Clinical Sciene Session (CSS)

*Kepaniteraan Klinik Senior/ G1A22

**Pembimbing

SERUM CYTOKINE AND CHEMOKINE PROFILE IN RELATION TO

THE SEVERITY OF CORONAVIRUS DISEASE 2019 IN CHINA

Intan Oktavia* dr. Sabar Hutabarat, Sp.A**

PROGRAM STUDI PROFESI DOKTER

ILMU KESEHATAN ANAK
RSUD RADEN MATTAHER JAMBI
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS JAMBI
2023
 LEMBAR PENGESAHAN

SERUM CYTOKINE AND CHEMOKINE PROFILE IN RELATION TO

THE SEVERITY OF CORONAVIRUS DISEASE 2019 IN CHINA

Oleh :
Intan Oktavia, S.Ked
G1A22

Sebagai salah satu tugas di Program Profesi Dokter

Bagian Ilmu Kesehatan Anak
2023

Jambi, Januari 2023

Pembimbing

dr. Sabar Hutabarat, Sp.A

 KATA PENGANTAR

Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah
melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan
CSS yang berjudul “Serum Cytokine and Chemokine Profile in Relation to the
Severity of Coronavirus Disease 2019 in China” sebagai kelengkapan
persyaratan dalam mengikuti Kepaniteraan Klinik Senior Bagian Ilmu Kesehatan
Anak.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada dr. Sabar Hutabarat, Sp.A, yang
telah bersedia meluangkan waktu dan pikirannya untuk membimbing pembuatan
CSS ini.
Penulis menyadari bahwa laporan kasus ini masih jauh dari sempurna.
Oleh karena itu, kritik dan saran yang membangun dari berbagai pihak sangat
diharapkan guna kesempurnaan CSS ini, sehingga nantinya dapat bermanfaat bagi
penulis dan para pembaca.

Jambi, Januari 2023

Penulis
Profil Serum Sitokin dan Kemokin dalam Hubungannya Terhadap Tingkat
Keparahan Penyakit Coronavirus 2019 di China

Abstrak : Penyakit Coronavirus 2019 (COVID-19) adalah penyakit yang

disebabkan oleh sindrom pernafasan akut berat oleh coronavirus 2 (SARS-CoV-
2). Kami menyelidiki kadar sitokin dan kemokin serum pada pasien terinfeksi
SARS-CoV-2 tanpa gejala, pasien dengan gejala ringan, gejala sedang, gejala
berat, dan pasien yang telah sembuh. Produksi sitokin dan kemokin proinflamasi
yang diinduksi oleh SARS-CoV-2 diamati tidak hanya pada pasien bergejala
tetapi juga pada pasien tanpa gejala, dan pasien yang kembali normal setelah
pemulihan. IL-6, IL-7, IL-10, IL-18, G-CSF, M-CSF, MCP-1, MCP-3, IP-10,
MIG, dan MIP-1α ditemukan terkait dengan tingkat keparahan dari COVID-19.
Selain itu, profil sitokin dan kemokin secara signifikan lebih tinggi pada pasien
berjenis kelamin pria yang terinfeksi SARS-CoV-2 daripada pasien berjenis
kelamin wanita. Tingkat serum MCP-1, G-CSF, dan VEGF berkorelasi lemah dan
positif dengan titer virus. Kami menyarankan bahwa analisis kombinatorial antara
sitokin dan kemokin serum dengan klasifikasi klinis dapat berkontribusi terhadap
evaluasi tingkat keparahan COVID-19 dan dalam mengoptimalkan strategi terapi.

PENDAHULUAN
Pada bulan Desember 2019, sekelompok pasien dengan pneumonia virus
yang muncul di Wuhan, Cina, ditemukan terinfeksi oleh novel coronavirus,
sindrom pernapasan akut coronavirus 2 (SARS-CoV-2) [1–3]. Per 20 Maret 2020,
SARS-CoV-2 telah menimbulkan 326.558 kasus di seluruh dunia, termasuk
didalamnya 14.267 kematian. Spektrum klinis infeksi SARS-CoV-2 yang
ditemukan tampaknya bervariasi, mulai dari infeksi tanpa gejala, penyakit saluran
pernapasan atas ringan, infeksi paru-paru sedang dengan kelainan radiologis,
hingga pneumonia virus parah dengan gagal napas serta dalam beberapa kasus
menyebabkan kematian [4-6 ]. Karakteristik epidemiologis dan klinis pasien
dengan penyakit coronavirus 2019 (COVID-19) telah banyak diteliti, namun
patogenesis infeksi SARS-CoV-2 belum terdefinisi dengan baik [7, 8].
 Produksi sitokin berlebihan yang diinduksi oleh virus (juga dikenal
sebagai hipersitokinemia) berhubungan erat dengan morbiditas dan mortalitas
pada beberapa infeksi virus [9-13]. Juga, telah dilaporkan bahwa hiperinduksi
sitokin proinflamasi memainkan peran penting dalam perkembangan penyakit dan
kematian pada pasien yang terinfeksi SARS-CoV [14, 15], sindrom pernapasan
oleh coronavirus Timur Tengah (MERS-CoV) [12], dan infeksi SARS-CoV-2 [8,
16]. Namun, profil sitokin dan kemokin pada kasus yang terinfeksi SARS-CoV-2
dengan tingkat keparahan penyakit yang berbeda-beda masih belum jelas. Dalam
penelitian ini, kami menyelidiki kadar sitokin dan kemokin serum pada kasus
infeksi SARS-CoV-2 asimtomatik, ringan, sedang, berat, dan kasus yang telah
sembuh di Provinsi Jiangsu, Cina. Selanjutnya, hubungan antara jenis kelamin dan
viral load serta tingkat serum sitokin dan kemokin pada pasien yang terinfeksi
SARS-CoV-2 dieksplorasi. Temuan penelitian ini akan menambah pemahaman
kita tentang peristiwa imunoregulasi dalam perkembangan penyakit dan
patogenesis infeksi SARS-CoV-2.

