Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

CLINISMIKROBIOLOGIRTINJAUAN, Juli 2001, hal. 447–475 Vol. 14, No.3

0893-8512/01/$04.0010 DOI: 10.1128/CMR.14.3.447–475.2001 Hak Cipta ©
2001, Masyarakat Mikrobiologi Amerika. Seluruh hak cipta.

Biologi dariGiardia lamblia

RODNEY D. ADAM*
Departemen Kedokteran dan Mikrobiologi dan Imunologi, Universitas Arizona
Fakultas Kedokteran, Tucson, Arizona

PERKENALAN ................................................. ............................................................... ............................................................... ..447

KLASIFIKASI DAN EVOLUSI DARIGIARDIAJENIS................................................. ........................448
Sejarah Penemuan dan Penunjukan SpesiesGiardia............................................................... ........................448
Genotipe dariG. lamblia............................................................... ............................................................... ..............................................448
Koevolusi Inang-Parasit .............................................. ............................................................... ....................................450
Giardiadan Diplomonad Lain sebagai Eukariota Percabangan Awal .............................................. ........................450
Evolusi Eukariota................................................... ............................................................... ..............................................451
BIOKIMIA DAN METABOLISME ...................................................... ............................................................... ................451
Pertumbuhan Axenic dari Trofozoit.................................................... ............................................................... ..............................451
Metabolisme Karbohidrat ............................................... ............................................................... ...................................452
Metabolisme Asam Amino................................................... ............................................................... ..............................................455
Metabolisme Lemak................................................... ............................................................... ............................................................... 455
Penyelamatan Purin dan Pirimidin ............................................... ............................................................... ..............................456
SEL BIOLOGI ................................................ ............................................................... ............................................................... ....457
Struktur Trofozoit ............................................... ............................................................... ..............................................457
Struktur dan Replikasi Nuklir .............................................. ............................................................... ......................457
Sitoskeleton dan Motilitas................................................... ............................................................... ..............................................458
Transpor dan Degradasi Protein ............................................... ............................................................... ....................460
Sistem transpor protein endomembran................................................... ............................................................... .......460
Vakuola endosom-lisosom .............................................. ............................................................... ..........................460
Proteasom .................................................... ............................................................... ............................................................... ....460
Struktur Kista ............................................... ............................................................... ............................................................... .....461
Enkripsi .............................................................. ............................................................... ............................................................... .........461
Faktor pendorong dan penghambat ............................................... ............................................................... .....................461
Peristiwa encystation .............................................................. ............................................................... ..............................................461
Jalur Enzim ............................................................... ............................................................... ..............................................461
Eksistasi ............................................................... ............................................................... ............................................................... ..........462
Faktor pendorong dan penghambat ............................................... ............................................................... .....................462
Morfologi Eksistasi................................................... ............................................................... ..............................462
GENETIKA DAN BIOLOGI MOLEKULER ...................................................... ............................................................... ..........462
Struktur Genom................................................... ............................................................... ...................................................462
Sistem Transfeksi ............................................... ............................................................... ..............................................464

Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.

Transkripsi dan Terjemahan ............................................................... ............................................................... ..........................464
Giardia lambliaVirus................................................. ............................................................... ..............................................465
ANTIGEN PERMUKAAN DAN VARIASI ANTIGEN ................................................ ..............................................465
Kemunculan dan Signifikansi Biologis dari Variasi Antigenik ........................................................ ..........................465
Struktur dan Biokimia VSP ............................................... ............................................................... ...............466
Organisasi Genomik darivspGen dan Mekanisme Potensial dari Variasi Antigenik......................467
Antigen Permukaan Lainnya................................................... ............................................................... ..............................................468
KESIMPULAN ............................................................... ............................................................... ............................................................... ....468
UCAPAN TERIMA KASIH ............................................... ............................................................... ..............................................469
REFERENSI ................................................. ............................................................... ............................................................... .......469

PERKENALAN diare bawaan makanan (47a, 227). Di negara berkembang, terdapat

prevalensi dan insidensi infeksi yang sangat tinggi, dan data
Giardia lamblia(sin.Giardia intestinalis, Giardia duodenalis) adalah
menunjukkan bahwa retardasi pertumbuhan jangka panjang dapat
mikroorganisme eukariotik uniseluler berflagel yang umumnya
terjadi akibat giardiasis kronis (105). Di wilayah tertentu di dunia, air
menyebabkan penyakit diare di seluruh dunia. Ini adalah penyebab
terkontaminasi denganG. lambliakista umumnya menyebabkan
paling umum dari wabah diare yang ditularkan melalui air di
giardiasis terkait perjalanan pada wisatawan (33).
Amerika Serikat (18) dan kadang-kadang dilihat sebagai penyebab
Giardiaspesies memiliki dua tahap utama dalam siklus hidup. Infeksi
inang dimulai ketika kista tertelan dengan air yang terkontaminasi atau,
* Alamat surat: Departemen Mikrobiologi dan Imunologi, Fakultas lebih jarang, makanan atau melalui kontak fecal-oral langsung. Kista
Kedokteran Universitas Arizona, 1501 N. Campbell, Tucson, AZ
85724-5049. Telepon: (520) 626-6430. Faks: (520) 626-2100. Email: relatif lembam, memungkinkan kelangsungan hidup yang lama dalam
adamr@u.arizona.edu. berbagai kondisi lingkungan. Setelah

447
448 ADAM
paparan lingkungan asam lambung, kista keluar menjadi
trofozoit di usus kecil proksimal. Trofozoit adalah bentuk
vegetatif dan bereplikasi di usus kecil, di mana ia menyebabkan
gejala diare dan malabsorpsi. Setelah terpapar cairan empedu,
beberapa trofozoit membentuk kista di jejunum dan
dikeluarkan melalui feses, memungkinkan penyelesaian siklus
transmisi dengan menginfeksi inang baru.
Aspek klinis giardiasis telah ditinjau baru-baru ini
(260), seperti halnya respon imun pejamu terhadap giardiasis
(95) dan epidemiologi (106). Tinjauan ini akan berfokus
terutama pada biologi organisme dan relatif sedikit berurusan
dengan penyakit klinis atau interaksi inang-parasit. Sejak review
sebelumnyaGiardiaspesies (3), banyak kemajuan telah dibuat
dalam pemahaman organisme, dan kemajuan baru ini akan
ditekankan. Banyak dari kemajuan utama saat ini telah
difasilitasi oleh kemajuan berkelanjutan dariG. lambliaproyek
genom, berbasis di Marine Biological Laboratories dan
melibatkan kolaborator di University of Illinois, University of
Texas di E1 Paso, University of California di San Diego, dan
University of Arizona (210). Urutan pada Juni 2000 memberikan
setidaknya pembacaan single-pass dari 85% genom, dan
hasilnya tersedia di www.mbl.edu/Giardia.
KLASIFIKASI DAN EVOLUSI DARI
GIARDIAJENIS
Sejarah Penemuan dan Penunjukan SpesiesGiardia
Klasifikasi yang sesuai untukGiardiaspp. sangat penting
untuk pemahaman tentang patogenesis dan epidemiologi
infeksi, serta biologi organisme. Proses ini sulit karena sejumlah
alasan. (i) Sifat organisme yang (diduga) aseksual tidak
memungkinkan percobaan perkawinan untuk memungkinkan
penunjukan spesies. Untuk organisme klon dalam clade yang
sama, tidak ada kriteria yang jelas untuk penunjukan spesies;
sebutan ini tetap kontroversial. (ii) Banyak dari deskripsi
sebelumnya tentangGiardiaspp. mengasumsikan spesies yang
berbeda untuk setiap inang dan akibatnya melebih-lebihkan
jumlah spesies. Deskripsi spesies selanjutnya berdasarkan
perbedaan morfologi yang terdeteksi oleh mikroskop cahaya
mungkin meremehkan perbedaan antara isolat, galur, atau
spesies. (iii) Eksperimen transmisi silang dariGiardiadari satu
host ke yang lain telah menghasilkan hasil yang tidak konsisten.
(iv) Alat yang tersedia untuk membedakanGiardiaisolat telah
memadai sampai pengenalan baru-baru ini teknik mikrografi
molekuler dan elektron untuk mengklasifikasikanGiardiaspp.
Mengingat keprihatinan tersebut, tinjauan sejarah deskripsi
Giardiadan penunjukan dariGiardiaspesies dijamin.
Giardiapertama kali dideskripsikan oleh van Leeuwenhoek pada tahun 1681
saat ia memeriksa feses diarenya sendiri di bawah mikroskop (66). Organisme
tersebut dideskripsikan secara lebih rinci oleh Lambl pada tahun 1859, yang
mengira organisme tersebut termasuk dalam genusCercomonasdan
menamainyaCercomonas intestinalis(172). Setelah itu, beberapa menamai
genus menurut namanya sementara yang lain menamai spesies dari bentuk
manusia menurut namanya (yaitu,G. lamblia). Pada tahun 1879, Grassi
menamai organisme pengerat yang sekarang dikenal sebagai aGiardiajenis,
Dimorphus muris, tampaknya tidak mengetahui deskripsi Lambl sebelumnya.
Pada tahun 1882 dan 1883, Kunstler mendeskripsikan organisme dalam
berudu (?G. agilis) yang dia beri nama
CLIN. MICROBIOL. REV.
Giardia, pertama kaliGiardiadigunakan sebagai nama genus. Pada
tahun 1888, Blanchard mengusulkan nama tersebutLamblia
intestinalis(29), yang kemudian diubah oleh StilesG. duodenalispada
tahun 1902 (314). Selanjutnya, Kofoid dan Christiansen
mengusulkan nama tersebutG. lambliapada tahun 1915 (165) danG.
entericapada tahun 1920 (166). Masih ada kontroversi tentang
jumlahGiardiaspesies selama bertahun-tahun, dengan beberapa
penyelidik menyarankan nama spesies berdasarkan asal inang dan
lainnya berfokus pada morfologi. Misalnya, lebih dari 40 nama
spesies telah diajukan berdasarkan asal inang (169). Simon, di sisi
lain, menggunakan kriteria morfologis untuk membedakannya
G. lambliaDanG.murisdan menerima nama ituG. lambliauntuk
bentuk manusia (304). Pada tahun 1952, Filice menerbitkan
deskripsi morfologi rinciGiardiadan mengusulkan agar tiga
nama spesies digunakan berdasarkan morfologi tubuh median:
G. duodenalis, G. muris, DanG. agilis(104). Nama spesiesG.
lambliamenjadi diterima secara luas melalui tahun 1970-an.
Sejak 1980-an, beberapa telah mendorong penggunaan nama
tersebutG. duodenalis, dan pada 1990-an, namanya
G.intestinalis telah didorong oleh peneliti lain (170). Saat ini
tampaknya tidak ada alasan yang cukup untuk mengabaikan
istilah tersebutG. lamblia, yang telah diterima secara luas dalam
literatur medis dan ilmiah.
G. lambliaberbentuk buah pir dan memiliki satu atau dua badan
median melintang berbentuk cakar;G. agilispanjang dan ramping (100)
dan memiliki tubuh median berbentuk tetesan air mata; danG.muris
trofozoit lebih pendek dan bulat serta memiliki tubuh median yang kecil
dan membulat.G. lambliaditemukan pada manusia dan berbagai
mamalia lainnya,G.murisditemukan pada hewan pengerat, danG. agilis
ditemukan pada amfibi (Tabel 1).
UntukGiardiaisolat dikelompokkan denganG. lamblia
berdasarkan kriteria morfologi yang dapat dilihat dengan
mikroskop cahaya, perbedaan yang dapat dideteksi dengan
mikroskop elektron telah memungkinkan deskripsi spesies
tambahan,G. psittacidari parkit (78) danG.ardeaedari bangau
(81). Spesies lain,Mikroti Giardia, telah disarankan berdasarkan
spesifisitas inang untuk tikus dan muskrat, perbedaan kista
yang dinilai dengan mikrografi elektron (97), dan perbedaan
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
urutan 18S rRNA dibandingkan denganG. lambliaberasal dari
manusia (331).
Genotipe dariG. lamblia
Alat klasifikasi molekuler sangat bermanfaat dalam
memahami patogenesis dan kisaran inangGiardiaisolat yang
diperoleh dari manusia dan berbagai mamalia lainnya. Studi
pertama tentang perbedaan molekulG. lambliaisolat (26) adalah
analisis zymodeme dari lima isolat axenized, tiga dari manusia,
satu dari marmut, dan satu dari kucing, menggunakan enam
enzim metabolik. Analisis zymodeme terdiri dari pengetikan
organisme berdasarkan migrasi satu set enzim pada gel pati
dengan adanya medan listrik. Migrasi tergantung pada ukuran,
struktur, dan titik isoelektrik enzim tersebut. Karena sifat-sifat
ini adalah fungsi dari urutan asam amino primer, perbedaan
dalam zymodem harus mencerminkan perbedaan dalam urutan
gen yang mengkodekan enzim ini. Pada tahun 1985, analisis
polimorfisme panjang fragmen restriksi dari 15 isolat dilakukan
dengan menggunakan probe acak (251). Studi-studi ini
menghasilkan deskripsi tiga kelompok; kelompok 3 sangat
berbeda dengan kelompok 1 dan 2
VOL. 14, 2001 BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 449

