Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Kemosfer 236 (2019) 124390

Daftar isi tersedia diScienceDirect

Kemosfer
halaman utama jurnal:www.elsevier.com/locate/chemosphere

Riwayat hidup dan efek perilaku pewarna sintetis dan alami pada
Daphnia magna
Flavia R.AbeA,B,*, Ana L. MachadoB, Amadeu MVM SoaresB, Danielle P. de OliveiraA, Joa
~o LT PestanaB
ASekolah Ilmu Farmasi Ribeira ~o Preto, Universitas Sa ~o Paulo, 14040-903, Ribeira ~o Preto, Sa~o Paulo, Brasil
BDepartemen Biologi dan Pusat Studi Lingkungan dan Kelautan, Universitas Aveiro, 3810-193, Aveiro, Portugal

highlight

- Basic Red 51 dan Erythrostominone sangat beracunDaphnia magna.

- Kedua pewarna menyebabkan konsekuensi yang merugikan pada tingkat populasi untuk daphnida.
- Basic Red 51 meningkatkan laju respirasi daphnid.
- Toksisitas erythrostominone 100 kali lipat lebih rendah dibandingkan dengan Basic Red 51.
- Setelah fotodegradasi, Erythrostominone kehilangan potensi toksiknyaD. magna.

articleinfo abstrak

Riwayat artikel: Pewarna azo adalah kelas pewarna terbesar yang banyak digunakan oleh industri meskipun memiliki potensi mutagenik bagi
Diterima 18 April 2019 manusia. Dengan demikian, pewarna alami telah muncul kembali sebagai alternatif penting untuk keselamatan manusia.
Diterima dalam bentuk
Namun, studi terbatas telah berfokus pada efek pewarna terhadap lingkungan, sehingga penyelidikan ekotoksikologi mereka
revisi 18 Juni 2019
sangat penting. Di sini, kami bertujuan untuk mengevaluasi efek toksik yang diinduksi oleh pewarna azo sintetik Basic Red 51
Diterima 17 Juli 2019 Tersedia
(BR51) dibandingkan dengan pewarna alami erythrostominone (Ery) di microcrustacean Dafnia magna,organisme standar
online 17 Juli 2019
yang digunakan untuk menilai risiko bahan kimia terhadap organisme akuatik. Produk tak berwarna yang terbentuk setelah
Editor Penanganan: Jim Lazorchak fotodegradasi Ery (DEry) juga dievaluasi, membahas alternatif yang mudah dan berbiaya rendah untuk pengolahan limbah
industri. Hasilnya menunjukkan bahwa kedua pewarna tersebut sangat beracunD. magna.BR51 dan Ery mengurangi tingkat
Kata kunci: intrinsikD.magnapeningkatan populasi, yang menghasilkan lebih sedikit neonatus per induk. BR51 juga meningkatkan laju
Merah dasar 51 respirasi daphnid. Sebaliknya, DEry tidak mengubah parameter yang dianalisis. Tidak ada perubahan alat gerak yang diamati
Eritrostominon ketika daphnid terpapar pada konsentrasi Ery atau BR51 yang sub-mematikan. Hasil ini menunjukkan bahwa kedua pewarna
Efek sub-mematikan dapat menyebabkan konsekuensi yang merugikan bagi daphnida termasuk efek tingkat populasi, tetapi pewarna alami Ery
Perilaku berenang
menghadirkan toksisitas 100 kali lipat lebih rendah dibandingkan dengan pewarna azo BR51. Juga, fotodegradasi Ery adalah
Uji reproduksi
metode yang efisien untuk mengurangi dan mencegah efek toksik yang diamati sebelumnya, menunjukkan alternatif yang
murah, cepat dan mudah untuk pengolahan limbah yang mengandung pewarna alami ini.

©2019 Elsevier Ltd. Semua hak dilindungi undang-undang.

1. Perkenalan
Pewarna banyak digunakan dalam spektrum konsumen yang luas
* Penulis yang sesuai. Sekolah Ilmu Farmasi Ribeira ~o Preto,
Departemen Analisis Klinis, Laboratorium Toksikologi Lingkungan, Universitas S~
ao Paulo (USP), Kafe - Avenue, 14040-903, Ribeira ~o Preto, Sa~o Paulo, Brasil.
Alamat email:frabe@usp.br (FR Abe),luisamachado@ua.pt (AL Machado),
asoares@ua.pt (AMVM Melonjak),dpalma@usp.br (DP Oliveira),jpestana@ua.pt (JLT
Pestana).
produk dan proses industri, termasuk tekstil, kosmetik dan bahan
makanan. Diperkirakan bahwa lebih dari 700.000 t pewarna diproduksi
setiap tahun dan akun kelas kimia azo untuk 60e70% dari produksi
karena karakteristik yang menguntungkan dari stabilitas tinggi, biaya
rendah dan perolehan yang mudah (Zhou dan Dia, 2007;Pemeriksa et
al., 2013). Oleh karena itu, pembuangan akhir limbah cair yang
mengandung zat warna azo menjadi perhatian serius bagi lingkungan,
mengingat industri tekstil melepaskan hingga 50% zat warna ke
lingkungan perairan melalui limbah, mencapai 10e50 mg/L di
lingkungan akuatik (O'Neill et al., 1999;Chung, 2000).

https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.2019.124390 0045-6535/©
2019 Elsevier Ltd. Semua hak dilindungi undang-undang.
2 FR Abe dkk. / Kemosfer 236 (2019) 124390