METODE
Populasi dan Sampel
Sebanyak 70 pasien yang terinfeksi SARS-CoV-2, didiagnosis dengan RT-PCR
real time atau sekuensing, dan 4 kasus pemulihan di Provinsi Jiangsu, Tiongkok
dimasukkan dalam penelitian ini. Dari 70 pasien, 4 tidak menunjukkan gejala dan
66 menunjukkan gejala. Sampel serum dari kasus simtomatik dikumpulkan kira-
kira 1 sampai 11 hari setelah onset penyakit. Menurut “Novel Coronavirus
Pneumonia Diagnosis and Treatment Guidance” (versi 5) yang diterbitkan oleh
Komisi Kesehatan Nasional China [17], 66 kasus bergejala dapat dikategorikan ke
dalam kelompok klinis yang berbeda. 22 kasus ringan memiliki gejala klinis
ringan dan tidak ada perubahan radiologis, 36 kasus sedang mengalami demam,
gejala saluran pernapasan, dan kelainan radiologis, dan 8 kasus berat (termasuk 1
kasus kritis) memiliki setidaknya 1 dari berikut ini: (1) distres pernapasan dengan
laju pernapasan ≥ 30 kali/menit, (2) saturasi oksigen saat istirahat ≤ 93%, (3)
PaO2 arteri/FiO2 ≤ 300 mmHg, dan (4) gagal napas, syok, atau kegagalan organ
lain yang memerlukan unit perawatan intensif. Selain itu, 4 kasus pemulihan dan 4
kasus kontrol sehat usia dan jenis kelamin yang telah menjalani pemeriksaan fisik
rutin di Provinsi Jiangsu juga disertakan. Kriteria eksklusi untuk individu kontrol
yang sehat adalah adanya penyakit menular akut atau kronis, adanya kelainan
yang signifikan secara klinis, dan sedang dalam pengobatan yang diketahui
berpengaruh pada faktor imunologi. Semua prosedur yang dilakukan dalam
penelitian ini yang melibatkan manusia telah disetujui oleh Pusat Provinsi Jiangsu
untuk Komite Etika Pengendalian Penyakit.

Uji Sitokin dan Kemokin

Sebanyak 48 serum sitokin dan kemokin diukur dalam immunoassay biometrik
multipleks yang mengandung mikrosfer fluoresen terkonjugasi dengan antibodi
monoklonal spesifik target sesuai dengan petunjuk pabrikan (Bio-Plex Pro Human
Cytokine Screening 48-plex panel; Bio-Rad) dan terdeteksi pada sistem Luminex
200 (Luminex). Menurut fungsinya, sitokin/kemokin dikelompokkan menjadi 6
kategori: interleukin (IL-1α, IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-2Rα, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6,
IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12 (p40), IL-12 (p70), IL-13, IL-15, IL-16, IL-17, and
IL-18), colony stimulating factors (G-CSF, GM-CSF, M-CSF, and stem cell factor
[SCF]), interferons (IFN-α2 and IFN-γ), tumor necrosis factor (TNF-α, TNF-β,
and TNF-related apoptosis inducing ligand [TRAIL]), growth factors (basic
fibroblast growth factor [FGF], nerve growth factor-β [NGF-β], hepatocyte
growth factor [HGF], leukemia inhibitory factor [LIF], platelet-derived growth
factor [PDGF-BB], vascular endothelial growth factor [VEGF], dan stem cell
growth factor-β [SCGF-β]), dan kemokin (cutaneous T-cell-attracting chemokine
[CTACK], eotaxin, growth related oncogene-α [GRO-α], IFN-γ inducible protein-
10 [IP-10], monocyte chemoattractant protein-1 [MCP-1], MCP-3, migration
inhibitory factor [MIF], monokine induced by interferon-γ [MIG], macrophage-
inflammatory protein [MIP-1α], MIP-1β, regulated upon activation normal T-cell
expressed and secreted [RANTES], and stromal cell-derived factor-1α [SDF-1α]).
Deteksi Viral Load SARS-CoV-2 Viral load
SARS-CoV-2 diambil dari spesimen pernapasan yang terdeteksi oleh RT-PCR
real-time. Gen virus N dideteksi dengan kit komersial sesuai dengan instruksi
pabriknya (kit tes Asam Nukleat SARS-CoV-2; BioGem). Human ribonucleases P
(Rnasep) dipilih sebagai referensi gen internal. Viral load relatif setiap pasien
dihitung dengan menggunakan persamaan 2−△Ct, di mana △ nilai ambang batas
siklus (Ct) = gen Ctviral N−Ct RnaseP. Data diterjemahkan ke log2 (viral load
relatif), yang setara dengan nilai −△Ct [18].

