam
pemaparan, 100% kematian diamati pada 2%
dan konsentrasi yang lebih tinggi dari A.
muricata dan G. mangostana. Namun,
meskipun mortalitas lebih rendah dari 100%,
IJBPAS, Mei, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkk Artikel Penelitian
terdeteksi dalam skrining fitokimia. Senyawa ini
memiliki dampak besar pada embrio yang
menyebabkan kematian sedini 12 jam dan
waktu paparan ekstrak yang lama. Wahyuni [36]
misalnya melaporkan bahwa senyawa saponin
dapat mengganggu perkembangan nyamuk
Aedes egypti dengan menyebabkan
terhambatnya perkembangan dan penurunan
berat badan. Peningkatan tingkat kematian
larva juga disebabkan oleh senyawa ini yang
embrio yang terpapar pada 2% A. squamosa
menunjukkan perbandingan statistik dengan
3%. Rupanya, kematian embrio telah meningkat
seiring waktu pemaparan yang berkepanjangan
dan ini terbukti diamati pada embrio pada
konsentrasi 1% dari semua ekstrak. Pada
paparan 48 jam pasca perawatan, kematian
100% diamati pada embrio yang terpapar
0,50% dan konsentrasi yang lebih tinggi dari A.
muricata dan A. squamosa dan pada mereka
yang pada konsentrasi 1,0% dan lebih tinggi
dari G. mangostana. Sebaliknya, tidak ada
kematian yang diamati pada mereka yang
diobati 0,10% dari semua ekstrak.
Jelas terlihat bahwa semua ekstrak pada 0,5%
dan konsentrasi yang lebih tinggi secara
signifikan mempengaruhi kelangsungan hidup
embrio D. rerio. Koagulasi adalah efek
mematikan yang paling diamati pada embrio
dari tiga ekstrak tumbuhan. Efek toksik dari
ekstrak tumbuhan ini dapat dikaitkan dengan
komponen bioaktifnya
943
dapat menyebabkan hemolisis pada pembuluh
darah yang menyebabkan kematian larva. Joy
dan Remani [37] mengisolasi senyawa baru dari
pericarp A. squamosa sebagai (-)–ent-kaur-16-
en-19-oic acid dan 16a,17-dihydroxy-ent-
kauran-19-oic acid menunjukkan sitotoksisitas
terhadap garis sel yang berbeda (sel kanker
serviks He La, sel DLA). Namun, akar A.
muricata menunjukkan efek sitotoksik yang
tinggi terhadap sel HL-60 dengan mengganggu
membran mitokondria untuk menahan fase efekproliferasi pada sel kanker dievaluasi efek
G0/G1 dan menghambat proliferasi sel pada toksiknya pada D. rerio. Embrio mati pada 250
konsentrasi yang berbeda setelah 24 jam g/mL dan 125 g/mL setelah 48 jam inkubasi.
pengobatan [38]. Demikian pula, aktivitas A. Jadi embrio pada 62,5 g/mL dan konsentrasi
muricata ini juga diamati pada embrio D. rerio yang lebih tinggi dianggap beracun dan
dengan menunjukkan keterbelakangan mematikan bagi embrio. Namun, tidak ada
pertumbuhan seiring waktu pemaparan yang malformasi yang diamati pada semua embrio
berkepanjangan. Acetogenins adalah senyawa yang bertahan [41]. Beberapa tanaman seperti
lain yang melimpah di antara keluarga Artocarpus heterophyllus dan Tinospora
Annonaceae. Ini telah dilaporkan memiliki sifat cordifolia juga menunjukkan efek toksik pada
antikanker. Acetogenin, squamostolide yang embrio D. rerio [42, 43].
diisolasi dari biji Detak Jantung Ikan Zebra
A. squamosa menunjukkan efek sitotoksik Detak jantung merupakan parameter penting
terhadapbel-7402 dan CNEin vitro2 garis sel untuk menentukan kelangsungan hidup embrio
tumor manusia[39]. Panaxanthone yang D. rerio yang sedang berkembang. Detak
diisolasi dari pericarp G. mangostana menekan jantung normal embrio D. rerio berkisar antara
volume tumor yang diobati dengan 120-180 per menit [44]. Tingkat detak jantung
panaxanthone dan juga secara signifikan semua embrio pada tahap faring dimonitor dan
menurunkan metastasis model tikus [40]. Selain hasilnya disajikan pada Tabel 3. Rupanya, tidak
itu, xanthone dari G. mangostana yang ada detak jantung yang diamati pada embrio
sebelumnya dilaporkan memilikianti dalam konsentrasi 1% dan lebih tinggi

