MAKALAH BIOLOGI SEL

PRINSIP REKAYASA GENETIK

PENYUSUN :

NAMA : SUKASLIM AMIN

NIM : D1B121192
KELAS : D/2021

DOSEN : Apt. SUNARTI, M.SI

PROGRAM STUDI S1 FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MEGAREZKY
MAKASSAR
2021
 KATA PENGANTAR

Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena berkat rahmat dan karunia-
Nya kami dapat menyusun makalah yang berjudul “ Prinsip Rekayasa Genetik” ini
tepat pada waktu yang telah ditentukan. Kami berharap agar makalah ini dapat
bermanfaat bagi peserta didik dan pembaca pada umumnya, sebagai salah satu
sumber pengetahuan dan bahan pembelajaran tentang kimia analisis.
Dalam hal ini kami selaku penyusun menyadari masih banyak kekurangan dan
kekeliruan dalam penyusunan makalah ini, untuk itu kami meminta maaf atas segala
keterbatasan waktu dan kemampuan kami dalam menyelesaikan makalah ini.
Segala kritik dan saran yang membangun senantiasa kami harapkan demi
peningkatan kualitas makalah.

i
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ………………………………………………………. i

DAFTAR ISI………………………………………………………………… ii
BAB I PENDAHULUAN…………………………………………………… 1
A. Latar Belakang ...............……………………………………. 1
B. Rumusan Masalah …..……………………………………… 2
BAB II PEMBAHASAN…………………………………………………… 2
A. Pengertian Rekayasa Genetik………..……………………… 2
B. Sejarah Rekayasa Genetik..............…………………………. 3
C. Proses Rekayasa Genetik..................................…………….. 5
D. Peneraparan Rekayasa Genetik….…………………………. 8
BAB III PENUTUP………………………………………………………… 9
A. Kesimpulan…………………………………………………. 9
B. Saran………………………………………………………… 9

ii
1

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Rekayasa genetika, juga disebut modifikasi genetika, adalah manipulasi

langsung gen suatu organisme menggunakan bioteknologi. Hal ini merupakan satu set
teknologi yang digunakan untuk mengubah susunan genetik dari sel, termasuk
transfer gen-gen yang berada dan melintasi batas-batas spesies untuk menghasilkan
organisme yang meningkat. DNA baru diperoleh dengan mengisolasi dan menyalin
materi genetik dari induk menggunakan metode DNA rekombinan atau sintesa DNA
buatan. Sebuah vektor biasanya diciptakan dan digunakan untuk menyisipkan DNA
ini ke organisme inang. Molekul DNA rekombinan pertama dibuat oleh Paul Berg
pada tahun 1972 dengan menggabungkan DNA virus monyet SV40 dengan virus
lambda.
Selain memasukkan gen, proses ini dapat digunakan untuk menghapus gen.
DNA baru dapat dimasukkan secara acak, atau ditargetkan le bagian tertentu dari
genom. Suatu organisme yang dihasilkan melalui rekayasa genetika dianggap
dimodifikasi secara genetik dan entitas yang dihasilkan disebut genetically modified
organism (GMO). Organisme transgenik pertama adalah bakteri yang dihasilkan oleh
Herbert Boyer dan Stanley Cohen pada tahun 1973. Rudolf Jaenisch menciptakan
hewan transgenik pertama ketika dia memasukkan DNA asing dalam tikus pada tahun
1974. Perusahaan pertama yang berfokus pada rekayasa genetika, Genentech,
didirikan pada tahun 1976 dan mulai memproduksi protein manusia.
Rekayasa genetika telah banyak diaplikasikan dalam berbagai bidang, termasuk
penelitian, obat-obatan, bioteknologi industri, dan pertanian. Munculnya tanaman
rekayasa genetika yang dikomersialisasi telah memberikan manfaat ekonomi kepada
para petani di berbagai negara, tetapi juga menjadi sumber kontroversi. Hal ini sudah
muncul sejak awal kehadirannya, ladang percobaan uji pertamanya dihancurkan oleh
aktivis anti-transgenik. Meskipun ada konsensus ilmiah yang menyatakan bahwa
makanan yang berasal dari tanaman transgenik tidak menimbulkan risiko yang lebih
besar untuk kesehatan manusia daripada makanan konvensional, keamanan pangan
transgenik tetap menjadi pusat kritikan.
 1
Aliran gen, dampak pada organisme non-target, kontrol pasokan makanan dan
hak-hak kekayaan intelektual juga menjadi perdebatan. Adanya masalah ini
mengakibatkan munculnya pengembangan kerangka peraturan, yang dimulai pada
tahun 1975. Perjanjian internasionalnya juga telah disepakati pada tahun 2000 yaitu
Protokol Cartagena tentang Keamanan Hayati.

