PERBEDAAN NILAI HEMATOKRIT PADA SAMPEL YANG

DITUNDA 3 JAM PADA SUHU RUANG DAN SUHU 2-8˚C

METODE OTOMATIS

PROPOSAL TUGAS AKHIR

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk menyelesaikan

Pendidikan Diploma IV Kesehatan
Bidang Analis Kesehatan

Disusun oleh:

Ria Agustina Handayani

G1C220049

PROGRAM STUDI D IV ANALIS KESEHATAN

FAKULTAS ILMU KEPERAWATAN DAN KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SEMARANG
2022
 HALAMAN PERSETUJUAN

Proposal Tugas Akhir dengan judul

PERBEDAAN NILAI HEMATOKRIT PADA SAMPEL YANG DITUNDA 3

JAM PADA SUHU RUANG DAN SUHU 2-8˚C METODE OTOMATIS

Ria Agustina Handayani

G1C220049

Telah disetujui
Oleh

Pembimbing I Pembimbing II

dr. Yekti Hediningsih, M.Si.Med., Sp.PK Andri Sukeksi, SKM., M.Si

NIDN. 8851950017 NIK. 28.6.1026.024

Mengetahui
Ketua Program Studi D IV Analis Kesehatan

Fandhi Adi Wardoyo, M.Sc

NIK. 28.6.1026.277

ii
 KATA PENGANTAR
Assalamualaikum wr. wb. segala puji dan syukur kehadirat Allah Yang Maha Esa
atas anugerah-Nya yang melimpah, kemurahan dan kasih setia yang besar akhirnya
penulis dapat menyelesaikan penulisan Proposal Tugas Akhir dengan judul:
“Perbedaan Nilai Hematokrit Pada Sampel Yang Ditunda 3 Jam Pada Suhu Ruang
Dan Suhu 2-8˚C Metode Otomatis”.
Keberhasilan penulisan Proposal Tugas Akhir ini tentunya tidak lepas dari
bantuan dan dorongan berbagai pihak yang telah mendukung dan membimbing
penulis. Oleh karena itu, kasih yang tulus serta penghargaan yang setinggi-tingginya
kepada:

1. dr. Yekti Hediningsih, M.Si.Med., Sp.PK selaku pembimbing I. Terima kasih

atas segala bimbingan, ajaran, dan ilmu-ilmu baru yang penulis dapatkan
selama penyusunan proposal ini.
2. Andri Sukeksi, S.KM., M.Si selaku pembimbing II. Terimakasih atas segala
bimbingan, ajaran, dan ilmu-ilmu baru yang penulis dapatkan selama
penyusunan proposal ini.
3. Dr. Budi Santosa, M.Si.Med selaku Penguji yang telah memberikan masukan
serta arahan dalam penyusunan proposal ini.
4. Fandhi Adi Wardoyo, M.Sc selaku Ketua Program Studi D IV Analis
Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang.
5. Kedua orang tua yang senantiasa memberikan doa, kasih sayang, dan
dukungan yang tiada henti-hentinya kepada penulis untuk menyelesaikan
setiap tugas dan tanggung jawab bagi cita-cita penulis.
6. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebut satu persatu yang telah memberi
bantuan dalam penyusunan proposal ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa proposal ini masih jauh dari kesempurnaan
karena menyadari segala keterbatasan yang ada. Untuk itu demi sempurnanya

iii
proposal ini, penulis sangat membutuhkan dukungan dan sumbangsih pikiran yang
berupa kritik dan saran yang bersifat membangun.
Akhir kata dengan segala kerendahan hati, penulis berharap semoga hasil
penelitian ini dapat bermanfaat baik bagi kalangan akademis, khususnya bagi seluruh
mahasiswa Universitas Muhammadiyah Semarang, masyarakat pada umumnya dan
bagi dunia pengetahuan.

Semarang, 2022

Ria Agustina Handayani

iv
 DAFTAR ISI

HALAMAN PERSETUJUAN ...................................................................................... ii

KATA PENGANTAR ................................................................................................. iii
DAFTAR TABEL ....................................................................................................... vii
DAFTAR GAMBAR ................................................................................................. viii
BAB I ............................................................................................................................ 1
PENDAHULUAN ........................................................................................................ 1
1.1. Latar Belakang ............................................................................................... 1
1.2. Rumusan Masalah .......................................................................................... 3
1.3. Tujuan Penelitian ............................................................................................ 3
1.3.1. Tujuan Umum ......................................................................................... 3
1.3.2. Tujuan Khusus ........................................................................................ 3
1.4. Manfaat Penelitian .......................................................................................... 3
1.5. Keaslian/Originalitas Penelitian ..................................................................... 4
BAB II ........................................................................................................................... 6
TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................................... 6
2.1. Laboratorium Klinik ....................................................................................... 6
2.2. Darah .............................................................................................................. 6
2.2.1. Definisi Darah ......................................................................................... 6
2.2.2. Fungsi Darah ........................................................................................... 7
2.2.3. Komponen Darah .................................................................................... 7
2.3. Hematokrit .................................................................................................... 10
2.3.1. Definisi Hematokrit ............................................................................... 10
2.4. Metode pemeriksaan hematokrit .................................................................. 11
2.5. Faktor-faktor yang mempengaruhi pemeriksaan hematokrit ....................... 13
2.6. Kerangka Teori ............................................................................................. 15
2.7. Kerangka Konsep ......................................................................................... 16
2.8. Hipotesis ....................................................................................................... 16
BAB III ....................................................................................................................... 17
METODE PENELITIAN ............................................................................................ 17