944
IJBPAS, Mei, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkk Artikel Penelitian

ekstrak A. muricata dan G. mangostana dan kardiotoksik terhadap embrio D. rerio. Efek ini
0,5% dan konsentrasi ekstrak A. squamosa dapat dikaitkan dengan glikosida jantung yang
yang lebih tinggi karena koagulasi pada tahap ada dalam tiga ekstrak tumbuhan. Menurut
awal perkembangan embrio. Nilai nol detak Poindexter et al. [45] seperti yang dikutip oleh
jantung berarti tidak ada detak jantung visual Jose et al. [46], glikosida jantung ditemukan
selama periode pengamatan yang menunjukkan menghambat enzim Na-K ATPase miokard
pertumbuhan tertunda. Namun, hanya embrio yang menyebabkan peningkatan kekuatan
pada 0,1% ekstrak A. muricata dan A. kontraksi jantung yang dapat menyebabkan
squamosa yang menunjukkan detak jantung henti jantung.
yang jelas tetapi lebih rendah daripada mereka Daya Tetas Ikan Zebra Salah
yang kontrol. Hasil ini menunjukkan bahwa satu indikasi keberhasilan proses
ketiga ekstrak tumbuhan tersebut bersifat
perkembangan adalah penetasan. Persentase terbatasnya pergerakan embrio yang dirawat,
rata-rata daya tetas embrio yang terpapar sehingga tidak dapat memecahkan korion.
berbagai konsentrasi ekstrak A. muricata, A. Efek Teratogenik Ekstrak Kulit Buah
squamosa, dan G. mangostana juga disajikan Pertumbuhan yang tertunda adalah salah satu
pada Tabel 3. Embrio kontrol menyelesaikan efek teratogenik yang berbeda dari ketiga
periode penetasannya pada 48 jam setelah ekstrak. Persentase pertumbuhan tertunda
paparan perlakuan. 0,1% embrio yang diberi embrio yang terpapar dalam berbagai
ekstrak A. muricata menunjukkan persentase konsentrasi ekstrak setelah 48 jam diamati dan
daya tetas rata-rata 33,33% yang secara hasilnya ditunjukkan pada Tabel 3. Embrio
signifikan lebih rendah menunjukkan pertumbuhan tertunda 100% saat
daripada embrio kontrol. Tidak ada penetasan terpapar dalam konsentrasi 0,5% dan lebih
tercatat pada mereka yang terkena semua tinggi dari A. muricata dan A. squamosa
konsentrasi ekstrak A. squamosa dan G. ekstrak, dan dalam konsentrasi 0,1% dan lebih
mangostana. Ini karena koagulasi dini dan tinggi dari ekstrak G. mangostana. Konsentrasi
pertumbuhan embrio yang tertunda. Penundaan 0,1% dari dua ekstrak pertama mencatat
proses penetasan dapat dikaitkan dengan persentase pertumbuhan tertunda yang rendah
penghambatan pelepasan korionase, enzim tetapi ditemukan secara statistik sebanding
yang bertanggung jawab untuk penetasan [47] dengan yang ada di kontrol. Selain
oleh ekstrak tumbuhan. Alasan lain pertumbuhan yang tertunda, kelainan morfologi
keterlambatan atau kegagalan menetas adalah yang berbeda juga diamati, dan yang paling
karena kelainan yang mengakibatkan umum

945
IJBPAS, Mei 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkkartikel penelitian

Kelainanadalah malformasi ekor (Gambar 1). oleh keterlambatan pertumbuhan yang sangat
Embrio ujung ekor bengkok diamati pada 0,1% jelas. Embrio
dari kedua ekstrak A. muricata dan A. ini masih dalam fase segmentasi lanjut (Gambar
squamosa. Kelainan ini kemungkinan 1F) selama periode pengamatan terakhir.
disebabkan oleh gangguan perkembangan Dalam karya sebelumnya Noordin et al. [41],
embrio D. rerio. Namun, embrio yang diberi embrio ikan zebra yang selamat tidak
ekstrak G. mangostana tidak menunjukkan menunjukkan malformasi apapun ketika terkena
malformasi apapun, yang mungkin disebabkan xanthone dari pericarp G. mangostana.

