Diterjemahkan dari bahasa Afrikans ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

BCR-ABL mengatakan

Xpert R MTB / RIF

GXMTB / RIF-10

In VitroPerangkat Medis Diagnostik 301-0191 Pdt. C, Mei 2012

Hak Cipta © Cepheid. Cepheid®, logo Cepheid, GeneXpert®, dan Xpert® adalah merek dagang dari Cepheid.

Produk ini dilisensikan di bawah Paten AS No. 5.851.767 dan klaim terkait dari setiap rekanan non-AS daripadanya.
Produk ini dijual di bawah lisensi dari Lembaga Penelitian Kesehatan Masyarakat dan dapat digunakan di bawah hak paten PHRI hanya untuk manusiain vitro
diagnostik.

TIDAK ADA HAK LAIN YANG DILAKUKAN SECARA TERSURAT, MELALUI IMPLIKASI ATAU OLEH ESTOPPEL KEPADA PATEN LAINNYA. LEBIH LANJUT, TIDAK ADA HAK UNTUK
DIJUAL KEMBALI DENGAN PEMBELIAN PRODUK INI.
bahasa Inggris

In VitroPerangkat Medis Diagnostik

PROPRIETARYSEBUAH
AME Uji Xpert® MTB / RIF

COMMON ATAUANDASUAL
SEBUAHAME Uji Xpert MTB / RIF

SEBUAH. SayaDIPERBOLEHKANANDAMENGATAKAN

Xpert MTB / RIF Assay untuk digunakan dengan sistem Cepheid GeneXpert® adalah PCR real-time
semi-kuantitatif bersarangin vitroTes diagnostik untuk mendeteksi:

• Mycobacterium tuberculosisDNA kompleks dalam sampel sputum atau sedimen pekat yang dibuat
dari sputum yang diinduksi atau diekspektorasi yang merupakan BTA positif atau negatif

• Mutasi terkait resistensi rifampisin darirpoBgen dalam sampel dari pasien yang berisiko
resistensi rifampisin
The Xpert MTB / RIF Assay dimaksudkan untuk digunakan dengan spesimen dari pasien yang tidak diobati
yang ada kecurigaan klinis tuberkulosis (TB). Penggunaan Xpert MTB / RIF Assay untuk mendeteksi
M.tuberkulosis(MTB) atau penentuan kerentanan rifampisin belum divalidasi untuk pasien yang
menerima pengobatan untuk tuberkulosis.

B. SUMMARY DANEXPLANASI
Secara global, sekitar 2 miliar orang terinfeksi MTB.1Setiap tahun hampir 9 juta orang mengembangkan
penyakit aktif, dan 2 juta orang meninggal karena penyakit tersebut. MTB aktif, yang sebagian besar bersifat
paru, adalah penyakit menular melalui udara. Mengingat sifat infeksi MTB, diagnosis yang cepat dan akurat
merupakan elemen penting dari pengobatan dan pengendalian MTB.

Perawatan melibatkan pemberian beberapa obat dalam waktu lama dan biasanya sangat efektif. Namun, jenis MTB
dapat menjadi resisten terhadap satu atau lebih obat, yang membuat penyembuhan sulit dicapai. Empat obat lini
pertama yang umum digunakan dalam terapi anti-tuberkulosis adalah:

• Isoniazid (INH)
• Rifampisin (RIF atau Rifampisin)

• Etambutol (EMB)
• Pirazinimida (PZA)
Resistensi RIF jarang terjadi dalam isolasi dan biasanya menunjukkan resistensi terhadap sejumlah obat anti-TB
lainnya.2Resistensi RIF paling sering terlihat pada strain resisten multi-obat (MDR-TB) dan memiliki frekuensi yang
dilaporkan lebih besar dari 95% pada isolat tersebut.3, 4, 5MDR-TB didefinisikan sebagai penyakit tuberkulosis yang
disebabkan oleh strain bakteri yang resisten terhadap setidaknya INH dan RIF. Resistensi terhadap RIF atau obat lini
pertama lainnya biasanya menunjukkan perlunya pengujian kerentanan penuh, termasuk pengujian terhadap agen
lini kedua.

301-0191 Pdt. C, Mei 2012 1

bahasa Inggris

Deteksi molekuler MTB danrpoBmutasi gen yang terkait dengan resistensi RIF mempercepat diagnosis baik
yang rentan terhadap obat maupun TB-MDR. Dengan Xpert MTB / RIF Assay, hal ini dapat dilakukan pada
sampel dahak segar dan pada sedimen yang telah disiapkan dalam waktu kurang dari 2,5 jam. Deteksi cepat
resistensi MTB dan RIF memungkinkan dokter untuk membuat keputusan manajemen pasien yang kritis
mengenai terapi selama pertemuan medis yang sama.

C. PRINSIP DARIPTATA CARA

Sistem GeneXpert Dx mengintegrasikan dan mengotomatiskan pemrosesan sampel, amplifikasi asam nukleat,
dan deteksi sekuens target dalam sampel sederhana atau kompleks menggunakan PCR waktu nyata dan PCR
transkriptase terbalik. Sistem ini terdiri dari instrumen, komputer pribadi, pemindai kode batang, dan
perangkat lunak yang dimuat sebelumnya untuk menjalankan tes pada sampel yang dikumpulkan dan melihat
hasilnya. Sistem ini memerlukan penggunaan kartrid GeneXpert sekali pakai sekali pakai yang menampung
reagen PCR dan menampung proses PCR. Karena kartrid mandiri, kontaminasi silang antar sampel
dihilangkan. Untuk deskripsi lengkap tentang sistem, lihatManual Operator Sistem GeneXpert Dxatau Manual
Operator Sistem GeneXpert Infinity.

Xpert MTB / RIF mencakup reagen untuk mendeteksi resistensi MTB dan RIF dan Sample Processing Control
(SPC) untuk mengontrol pemrosesan bakteri target yang memadai dan untuk memantau keberadaan
inhibitor dalam reaksi PCR. Probe Check Control (PCC) memverifikasi rehidrasi reagen, pengisian tabung
PCR di dalam kartrid, integritas probe, dan stabilitas pewarna.

Primer dalam Xpert MTB / RIF Assay memperkuat sebagian darirpoBgen yang mengandung 81
pasangan basa wilayah "inti". Probe mampu membedakan antara sekuens tipe liar yang
dilestarikan dan mutasi di wilayah inti yang terkait dengan resistensi RIF.

D. REAGEN DANSayaNSTRUMENTS

D.1 MATERIALPDIKEMBALIKAN
Kit Xpert MTB / RIF (GXMTB / RIF-10) berisi reagen yang cukup untuk memproses 10
spesimen pasien atau kontrol kualitas.
Kit berisi item berikut:
• CD
• File definisi pengujian (ADF)

• Petunjuk untuk mengimpor ADF ke perangkat lunak GX

• Sisipan Paket
• Kartrid Xpert MTB / RIF dengan tabung reaksi terintegrasi 10
• Manik 1 (kering beku) 2 per kartrid
- Primer
- Probe
- KCl
- MgCl2
- HEPES, pH 8,0
- Albumin serum sapi (BSA)

2 301-0191 Pdt. C, Mei 2012

 D. Reagen dan Instrumen

• Manik 2 (kering beku) 2 per kartrid

- Menguji

- Polimerase
- KCl
- MgCl2
- dNTP
- HEPES, pH 7,2
- BSA
• Manik 3 (kering beku) 1 per kartrid

- Sekitar 6000 spora kontrol preparasi sampel non-

infeksius
Reagen 1 (tris buffer, EDTA, dan surfaktan) 4 mL per kartrid
• Reagen 2 (tris buffer, EDTA, dan surfaktan) 4 mL per kartrid
• Reagen Sampel (SR) - natrium hidroksida dan isopropanol 10 x 8 mL botol
• Pipet transfer sekali pakai 12

Catatan: Larutan Sample Reagent (SR) bening, mulai dari tidak berwarna hingga kuning keemasan.

