Clostridium

By : Group 3 & 4
Member :
• Apriliyan Eko B
• Nila Arum Sari
• Mochamad Iqbal G
• Deni Setiawan
• Rizwansyah
• M Yahya
Clostridium

 Clostridium sp. adalah bakteri gram positif yang

berbentuk batang dan bersifat anaerobik yang dapat
menghasilkan endospora.
 Beberapa spesies bersifat patogenik dan banyak yang
terdapat sebagai saprofit di dalam tanah dan saluran
pencernaan manusia dan hewan.
 Contoh bakteri Clostridium sp. yang bersifat patogen
adalah C.perfringens, C.difficele, C.batulinum dan
C.tetani.
 C. tetani dan C. botulinum menghasilkan toksik
biologis yang kuat yang dikenal dapat menginfeksi
manusia.
Clostridium

 Clostridium dapat memfermentasi senyawa organik,

seperti gula, menghasilkan sejumlah besar CO2 dan H2
serta senyawa organik yang mudah menguap seperti
asetat dan asam butirat, aseton dan butanol.
 Clostridium juga memiliki enzim ekstraseluler yang
mampu mendegradasi molekul biologis yang besar di
lingkungan menjadi senyawa difermentasi.
 Clostridium terbagi dalam beberapa kelompok seperti
Clostridium perfringens yang dapat menyebabkan
keracunan pada daging, luka dan infeksi bedah,
Clostridium tetani, yang dapat menyebabkan infeksi
tetanus yang mematikan, dan Clostridium botulinum
yang menyebabkan botulisme.
Klasifikasi

 Kingdom : Bakteri
 Filum : Firmicutes
 Class : Clostridium
 Ordo : Clostridiumles
 Famili : Clostridiumceae
 Genus : Clostridium
 Spesies : C.perfringens, C.difficele,
C.batulinum dan C.tetani.
www.depts.washington.edu.
 Spesies Patogen
 Spesies bakteri yang bersifat • Sedangkan yang bersifat
patogen nonpatogen
C. perfringens
•
• C. sporogenes,
• C. septicum
• C. ramosum.
• C. novyii type A
• C. sordelli
• C. innocuum,
• C. tetani • C. paraputrificum,
• C. difficile • C. cadaveris,
• C. botulinum • C. bifermentans,
• C. butyricum • C. fallax,
• C. baratii • C. Clostridioforme
• C. tertium
• C. histolyticum.
Spesies Patogen

Clostridium perfringens

o menghasilkan sejumlah besar invasins dan eksotoksin

o enzim: hemolysins (β-hemolisis), lecithinase, protease
ekstraseluler, lipase (fosfolipase-C), kolagenase,
hyaluronidase, enzim saccharolytic dan mampu
mengurangi sulfit ke sulfida
o enterotoksin yang menyebabkan keracunan makanan
o ditemukan pada makanan kaleng (perkecambahan
endospora) dan air
o nonmotile
 Spesies Patogen
Clostridium tetani
o menghasilkan toksin: tetanospasmin (penyebab tetanus)
o anaerob (tidak tahan terhadap oksigen)
o tidak tahan terhadap panas
o flagella memberikan motilitas terbatas
o terminal spora (tahan terhadap panas dan paling antiseptik)
o khas gram positif, mungkin noda gram-negatif atau gram-variabel,
terutama di sel tua
Spesies Patogen
Clostridium botulinum
 tujuh subtipe (AG) menghasilkan toksin botulinum
yang berbeda (jenis C dan D tidak patogen)
 tumbuh dalam kondisi oksigen yang rendah
 endospora subterminal (tahan sampai mendidih
tanpa tekanan)
 berasal dari tanah, sedimen air, vegetasi yang
busuk, dan ditemukan pada makanan kaleng
(perkecambahan endospora)
 keasaman, konsentrasi gula tinggi, kelembaban
yang rendah atau tingkat oksigen tinggi yang dapat
menghambat pertumbuhan
 enzim: produksi lipase pada telur agar kuning
Penyakit yang diakibatkan oleh
Clostridium digolongkan berdasar
jenis toksin yang dihasilkan
Tipe ToksinUtama
Alfa Beta Epsilon Iota

A + − − −
B + + + −
C + + − −
D + − + −
E + − − +
Penyakit

 Clostridium perfringens Tipe A

 Gastritis dan hemolitik pada ruminan
(enterotoxemic dan jaundice)
 Enteritis hemoragik pada sapi, dan kuda
 Enteritis nekrotik pada unggas
 Diare pada anjing dan kucing
 Clostridium perfringens Tipe B
 Dysentry lambung pada hewan yang baru lahir,
kadang terjadi juga pada anak kuda, anak sapi,
domba dan kambing dewasa
Penyakit

 Clostridium perfringens Tipe C

 Enterotoksemia hemoragik pada anak sapi,
anak kuda, anak babi, dan anak domba baru
lahir
 Enteritis nekrotik pada unggas dan burung
 Clostridium perfringens Tipe D
 Enterotoksemia (overeating disease, pulpy
kidney disease)  pada domba kurang dari 1
tahun, terkadang pada sapi dan kambing
 Faktor kunci toksin epsilon
Diagram Alir Identifikasi Spesies
Clostridium
Diagram Alir Identifikasi Spesies
Clostridium
Diagram Alir Identifikasi Spesies
Clostridium
Diagram Alir Identifikasi Spesies
Clostridium
Diagnosa