Tabel 1: Komposisi fitokimia kulit buah A. muricata, A. squamosa, dan G. mangostana Fitokimia
A.muricata A.squamosa G.mangostana Tannin Hadir Hadir Hadir Saponin Hadir Hadir Hadir Flavonoid
Hadir Hadir Tidak terdeteksi Terpenoid Hadir Hadir Hadir
 Glikosida Jantung Hadir Saat Ini

Tabel 2: Mortalitas D. rerioembryo setelah 12, 24, 36, dan 48 jam pemaparan pada konsentrasi yang berbeda
dari ekstrak kulit buah A. muricata, A. squamosa, dan G. mangostana
Ekstrak Kulit Buah (%) Mortalitas (%)
12 jam 24 jam 36 jam 48 jam
A. muricata
3.00 100.00a 100.00a 100.00a 100.00a 2.00 100.00a 100.00a 100.00a 100.00a 1.00 75.00a 100,00 100,00
100,00
0,50 0,00b 8,25b 16,75b 100,00a 0,10 0,00b 0,00b 0,00bc 0,00b
0,00 0,00b 0,00b 0,00bc 0,00b A. squamosa
3.00 100.00a 100.00a 100,00 100,00 2.00 91,75a 100,00 100,00 100,00 1,00 58,25b 83.25ab 100.00a 100.00a
0,50 0,00c 0,00c 100,00 100,00 0,10 0,00c 0,00c 0,00b 0,00b 0,00 0,00c 0,00c 0,00b 0,00b G.manggis
3.00 100.00a 100.00a 100,00 100,00 2.00 100.00a 100,00 100,00 100,00 1,00 0,00b 41,75b 100,00a 100,00 0,50
0,00b 0,00c 8,25b 75,00ab 0,10 0,00b 0,00c 0,00b 0,00c
0,00 0,00b 0,00c 0,00b 0,00c
Nilai dinyatakan sebagai rata-rata tiga ulangan setiap konsentrasi ekstrak. Berarti dengan huruf superscript
yang sama tidak berbeda nyata pada P<0,05 dengan menggunakan DMRT.

946
IJBPAS, Mei, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkk Artikel Penelitian

Tabel 3: Detak jantung, persentase daya tetas, dan persentase keterlambatan pertumbuhanD.
rerioembriopada konsentrasi berbeda dari tiga ekstrak kulit buah
Ekstrak Kulit Buah (%) Tingkat Detak Jantung
Daya Tetas
Pertumbuhan Tertunda (%)
(per menit)
(%)
A. muricata
3.0 NBH 0.00c 100.00untuk2.0 NBH 0.00c 100,00per1,0 NBH 0,00c 100,00a0,5 0,00b0,00c
100.00a0.1 127.00a33.33b8.33b
0.0 137.67a100.00a0.00b
A. squamosa
3.0 NBH 0.00b100.00a
2.0 NBH 0.00b100.00a
1.0 NBH 0.00b100.00a
0.5 NBH 0.00b100.00a
0.1 106.67b0.00b16.67b
0.0 145.33a100.00a0.00b
G. mangostana
3.0 NBH 0.00b100.00a
2.0 NBH 0.00b100.00a
1.0 NBH 0.00b100.00a
0.5 0.00b0.00b100.00a
0.1 0.00b0.00b100.00a
0.0 150.67a100.00a 0,00b
Nilai dinyatakan sebagai rata-rata tiga ulangan setiap konsentrasi ekstrak. Berarti dengan huruf
superscript yang sama tidak berbeda nyata pada P<0,05 dengan menggunakan DMRT. NBH; tidak ada
detak jantung karena koagulasi pada tahap awal perkembangan embrio. Nilai nol pada kolom denyut
jantung berarti tidak ada denyut jantung visual selama periode pengamatan yang menunjukkan
 pertumbuhan yang tertunda.