Catatan: Lembar Data Keselamatan (SDS) tersedia di www.cepheid.com/tests-and-reagents/literature/msds atau

www.cepheidinternational.com/tests-and-reagents/literature/msds.

Catatan: Albumin serum sapi (BSA) dalam manik-manik dalam produk ini diproduksi secara eksklusif dari plasma sapi
yang bersumber di Amerika Serikat. Pembuatan BSA juga dilakukan di Amerika Serikat. Tidak ada protein
ruminansia atau protein hewani lainnya yang diberikan kepada hewan; hewan lulus pengujian ante- dan
post-mortem. Selama pengolahan, tidak ada pencampuran bahan dengan bahan hewani lainnya.

Catatan: Pipet transfer memiliki satu tanda yang menunjukkan volume minimum sampel yang diperlukan untuk ditransfer
ke kartrid GX. Gunakan hanya untuk tujuan ini. Semua pipet lainnya harus disediakan oleh laboratorium.

D.2 SPENYIMPANAN DANHANDLING

Simpan kartrid dan reagen Xpert MTB / RIF pada 2 hingga 28 ° C.

• Jangan gunakan reagen atau kartrid yang telah melewati tanggal kedaluwarsa.

• Jangan membuka tutup kartrid sampai Anda siap melakukan pengujian.

Proses kartrid dalam waktu 4 jam setelah sampel ditambahkan ke kartrid.

• Kartrid stabil hingga 2 minggu pada 2 hingga 48 ° C setelah kantong dibuka.

301-0191 Pdt. C, Mei 2012 3

bahasa Inggris

E. MATERIALRDIPERLUKAN TAPISEBUAHLemburPDIKEMBALIKAN

• Sistem GeneXpert Dx dilengkapi denganPerangkat lunak GX4.0 atau lebih tinggi(nomor katalog bervariasi
menurut konfigurasi): Instrumen GeneXpert, komputer, pembaca kode batang, dan manual operator

• Pencetak (LihatManual Operator Sistem GeneXpert Dx atau Manual Operator GeneXpert Infinityuntuk
pedoman kompatibilitas)

• Wadah pengumpulan spesimen anti bocor, steril, tertutup sekrup

• Sarung tangan sekali pakai dan pelindung mata

• Label atau spidol permanen

• Transfer pipet untuk pemrosesan sampel

F. WARNING DANPPERHATIAN
• Perlakukan semua spesimen biologis, termasuk kartrid bekas, seolah-olah mampu menularkan agen infeksi.
Karena seringkali tidak mungkin untuk mengetahui mana yang mungkin menular, semua spesimen
biologis harus diperlakukan dengan kewaspadaan standar. Pedoman penanganan spesimen tersedia dari
Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit AS6dan Institut Standar Klinis dan Laboratorium (sebelumnya
Komite Nasional untuk Standar Laboratorium Klinis)7.

• Kenakan sarung tangan pelindung sekali pakai, jas laboratorium, dan pelindung mata saat menangani spesimen
dan reagen. Cuci tangan secara menyeluruh setelah menangani spesimen dan reagen uji.

• Ikuti prosedur keselamatan institusi Anda untuk bekerja dengan bahan kimia dan menangani sampel
biologis.

• Kinerja Xpert MTB / RIF Assay untuk mendeteksi kompleks MTB belum ditunjukkan dari
spesimen non-pernapasan, seperti darah, CSF, tinja atau urin. Kinerja Xpert MTB / RIF
Assay belum dievaluasi dengan spesimen yang diproses dengan metode selain yang
dijelaskan dalam sisipan paket ini.
• Saat memproses lebih dari satu sampel sekaligus, buka hanya satu kartrid, tambahkan sampel yang diolah dengan
Reagen Sampel (atau sampel yang didekontaminasi dan dicairkan), dan tutup kartrid sebelum menambahkan
sampel yang diolah dengan Reagen Sampel ke kartrid berikutnya.

• Jangan membuka tutup kartrid Xpert MTB/RIF kecuali saat menambahkan sampel yang telah diolah.

• Jangan gunakan kartrid yang terjatuh atau terguncang setelah Anda menambahkan sampel yang telah diolah.

• Jangan gunakan kartrid jika terlihat basah atau jika segel tutup tampaknya telah rusak.

• Jangan gunakan kartrid yang tabung reaksinya rusak.

• Setiap cartridge Xpert MTB/RIF digunakan untuk satu kali proses pengujian. Jangan gunakan kembali kartrid yang telah diproses.

• Periksa persyaratan pembuangan limbah berbahaya dan medis regional / negara Anda. Jika peraturan (atau
kekurangannya) tidak memberikan arahan yang jelas tentang pembuangan yang tepat, spesimen biologis, termasuk
kartrid bekas, harus diperlakukan sebagai bahan yang mampu menularkan agen infeksi. Buang kartrid bekas sebagai
limbah perawatan kesehatan berbahaya dalam wadah limbah tahan lama sesuai dengan pedoman penanganan dan
pembuangan limbah medis WHO [Organisasi Kesehatan Dunia}.

Sampel Reagen mengandung natrium hidroksida (pH> 12,5) dan isopropanol. Berbahaya jika tertelan (H302),
menyebabkan kulit terbakar parah dan kerusakan mata (H314). Cairan dan uap yang sangat mudah terbakar
(H225).

4 301-0191 Pdt. C, Mei 2012

 G. Pengumpulan dan Transportasi Spesimen

G. SPECIMENCPENGUMPULAN DANTRANSPORT
Anda dapat memproses sedimen yang disuspensikan kembali atau dahak segar dengan pengujian ini. Lihat Tabel 1 untuk menentukan

volume spesimen yang memadai.

Tabel 1.Volume Spesimen yang Diperlukan

Volume Total Minimum untuk Tes dan Tes

Jenis Spesimen Volume Minimum untuk Satu Tes Ulang

Sedimen dahak 0,5 mL 1 mL

dahak segar 1 mL 2 mL

Catatan: Untuk mendapatkan spesimen dahak segar yang memadai, ikuti petunjuk di bagian ini. Pasien harus
duduk atau berdiri.

G.1 SPENYIMPANAN DAN TRANSPORTASI

Simpan dan pindahkan spesimen pada suhu 2 hingga 8 ° C sebelum diproses bila memungkinkan. Namun bila perlu
spesimen dapat disimpan pada suhu maksimum 35°C selama - 3 hari dan pada suhu 2 sampai 8°C selama 4 sampai
10 hari.

G.2 SPECIMENCPENGUMPULANPTATA CARA

1.Minta pasien berkumur dua kali dengan air.
2.Buka tutup wadah penampung dahak.
3.Minta pasien menarik napas dalam-dalam, batuk kuat-kuat, dan mengeluarkan bahan ke dalam
wadah. Hindari tumpahan atau mengotori bagian luar wadah.