Efek ekologis potensial dari pewarna azo telah dilaporkan dalam 2. Bahan-bahan dan metode-metode
literatur untuk spesies ikan air tawar (Bhunia et al. 2003;Liu et al., 2007,
Kaur dan Kaur 2015;Darsana dkk., 2015,Parrott et al., 2016), katak 2.1. Menguji senyawa
Xenopus sp. (Gungo €rdü et al., 2013,Mathieu-
Denoncourt dkk. 2014;Soriano dkk. 2014), cnidariaHydra melemahkan ( Basic Red 51 (BR51) (CAS no. 77061-58-6, MW 279,6 g/mol,
Jong et al., 2016;Vacchi et al., 2016), dan ke mikrokrustasea Daphnia sp. kemurnian 99%) (Gambar 1A) dibeli dari LCW Import and Export Ltd (Sa
(Bae dan Freeman 2007,Liu et al., 2007; Darsana dkk., 2015;Vacchi et al., ~o Paulo, Brasil). Larutan stok BR51 disiapkan dalam air sadah
2016). Bersama-sama, hasilnya mengungkapkan bahwa pewarna azo ASTM (American Society for Testing Materials) dan digunakan untuk
tampaknya beracun bagi banyak spesies air. Selain itu, hasil jelas menyiapkan larutan pengujian.
menunjukkan bahwa pewarna azo sangat beracun untuk daphnida Strain jamur endofit LC01-A (dalam fase identifikasi) disediakan dari
setelah paparan akut, menunjukkan bahwa pengujian dengan Coleça ~o de Microorganismos de
daphnida adalah metode yang sangat baik untuk evaluasi pewarna Importância Agrícola e Ambiental (CCMA, EMBRAPA, Brazil), dan
untuk toksisitas air. Namun, ada kekurangan laporan yang menilai senyawa merah erythrostominone (Ery) (CAS no. 26153-04-8, MW
siklus hidup penuh daphnid yang terpapar pewarna azo.Vacchi et al. 348,08 g/mol, kemurnian 85e92%) (Gambar 1B) diekstraksi, dimurnikan
(2016)melaporkan bahwa pewarna azo Disperse Red 1 menghambat dan dikarakterisasi oleh kelompok penelitian Prof. Dr. Luis Alberto
reproduksi daphnida setelah paparan 14 hari pada konsentrasi dari 10 Beraldo de Moraes, dari Fakultas Filsafat, Ilmu Pengetahuan dan Sastra
Mg/L. Selain itu, pewarna azo memiliki potensi mutagenik yang Ribeira ~o Preto, Universitas S~ ao Paulo, Brasil (lihat
memberatkan manusia (Reid et al., 1984;Pemeriksa et al., 2011;Leme et informasi ekstraksi yang lebih rinci diAbe et al., 2017a). Larutan stok ery
al., 2015), dan penelitian telah mengaitkan pewarna azo dengan disiapkan dalam pelarut dimetil sulfoksida (DMSO) dan diencerkan
aktivitas mutagenik sampel air yang dikumpulkan di sungai yang dalam air sadah ASTM untuk menyiapkan larutan pengujian (DMSO
menerima limbah tekstil (Coelho et al., 1992;Valent et al., 1993; 0,01%, v/v).
Umbuzeiro et al., 2005). Basic Red 51 (BR51), misalnya, mewakili Solusi Ery (DEry) yang terdegradasi dilakukan seperti yang
pewarna azo yang saat ini digunakan di industri tekstil untuk mewarnai dijelaskan sebelumnya olehAbi et al. (2017a). Singkatnya, setiap larutan
kain dan di industri kosmetik untuk produk perawatan rambut, dan uji Ery ditempatkan ke dalam bejana yang memadai (50 mL hingga 500
sebelumnya telah terbukti memiliki potensi mutagenik untuk mL labu volumetrik kaca) yang ditutup denganparafilm®dan disimpan
Salmonella typhimurium (SCC, 2011) dan untuk sel epidermis manusia ( di dalam ruangan yang dilengkapi lampu neon putih (36W, 250 lx)
Zanoni et al., 2014). Namun, ada beberapa penelitian mengenai selama 7 hari, saat larutan merah menjadi tidak berwarna. Setelah itu,
toksisitas pewarna ini terhadap ekosistem perairan. Baru-baru ini, larutan DEry segera dan langsung digunakan dalam bioassay. Analisis
ditunjukkan bahwa BR51 memiliki efek akut pada ikan air tawarDanio UPLC-DAD-MS dari Ery dan DEry dilakukan, dengan sampel diperoleh
rerioembrio dan mempengaruhi perilaku mereka, aktivitas enzim dalam 1, 2, 3, 5 dan 7 hari paparan cahaya, memungkinkan kami untuk
detoksifikasi dan konsumsi energi (Abe et al., 2017a;2017b,2018). melacak degradasi. Degradasi BR51 juga dilakukan mengikuti protokol
Untuk mencapai masyarakat yang ramah lingkungan, pewarna alternatif yang sama, tetapi mengingat pewarna sintetis tidak terdegradasi (lihat
telah dikembangkan agar tidak berbahaya bagi manusia dan lingkungan, detail lebih lanjut diAbe et al., 2017a), kami hanya menggunakan
dan pewarna yang diekstraksi dari sumber alami telah muncul kembali senyawa alami dalam pekerjaan ini.
sebagai alternatif yang penting.Shahid et al., 2013). Di antara sumber Air keras ASTM dan 0,01% DMSO dalam air keras ASTM (v/v) digunakan
pewarna alami, mikroorganisme adalah yang paling menarik karena tingkat sebagai kontrol negatif dan pelarut di semua pengujian.
pertumbuhannya yang tinggi di area kecil seperti bioreaktor, berbeda
dengan area luas yang dibutuhkan oleh tanaman, dan ekstraksi pigmen
yang cepat dan murah memungkinkan produksi skala industri dalam waktu
- et al., 2014;
singkat. waktu (Mapari et al., 2009;Velmurugan et al., 2010;Dufosse
Akilandeswari dan Pradeep, 2016). Para peneliti telah menyoroti
potensi pelindung dan terapeutik pewarna alami, yang terdiri dari sifat
antioksidan, aktivitas antimikroba dan antitumor (Kuwahara et al., 2009
;Silva et al., 2014;Akilandeswari dan Pradeep, 2016;Baldin et al., 2016).
Namun, masih kurangnya pengetahuan mengenai keamanan pewarna
alami terhadap lingkungan. Abi et al. (2017a,2017b,2018)telah
menunjukkan efek toksik dari erythrostominone (Ery), pewarna alami
yang diekstrak dari jamur, untuk
D.rerioembrio, bagaimanapun, produk yang terbentuk setelah
biodegradasi terbukti tidak berbahaya bagi organisme yang sama.
Oleh karena itu, tujuan utama dari pekerjaan ini adalah untuk
mengevaluasi keamanan lingkungan dari pewarna alami dan sintetis
terhadap microcrustaceanDafnia magna,organisme air tawar standar yang
banyak digunakan dalam bioassay toksisitas (Bae dan Freeman 2007). Untuk
ini, kami menggunakan pewarna azo sintetik BR51, yang banyak digunakan
oleh industri kosmetik dan tekstil, dan pewarna alami Ery, naftokuinon
dengan penerapan industri yang potensial. Kami juga mengevaluasi efek
merugikan dari Ery setelah fotodegradasinya (DEry) menangani pengolahan
limbah industri yang mudah dan berbiaya rendah sebelum dilepaskan ke
lingkungan perairan. Untuk penilaian ini, tidak hanya
D.magnakelangsungan hidup tetapi juga berbagai titik akhir toksisitas
sub-mematikan dan kronis seperti perilaku, pernapasan dan reproduksi
Gambar 1.Struktur kimia pewarna azo sintetik Basic Red 51 (A) dan pewarna alami
dievaluasi.
erythrostominone (B).
 FR Abe dkk. / Kemosfer 236 (2019) 124390
2.2. Organisme uji
Daphnia magnaStraus (klon Paruh) dibudidayakan dalam air sadah ASTM
yang diperkaya dengan ekstrak organik (ekstrak rumput laut, dipasok oleh
Glenside Organics Ltd., Inggris), dipertahankan pada fotoperiode 16:8 jam
terang/gelap dan 20±2-C. Organisme dipelihara dalam akuarium 1 L dengan
kepadatan 18e25 daphnids/L, dan diberi makan alga hijauRaphidocelis
subcapitatapada konsentrasi 3 105sel/mL/organisme. Media dan makanan