v
 3.1. Jenis Penelitian ............................................................................................. 17
3.2. Tempat dan Waktu Penelitian ...................................................................... 17
3.3. Variabel Penelitian ....................................................................................... 17
3.3.1. Variabel Bebas (X) ................................................................................ 17
3.3.2. Variabel Terikat (Y) .............................................................................. 17
3.4. Definisi Operasional ..................................................................................... 18
3.5. Populasi dan Sampel .................................................................................... 18
3.5.1. Populasi ................................................................................................. 18
3.5.2. Sampel ................................................................................................... 18
3.6. Alat dan Bahan ............................................................................................. 19
3.6.1. Alat ........................................................................................................ 19
3.6.2. Bahan..................................................................................................... 19
3.7. Prosedur Penelitian ....................................................................................... 19
3.7.1. Pra Analitik ........................................................................................... 19
3.7.2. Analitik.................................................................................................. 20
3.7.3. Pasca Analitik........................................................................................ 21
3.8. Alur Penelitian .............................................................................................. 21
3.9. Teknik Pengumpulan dan Analisa Data ....................................................... 21
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................. 22

vi
 DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Originalitas Penelitian ....................................................................... 4
Tabel 2. Definisi Operasional ......................................................................... 17
Tabel 3. Interpretasi Hasil ............................................................................... 20

vii
 DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Plasma darah .................................................................................. 8
Gambar 2. Sel darah putih atau leukosit .......................................................... 9
Gambar 3. Trombosit atau keping darah .......................................................... 9
Gambar 4. Sel darah merah atau eritrosit ......................................................... 10
Gambar 5. Hematokrit ...................................................................................... 11
Gambar 6. Kerangka teori ................................................................................ 15
Gambar 7. Kerangka konsep ............................................................................ 16
Gambar 8. Alur penelitian ................................................................................ 20

viii
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Pemeriksaan laboratorium merupakan suatu pemeriksaan yang digunakan untuk
kepentingan klinik. Pemeriksaan laboratorium dilakukan untuk membantu
menegakan diagnosis penyakit dan membantu dalam menindak lanjuti terapi.
Sebelum hasil pemeriksaan laboratorium dikeluarkan oleh petugas laboratorium tentu
telah melalui berbagai tindakan dan penanganan. Tahap-tahap tindakan dan
penanganan dalam pemeriksaan laboratorium harus di perhatikan secara memadai
sehingga dapat dicegah hal-hal yang tidak sesuai dengan keadaan penderita (Atmaja,
2018).
Pemeriksaan laboratorium klinik merupakan salah satu pemeriksaan penunjang
dalam membantu diagnosis suatu penyakit serta mengetahui penyebab timbulnya
penyakit. Pemeriksaan laboratorium yang sering dilakukan salah satunya adalah
pemeriksaan hematologi meliputi beberapa parameter pemeriksaan antara lain: kadar
hemoglobin, jumlah leukosit, jumlah eritrosit, jumlah trombosit, hematokrit, indeks
eritrosit (MCV, MCH, MCHC), LED (Laju Endap Darah), hitung jenis leukosit (Diff
Count), retikulosit, pemeriksaan hemostasis dan hematokrit (FKUI, 2011).
Hematokrit adalah hasil pengukuran yang menyatakan perbandingan sel darah
merah terhadap volume darah. Pemeriksaan hematokrit merupakan salah satu
pemeriksaan yang sering dikerjakan untuk membantu diagnosa berbagai penyakit
diantaranya Demam Berdarah Dengue (DBD), anemia, polisitemia vera, dan diare
berat (Sutedjo, 2009).
Pemeriksaan di laboratorium harus menggunakan metode dan prosedur kerja
sesuai Standar Operasional Prosedur (SOP) yang benar agar hasil yang dikeluarkan
dapat menggambarkan kondisi pasien yang sesungguhnya. Secara umum, ada
beberapa faktor yang dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan laboratorium