ABCD

EF
Gambar 1.Efek toksik dan teratogenik dari ketiga
ekstrak kulit buah: Embrio terkoagulasi (ACE) yang terpapar pada konsentrasi yang lebih tinggi dari ketiga
ekstrak; (BD) embrio ujung ekor bengkok yang diberi perlakuan dengan 0,1%A. muricata dan
ekstrakA. squamosa; dan (F) pertumbuhan embrio tertunda pada 0,1% ekstrak G. mangostana

947
IJBPAS, Mei, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkk Artikel PenelitianBerdasarkan

KESIMPULAN Farmakognosi dan Fitokimia, 2013, ID

data, ekstrak ketiga kulit buah mengandung
fitokimia dengan sifat farmakologis
berharga dan menunjukkan aktivitas toksik dan
teratogenik dalam perkembangan embrio ikan
zebra. Pertumbuhan yang terkoagulasi dan
tertunda adalah efek toksik dan teratogenik
yang paling umum dari ketiga ekstrak, masing-
masing.
REFERENSI
[1] Saxena M, Saxena J, Nema R, Singh D,
Gupta A. Fitokimia tanaman obat. Jurnal
Artikel 2668735-5.
yang [2] Akao Y, Nakagawa Y, Iinuma M, Gifu YN.
Efek anti kanker xanthone dari kulit buah
manggis. Jurnal Internasional Ilmu
Molekuler, 2008, 9, 355-370.
[3] Kaladhar DSVGK, Duddukuri GR, Yarla NS.
Analisis fitokimia, aktivitas antioksidan dan
antimikroba dari ekstrak mentah kulit buah
mentah Annona squamosa Linn. Jurnal
Dunia Farmasi dan Ilmu Farmasi, 2014, 4(1),
1373-1380.
[4] Jaramillo MC, Arango GJ, Gonzalez MC,
Robledo SM, Velez ID. Sitotoksisitas dan
aktivitas antileishmanial Annona
muricata pericarp. Fitoterapia, 2000, 183-
186.
[5] Solomon-Kebijaksanaan GO, Ugoh SC,
Mohammed B. Skrining fitokimia dan
aktivitas antimikroba ekstrak daun Annona
muricata (L). American Journal of Biological,
Chemical and Pharmaceutical Sciences,
2014, 2(1),
01-07. [6] Mayshar Y, Yanuka O. Teratogen
penyaringan menggunakan pembuatan profil
transkriptom membedakan batang embrio
manusia sel. Jurnal Seluler dan Molekuler
Kedokteran, 2011, 15(6), 1393-1401.
IJBPAS, Mei, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkk Artikel Penelitian
[12] Thomas, J., 2000. The Zebrafish Book,
edisi ke-4, University of Oregon. Diakses
pada 2 Juli
2011darihttp://www.swarthmore.edu/Na
tSci/sgilber1/DB_lab/Fish/fish_solutions.
html.
[13] Schulte C, Nagel R. Pengujian toksisitas
akut pada embrio ikan zebra, Brachydanio
rerio sebagai alternatif untuk uji ikan akut -
hasil awal. ATLA, 1994, 22, 12-19.
[14] Nagel R. DarT: Uji embrio dengan ikan
zebra (Danio rerio) - model umum dalam
ekotoksikologi dan toksikologi. ALTEX,
2002, 19, 10-12.
[15] Ojezele OJ, Ojezele MO, Adeosun AM.
[7] Teo SK, Stirling DI, Zeldis JB. Thalidomide
sebagai agen terapi baru: kegunaan baru
untuk produk lama. Obat Penemuan Hari
Ini, 2005, 10, 107-114.
[8] Zhu J, Chen Z. Seberapa akut promyelocytic
leukemia menghidupkan kembali arsenik?.
Alam Ulasan Kanker, 2002, 2, 705-713.
[9] Sofowara A. Tanaman obat dan pengobatan
tradisional di Afrika. Spectrum books, Ltd.,
Ibadan, Nigeria, 1993, 289.
[10] Trease GE, Evans WC. Farmakognosi.
11th edisi. Braillier Tiride Land Penerbit
Macmillan. 1989.
[11] Harbourne JB. Buku teks metode fitokimia,
Champman and Hall Ltd, London.1973, 110-
113.
948
Perbandingan aktivitas fitokimia dan
antioksidan ekstrak air dan etanol daun, biji,