4.Amankan tutupnya pada perangkat pengumpul, lalu kirim wadah ke area pemrosesan.

H. SEBUAHSAYPTATA CARA(S)

H.1 SPUTUMSEDIMENPTATA CARA

Catatan: Tolak spesimen dengan partikel makanan yang jelas atau partikulat padat lainnya.

Persyaratan Volume: Sedimen dahak disiapkan menurut metode Kent dan Kubica8dan disuspensikan
kembali dalam buffer Fosfat / H2O 67mM) dapat diuji menggunakan Xpert MTB / RIF Assay. Setelah
resuspensi, simpan setidaknya 0,5 mL sedimen yang disuspensi ulang untuk Xpert MTB / RIF Assay.

1.Labeli setiap kartrid Xpert MTB / RIF dengan ID sampel.

Catatan: Tulis di sisi kartrid atau tempelkan label ID. Jangan menempelkan label pada tutup cartridge atau menutupi
barcode 2D yang ada pada cartridge.

2.Pindahkan setidaknya 0,5 mL dari total pelet yang disuspensikan kembali ke dalam tabung bertutup ulir
berbentuk kerucut untuk Xpert MTB / RIF menggunakan pipet transfer. Atau, seluruh sampel dapat
diproses dalam tabung asli.

Catatan: Simpan sedimen yang tersuspensi kembali pada 2 hingga 8 ° C jika tidak segera diproses. Jangan disimpan lebih
dari 12 jam.

3.Pindahkan 1,5 mL Xpert MTB / RIF Sample Reagent (SR) ke 0,5 mL sedimen yang disuspensikan kembali
menggunakan pipet transfer.

301-0191 Pdt. C, Mei 2012 5

bahasa Inggris

4.Kocok kuat-kuat 10 hingga 20 kali atau vortex setidaknya selama 10 detik.

Catatan: Satu gerakan maju mundur adalah satu goyangan.

5.Inkubasi selama 10 menit pada suhu kamar, lalu kocok spesimen dengan kuat 10 hingga 20 kali
atau vortex setidaknya selama 10 detik.

6.Inkubasi sampel pada suhu kamar selama 5 menit tambahan.

H.2 EDIPERHATIKANSPUTUMSCUKUPPTATA CARA

Catatan: Tolak spesimen dengan partikel makanan yang jelas atau partikulat padat lainnya.

1.Labeli setiap kartrid Xpert MTB / RIF dengan ID sampel.

Catatan: Tulis di sisi kartrid atau tempelkan label ID. Jangan menempelkan label pada tutup cartridge atau menutupi
barcode 2D yang ada pada cartridge.

Gambar 1.Menulis pada kartrid dengan spidol permanen

2. Dalam wadah pengumpulan dahak anti bocor:

SEBUAH.Buka tutup wadah penampung dahak dengan hati-hati.

Gambar 2.Membuka wadah sampel

B.Tuangkira-kira 2 kali volume SR ke dalam sputum (pengenceran 2:1, SR:

sputum).

Contoh 1 Contoh 2
8 mL SR: 4 mL dahak 2 mL SR: 1 mL dahak
Catatan:Buang sisa SR dan
botolnya ke dalam wadah
3 mL garis
limbah kimia.
1 ml dahak

Gambar 3.Contoh pengenceran 2: 1

6 301-0191 Pdt. C, Mei 2012

 H. Prosedur Pengujian

C.Ganti dan kencangkan tutupnya.

D.Kocok kuat-kuat 10 hingga 20 kali atau vortex setidaknya selama 10 detik.

Catatan: Satu gerakan maju mundur adalah satu goyangan.

3.Inkubasi sampel selama 10 menit pada suhu kamar, lalu kocok spesimen dengan kuat 10
hingga 20 kali atau vortex setidaknya selama 10 detik.

4.Inkubasi sampel pada suhu kamar selama 5 menit tambahan.

H.3 PMEMPERBAIKICARTRIDGE

Catatan: Mulai tes dalam waktu 4 jam setelah menambahkan sampel ke kartrid.

1.Buka tutup kartrid, lalu buka wadah sampel.

2.Menggunakan pipet transfer yang disediakan, aspirasi sampel cair ke garis pada pipet. Jangan
memproses sampel lebih lanjut jika volumenya tidak mencukupi. Lihat Gambar 4.

Gambar 4.Aspirasi ke garis pada pipet

3.Pindahkan sampel ke dalam ruang sampel kartrid Xpert MTB/RIF. Keluarkan sampel secara
perlahan untuk meminimalkan risiko pembentukan aerosol. Lihat Gambar 5.

Gambar 5.Mengeluarkan sampel cair yang didekontaminasi ke dalam ruang sampel kartrid

4.Tutup penutup kartrid dengan kuat.

Penting: Pastikan untuk memuat kartrid ke dalam instrumen GeneXpert Dx dan mulai pengujian
dalam waktu 5 jam setelah menyiapkan kartrid.

301-0191 Pdt. C, Mei 2012 7

bahasa Inggris

H.4 SMENCARINYATEst

Penting: Sebelum Anda memulai pengujian, pastikan sistem menjalankan perangkat lunak GX
4.0 atau lebih tinggi dan file definisi pengujian Xpert MTB / RIF diimpor ke perangkat
lunak.

Bagian ini mencantumkan langkah-langkah dasar untuk menjalankan pengujian. Untuk petunjuk
rinci, lihat Manual Operator Sistem GeneXpert DxatauManual Operator Sistem GeneXpert Infinity,
tergantung model yang digunakan.

Catatan: Langkah-langkah yang Anda ikuti dapat berbeda jika administrator sistem mengubah alur kerja default sistem.

1.Nyalakan instrumen GeneXpert:

• Jika menggunakan instrumen GeneXpert Dx, pertama-tama nyalakan instrumen GX Dx, lalu nyalakan
komputer. Perangkat lunak GeneXpert akan diluncurkan secara otomatis.

atau
• Jika menggunakan instrumen GeneXpert Infinity, nyalakan instrumen. Pada
desktop Windows®, klik dua kali ikon pintasan Perangkat Lunak.

2.Masuk ke perangkat lunak GeneXpert Dx System menggunakan nama pengguna dan kata sandi Anda.

3.Di
jendela GeneXpert Dx System, klikBuat Tes. Kotak dialog Scan Sample ID
muncul.
4.DalamContoh IDkotak, pindai atau ketik ID sampel. Pastikan Anda mengetik ID sampel
yang benar (ID sampel dikaitkan dengan hasil tes dan ditampilkan diLihat hasiljendela
dan semua laporan). Kotak dialog Scan Cartridge Barcode muncul.

5.Scan barcode pada cartridge Xpert MTB/RIF. Jendela Buat Tes muncul. Menggunakan informasi
kode batang, perangkat lunak secara otomatis mengisi kotak untuk bidang berikut: Pilih
Pengujian, ID Lot Reagen, SN Kartrid, dan Tanggal Kedaluwarsa.

6.KlikMulai Tes. Masukkan kata sandi Anda jika diminta.

7.Buka pintu modul instrumen dengan lampu hijau berkedip dan masukkan kartrid.

