Pengambilan Sampel Endotoksin Bakteri

Sampling Endotoksin melalui Limulus Amebocyte Lysate (LAL)

Tujuan Uji :
Untuk mengetahui tingkat konsentrasi endotoksin bakteri di udara, debu atau cairan.

Keuntungan dan kerugian :

1. Keuntungan
Uji endotoksin bakteri merupakan uji yang sangat sensitif untuk mendeteksi
lipopolisakarida yang biasa ditemukan pada dinding sel bakteri gram negatif. Ini
memberikan pengukuran yang baik untuk kontaminasi bakteri. Juga, ketika terdeteksi
dalam konsentrasi tinggi menimbulkan risiko kesehatan khususnya di beberapa
lingkungan kerja.
2. Kerugian
Tidak bereaksi terhadap bakteri Gram-positif.
Peralatan :
1. Kaset 3 pc bebas endotoksin dengan filter polikarbonat atau sampler pribadi IOM untuk
pengambilan sampel udara.
2. Tabung centrifuge bebas endotoksin (15 ml) untuk sampel cair.
3. Pengumpul debu (mis. DustChek™, DUSTREAM®)
4. Penyedot debu atau pompa untuk pengambilan sampel debu ; ( alternatifnya 3 kaset pc
dengan pompa volume tinggi dapat digunakan).

Protokol Pengambilan Sampel pada uji bakteri endotoksin

Sampel Udara dengan Kaset 3 bagian (Sampel Stasioner):
1. Dapatkan kaset pengambilan sampel udara 3 bagian (bebas pirogen) dengan filter
(polikarbonat) dari EMLab P&K.
2. Beri label pada kaset dengan benar.
3. Lepaskan sumbat atas (biru) dan bawah (merah) dari kaset.
4. Pasang pompa volume tinggi ke bukaan bawah kaset.
5. Kumpulkan 250 -1000 liter (2-10 Lpm).
Sampel Udara dengan IOM Personal Sampler:
1. Keluarkan kaset yang dimuat dari klip pengangkutnya dan lepas penutup kaset. Pastikan
cincin-O dipasang dengan benar di dalam badan wadah sampel. Masukkan kaset ke
dalam badan IOM Sampler yang bersih. Pasang pelat depan dengan erat untuk
memberikan segel yang baik.
2. Jepitkan ke pakaian pekerja di zona pernapasan.
3. Lepas tutup debu sampler dari stopkontak. Dengan menggunakan selang, sambungkan
saluran keluar Sampler IOM ke saluran masuk pompa sampel yang dikalibrasi ke 2 Lpm
4. Sampel untuk waktu yang tepat.
5. Setelah pengambilan sampel, keluarkan kaset dari badan sampel, letakkan penutup
pada kaset, dan seka permukaan luar kaset dengan kertas, kain, dan sikat lembut yang
bebas serabut. Tempatkan kaset dengan penutup ke dalam klip pengangkut.

Sampel Cairan:
1. Dapatkan wadah tutup ulir 15ml steril yang bebas dari endotoksin yang dapat dideteksi
untuk pengambilan sampel.
2. Biarkan wadah pengambilan sampel tetap tertutup sampai digunakan. Isi wadah dengan
air.
3. Tutup botol dengan rapat. Pastikan air tidak bocor selama pengiriman dan
pengangkutan.

Sampel Debu dengan kaset 3pc:

1. Dapatkan kaset 3 bagian 37-mm dengan permukaan tertutup, yang diisi sebelumnya
dengan filter ukuran pori 0,45 µm untuk pengambilan sampel.
2. Jumlah debu yang cukup diperlukan untuk analisis, sebaiknya 0,1 g atau lebih.
3. Vakum dengan pompa pada 10-15 Lpm selama minimal lima menit di lokasi
pengambilan sampel.

Sampel Debu dengan DustChek™ atau DUSTREAM®:

1. Dapatkan pengumpul debu (mis. DustChek™, DUSTREAM®).
2. Biasanya, jumlah debu yang terkumpul jauh lebih penting daripada waktu menyedot
debu, kecepatan pompa, atau luas permukaan sampel. Debu sebanyak mungkin dengan
minimal satu sendok teh atau ~150 mg debu diperlukan untuk melakukan analisis. Lebih
banyak lebih baik.
3. Lepaskan penutup dari setiap ujung pengumpul debu alergen, lalu pasang pengumpul ke
ujung selang penyedot debu.
4. Dengan pengumpul debu terpasang pada penyedot debu, nyalakan penyedot debu dan
seret pengumpul debu ke atas permukaan yang akan diambil sampelnya (lantai, tempat
 tidur, furnitur, dll.). Sudut ruangan seringkali merupakan area yang baik untuk
mengumpulkan sampel debu.

Pengiriman
1. Labeli sampel dengan benar (untuk sampel udara catat volume udara) dan isilah Chain
of Custody (COC).
2. Simpan sampel dalam lemari pendingin jika sampel perlu dikumpulkan dalam jangka
waktu yang lebih lama sebelum dikirim ke laboratorium.
3. Lepaskan pengumpul debu dari selang vakum dan pasang kembali tutupnya di setiap sisi
pengumpul.