dan buah Annona muricata Linn. Kemajuan
dalam Penelitian Biologi, 2016, (4), 230-235.
[16] Sharma A, Sharmab AK, Chanda T,
Khardiyaa M, Agarwal S. 2013. Skrining
fitokimia awal ekstrak kulit buah Annona
squamosa Linn. Penelitian Farmasi Saat Ini,
2013, 4(1), 1038–1043.
[17] Sivakumari K, Manimekalai I, Ashok K,
Rajesh S. Profil fitokimia buah manggis,
Garcinia mangostana. Jurnal Dunia Farmasi
dan
Ilmu Farmasi, 2016, 5(2), 221-252.
[18] Alvarez MR, Bueno PR, Cruz RO, Francis
 RM, Vallesfin J, Heralde F. Analisis fitokimia
dan aktivitas penghambatan amilase saliva
dari ekstrak daun pepaya Carica dan ekstrak
pericarp Garcinia mangostana dan fraksi
yang dimurnikan sebagian. Jurnal
Internasional Penelitian Farmasi dan
Fitofarmakalogi, 2016, 6(1), 34-40.
[19] Njoku O, Obi C. Konstituen fitokimia dari
beberapa tanaman obat terpilih. Jurnal
Kimia Murni dan Terapan Afrika, 2009,
3(11), 228-233.
IJBPAS, Mei, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkk Artikel Penelitian
[22] Wang CC, Chen LG, Yang LL. Cuphiin D1,
tanin terhidrolisis makrosiklik menginduksi
apoptosis pada garis sel HL-60. Surat
Kanker, 2000, 149, 77-83.
[23] Zulkifli K, Abdullah N, Abdullah A, Aziman
N, Kamarudin W. Fitokimia penyaringan
dan aktivitas hidrofilik dan antioksidan
lipofilik dari beberapabuah p.belut Jurnal
Malaysia Ilmu Analitis, 2012, 16(3), 309–
317.
[24] Khanna VG, Kannabiran K. Aktivitas
sitotoksik antikanker saponin diisolasi dari
daun Gymnema sylvestre dan Eclipta
prostrata pada sel HeLa. Jurnal
Internasional Farmasi Hijau, 2009, 3(3), 227-
229.
[25] Khanna VG, Kannabiran K. Aktivitas
antimikroba fraksi saponin daun Gymnema
sylvestre dan Eclipta prostrata. Jurnal Dunia
Mikrobiologi dan Bioteknologi, 2008, 24, 27-
[20] Visweswari G, Christopher R, Rajendra W.
Skrining fitokimia aktif metabolit sekunder
yang ada di Withania somnifera root: peran
dalam obat tradisional. Internasional Jurnal
Ilmu Farmasi dan Penelitian, 2013, 4(7),
2770-2776.
[21] Gonzalez-Sarria A, Yuan T, Seeram NP.
Studi hubungan sitotoksisitas dan aktivitas
struktur maplexin AI, galotanin dari maple
merah (Acer rubrum). Toksikologi Kimia
Pangan, 2012, 50,1369-1376.
949
37.
[26] Moghimipour E, Handali S. Saponin: sifat,
metode evaluasi dan aplikasi. Penelitian &
Review Tahunan dalam Biologi, 2015, 5(3),
207-220.
[27] Patel PP, Patil PH. Aktivitas antiinflamasi
fraksi kaya saponin yang diisolasi dari daun
Thespesia populnea (L.). Jurnal
Internasional Ilmu Biomedis dan
Farmasi. 2012, 3(4), 1526-1532.
[28] Yildirim I, Kutlu T. Agen antikanker:
saponin dan tanin. Jurnal Internasional
Kimia Biologi, 2015, 9(6), 332-340.
[29] Aiyelaagbe OO, Osamudiamen PM.
Skrining fitokimia untuk senyawa aktif dalam
daun Mangifera indica dari Ibadan, Negara
Bagian Oyo. Penelitian Ilmu Tanaman,
2009, 2(1), 11-13.
[30] Cushnie TP, Domba AJ. antimikroba
aktivitas flavonoid. Internasional Jurnal
 Agen Antimikroba, 2005, (5), 343-56.
[31] Chahar MK, Sharma N, Dobhal MP, Joshi
YC. Flavonoid: Sumber serbaguna obat
antikanker. Ulasan Farmakognosi, 2011,
5(9), 1-12.
[32] Pietta PG. Flavonoid sebagai antioksidan.
Jurnal Produk Alami, 2000, 63, 1035-1042.