8.Tutup pintu. Tes dimulai dan lampu hijau berhenti berkedip. Ketika tes selesai,
lampu mati.
9.Tunggu hingga sistem melepaskan kunci pintu di akhir proses, lalu buka pintu modul
dan keluarkan kartrid.

8 301-0191 Pdt. C, Mei 2012

 H. Prosedur Pengujian

H.5 DISCARDINGANDASEDCARTRIDGE
1.Buang kartrid bekas ke dalam wadah biohazard sisi keras sesuai dengan praktik standar
institusi Anda.

2.Jangan membakar kartrid bekas.

3.Jangan membuang kartrid bekas di tempat pembuangan akhir atau tempat pembuangan.

H.6 VIEWING DANPMENCINTAIRHASIL

Untuk petunjuk rinci tentang cara melihat dan mencetak hasilnya, lihat CepheidManual Operator
Sistem GeneXpert DxatauManual Operator Sistem GeneXpert Infinity, tergantung model yang
digunakan.

301-0191 Pdt. C, Mei 2012 9

bahasa Inggris

SAYA. QKUALITASCMEMERIKSA
Setiap pengujian mencakup Kontrol Pemrosesan Sampel (SPC) dan Kontrol Pemeriksaan Probe (PCC).

SPC: Memastikan sampel diproses dengan benar. SPC berisi spora tidak menular dalam bentuk kue spora
kering yang disertakan dalam setiap kartrid untuk memverifikasi pemrosesan MTB yang memadai. SPC
memverifikasi bahwa lisis MTB telah terjadi jika organisme ada dan memverifikasi bahwa pemrosesan
spesimen memadai. Selain itu, kontrol ini mendeteksi penghambatan terkait spesimen dari uji PCR waktu
nyata.

SPC harus positif dalam sampel negatif dan bisa negatif atau positif dalam sampel positif. SPC lolos
jika memenuhi kriteria penerimaan yang divalidasi. Hasil tes akan “Invalid” jika SPC tidak terdeteksi
dalam tes negatif.
PCC: Sebelum reaksi PCR dimulai, Sistem GeneXpert Dx mengukur sinyal fluoresensi dari probe untuk
memantau rehidrasi manik, pengisian tabung reaksi, integritas probe, dan stabilitas pewarna. PCC
lolos jika memenuhi kriteria penerimaan yang ditetapkan.

J. SayaINTERPRETASI DARIRHASIL
Sistem Instrumen GeneXpert menghasilkan hasil dari sinyal fluoresen terukur dan algoritme
kalkulasi tertanam. Hasilnya bisa dilihat diLihat hasiljendela. Lihat Gambar 6, 7, dan 8 untuk
contoh spesifik, dan lihat Tabel 2 untuk daftar semua kemungkinan hasil.

Gambar 6.MEDIUM TERDETEKSI MTB; Rif Resistance TERDETEKSI (Tampilan Pengguna Istimewa)

10 301-0191 Pdt. C, Mei 2012

 J. Interpretasi Hasil

Gambar 7.MTB TERDETEKSI RENDAH; Resistensi Rif TIDAK TERDETEKSI (Tampilan Pengguna Istimewa)

Angka 8.MTB TIDAK TERDETEKSI (Tampilan Pengguna Istimewa)

301-0191 Pdt. C, Mei 2012 11

bahasa Inggris

Meja 2.Hasil dan Interpretasi Pengujian Xpert MTB / RIF

Hasil Penafsiran
Target MTB hadir dalam sampel:
MTB TERDETEKSI;
• Sebuah mutasi pada gen rpoB telah terdeteksi yang termasuk dalam pengaturan delta Ct yang
Tahanan Rif TERDETEKSI
valid.
• SPC: NA (tidak berlaku). Sinyal SPC tidak diperlukan karena amplifikasi
MTB dapat bersaing dengan kontrol ini.
• Pemeriksaan Probe: LULUS. Semua hasil pemeriksaan probe lulus.

Target MTB hadir dalam sampel:

MTB TERDETEKSI;
• Tidak ada mutasi pada gen rpoB yang terdeteksi.
Resistensi Rif TIDAK TERDETEKSI
• SPC: NA (tidak berlaku). Sinyal SPC tidak diperlukan karena amplifikasi
MTB dapat bersaing dengan kontrol ini.
• Pemeriksaan Probe: LULUS. Semua hasil pemeriksaan probe lulus.

Target MTB hadir dalam sampel:

MTB TERDETEKSI;
Resistansi RIF tidak dapat ditentukan karena deteksi sinyal yang tidak memadai.
Resistensi Rif TAK TERTENTU
• SPC: NA (tidak berlaku). Sinyal SPC tidak diperlukan karena amplifikasi
MTB dapat bersaing dengan kontrol ini.
• Pemeriksaan Probe: LULUS. Semua hasil pemeriksaan probe lulus.

Target MTB tidak terdeteksi dalam sampel:

MTB Tidak Terdeteksi
• SPC: LULUS. SPC dengan kriteria penerimaan.
• Pemeriksaan Probe: LULUS. Semua hasil pemeriksaan probe lulus.

Ada atau tidak adanya MTB tidak dapat ditentukan. SPC tidak memenuhi kriteria
TIDAK SAH
penerimaan, sampel tidak diproses dengan benar, atau PCR terhambat. Ulangi tes.
Lihat bagian Prosedur Tes Ulang pada dokumen ini.
• MTB INVALID: Ada atau tidak adanya DNA MTB tidak dapat ditentukan.
• SPC: GAGAL. Hasil target MTB negatif, dan SPC Ct tidak dalam kisaran yang
valid.
• Pemeriksaan Probe: LULUS. Semua hasil pemeriksaan probe lulus.

Ada atau tidak adanya MTB tidak dapat ditentukan. Ulangi tes. Lihat bagian Prosedur
KESALAHAN
Tes Ulang pada dokumen ini.
• MTB: TIDAK ADA HASIL
• SPC: TIDAK ADA HASIL
• Pemeriksaan Probe: GAGAL. Semua atau salah satu hasil pemeriksaan probe gagal.

Catatan: Jika pemeriksaan probe lolos, kesalahan tersebut disebabkan oleh kegagalan komponen sistem.

Ada atau tidak adanya MTB tidak dapat ditentukan. Ulangi tes. Lihat bagian Prosedur Tes Ulang
TIDAK ADA HASIL
pada dokumen ini. TIDAK ADA HASIL menunjukkan bahwa data yang dikumpulkan tidak mencukupi.
Misalnya, operator menghentikan tes yang sedang berlangsung.
• MTB: TIDAK ADA HASIL
• SPC: TIDAK ADA HASIL
• Pemeriksaan Probe: NA (tidak berlaku)

J.1 Ralasan untukRINGATLAHSEBUAHSAY

Ulangi pengujian menggunakan kartrid baru jika salah satu dari hasil pengujian berikut terjadi:

• Hasil INVALID menunjukkan bahwa SPC gagal. Sampel tidak diproses dengan benar, atau
PCR terhambat.

• Hasil ERROR menunjukkan bahwa PCC gagal, dan pengujian dibatalkan mungkin karena
tabung reaksi tidak diisi dengan benar, masalah integritas probe reagen terdeteksi, batas
tekanan maksimum terlampaui atau modul GeneXpert gagal.

• TIDAK ADA HASIL menunjukkan bahwa data yang dikumpulkan tidak mencukupi. Misalnya, operator
menghentikan tes yang sedang berlangsung.