TABEL 1.Giardiajenis

Morfologi oleh:
Nama spesies Tuan rumah Data molekuler
mikroskop cahaya Mikroskop elektron

G. agilis Amfibi Panjang dan ramping; titik air mata- NAA

berbentuk tubuh median
G.muris Hewan pengerat Pendek dan bulat; bulat kecil Jauh dariG. lamblia
tubuh median
G. lamblia Banyak mamalia, berbentuk buah pir; satu atau dua Clade dengan banyak
termasuk manusia melintang, tubuh median genotipe
berbentuk cakar
G.ardeae Bangau Sama denganG. lamblia Diskus ventral dan kaudal Lebih dekat denganG. lamblia
flagel mirip dengan daripadaG.muris
G.muris
G. psittaci Burung Psittacine Sama denganG. lamblia ventrolateral tidak lengkap NA
mengarah, tidak ada marjinal

alur
G. microti Tikus dan muskrat Sama denganG. lamblia Kista berisi dua Mirip denganG. lamblia
trofozoit dengan genotipe
disk ventral dewasa

ANA, tidak tersedia.

saran penunjukan spesies yang terpisah dibuat. Selanjutnya,
sejumlah studi klasifikasi molekuler lainnya telah dilakukan
dengan menggunakan analisis zymodeme (2, 16, 47, 212,
214, 234, 277, 316) dan analisis polimorfisme panjang
fragmen restriksi (65, 85-87, 90, 137). Pulsed-field gel
electrophoresis (PFGE) pola kromosom juga telah dipelajari
(7, 42, 143, 167, 291) tetapi nilainya terbatas untuk klasifikasi
karena seringnya terjadi penataan ulang kromosom (4, 179).
Demikian pula, klasifikasi berdasarkan antigen permukaan
(250) dibatasi oleh variasi antigenik dari protein varian-
spesifik (VSPs) (6, 243). Studi-studi ini sangat berguna, tetapi
kesimpulan yang dapat ditarik dari jenis data ini dibatasi
oleh sifat semikuantitatif dari data tersebut. Untuk
memungkinkan perbandingan yang lebih kuantitatifGiardia
isolat, perbandingan urutan rRNA subunit kecil, isomerase
triosefosfat (tim), dan gen glutamat dehidrogenase (GDH)
telah digunakan dalam sejumlah penelitian selanjutnya (17,
Kumpulan Mayrhofer B, kelompok 3 dan 4, dan isolat Belgia
membentuk genotipe utama lainnya. Misalnya,tim urutan
nukleotida dari isolat kelompok 1 dan 2 menyimpang sebesar
1% di daerah pengkode protein dan 2% di daerah mengapit,
sedangkan kelompok 1 dan 3 menyimpang sebesar 19% dan
daerah mengapit sangat berbeda sehingga menghalangi
keselarasan mereka (193) . Urutan subunit kecil atau 18S rRNA
(SS rRNA) menunjukkan perbedaan 1% antara kelompok 1 dan 3
(333), mencerminkan urutannya yang lebih terkonservasi. Selain
perbedaan genetik yang mencolok, kedua genotipe tersebut
mungkin memiliki sejumlah perbedaan biologis yang penting.
Misalnya, isolat GS (grup 3) secara signifikan lebih patogen pada
infeksi sukarelawan manusia daripada isolat WB (grup 1) (249).
Organisme kelompok 3 juga tampak tumbuh jauh lebih lambat
dalam kultur axenic daripada organisme genotipe 1 (155).
Baru-baru ini, sejumlah kumpulan tambahan (genotipe)
telah diusulkanGiardiadiisolasi dari berbagai mamalia. Isolat

Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.

92, 193, 229-231).
Studi-studi ini semuanya mengkonfirmasi pembagianG. lamblia
isolat manusia menjadi dua genotipe utama (Tabel 2). Yang pertama
terdiri dari Nash grup 1 dan 2, kumpulan Mayrhofer A, grup 1 dan 2,
dan isolat Polandia, sedangkan Nash grup 3,
ini secara morfologis identik dengan manusiaG. lamblia,
tetapi urutan daerah pengkode proteinnya berbeda. Studi-
studi ini memungkinkan identifikasi isolat anjing yang
secara genetik berbeda dari manusiaG. lamblia. Giardia
isolat dari anjing telah terkenal sulit untuk

TABEL 2. Genotipe dariG. lamblia

Diajukan kelompok Nash perakitan Mayrhofer Asal

Tuan rumah Referensi
penamaan (251) (209) (137)

Genotipe A-1 1 A (grup 1) Polandia Manusia, berang-berang, kucing, lemur, domba, 65, 137, 155, 209,
betis, anjing, chinchilla, alpaka, 229, 251
kuda, babi, sapi