1
 2

diantaranya faktor pra analitik, analitik, dan pasca analitik (Riswanto, 2013). Faktor
yang paling besar pengaruhnya adalah faktor pra analitik yaitu kesalahan mencapai
68%, analitik 13% dan pasca analitik 19% (Usman, 2015). Tahapan pra-analitik
adalah semua hal yang dilakukan terhadap spesimen pasien sebelum dianalisis dan
merupakan sumber kesalahan terbesar (Chhillar et al., 2010). Salah satu faktor pra
analitik yang berpengaruh dalam pemeriksaan hematokrit adalah penyimpanan
sampel dan penundaan pemeriksaan. Penyimpanan sampel sering dilakukan karena
terjadi penundaan pemeriksaan di laboratorium. Penundaan terjadi disebabkan oleh
beberapa hal diantaranya kurangnya jumlah tenaga laboratorium sehingga
pengumpulan sampel dilakukan terlebih dahulu hingga selesai kemudian diperiksa
secara bersamaan, pemadaman listrik yang tidak terduga, keterlambatan pengiriman
sampel darah yang pasiennya berasal dari kamar inap yang jaraknya jauh dari
laboratorium, dan sebagainya sehingga pemeriksaan sampel tertunda lebih dari 1 jam.
Pemeriksaan yang menggunakan darah EDTA harus segera dilakukan, bila
terpaksa ditunda sebaiknya harus diperhatikan batas waktu penyimpanan untuk
masing-masing pemeriksaan. Darah EDTA dapat disimpan selama 24 jam pada suhu
4˚C tanpa memberikan penyimpanan yang bermakna, sedangkan darah EDTA yang
disimpan pada suhu kamar lebih dari satu jam dapat menyebabkan penurunan nilai
hematokrit. Penurunan nilai hematokrit disebabkan oleh eritrosit yang mengalami
penyusutan (krenasi). Penyusutan terjadi pada darah yang dibiarkan pada suhu kamar
dalam waktu yang lama sehingga saat dilakukan pemeriksaan menggunakan alat
otomatis hasil pemeriksaan hematokrit akan mengalami penurunan (Patel N, 2009).
Penelitian yang dilakukan Nauroh Nadzifah (2020) mengenai Pengaruh Lama
Penyimpanan Darah EDTA dalam Lemari Es (Suhu 4⁰C) Terhadap Nilai Hematokrit
Menggunakan Hematology Analyzer menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang
bermakna dari hasil pemeriksaan hematokrit yang dilakukan setelah penyimpanan
dalam lemari es suhu 4⁰C Selama 0 jam, 1 jam, dan 2 jam. Oleh karena itu peneliti
ingin membuktikan ada tidaknya perbedaan nilai hematokrit pada sampel yang
ditunda 3 jam pada suhu ruang dan suhu 2-8⁰C.
 3

1.2. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan diatas, maka rumusan masalah
pada penelitian adalah sebagai berikut: Apakah ada perbedaan nilai hematokrit pada
sampel yang ditunda 3 jam pada suhu ruang dan suhu 2-8˚C metode otomatis.

1.3. Tujuan Penelitian

1.3.1. Tujuan Umum
Mengetahui perbedaan nilai hematokrit pada sampel yang ditunda 3 jam
pada suhu ruang dan suhu 2-8˚C metode otomatis.
1.3.2. Tujuan Khusus
1. Mengukur nilai hematokrit pada sampel yang ditunda 3 jam pada
suhu ruang dengan metode otomatis.
2. Mengukur nilai hematokrit pada sampel yang ditunda 3 jam pada
suhu 2-8˚C dengan metode otomatis.
3. Menganalisis perbedaan nilai hematokrit pada sampel yang ditunda 3
jam pada suhu ruang dan suhu 2-8˚C metode otomatis.

1.4. Manfaat Penelitian

Berdasarkan uraian di atas, adapun manfaat yang ingin dicapai dari hasil
penelitian adalah:
1. Bagi Penulis
Memberikan informasi mengenai perbedaan nilai hematokrit pada sampel
yang ditunda 3 jam pada suhu ruang dan suhu 2-8˚C metode otomatis.
2. Bagi Rekan Ahli Teknologi Laboratorium Medik
Memberikan informasi mengenai perbedaan nilai hematokrit pada sampel
yang ditunda 3 jam pada suhu ruang dan suhu 2-8˚C metode otomatis,
 4

diharapkan dapat menjadi panduan bagi rekan ATLM dalam melakukan

pemeriksaan nilai hematokrit sehingga dapat memberikan hasil yang akurat.
3. Bagi Institusi Pendidikan
Menambah kepustakaan di Universitas Muhammadiyah Semarang mengenai
perbedaan nilai hematokrit pada sampel yang ditunda 3 jam pada suhu ruang
dan suhu 2-8˚C metode otomatis.

1.5. Keaslian/Originalitas Penelitian

Tabel 1. Originalitas Penelitian
Nama
No Judul Penelitian Hasil Penelitian
Peneliti/Instansi
1 Siti Yumaroh, (2018) Perbedaan kadar hematokrit Tidak ada perbedaan
Universitas darah EDTA disimpan suhu bermakna kadar hematokrit
Muhammadiyah kamar dan suhu lemari penyimpanan 6 jam suhu
Semarang pendingin selama 6 jam dan kamar dan suhu lemari
18 jam. pendingin (p > 0,05).
Ada perbedaan bermakna
kadar hematokrit
penyimpanan 18 jam suhu
kamar dan suhu lemari
pendingin (p < 0,05).
2 Anik Nuryati, Pengaruh volume, lama Tidak ada pengaruh volume,
Suhardjono (2016) pendiaman dan suhu lama pendiaman dan suhu
Poltekkes Kemenkes penyimpanan darah pada penyimpanan darah terhadap
Yogyakarta pemeriksaan nilai hematokrit.
mikrohematokrit terhadap
nilai hematokrit
3 Fiolita Fika Afiyanti Perbedaan nilai hematokrit Ada perbedaan yang
(2017) ditunda 0 jam dan 6 jam signifikan nilai hematokrit
Sekolah Tinggi Ilmu menggunakan metode yang ditunda 0 jam dengan
Kesehatan Insan mikrohematokrit nilai hematokrit yang ditunda
Cendikia Medika 6 jam menggunakan metode
mikrohematokrit.
4 Nauroh Nadzifah Pengaruh Lama Tidak terdapat perbedaan
(2020) Penyimpanan Darah EDTA bermakna dari hasil
Poltekkes Kemenkes dalam Lemari Es (Suhu 4°C) pemeriksaan hematokrit yang
Yogyakarta Terhadap Nilai Hematokrit dilakukan setelah
Menggunakan Hematology penyimpanan dalam lemari
Analyzer es suhu 4°C selama 0 jam, 1
jam dan 2 jam.
 5