B. Rumusan Masalah

1. Apa pengertian rekayasa genetik?

2. Bagaimana sejarah rekayasa genetik?
3. Bagaimana proses rekayasa genetik?
4. Bagaimana penerapan rekayasa genetik?

BAB II

PEMBAHASAN

A. Apa pengertian rekayasa genetik?

GENETIKA
Genetika adalah kata yang
dipinjam dari bahasa
Belanda:genetica, adaptasi
dari bahasa Inggris:
genetics, dibentuk dari
kata bahasa Yunani
genno, yang
berarti "melahirkan".
Genetika merupakan
cabang biologi yang
mempelajari
pewarisan sifat pada
organisme maupun
suborganisme (seperti virus
dan prion).
Maka, dapat juga dikatakan
bahwa genetika adalah ilmu
tentang gen dan segala
aspeknya
GENETIKA
Genetika adalah kata yang
dipinjam dari bahasa
Belanda:genetica, adaptasi
dari bahasa Inggris:
genetics, dibentuk dari
kata bahasa Yunani
genno, yang
berarti "melahirkan".
Genetika merupakan
cabang biologi yang
mempelajari
pewarisan sifat pada
organisme maupun
suborganisme (seperti virus
dan prion).
Maka, dapat juga dikatakan
bahwa genetika adalah ilmu
tentang gen dan segala
aspeknya
GENETIKA
Genetika adalah kata yang
dipinjam dari bahasa
Belanda:genetica, adaptasi
dari bahasa Inggris:
genetics, dibentuk dari
kata bahasa Yunani
genno, yang
berarti "melahirkan".
Genetika merupakan
cabang biologi yang
mempelajari
pewarisan sifat pada
organisme maupun
suborganisme (seperti virus
dan prion).
Maka, dapat juga dikatakan
bahwa genetika adalah ilmu
tentang gen dan segala
aspeknya
Rekayasa genetika atau rekombinan DNA adalah kumpulan teknik-teknik
eksperimental memungkinkan peneliti untuk mengisolasi, mengidentifikasi, dan
melipat gandakan suatu fragmen dari materi genetika (DNA) dalam bentuk murninya.
Pemanfaatan teknik genetika di dalam bidang pertanian diharapkan dapat
memberikan sumbangan, baik dalam membantu memahami mekanisme-mekanisme
dasar proses metabolisme tanaman maupun dari segi aplikasi praktis seperti
pengembangan tanaman-tanaman pertanian dengan sifat unggul .Yang disebut
terakhir bisa berupa pengklonan dan pemindahan gen-gen penyandi sifat-sifat
ekonomis penting pada tanaman, maupun pemanfaatan klon-klon DNA sebagai
masker (penanda) di dalam membantu meningkatkan efisiensi seleksi dalam program
pemulihan tanaman.
Keunggulan rekayasa genetika adalah mampu memindahkan materi genetika
dari sumber yang sangat beragam dengan ketepatan tinggi dan terkontrol dalam
waktu yang lebih singkat. Melalui proses rekayasa genetika ini, telah berhasil
dikembangkan berbagai organisme maupun produk yang menguntungkan bagi
kehidupan manusia. Teknologi khusus yang digunakan dalam rekayasa genetika