Analisis Statistik
Semua analisis statistik dilakukan dengan SPSS (versi 20.0), dan angka-angka
disiapkan menggunakan GraphPad Prism (versi 8.0). Data kuantitatif yang
terdistribusi normal disajikan sebagai rata-rata ± standar deviasi (SD), sedangkan
data yang terdistribusi tidak normal disajikan sebagai median (persentil ke-25-75).
Uji Mann-Whitney U nonparamentik digunakan untuk membandingkan kadar
sitokin serum antara 2 kelompok. Untuk mengeksplorasi korelasi antara sitokin
dan viral load, dilakukan analisis Spearman karena distribusi variabel tidak
normal; analisis heat map dari koefisien korelasi kemudian dilakukan. Hasilnya
dianggap signifikan secara statistik jika nilai P < 0,05.

HASIL
Tingkat Sitokin dan Kemokin Serum pada Kasus Tanpa gejala, Bergejala, dan
Sembuh pada SARS-CoV-2
Kami pertama-tama menyelidiki kadar sitokin dan kemokin serum pada kasus
tanpa gejala, bergejala, sembuh serta kelompok kontrol yang sehat. Dibandingkan
dengan kontrol yang sehat, kadar serum IL-7, IL-10, dan IP-10 secara signifikan
lebih tinggi pada kasus tanpa gejala. Serum IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-2Rα, IL-6, IL-
7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, G-CSF, M-CSF, IFN-α2, IFN-γ,
TNF-α, TRAIL, FGF dasar, HGF, PDGF-BB, VEGF, GRO-α, IP-10, MCP-1, dan
Tingkat MIG lebih tinggi pada pasien bergejala (Tabel 1). Tingkat eotaxin lebih
rendah pada kasus bergejala dibandingkan kelompok kontrol yang sehat.
Perbandingan lebih lanjut antara kasus tanpa gejala dan gejala menunjukkan
bahwa konsentrasi serum IL-1ra, IL-1β, IL-6, dan IP-10 lebih rendah pada kasus
tanpa gejala daripada kasus dengan gejala. Seperti yang diharapkan, semua level
sitokin dan kemokin pada kasus pemulihan serupa dengan kasus tanpa gejala dan
kelompok kontrol yang sehat. Namun, kadar serum IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-6, IL-
8, IL-9, IL-10, IL-12 (p40), IL-13, IL-15, IL -18, G-CSF, M-CSF, IFN-α2, IFN-γ,
TNF-α, TRAIL, FGF dasar, NGF-β, VEGF, CTACK, GRO-α, IP-10, MCP-1,
MCP- 3, MIF, dan MIG pada kasus sembuh secara signifikan lebih rendah
dibandingkan pada kasus simptomatik. Selain itu, tidak ada perbedaan yang
signifikan secara statistik pada kadar serum IL-1α, IL-3, IL-4, IL-5, IL-12(p70),
IL-16, GM-CSF, SCF, TNF-β, LIF, SCGF-β, MIP-1α, MIP-1β, RANTES, dan
SDF-1α dengan salah satu kelompok, seperti yang ditunjukkan pada Tabel 1.
Tingkat Sitokin dan Kemokin Serum pada Pasien yang Terinfeksi SARS-CoV-2
dengan Ringan, Sedang, dan Berat
Kami memeriksa lebih lanjut kadar sitokin dan kemokin ini pada pasien bergejala
dengan tingkat keparahan penyakit yang berbeda. Karakteristik demografi dan
klinis pasien dengan tingkat keparahan penyakit yang berbeda terhadap kontrol
yang sehat ditunjukkan pada Tabel 2. Tidak ada perbedaan yang signifikan secara
statistik pada kadar serum IL-1α, IL-3, IL-4, IL-5, IL-12 (p40), IL-12(p70), IL-16,
GM-CSF, SCF, TNF-β, FGF dasar, LIF, SCGF-β, CTACK, MIP-1β, MIF,
RANTES, dan SDF-1α di antara keseluruhan grup. Dibandingkan dengan individu
sehat, kasus ringan memiliki kadar serum IL-1β, IL-1ra, IL-2Rα, IL-6, IL-7, IL-8,
IL-9, IL-10, IL-13, IL-15, IL-17, M-CSF, IFN-α2, IFN-γ, TNFα, TRAIL, FGF
dasar, HGF, PDGF-BB, VEGF, eotaxin, GRO-α, IP-10, dan MIG; kasus sedang
memiliki kadar serum IL-1β, IL-1ra, IL-2Rα, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-15,
IL-18, G- CSF, M-CSF, IFN-α2, IFN-γ, TNF-α, TRAIL, FGF dasar, HGF, PDGF-
BB, VEGF, eotaxin, GRO-α, IP-10, dan MIG; dan kasus berat memiliki kadar
serum IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-2Rα, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-13, IL-17, IL-
18, G-CSF, M-CSF, IFN-α2, IFN-γ, TNF-α, TRAIL, HGF, PDGF-BB, VEGF,
eotaxin, IP-10, MCP-1, MCP-3 , MIG, dan MIP-1α yang lebih tinggi.
Dibandingkan dengan kasus ringan, kasus berat memiliki konsentrasi serum IL-6,
IL-7, IL-10, G-CSF, M-CSF, IP-10, MCP-1, MCP-3, MIG, dan MIP-1α serum
yang lebih tinggi; dan kasus sedang memiliki konsentrasi serum IL-18, IP-10, dan
M-CSF yang lebih tinggi. Selain itu, kasus berat juga memiliki tingkat MCP-3,
MIG, dan MIP-1α yang lebih tinggi daripada kasus sedang (Gambar 1 dan Tabel
Tambahan 1). Kemudian kami menganalisis kadar sitokin dalam kasus bergejala
terhadap waktu sejak timbulnya gejala, dan kami menemukan bahwa sebagian
besar sitokin yang kadarnya terkait dengan keparahan COVID-19 memuncak pada
sekitar 6 hingga 8 hari (fase akut penyakit) setelah onset (Gambar Tambahan 1A).
Namun, sebagian besar sitokin lain, kecuali IL-1ra dan MIF, tidak memiliki waktu
puncak yang jelas (Tambahan Gambar 1B).
Perbandingan Tingkat Sitokin antara Pasien COVID-19 Pria dan Wanita
Seperti yang telah dilaporkan bahwa COVID-19 lebih banyak terjadi pada pria [7,
19], kami menyelidiki efek jenis kelamin pada tingkat serum sitokin dan kemokin.
Karakteristik pasien pria dan wanita yang terinfeksi SARSCoV-2 dengan gejala
ditunjukkan pada Tabel 3. Pasien pria yang terinfeksi SARS-CoV-2 memiliki
konsentrasi serum yang lebih tinggi yaitu: IL-1β, IL-2, IL-2Rα, IL-3 , IL-4, IL-6,
IL-7, IL-8, IL-13a, IL-15, G-CSF, M-CSF, IFN-α2, IFN-γ, FGF dasar, NGF-β,
HGF, LIF, VEGF, MCP-3, dan MIP-1α dibandingkan pasien wanita (Gambar 2
dan Tabel Tambahan 2).