Perbedaan penelitian ini dengan penelitian sebelumnya terletak pada metode

pemeriksaan yang digunakan dan variasi lama waktu penundaan penyimpanan
darah. Penelitian sebelumnya menggunakan metode mikrohematokrit sedangkan
penelitian ini menggunakan metode otomatis dengan alat hematology analyzer.
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Laboratorium Klinik
2.1.1. Definisi Laboratorium Kllinik
Menurut Permenkes RI No. 411/Menkes/Per/III/2010, laboratorium klinik
adalah laboratorium kesehatan yang melaksanakan pelayanan pemeriksaan
spesimen klinik untuk mendapatkan informasi tentang kesehatan perorangan
terutama untuk menunjang upaya diagnosis penyakit, dan memulihkan kesehatan
(Mardiana dan Rahayu Ira Gustiana, 2017).
Laboratorium klinik adalah laboratorium kesehatan yang melaksanakan
pelayanan pemeriksaan di bidang hematologi, kimia klinik, mikrobiologi klinik,
parasitologi klinik, imunologi klinik atau bidang lain yang berkaitan dengan
kepentingan kesehatan perorangan terutama untuk menunjang upaya diagnosis
penyakit, penyembuhan penyakit dan pemulihan kesehatan. Selain itu, laboratorium
klinik dan kesehatan pun memilki klasifikasi tertentu sesuai dengan kebutuhan
masing-masing laboratorium (Resmiaty dan Sari, 2017).

2.2. Darah
2.2.1. Definisi Darah
Darah merupakan komponen esensial makhluk hidup mulai dari manusia
hingga binatang. Fungsi darah yaitu mengangkut oksigen, sebagai mekanisme
pertahanan tubuh terhadap infeksi dan mekanisme hemostasis (Bakta, 2013).
Komposisi darah manusia terdiri dari plasma darah, sel darah, protein, dan zat
terlarut lainnya. Plasma darah merupakan bagian cairan yang jernih dan berwarna
kekuningan yang hampir 90% kandungannya adalah air dan bertugas untuk
mengedarkan sari makanan keseluruh tubuh. Sel darah terdiri dari tiga jenis yaitu
sel darah merah (eritrosit), sel darah putih (leukosit), dan keping darah (trombosit).

6
 7

2.2.2. Fungsi Darah

Fungsi darah menurut Gaol (2015)antara lain:
a. Membawa nutrisi yang telah disiapkan oleh saluran pencernaan menuju
jaringan tubuh.
b. Membawa oksigen dari paru-paru keseluruh tubuh.
c. Mengangku produk sisa dari berbagai jaringan menuju ginjal untuk
diekskresikan.
d. Mengangkut hasil sekresi kelenjar endokrin (hormon) dan enzim dari
organ ke organ.
e. Ikut berperan dalam mempertahankan keseimbangan air, sistem buffer
seperti bicarbonat di dalam darah, membantu mempertahankan pH yang
konstan pada jaringan dan cairan tubuh.
f. berperan penting dalam pengendalian suhu tubuh dengan cara
mengangkut panas dari struktur yang lebih dalam menuju permukaan
tubuh.
g. Mengatur konsentrasi ion hidrogen dalam tubuh (keseimbangan asam
basa).
h. Membantu pertahanan tubuh terhadap penyakit.
2.2.3. Komponen Darah
Darah tersusun atas dua komponen yaitu:
1. Plasma Darah
Adalah cairan berwarna kuning yang di dalamnya terdapat fibrinogen
yang didapatkan dengan cara menambahkan antikoagulan seperti EDTA atau
heparin kedalam darah sehingga darah tidak membeku, hanya mengendap.
Komposisi plasma darah terdiri atas air 91%, protein 8% diantaranya
albumin, globulin, protrombin dan fibrinogen. Plasma juga mengandung
mineral sebanyak 0,9% diantaranya natrium klorida, natrium bikarbonat,
garam, fosfor, magnesium, dan besi. Sisanya mengandung glukosa, lemak,
 8

urea, asam urat, kreatinin, kolesterol, dan asam amino. Fungsi utama plasma
yaitu sebagai perantara untuk menyalurkan makanan, mineral, lemak, glukosa,
dan asam amino keseluruh tubuh. Plasma juga berfungsi sebagai perantara
untuk mengangkut zat-zat yang dibuang seperti urea, asam urat, dan lain-lain.