diperbarui setiap dua hari. Neonatus (6e15 jam) dari cengkeraman 3 atau 4
orang dewasa yang dikultur digunakan dalam bioassay, secara acak
ditugaskan untuk perawatan yang berbeda.
2.3. Eksperimen toksisitas akut
Uji toksisitas akut dilakukan untuk mendapatkan konsentrasi efektif
median 48 jam (EC50) dari BR51, Ery dan DEry to
D.magna,menurut pedoman Organization for Economic Co-operation and
Development (OECD) no. 202 (2004). Konsentrasi yang dipilih dari pewarna
yang diuji adalah 0,003, 0,06, 0,125, 0,25, 0,5 dan 1 mg/L dari BR51 dan
1,875, 3,75, 7,5, 15, 30 dan 50 mg/L dari Ery dan DEry, ditambah kontrol,
berdasarkan uji pendahuluan. tes. Neonatus didistribusikan secara acak ke
dalam piring 6-sumur yang berisi 10 mL larutan uji setiap sumur (tidak ada
makanan yang ditambahkan), dengan total 5 organisme per sumur dan 4
sumur per perlakuan (n¼20 organisme/perlakuan). Pengujian dipertahankan
selama 48 jam pada fotoperiode terang/gelap 16:8 jam dan 20±2-C.
Imobilitas diperkirakan pada 24 dan 48 jam, dan didefinisikan sebagai
organisme yang tidak dapat berenang dalam waktu 15 detik, setelah agitasi
lembut pada bejana uji.
2.4. Tes siklus hidup penuh
Uji toksisitas 21-hari dilakukan sesuai dengan pedoman OECD no.
211 (2012).
Konsentrasi pewarna yang dipilih didasarkan pada uji toksisitas
akut, dimulai dari 1% EC50sebagai konsentrasi terendah hingga 20%
dari EC50sebagai konsentrasi tertinggi. Empat konsentrasi digunakan:
0,001, 0,005, 0,01 dan 0,02 mg/L BR51, 0,2, 1, 2 dan 4 mg/L Ery dan
DEry, ditambah kontrol. Sepuluh ulangan individu per perawatan
digunakan untuk setiap pewarna yang diuji (n¼10 organisme/
perlakuan). Neonatus dipindahkan ke larutan uji 50 mL ke dalam
bejana kaca yang berisi 3 105sel/mL/organisme dari
R. subcapitatadiperkaya dengan ekstrak organik. Media dan makanan
diperbarui tiga kali per minggu. Tes dipertahankan selama 21 hari pada
fotoperiode 16:8 jam terang/gelap dan 20±2-C. Titik akhir berikut
dinilai: usiaD.magnareproduksi pertama, jumlah induk sampai 21-hari,
jumlah neonatus yang dihasilkan per betina,D.magnaukuran pada
akhir 21-d dan tingkat intrinsik peningkatan populasi (R) (Pestana et al.,
2010).
2.5. Pengukuran konsumsi oksigen
Konsumsi oksigen diperkirakan dalamD.magnaremaja menurut
metode respirometri yang digunakan sebelumnya (Pestana et al., 2010
). Konsentrasi terpilih dari pewarna yang diuji adalah 0,005, 0,01 dan
0,02 mg/L BR51 dan 1, 2 dan 4 mg/L Ery dan DEry, ditambah kontrol.
Secara singkat, neonatus dipindahkan ke akuarium 1 L berisi 3 105sel/
mL/organisme dariR. subcapitatadiperkaya dengan ekstrak organik,
dan disimpan pada kondisi prosedur kultur yang sama. Setelah
mencapai usia 4 hari, daphnid didistribusikan secara acak ke dalam
spuit gastight 50 mL (Hamilton, USA) dengan larutan uji 30 mL (tanpa
tambahan makanan). Udara yang tersisa dikeluarkan dari jarum suntik
dan perawatan dipertahankan dalam bak air pada 20-C dalam gelap.
SepuluhD.magnadigunakan per jarum suntik dan 5 jarum suntik
digunakan per pengobatan (n¼50 organisme/perlakuan). Kandungan
oksigen awal setiap jarum suntik diukur setelah 1 jam paparan
3
(TSaya¼1 jam) dengan pengukur oksigen (model 782, dengan elektroda
oksigen model 1302, Strathkelvin Instruments, Glasgow, UK). Setelah
23 jam, kandungan oksigen akhir diukur (TF¼24 jam) menggunakan
pengukur oksigen yang sama. Konsumsi oksigen dihitung sebagai
perbedaan antara TFdan TSaya, dan laju respirasi dinyatakan sebagai mg
O2/organisme/jam. Eksperimen terpisah dengan tiga kontrol kosong
(hanya jarum suntik dan larutan uji tanpa organisme) dilakukan untuk
setiap perlakuan sebagai faktor koreksi O2
penipisan karena faktor lain selain respirasi organisme.
2.6. Uji perilaku
Perilaku dariD.magnadievaluasi menggunakan sistem pelacakan
ZebraBox dan perangkat lunak ZebraLab (ViewPoint Life Science, Lyon,
Prancis). Konsentrasi terpilih dari pewarna yang diuji adalah 0,005, 0,01 dan
0,02 mg/L BR51 dan 1, 2 dan 4 mg/L Ery, ditambah kontrol. Neonatus
dipindahkan ke akuarium 1 L berisi 3 105sel/mL/organisme dariR.
subcapitatadiperkaya dengan ekstrak organik, dan disimpan pada kondisi
prosedur kultur yang sama. Setelah mencapai 4 hari, remaja didistribusikan
secara acak ke dalam piring 6-sumur yang berisi 5 mL larutan uji masing-
masing sumur (tanpa tambahan makanan), dengan total 5 organisme per
sumur dan 4 sumur per perlakuan (n¼20 organisme/perlakuan). Setelah
paparan 24 jam, remaja dipindahkan secara individual ke piring transparan
24 lubang dan segera direkam dengan video. Setiap sumur berdiameter 15,5
mm diisi dengan 0,5 mL larutan uji, mendefinisikan dimensi daerah
percobaan (dh) sebagai 15,5 mm 0,5 mm. Satu kelompok kontrol dan tiga
konsentrasi pewarna yang diuji didistribusikan pada setiap pelat untuk
menghindari perbedaan berenang karena waktu yang dicatat (total 4 pelat
dengan interval 25 menit antara setiap pelat). Tes statistik menunjukkan
tidak ada perbedaan yang signifikan di antara kontrol yang direkam dengan
video pada waktu yang berbeda.
Secara singkat, tes terdiri dari interval terang dan gelap untuk
stimulasi organisme. 2 menit pertama dari siklus cahaya adalah untuk
aklimatisasi, diikuti oleh 4 siklus berturut-turut 5 menit bergantian
terang/gelap. Penerangan LED digunakan untuk siklus cahaya dan
kamera inframerah dengan 30 frame per detik untuk siklus gelap.
Mode latar belakang transparan dipilih dengan ambang deteksi 8%.
Untuk setiap ulangan, jarak yang ditempuh (mm) dan kecepatan
renang (mm/s) dicatat secara otomatis untuk setiap interval 60 detik.
Ambang batas 0,2 cm digunakan untuk menghindari kebisingan sistem
pelacakan.
2.7. Analisis data
Komisi Eropa50dan interval kepercayaan masing-masing (CI)
dihitung untuk data toksisitas akut menggunakan metode Spearman-
Karber yang dipangkas (Hamilton et al., 1977). ANOVA satu arah diikuti
oleh uji post-hoc Dunnett digunakan untuk memverifikasi perbedaan
pada konsumsi oksigen dan ciri-ciri riwayat hidup Ciri-ciri riwayat hidup
menggunakan perangkat lunak Sigma Plot 12.5 (SysStat, San Jose,
California, USA), dengan tingkat signifikansi 5% . Normalitas dan
homogenitas varian data masing-masing diperiksa dengan uji Shapiro-
Wilk dan Levene Median. Laju intrinsik pertambahan penduduk (R)
dihitung menggunakan persamaan Euler:
XN
1¼ erxlXMX
X¼0
Di manaRadalah laju pertambahan penduduk (per hari), x adalah umur
dalam hari (0…n), lx adalah probabilitas kelangsungan hidup pada umur x,
dan mx adalah fekunditas pada umur x. Nilai semu dari ulangan dihasilkan
menggunakan prosedur jackknife (Meyer et al., 1986). Untuk menganalisis
data perilaku, model campuran linier dijalankan pada variabel perilaku (jarak
dan kecepatan) menggunakan konsentrasi Ery atau BR51,
4 FR Abe dkk. / Kemosfer 236 (2019) 124390