 Uji Biokimia
 Matrix-Assisted Laser Desorpi
 Nucleid Acid Amplification (NAATs)

LANJUT
Uji Biokimia
 Nagler Uji TP 22 – Uji Nagler
Tes Nagler menentukan kemampuan mikroorganisme
untuk menghasilkan enzim lecithinase. Lecithinase
organisme memproduksi diidentifikasi oleh zona
opalescence sekitar koloni individu pada kuning telur
agar. C. perfringens lecithinase dihambat oleh
antitoksin C. perfringens tipe A. Clostridium baratii,
Clostridium absonum, Clostridium bifermentans,
Clostridium sordelli dan Clostridium novyi juga
memproduksi lecithinase. C. sordelli dan C.
bifermentans menghasilkan enzim yang juga terkait
erat dengan C. perfringens alpha toksin (lecithinase)
dan dapat menghasilkan parsial lintas reaction (Collee
1996). Hasil positif Nagler ditandai dengan produksi
lecithinase dan penghambatan karena antitoksin.
Catatan: Dalam beberapa tahun terakhir, popularitas
tes Nagler telah menurun karena antitoksin yang
belum banyak tersedia. Sebuah alternatif untuk tes
Nagler digunakan di beberapa laboratorium adalah tes
CAMP terbalik.
 Uji CAMP terbalik
Uji CAMP terbalik dapat digunakan untuk diferensiasi
C. perfringens dari Spesies Clostridium lainnya. Racun
Alpha diproduksi oleh C. perfringens dan kelompok B,
β-hemolitik streptococci tumbuh dalam pola
karakteristik pada agar darah; Namun perawatan harus
diambil untuk memastikan kultur murni dapat
digunakan (Buchanan 1982). Indole tes TP 19 - Uji
indol Tes indole menentukan kemampuan suatu
organisme untuk menghasilkan indole dari degradasi
asam amino triptofan. Anaerob, khususnya spesies
Clostridium, membentuk indole tapi dapat cepat
memecahnya seperti yang diproduksi; Oleh karena itu,
reaksi negatif palsu dapat terjadi (Reed 1942). C.
novyi strain A memberikan variabel hasil tes indole
tapi biasanya indole negatif.
 Urease uji TP 36 – Uji Urease
Tes urease digunakan untuk menentukan kemampuan
suatu organisme untuk membagi urea, melalui
produksi enzim urease. C. sordellii yang urease positif
sedangkan C. Bifermentans menunjukkan urease
negatif.

 Uji Lipase
Tes lipase menentukan kemampuan mikroorganisme
untuk menghasilkan enzim lipase yang mengkatalisis
hidrolisis trigliserida dan digliserida asam lemak dan
gliserol. Hal ini ditunjukkan dengan kemilau warna-
warni dan sekitarnya koloni di piring menengah. Hal
ini membantu dalam diferensiasi spesies Clostridium.
C. botulinum, C. sporogenes, C. novyi A, C. ghonii dan
C. cochlearium menghasilkan lipase. C. leptum
memberikan variabel reaksi lipase tapi biasanya lipase
negatif.
BACK
 Matrix-Assisted Laser Desorpi
 Matrix-dibantu laser yang desorpsi ionisasi waktu-of-
flight spektrometri massa (MALDITOF MS), yang dapat
digunakan untuk menganalisis komposisi protein dari sel
bakteri, telah muncul sebagai teknologi baru untuk
identifikasi spesies. Ini telah terbukti menjadi alat
cepat dan kuat karena reproduktifitas, kecepatan dan
sensitivitas analisis. Keuntungan dari MALDI-TOF
dibandingkan dengan metode identifikasi lain adalah
bahwa hasil analisis yang tersedia dalam beberapa jam
daripada beberapa hari. Kecepatan dan kesederhanaan
persiapan sampel dan hasilnya akuisisi terkait dengan
biaya konsumsi minimal membuat metode ini cocok
untuk digunakan (Barbuddhe 2008).
 Ini telah digunakan untuk identifikasi spesies
Clostridium terutama untuk membedakan ribotypes
berbeda antara isolat C. difficile. Namun, database
yang luas adalah penting untuk mengidentifikasi spesies
dan strain terkait erat andal dan tersedia database
perlu dioptimalkan (Veloo 2011). Keterbatasan lain
untuk penggunaan teknik ini adalah adanya spora
Clostridium spesies dan budaya sehingga muda sekarang
digunakan untuk meminimalkan spektral interference .
Nucleid Acid Amplification
(NAATs)
PCR biasanya dianggap sebagai metode yang baik untuk
deteksi bakteri karena sederhana, cepat, sensitif dan
spesifik. Dasar untuk aplikasi diagnostik PCR dalam
mikrobiologi adalah deteksi agen infeksi dan
diskriminasi non-patogenik dari strain patogen
berdasarkan gen tertentu. Namun, itu memang memiliki
keterbatasan. Meskipun gen 16S rRNA umumnya
ditargetkan untuk desain spesies-spesifik PCR primer
untuk identifikasi, merancang primer sulit ketika urutan
dari gen homolog memiliki kesamaan yang tinggi. Ini
telah berhasil digunakan dalam identifikasi spesies
Clostridium misalnya C. perfringens, C. botulinum, C.
baratii dan C. butyricum, C. novyi, C. Difficile 40-44.
Identifikasi Lanjut

 Metode cepat
 Neon Amplified Fragment Length Polymorphism
(AFLP)
SEKIAN