12 301-0191 Pdt. C, Mei 2012

 K. Keterbatasan

J.2 RETESTPTATA CARA

Jika Anda memiliki sisa sputum segar atau sedimen yang telah dilarutkan, selalu gunakan SR baru untuk mendekontaminasi
dan mencairkan sputum sebelum menjalankan pengujian. Lihat “Prosedur Pemeriksaan” atau “Prosedur Sampel Sputum
yang Diharapkan” pada halaman 6.

Jika Anda memiliki sisa sampel yang diolah dengan SR yang cukup dan berada dalam waktu 5 jam setelah
penambahan awal SR ke sampel, Anda dapat menggunakan sampel sisa untuk menyiapkan dan memproses kartrid
baru. Saat menguji ulang, selalu gunakan kartrid baru. Lihat “Menyiapkan Kartrid” pada halaman 7.

K LIMITASI
Kinerja Xpert MTB/RIF divalidasi menggunakan prosedur yang disediakan dalam sisipan paket ini.
Modifikasi prosedur ini dapat mengubah kinerja tes. Hasil dari Xpert MTB / RIF harus
diinterpretasikan dalam hubungannya dengan laboratorium lain dan data klinis yang tersedia
untuk dokter.

Karena deteksi MTB bergantung pada jumlah organisme yang ada dalam sampel, hasil yang dapat diandalkan bergantung
pada pengumpulan, penanganan, dan penyimpanan spesimen yang tepat. Hasil pengujian yang salah dapat terjadi dari
pengumpulan spesimen yang tidak tepat, kegagalan untuk mengikuti prosedur pengumpulan sampel yang
direkomendasikan, penanganan atau penyimpanan, kesalahan teknis, campuran sampel, atau konsentrasi bahan awal yang
tidak mencukupi. Kepatuhan yang cermat terhadap instruksi dalam sisipan ini diperlukan untuk menghindari hasil yang
salah.

Hasil tes positif tidak selalu menunjukkan adanya organisme yang hidup. Namun,
dugaan adanya resistensi MTB dan RIF.
Hasil tes mungkin dipengaruhi oleh terapi antibiotik sebelumnya atau bersamaan. Oleh karena itu, keberhasilan atau
kegagalan terapi tidak dapat dinilai menggunakan tes ini karena DNA mungkin bertahan setelah terapi antimikroba.

Mutasi atau polimorfisme pada daerah pengikatan primer atau probe dapat mempengaruhi deteksi strain MDR-MTB
atau resisten RIF yang baru atau tidak diketahui yang menghasilkan hasil negatif palsu.

L PKINERJACHARAKTERISTIK
Bagian ini mencantumkan karakteristik kinerja dan batasan Xpert MTB / RIF Assay.

L.1 PKINERJATESTING- CLINIS

Karakteristik kinerja Xpert MTB/RIF Assay untuk deteksi TB dan rifampisin dievaluasi
di lima institusi di Asia, Eropa, Afrika dan Amerika Selatan.12
Penelitian ini dilakukan sesuai dengan protokol Foundation for Innovative New Diagnostics
(FIND).Studi Evaluasi Xpert MTB: Evaluasi FIND / Cepheid Xpert MTB assay untuk
mendeteksi TB paru dalam dahak orang dewasa yang bergejala.
Subyek termasuk individu dengan gejala TB paru dan berisiko resistensi multi-obat. Untuk subjek
yang memenuhi syarat, tiga sampel dahak diperoleh untuk pengujian dengan Xpert MTB / RIF
Assay dan pengujian referensi.
Kinerja Xpert MTB / RIF Assay dibandingkan dengan:
• Mikroskop apusan ZN

• Kultur cair (Becton Dickinson BACTEC ™ 960 MGIT ™) dan padat (Löwenstein-
Jenson)

301-0191 Pdt. C, Mei 2012 13

bahasa Inggris

Uji kepekaan obat (DST) pada proporsi LJ atau pada MGIT yang mencakup setidaknya empat obat
lini pertama.

• Tes NAAT standar (Uji Langsung Mycobacterium TB Terkuat Gen-Probe dan Tes MTB
Roche AMPLICOR®) saat dilakukan
Sampel termasuk spesimen dahak yang dikumpulkan untuk pengujian rutin dari pasien yang diduga
terinfeksi TB dan berisiko TB yang resistan terhadap banyak obat.

L.2 HAIVERALLRHASIL
Sebanyak 1448 spesimen dahak diuji ketahanannya terhadap MTB dan RIF dengan Xpert MTB/RIF
Assay, serta pemeriksaan mikroskopis apusan dan kultur bakteri. Spesimen di tiga lokasi yang
berpartisipasi juga dinilai menggunakan Tes AMPLICOR MTB (UCT, Afrika Selatan & India) atau
Tes Langsung Mycobacterium TB Amplified (Azerbaijan). Dari 1448 peserta, 563 memiliki BTA dan
kultur TB positif (S+C+), 170 memiliki BTA negatif, TB kultur positif (S-C+), dan 618 TB dieksklusi.
Sisanya 97 pasien dirawat karena TB berdasarkan klinis. gejala dan membaik selama pengobatan
TB, tetapi tidak diuji dengan pemeriksaan mikroskopis atau kultur; pasien ini tidak termasuk
dalam analisis data yang disajikan dalam tabel.

L.3 MTB DETEKSIRHASIL

Secara keseluruhan, ketika mempertimbangkan gabungan hasil dari tiga sampel dahak per
pasien, Xpert MTB / RIF Assay menunjukkan sensitivitas di antara spesimen kultur positif sebesar
97,3% (713/733). Pada pasien S + C +, sensitivitas Xpert MTB / RIF Assay adalah 99,5% (560 /
563); pada pasien S-C + sensitivitasnya adalah 90,0% (153/170). Spesifisitas Xpert MTB/RIF
Assay pada pasien non-TB adalah 97,9% (605/618). Lihat Tabel 3.

Tabel 3.Kinerja Pengujian Xpert MTB / RIF pada Spesimen Sputuma, b

Lokasi Sensitivitas S + C + Sensitivitas S-C + Kekhususan

Peru 100% 83,3% 100%

(199/199) (10/12) (102/102)
[98,1% -100%] [55,2% -95,3%] [96,4% -100%]
Azerbaijan 100% 92,3% 95,8%
(76/76) (60/65) (69/72)
[95,2% -100%] [83,2% -96,7%] [88,5% -98,6%]
Afrika Selatan-1 99,0% 90,4% 98,4%
(95/96) (47/52) (186/189)
[94,3% -99,8%] [79,4% -95,8%] [95,4% -99,5%]
Afrika Selatan-2 100% 86,7% 97,3%
(30/30) (13/15) (213/219)
[88,6% -100%] [62,1% -96,3%] [94,2% -98,7%]
India 98,8% 88,5% 97,2%
(160/162) (23/26) (35/36)
[95.6% -99.7%] [71,0% -96,0%] [85,8% -99,5%]
Keseluruhan 99,5% 90,0% 97,9%
(560/563) (153/170) (605/618)
[98,4% -99,8%] [84,6% -93,7%] [96,4% -98,8%]

sebuah Merupakan hasil dari 3 tes Xpert, 3 smear, dan 4 kultur.