Genotipe A-2 2 A (grup 2) Manusia, berang-berang 209, 229, 251

Genotipe B 3 B (grup 3 dan 4) Belgium Manusia, berang-berang, marmut, anjing, 137, 155, 209,
monyet 229, 251
C Anjing 229, 230
D Anjing 229, 230
E (atau A-ternak) Sapi, domba, alpaka, kambing, babi 92, 229
F Kucing 229
G Tikus 229
450 ADAM
axenize, dibandingkan dengan isolat dari manusia (213), mengarah
ke usulan bahwaGiardiaisolat dari anjing berbeda dengan isolat
kucing atau manusia. Namun, beberapa isolat anjing telah
dihilangkan dan dikarakterisasi (17). Untuk mengevaluasi lebih
lanjut potensi zoonosis anjingGiardia, infeksi tikus menyusui
ditetapkan dari 11 anjing yang terinfeksi berturut-turut. Atas dasar
analisis urutan, ini ditugaskan ke dua kumpulan (C dan D) yang
sangat berbeda dari kumpulan A dan B (230). Sebuah studi berbasis
PCR terhadap sembilan isolat tinja dari anjing menemukan bahwa
salah satu dari sembilan itu mirip dengan isolat manusia sementara
delapan lainnya berbeda (138). Hasil ini menunjukkan bahwa
sebagian besar isolat anjing secara genetik berbeda dari yang
ditemukan pada manusia dan memiliki sedikit atau tidak ada
potensi penularan zoonosis.
Kumpulan terpisah (E sampai G) juga telah diusulkan untuk isolat
ternak berkuku (92), kucing (229), dan tikus (229) (Tabel 2). Studi
berbasis urutan yang sama ini menunjukkan hal ituG. microtiadalah
anggota dari kompilasi tujuh majelis ini (229). Studi lebih lanjut dari
Giardiadiperoleh dari ternak telah menunjukkan bahwa beberapa
isolat milik kumpulan ternak (kumpulan E) sementara yang lain milik
kumpulan A (genotipe 1) dan dengan demikian mungkin memiliki
potensi untuk infeksi manusia (259). Kumpulan C sampai G belum
diisolasi dari manusia, menunjukkan kemungkinan bahwa beberapa
genotipe dariG. lambliamemiliki kisaran spesifisitas inang yang luas
yang mencakup manusia sementara yang lain tampaknya lebih
terbatas dalam kisaran inangnya dan mungkin tidak menimbulkan
risiko penularan zoonosis. Apakah ketujuh kumpulan ini harus
dianggap sebagai spesies yang terpisah harus menunggu data dan
konsensus lebih lanjut. Untuk menyatukan sebutan dariG. lamblia
genotipe, saya mengusulkan pendekatan yang memperhitungkan
semua data yang tersedia saat ini. Prioritas harus pergi ke klasifikasi
pertama yang disarankan oleh Nash et al. (251) pada tahun 1985.
Namun, "kelompok" telah digunakan dengan cara yang berbeda
oleh penulis yang berbeda. Selain itu, jelas dari data yang
diterbitkan setelah deskripsi awal bahwa kelompok Nash 1 dan 2
terkait erat sementara kelompok 3 secara genetik cukup berbeda
untuk memungkinkan pertimbangan nama spesies atau subspesies
yang terpisah seperti yang disarankan (251). Penugasan status
spesies untuk organisme klonal bermasalah (324) dan harus ditunda
sampai ada kesepakatan umum di antara peneliti, tetapi
kesepakatan penunjukan genotipe harus memfasilitasi pemahaman
dan koordinasi literatur yang lebih baik. Oleh karena itu, saya
mengusulkan agar genotipe A diterima sebagai sebutan untuk
kelompok Nash 1 (A-1), Nash grup 2 (A-2), assemblage A, dan isolat
Polandia. Genotipe B kemudian akan menunjuk kelompok Nash 3,
kumpulan B, dan isolat Belgia. Mungkin juga tepat untuk
menggunakan penunjukan serupa untuk kumpulan C sampai G,
karena ini juga mencerminkan perbedaan genetik yang signifikan
serta perbedaan inang.
Koevolusi Inang-Parasit
Setiap kali anggota kelompok organisme parasit menjadi parasit
pada inang yang berbeda, adalah tepat untuk menjawab
pertanyaan tentang koevolusi inang dan parasit. UntukGiardiaspp.,
kemampuan untuk melakukannya telah terbatas karena
ketidakpastian tentang kekhususan inang tertentuGiardiaspesies
atau genotipe serta masalah klasifikasi isolat yang tepat.
Pengembangan alat klasifikasi molekul yang baik dan pemahaman
yang lebih baik tentang kekhususan inang membuatnya
CLIN. MICROBIOL. REV.
masuk akal untuk mengatasi kemungkinan koevolusi spesies atau
genotipe yang berbedaGiardiadengan tuan rumah mereka. Perbedaan
yang lebih besar antaraG. lambliaDanG.ardeaedaripada di antara
G. lambliagenotipe mendukung gagasan bahwa perbedaan
antaraG. lambliaDanG.ardeaemenyertai divergensi antara
burung dan mamalia. Namun,G. lambliaDanG.ardeaelebih dekat
satu sama lain daripada keG.muris, kebalikan dari temuan yang
diharapkan, karena tikus menyimpang dari mamalia lain baru-
baru ini daripada dari burung. Informasi urutan belum tersedia
dariG. agilisuntuk memungkinkan perbandingan yang serupa
antara amfibi dan mamaliaGiardiajenis. Hubungan yang lebih
dekat dari yang diharapkan antaraG.ardeaeDanG. lamblia
mungkin bisa dijelaskan jika penularanGiardiaantara burung
dan mamalia diikuti oleh divergensi dua garis keturunan
dengan inangnya.
Giardiadan Diploma lainnya sebagai
Eukariota Percabangan Awal
Secara tradisional, semua organisme hidup telah diklasifikasikan
sebagai prokariota atau eukariota, dan beberapa masih
berpendapat untuk mempertahankan dua divisi utama (208).
Namun, klasifikasi yang paling banyak diterima sekarang
menggunakan tiga divisi utama, Archaea (archaebacteria), Bakteri
(eubacteria), dan Eukarya (eukariota) (353), yang kemudian dapat
dibagi menjadi kingdom. Dengan salah satu sistem klasifikasi,G.
lambliajelas merupakan organisme eukariotik dan telah dianggap
sebagai anggota protozoa, eukariota uniseluler yang lebih “mirip
hewan”. Organisme protozoa ini secara tradisional diklasifikasikan
berdasarkan morfologinya menjadi flagelata, ciliata, amuba
(rhizopoda), dan sporozoa. Dengan demikian,G. lamblia
diklasifikasikan dengan protozoa flagellated, termasuk
kinetoplastids (misalnya,Leishmaniaspp. DanTripanosomaspp.),
parabasalida (misalnya,Trichomonas vaginalis), DanDientamoeba(
misalnya,Dientamoeba fragilis) (185).Giardiatelah ditempatkan
dalam urutan Diplomonadida (dua kariomastigon, masing-masing
dengan empat flagela, dua inti, tanpa mitokondria, dan tanpa
kompleks Golgi; terdapat kista, dan dapat hidup bebas atau parasit)
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
dan famili Hexamitidae (enam atau delapan flagela , dua inti,
bilateral simetris, dan kadang-kadang axostyles dan badan median
atau parabasal), bersama dengan parasit molSpironucleus muris(
145) dan organisme yang hidup bebasHeksamita inflata. Beberapa
urutan klasifikasi yang lebih tinggi tampaknya tidak valid secara
filogenetik, seperti penempatan semua protozoa bertanda bersama.
Namun, famili Hexamitidae tampaknya merupakan kelompok
monofiletik (lihat di bawah).
Satu sistem klasifikasi baru-baru ini dengan satu kerajaan prokariotik
dan lima kerajaan eukariotik telah mempertahankan Protozoa sebagai
salah satu dari enam kerajaan (45), tetapi proposal terbaru menyarankan
untuk meninggalkan istilah "protozoa" demi istilah yang lebih umum
tetapi pada saat yang sama istilah yang lebih tepat. "protista" (56, 57,
350). Tinjauan ini akan menggunakan istilah "protista", tetapi harus
dicatat bahwa dalam konteks klinis,G. lambliabiasanya disebut sebagai
protozoa.
Klasifikasi baru-baru ini dari organisme mikroba eukariotik terutama
bergantung pada perbandingan molekuler. Sistem klasifikasi molekuler
yang ideal akan didasarkan pada gen yang diperlukan untuk semua
kehidupan dan yang cukup terkonservasi di semua bentuk kehidupan
sehingga penyelarasan yang akurat memungkinkan perbandingan dan
klasifikasi semua organisme. Dalam banyak hal,
VOL. 14, 2001
rRNA telah menjadi gen yang paling berguna untuk perbandingan
molekuler, karena urutan rRNA sangat dilestarikan sepanjang hidup
dan karena fungsi rRNA sangat penting bagi biologi organisme.
Oleh karena itu, skema klasifikasi yang paling diterima secara luas
didasarkan pada urutan SS (18S) rRNA. Berdasarkan perbandingan
urutan SS rRNA,G. lambliadiusulkan sebagai salah satu organisme
eukariotik paling primitif (308), bersama denganT.vaginalisdan
mikrosporidium. Penggunaan urutan SS rRNA untuk menempatkan
Giardiasebagai eukariota bercabang awal telah dikritik karena
tingginya G1C konten SS rRNA dariGiardia(75%) dan karena Giardia
spp. adalah organisme parasit; artefak dapat diperkenalkan oleh
tingginya tingkat mutasi yang menyertai adaptasi inang. Sebuah
analisis terhadap eukariota bercabang awal menunjukkan bahwa
posisi basal dariGiardiaadalah hasil artifaktual dari daya tarik
cabang panjang karena tingkat evolusi yang lebih besar Giardia(
315). Analisis subunit besar RNA polimerase II dan analisis ulang
urutan eF1 dan eF2 juga mendukung gagasan artefak cabang
panjang (133). Namun, tidak ada efek seperti itu yang ditunjukkan
untuk pohon eRF3 (142). Selain itu, ketidakhadiran diG. lambliadari
domain N-terminal yang sangat terkonservasi dari eRF3 yang
ditemukan pada eukariota lain termasukT.vaginalis menyarankan
perbedaan dariG. lambliasebelum akuisisi domain N-terminal (142).
Perlu juga dicatat bahwa penempatan filogenetik dariHexamita,
organisme yang hidup bebas dalam keluarga yang sama
(sebagaimana ditentukan oleh kriteria morfologis), menghindari
artefak karena G tinggi1C konten atau parasitisme. G1C konten dari
Heksamita inflataSS rRNA adalah 51%, danH.inflataditemukan
monofiletik denganGiardia(183, 332). Klasifikasi dariH.inflatadengan
G. lambliajuga didukung oleh perbandingan urutan dehidrogenase
gliseraldehida-3-fosfat dariG. lamblia, Trepomonas agilis, H. inflata,
DanSpironukleussp. (287). Perbandingan urutan SS rRNA dari
Giardia, Hexamita, Trepomonas, DanSpironukleus, semua
diplomonad, menunjukkan bahwa semuanya terkait secara
filogenetik dan tiga yang terakhir terdiri dari satu clade sementara
Giardiamenempati clade lain (46). Perbandingan berbasis urutan ini
telah menghasilkan sistem klasifikasi yang diusulkan berikut ini
Giardia: kingdom Protozoa, subkingdom Archezoa (termasuk filum
Metamonada dan Microsporidia), subphylum Eopharyngia, kelas
Trepomonadea, subkelas Diplozoa, dan ordo Giardiida (termasuk
famili Octomitidae dan Giardiidae). Dalam sistem klasifikasi ini,
diplomonad dianggap terdiri dari subkelas, Diplozoa, danHeksamita,
Trepomonas, DanSpironukleussemuanya anggota ordo diplozoa
lainnya, Distomatida (46).
Pemeriksaan berbagai gen yang digunakan untuk klasifikasi
filogenikGiardiamenunjukkan bahwa gen yang digunakan dalam
transkripsi dan translasi umumnya menghasilkan posisi basal untuk
Giardia, meskipun artefak karena daya tarik cabang yang panjang
belum dikesampingkan (Tabel 3). Menariknya, sebuah pohon
filogenetik dari salah satu gen dianggap berasal dari mitokondria (
cpn60) juga menunjukkan bahwaGiardiaadalah eukariota bercabang
awal (107, 286). Dari kelompok gen lain, gen metabolik tidak
menghasilkan posisi yang jelas, tetapi beberapa menyarankan asal
eubakteriGiardia. Gen sitoskeletal memberikan hasil yang beragam,
dengan aktin memberikan divergensi awal tetapi tubulin
menghasilkan divergensi yang lebih lambat dari itu.Entamoeba
histolytica. Di antara kelas gen lainnya, filogeni HSP70 dan cathepsin
B menunjukkan perbedaan awal untukGiardia. Jadi, meskipun
BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 451
jawabannya tidak konklusif, sebagian besar data menunjukkan demikian
G. lambliadan diplomonad lainnya adalah yang paling basal dari
eukariota yang masih ada.
Evolusi Eukariota
G. lambliaadalah organisme eukariotik yang khas karena
memiliki nukleus dan membran nuklir, sitoskeleton, dan sistem
endomembran yang berbeda, tetapi tidak memiliki organel lain
yang hampir universal pada eukariota, seperti nukleolus dan
peroksisom. Selain itu,G. lambliabersifat anaerobik, kekurangan
mitokondria atau salah satu komponen fosforilasi oksidatif.
Hipotesis bahwa eukariota muncul melalui peristiwa
endosimbiotik, menghasilkan asal usul plastida dan mitokondria
dan penggunaan fosforilasi oksidatif sebagai sumber utama
produksi energi, telah diterima secara luas (120). Salah satu versi
dari hipotesis ini adalah bahwa nenek moyang yang sama dari
archaebacteria dan eukariota mengembangkan nukleus dan
sitoskeleton. Keturunan kemudian mengendositosis eubacterium,
menghasilkan perkembangan mitokondria. Pengamatan bahwa
eukariota amitochondriate tertentu (misalnya,G. lambliadan
diploma lainnya sertaTrichomonas vaginalis) adalah basal pada
pohon 18S rRNA menyebabkan dugaan bahwa organisme tersebut
diturunkan dari Archezoa sebelum peristiwa simbiosis plastid (44,
46). Namun, pengenalan selanjutnya dari gen mitokondria dalam
genomT.vaginalis(39) danG. lamblia
(286) telah mengarah pada saran bahwa protista amitokondria telah
kehilangan mitokondria mereka secara sekunder.
Versi alternatif dari hipotesis simbiosis adalah bahwa
eukariota dikembangkan melalui hubungan simbiosis dari
archaebacterium dengan eubacterium (207). Dalam proposal
ini, endosimbion eubakteri menyediakan jalur untuk organisme
tergantung pada metabolisme piruvat oleh respirasi
mitokondria serta yang tergantung pada metabolisme piruvat
oleh piruvat: ferredoxin oksidoreduktase (PFOR), baik di sitosol (
G. lamblia) atau dalam hidrogenosom (T.vaginalis). Menurut
proposal ini, organisme yang mengarah ke
G. lambliakemudian kehilangan komponen enzimatik
respirasi mitokondria.
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
BIOKIMIA DAN METABOLISME
Pertumbuhan Axenic Trofozoit
G. lambliatrofozoit yang diperoleh dari kelinci, chinchilla, dan kucing
pertama kali ditanam secara aksial (dengan tidak adanya sel eksogen)
pada tahun 1970 (222). Media HSP-1, modifikasi selanjutnya dilaporkan
pada tahun 1976, mengandung phytone peptone, glukosa,
L-sisteinHCl, larutan Hanks, dan serum manusia (223). Studi ini
melaporkan manusia pertamaG. lambliaisolat, Portland-1 (P-1).
P-1 dan WB, isolat yang diperoleh dari manusia bergejala yang
mungkin tertular di Afghanistan (307), memiliki genotipe yang
sama dan telah digunakan untuk banyak studi tentangG.
lamblia. Media pertumbuhan selanjutnya dimodifikasi, dan saat
ini media yang paling umum digunakan adalah modifikasi TYI-
S-33 (159) (Tabel 4). Di antara persyaratan penting untuk
pertumbuhan axenic adalah persyaratan mutlak untuk O2
rendah2konsentrasi, konsentrasi sistein tinggi, dan kebutuhan
lipid eksogen, yang diperoleh dari komponen serum. Ketika
disimpan pada suhu 37°C, trofozoit menempel pada dinding
kaca tabung tempat
452 ADAM CLIN. MICROBIOL. REV.