Viral Load Terkait dengan Konsentrasi Sitokin dan Kemokin

Untuk mengeksplorasi korelasi antara tingkat sitokin dan kemokin serum terhadap
viral load pada pasien yang terinfeksi SARS-CoV-2, dilakukan analisis korelasi
Spearman. Semua koefisien korelasi Spearman ditampilkan dalam heat map
(Gambar 3A). Analisis statistik menunjukkan bahwa kadar MCP-1 (r = 0,333, P <
0,01), G-CSF (r = 0,245, P < 0,05), dan VEGF (r = 0,300, P < 0,05) berkorelasi
lemah dan positif dengan viral load (Gambar 3B).

DISKUSI
Epidemi SARS-CoV-2 telah mempengaruhi 189 negara di seluruh dunia
dan telah dinyatakan sebagai kondisi darurat kesehatan masyarakat yang menjadi
perhatian internasional Organisasi Kesehatan Dunia. Respon inflamasi yang
dimediasi oleh sitokin dikaitkan dengan peradangan paru dan cedera paru akut
pada SARS [14, 15], MERS-CoV [12], dan baru-baru ini infeksi SARS-CoV-2 [8,
16]. Dalam penelitian ini, kami mendeteksi kadar serum 48 sitokin dan kemokin
pada 74 pasien COVID-19 termasuk kasus tanpa gejala, ringan, sedang, dan berat
yang dikonfirmasi laboratorium di Jiangsu, Tiongkok. Selain itu, hubungan antara
jenis kelamin, viral load, kadar sitokin dan kemokin serum dieksplorasi pada
pasien COVID-19.
Tidak ada penelitian sebelumnya yang mengevaluasi profil sitokin dan
kemokin serum di antara kasus tanpa gejala, ringan, dan pemulihan. Pasien yang
terinfeksi SARS-CoV-2 tanpa gejala yang tidak memiliki gejala tetapi masih
dapat menular diidentifikasi [6, 20]. Perlu dicatat bahwa kasus tanpa gejala dan
kasus dengan ringan merupakan infeksi SARS-CoV-2 terselubung yang dapat
memicu wabah baru dan harus mendapat perhatian yang memadai. Di sini, kami
menemukan bahwa konsentrasi sirkulasi 27 sitokin atau kemokin (IL-1β, IL-1ra,
IL-2, IL-2Rα, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL -13, IL-15, IL-17, IL-18, G-CSF,
M-CSF, IFN-α2, IFN-γ, TNF-α, TRAIL, FGF dasar, HGF, PDGF-BB, VEGF,
GRO- α, IP-10, MCP-1, dan MIG) pada kelompok COVID-19 bergejala dan 3
(IP-10, IL-10, dan IL-7) pada kasus tanpa gejala meningkat dibandingkan dengan
kelompok kontrol yang sehat. Hasil ini menunjukkan bahwa IP-10, IL-10, dan IL-
7 dapat membantu mengidentifikasi adanya infeksi pada kasus dicurigai tanpa
gejala dan kontak dekat. Juga, kami menemukan bahwa 3 sitokin ini memiliki
nilai diagnostik yang signifikan seperti yang dianalisis dengan kurva. Sitokin
proinflamasi IL-1ra, IL-1β, IL-6, dan kemokin IP-10 secara signifikan lebih
rendah pada kasus tanpa gejala dibandingkan pada pasien bergejala, menunjukkan
faktor-faktor ini dapat menjadi prediktor munculnya gejala klinis. Juga, pada
individu yang pulih dari COVID-19, konsentrasi sitokin dan kemokin serum
menurun ke tingkat normal. Hasil ini menunjukkan bahwa sitokin proinflamasi
dan produksi kemokin yang diinduksi oleh SARS-CoV-2 diamati tidak hanya
pada pasien bergejala tetapi juga pada kasus tanpa gejala klini yang kembali
normal setelah pemulihan. Temuan ini menunjukkan bahwa sitokin dan kemokin
dapat berfungsi sebagai “pembawa pesan” infeksi SARS-CoV-2 dan berkontribusi
pada pemahaman kita tentang patogenesis dan outcome di semua tahapan
penyakit infeksi COVID-19.
Kami kemudian memeriksa kadar sitokin dan kemokin ini pada pasien
bergejala dengan tingkat keparahan penyakit yang berbeda. Kasus bergejala
dikategorikan menjadi 3 kelompok klinis, kasus ringan dengan sedikit gejala
saluran pernapasan atas dan tidak ada perubahan radiologis, kasus sedang dengan
pneumonia dan kelainan radiologis, dan kasus berat dengan gagal napas dan
beberapa kasus kematian [17]. Pasien COVID19 yang parah memiliki kadar