2
meliputi teknologi DNA Rekombinan yaitu pembentukan kombinasi materi genetik
yang baru dengan cara penyisipan molekul DNA ke dalam suatu vektor sehingga
memungkinkannya untuk terintegrasi dan mengalami perbanyakan di dalam suatu sel
organisme lain yang berperan sebagai sel inang.
Tanaman, hewan atau mikro organisme yang telah diubah melalui rekayasa
genetik yang disebut organisme hasil rekayasa genetika. Jika materi genetik dari
spesies lain yang ditambahkan ke inang, organisme yang dihasilkan disebut
transgenik. Jika materi genetik dari spesies yang sama atau spesies yang dapat
berkembang biak secara alami dengan inang maka organisme yang dihasilkan disebut
cisgenesis. Jika rekayasa genetika digunakan untuk mengeluarkan materi genetik dari
target maka organisme yang dihasilkan disebut organisme knockout. Di Eropa
modifikasi genetika identik dengan rekayasa genetika, sedangkan di Amerika Serikat
dan Kanada modifikasi genetika juga digunakan untuk merujuk ke metode
pengembangbiakan konvensional.

B. Sejarah Rekayasa Genetik

Manusia telah mengubah genom spesies selama ribuan tahun melalui

pemuliaan selektif, atau seleksi buatan sebagai kontras dengan seleksi alam. Baru-
baru ini, pemuliaan mutasi telah menggunakan paparan bahan kimia atau radiasi
untuk menghasilkan frekuensi tinggi mutasi acak, untuk tujuan pemuliaan selektif.
Rekayasa genetika sebagai manipulasi langsung DNA oleh manusia di luar pemuliaan
dan mutasi baru ada sejak tahun 1970-an. Istilah “rekayasa genetika” pertama kali
diciptakan oleh Jack Williamson dalam novel fiksi ilmiahnya Dragon’s Island, yang
diterbitkan pada tahun 1951 satu tahun sebelum peran DNA dalam faktor keturunan
dikonfirmasikan oleh Alfred Hershey dan Martha Chase, dan dua tahun sebelumnya
James Watson dan Francis Crick menunjukkan bahwa molekul DNA memiliki
struktur heliks ganda meskipun konsep umum manipulasi genetika langsung
dieksplorasi dalam bentuk yang belum sempurna dalam cerita fiksi ilmiah Stanley G.
Weinbaum tahun 1936, Proteus Island.
Pada tahun 1972, Paul Berg menciptakan molekul DNA rekombinan pertama
dengan menggabungkan DNA dari virus monyet SV40 dengan virus lambda. Pada
tahun 1973 Herbert Boyer dan Stanley Cohen menciptakan organisme transgenik
pertama dengan memasukkan gen resistensi antibiotik ke dalam plasmid bakteri
Escherichia coli. Setahun kemudian Rudolf Jaenisch menciptakan tikus transgenik

3
dengan memasukkan DNA asing ke dalam embrio, menjadikannya hewan transgenik
pertama di dunia. Pencapaian ini menyebabkan kekhawatiran dalam komunitas ilmiah
tentang risiko potensial dari rekayasa genetika, yang pertama kali dibahas secara
mendalam di Konferensi Asilomar pada tahun 1975. Salah satu rekomendasi utama
dari pertemuan ini adalah bahwa pengawasan pemerintah terhadap penelitian DNA
rekombinan harus ditetapkan sampai teknologi dianggap aman.
Pada 1976 Genentech, perusahaan rekayasa genetika pertama, didirikan oleh
Herbert Boyer dan Robert Swanson dan setahun kemudian perusahaan itu
menghasilkan protein manusia (somatostatin) di E.coli. Genentech mengumumkan
produksi insulin manusia rekayasa genetika pada tahun 1978. Pada tahun 1980,
Mahkamah Agung AS dalam kasus Diamond v. Chakrabarty memutuskan bahwa
kehidupan yang diubah secara genetik dapat dipatenkan. Insulin yang diproduksi oleh
bakteri disetujui untuk dirilis oleh Food and Drug Administration (FDA) pada tahun
1982.
Pada tahun 1983, sebuah perusahaan bioteknologi, Advanced Genetic
Sciences (AGS) mengajukan permohonan otorisasi pemerintah AS untuk melakukan
tes lapangan dengan strain minus-es Pseudomonas syringae untuk melindungi
tanaman dari cuaca beku, tetapi kelompok lingkungan dan pengunjuk rasa menunda
tes lapangan selama empat tahun dengan tantangan hukum. Pada tahun 1987, jenis es-
minus P. syringae menjadi organisme rekayasa genetika (GMO) pertama yang
dilepaskan ke lingkungan ketika ladang stroberi dan ladang kentang di California
disemprotkan dengannya. Kedua bidang uji diserang oleh kelompok aktivis pada
malam sebelum tes terjadi: “Situs uji coba pertama di dunia menarik pelanggan
lapangan pertama di dunia”.
 Percobaan lapangan pertama tanaman rekayasa genetika terjadi di Perancis
dan AS pada tahun 1986, tanaman tembakau direkayasa agar tahan terhadap
herbisida. Republik Rakyat Tiongkok adalah negara pertama yang mengomersialkan
tanaman transgenik, memperkenalkan tembakau yang tahan virus pada tahun 1992.
Pada tahun 1994 Calgene memperoleh persetujuan untuk secara komersial
melepaskan makanan yang dimodifikasi secara genetika pertama, Flavr Savr, sebuah
rekayasa tomat. untuk memiliki umur simpan yang lebih lama.
Pada tahun 1994, Uni Eropa menyetujui tembakau yang direkayasa agar tahan
terhadap herbisida bromoxynil, menjadikannya tanaman rekayasa genetika pertama
yang dikomersialkan di Eropa. Pada tahun 1995, Bt Potato disetujui dengan aman

