Clostridium botulinum

Merupakan batang lurus dengan ukuran (0,9–1,2×4–6μ.m) dan pH yang mendekati diatas netralitas
dan juga menghasilkan spora oval subterminal. Spora ini sangat resisten tapi dapat mati di suhu 121°C
selama 15 menit. Sementara toksin dapat dihancurkan di suhu 100 °C selama 20 menit.

Clostridium botulinum dapat dibedakan dari antigenisitas toksin yang dihasilkan, terdapat 8
neurotoksin yang berbeda diproduksi oleh Clostridium botulinum di tipe A-G. pada tipe G telah diganti
Namanya menjadi C.argentina. toksin ini mempunyai aksi yang sama, namun, berbeda dalam potensi
antigenisitas, dan distribusinya. Dan pada toksin tipe C dan D dapat diketahui berkode bakteriofag. pH
optimum pada Clostridium botulinum netral hingga sedikit basa (pH 7,0–7,6) dan suhu optimal terletak
antara 30–37°C.

Habitat Alami

Endospore tersebar luas tapi tidak merata dan didistribusikan pada tanah dan lingkungan perairan
diseluruh dunia. Perkecambahan pada endospore dengan pertmbuhan sel vegetative dan produksi toksin,
terjadi dalam situasi anaerobic seperti di pada kaleng daging atau sayuran yang sudah terkontaminasi.

Patogenesis

Botulisme merupakan keracunan yang biasanya diakibatkan oleh konsumsi toksin yang terbentuk
sebelum dalam bahan makanan. Toksin ini diserap dari saluran usus dan diangkut lewat aliran darah menuju
ke sel saraf perifer dan bekerja pada sambungan neuromuscular saraf kolinergik dan juga pada sinapsis
otonom perifer. Toksin botulinum ini mempunyai strukur dan cara kerja yang sama dengan toksin tetanus
dengan perbedaan tanda klinis pada kedua penyakit yang disebabkan oleh tempat kerja toksin yang berbeda.

Diagnosa Laboratorium

Diagnosis botulisme didasari pada riwayatnya, dimana tanda klinis dan demonstrasi dan identifikasi toksin
dalam serum hewan yang hampir mati serta deteksi toksin dan C botulinum dalam bahan makanan. C
botulinum spora dapat bersifat sebenat di usus hewan normal dan kematian hewan menciptakan lingkungan
anaerobic yang cocok untuk perkecambahan spora dan produksi toksin. Perhatian besar harus diberikan
saat bekerja dengan bahan yang mengandung C. botulinum racun karena potensinya yang tinggi.

Demonstrasi Racun

Serum atau eksudat serosa disentrifugasi dari hewan dan dapat langsung diinokulasi dengan cara
intraperitoneal (0.5mL) ke dalam badan tikus. Namun jika ada toksin maka ciri khas penampilan pada tikus
akan terlihat dalam beberapa jam atau hingga lima hari. Gejala -gejalanya yaitu munculnya pernafasan perut
karena lumpunya otot pernafasan.
 (Tikus yang diinokulasi dengan serum yang mengandung toksin C. botulinum.)

Ekstrasi toksin dalam bahan makanan dapat dilakukan dengan cara maserasi produk dalam larutan
garam selama satu malam. Suspense disentrifugasi dan supernatant disaring melalui 0,45μ.m filter
bakteriologis. Dikarenakan toksin dapat berbentuk prtoksin, Sembilan bagian filtrat diperlakukan dengan
satu bagian larutan tripsin 1% dan diikubinasi pada suhu 37°C selama 45 menit secara intraperitoneal.

Klostridia Histotoksik
Gas-Gangren Clostridia

Clostridia yang biasanya mengakibatkan gangrene gas kadang-kadang clostidia lain, yang ada di
tanah dan di usus hewan, dan dapat menyebabkan sindrom yang persis. Penyakit yang disebabkan oleh
clostridia ini tersebar di seluruh dunia.

Patogenesis

Racun yang dihasilkan oleh gas-gangren clostridia ini tidak sekuat yang ada di C. tetani dan C.
botulinum tetapi bakteri gangren gas bersifat invasif. Sindrom penyakit dapat berbeda/bervariasi dari infeksi
luka sederhana, selulitis anaerobic hingga gangren gas yang parah dan fatal. Infeksi dapat berasal dari
endogen atau eksogen. Infeksi endogen sering terjadi apda kaki hitam pada pedet yang disebabkan oleh C.
chauvoei. Endospore tertelan dan biasanya tidak berbahaya melalui saluran usus tapi kadng spora melewati
usus melalui limfatik dan aluran darahke massa otot dan biasanya pada bagian belakang kadang di otot
jantung. Trauma pada daerah spora bersarang yang menyebabkan nekrosis jaringan dan mengakibatkan
kondisi anaerobic mendukung perkecambahan spora dan pasukan asam amino dan nutrisi lain untuk sel
vegetative.