serum IL-6, IL-7, IL-10, G-CSF, M-CSF, IP-10, MCP-1, MCP-3, MIG, dan MIP-
1α yang lebih tinggi dibandingkan dengan kasus ringan , dan tingkat MCP-3,
MIG, serta MIP-1α yang lebih tinggi dibandingkan dengan kasus sedang. Selain
itu, pasien COVID-19 kasus sedang memiliki konsentrasi serum IL-18, IP-10, dan
M-CSF yang lebih tinggi daripada kasus ringan. hasil menunjukkan bahwa, selain
IL-6, IL-7, IL-10, G-CSF, IP-10, MCP-1, dan MIP-1α yang sebelumnya
dilaporkan terkait dengan tingkat keparahan COVID-19 [8, 16], IL-18, MCP-3,
M-CSF, dan MIG juga memungkinkan menjadi prediktor keparahan COVID-19.
Sitokin dan kemokin yang terkait dengan keparahan COVID-19 ini sebagian besar
adalah interleukin, kemokin, dan colony stimulating factors. Karena COVID-19
gejala berat lebih mungkin terjadi pada pria [7, 19], kami mengevaluasi kadar
sitokin dan kemokin serum pada pasien wanita dan pria. Hasil kami
mengidentifikasi bahwa pasien laki-laki yang terinfeksi SARSCoV-2 memiliki
konsentrasi serum IL-1β, IL-2, IL-2Rα, IL-3, IL-4, IL-7, IL-8, IL-12 (p40 ), GM-
CSF, IFN-α2, IFN-γ, FGF dasar, NGF-β, HGF, LIF, VEGF, MCP-3, dan MIP-1α
lebih tinggi dibandingkan pasien wanita. Profil sitokin dan kemokin yang
terproduksi berlebihan pada pasien pria ini dapat berfungsi untuk membersihkan
patogen tetapi juga dapat memediasi peradangan jaringan yang bersifat merusak,
yang dapat ditafsirkan sebagai alasan mengapa pasien COVID-19 pria lebih
cenderung berkembang menjadi penyakit parah. Selain itu, kami menemukan
kadar serum MCP-1, G-CSF, dan VEGF berkorelasi lemah dan positif dengan
titer virus.
 Keterbatasan berikut harus dipertimbangkan dalam interpretasi temuan
kami. Pertama, jumlah subjek terbatas karena sulitnya mendapatkan sampel dari
kasus tanpa gejala dan kasus yang telah sembuh. Kedua, nilai Ct virus dapat
dipengaruhi oleh rendahnya tingkat positif deteksi RNA SARSCoV-2 dalam
serum dan kurangnya deteksi kuantitatif RNA virus. Oleh karena itu, penelitian
lebih lanjut diperlukan untuk menetapkan keterlibatan yang tepat dari faktor virus
dan pasien untuk memverifikasi respons imunologis ini. Namun demikian,
penelitian ini menunjukkan profil sitokin dan kemokin yang tersirkulasi terdeteksi
pada semua tahapan penyakit COVID-19.
Dalam penelitian ini, kami mengamati bahwa infeksi SARS-CoV-2 adalah
penginduksi sitokin dan kemokin proinflamasi yang kuat, yang mungkin terlibat
dalam pertahanan melawan infeksi virus tetapi juga dapat memediasi terjadinya
cedera paru yang bersifat merusak. Tingkat IP-10, IL-10, dan IL-7 yang
meningkat secara tidak normal dalam kasus tanpa gejala dapat membantu
mengidentifikasi infeksi SARS-CoV-2 yang terselubung, yang akan berguna
untuk mengendalikan wabah baru. Seiring perkembangan penyakit, induksi IL-6,
IL-7, IL-10, IL-18, G-CSF, M-CSF, IP-10, MCP-1, MCP-3, MIG, dan MIP-1α
yang berlebihan ditemukan terkait dengan tingkat keparahan COVID-19. Dan
ditemukan profil sitokin dan kemokin yang bersirkulasi akan kembali normal
setelah pemulihan. Selain itu, juga ditemukan satu set profil sitokin dan kemokin
secara signifikan lebih tinggi pada pria yang terinfeksi SARS-CoV-2
dibandingkan pasien wanita. Kami percaya bahwa pola respons sitokin dan
kemokin pada berbagai tahap perkembangan COVID-19 dapat berfungsi sebagai
biomarker untuk mengevaluasi tingkat keparahan penyakit dan outcome dari
pasien COVID-19. Selain itu, pengobatan imunomodulator untuk mengatur
respons sitokin yang disertai dengan pengobatan antivirus dapat menjadi strategi
terapi yang efektif untuk infeksi SARS-CoV-2.