TABEL 3. Filogeni molekuler dariG. lamblia

Gen Posisi filogenetik Referensi)

SS (18S) rRNA Di dasar pohon denganT.vaginalisdan microsporidia atau long- 308, 315
artefak cabang
Peralatan terjemahan
RNA polimerase III Nanti; mirip denganT. brucei 175
EF1-alfa Divergensi awal; diplomonad membentuk clade tunggal atau long- 125, 133, 157
artefak atraksi cabang
EF2 Divergensi awal atau artefak atraksi bercabang panjang 124, 133
Faktor pelepasan eukariotik 1 (eRF1) Faktor Basal 142
pelepasan eukariotik 3 (eRF3) RNA Divergensi awal 142
polimerase II subunit besar (RPB1) Posisi tidak dapat ditentukan karena cabang panjang 133
artefak atraksi

Alat transkripsi
Fibrillarin Dr dasarnya 240

Gen mitokondria
cpn60 Basal bersama denganT.vaginalisDanE.histolytica Kurangnya 107, 286
sintetase Valyl-tRNA mitokondria sekunder; berhubungan dengan gama- 126
proteobakteria; cabang denganArabidopsis

Sitoskeleton
Lampiran Alpha-giardins sebagai annexins primitif 232
Aktin Divergensi awal 67
B-Tubulin Kemudian divergensi dariE.histolytica 71, 345

Jalur metabolisme
isomerase triosefosfat Asal Eubacterial (alpha-proteobacteria), tidak tertimbang 158
kekikiran menempatkanGiardiadi dasar Kemungkinan asal
Glutamat dehidrogenase (tergantung NADP) eubakteri Tidak mungkin untuk menyelesaikan urutan kemunculan 22, 272, 359
Adenylate kinase Monofiletik dengan diplomonad lainnya; divergensi kemudian Tidak 288
Gliseraldehida-3-fosfat dehidrogenase ada bukti divergensi awal 287
Piruvatfosfat dikinase 255, 289
Malat dehidrogenase Eukariotik, terkait denganT.vaginalis Posisi tidak 285
Malat dehidrogenase, dekarboksilasi dapat diselesaikan secara memadai Mirip 294
Fruktosa-1,6-bifosfat aldolase (kelas II) dengan eubacteria 128
Asetil-KoA sintetase Tidak ada bukti divergensi awal 293

gen lain
Cathepsin B (cysteine protease) Signal Divergensi awal 344
recognition peptide HSP70 (cytosolic and Eukariotik dengan beberapa fitur bakteri dan archael Giardiadi 321
GRP78/BiP) CDC2 (anggota cyclin-dependent pangkalan, sebelumnyaT.vaginalis; kesamaan dengan eubacteria 107, 121
kinase Awal bercabang, tapi setelahE.histolyticaDanT.vaginalis 284
keluarga)

Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.

mereka tumbuh. Kepatuhan ini tergantung pada glikolisis dan
kontraksi protein dari diskus ventral (99). Sampai saat ini,
spesies lain dariGiardia(misalnya,G.murisDanG. agilis) belum
tumbuh secara aksial.
Metabolisme Karbohidrat
Sebagian besar organisme eukariotik bergantung terutama pada
metabolisme aerobik untuk produksi energinya. Namun, eukariota
tertentu, termasukTrichomonasspp.,Entamoebaspp., dan Giardiaspp.,
ditandai dengan kurangnya mitokondria dan fosforilasi oksidatif yang
dimediasi sitokrom. Mereka mengandalkan metabolisme fermentasi
(bahkan ketika oksigen hadir) untuk konservasi energi. Glikolisis dan
perluasan singkatnya menghasilkan ATP, dengan pembentukan hanya
bergantung pada fosforilasi tingkat substrat. Glukosa tidak sepenuhnya
teroksidasi menjadi CO22dan H2O seperti dalam metabolisme aerob
tetapi dikatabolisme secara tidak sempurna menjadi asetat, etanol,
alanin, dan CO2. Keseimbangan pembentukan produk akhir peka
terhadap O2ketegangan dan konsentrasi glukosa dalam media. Jalur
yang diusulkan
produksi energi dari glukosa dan aspartat ditunjukkan pada Gambar. 1
sampai 3.
Metabolisme trofozoit sangat dipengaruhi oleh perubahan
kecil konsentrasi oksigen. Di bawah kondisi anaerobik yang
ketat, alanin adalah produk utama dari metabolisme
karbohidrat (72, 263, 265) (Gbr. 2). Bahkan dengan penambahan
O dalam jumlah minimal2(yaitu, konsentrasi ,0,25MM), produksi
etanol distimulasi dan produksi alanin dihambat (263). Dengan
peningkatan lebih lanjut dalam O2konsentrasi, produksi etanol
dan alanin terhambat. Di O2konsentrasi 0,46MM, produksi
alanin benar-benar terhambat dan asetat dan CO2merupakan
produk utama dari metabolisme energi. Konsentrasi oksigen ini
mungkin relevan dengan lingkungan usus tempat trofozoit
bereplikasi karena konsentrasi oksigen di lingkungan ini
diperkirakan bervariasi antara 0 dan 60MM. Dengan demikian,
jalur metabolisme piruvat tampaknya diubah untuk lingkungan
anaerobik atau mikroaerofilik yang berbeda.
Meskipun metabolisme anaerobik, trofozoit memang menghasilkan
VOL. 14, 2001 BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 453

TABEL 4. Media untuk pertumbuhan in vitroG. lambliaA dan bukan enzim yang diatur (220). Fosfofruktokinase yang
Komponen Kuantitas/liter Koneksi akhir
bergantung pada pirofosfat dariGiardiatelah dikloning dan
dikarakterisasi (274, 289). Triosephosphate isomerase,
K2HPO4zH2 1g 4,4 mM enzim yang mengkatalisis konversi reversibel antara
wahai KH2PO4 600 m 4,4 mM
dihidroksiaseton fosfat danD-gliseraldehida-3-fosfat,
Trypticase (kasein pepton) 20g
Ekstrak ragi 10g dikloning dengan komplemen dalamEscherichia colidan
D-Glukosa 10g 56 mM dikarakterisasi (238).
NaCl 2g 34 mM Dua enzim yang mengubah fosfoenolpiruvat menjadi piruvat,
Sistein-HCl 2g 16,5 mM
piruvat kinase yang bergantung pada ATP (271), dan piruvat
Asam askorbat 200mg 1,1 mM
Ferri NH4-sitrat (Sigma 22,8 mg
fosfat dikinase (PPDK) yang bergantung pada pirofosfat (PPDK)
F-5879) telah diidentifikasi (37, 132, 141). Ada keuntungan energi
Empedu sapi (Sigma B-8381) 40 ml larutan 6,5% Bawa potensial dalam reaksi yang dimediasi oleh PPDK, karena dua
NaOH pH menjadi 7,0–7,2 (1,65 molekul ATP dapat dihasilkan oleh reaksi terkoordinasi yang
ml larutan 10 M 100
melibatkan PPDK dan adenilat kinase. Adenylate kinase (288)
Serum (sapi atau anak sapi janin) ml 10%
mengubah dua molekul ADP menjadi ATP1ADP melalui reaksi
AFormula TYI-S-33 (159), media pertumbuhan yang paling umum digunakan
yang pada dasarnya netral energi, dan PPDK mengubah
G. lambliatrofozoit. Ferri-NH4sitrat dan empedu sapi biasanya disimpan sebagai larutan pada
suhu 4°C. Semua komponen kecuali serum dilarutkan dalam air, dibawa ke 200 ml, fosfoenolpiruvat plus AMP menjadi piruvat1ATP, menghasilkan
disterilkan pada 0,22- atau 0,45-Msaringan ukuran pori m, dan ditambahkan ke dalam 700 ml
air steril. Serum yang tidak aktif dengan panas (56°C selama 20 menit) kemudian
ditambahkan. Selama pertumbuhan in vitro, organisme ditumbuhkan dalam wadah kaca
tertutup yang hampir penuh dengan media. Jika hal ini tidak memungkinkan, seperti selama
kloning dengan membatasi pengenceran dalam pelat 96-sumur (243), kantong tersegel berisi
generator anaerobik digunakan. Pada suhu 4°C, umur simpan dibatasi hingga 5 sampai 7
hari, terutama karena degradasi sistein.

beberapa radikal bebas oksigen, dan mekanisme detoksifikasi

oksigen diperlukan. Detoksifikasi radikal bebas oksigen dalam
organisme aerobik biasanya dicapai dengan jalur enzimatik
yang dimulai dengan superoksida dismutase. Aktivitas
superoksida dismutase telah terdeteksi oleh beberapa (188),
tetapi peneliti lain tidak mendeteksi aktivitas superoksida
dismutase, katalase, atau peroksidase padaG. lamblia(35) dan
mengusulkan H2Memproduksi NADH oksidase sebagai rute
utama detoksifikasi oksigen diG. lamblia(36).
RutinGiardiamedia mengandung 50 mM glukosa, dan banyak
studi metabolik trofozoit telah dilakukan dengan media tersebut.
Ketika konsentrasi glukosa dikurangi menjadi 10 mM, terdapat
sedikit efek pada pertumbuhan trofozoit (299). Pada konsentrasi
glukosa di bawah 10 mM, tingkat replikasi berkurang hampir 50%

Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.

dan produksi etanol sangat berkurang, produksi alanin sedikit
berkurang, dan produksi asetat tidak terpengaruh. Dengan
demikian, glukosa mendorong pertumbuhan trofozoit tetapi tidak
mutlak diperlukan. Peningkatan pertumbuhan oleh glukosa tidak
disediakan oleh gula lain.
Di dalamT.vaginalis, enzim glikolitik (glukosa menjadi piruvat)
ditemukan di sitosol tetapi yang terlibat dalam oksidasi piruvat
terlokalisasi dalam organel terpisah, hidrogenosom (152). Di
dalamGiardia, tidak ada kompartementalisasi metabolik;
sebaliknya, semua reaksi terjadi di sitosol atau di permukaan
sitosol membran untuk reaksi yang dimediasi PFOR (188).
ARA. 1. Metabolisme glukosa menjadi fosfoenolpiruvat. Banyak
Glukosa memasok sumber energi utama yang berasal dari enzim telah didokumentasikan dalam hal aktivitas enzimatik, isolasi
karbohidrat (147). Glukosa diubah menjadi piruvat oleh jalur enzim, atau kloning gen yang mengkode enzim. Enzim diberi label
shunt Embden-Meyerhof-Parnas dan heksosa monofosfat (Gbr. sebagai berikut: 1, heksokinase (188); 2, isomerase glukosa fosfat
(diusulkan); 3, fosfofruktokinase yang bergantung pada pirofosfat
1). Untuk sebagian besar organisme eukariotik dan prokariotik,
(186, 219, 274, 289); 4, fruktosa bifosfat aldolase (128, 188); 5,
konversi fruktosa-6-fosfat menjadi fruktosa-1,6-bifosfat adalah isomerase triosefosfat (238); 6, gliseraldehida-3- fosfat
langkah yang tidak dapat diubah dan diatur yang dikatalisis dehidrogenase (287); 7, fosfogliserat kinase (diusulkan); 8,
oleh fosfofruktokinase yang bergantung pada ATP. Namun, fosfogliseromutase (diusulkan); 9, enolase (diusulkan). Enzim
untukGiardia(219), serta untukT.vaginalis(221) danE.histolytica( tertentu (untuk langkah 2, 7, 8, dan 9) disarankan berdasarkan jalur
pada organisme lain tetapi belum terbukti untukGiardia. Angka ini
279), reaksi ini dikatalisis oleh fosfofruktokinase yang
telah diadaptasi dari materi yang disajikan dalam ulasan
bergantung pada pirofosfat. Berbeda dengan enzim yang sebelumnya (55, 146, 150) dan diperbarui dari literatur yang lebih
bergantung pada ATP, enzim ini mengkatalisis reaksi reversibel baru sebagaimana dikutip untuk masing-masing enzim.
454 ADAM CLIN. MICROBIOL. REV.

ARA. 2. Jalur perantara untuk sintesis piruvat. 1, piruvat fosfat dikinase (132, 141); 2, piruvat kinase (271) (peran relatif piruvat fosfat
dikinase dan piruvat kinase dalam konversi fosfoenolpiruvat menjadi piruvat belum ditentukan); 3, fosfoenolpiruvat karboksifosfotransferase;
4, malat dehidrogenase (188, 285); 5, malat dehidrogenase (dekarboksilasi) (188, 294); 6, alanin transaminase (72, 263); 7, aspartat
transaminase (215). Pi, fosfat anorganik. Angka ini diadaptasi dari materi yang disajikan dalam ulasan sebelumnya (55, 215) dan diperbarui
dari literatur yang lebih baru (lihat kutipan untuk masing-masing enzim).

generasi bersih dua molekul ATP selama konversi fosfoenolpiruvat
menjadi piruvat, daripada satu ATP yang dihasilkan oleh reaksi
piruvat kinase. Peran relatif mereka dalam glikolisis belum
ditentukan, tetapi aktivitas spesifik piruvat kinase yang lebih tinggi
menunjukkan bahwa piruvat kinase mungkin memainkan peran
utama dalam glikolisis (271).
Konversi piruvat menjadi asetil koenzim A (asetil-KoA) (Gbr. 3)
dikatalisis oleh PFOR, yang menggunakan ferredoksin daripada NAD
sebagai akseptor elektron (188, 326, 327), menggantikan kompleks
piruvat dehidrogenase yang ditemukan di eubakteria aerobik dan
eukariota. PFOR juga ditemukan diE.histolytica
(280) danT.vaginalis(352).
Metronidazole adalah agen antimikroba dengan spektrum
pada gilirannya telah dikurangi oleh PFOR, menghasilkan radikal
nitro beracun. Metronidazol dan natrium nitrit, penghambat
pernapasan lain yang diduga bekerja dengan menghancurkan pusat
besi-sulfur PFOR, beracun bagiG.muristrofozoit, tetapi hanya
natrium nitrit yang beracun bagi kista. Diusulkan bahwa mereka
memiliki efek yang berbeda karena ketidakmampuan metronidazole
untuk memasuki kista, tetapi usulan ini tidak diuji secara langsung
(262). Dalam studi yang berbedaG. lambliaisolat, beberapa di
antaranya sangat rentan terhadap metronidazole dan beberapa di
antaranya relatif resisten, penurunan kadar ferredoksin dikaitkan
dengan resistensi obat (192).
Asetil-KoA dapat diubah langsung menjadi asetat oleh ADP
membentuk asetil-KoA sintetase (293), menghasilkan produksi

Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.

aktivitas yang luas terhadap bakteri anaerob dan protozoa. Ini ATP dari ADP karena asetil-KoA diubah menjadi asetat. Atau,
diaktifkan ketika gugus 5-nitronya direduksi oleh ferredoxin itu asetil-KoA diubah menjadi etanol, menggunakan asetat