Stimulus Cahaya dan Siklus sebagai efek tetap; untuk
memperhitungkan tindakan berulang, setiap ulangan individu
(identitas) juga dimasukkan dalam model sebagai efek acak (perangkat
lunak R, paket Lmer;Bates et al., 2015). Signifikansi efek tetap dan
interaksinya dihitung melalui metode derajat kebebasan Satterthwaite
(paket LmerTest R;Kuznetsova et al., 2017).
3. Hasil
dan kontrol.D.magnadari semua perlakuan dan kontrol memiliki lima induk,
memulai reproduksi pertama dengan umur 8 hingga 9 hari (BR51: H¼3.73,
hal¼0,44, Eri: H¼0,00, hal¼1,00; DEri: H¼3.90, hal¼0,42) (Gambar 2B).
Paparan BR51 dan Ery menyebabkan penurunan yang signifikan dalam
jumlah neonatus yang dihasilkan perD. magna (Gambar 2C), dan dengan
demikian, ada pengurangan yang signifikan pada tingkat intrinsik
peningkatan populasi (R) (Gambar 2E).D.magnaterpapar BR51 menghasilkan
neonatus yang jauh lebih sedikit pada induk kedua (total neonatus/betina: F
4;45¼0,84, hal¼0,51; neonatus/betina pada induk ke-2: F4;45¼2.42, hal¼0,06),