4
oleh Badan Perlindungan Lingkungan, setelah disetujui oleh FDA, menjadikannya
tanaman penghasil pestisida pertama yang disetujui di AS. Pada tahun 2009 11
tanaman transgenik ditanam secara komersial di 25 negara, yang terbesar berdasarkan
luas yang ditumbuhkan adalah AS, Brasil, Argentina, India, Kanada, Cina, Paraguay,
dan Afrika Selatan.
Pada 2010, para ilmuwan di J. Craig Venter Institute menciptakan genom
sintetis pertama dan memasukkannya ke dalam sel bakteri kosong. Bakteri yang
dihasilkan, bernama Mycoplasma laboratorium, dapat mereplikasi dan menghasilkan
protein. Empat tahun kemudian ini diambil selangkah lebih maju ketika bakteri
dikembangkan yang mereplikasi plasmid yang mengandung pasangan basa unik,
menciptakan organisme pertama yang direkayasa untuk menggunakan alfabet genetik
yang diperluas. Pada 2012, Jennifer Doudna dan Emmanuelle Charpentier
berkolaborasi untuk mengembangkan sistem CRISPR / Cas9, sebuah teknik yang
dapat digunakan untuk dengan mudah dan khusus mengubah genom hampir semua
organisme.

C. Proses Rekayasa Genetik

Membuat GMO adalah proses multi-langkah. Insinyur genetika pertama-tama

harus memilih gen apa yang ingin mereka masukkan ke dalam organisme. Ini
didorong oleh apa tujuannya untuk organisme yang dihasilkan dan dibangun
berdasarkan penelitian sebelumnya. Layar genetik dapat dilakukan untuk menentukan
gen potensial dan tes lebih lanjut kemudian digunakan untuk mengidentifikasi
kandidat terbaik. Pengembangan microarray, transkriptomik dan sekuensing genom
telah membuatnya lebih mudah untuk menemukan gen yang cocok. Keberuntungan
juga memainkan perannya; gen siap-bulat itu ditemukan setelah para ilmuwan
memperhatikan adanya bakteri yang tumbuh subur di hadapan herbisida.

1. Isolasi dan Kloning Gen

Langkah selanjutnya adalah mengisolasi gen kandidat. Sel yang

mengandung gen dibuka dan DNA dimurnikan. Gen dipisahkan dengan
menggunakan enzim restriksi untuk memotong DNA menjadi fragmen atau
reaksi rantai polimerase (PCR) untuk memperkuat segmen gen. Segmen ini
kemudian dapat diekstraksi melalui elektroforesis gel. Jika gen yang dipilih