ARA. 3. Sintesis produk akhir dari piruvat. Enzim diberi label sebagai berikut: 1, alanin aminotransferase (72, 263) (alanin diproduksi hanya
dalam kondisi anaerobik [265]); 2, GDH (263, 272, 359); 3, PFOR (327) (feredoksin daripada NAD sebagai akseptor elektron [326]); 4, asetil-KoA
sintetase (pembentuk ADP) (293); 5, alkohol dehidrogenase E (ADHE) (memiliki aktivitas asetaldehida dehidrogenase di terminal amino yang
mengkatalisis konversi asetil-KoA menjadi asetaldehida dan aktivitas alkohol dehidrogenase di terminal karboksi yang mengkatalisis konversi
asetaldehida menjadi etanol) (59, 292). Asetat adalah produk utama dalam kondisi aerobik; etanol dan alanin lebih disukai diproduksi dalam
kondisi anaerobik (265).
VOL. 14, 2001
ARA. 4. Jalur arginin dihidrolase (74, 297, 300). Enzim diberi label sebagai berikut: 1, arginine deiminase (163); 2, ornitin transkarbamoilase
(297, 300); 3, karbamat kinase (226).
aldehida sebagai perantara, oleh enzim bifungsional alkohol
dehidrogenase E (59, 292, 295). Alkohol dehidrogenase E
memiliki aktivitas asetaldehida dehidrogenase di terminal
amino yang mengkatalisis konversi asetil-KoA menjadi
asetaldehida dan aktivitas alkohol dehidrogenase di terminal
karboksi yang mengubah asetaldehida menjadi etanol.
Metabolisme Asam Amino
Asam amino menjadi semakin diakui sebagai komponen
penting dari metabolisme energiG. lamblia. Penyerapan
aspartat, alanin, dan arginin dari media ekstraseluler, serta
dokumentasi metabolisme glukosa-independen,
menunjukkan potensi pentingnya metabolisme asam amino
untuk produksi energi diGiardia(215, 297, 299).
Jalur arginin dihidrolase adalah salah satu sumber energi
potensial (74, 297, 300) (Gambar 4). Jalur ini ada di sejumlah
organisme prokariotik, tetapi di antara eukariota jalur ini
hanya didokumentasikan diT.vaginalis(191) danG. lamblia.
Dalam jalur arginin dihidrolase, arginin diubah menjadi
ornitin dan amonia dengan pembentukan ATP dari ADP
melalui fosforilasi tingkat substrat. Ornitin kemudian
diekspor dengan imbalan arginin ekstraseluler melalui
mekanisme transporter (298).
Aspartat adalah sumber energi potensial lainnya. Ini diubah
menjadi oksaloasetat oleh aspartat transaminase, memasuki
jalur perantara, di mana ia diubah menjadi piruvat melalui
perantara malat (215) (Gbr. 2).
Alanine juga tampaknya memainkan peran penting dalam
memungkinkan trofozoit beradaptasi dengan tantangan
hipoosmotik. Dengan lingkungan ekstraseluler isoosmolar,
konsentrasi alanin intraseluler adalah 50 mM (161, 270), dan
dengan tantangan hipoosmolar, konsentrasi alanin menurun
dengan cepat melalui mekanisme transpor aktif. (Selain alanin,
kalium tampaknya berperan dalam osmoregulasi trofozoit
[204].) Sekresi alanin terjadi melalui transporter alanin yang
juga mengangkutL-serin, glisin danL-treonina,L-glutamin, danL
-asparagin (73, 258). Transporter ini bertindak sebagai antiport,
menukar alanin intraseluler dengan asam amino lain dari
lingkungan ekstraseluler (298).
Selain sintesis alanin sebagai produk sampingan dari metabolisme
energi, satu-satunya asam amino lain yang telah didokumentasikan
sintesis de novo adalah valin. Dengan demikian,Giardiatidak memiliki
sintesis sebagian besar asam amino dan bergantung pada pemulungan
mereka dari lingkungan usus tempat trofozoit bereplikasi.
Salah satu persyaratan penting untuk pertumbuhan axenicG.
lambliatrofozoit adalah persyaratan mutlak untuk rela-
BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 455
Sistein konsentrasi tinggi (16 mM). Sistein juga memberikan
perlindungan parsial dari toksisitas oksigen yang tidak
terlihat dengan agen pereduksi lainnya, termasuk sistin, dan
oleh karena itu tampaknya merupakan efek spesifik dari
sistein (109, 110, 113). Sistein tidak disintesis de novo dan
tidak disintesis dari sistin (202). Tampaknya diimpor ke
dalam sel melalui difusi pasif, meskipun transpor aktif dapat
menjelaskan beberapa perolehan sistein (202). Pentingnya
gugus tiol bebas pada permukaan trofozoit ditunjukkan
oleh toksisitas agen penghambat tiol yang tidak mampu
menembus sel utuh (116). Toksisitas ini menunjukkan
bahwa agen ini bereaksi dengan gugus tiol pada permukaan
trofozoit, membunuh trofozoit. Sistein tampaknya
merupakan kelompok tiol utama yang ada (34).
Metabolisme Lipid
Pertumbuhan trofozoit terutama di duodenum dan jejunum
awalnya menunjukkan pentingnya empedu dalam pertumbuhan
Giardiatrofozoit. Pertumbuhan axenic jangka pendek tanpa adanya
serum dapat didukung oleh empedu (111). Kolesterol lipid empedu
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
dan fosfatidilkolin serta garam empedu glikokolat dan
glikodeoksikolat juga akan mendukung pertumbuhan ini (111).
Serum diperlukan untuk pertumbuhan axenic jangka panjang, tetapi
telah ditunjukkan bahwa fraksi Cohn IV-1 serum sapi (diperkaya
dengan globulin alfa, lipoprotein, dan faktor pertumbuhan) dapat
menggantikan seluruh serum (194). Faktanya, faktor pertumbuhan
mirip insulin II, yang terdapat dalam fraksi IV-1, merangsang
pertumbuhan trofozoit dan penyerapan sistein. Fraksi yang sama
dari sejumlah mamalia lain juga efektif dalam mendukung
pertumbuhan, meskipun dalam beberapa kasus penipisan antibodi
diperlukan.
G. lambliatrofozoit tidak memiliki kapasitas sintesis asam
lemak de novo (149), dengan kemungkinan pengecualian asam
lemak minor tertentu (75). Namun, asam lemak bebas beracun
bagi trofozoit, menunjukkan 50% dosis mematikan 2 sampai 12
MM (283). Bahkan, toksisitas susu manusia untukG. lamblia
trofozoit tampaknya dimediasi melalui produk lipolisis susu
(129, 283). Trofozoit tampaknya memenuhi kebutuhan lipidnya
dengan memperoleh kolesterol dan fosfatidilkolin dari
lingkungan eksternal (94, 111, 200). Kolesterol dan fosfolipid
disuplai oleh lipoprotein, B-siklodekstrin, dan garam empedu,
dengan transfer lipid ke
456 ADAM
ARA. 5. Jalur penyelamatan purin ribonukleosida. Enzim diberi
label sebagai berikut: 1, adenosin hidrolase (339); 2, adenin
fosforibosiltransferase (APRTase); (339); 3, guanosin hidrolase (339);
4, guanin fosforibosiltransferase (GPRTase) (339).
permukaan parasit yang difasilitasi oleh garam empedu (200). Juga telah
disarankan bahwa tingkat endositosis lipid yang rendah terjadi (200). Asam
empedu terkonjugasi tampaknya diambil oleh mekanisme yang diperantarai
oleh pembawa yang mencakup pembawa yang berbeda untuk cholyltaurine
dan cholylglycine (60).
Asam lemak utama yang ditemukan pada trofozoit yang
tumbuh secara axenically adalah asam palmitat, asam
stearat, dan asam oleat (75). Aktivitas desaturase asam
lemak, termasuk desaturasi oleat menjadi linoleat dan
linolenat, telah didokumentasikan (75). Asam arakidonat
dimasukkan ke dalam lipid netral, fosfolipid, dan berbagai
macam lipid seluler (108), sedangkan asam palmitat, asam
miristat, dan asam oleat ditransesterifikasi terutama
menjadi fosfolipid (28), termasuk fosfolipid seluler,
(misalnya, fosfatidilgliserol, fosfatidilkolin ,
fosfatidiletanolamin, dan fosfatidilinositol) (149, 154, 228,
313). Interesterifikasi juga terjadi dengan penggabungan
asam lemak terkonjugasi ke dalam fosfatidilgliserol (108).
Toksisitas analog tertentu dari fosfatidilgliserol untuk
trofozoit telah didokumentasikan,
Isoprenoid adalah lipid yang berasal dari mevalonat yang
umumnya ditemukan pada sel eukariotik. Produk akhir yang paling
menonjol adalah kolesterol, tetapi isoprenoid juga dimasukkan ke
dalam protein seperti protein pengikat GTP melalui modifikasi
pascatranslasional. Isoprenilasi protein telah ditunjukkan dengan
penggabungan mevalonat berlabel radioaktif ke dalam protein
trofozoit (197). Penggabungan mevalonat dan pertumbuhan sel
dihambat secara reversibel oleh inhibitor kompetitif 3-hidroksi-3-
metilglutoril (HMG)-CoA reduktase. Inhibitor langkah selanjutnya
dari isoprenilasi secara permanen menghambat pertumbuhan sel.
Penyelamatan Purin dan Pirimidin
Banyak protozoa patogen, termasukG. lamblia(339),
bergantung pada jalur penyelamatan untuk mendapatkan
nukleosida purin. Selain itu,G. lamblia(13), sertaT.vaginalis(340)
dan janin Tritrikomonas(341), kekurangan jalur sintetik pirimidin
dan bergantung pada jalur penyelamatan untuk memperoleh
nukleosida purin dan pirimidin.
Studi metabolisme purin menggunakan prekursor
radiolabeled telah menunjukkan penggabungan adenin,
adenosin, guanin, dan guanosin menjadi nukleotida tetapi tidak
ada penggabungan komponen jalur sintetik de novo, seperti
format, glisin, hipoksantin, inosin, atau xantin (23, 224 , 339).
Skenario yang mungkin adalah bahwa nukleosida purin
(adenosin dan guanosin) diimpor oleh transporter dengan
spesifisitas luas untuk nukleosida serta deoksiribonukleosida
(19, 63). Nukleosida purin kemudian dipecah menjadi basa oleh
masing-masing hidrolase (Gbr. 5). Fosforibosil 1-piro-
CLIN. MICROBIOL. REV.
fosfat disintesis oleh fosforibosil 1-pirofosfat sintetase (171) dan
bereaksi dengan basa purin yang diselamatkan untuk
menghasilkan nukleosida-59-monofosfat dalam reaksi yang
dikatalisis oleh masing-masing monofosfat
fosforibosiltransferase (PRTase). GPRTase dari kebanyakan
eukariota menggunakan hipoksantin atau xantin sebagai
substrat, tetapiG. lamblia GPRTase sangat spesifik untuk guanin
(261, 311), menunjukkan bahwa guanin adalah satu-satunya
sumber nukleotida guanin. Urutan asam amino dari enzim
GPRTase menunjukkan kurang dari 20% identitas enzim
manusia (311). Struktur kristalografi dariG. lambliaGPRTase
telah menyarankan kemungkinan alasan untuk substrat unik
dariG. lambliaenzim, seperti substitusi aspartat untuk leusin
pada posisi 181 (303).
G. lambliatrofozoit juga bergantung pada penyelamatan
timidin eksogen, sitidin, dan uridin untuk sintesis nukleotida
pirimidin (13, 190) (Gbr. 6). Uridine mungkin diimpor oleh
transporter timidin (62, 89) dan dipecah menjadi urasil oleh
hidrolase (13) atau fosforilase (181). Cytidine dan uridine
juga dapat diimpor oleh transporter spesifisitas luas (63),
tetapi sebagian besar cytidine mungkin memasuki jalur
sintetik untuk sintesis UTP daripada dikonversi lebih
langsung ke CTP (Gbr. 6). Mayoritas CTP mungkin dihasilkan
dari UTP oleh sintetase CTP (151). Transporter nukleobase
berafinitas rendah juga telah didokumentasikan (89).
Meskipun fungsi transporter belum ditentukan, ia mungkin
terlibat dalam ekspor nukleobase yang tidak dapat
digunakan (misalnya timin) atau berlebihan.
Sintesis DNA juga bergantung pada penyelamatan
deoksinukleotida eksogen.G. lambliatrofozoit kekurangan reduktase
ribonukleotida dan tidak memasukkan basa purin atau nukleosida