3.1. Imobilitas
Tidak ada imobilitas yang diamati pada daphnia dari kelompok
kontrol. BR51 dan Ery 48-h EC50(95% CI) adalah 0,10 mg/L (0,09e0,11)
dan 19,7 mg/L (15,7e24.9), masing-masing. Kedua pewarna
menginduksi imobilitasD.magnatergantung dosis, mencapai 100%
imobilitas dalam konsentrasi tertinggi (Gambar 2A). DEry tidak
menyebabkan imobilitas di salah satu konsentrasi yang diuji.
sehingga secara signifikan mengurangiR dibandingkan dengan kontrol (F4;45
¼3.82, hal¼0,009). Ery secara signifikan mengurangi jumlah neonatus dari
induk kedua hingga kelima (total neonatus/betina: F4;43¼18,3, p <0,001),
sehingga secara signifikan mengurangiR (F4;45¼5.58, p <0.001). Oleh karena
itu, efek samping yang disebabkan oleh paparan BR51 diamati pada
konsentrasi hingga 100 kali lipat lebih rendah daripada yang diamati pada
Ery. Setelah fotodegradasi Ery (DEry), tidak ada efek yang diamati pada
organisme yang terpapar (F4;44¼0,85, hal¼0,51) (Gambar 2).

Pada akhir 21 hari paparan pewarna, panjang tubuh terakhir dari

3.2. Sejarah hidup
D.magnatidak berbeda dengan kontrol (BR51: F4;44¼1.25, hal¼0,31;
Erry: F4;43¼1.55, hal¼0,14; DEri: F4;43¼0,20, hal¼0,94)
Dalam uji 21 hari, mortalitas tidak melebihi 10% pada semua perlakuan

Gambar 2.Efek Basic Red 51 (BR51), erythrostominone (Ery) dan degradasi erythrostominone (DEry) keDaphnia magna.J: Imobilitas; B: Konsumsi oksigen; C: jumlah neonatus per
perempuan; D: panjang badan pada 21 hari; E: umur reproduksi pertama; F: tingkat intrinsik dari peningkatan alami. Nilai diwakili per rata-rata±SEM. *Berbeda signifikan dibandingkan
kelompok kontrol yaitu dengan “0” pada sumbu x (Uji Dunnett, p < 0,05). (Untuk interpretasi referensi warna dalam legenda gambar ini, pembaca dirujuk ke versi Web artikel ini.)
 FR Abe dkk. / Kemosfer 236 (2019) 124390 5

(Gambar 2D). Meja 2

Estimasi parameter untuk model campuran linier yang menganalisis pengaruh konsentrasi Basic
Red 51, Rangsangan Cahaya dan Siklus pada variabel perilaku Daphnia (Jarak, Kecepatan).
3.3. Tingkat pernapasan

Memperkirakan St. Kesalahan nilai t nilai-p

D.magnaterkena BR51 secara signifikan meningkatkan oksigen
Jarak
konsumsi dalam 14% pada 0,02 mg/L dibandingkan dengan kontrol (F3;16¼
(Mencegat) 176.926 7.725 22.904 <2e-16
4.64, hal¼0,02), sedangkan tidak ada efek signifikan yang terdeteksi untuk Konsentrasi 61.614 657.984 0,094 0,9255
paparan Ery dan DEry (F3;16¼0,44, hal¼0,73 dan F3;16¼0,75, hal¼0,54, Stimulus (Cahaya) 47.778 8.817 5.419 1.58E-07
masing-masing) (Gambar 2F). Siklus (Kedua) 2.045 8.87 0,231 0,8178
Konsentrasi * Konsentrasi 3.12 751.016 0,004 0,9967
Stimulus * Siklus 64.2 752.054 0,085 0,932
3.4. Aktivitas lokomotor Stimulus * Siklus 31.694 12.524 2.531 0,0121
Konsentrasi * Stimulus * Siklus 776.693 1063.248 0,73 0,4659
Kecepatan
Baik Ery maupun BR51 tidak memengaruhi aktivitas alat gerak daphnid
(Mencegat) 3.50705 0,11589 30.261 <2e-16
yang terpapar (Tabel 1 dan 2;Gambar 3). Seperti yang diharapkan, daphnid Konsentrasi 4.1968 9.87165 0,425 0,6711
menunjukkan kecepatan dan jarak yang lebih tinggi selama siklus terang Stimulus (Cahaya) 1.09572 0,13912 7.876 1.61E-13
daripada selama siklus gelap. Tidak ada interaksi signifikan yang diamati Siklus (Kedua) 0,0377 0,13993 0,269 0,7879
antara konsentrasi pewarna dan faktor lain yang diuji (stimulus cahaya dan Konsentrasi * Konsentrasi 0,85701 11,85008 0,072 0,9424
Stimulus * Siklus 4.03929 11.86594 0,34 0,7339
siklus). Untuk kedua pewarna dan untuk jarak dan kecepatan, satu-satunya
Stimulus * Siklus 0,37887 0,19761 1.917 0,0565
interaksi signifikan yang diamati adalah antara rangsangan cahaya dan Konsentrasi * Stimulus * Siklus 13.3748 16.77671 0,797 0,4262
siklus yang berarti bahwa respons perilaku daphnid terhadap denyut cahaya
lebih kuat pada siklus kedua (Tabel 1 dan 2;Gambar 3).