5
atau genom organisme donor telah dipelajari dengan baik itu mungkin sudah
dapat diakses dari perpustakaan genetik. Jika urutan DNA diketahui, tetapi
tidak ada salinan gen yang tersedia, itu juga dapat disintesis secara artifisial.
Setelah diisolasi, gen tersebut diligasi ke dalam plasmid yang kemudian
dimasukkan ke dalam bakteri. Plasmid direplikasi ketika bakteri membelah,
memastikan salinan gen yang tidak terbatas tersedia.
Sebelum gen dimasukkan ke dalam organisme target, harus
dikombinasikan dengan elemen genetik lainnya. Ini termasuk wilayah
promotor dan terminator, yang memulai dan mengakhiri transkripsi. Gen
penanda yang dapat dipilih ditambahkan, yang dalam banyak kasus
memberikan resistensi antibiotik, sehingga peneliti dapat dengan mudah
menentukan sel mana yang telah berhasil ditransformasikan. Gen ini juga
dapat dimodifikasi pada tahap ini untuk ekspresi atau efektivitas yang lebih
baik. Manipulasi ini dilakukan dengan menggunakan teknik DNA
rekombinan, seperti pencernaan restriksi, ikatan dan kloning molekuler.

2. Memasukkan DNA ke dalam Genom Inang

Ada sejumlah teknik yang tersedia untuk memasukkan gen ke dalam

genom inang. Beberapa bakteri secara alami dapat mengambil DNA asing.
Kemampuan ini dapat diinduksi pada bakteri lain melalui stres (misalnya
sengatan listrik atau panas), yang meningkatkan permeabilitas membran sel
terhadap DNA; DNA yang diambil dapat diintegrasikan dengan genom atau
ada sebagai DNA ekstrachromosomal. DNA umumnya dimasukkan ke dalam
sel hewan menggunakan microinjection, di mana ia dapat disuntikkan melalui
amplop nuklir sel langsung ke dalam nukleus, atau melalui penggunaan vektor
virus.
Pada tanaman, DNA sering dimasukkan menggunakan rekombinasi
Agrobacterium-mediated, mengambil keuntungan dari urutan T-DNA
Agrobacterium yang memungkinkan penyisipan alami bahan genetik ke dalam
sel tanaman. Metode lain termasuk biolistik, di mana partikel emas atau
tungsten dilapisi dengan DNA dan kemudian ditembakkan ke sel tanaman
muda, dan elektroporasi, yang melibatkan penggunaan sengatan listrik untuk
membuat membran sel permeabel terhadap DNA plasmid. Karena kerusakan

6
yang disebabkan oleh sel-sel dan DNA efisiensi transformasi dari biolistik dan
elektroporasi lebih rendah dari transformasi agrobakterial dan mikroinjeksi.
Karena hanya sel tunggal yang ditransformasikan dengan bahan
genetik, organisme harus diregenerasi dari sel tunggal itu. Pada tanaman ini
dicapai melalui penggunaan jaringan. Pada hewan perlu dipastikan bahwa
DNA yang dimasukkan ada di dalam sel induk embrionik. Bakteri terdiri dari
sel tunggal dan bereproduksi secara klon sehingga regenerasi tidak diperlukan.
Marker yang dapat dipilih digunakan untuk dengan mudah membedakan sel
yang ditransformasi dari yang tidak diubah. Penanda ini biasanya ada dalam
organisme transgenik, meskipun sejumlah strategi telah dikembangkan yang
dapat menghilangkan penanda yang dapat dipilih dari tanaman transgenik
dewasa.
Pengujian lebih lanjut menggunakan PCR, hibridisasi selatan, dan
sekuensing DNA dilakukan untuk mengkonfirmasi bahwa suatu organisme
mengandung gen baru. Tes-tes ini juga dapat mengkonfirmasi lokasi
kromosom dan menyalin nomor gen yang dimasukkan. Kehadiran gen tidak
menjamin itu akan diekspresikan pada tingkat yang sesuai dalam jaringan
target sehingga metode yang mencari dan mengukur produk gen (RNA dan
protein) juga digunakan. Ini termasuk hibridisasi utara, RT-PCR kuantitatif,
Western blot, imunofluoresensi, ELISA dan analisis fenotipik.
Bahan genetik baru dapat dimasukkan secara acak ke dalam genom
inang atau ditargetkan ke lokasi tertentu. Teknik penargetan gen
menggunakan rekombinasi homolog untuk membuat perubahan yang
diinginkan pada gen endogen tertentu. Ini cenderung terjadi pada frekuensi
yang relatif rendah pada tanaman dan hewan dan umumnya membutuhkan
 penggunaan penanda yang dapat dipilih. Frekuensi penargetan gen dapat
sangat ditingkatkan melalui pengeditan genom. Pengeditan genom
menggunakan nukleasi yang direkayasa secara artifisial yang menciptakan
jeda beruntai ganda spesifik pada lokasi yang diinginkan dalam genom, dan
menggunakan mekanisme endogen sel untuk memperbaiki jeda yang
diinduksi oleh proses alami rekombinasi homolog dan penggabungan akhir
yang tidak homolog.
Ada empat keluarga nuklease yang direkayasa: meganucleases,
nukleasi jari seng, transkripsi nukleasi seperti aktivator (TALEN), transkripsi,