IJBPAS, Mei 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo dkk Artikel Penelitian
Agen Kanker dalam Kimia Obat, 2013,
13(7), 1069-1087.
[35] Rosenkranz V, Wink M. Induksi apoptosis
oleh alkaloid, asam amino non-protein, dan
glikosida jantung dalam sel HL-60
promyelotic manusia. Zeitschrift fur
Naturforschung C, 2007, 62, 1-6.
[36] Wahyuni D. Bioinsektisida baru butiran
toksin dari ekstrak pepaya (Carica papaya)
biji dan daun dimodifikasi terhadap larva
Aedes aegypti. procedia Ilmu Lingkungan,
2015, 23, 323– 328.
[37] Joy B, Remani P. Konstituen antitumor dari
pericarp buah Annona squamosa. Penelitian
Kimia Medis, 2008, 17, 345–355.
[38] Pieme CA, Kumar SG, Dongmo MS,
Moukette BM, Boyom FF, Ngogang JY,
Saxena AK. Aktivitas antiproliferatif dan
induksi apoptosis oleh ekstrak Annonna
muricata (Annonaceae) pada sel kanker
manusia. Pengobatan Komplementer dan
Alternatif, 2014, 14, 516-525.
[39] Xie HH, Wei XY, Wang JD, Liu MF, Yang
[33] Kanadaswami C, Lee T, Lee PH, Hwang
JJ, Ke FC, Huang YT, Lee MT. Aktivitas
antitumor flavonoid. In vivo, 2005, (19), 895-
910.
[34] Babula P, Masarik M, Adam V, Provaznik
PI, Kize R. Dari Na+/K+- ATPase dan glikosida
jantung hingga sitotoksisitas dan pengobatan
kanker. Anti-
950
RZ. Sebuah acetogenin sitotoksik baru from
the seeds of Annona squamosa. Chinese
Chemical Letters, 2003, 14(6), 588–590.
[40] Shibata MA, Matoba Y, Tosa H, Iinuma M.
Effects of mangosteen pericarp
extracts against mammary cancer.
Alternative and Integrative Medicine, 2013,
2(8), 1-5.
[41] Noordin MAM, Noor MM, Kamaruddin
WMAW, Lazim AZ, Fazry S. Toxicity test of
xanthone from mangosteen on zebrafish
embryos. 2016, Article ID 020014-1.
[42] Romagosa CMR, David ES, Dulay RMR.
Embryo-toxic and teratogenic effects of
Tinospora cordifolia leaves and bark extracts
in zebrafish (Daniorerio) embryos. Asian
Journal of Plant Science and Research,
2016, 6(2), 37-41.
[43] Meman MAC, Dulay RMR, David ES.
Teratogenic effects of lyophilized water
extracts of leaves and stem-bark of
Artocarpus heterophyllus in zebrafish (Danio
rerio) Embryo. International Journal of
 Biology, Pharmacy and Allied Sciences, [45] Poindexter BW, Feng A, Dasgupta A, Bick
2016, 5(6), 1351-1360. R. Oleandrin produces changes in
[44] Mably JD, Childs SD. Developmental intracellular calcium levels in isolated
physiology of the zebrafish cardiovascular cardiomyocytes, a real-time fluorescence
system. Fish Physiology, 2010, 10, 1546- imaging study comparing adult to neonatal
5098. cardiomyocytes. Jurnal dari

951
IJBPAS, May, 2018, 7(5)
Robert I. Palambergo et al Research Article

Toxicology and Environmental Health

A, 2007, 70, 568-574.
[46] Jose BV, Dulay RMR, David ES.
Toxic and teratogenic assessment of
mangosteen (Garcinia mangostana L.)
leaves and stem-bark lyophilized water
extracts in zebrafish (Danio rerio)
embryo. Advances in Environmental
Biology, 2016, 10(5), 96-101.
[47] Sreedevi B, Suvarchala G, Philip GH.
Morphological and physiological
abnormalities during development in
zebrafish due to chlorpyrifos. Indian
Journal of Science Research, 2014,
5(2), 1-8.
 952
IJBPAS, May, 2018, 7(5)