Data Tambahan
Materi tambahan tersedia di The Journal of Infectious Diseases online. Terdiri
dari data yang disediakan oleh penulis untuk kepentingan pembaca, materi yang
diposting tidak disalin dan merupakan tanggung jawab penulis, jadi pertanyaan
atau komentar harus ditujukan kepada penulis terkait.

Catatan
Ucapan Terima Kasih
Kami berterima kasih kepada sukarelawan yang sehat atas partisipasi mereka
dalam penelitian ini; dan Zhan Zhang untuk saran analitis dan tinjauan kritis
naskah ini.
Dukungan keuangan
Karya ini didukung oleh National Natural Science Foundation of China (hibah
nomor 81601732, 31570926, 81871666, 31700035); Yayasan Ilmu Pengetahuan
Alam Provinsi Jiangsu (nomor hibah BK20191489); Proyek Penelitian dan
Pengembangan Utama Provinsi Jiangsu (nomor hibah BE2019761, BE2017748);
Bakat Pemuda Medis provinsi Jiangsu (nomor hibah QNRC2016537,
JKRC2016018); dan Proyek “Enam Satu” Provinsi Jiangsu (nomor hibah
LGY2017084).
Potensi konflik kepentingan
Semua penulis: Tidak ada konflik kepentingan yang dilaporkan. Semua penulis
telah menyerahkan Formulir ICMJE untuk Pengungkapan Potensi Konflik
Kepentingan. Konflik yang dianggap editor relevan dengan isi naskah telah
diungkapkan.
 Telaah Jurnal Metode PICO-VIA

Judul jurnal : Profil Serum Sitokin dan Kemokin dalam Hubungannya Terhadap
Keparahan Penyakit Coronavirus 2019 di China
Penulis : Ying Chi et al
Publikasi : 1 September 2020, The journal of infectious disease, Nanjing
Medical University, China

Patient/Population of Problem
 70 pasien yang terinfeksi SARS-CoV-2, didiagnosis dengan RT-PCR real
time atau sekuensing, dan 4 kasus pasien pemulihan di Provinsi Jiangsu,
Tiongkok.

Intervention
 Pada penelitian ini tidak ada intervensi yang dilakukan terhadap variabel

Comparassion
 Perbandingan pertama dilakukan untuk menentukan kadar sitokin dan
kemokin pada kelompok sehat terhadap kasus terinfeksi covid-19
simptomatik, asimptomatik, dan sembuh.
 Perbandingan kedua dilakukan untuk menentukan kadar sitokin dan
kemokin pada kelompok kasus covid-19 ringan, sedang, dan berat
 Perbandingan ketiga dilakukan untuk menentukan kadar sitokin dan
kemokin anatar pasien terinfeksi covid-19 Pria dan Wanita.