EC50. Di sini, BR51 memiliki dampak signifikan pada kelangsungan

4. Diskusi hidup embrio, dan imobilitas bergantung pada konsentrasi dengan EC
48 jam.50sebesar 0,1 mg/L, yang sejalan dengan temuan penelitian lain.
Sebagian besar pewarna yang digunakan oleh industri mengandung EC 48 jam50Malachite Green (Kanhere et al., 2014) dan Bubarkan Merah
gugus kromofor azo-aromatik yang terkait dengan efek toksik dan 1 (Vacchi et al., 2016) untukD.magnaimobilisasi, misalnya, masing-
mutagenik (Reid et al., 1984;Pemeriksa et al., 2011;Leme et al., 2015), yang masing adalah 0,77 dan 0,58 mg/L. Disperse Red 1 juga sangat beracun
menimbulkan kekhawatiran yang meningkat mengenai potensi dampaknya Ceriodaphnia dubia (EC 48 jam50sebesar 0,55 mg/L) dan Ceriodaphnia
terhadap ekosistem alami. Oleh karena itu, penggunaan pewarna alami silvestrii (EC 48 jam50dari 0,8 mg/L) (Vacchi et al., 2016). Di sisi lain, ada
sebagai alternatif ramah lingkungan telah muncul di seluruh dunia (Shahid beberapa laporan tentang toksisitas pewarna azo yang jauh lebih
et al., 2013). Dalam penelitian ini, kami menunjukkan bahwa pewarna azo rendahD.magnadengan EC50mulai dari 6 hingga 55 mg/L (Bae dan
BR51 dan pewarna alami Ery berpengaruh negatifD.magnasetelah paparan Freeman 2007;Verm, 2008;Darsana dkk., 2015). Sebaliknya, tidak
jangka pendek dan jangka panjang. Namun, BR51 100 kali lipat lebih banyak informasi mengenai toksisitas pewarna alami. Contohnya,Abi et
beracun daripada Ery. Kami menunjukkan bahwa paparan terhadap al. (2017a,2017b,2018)menunjukkan bahwa Ery menginduksi efek
konsentrasi rendah dari pewarna tersebut merusak reproduksi dan merugikan tertentu pada ikan air tawar Danio rerioembrio, mulai dari
menyebabkan perubahan pernapasan. Efek ini tidak ada ketika daphnid 3,75 mg/L untuk efek subletal dan 96 jam LC50dari 27 mg/L. Di Sini,
terpapar pewarna alami Ery setelah fotodegradasi (DEry). D.magnaterkena Ery hanya terpengaruh secara akut pada konsentrasi
Toksisitas intrinsik pewarna azo yang dilaporkan dalam literatur menunjukkan tinggi (48-jam EC50sebesar 19,7 mg/L). Jadi, mengenai toksisitas akut
kepada kita bahwa sensitivitasnya mungkin bervariasi dari spesies ke spesies dan yang mematikan, BR51 menginduksi imobilisasi daphnid pada
dari struktur kimia yang berbeda, meskipun mereka mungkin memiliki potensi konsentrasi sekitar 200 kali lipat lebih rendah dari Ery. Hasil ini
aktif yang berkorelasi. Studi ekotoksikologi sebelumnya tentang efek pewarna azo menunjukkan toksisitas akut BR51 yang sangat tinggi, yang
pada daphnida telah melaporkan berbagai penyakit akut dikategorikan sebagai akut Kategori 1 - sangat toksik terhadap
kehidupan akuatik
1 mg/L),(EC
sedangkan
50 Ery akan dikategorikan sebagai Kategori 3e
berbahaya bagi kehidupan akuatik (10 EC50 100 mg/L), menurut
Tabel 1
Sistem Klasifikasi dan Pelabelan Bahan Kimia Harmonisasi Global (GHS,
Estimasi parameter untuk model campuran linier yang menganalisis pengaruh
konsentrasi Erythrostominone, Stimulus Cahaya dan Siklus pada variabel perilaku 2017).
Daphnia (Jarak, Kecepatan). Indikator toksisitas subletal kami menunjukkan bahwa setelah
Memperkirakan St. Kesalahan nilai t nilai-p
paparan jangka panjang, pewarna BR51 dan Ery memicu efek pada
reproduksiD. magna.Secara khusus, BR51 dan Ery mengurangi jumlah
Jarak
neonatus yang dihasilkan perD.magna,dan akibatnya mengurangi
(Mencegat) 190.071 5.834 32.581 <2e-16
Konsentrasi 3.047 2.53 1.204 0,22938 tingkat intrinsik peningkatan populasi, tanpa mempengaruhi nenek
Stimulus (Cahaya) 34.916 7.958 4.388 1.74E-05 moyang dalam hal panjang dan jumlah induk. Dalam kasus ini, BR51
Siklus (Kedua) 10.269 7.958 1,29 0,19819 merusak reproduksi daphnida pada konsentrasi 100 kali lipat lebih
Konsentrasi * Konsentrasi 1.564 3.451 0,453 0,65089
rendah dari Ery (masing-masing 0,02 dan 2 mg/L). Hasil ini sejalan
Stimulus * Siklus 2.857 3.451 0,828 0,40862
Stimulus * Siklus 36.46 11.254 3.24 0,00137
dengan temuan dariVacchi et al. (2016), yang menunjukkan bahwa
Konsentrasi * Stimulus * Siklus 4.041 4.881 0,828 0,40858 Disperse Red 1 juga menghambat reproduksiD.similisDan Ceriodaphnia
Kecepatan dubiapada dosis rendah setelah paparan jangka panjang (3 dan 100M
(Mencegat) 3.52174 0,09477 37.161 <2e-16 g/L, masing-masing).
Konsentrasi 0,03287 0,0411 0,8 0,42462
Konsentrasi subletal BR51 juga mampu meningkatkan konsumsi
Stimulus (Cahaya) 0,71429 0,1202 5.943 1.03E-08
Siklus (Kedua) 0,13824 0,1202 1,15 0,2513 oksigenD.magnasetelah paparan 24 jam, yang terkait dengan
Konsentrasi * Konsentrasi 0,01548 0,05213 0,297 0,76683 peningkatan metabolisme organisme. Faktanya, organisme air yang
Stimulus * Siklus 0,03556 0,05213 0,682 0,49579 terpapar pewarna azo menunjukkan aktivitas detoksifikasi xenobiotik
Stimulus * Siklus 0,51684 0,16999 3.04 0,00263
yang tinggi (Li et al., 2012;Kaur dan Kaur 2015;Yu et al., 2015;Abe
Konsentrasi * Stimulus * Siklus 0,06199 0,07372 0,841 0,40129
6 FR Abe dkk. / Kemosfer 236 (2019) 124390
Gambar 3.Efek erythrostominone (AeB) dan Dasar Merah 51 (CeD) (mg/L) pada perilaku renangDaphnia magna. (A) Jarak renang total dan (B) kecepatan renang. Tes dilakukan dalam 4
siklus 5 menit terang (batang putih) dan 5 menit gelap (batang hitam). Nilai diwakili per rata-rata (n¼20).
et al., 2017b), yang membutuhkan pengeluaran energi ekstra (Sokolova
et al. 2012). Misalnya, pewarna azo sebelumnya telah terbukti
meningkatkan aktivitas enzim antioksidan seperti katalase, superoksida
dismutase, dan glutathione S-transferase pada ikan.Li et al., 2012;Kaur
dan Kaur 2015;Abe et al., 2017b), dan glutathione S-transferase di
D.similis (Yu et al., 2015), terkait dengan antioksidan dan metabolisme
fase II xenobiotik. Jadi, daphnid yang terpapar BR51 mungkin
mengeluarkan energi ekstra dengan proses detoksifikasi, sehingga
menghabiskan lebih banyak energi. Terlepas dari bukti bahwa Ery juga
meningkatkan aktivitas detoksifikasi (Abe et al., 2017b), tidak adanya
efek pada konsumsi oksigen
D.magnamenunjukkan bahwa organisme mungkin menghadapi kondisi
stres yang sangat mahal tanpa meningkatkan konsumsi energi. Dengan
demikian, energi yang dialokasikan untuk fungsi fisiologis lainnya juga akan
terganggu.
Sebaliknya, penelitian terbaru menunjukkan bahwa BR51
mengurangi konsumsi energiD.rerioembrio dinilai sebagai aktivitas
sistem transpor elektron, yang berhubungan langsung dengan proses
konsumsi oksigen (Abe et al., 2018). Meskipun konsumsi energi
menurun, laporan tersebut membahas bahwa aktivitas detoksifikasi
ikan yang lebih tinggi bersama dengan konsumsi energi yang lebih
rendah mengakibatkan berkurangnya aktivitas renang embrio,
kemungkinan penyesuaian kompensasi dalam alokasi energi
organisme untuk fungsi fisiologis lainnya. Invertebrata air juga
menunjukkan penekanan tingkat metabolisme selama kondisi
lingkungan yang tidak menguntungkan, sehingga membatasi energi
untuk fungsi yang berhubungan dengan kebugaran, seperti aktivitas
reproduksi dan perilaku (Sokolova et al. 2012). Untuk menyelidiki
apakah laju respirasi dapat dikaitkan dengan perubahan perilaku, yang
secara metabolik mahal, aktivitas alat gerakD.magnadan juga
diukur. Namun, kami tidak menemukan perubahan signifikan dalam
aktivitas alat gerak pada daphnid yang terpapar pewarna apa pun yang diuji
meskipun respons yang diharapkan terhadap rangsangan cahaya, ketika
daphnid cenderung bergerak ke arah sumber cahaya karena fototaksisnya
yang sangat positif (Michels et al., 1999).
Potensi Ery yang ramah lingkungan muncul kembali setelah kami
mengamati bahwa setelah fotodegradasinya, produk tak berwarna yang
terbentuk tidak mampu menimbulkan efek buruk padaD.magna,yang
berarti kehilangan karakteristik toksik dari struktur kimia aslinya. Dalam hal
perbandingan dengan struktur kimia terdekat yang ditemukan dalam