BS = noda; C = budaya

14 301-0191 Pdt. C, Mei 2012

 L. Karakteristik Kinerja

Ketika mempertimbangkan hanya sampel dahak langsung tunggal, sensitivitas Xpert MTB / RIF Assay
adalah 97,8% (545/557) pada pasien S + C + dan 73,1% (122/167) pada pasien S-C +. Spesifisitas adalah
99,0% (605/611) pada pasien non-TB.

L.4 RIF REISTANCE

Secara keseluruhan, ketika mempertimbangkan gabungan hasil dari tiga sampel dahak per pasien,
Xpert MTB / RIF Assay menunjukkan sensitivitas untuk deteksi resistensi RIF di antara pasien resisten
RIF fenotipik sebesar 96,1% (195/203). Spesifisitas Xpert MTB / RIF Assay pada pasien yang sensitif
terhadap fenotipik RIF adalah 98,6% (502/509). Lihat Tabel 4.

Tabel 4.Kinerja Pengujian Xpert MTB / RIF pada Spesimen Sputum

Lokasi Sensitivitas dalam Kasus Tahan RIF Spesifisitas dalam Kasus Sensitif RIF

Peru 100% 98,4%

(16/16) (190/193)
[80,6% -100%] [95,5% -99,5%]
Azerbaijan 95,5% 98,9%
(42/44) (90/91)
[84,9% -98,7%] [94,0% -99,8%]
Afrika Selatan-1 93,8% 100%
(15/16) (126/126)
[71,7% -98,9%] [97,0% -100%]
Afrika Selatan-2 100% 100%
(3/3) (38/38)
[43,8% -100%] [90,8% -100%]
India 96,0% 95,1%
(119/124) (58/61)
[90,9% -98,3%] [86,5% -98,3%]
Keseluruhan 96,1% 98,6%
(195/203) (502/509)
[92,4% -98,0%] [97,2% -99,3%]

sebuah Merupakan hasil dari 3 tes Xpert, 3 smear, dan 4 kultur.

Ketika mempertimbangkan hanya satu sampel dahak langsung, sensitivitas Xpert MTB / RIF Assay untuk
deteksi resistensi RIF adalah 97,2% (141/145) pada pasien yang resistan terhadap RIF. Spesifisitas dalam
kasus sensitif RIF adalah 98,3% (412/419). Lihat Tabel 5.

Tabel 5.Kinerja Pengujian Xpert MTB / RIF pada Spesimen Sputum

Spesifisitas dalam Kasus Sensitif

Lokasi Sensitivitas dalam Kasus Tahan RIF RIF

Peru 100% 98,4%

(16/16) (180/183)
[80,6% -100%] [95,3% -99,4%]
Azerbaijan 97,4% 98,7%
(38/39) (74/75)
[86,8% -99,5%] [92,8% -99,8%]
Afrika Selatan-1 90,9% 98,1%
(10/11) (102/104)
[62,3% -98,4%] [93,3% -99,5%]

301-0191 Pdt. C, Mei 2012 15

bahasa Inggris

Tabel 5.Kinerja Pengujian Xpert MTB / RIF pada Spesimen Sputum (Lanjutan)

Spesifisitas dalam Kasus Sensitif

Lokasi Sensitivitas dalam Kasus Tahan RIF RIF

Afrika Selatan-2 100% 100%

(1/1) (23/23)
[20,7% -100%] [85,7% -100%]
India 97,4% 97,1%
(76/78) (33/34)
[91,1% -99,3%] [85,1% -99,5%]
Keseluruhan 97,2% 98,3%
(141/145) (412/419)
[93,1% -98,9%] [96,6% -99,2%]

sebuah Merupakan hasil dari 1 tes Xpert langsung, 3 apusan, dan 4 kultur.

Hasil Xpert MTB / RIF Assay pada spesimen dari lokasi di mana uji NAAT juga dilakukan
ditunjukkan pada Tabel. Hasil tes NAAT ditampilkan untuk perbandingan.

Tabel 6.Perbandingan Kinerja Xpert MTB / RIF dan NAAT Alternatif pada Spesimen Sputum

Statistik Tessebuah Azerbaijan Afrika Selatan-1 India Keseluruhan

Kepekaan ahli (3) 100% 99,0% 98,8% 99,1%

S+C+ (76/76) (95/96) (160/162) (331/334)
[95,2% -100%] [94,3% -99,8%] [95.6% -99.7%] [97,4% -99,8%]
ahli (1) 97,3% 96,8% 98,8% 97,9%
(73/75) (92/95) (159/161) (324/331)
[90,8% -99,3%] [91,1% -98,9%] [95.6% -99.7%] [95,7% -99,2%]
LAPISAN 100% 93,7% 94,2% 95,4%
(76/76) (89/95) (147/156) (312/327)
[95,2% -100%] [86,9% -97,1%] [89,4% -96,9%] [92,3% -97,4%]
Kepekaan ahli (3) 92,3% 90,4% 88,5% 90,9%
S-C + (60/65) (47/52) (23/26) (130/143)
[83,2% -96,7%] [79,4% -95,8%] [71,0% -96,0%] [85,0% -95,1%]
ahli (1) 68,8% 86,3% 69,2% 75,2%
(44/64) (44/51) (18/26) (106/141)
[56,6% -78,8%] [74,3% -93,2%] [50,0% -83,5%] [67,2% -82,1%]
LAPISAN 66,2% 45,7% 72,0% 61.6%
(43/65) (16/35) (18/25) (77/125)
[54,0% -76,5%] [30,5% -61,8%] [52,4% -85,7%] [52,5% -70,2%]
Kekhususan ahli (3) 95,8% 98,4% 97,2% 97,6%
(69/72) (186/189) (35/36) (290/297)
[88,5% -98,6%] [95,4% -99,5%] [85,8% -99,5%] [95,2% -99,1%]
ahli (1) 97,2% 99,5% 100% 99,0%
(69/71) (185/186) (35/35) (289/292)
[90,3% -99,2%] [97,0% -99,9%] [90,1% -100%] [97,0% -99,8%]
LAPISAN 95,8% 100% 100% 99,0%
(69/72) (187/187) (36/36) (292/295)
[88,5% -98,6%] [98,0% -100%] [90,4% -100%] [97,1% -99,8%]

sebuahXpert (3) = hasil dari 3 tes Xpert, 3 apusan, dan 4 kultur; Xpert (1) = hasil 1 uji Xpert

langsung, 3 apusan, dan 4 kultur; NAAT = ProbeTec (Azerbaijan), dan AMPLICOR (Afrika
Selatan dan India); NAAT "batas" diperlakukan sebagai negatif.

16 301-0191 Pdt. C, Mei 2012

 L. Karakteristik Kinerja

Dari pengujian Xpert MTB / RIF yang dilakukan bersamaan dengan penelitian ini, 96,5% (4327/4484) berhasil
pada percobaan pertama. Sisanya 157 memberikan hasil yang tidak pasti pada upaya pertama. Seratus
delapan dari 157 spesimen memberikan hasil yang valid dengan pengujian ulang. Tingkat keberhasilan
pengujian keseluruhan adalah 98,9% (4435/4484).