Outcome
 Pada perbandingan yang dilakukan untuk menentukan kadar sitokin dan
kemokin pada kelompok sehat terhadap kasus terinfeksi covid-19
simptomatik, asimptomatik, dan sembuh ditemukan :
- Konsentrasi sirkulasi 27 sitokin atau kemokin (IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-
2Rα, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL -13, IL-15, IL-17, IL-18, G-CSF,
M-CSF, IFN-α2, IFN-γ, TNF-α, TRAIL, FGF dasar, HGF, PDGF-BB,
 VEGF, GRO- α, IP-10, MCP-1, dan MIG) pada kelompok COVID-19
bergejala dan 3 (IP-10, IL-10, dan IL-7) pada kasus tanpa gejala
meningkat dibandingkan dengan kelompok kontrol yang sehat.
- Kadar serum IL-1ra, IL-1β, IL-6, dan IP-10 lebih rendah pada kasus
tanpa gejala daripada kasus dengan gejala.
- Kadar serum IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-6, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12 (p40),
IL-13, IL-15, IL -18, G-CSF, M-CSF, IFN-α2, IFN-γ, TNF-α, TRAIL,
FGF dasar, NGF-β, VEGF, CTACK, GRO-α, IP-10, MCP-1, MCP- 3,
MIF, dan MIG pada kasus sembuh secara signifikan lebih rendah
dibandingkan pada kasus simptomatik.
- Tidak ada perbedaan yang signifikan secara statistik pada kadar serum
IL-1α, IL-3, IL-4, IL-5, IL-12(p70), IL-16, GM-CSF, SCF, TNF-β,
LIF, SCGF-β, MIP-1α, MIP-1β, RANTES, dan SDF-1α dengan salah
satu kelompok, seperti yang ditunjukkan.
 Pada perbandingan yang dilakukan untuk menentukan kadar sitokin dan
kemokin pada kelompok kasus covid-19 ringan, sedang, dan berat
ditemukan :
- Dibandingkan dengan kelompok kontrol sehat, kasus ringan memiliki
kadar serum IL-1β, IL-1ra, IL-2Rα, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-
13, IL-15, IL-17, M-CSF, IFN-α2, IFN-γ, TNFα, TRAIL, FGF dasar,
HGF, PDGF-BB, VEGF, eotaxin, GRO-α, IP-10, MIG; kasus sedang
memiliki kadar serum IL-1β, IL-1ra, IL-2Rα, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9,
IL-10, IL-15, IL-18, G- CSF, M-CSF, IFN-α2, IFN-γ, TNF-α, TRAIL,
FGF dasar, HGF, PDGF-BB, VEGF, eotaxin, GRO-α, IP-10, MIG;
dan kasus berat memiliki kadar serum IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-2Rα, IL-
6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-13, IL-17, IL-18, G-CSF, M-CSF, IFN-
α2, IFN-γ, TNF-α, TRAIL, HGF, PDGF-BB, VEGF, eotaxin, IP-10,
MCP-1, MCP-3 , MIG, dan MIP-1α yang lebih tinggi.
- Dibandingkan dengan kasus ringan, kasus berat memiliki konsentrasi
serum IL-6, IL-7, IL-10, G-CSF, M-CSF, IP-10, MCP-1, MCP-3,
 MIG, dan MIP-1α ; dan kasus sedang memiliki konsentrasi serum IL-
18, IP-10, dan M-CSF yang lebih tinggi.
- Kasus berat memiliki tingkat MCP-3, MIG, dan MIP-1α yang lebih
tinggi daripada kasus sedang
- Ditemukan bahwa sebagian besar sitokin yang kadarnya terkait dengan
keparahan COVID-19 memuncak pada sekitar 6 hingga 8 hari (fase
akut penyakit) setelah onset. Namun, sebagian besar sitokin lain,
kecuali IL-1ra dan MIF, tidak memiliki waktu puncak yang jelas.
 Pada perbandingan yang dilakukan untuk menentukan kadar sitokin dan
kemokin anatar pasien terinfeksi covid-19 Pria dan Wanita ditemukan
pasien pria yang terinfeksi SARS-CoV-2 memiliki konsentrasi serum yang
lebih tinggi yaitu: IL-1β, IL-2, IL-2Rα, IL-3 , IL-4, IL-6, IL-7, IL-8, IL-
13a, IL-15, G-CSF, M-CSF, IFN-α2, IFN-γ, FGF dasar, NGF-β, HGF,
LIF, VEGF, MCP-3, dan MIP-1α dibandingkan pasien wanita.
 Kadar MCP-1 (r = 0,333, P < 0,01), G-CSF (r = 0,245, P < 0,05), dan
VEGF (r = 0,300, P < 0,05) berkorelasi lemah dan positif dengan viral
load.

Validity
 Desain penelitian ini tidak dijelasakan
 Teknik pengambilan sampel yang digunakan tidak dijelaskan, namun
70 pasien diambil berdasarkan hasil RT-PCR real time atau
sekuensing, dan 4 kasus untuk kelompok kontrol sehat dipilih dengan
kriteria eksklusi adanya penyakit menular akut atau kronis, adanya
kelainan yang signifikan secara klinis, dan sedang dalam pengobatan
yang diketahui berpengaruh pada faktor imunologi.
 Subjek dan fokus penelitian ini sudah sesuai yaitu pasien covid-19 di
Rumah Sakit di Provinsi Jiangsu, Tiongkok. Dimana kasus covid-19
masih tinggi dan beragam.
 Data yang dikumpulkan sudah sesuai dengan tujuan penelitian. Yaitu
berupa 48 serum sitokin dan kemokin diukur dalam immunoassay
 biometrik multipleks yang mengandung mikrosfer fluoresen
terkonjugasi dengan antibodi monoklonal spesifik target dan viral load
relatif setiap pasien dihitung dengan menggunakan persamaan 2−△Ct,
di mana △ nilai ambang batas siklus (Ct) = gen Ctviral N−Ct RnaseP.
Data diterjemahkan ke log2 (viral load relatif), yang setara dengan
nilai −△Ct [18].
 Perhitungan statistic yang dipakai dalam penelitian ini meliputi : data
kuantitatif yang terdistribusi normal disajikan sebagai rata-rata ±
standar deviasi (SD), sedangkan data yang terdistribusi tidak normal
disajikan sebagai median (persentil ke-25-75). Uji Mann-Whitney U
nonparamentik digunakan untuk membandingkan kadar sitokin serum
antara 2 kelompok. analisis Spearman digunakan untuk
mengeksplorasi korelasi antara sitokin dan viral load karena distribusi
variabel tidak normal. Kemudian dilakukan analisis heat map dari
koefisien korelasi, hasilnya dianggap signifikan secara statistik jika
nilai P < 0,05.
 Maka dapat disimpulkan bahwa penelitian ini valid

Importance
 Per 20 Maret 2020, SARS-CoV-2 telah menimbulkan 326.558 kasus
di seluruh dunia, termasuk didalamnya 14.267 kematian
 Penelitian ini penting karena temuan penelitian ini akan menambah
pemahaman kita tentang peristiwa imunoregulasi dalam
perkembangan penyakit dan patogenesis infeksi SARS-CoV-2, yang
selanjutnya diharapkan dapat berkontribusi terhadap evaluasi tingkat
keparahan COVID-19 dan dalam mengoptimalkan strategi terapi.