literatur,Wang dkk. (2009)melaporkan bahwa pewarna antrakuinon sintetik
ADBAQ (1-amino-2,4-dibromoanthraquinone) terbukti sangat beracun untuk
D.magnadi bawah cahaya tampak, tetapi setelah 12eFotodegradasi 48 jam,
fotoproduk secara dramatis menurunkan toksisitas. Toksisitas yang lebih
rendah dikaitkan dengan koefisien partisi log oktanol-air yang lebih tinggi
(log Kaduh) dari fotoproduk dibandingkan dengan log Kaduhdari ADBAQ,
secara dramatis meningkatkan hidrofobiknya yang menghambat
persilangan melalui membran sel. Baru-baru ini,Abi et al. (2017a,2017b,
2018)memang menunjukkan efek toksik tertentu dari Ery pada perilaku dan
keseimbangan energi
D.rerioembrio, bagaimanapun, produk yang terbentuk setelah
fotodegradasinya (DEry) terbukti sama sekali tidak berbahaya bagi
organisme pada kondisi yang diuji. Hal ini mencerminkan keuntungan untuk
pengolahan limbah yang mengandung pewarna yang efisien menggunakan
pengolahan yang mudah dan berbiaya rendah yang memberikan
lingkungan yang aman bagi organisme akuatik, berbeda dengan pewarna
azo sintetik, yang tidak mudah terdegradasi dan memerlukan perawatan
yang lebih rumit dan mahal, seperti fotoelektrokatalitik. oksidasi atau proses
koagulasi Fenton (Fraga et al., 2013;Zhang dkk. 2014).
 FR Abe dkk. / Kemosfer 236 (2019) 124390
5. Kesimpulan
Singkatnya, kami mengamati bahwa BR51 sangat beracun
D.magna,meningkatkan laju respirasi daphnida setelah paparan jangka
pendek, dan menghambat reproduksi setelah paparan jangka panjang. Ery
juga menghambat reproduksiD.magnatetapi BR51 terbukti 100 kali lipat
lebih beracunD.magnadibanding Ery. Menariknya, setelah fotodegradasi, Ery
kehilangan potensi toksiknyaD.magna,yang dapat mengurangi efek negatif
terhadap organisme air, berbeda dengan pewarna azo yang tidak dapat
terurai secara hayati dan memiliki stabilitas tinggi. Dengan demikian, Ery
merupakan pewarna ramah lingkungan yang potensial untuk digunakan
oleh industri; itu mudah terurai secara hayati dan menunjukkan
pengurangan toksisitas terhadap organisme air.
Deklarasi minat
Tidak ada.
Informasi penulis
Catatan.
Para penulis menyatakan tidak ada kepentingan yang bertentangan.
Pengakuan
Kami berterima kasih atas dukungan finansial dari Sa~o Paulo Research Foundation-
tion (Proses FAPESP No. 2013/14397-0, 2014/27009-0 dan 2013/
01509-4, Sa~o Paulo, Brasil). Studi ini dibiayai sebagian oleh
ao
Coordenaç~
de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil
(CAPES) - Kode Keuangan 001. Selain itu, penelitian ini didukung secara
finansial oleh Yayasan Sains dan Teknologi Portugis (FCT) melalui
CESAM: UID/AMB/50017/2019, FCT/MEC melalui dana nasional, dan
pendanaan bersama oleh FEDER, dalam Perjanjian Kemitraan PT2020
dan Bersaing 2020. Joaeo LT Pestana mengakui FCT untuk kontrak
penelitian di bawah program “Investigador FCT” (IF/01420/2015). Kami
juga berterima kasih kepada kelompok riset Prof. Dr. Luis Alberto
Beraldo de Moraes, dari Fakultas Filsafat, Ilmu Pengetahuan dan Sastra
Ribeira ~o Preto,
Universitas Sa ~o Paulo, Brazil, yang menyediakan Ery.
Lampiran A. Data tambahan
Data tambahan untuk artikel ini dapat ditemukan online di https://
doi.org/10.1016/j.chemosphere.2019.124390.
Referensi
Abe, FR, Mendonça, JN, Moraes, LAB, Gravato, C., Soares, AMVM, Oliveira, DP,
2017a. Respons toksikologi dan perilaku sebagai alat untuk menilai efek pewarna
alami dan sintetis pada kehidupan awal ikan zebra. Kemosfer 178, 282e290. https://
doi.org/10.1016/j.chemosphere.2017.03.030.
Abe, FR, Gravato, C., Soares, AMVM, Oliveira, DP, 2017b. Pendekatan biokimia
untuk menilai stres oksidatif yang disebabkan oleh paparan pewarna alami dan sintetis pada
tahap awal kehidupan ikan zebra. J. Toksikol. Mengepung. Kesehatan 80 (23e24), 1259e1268.
https://doi.org/10.1080/15287394.2017.1371091.
Abe, FR, Soares, AMVM, Oliveira, DP, Gravato, C., 2018. Toksisitas pewarna terhadap
ikan zebra di tingkat biokimia: alokasi energi seluler dan neurotoksisitas.
Mengepung. Polusi. 235, 255e262.https://doi.org/10.1016/j.envpol.2017.12.020.
Akilandeswari, P., Pradeep, BV, 2016. Eksplorasi babi penting industri
dari jamur tanah. Aplikasi Mikrobiol. Bioteknologi. 100 (4), 1631e1643.https://doi.org/
10.1007/s00253-015-7231-8.
Bae, JS, Freeman, HS, 2007. Evaluasi toksisitas perairan pewarna langsung baru ke
Daphnia magna.Pewarna Pigmen 73, 81e85.https://doi.org/10.1016/j.dyepig.
2005.10.015.
Baldin, JC, Michelin, EC, Polizer, YJ, Rodrigues, I., Godoy, SHS, Fregonesi, RP,
Pires, MA, Carvalho, ST, Fa - varo-Trindade, CS, Lima, CG, Fernandes, AM,
Trindade, MA, 2016. Jabuticaba mikroenkapsulasi (Myrciaria cauliflora) ekstrak
ditambahkan ke sosis segar sebagai pewarna alami dengan aktivitas antioksidan dan
antimikroba. Ilmu Daging. 118, 15e21.https://doi.org/10.1016/j.meatsci.2016.03. 016.
7
Bates, D., Maechler, M., Bolker, B., Walker, S., 2015. Menyesuaikan efek campuran linier
model menggunakan lme4. J.stat. Lembutw. 67 (1), 1e48.https://doi.org/10.18637/jss.
v067.i01.
Bhunia, F., Saha, NC, Kaviraj, A., 2003. Efek anilineSebuah amina aromatik untuk
beberapa organisme air tawar. Ekotoksikologi 12, 397e404.
Pemeriksa, FMD, Lizier, TM, Felicio, R., Zanoni, MVB, Debonsi, HM, Lopes, NP,
Marcos, R., Oliveira, DP, 2011. Analisis potensi genotoksik dan mutagenik produk
yang terbentuk setelah biotransformasi pewarna azo Disperse Red 1. Toxicol. Dalam
Vitro 25, 2054e2063.https://doi.org/10.1016/j.tiv. 2011.05.033.
Pemeriksa, FMD, Oliveira, GAR, Ferraz, ERA, Cardoso, JC, Zanoni, MVB,
Oliveira, DP, 2013. Dalam: Melih Gunay, Dr (Ed.), Pewarna Tekstil: Proses Pencelupan dan
Dampak Lingkungan, Pencelupan dan Finishing Tekstil Ramah Lingkungan. InTech. https://
doi.org/10.5772/53659.
Chung, KT, 2000. Mutagenisitas dan karsinogenisitas metabolisme amina aromatik
dihasilkan dari Azo Dyes. J Env Sci Menyembuhkan C 18 (1), 51e74.https://doi.org/10.
1080/10590500009373515. Coelho, MCLS, Coimbr~
ao, CA, Valent, GU, Sato, MIZ, Sanchez, PS, Targa, H.,
1992. Evaluasi mutagenisitas limbah industri dengan pengujian Ames. Mengepung.
Mol. Mutagen. 19 (S20), 199e211.
Darsana, R., Chandrasehar, G., Deepa, V., Gowthami, Y., Chitrikha, T., Ayyappan, S.,
Goparaju, A., 2015. Penilaian toksisitas akut Reaktif Red 120 terhadap organisme
akuatik tertentu. Banteng. Mengepung. Hubungi. Toksikol. 95 (5), 582e587.https://
doi. org/10.1007/s00128-015-1636-z. Dufosse
- , L., Fouillaud, M., Caro, Y., Mapari, SAS, Sutthiwong, N., 2014. Jamur berfilamen
adalah produsen pigmen dan pewarna skala besar untuk industri makanan. Kur.
Opin. Bioteknologi. 26, 56e61.https://doi.org/10.1016/j.copbio.2013.09.007. Fraga, LE,
Franco, JH, Orlandi, MO, Zanoni, MVB, 2013. Fotoelektrokatalitik
oksidasi pewarna rambut basic red 51 pada fotoanoda bikomposit W/WO3/TiO2 yang
diaktifkan oleh radiasi ultraviolet dan radiasi tampak. J.Lingkungan. kimia Eng. 1, 194e199.
https://doi.org/10.1016/j.jece.2013.04.018.
GHS, 2017. Sistem Klasifikasi dan Pelabelan Bahan Kimia yang Harmonisasi Secara Global
(GHS). Sistem Harmonisasi Global, GHS, New York dan Jenewa, Perserikatan Bangsa-Bangsa.
ST/SG/AC.10/30/Rev.7. Gungo
€rdü, A., Birhanli, A., Ozmen, M., 2013. Respons biokimia terhadap paparan enam pewarna
tekstil pada tahap perkembangan awalXenopus laevis.Mengepung. Sains. Polusi. Res. 20, 452
e460.https://doi.org/10.1007/s11356-012-1063-1.
Hamilton, MA, Russo, RC, Thurston, RV, 1977. Dipangkas Spearman-Karber
metode untuk memperkirakan konsentrasi mematikan median dalam bioassay toksisitas.
Mengepung. Sains. Technol. 11, 714e719.
Jong, L., Pech, N., Umbuzeiro, GA, Moreau, X., 2016. Evaluasi biomarker multi-skala
asi toksisitas pewarna azo komersial (Disperse Red 1) pada model hewan, cnidarian
air tawarHydra attenuata.Res air. 96, 62e73.https://doi.org/10.1016/