L.5 SayaMENGGANGGUSSUBSTANSI
Sebuah penelitian dilakukan untuk menilai potensi efek penghambatan zat yang mungkin
ada dalam dahak yang diproses dengan uji Xpert MTB / RIF. Ini termasuk, tetapi tidak
terbatas pada: darah, nanah, sel mamalia dan hemoglobin. Zat-zat ini diuji pada konsentrasi
sampel akhir 5% (darah, nanah, sel mamalia) atau 0,2% (hemoglobin) untuk menentukan
efek, jika ada, pada kinerja Xpert MTB / RIF. Setiap zat ditambahkan ke sampel yang
mengandung kira-kira 5 kali batas deteksi (LoD) sel BCG target dan diuji dalam rangkap dua.

Tidak ada efek penghambatan yang diamati untuk salah satu zat yang berpotensi mengganggu di atas.

L.6 SEBUAHNALYTICALSSENSITIFITAS
Studi tambahan dilakukan untuk menentukan interval kepercayaan 95% untuk batas deteksi
analitis (LoD) dari pengujian ini. Batas deteksi didefinisikan sebagai jumlah unit pembentuk koloni
(CFU) terendah per sampel yang dapat dibedakan secara reproduktif dari sampel negatif dengan
kepercayaan 95%. LoD analitik ditentukan dengan menguji 20 ulangan dari konsentrasi yang
berbedaM.tuberkulosissel dibubuhi menjadi sampel dahak klinis negatif. Berdasarkan kondisi
penelitian, hasil menunjukkan bahwa perkiraan titik LoD untukM.tuberkulosisadalah 131 CFU/mL
dengan interval kepercayaan 95% mulai dari 106,2 CFU sampai 176,4 CFU. Perkiraan dan tingkat
kepercayaan ditentukan menggunakan regresi logistik dengan data (jumlah positif per jumlah tes
pada setiap tingkat) yang diambil pada konsentrasi yang berbeda.
Interval kepercayaan ditentukan dengan menggunakan perkiraan kemungkinan maksimum pada
parameter model logistik menggunakan matriks varians-kovarians sampel besar.

L.7 SEBUAHNALYTICALSspesifisitas(EXCLUSIVITY)
Kultur dari 18 mikobakteri nontuberkulosis, NTM (sebelumnya MOTT), strain diuji dengan
uji Xpert MTB / RIF. Dua atau lebih ulangan dari masing-masing isolat dibubuhi sampel
sputum negatif dan diuji pada konsentrasi 10 .6CFU / mL. Lihat Tabel 7.
Tabel 7.Strain NTM diuji untuk spesifisitas

Strain NTM Diuji (106CFU / mL)

1 M.avium, SmT Mc2, 2500 10 M. genevenses, # 51233
2 M.avium, SmD Mc2, 2501 11 M.xenopi, #2278
3 M. intraseluler, # 35790 12 M. szulgai, Cap E9-1997
4 M. intraseluler, # 35771 13 M.celatum, # 51131
5 M.kansasii, #12478 14 M. marinum, Cap E10
6 M. scrofulaceum, Cap E5-1985 15 M. simiae, #25275
7 M.malmoense, #29571 16 M. asiaticum, E1-1985
8 M.fortuitum, #35754 17 M. tahan panas, e22-1985
9 M. chelonae, #35749 18 M. flavescens, PoH 193D

Berdasarkan kondisi penelitian, semua isolat NTM dilaporkan negatif MTB.

Selain itu, untuk menentukan apakah konsentrasi NTM yang tinggi akan mengganggu deteksi
tingkat TB yang rendah, galur yang tercantum dalam Tabel 7 dicampur dengan galur TB H37Rv
dalam dahak hingga konsentrasi akhir 106CFU / mL NTM dan 200 CFU / mL H37Rv.

301-0191 Pdt. C, Mei 2012 17

bahasa Inggris

Strain NTM yang diuji kemampuannya untuk mengganggu deteksi TB termasuk:

• M. avium, SmT Mc2, 2500

• M. avium, SmD Mc2, 2501
• M. intraseluler, # 35790
• M. intraseluler, #35771
• M. kansasii, #12478
• M. malmoense, #29571
Lima dari enam strain tidak mengganggu deteksi 200 CFU / mLM.tuberkulosis; dengan demikian,
sinyalnya sama dengan H37Rv saja. Ke enam,M. malmoense, menghasilkan interferensi lemah pada
106CFU / mL tetapi tidak ada pada 105CFU / mL atau lebih rendah. Oleh karena itu, tidak ada
gangguan dalam pendeteksianM.tuberkulosisbahkan dengan 105CFU / mL atau NTM.

Organisme non-mikobakteri (n = 59) yang mewakili berbagai patogen, kontaminan umum

dan mikroflora yang biasa ada dalam dahak atau mulut diuji pada konsentrasi 106salinan
DNA per volume reaksi akhir. Semua organisme diidentifikasi dengan benar sebagai MTB-
negatif oleh uji Xpert MTB/RIF. Kontrol positif dan negatif dimasukkan dalam penelitian ini.
Spesifisitasnya adalah 100%.

L.8 SPECIES/ SKERETA DIUJI UNTUKSspesifisitas

Tabel 8 menunjukkan spesies dan galur yang diuji spesifisitasnya.

Tabel 8.Spesies / Strain diuji untuk spesifisitas

Acinetobacter baumanii Haemophilus influenzae Salmonella typhi

Acinetobacter calcoaceticus Haemophilus parahemolyticus Serratia marcescens
Actinomyces meyeri Haemophilus parainfluenzae Shigella boydii
Bacillus cereus Klebsiella pneumoniae Shigella flexneri
Bacillus subtilis Legionella pneumophila Stafilokokus aureus
Bordetella parapertussis Leuconostoc mesenteroides Stafilokokus kapitis
Campylobacter jejuni Listeria greyi Staphylococcus epidermidis
Candida albicans Moraxella catarrhalis Stafilokokus hemolitikus
Teman Citrobacter Morganella morganii Staphylococcus hominis
Corynebacterium pseudodiptheriticum Mycoplasma pneumoniae Stenotrophomonas maltophilia
Corynebacterium xerosis Neisseria gonorrhoeae Streptococcus equi
Cryptococcus neoformans Neisseria lactamica Streptococcus pyogenes
Enterobacter aerogenes Neisseria meningitidis Streptococcus agalactiae
Enterobacter cloacae mukosa Neisseria Streptococcus constelatus
Enterococcus avium Peptostreptococcus anaerobius Streptococcus mitis
Enterococcus faecalis Porphyromonas gingivalis Streptococcus mutans
Enterococcus faecium Prevotella melaninogenica Streptokokus pneumonia
Escherichia coli (Strain tipe 2) Propionibacterium acnes Streptococcus uberis
Escherichia coli O157H7(Jenis regangan 1) Proteus mirabilis Veillonella parvula
Fusobacterium nucleatum Pseudomonas aeruginosa

18 301-0191 Pdt. C, Mei 2012

 L. Karakteristik Kinerja

L.9 SEBUAHNALYTICALSayaNCLUSIVITAS

Sampel DNA dari total 79 galur MTB diuji pada GX menggunakan protokol Xpert MTB/RIF
yang dimodifikasi untuk pengujian DNA. Komponen reaksi akhir dan kondisi siklus PCR
tidak berubah dari protokol yang dirancang untuk pengujian sampel pasien. Tujuh puluh
strain berasal dari koleksi WHO/TDR dan 9 dari koleksi laboratorium di University of
Medicine and Dentistry of New Jersey (UMDNJ). Secara kolektif galur ini mewakili isolat dari
31 negara dan mengandung 37 isolat resisten RIF yang terdiri dari 13 isolat unikrpoBmutasi
wilayah inti. Ini termasuk setiap keunikanrpoBmutasi ditemukan dalam database TDR.
Reaksi negatif menggunakan air sebagai sampel.
Campuran reaksi akhir mengandung 90 salinan genomik isolat dalam 100 L total volume.
Tabel 9 menunjukkan bahwa Xpert MTB/RIF mendeteksi semua galur MTB dengan benar dan
mengidentifikasi isolat resisten RIF dengan benar.