7
dan sistem Cas9-guideRNA (disesuaikan dari CRISPR). TALEN dan CRISPR
adalah dua yang paling umum digunakan dan masing-masing memiliki
kelebihannya sendiri. TALEN memiliki kekhususan target yang lebih besar,
sementara CRISPR lebih mudah dirancang dan lebih efisien. Selain
meningkatkan penargetan gen, nuklease yang direkayasa dapat digunakan
untuk memperkenalkan mutasi pada gen endogen yang menghasilkan sistem
gen.

D. Penerapan Rekayasa Genetik

Rekayasa genetika diterapkan dalam bidang kedokteran, penelitian, industri

dan pertanian dan dapat digunakan pada berbagai macam tanaman, hewan, dan
organisme mikro. Bakteri, organisme pertama yang dimodifikasi secara genetik,
dapat memasukkan DNA plasmid yang mengandung gen baru yang mengkode obat-
obatan atau enzim yang memproses makanan dan substrat lainnya. Tumbuhan telah
dimodifikasi untuk perlindungan serangga, resistensi herbisida, ketahanan terhadap
virus, peningkatan nutrisi, toleransi terhadap tekanan lingkungan dan produksi vaksin
yang dapat dimakan.
Kebanyakan transgenik komersial tahan tanaman serangga atau toleran
herbisida. Hewan yang dimodifikasi secara genetik telah digunakan untuk penelitian,
hewan model dan produksi produk pertanian atau farmasi. Hewan yang dimodifikasi
secara genetik termasuk hewan dengan gen yang tersingkir, peningkatan kerentanan
terhadap penyakit, hormon untuk pertumbuhan ekstra dan kemampuan untuk
mengekspresikan protein dalam susu mereka.
 8
BAB III

PENUTUP

A. Kesimpulan

Rekayasa genetika adalah suatu proses yang mengubah susunan genetik dari
suatu organisme dengan menghapus atau memasukkan DNA. Tidak seperti
pengembangbiakan hewan dan pemuliaan tanaman secara tradisional, yang
melibatkan beberapa persilangan dan kemudian organisme terpilih dengan fenotip
tertentu, rekayasa genetika mengambil gen secara langsung dari satu organisme dan
memasukkan ke organisme lain. Proses ini jauh lebih cepat, dapat digunakan untuk
menyisipkan gen-gen dari organisme apa pun (bahkan organisme dari berbagai
domain) dan mencegah agar gen yang tidak diinginkan tidak ikut ditambahkan.
Rekayasa genetika berpotensi memperbaiki kelainan genetik pada manusia
dengan mengganti gen yang rusak dengan gen yang baik. Proses ini menjadi sebuah
alat yang penting dalam penelitian yang memungkinkan fungsi spesifik suatu gen
menjadi bahan penelitian. Tanaman transgenik yang telah dikembangkan saat ini
membantu keamanan pangan dengan meningkatkan hasil, nilai gizi dan toleransi
terhadap tekanan lingkungan.

B. Saran

Dalam menerapkan rekayasa genetik, sebagai manusia yang memiliki naluri

seyogianya dapat menerapkannya sesuai dengan norma-norma agar dampak negatif
dari penerapan rekayasa genetik.
9