Gambar 1. Plasma darah (Sumber: ilmuveteriner.com)

2. Sel Darah
a. Sel Darah Putih atau Leukosit
Sel darah putih atau leukosit berwarna kuning, bentuknya lebih
besar dari eritrosit tetapi jumlahnya lebih sedikit dari eritrosit. Nilai normal
leukosit antara 4.000 sampai 10.000 milimeter kubik. Fungsi sel leukosit
adalah sebagai pertahanan tubuh terhadap infeksi, memberikan perlindungan
pada tubuh dari mikroorganisme yaitu kemampuan sebagai fagosit dan
memakan bakteri hidup yang masuk ke peredaran darah serta membantu
trombosit dalam proses penyembuhan luka.
 9

Gambar 2. Sel darah putih atau leukosit (Sumber:

patologiklinik.com
b. Trombosit atau Keping Darah
Trombosit atau keping darah merupakan sel kecil berukuran
sekitar sepertiga dari ukuran sel darah merah. Dalam setiap mililiter darah
terdapat kurang lebih 300.000 trombosit. Trombosit berdiameter 1 sampai 4
mikron dan berumur sekitar 10 hari, sekitar satu sepertiga dari jumlah
trombosit berada di dalam limfa sebagai cadangan dan sisanya berada di
dalam sirkulasi berjumlah antara 150.000 sampai 400.000 per mililiter kubik
darah.

Gambar 3. Trombosit atau keping darah (Sumber: Kosasih, A.S dan Kosasih
E.N. 2008)
 10

c. Sel Darah Merah atau Eritrosit

Sel darah merah atau eritrosit merupakan sel yang berwarna
merah dan berukuran kecil atau bikonkaf, cekung pada kedua sisinya sehingga
jika diliat dari samping tampak seperti dua buah bulan sabit yang saling
bertolak belakang. sel eritrosit berinti berasal dari sel induk multipotensial
dalam sumsum tulang. Setiap mililiter kubik darah terdapat 5.000.000 sel
darah merah. Fungsi sel darah adalah untuk transport makanan dan di
dalamnya mengandung haemoglobin yang selanjutnya membawa oksigen dari
paruparu ke jaringan tubuh.

Gambar 4. Sel darah merah atau eritrosit (Sumber: halodoc.com)

2.3. Hematokrit
2.3.1. Definisi Hematokrit
Hematokrit adalah volume eritrosit yang di pisahkan dari plasma dengan
memutarnya di dalam tabung khusus yang nilainya di nyatakan dalam persen.
Hematokrit adalah perbandingan bagian dari darah yang mengandung eritrosit
terhadap volume seluruh darah yang dihitung dalam % (Sutedjo, 2009). Menurut
Kee (2007) hematokrit merupakan volume sel darah merah yang ditemukan dalam
100 ml darah yang dihitung jumlahnya dalam bentuk persen (%). Kiswari (2014)
menyatakan nilai hematokrit yaitu perbandingan antara volume eritrosit dengan
volume darah keseluruhan dan dinyatakan dalam persen.
 11

Gambar 5. Hematokrit (Sumber: Turgeon, 2007)

Pemeriksaan hematokrit merupakan salah satu pemeriksaan yang sering
dilakukan untuk membantu berbagai diagnosa penakit seperti anemia, polisitemia,
diare berat, dan Demam Berdarah Dengue (DBD) (Sutedjo, 2009), dalam
pemeriksaan hematokrit, sampel yang digunakan yaitu darah kapiler maupun darah
vena. Kadar hematokrit berbeda berdasarkan jenis kelamin, kadar hematokrit pada
wanita yaitu sekitar 37-43% sedangkan kadar hematokrit pada pria 40-48%.
Pemeriksaan hematokrit merupakan salah satu metode yang paling teliti dan
simple dalam mendeteksi derajat anemia atau polisitemia. Nilai hematokrit juga
digunakan utuk mrnghitung nilai eritrosit rata-rata. Biasanya nilai itu ditentukan
dengan darah vena atau darah kapiler (Gandasoebrata, 2007).

2.4. Metode pemeriksaan hematokrit

Pemeriksaan hematokrit dapat dilakukan dengan dua metode yaitu konvensional
dan otomatis, metode konvensional meliputi pemeriksaan mikrohematokrit dan
makrohematokrit, sedangkan metode otomatis menggunakan alat yang biasa disebut
dengan hematologi anayzer.
1. Makrohematokrit
Darah EDTA atau heparin sebanyak 1 ml dimasukkan ke dalam tabung
wintrobe yang berukuran 110 mm dengan diameter 2,5-3,0 mm dan skala 0-10
mm, yang selanjutnya tabung kemudian disentrifuge selama 30 menit dengan
 12