Identifikasi Racun

Tes netralisasi tkus menggunakan antitoksin polivalen pada awal dan diikuti oleh antitoksin monovalen dan
jika tersedia maka digunakana untuk mengidentifikasi toksin dan jenisnya C.botilinum

Isolasi dari C. botulinum dari bahan konsumsi.

Beberapa sampel bahan konsumsi dimaserasi dalam sedikitgaram fisiologis. Suspensis dipanaskan pada a
65-80 °C selama 30 menit untuk membunuh sebagian besar organisme kontaminan dan untuk menginduksi
C. botulinum spora untuk berkecambah. Pelat agar darah diunokulasi dengan suspense dan diinkubasi di
bawah H2+ CO2 pada suhu 35 ° C hingga lima hari. Spora tipe E membutuhkan pengobatan dengan lisozim
buat membantu perkecambahan.

Diagnosa Laboratorium

a. Teknik AntiBodi Fluoresen

Antiserum spesifik berlabel fluoresen komersial tersedia untuk C. chauvoei, C.septikum,C.

novyidan C. sordellii. Teknik FA merupakan metode yang bagus dan cepat untuk mengidentifikasi
clostridia tersebut. Teknik ini dapat dilakukan pada apusan tetap aseton dari jaringan yang terkena
atau sumsum tulang dari tulang rusuk.

b. Sediaan Apusan Pewarnan Gram

Apusan cetakan yang diwarnai Gram pada hjaringan yang terkena dapat menghasilkan beberapa
informasi yang brguna. Morfologi dari organisme gas-gangren.

c. Isolasi dan Penampilan Kolonial

Supaya darah domba dengan ekstrak hati digunakan buat mengisolasi yang agak ribet C. chauvoei.
Supaya darah kaku dan agar darah normal digunakan saat mencoba mengisolasi C. septikum dan
C. sordellii. Clostridium perfringens dan C. novy tipe A tumbuh baik pada agar darah normal.

d. Reaksi Biokimia
Clostridium Chauvoei akan memfermentasikan sukrosa namun tidak salisin. C. septikum
memfermentasikan salisin tapi tidak sukrosa.

e. Reaksi Nagle dari C. perfingens

Antitoksin tipe A (alfa) dihamburkan di setengah piring supaya kuning telur agar dibiarkan kering.
Diketahui bahwa C. perfringens tergores pada kedua bagian piring. Semua jenis C.perfringens
menghasilkan toksin alfa yang merupakan lesitinase ( sejenis fosfolipase). Pada setengah pelat
tanpa antitoksin, lesitin dalam media diserang sehingga menyebabkan opalesensi di daerah coretan.
Reaksi lesitinase dinetral pada setengah piring dengan antitoksin namun pertumbuhan C.
perfringens tidak terpengaruh sama sekali

f. Reaksi CAMP dari C. perfringens

Faktor difusi yang dihasilkan oleh streptococcus agalactiae meningkatkan hemolisis parsial toksin
alfa C.perfringens. hemolisis lengkap terlihat segera disekitar C.perfringens koloni disebabkan oleh
toksin theta.
 Clostridia Histotosik yang Mempengaruhi Hati.
Clostridium novy tipe B dapat dtemukan biasanya di tanah dan di saluran usus normal
herbivora. Ini akan menghasilkan penyakit hitam (hepatitis nekrotik) pada hewan domba.
Clostridium hemolitikum ( C. novy tipe D) dapat dijumpai di saluran pencernaan ruminansia (sapi
dsb), hati dan di dalam tanah dan juga merupakan salah satu penyebab haemoglobinuria basiler
pada sapi. Clostridium colinum, yaitu penyebab penyakit puyuh, diekskresikan dalam kotoran
burung dengan kondisi kronis. Sebuah racun belum diidentifikasi untuk spesies clostridial ini.
Nekrosis hati hadir dalam beberapa kasus selain lesi usus.

Patogenesis
Toksin ala diproduksi oleh C.novy tipe A dan B, toksin ini adalah sitolisin yang bergantung
pada kolestrol dan juga termasuk dalam keluarga toksin klostridial yang dikenal “sitotoksin
klostridial besar”. Perfringolisin diproduksi oleh C. perfringens dan racn alfa dan beta dari C. sulit
dan C. sordellii juga termasuk dalam kelompok tersebut. Toksin mematikan protein pengikat GTP
dengan berat molekul rendah melewati glukosilasi yang mengganggu sitoskeleton. Yang
mengakibatkan kematian sel.
Pada penyakit hitam dan hemoglobinuria basiler, spora yang biasanya ada di usus dapat
mencapai hati dan tetap dorman di sel Kupffer. Kerusakan traumatis pada hati, terutama karena
mirasi cacing hati, menghasilkan kerusakan jaringan dan kondisi anaerobic yang cocok buat
perkecambahan spora. Ada juga replikasi clostridia yang mengakibatkan toksemia, bakteremia dan
sering kali kematian.