ke dalam DNA. Sebaliknya, mereka bergantung pada penyelamatan
deoksinukleosida purin eksogen (20) (Gbr. 7). Satu purin
deoksinukleosida kinase untuk sintesis deoksinukleotida dari
masing-masing deoksinukleosida (deoksiadenosin dan
deoksiguanosin) dan pirimidin deoksinukleosida kinase
mengkatalisasi produksi pirimidin deoksinukleotida dari
deoksinukleosida timidin dan sitosin (176).
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
ARA. 6. Jalur penyelamatan pirimidin ribonukleosida. Enzim diberi
label sebagai berikut: 1, urasil fosforibosiltransferase (UPRTase) (58);
2, uridin/timin fosforilase (181) (hidrolase uridin [13] belum
dikonfirmasi); 3, uridin fosfotransferase (kinase) (13) (tidak
dikonfirmasi [336]); 4, UMP kinase (151); 5, UDP kinase (151); 6,
sintetase CTP (151, 187); 7, CDP kinase (151); 8, cytosine
phosphoribosyltransferase (CPRTase) (13) (aktivitas tingkat rendah
[151]); 9, hidrolase sitidin (13); 10, deaminase sitidin (336). Jalur
penyelamatan pirimidin awal dijelaskan dalam (referensi) dan telah
diperbarui dari literatur yang lebih baru (lihat referensi yang dikutip
untuk masing-masing enzim).
VOL. 14, 2001
ARA. 7. Jalur penyelamatan deoksinukleosida. Enzim diberi label
sebagai berikut: 1, pirimidin deoksinukleosida kinase (176); 2, purin
deoxynucleoside kinase (176).
SEL BIOLOGI
Struktur Trofozoit
ItuG. lambliatrofozoit berbentuk buah pir dan kira-kira 12
sampai 15Mm panjang dan 5 sampai 9Mm lebar.
Sitoskeleton meliputi badan median, empat pasang flagela
(anterior, posterior, kaudal, dan ventral), dan cakram ventral
(Gbr. 8 dan 9). Trofozoit memiliki dua inti tanpa nukleolus
yang terletak di anterior dan simetris terhadap sumbu
panjang (Gbr. 9). Vakuola lisosom, serta butiran ribosom
dan glikogen, ditemukan di sitoplasma. Kompleks Golgi
menjadi terlihat pada trofozoit encysting tetapi belum
dipastikan ada pada trofozoit vegetatif (117). Namun,
tumpukan membran yang menunjukkan kompleks Golgi
telah dibuktikan (174, 309).
ARA. 8. Bagian koronal trofozoit. Pandangan koronal trofozoit menunjukkan inti (N), retikulum endoplasma (ER), flagela (F), dan vakuola (V).
Pengisapan mekanis terbentuk ketika cakram ventral (VD) menempel pada permukaan usus atau kaca. Komponen cakram ventral meliputi area terbuka
(BA), puncak lateral (LC), dan sayap ventrolateral (VLF). Pandangan yang diperbesar dari disk ventral ditunjukkan pada Gambar. 10.
BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 457
Struktur dan Replikasi Nuklir
G. lambliatrofozoit memiliki dua nukleus yang penampilannya
hampir identik (Gbr. 8 dan 9). Mereka mereplikasi kira-kira pada
waktu yang sama (351) dan keduanya aktif secara transkripsi
(153) sebagaimana ditentukan oleh penggabungan uridin ke
dalam RNA nuklir. Kedua nuklei memiliki jumlah gen rDNA yang
kira-kira sama seperti yang ditentukan oleh hibridisasi in situ
menggunakan probe rDNA (153). Keduanya memiliki jumlah
DNA yang kira-kira sama seperti yang ditentukan oleh intensitas
pewarnaan nuklir dengan 49,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)
(153) atau propidium iodide (25), meskipun kepemilikan jumlah
DNA yang sama oleh kedua inti telah dipertanyakan (M. Frisardi
dan J. Samuelson, Pertemuan Parasitologi Molekuler Woods
Hole, abstr. 263A, 1999, dan abstr. 202C, 2000). Secara umum
diasumsikan bahwa dua nukleus memiliki komplemen gen dan
kromosom yang sama, dan hasil dari laboratorium kami
menggunakan hibridisasi fluoresensi in situ dengan gen salinan
tunggal mendukung asumsi ini (L. Yu, CW Birky, dan RD Adam,
pengamatan yang tidak dipublikasikan) . Fitur-fitur ini semua
berbeda dari protista bersilia yang binukleat, seperti
TetrahymenaDanParamecium(276). Organisme ini memiliki
mikronukleus yang lebih kecil yang berisi DNA genom tetapi
tidak aktif secara transkripsi. DNA dari mikronukleus
diamplifikasi menjadi banyak salinan, membentuk
makronukleus, dari mana transkripsi terjadi. Giardiaspp. dan
diplomonad lainnya tampak unik karena memiliki dua inti yang
identik dengan parameter di atas.
Inti eukariota yang lebih tinggi memiliki nukleolus yang mudah terlihat,
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
458 ADAM
ARA. 9. Penampang trofozoit. Pandangan penampang trofozoit menunjukkan inti (N), flagela (F), vakuola (V), dan retikulum endoplasma
(ER).
yang merupakan situs transkripsi rRNA. Fibrillarin adalah komponen
utama nukleolus dan diperlukan untuk pemrosesan pra-rRNA serta
untuk kelangsungan hidup diSaccharomyces cerevisiae(144, 296,
325) Nukleolus belum teridentifikasiG. lambliainti, dan antibodi
terhadapG. lambliafibrillarin secara difus menodai nuklei
G. lamblia, menunjukkan bahwa transkripsi dan pemrosesan
rRNA tidak terlokalisasi ke daerah inti tertentu (240).
Kultur axenic belum disinkronkan, dan waktu pembelahan sangat
singkat, sehingga studi pembelahan sel dan inti terbatas pada
pengamatan replikasi trofozoit berdasarkan mikroskop statis.
Berdasarkan pengamatan ini, telah diusulkan bahwa selama
pembelahan sel, inti bergerak ke samping diikuti oleh replikasi inti,
menghasilkan trofozoit dengan empat inti. Trofozoit kemudian
membelah pada bidang longitudinal sedemikian rupa untuk
mempertahankan asimetri kiri-kanan (48, 104, 153). Mikrograf
elektron dari organisme eksisting yang menjalani sitokinesis telah
menunjukkan sel-sel yang tampak bergabung secara lateral atau
dengan cakram ventral yang berlawanan satu sama lain (130). Sel-
sel yang bergabung secara lateral akan konsisten dengan
mekanisme sitokinesis di atas, tetapi replikasi yang menghasilkan
cakram ventral yang berlawanan akan membalikkan asimetri kiri-
kanan dengan masing-masing divisi. Dengan demikian, belum
mungkin untuk memastikan morfologi sitokinesis.
Sejumlah obat yang menghentikan siklus sel sel mamalia
telah diuji pengaruhnya terhadap trofozoit. Colchicine
(mamalia G21M) dan iradiasi gamma (mammalian
CLIN. MICROBIOL. REV.
G21M) tidak berpengaruh, sedangkan hidroksiurea (mammalian
G21M) dan razoxane (mamalia G1/S, terkadang G21M),
menangkap siklus sel di G21Fase M (140). Sampai saat ini,
budaya axenic dariG. lambliabelum disinkronkan.
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
Sitoskeleton dan Motilitas
Trofozoit mengkolonisasi usus kecil inangnya, mendominasi di
pertengahan jejunum. Mereka menempel dengan permukaan
ventral cekung mereka (piringan perekat ventral) ke dinding usus, di
mana mereka mendapatkan nutrisi yang diperlukan dan
menghindari transportasi di luar jejunum. Disk ventral memediasi
perlekatan mekanis tidak hanya ke dinding usus tetapi juga ke
permukaan wadah yang digunakan untuk pertumbuhan axenic. Baik
invasi seluler maupun perlekatan yang dimediasi reseptor telah
didokumentasikanGiardiaspp. Oleh karena itu, sitoskeleton dan
terutama cakram ventral memainkan peran kunci dalam
kelangsungan hidup organisme di usus inang.
Diskus ventral adalah komponen unik dan penting dari
G. lambliasitoskeleton. Secara kasar, tampak sebagai struktur
cekung dengan kedalaman maksimum 0,4Mm menutupi seluruh
permukaan ventral. Tepinya menyempit menjadi puncak lateral, dan
sayap ventrolateral yang lebih fleksibel (Gbr. 8) mengelilingi
piringan (82). Disk berisi aktinin protein kontraktil,A-actinin, myosin,
dan tropomyosin (103) sebagai dasar biokimia untuk kontraksi
diskus yang terlibat dalam perlekatan. Menempel-
VOL. 14, 2001
ARA. 10. Tampilan jarak dekat cakram ventral. Tampilan diskus ventral yang diperbesar menunjukkan mikrotubulus (MT) dan mikroribbon atau pita dorsal (DR).
ment tergantung pada metabolisme aktif dan dihambat oleh suhu
di bawah 37°C, peningkatan kadar oksigen, atau penurunan
konsentrasi sistein (109, 113). Secara ultrastruktural, cakram ventral
mencakup satu set mikrotubulus yang mengandung 13
protofilamen dan dihubungkan ke membran ventral. Mikrotubulus
ini membentuk dasar mikroribbon (pita dorsal) yang memanjang
hampir tegak lurus dari membran (Gbr. 8 dan 10). Konstituen
protein dari pita dorsal (microribbons) termasuk satu set giardin,
yang merupakan protein alpha-coiled-helix berukuran sekitar 29
hingga 38 kDa. Giardin melapisi tepi mikroribbon tetapi tidak
ditemukan di mikrotubulus (273). Meskipun 23 bentuk protein ini
telah dipisahkan oleh elektroforesis dua dimensi, urutan N-terminal
dari beberapa varian identik, menyarankan bahwa modifikasi
posttranslasional menyumbang beberapa bentuk (273). Beberapa
giardin,A1-giardin (273),A2-giardin (15),B-giardin (10, 134), danG-
giardin (257), telah dikloning, dan rangkaiannya memastikan
struktur alfa-heliks dari protein ini. ItuA1-giardin danA2Urutan
-giardin menunjukkan sekitar 80% identitas pada tingkat nukleotida
dan asam amino (15), sedangkan giardin lainnya tidak memiliki
kesamaan urutan yang signifikan. Dari dua urutan yang diterbitkan
untuk B-gen giardin, yang ditemukan dalam referensi (134) adalah
yang benar kecuali bahwa kodon awal adalah 13 asam amino di
hulu dari sekuens cDNA yang dilaporkan (2 asam amino di hulu dari
sekuens genomik yang dilaporkan) (10), menghasilkan prediksi yang
sedikit lebih tinggi massa molekul (R. Adam, hasil tidak
dipublikasikan). Suatu protein dengan reaktivitas silang imunologis
denganB-giardin, tetapi secara signifikan lebih besar, juga telah
diidentifikasi sebagai protein sitoskeletal (protein tangkai kepala;
HPSR2) (206). Protein 183-kDa ini memiliki tangkai gulungan
panjang dan domain hidrolitik N-terminal. Apakah itu memiliki
distribusi seluler yang sama dengan giardin belum dilaporkan.
Tubulin tidak ditemukan di mikroribbon tetapi ditemukan di
mikrotubulus (310). Mikrotubulus cakram ventral, serta flagela,
mungkin terdiri dari ab-tubulin. Modifikasi pascatranslasi dariG.
lamblia tubulin termasuk asetilasi dan poliglisilasi (310, 345,
346). Benzimidazoles adalah senyawa yang digunakan terutama
sebagai agen antihelminthic, tetapi mereka juga memiliki
aktivitas in vitro yang signifikan terhadapG. lambliaserta khasiat
in vivo untuk giardiasis (49, 68, 70, 122, 233). Efek mereka
dianggap dimediasi oleh interaksi mereka denganB-tubulin.G.
lambliatrofozoit terpapar
BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 459
albendazole (atau benzimidazoles lainnya) kehilangan kemampuan
mereka untuk melekat meskipun gerakan flagela normal (70). Ini
menunjukkan perbedaan antara tubulin yang ditemukan di cakram
ventral dan yang ditemukan di flagela. Ini, serta pengamatan bahwa
kepatuhan dapat terjadi tanpa adanya fungsi flagellar (103),
menunjukkan bahwa diskus ventral penting untuk kepatuhan tetapi