kecepatan 3000 rpm, tinggi kolom eritrosit adalah nilai hematokrit yang
dinyatakan dalam persen. Metode makro sudah tidak banyak lagi digunakan
(Riswanto, 2013).
2. Mikrohematokrit
Metode mikrohematokrit merupakan gold standard untuk pemeriksaan
hematokrit, namun pemeriksaan menggunakan metode mikrohematokrit
mungkin kurang akurat karena dipengaruhi oleh banyak faktor (Gebretsadkan et
al., 2015). Salah satu faktor yang mempengaruhi pada metode mikrohematokrit
misalnya jika volume darah yang diambil kurang dari 2/3 tabung (Nuryati dan
Suhardjono, 2016). Tabung yang digunakan pada metode mikrohematokrit
yaitu tabung kapiler, tabung yang dapat digunakan ada dua macam, yaitu
tabung yang dilapisi antikoagulan ammonium heparin dan tabung yang tidak
mengandung antikoagulan. Tabung mikrohematokrit dirancang untuk
digunakan menggunakan sentrifus khusus (Riswanto, 2013), setelah dilakukan
sentrifuge, panjang kolom eritrosit ditentukan dengan menggunakan skala
pembaca.
3. Hematologi Analyzer
Pengukuran kadar hematokrit dapat dilakukan menggunakan metode
otomatis dengan alat hematologi analyzer. Hematologi analyzer adalah alat
penghitung sel darah lengkap yang terdiri dari beberpa parameter pemeriksaan
dan diukur secara bersamaan (Vis & Huisman, 2016).
Pengukuran hitung jumlah sel pada alat hematologi analyzer berdasarkan
prinsip flowcytometri. Flowcytometri adalah metode pengukuran, jumlah dan
sifat-sifat sel yang dibungkus oleh aliran cairan melalui celah sempit. Ribuan
sel dialirkan melalui celah tersebut sedemikian rupa sehingga sel dapat lewat
satu per satu, kemudian dilakukan penghitungan jumlah sel dan ukurannya.
Pemeriksaan menggunakan hematology analyzer memiliki kelebihan antara
lain:
 13

a. Waktu pemeriksaan lebih cepat

b. Alat yang telah terkoneksi dengan Sistem Informasi Laboratorium
(SIL) akan mengurangi kemungkinan kesalahan saat identifikasi
sampel dan entri data hasil pemeriksaan.
c. Berbagai parameter dapat diukur secara bersamaan.
Kelemahan alat hematology analyzer yaitu :
a. Apabila ada sel yang saling menempel secara bersamaan akan dihitung
sebagai satu sel.
b. Gelembung udara mikro atau partikel lain juga dapat dihitung sebagai
sel (Mengko, 2013).

2.5. Faktor-faktor yang mempengaruhi pemeriksaan hematokrit

Beberapa faktor yang dapat mempengaruhi pemeriksaan hematokrit yaitu:
1. Faktor In vivo
a. Eritrosit
Eritrosit sangat penting pada pemeriksaan hematokrit karena eritrosit
merupakan sel yang diukur dalam pemeriksaan tersebut. Hematokrit dapat
meningkat pada polisitemia yaitu peningkatan jumlah sel darah merah dan nilai
hematokrit dapat menurun pada anemia yaitu penurunan kuantitas sel-sel darah
merah dalam sirkulasi (Nugraha, 2015).
b. Viskositas darah
Efek hematokrit terhadap viskositas darah adalah makin besar persentase
sel darah maka makin tinggi hematokritnya dan makin banyak pergeseran
diantara lapisan-lapisan darah, pergeseran inilah yang menentukan viskositas,
viskositas darah meningkat secara drastis ketika hematokrit meningkat (Nugraha,
2015).
 14

c. Plasma
Pemeriksaan hematokrit, plasma harus pula diamati terhadap adanya
ikterus atau hemolisis. Keadaan fisiologis atau patofisiologis pada plasma dapat
mempengaruhi pemeriksaan hematokrit (Nugraha, 2015).
2. Faktor In vitro
a. Pemusingan/ sentrifugasi
Penempatan tabung kapiler pada lubang jari-jari sentrifus yang kurang
tepat dan penutup yang kurang rapat dapat menyebabkan hasil pembacaan
hematokrit tinggi palsu. Kecepatan putar sentrifus dan pengaturan waktu
dimaksudkan agar eritrosit memadat secara maksimal dan harus diatur secara
tepat. Pemakaian mikrosentrifus dalam waktu yang lama mengakibatkan alat
menjadi panas sehingga dapat mengakibatkan hemolisis dan nilai hematokrit
menjadi rendah palsu (Wirawan, 2011).
b. Antikoagulan
Volume darah dengan antikoagulan yang tidak sebanding akan
mengakibatkan sel eritrosit menjadi mengkerut atau sehingga darah menjadi
encer dan nilai hematokrit menjadi tinggi palsu (Nugraha, 2015).
c. Pembacaan yang tidak tepat
d. Bahan pemeriksaan yang tidak dihomogenkan sebelum pemeriksaan.
e. Suhu dan Waktu Penyimpanan Sampel
Bahan pemeriksaan sebaiknya segera diperiksa, jika dilakukan penundaan
pemeriksaan sebaiknya sampel disimpan pada 4 derajat selsius selama 24 jam
memberikan nilai hematokrit yang lebih tinggi (Gandasoebrata, 2010).
 15

2.6. Kerangka Teori

Darah

Hematokrit

Faktor yang
mempengaruhi nilai
hematokrit

Antikoagulan Suhu dan Waktu

Penyimpanan

Ditunda 3 jam

Suhu Ruang Suhu 2-8˚C

Perbedaan Nilai
Hematokrit

Gambar 6. Kerangka Teori

 16

2.7. Kerangka Konsep

Sampel yang ditunda 3 Sampel yang ditunda 3

jam suhu ruang jam suhu 2-8˚C

Nilai Hematokrit (%)

Gambar 7. Kerangka Konsep

2.8. Hipotesis
Adanya perbedaan nilai hematokrit pada sampel yang ditunda 3 jam pada suhu
ruang dan suhu 2-8°C menggunakan metode otomatis.
 BAB III
METODE PENELITIAN

3.1. Jenis Penelitian

Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian eksperimen. Penelitian
eksperimen yang dilakukan menggunakan data kuantitatif untuk menguji hipotesis
hubungan antara variabel yang akan diteliti.