Tabel 9.Deteksi galur MTB dan isolat yang resisten terhadap RIF

Hasil GeneXpert

MTB Positif

RIF tidak MTB Negatif

RIF terdeteksi terdeteksi

Ketahanan RIF 37 0 0
MTB +
0 42 0
Referensi Sensitif RIF

MTB- 0 0 52

L.10 SEBUAHNALYTICALSayaNAKTIFKANMYCOBACTERIA DALAM SAMPEL SPUTUM

Kemampuan desinfeksi reagen sampel Xpert MTB / RIF ditentukan menggunakan metode kultur
tuberkulosida kuantitatif standar. Sampel dahak dibubuhi dengan konsentrasi tinggi yang layak
M. bovis, dicampur dengan reagen sampel dengan perbandingan 2:1, dan diinkubasi selama 15
menit. Setelah inkubasi sampel reagen / campuran dahak dinetralkan dengan pengenceran dan
filtrasi dan kemudian dikultur. kelangsungan hidupM. bovis organisme dari dahak yang dirawat
berkurang setidaknya 6 log relatif terhadap kontrol yang tidak diobati.

Setiap laboratorium harus menentukan efektivitas sifat desinfeksi reagen sampel menggunakan metode
standar mereka sendiri dan harus mematuhi peraturan keamanan hayati yang direkomendasikan.

301-0191 Pdt. C, Mei 2012 19

bahasa Inggris

PAKEFERENSI
1.Laporan WHO 20081. http://www.who.int/tb/publications/global_report/2008

2.Resistensi anti-tuberkulosis di dunia: laporan global keempat. WHO / HTM / TB /

2008.394

3.Morris SL, Bai G, Suffys P, Portillo-Gomez L, Fairchok M, Rouse D.Mekanisme molekuler

resistensi multiobat pada isolat klinis Mycobacterium tuberculosis. J Menginfeksi Dis 1995;
171: 954-60.

4.Ashok Rattan, Awdhesh Kalia, dan Nishat Ahmad.Mycobacterium tuberculosis Ketahanan

Multi-obat: Perspektif Molekuler, Emerging Infectious Diseases, Vol.4 No.2, http: //
www.cdc.gov/ncidod/EID/vol4no2/rattan.htm

5.FrancisJ. Curry National Tuberculosis Center dan Departemen Kesehatan Masyarakat California, 2008:
Tuberkulosis Tahan Obat, Panduan Bertahan Hidup untuk Dokter, Edisi kedua.

6.Pusat Pengendalian dan Pencegahan Penyakit. Keamanan hayati di laboratorium mikrobiologi

dan biomedis. Richmond JY dan McKinney RW (eds) (1993). Nomor Publikasi HHS (CDC)
93-8395.

7.Institut Standar Klinis dan Laboratorium (sebelumnya Komite Nasional untuk Standar
Laboratorium Klinis). Perlindungan pekerja laboratorium dari infeksi yang didapat akibat
kerja; Pedoman yang Disetujui. Dokumen M29 (lihat edisi terbaru).

8. Kent PT, Kubica GP 1985. Kesehatan Masyarakat Mycobacteriology—Panduan untuk

Laboratorium Level III, Pusat Pengendalian Penyakit, Atlanta, Publikasi no. OJ 86-216546.

9.Pelayanan Laboratorium dalam Pengendalian Tuberkulosis: Bagian II, Mikroskopi WHO/TB/98.258; hal
1-61.

10.Pelayanan Laboratorium dalam Pengendalian Tuberkulosis: Bagian III Kultur. WHO / TB / 98.258. hal 1- 74.

11.NCCLS, Pengujian kerentanan Mycobacteria, Nocardia, dan Actinomycetes Aerobik lainnya:

Standar yang Disetujui. Dokumen NCCLS M24-A (ISBN 1- 56238-500-3). NCCLS, 940 West
Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania 19087 - 1898, AS. 2003.

12.Boehme CC, Nabeta P, Hillemann D, Nicol MP, dkk.Deteksi Molekuler Cepat

Tuberkulosis dan Resistensi Rifampisin. N Engl J Med 2010; 363: 1005-15.

20 301-0191 Pdt. C, Mei 2012

 N. Bantuan

SEBUAH. SEBUAHSISTANCE

Sebelum menghubungi Dukungan Teknis Cepheid, kumpulkan informasi berikut:

• Nama Produk

• Nomor lot
• Nomor seri instrumen
• Pesan kesalahan (jika ada)

• Versi perangkat lunak dan, jika berlaku, nomor Tag Servis Komputer

Wilayah Telepon Surel

Amerika Utara + 1.888.838.3222 techsupport@cepheid.com

Dukungan telepon tersedia dari Senin hingga Jumat mulai pukul 05.00
hingga 17.00

Dukungan Penjualan: Opsi 1

Dukungan Teknis: Opsi 2
Dukungan Layanan: Opsi 3

Uni Eropa + 33 5 6382 5319 support@cepheideurope.com

Dukungan telepon tersedia dari Senin hingga Jumat dari pukul 08:00
hingga 18:00 (GMT + 1).

Dukungan Penjualan: +33 5 6382 5314

Dukungan penjualan tersedia dari Senin hingga Jumat dari pukul 09:00 hingga 18:00
(GMT + 1).

Dukungan Layanan (hanya kalibrasi): +33 5 6382 5352

Dukungan tersedia dari Senin hingga Jumat dari pukul 09:00 hingga 18:00
(GMT + 1).

Kantor pusat perusahaan kami terletak di Amerika Utara.

Cepheid
904 Karibia Drive
Sunnyvale, CA 94089-1189
AS
Telepon: + 1.408.541.4191
Fax: + 1.408.541.4192

www.cepheid.com

Untuk dukungan teknis di luar Amerika Utara, Anda dapat menghubungi Cepheid Europe untuk mendapatkan bantuan.

Cepheid Eropa
Vira Solelh
81470 Maurens-Scopont
Perancis

Telepon: +33.563.82.53.00
Faks: +33.563.82.53.01

www.cepheidinternational.com/

301-0191 Pdt. C, Mei 2012 21

bahasa Inggris

Informasi kontak untuk kantor Cepheid lainnya tersedia di situs web kami di
http://www.cepheid.com/company/contact-us/

TMAMPUSYMBOLS

Simbol Berarti

Kesesuaian Eropa

Nomor katalog

In vitroperangkat medis diagnostik

Kode batch

Jangan gunakan kembali

Perhatian, lihat dokumen yang menyertainya

Pabrikan

Berisi cukup untuk <n> tes

Gunakan oleh YYYY-MM-DD atau YYY-MM

Kontrol

Batasan suhu

Konsultasikan petunjuk penggunaan

Risiko biologis

CEPHEIDAB
Röntgenvägen 5
SE-171 54 Solna
Swedia

22 301-0191 Pdt. C, Mei 2012