Applicable
 Hasil penelitian ini dapat dipakai sebagai referensi tentang profil
serum Sitokin dan Kemokin dalam hubungannya terhadap keparahan
penyakit Covid-19
 Hasil penelitian ini dapat dijadikan referensi oleh dunia medis
Indonesia dalam evaluasi tingkat keparahan COVID-19 dan
mengoptimalkan strategi terapi.
 DAFTAR PUSTAKA

1. Zhu N, Zhang D, Wang W, et al. A novel coronavirus from patients with

pneumonia in China, 2019. N Engl J Med 2020; 382:727–33.
2. Armstrong GL, Mac Cannell DR, Taylor J, et al. Pathogen genomics in
public health. N Engl J Med 2019; 381:2569–80.
3. Lu R, Zhao X, Li J, et al. Genomic characterisation and epidemiology of
2019 novel coronavirus: implications for virus origins and receptor
binding. Lancet 2020; 395:565–74.
4. Wang D, Hu B, Hu C, et al. Clinical characteristics of 138 hospitalized
patients with 2019 Novel coronavirus-infected pneumonia in Wuhan,
China. JAMA 2020; 323:1061–9.
5. Zhou F, Yu T, Du R, et al. Clinical course and risk factors for mortality
of adult inpatients with COVID-19 in Wuhan, China: a retrospective
cohort study. Lancet 2020; 395:1054–62.
6. Ling Z, Xu X, Gan Q, et al. Asymptomatic SARS-CoV-2 infected patients
with persistent negative CT findings. Eur J Radiol 2020; 126:108956.
7. Chen N, Zhou M, Dong X, et al. Epidemiological and clinical
characteristics of 99 cases of 2019 novel coronavirus pneumonia in
Wuhan, China: a descriptive study. Lancet 2020; 395:507–13.
Downloaded from https://academic.oup.com/jid/article/222/5/746/5860445
8. 8. Huang C, Wang Y, Li X, et al. Clinical features of patients infected with
2019 novel coronavirus in Wuhan, China. Lancet 2020; 395:497–506.
9. Chan MC, Cheung CY, Chui WH, et al. Proinflammatory cytokine
responses induced by influenza A (H5N1) viruses in primary human
alveolar and bronchial epithelial cells. Respir Res 2005; 6:135.
10. Seo SH, Hoffmann E, Webster RG. Lethal H5N1 influenza viruses escape
host anti-viral cytokine responses. Nat Med 2002; 8:950–4.
11. Chi Y, Zhu Y, Wen T, et al. Cytokine and chemokine levels in patients
infected with the novel avian influenza A (H7N9) virus in China. J Infect
Dis 2013; 208:1962–7.
12. Mahallawi WH, Khabour OF, Zhang Q, et al. MERS-CoV infection in
humans is associated with a pro-inflammatory Th1 and Th17 cytokine
profile. Cytokine 2018; 104:8–13.
13. Yu X, Zhang X, Zhao B, et al. Intensive cytokine induction in pandemic
H1N1 influenza virus infection accompanied by robust production of IL-
10 and IL-6. PLoS One 2011; 6:e28680.
14. Wong CK, Lam CW, Wu AK, et al. Plasma inflammatory cytokines and
chemokines in severe acute respiratory syndrome. Clin Exp Immunol
2004; 136:95–103.
15. Zhang Y, Li J, Zhan Y, et al. Analysis of serum cytokines in patients
with severe acute respiratory syndrome. Infect Immun 2004; 72:4410–5.
16. Qin C, Zhou L, Hu Z, et al. Dysregulation of immune response in patients
with COVID-19 in Wuhan, China [published online ahead of print 12
March 2020]. Clin Infect Disease doi: 10.1093/cid/ciaa248.
17. China National Health Commission. Novel coronavirus pneumonia
diagnosis and treatment guidance. Trial 5th ed.
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7653p/202002/d4b895337e19445f8d728fca
f1e3e13a/files/ab6bec7f93e64e7f998d802991203cd6.pdf. Accessed 25
March 2020.
18. Ge Y, Zhao K, Qi Y, et al. Serum microRNA expression profile as a
biomarker for the diagnosis of pertussis. Mol Biol Rep 2013; 40:1325–32.
19. Yang X, Yu Y, Xu J, et al. Clinical course and outcomes of critically ill
patients with SARS-CoV-2 pneumonia in Wuhan, China: a single-
centered, retrospective, observational study. Lancet Respir Med 2020;
8:475–81.
20. Zou L, Ruan F, Huang M, et al. SARS-CoV-2 viral load in upper
respiratory specimens of infected patients. N Engl J Med 2020; 382:1177–
9