3.2. Tempat dan Waktu Penelitian

3.2.1. Tempat Penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Instrumen Universitas Muhammadiyah
Palangkaraya.
3.2.2. Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan januari-Juni 2022

3.3. Variabel Penelitian

3.3.1. Variabel Bebas (X)
Variabel bebas yang akan diteliti adalah sampel yang ditunda selama 3 jam
pada suhu ruang dan suhu 2-8˚C.
3.3.2. Variabel Terikat (Y)
Variabel terikat yang akan diteliti adalah nilai hematokrit.

17
 18

3.4. Definisi Operasional

Tabel 2. Definisi Operasional

Variabel Definisi Metode Indikator Skala
Pengukuran
Sampel darah Sampel darah Diukur Suhu ruang dan Rasio
yang ditunda 3 yang menggunakan suhu 2-8˚C
jam pada suhu menggunakan skala pada
ruang dan suhu K₃EDTA dalam tabung
2-8˚C tabung vacutainer
vacutainer
dengan
penundaan 3 jam
suhu ruang dan
suhu 2-8˚C

Nilai Hematokrit Banyaknya Pengukuran nilai Persen (%) Rasio

jumlah hematokrit
persentase dengan
perbandingan sel menggunakan
darah merah alat Hematology
dengan volume Analyzer xp-300
darah.

3.5. Populasi dan Sampel

3.5.1. Populasi
Populasi adalah keseluruhan subjek atau objek yang diteliti (Notoadmodjo,
2005). Populasi dalam penelitian adalah mahasiswa D3 analis kesehatan Semester
IV Universitas Muhammadiyah Palangkaraya dengan jumlah populasi sebanyak 54
orang.
3.5.2. Sampel
Sampel adalah sebagian atau perwakilan dari populasi yang akan diteliti
(Arikunto, 2006). Besar sampel dalam penelitian dihitung dengan rumus Federer
sebagai berikut:
 19

(t-1) (n-1) > 15

(3-1) (n-1) > 15
2n-2 > 15
2n > 15 + 2
n > 17/2
n = 8,5 = 9

3.6. Alat dan Bahan

3.6.1. Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian adalah hematologi analyzer, tabung
vakutainer K₃EDTA, rak tabung reaksi, sarung tangan, tourniquet.
3.6.2. Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian adalah sampel darah, bahan kontrol
high, bahan kontrol normal, bahan kontrol low, probe cleanser, dan kapas alkohol.

3.7. Prosedur Penelitian

3.7.1. Pra Analitik
1. Pengambilan Sampel
Langkah pertama dilakukan proses sampling darah vena pada responden.
Dimasukkan darah kedalam masing-masing tabung vakutainer sebanyak 3 cc
kemudian tabung ditutup rapat dan dihomogenkan. Sampel darah diambil
sebanyak 3 tabung vakutainer tutup ungu atau tabung berisi antikoagulan
K₃EDTA.
2. Persiapan Sampel
Sampel yang digunakan adalah sampel darah K₃EDTA dengan catatan
sampel tidak ada bekuan, tidak ikterik, dan tidak lisis.
3. Metode
Flowcytometri
 20

4. Prinsip
Prinsip flowcytometri dimana pengukuran dari jumlah dan sifat-sifat dari sel
yang dapat dibungkus oleh aliran cairan kemudian dilewatkan bersama aliran
melalui celah, sel dapat lewat satu per satu kemudian dilakukan perhitungan
jumlah sel dan ukurannya (Koehane, 2016). Reagen ulfolyser melisikan sel
darah merah dan bereaksi dengan hemoglobin membentuk oxyhemoglobin
yang dimodifikasi, konsentrasinya diukur dengan melewatkan cahaya
monokromatis. Cahaya yang diserap berbanding lurus dengan konsentrasi
suatu zat, semakin banyak cahaya yang diserap. Reagen sulfolyser
melisiskan sel darah merah konsentrasinya diukur dengan melewatkan
cahaya monokromatis. Cahaya yang diserap berbanding lurus dengan
konsentrasi suatu zat semakin banyak cahaya yang diserap (Setiani, 2017).
3.7.2. Analitik
Prosedur pemeriksaan jumlah hematokrit, yaitu alat dalam status ready.
Sistem pada mode whole blood mode, jika tidak pada mode whole blood maka
ditekan tombol [mode] untuk merubah analysis mode dan gunakan tombol
[left]/[right] untuk memilih “whole blood”, kemudian tekan tombol [enter]. Tekan
tombol [sample no.] untuk memasukkan nomor identitas darah sample, kemudian
tekan tombol [enter]. Reagen kontrol dan sampel dihomogenisasikan kemudian
diperiksa dengan baik secara berurutan mulai dari kontrol high, normal, low. Tutup
reagen kontrol atau sampel dibuka dan letakkan di bawah aspiration probe. Ujung
probe menyentuh dasar botol darah sampel agar tidak menghisap udara. Ditekan
start switch untuk memulai proses. Botol darah reagen atau sampel ditarik dari
bawah probe setelah terdengar bunyi beep dua kali. Hasil akan tertampil pada layar
dan secara otomatis tercetak pada kertas printer.
 21