j.watres.2016.03.043.
Kanhere, J., Gopinathan, R., Banerjee, J., 2014. Sitotoksisitas dan genotoksisitas
malachite green pada organisme air non-target:chlorella pyrenoidosaDan Daphnia
magna.Pencemaran Tanah Air Udara. 225, 2134.https://doi.org/10.1007/
s11270-014-2134-3.
Kaur, S., Kaur, A., 2015. Variabilitas enzim antioksidan/detoksifikasiLabeo
rohitaterkena pewarna azo, Acid Black (AB). Komp. Biokimia. Fisik. C 167, 108e116.
https://doi.org/10.1016/j.cbpc.2014.06.009.
Kuwahara, R., Hatate, H., Yuki, T., Murata, H., Tanaka, R., Hama, Y., 2009. Antioksidan
milik pigmen naphthoquinone polihidroksilasi dari cangkang bulu babi ungu
Anthocidaris crassippina.LWT - Ilmu Makanan. Technol. (Lebensmittel-Wissenschaft
-Technol.) 42, 1296e1300.https://doi.org/10.1016/j.lwt.2009.02. 020.
Kuznetsova, A., Brockhoff, PB, Christensen, RHB, 2017. Paket lmerTest: tes di
model efek campuran linier. J.stat. Lembutw. 82 (13), 1e26.https://doi.org/10. 18637/
jss.v082.i13.
Leme, DM, Primo, FL, Gobo, GG, Costa, CRV, Tedesco, AC, Oliveira, DP, 2015a.
Penilaian genotoksisitas pewarna tekstil reaktif dan dispersi menggunakan setara
kulit manusia (sistem kultur sel 3D). J. Toksikol. Mengepung. Kesehatan 78, 466e480.
https://doi.org/10.1080/15287394.2014.999296.
Li, Y., Shi, JQ, Qu, RJ, Feng, MB, Liu, F., Wang, M., Wang, ZY, 2012. Toksisitas
penilaian pada tiga pewarna langsung (D-BLL, D-GLN, D-3RNL) menggunakan bioassay stres
oksidatif dan perhitungan parameter kuantum. Ekotoksikol. Mengepung. Aman. 86, 132e
140.https://doi.org/10.1016/j.ecoenv.2012.09.023.
Liu, H., Yu, H., Giesy, JP, Sun, Y., Wang, X., 2007. Toksisitas HC Orange No.
Dafnia magna,ikan zebra (Brachydanio rerio)embrio, dan ikan mas (Carassius
auratus).Kemosfer 66, 2159e2165.https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.
2006.09.005.
Mapari, AS, Meyer, AS, Thrane, U., Frisvad, JC, 2009. Identifikasi potensi
pabrik sel jamur yang menjanjikan untuk produksi pewarna makanan alami
poliketida menggunakan dasar pemikiran kemotaksonomi. Mikroba. Pabrik Sel 8, 24.
https://doi.org/10.1186/1475-2859-8-24.
Mathieu-Denoncourt, J., Martyniuk, CJ, Solla, SR, Balakrishnan, VK, Langlois, VS,
2014. Sedimen yang terkontaminasi dengan pewarna azo Disperse Yellow 7 mengubah stres
seluler dan transkripsi terkait androgen diSilurana tropicalislarva. Mengepung. Sains.
Technol 48, 2952e2961.https://doi.org/10.1021/es500263x.
Meyer, JS, Ingersoll, CG, Mcdonald, LL, Boyce, MS, 1986. Memperkirakan ketidakpastian
dalam tingkat pertumbuhan populasi: teknik berlipat vs. bootstrap. Ekologi 67, 1156e
1166.
Michels, E., Leynen, M., Cousyn, MC, De Meester, L., Ollevier, F., 1999. Fototaktik
perilaku daphnia sebagai alat dalam pemantauan terus menerus kualitas air:
eksperimen dengan fototaktik positifDaphnia magnaklon. Res air. 33
8 FR Abe dkk. / Kemosfer 236 (2019) 124390
(2), 401e408.
O'Neill, C., Hawkes, FR, Hawkes, DL, Lourenço, ND, Pinheiro, HM, Dele - e, W.,
1999. Warna pada limbah tekstilesumber, pengukuran, persetujuan pelepasan dan
simulasi: review. J.Chem. Technol. Bioteknologi. 74, 1009e1018. Parrott, JL, Bartlett,
AJ, Balakrishnan, VK, 2016. Toksisitas kronis azo dan
pewarna antrasendione untuk embrio-larva fathead minnow. Mengepung. Polusi.
210, 40e47.https://doi.org/10.1016/j.envpol.2015.11.037.
Pestana, JLT, Loureiro, S., Baird, DJ, Soares, AMVM, 2010. Paparan pestisida dan
respons antipredator yang dapat diinduksi pada penggembala zooplankton,Daphnia
magna Straus. Kemosfer 78, 241e248.https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.2009.
10.066.
Reid, TM, Morton, KC, Wang, CY, King, CM, 1984. 1984. Mutagenisitas pewarna azo
mengikuti metabolisme oleh sistem reduktif/oksidatif yang berbeda. Mengepung.
Mol. Mutagen. 6, 705e717.https://doi.org/10.1002/em.2860060508.
SCCS, 2011. Pendapat Komite Ilmiah tentang Pendapat Keamanan Konsumen tentang
Dasar Merah 51. Komite Ilmiah Keamanan Konsumen. SCCS/1436/11.https://doi.org/
10.2772/99670.
Shahid, M., Shahid-Ul-Islam, Mohammad, F., 2013. Kemajuan terkini di alam
aplikasi pewarna: ulasan. J.Bersih. Melecut. 53, 310e331.https://doi.org/10.1016/j.
jclepro.2013.03.031.
Silva, MC, Souza, VB, Thomazini, M., Silva, ER, Smaniotto, T., Carvalho, RA,
Genovese, MI, Favaro-Trindade, CS, 2014. Penggunaan jabuticaba (Myrciaria
cauliflora)depulping residu untuk menghasilkan bubuk pigmen alami dengan sifat
fungsional. LWT - Ilmu Makanan. Technol. (Lebensmittel-Wissenschaft -Technol.) 55,
203e209.https://doi.org/10.1016/j.lwt.2013.08.026.
Sokolova, IM, Frederich, M., Baqwe, R., Lanniq, G., Sukhotin, AA, 2012. Energi
homeostasis sebagai alat integratif untuk menilai batas toleransi stres lingkungan
pada invertebrata air. Mar.Lingkungan. Res. 79, 1e15.https://doi.org/ 10.1016/
j.marenvres.2012.04.003.
Soriano, JJ, Mathieu-Denoncourt, J., Norman, G., Solla, SR, Langlois, VS, 2014.
Toksisitas pewarna azo Acid Red 97 dan Bismarck Brown Y terhadap kodok cakar
barat (Silurana tropicalis).Mengepung. Sains. Polusi. Res. 21, 3582e3591.https://doi.
org/10.1007/s11356-013-2323-4.
Umbuzeiro, GA, Freeman, HS, Warren, SH, Oliveira, DP, Terao, Y., Watanabe, T.,
Claxton, LD, 2005. Kontribusi pewarna azo terhadap aktivitas mutagenik Sungai
Cristais. Kemosfer 60, 55e64.https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.
2004.11.100.
Vacchi, FI, Von der Ohe, PC, Albuquerque, AF, Vendemiatti, JAS, Azevedo, CCJ,
Hono - rio, JG, Silva, BF, Zanoni, MVB, Henry, TB, Nogueira, AJ,
Umbuzeiro, GA, 2016. Penilaian kejadian dan risiko pewarna azo - kasus Disperse Red
1. Chemosphere 156, 95e100.https://doi.org/10.1016/j. chemosphere.2016.04.121.
Valent, GU, Sato, MIZ, Coelho, MCLS, Coimbrao, CA, Sanchez, PS, Martins, MT,
Bonatelli Jr., R., 1993. Pemantauan Sa ~ o Sungai negara bagian Paulo di Brasil untuk mutagenik
kegiatan menggunakan tes Ames. Mengepung. Toksikol. Kualifikasi Air 8, 371e381.
Velmurugan, P., Kamala-Kannan, S., Balachandar, V., Lakshmanaperumalsamy, P.,
Chae, JC, Oh, BT, 2010. Ekstraksi pigmen alami dari lima jamur berfilamen untuk
aplikasi industri dan pewarnaan kulit. Karbohidrat. Polim. 79, 262e268.https://
doi.org/10.1016/j.carbpol.2009.07.058.
Verma, Y., 2008. Penilaian toksisitas akut pewarna tekstil dan bahan tekstil dan pewarna
limbah industri dengan menggunakanDaphnia magnabioassay. Toksikol. Ind. Kesehatan 24,
491e500.https://doi.org/10.1177/0748233708095769.
Wang, Y., Chen, J., Lin, J., Wang, Z., Bian, H., Cai, X., Hao, C., 2009. Gabungan
studi eksperimental dan teoretis tentang toksisitas yang diinduksi foto dari zat
antara pewarna antrakuinonDaphnia magna.Mengepung. Toksikol. kimia 28 (4), 846e
852.https://doi.org/10.1897/08-256R.1.
Yu, TH, Dafre, AL, Umbuzeiro, GA, Franciscon, E., 2015. Induksi tergantung CYP
glutathione S-transferase diMirip dengan Daphniaterkena pewarna azo dispersi.
Ekotoksikologi 24, 232e237.https://doi.org/10.1007/s10646-014-1348-x. Zanoni, TB,
Tiago, M., Faia ~o-Flores, F., Barros, SBM, Bast, A., Hageman, G.,
Oliveira, DP, Maria-Engler, SS, 2014. Basic Red 51, pewarna rambut semipermanen
yang diizinkan, bersifat sitotoksik pada sel kulit manusia: Studi pada model kulit
monolayer dan 3D menggunakan keratinosit manusia (HaCaT). Toksikol. Lett. 227,
139e149.https://doi.org/10.1016/j.toxlet.2014.03.007.
Zhang, J., Chen, S., Zhang, Y., Quan, X., Zhao, H., Zhang, Y., 2014. Pengurangan akut
toksisitas dan genotoksisitas limbah pewarna menggunakan proses koagulasi Fenton. J.
Bahaya. Mater. 274, 198e204.https://doi.org/10.1016/j.jhazmat.2014.04.022.
Zhou, M., He, J., 2007. Degradasi zat warna azo dengan tiga oksidasi lanjutan bersih
proses: oksidasi basah, oksidasi elektrokimia, dan oksidasi elektrokimia basah. Studi
banding. Electrochim. UU 53, 1902e1910.https://doi. org/10.1016/
j.electacta.2007.08.056.