3.7.3. Pasca Analitik

Tabel 3. Interpretasi Hasil

Kategori Nilai Rujukan (%)
Dewasa laki-laki 40-52
Dewasa perempuan 35-47
Bayi baru lahir 44-72
Anak usia 1-3 tahun 35-43
Anak usia 4-5 tahun 31-43
Anak usia 6-10 tahun 33-45
Sumber: Riswanto, 2013

3.8. Alur Penelitian

Darah Vena

Sampel Segera Darah yang disimpan Darah yang disimpan

pada suhu ruang pada suhu 2-8˚C

Analisa Data

Gambar 8. Alur Penelitian

3.9. Teknik Pengumpulan dan Analisa Data

Analisis data yang dilakukan menggunakan program SPSS sebagai alat untuk
meregresikan model yang telah dirumuskan. Metode analisis yang digunakan
adalah dependent t-test.
 22

DAFTAR PUSTAKA

Arikunto, S. 2006. Metode Penelitian Kualitatif. Jakarta: Bumi Aksara

Atmaja, I. G. N. G. J. (2018). Gambaran Kadar Hemoglobin Dengan Pemeriksaan
Menggunakan Metode Point of Care Testing Dan Hematology Analyzer
Bakta, I.M. (2013). Hematologi Klinik Ringkas. Jakarta: EGC
Chhillar et al., 2010. Kendali Mutu Laboratorium. Jakarta.
Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia 2011. Pemeriksaan Laboratorium
Sederhana. Edisi ke-2. Jakarta.
Gandasoebrata R. (2010) Penuntun Laboratorium Klinik, Penerbit Dian Rakyat,
Jakarta.
Gebretsadkan, G. 2015. The Comparison Between Microhematocrit and Automated
Methods for Hematocrit Determination. International Journal of Blood
Research and Disorders, 2(1), pp. 1–3. doi: 10.23937/2469- 5696/1410012.
Herawati. 2016. Pemeriksaan Hematokrit Metode Mikrohematokrit Antara
Menggunakan Centrifuge Sudut dengan Centrifuge Mikrohematokrit.
Diploma Thesis. Ciamis: Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Muhammadiyah
Ciamis.
Kee, Joyce LeFever. 2007. Pedoman Pemeriksaan Laboratorium dan Diagnostik Edisi
6. Jakarta: EGC. Pp: 232.
Kiswari Rukman. (2014) Hematologi & Transfusi. Jakarta: Erlangga.
Longanbach, S., Miers, M. 2015. Automated Blood Cell Analysis. In Rodak’s
Hematology: Clinical Principles and Applications. St. Louis: Elsevier
Saunders.
Mardiana dan Rahayu Ira Gustira. (2017). Pengantar Laboratorium Medik Edisi 1. h:
15. Pusat Pendidikan Sumber Daya Manusia Kesehatan Badan
Pengembangan dan Pemberdayaan Sumber Daya Manusia Kesehatan Edisi
Tahun 2017.
Mengko.R. 2013.Instrumen Laboratorium Klinik. ITB: Bandung
Mindray, (2006). BC 2600 Auto Hematology Analyzer. China
Notoatmodjo, S. 2005. Metodologi Penelitian Kesehatan. Jakarta: PT. Rineka Cipta.
h: 78-89, 145-50.
 23

Nugraha, Gilang. 2015. Panduan Pemeriksaan Laboratorium Hematologi Dasar.

CV. Trans Info Media: Jakarta Timur.
Nuryati, A. 2016. Pengaruh Volume, Lama Pendiaman Dan Suhu Penyimpanan
Darah Pada Pemeriksaan Mikrohematokrit. Jurnal Teknologi Kesehatan,
12(2), pp. 141–146.
Patel, N. (2009). Volume 7, No 1 BD Global Technical Service Receive many
questions about BD products.
Riswanto. (2013) Pemeriksaan Laboratorium Hematologi. Yogyakarta: Alfameda &
Kenal Medika.
Sutedjo AY., 2009. Mengenal Penyakit Melalui Hasil Pemeriksaan Laboratorium.
Yogyakarta: Amara Books, pp. 28.
Usman, U; Javed Ahmed Siddiqui, Javed Lodhi. 2015. Evaluation and Control of Pra
Analytical Errors in Required Quality Variables of Clinical Lab Services.
IOSR-JNHS: 4 (3) 54-71.
Vis, J.Y., Huisman, A, 2016, Verification and Quality Control of Routine
Hematology Analyzers, [Review Article], John Wiley & Sons Ltd,
International Journal of Laboratory Hematology, May 2016, 38 (1), 100 –
109, doi: 10.1111/ijlh.12503.
Wirawan R. 2011. Analisa Hemoglobin dengan Cara Konvensional dan Mikrokapiler
Elektroforesis. Jakarta: Badan Penerbitan FKUI.
Wirawan R. 2011. Pemeriksaan Hematologi Dasar. In: R Wirawan, Pemeriksaan
Laboratorium Hematologi. Jakarta: Badan Penerbit FKUI. h. 25-76.