flagela tidak. Dengan paparan yang lebih lama (misalnya 24 jam)
terhadap albendazol, cakram ventral menjadi terfragmentasi,
dengan dislokasi mikroribbon dan mikrotubulus cakram ventral (49).
Endapan padat-elektron substansial dapat ditemukan di
mikrotubulus dan mikroribbon dan pada tingkat yang lebih rendah
di struktur yang mengandung tubulin lainnya, seperti badan median
dan flagela (49). Efek nyata albendazol pada mikroribbon, meskipun
kekurangan tubulin dalam mikroribbon, meningkatkan
kemungkinan bahwa benzimidazole bereaksi dengan protein selain
tubulin, seperti giardin. Vinculin adalah protein yang mengikatA-
aktinin dan memediasi perlekatan filamen aktin ke situs membran.
Lokasinya di daerah perlekatan cakram ventral telah mengarah
pada dugaan bahwa ia mungkin terlibat dalam proses perlekatan
(241). Studi fungsional lebih lanjut diperlukan untuk
mengkonfirmasi atau menyangkal proposal ini.
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
Trofozoit memiliki empat pasang flagela yang dimulai pada dua
set badan basal yang berada di dekat garis tengah dan
anteroventral ke nukleus. Mereka muncul dari daerah anterior,
posterior, kaudal, dan ventral trofozoit. Batang paraflagellar
memanjang sepanjang satu sisi dari dua flagela ventral (102, 135).
Sembilan pasang mikrotubulus melingkari dua mikrotubulus untuk
membentuk flagela (Gbr. 8). Flagela tampaknya penting untuk
motilitas tetapi tidak untuk perlekatan. Selain itu, munculnya awal
mereka melalui dinding kista selama proses excystation
menunjukkan pentingnya mereka dalam excystation (38) (lihat
“Excystation” di bawah).
Tubuh median adalah komponen sitoskeleton yang terletak di
garis tengah dan punggung flagela ekor dan terdiri dari sekelompok
mikrotubulus dalam bundel yang rapat. Ini unik untukGiardiaspp.,
dan morfologinya membantu menentukan karakteristik morfologi
yang berbedaGiardiaspesies (Tabel 1).G. lambliatrofozoit biasanya
memiliki dua badan median yang berbentuk seperti palu cakar.
Badan median telah diusulkan sebagai tempat perakitan
mikrotubulus untuk dimasukkan ke dalam cakram ventral (216).
Caltractin/centrin, protein pengikat kalsium yang bertanggung
jawab untuk pembentukan tubuh basal
460 ADAM
entasi, telah diidentifikasi dalam badan basal serta batang
paraflagellar dan badan median (21, 216). Protein koil-koil
101-kDa juga telah terlokalisasi ke median tubuh dengan
mikroskop imunofluoresensi (205).
Transpor dan Degradasi Protein
sistem transpor protein endomembran.Retikulum
endoplasma (ER) dan kompleks Golgi adalah bagian dari sistem
endomembran eukariotik yang terlibat dalam pelipatan dan
translokasi protein. Pada eukariota yang lebih tinggi, protein
yang ditujukan untuk sekresi memiliki urutan sinyal yang
mengarahkannya ke ER saat diterjemahkan dalam ribosom.
Urutan sinyal berikatan dengan partikel pengenalan sinyal
(SRP). Kompleks ini kemudian berikatan dengan reseptor SRP
(SR) pada bagian sitoplasma RE. SR adalah protein dimerik yang
terdiri dari SR berlabuh membranBdan GTPase, SRA.Setelah
translokasi mereka ke UGD, pendamping seperti BiP (homolog
HSP70 yang ditemukan di UGD) membantu melipat dan
mengangkut lebih lanjut. Meskipun struktur yang konsisten
dengan ER sebelumnya telah diidentifikasi dengan mikroskop
elektron (EM), sampai saat ini masih ada keraguan tentang
keberadaan ER diG. lamblia. Namun kloning dan karakterisasi
SRA,serta identifikasi sistem membran ekstensif berlabel
antibodi terhadap BiP (309), telah dengan jelas menunjukkan
keberadaan ER. Salah satu aspek penting dari pelipatan protein
meliputi pembentukan ikatan disulfida yang benar, yang dicapai
dalam lumen RE oleh protein disulfida isomerase. Tiga gen
isomerase protein disulfida dariG. lambliatelah dikloning dan
dikarakterisasi, dan produknya telah dilokalkan ke ER (162).
Kompleks Golgi belum terdeteksi pada trofozoit dengan
teknik mikroskopis standar tetapi telah didemonstrasikan pada
organisme yang membentuk kista (117, 282) (lihat “Encystation”
di bawah). Baru-baru ini, transmisi dan fraktur beku EM dari
trofozoit fase log nitrobenzoxadiazole (NBD) berlabel ceramide
menunjukkan pewarnaan berat di daerah perinuklear dalam
pola yang mirip dengan kompleks Golgi dari organisme lain
(174). Faktor ADP-ribosylation (ARF) adalah protein pengikat GTP
yang diperlukan untuk pembentukan vesikel berlapis clathrin
dan COP I dari kompleks Golgi. ARF dinyatakan dalam
G. lambliatrofozoit dan telah digunakan untuk melengkapi fungsi
ARF diS.cerevisiae(182, 239). Antibodi terhadap ARF dan untukB-COP
(dari mantel COP I) memberi label vesikel perinuklear dengan cara
yang dihambat oleh brefeldin A (195), juga menunjukkan bahwaG.
lambliatrofozoit mungkin memiliki bentuk kompleks Golgi. Namun,
penyelidikan lebih lanjut diperlukan untuk mengkonfirmasi lebih
lanjut keberadaan kompleks Golgi dalam trofozoit dan untuk
menentukan karakteristiknya.
Impor spesifik protein ke dalam inti juga telah
didokumentasikan dengan menggunakan sinyal lokalisasi nuklir
virus simian 40 untuk mengarahkan protein fluoresen hijau
(GFP) ke inti (76). Ran adalah protein pengikat GTP nuklir yang
terlibat dalam impor protein dalam nukleusXenopusoosit dan
berpartisipasi dalam perkembangan siklus sel dalam ragi (sppi
1). Itu telah dikloning dan dikarakterisasiG. lamblia, tetapi lokasi
seluler dan fungsinya belum ditentukan (50).
Vakuola endosom-lisosom.Kebanyakan eukariota memiliki sistem
endosom dan lisosom yang mendegradasi dan mendaur ulang protein
endogen atau yang diperoleh melalui endositosis atau pha-
CLIN. MICROBIOL. REV.
gocytosis dari ruang ekstraseluler. Endosom awal menginternalisasi
protein endositosis untuk memungkinkan mereka selanjutnya
kembali ke membran sel atau diangkut ke endosom akhir (atau,
alternatifnya, pematangan endosom awal ke akhir) diikuti oleh
pengangkutan ke dan degradasi oleh lisosom. Keduanya bersifat
asam, dengan pH endosom ,6 dan pH lisosom 5. Trofozoit memiliki
banyak vakuola yang mengelilingi pinggiran sel (Gbr. 8 dan 9), yang
memenuhi setidaknya beberapa kriteria endosom dan lisosom.
Vakuola ini bersifat asam, seperti yang ditunjukkan oleh serapan
acridine orange (101, 156). Mereka mengkonsentrasikan ferritin
eksogen dan lucifer yellow, menunjukkan peran potensial mereka
dalam endositosis (30, 173).G. lamblia partikel virus tampaknya
terkonsentrasi ke dalam vakuola melalui mekanisme endositosis
(323) (lihat “Giardia lambliavirus” di bawah). Pelabelan pulse-chase
dengan horseradish peroxidase menunjukkan pelabelan vakuola
awal dan persisten, menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan
antara vesikel endositik awal dan akhir seperti yang ditemukan pada
eukariota tingkat tinggi (173). Pelabelan sebagian kecil vakuola
dengan bahan kimia yang melabeli ER, seperti glukosa-6-fosfatase
dan seng iodida-osmium tetroksida, dan rekonstruksi tiga dimensi
(173), serta EM menggunakan antibodi anti-BiP (309) , telah
menyarankan kesinambungan vakuola ini dengan UGD. Vakuola
juga mengandung berbagai aktivitas hidrolase, seperti asam
fosfatase, proteinase, dan RNase, yang menunjukkan karakteristik
lisosomalnya (98, 189). Dengan demikian, vakuola tampaknya
berfungsi sebagai endosom dan lisosom awal dan akhir dan
mungkin secara fungsional terkait dengan ER (173).
Aktivitas proteinase sistein terjadi pada vakuola endosom-
lisosom (189). Aktivitas proteinase sistein utama dari
G. lambliatrofozoit telah ditemukan dalam protein dengan
massa molekul 40 dan 105 kDa (123), 35 dan 95 kDa (348), dan
tiol 38-kDa (269). Tampaknya ada dua ukuran utama proteinase
sistein, satu dalam kisaran ukuran 35 hingga 40 kDa dan satu
lagi dalam kisaran 95 hingga 105 kDa. Sebuah famili dari tiga
gen sistein protease (CP1, CP2, dan CP3) telah ditemukan
menjadi anggota subgrup cathepsin B dari famili peptidase C1
(344). Proteinase sistein ini berukuran sekitar 30 kDa, mungkin
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
sesuai dengan aktivitas proteinase yang disebutkan di atas yang
lebih kecil. Hanya CP2 dan CP3 yang diekspresikan; CP2
ditemukan di vakuola dan terlibat dalam eksistasi (lihat
“Excystation” di bawah).
Proteasom.Sementara lisosom mendegradasi protein
endositosis, proteasom adalah kompleks besar yang mendegradasi
protein sitosolik endogen yang tidak terlipat dengan benar.
Kompleks proteasome 20S sekitar 700 kDa dan mengandung
aktivitas protease. Kompleks ini dapat diubah menjadi kompleks 26S
dengan penambahan protein yang menambah aktivitas pengaturan
dan membawa ukurannya menjadi 2.000 kDa. Archaea memiliki
proteasome paling sederhana, terdiri dari dua alfa dan dua beta
heptamer, sedangkan proteasome eukariotik 20S berisi tujuh
subunit alfa dan tujuh beta berbeda yang diatur dengan cara yang
mirip dengan Archaea. SejakG. lambliamemiliki kesamaan tertentu
dengan Archaea tetapi fitur eukariotik lainnya, menarik bahwa
proteasome 20S dariGiardiamenunjukkan pola eukariotik yang jelas
dengan 14 subunit (77). Protein ditargetkan ke proteasom oleh
ubiquitin, yang tampaknya ada diGiardiasebagai satu salinan gen,
berbeda dengan banyak salinan gen yang ditemukan pada
eukariota lain (168).
VOL. 14, 2001
Struktur Kista
Encystation terjadi setelah organisme mengalami replikasi
nuklir tetapi sebelum sitokinesis; oleh karena itu, kista
mengandung empat inti. Mereka kira-kira berukuran 5 kali 7
hingga 10Mm dengan diameter dan ditutupi oleh dinding yang
berukuran 0,3 sampai 0,5Mm tebal dan terdiri dari lapisan
filamen luar dan lapisan membran dalam dengan dua
membran. Bagian luar dinding kista ditutupi oleh jaringan
filamen 7-20-nm (79, 80). Empat protein utama telah
diidentifikasi pada dinding kista luar, berukuran 29, 75, 88, dan
102 kDa (80). Komponen gula bagian terluar didominasi oleh
galaktosamin dalam bentukN- asetilgalaktosamin (GalNAc)
(148). Klaim sebelumnya bahwa dinding kista terdiri dari kitin (N
-acetylglucosamine) telah disangkal (3).
Sebagai bentuk siklus hidup yang ramah lingkungan, kista
memiliki tingkat metabolisme hanya 10 sampai 20% dari yang
ditemukan di trofozoit (262). Respirasi kista dan trofozoit
distimulasi oleh etanol, sedangkan trofozoit hanya distimulasi
oleh glukosa.
Enkripsi
Faktor pendorong dan penghambat.Saat trofozoit
bereplikasi dan menjajah permukaan usus, beberapa kista
di jejunum setelah terpapar sekresi empedu. Encystation
telah dilakukan in vitro dengan memaparkan trofozoit ke
lingkungan yang meniru jejunum (114, 115, 301). Kondisi
khusus yang mempromosikan encystation termasuk pH
alkalotik ringan 7,8 dan garam empedu terkonjugasi
ditambah asam lemak (114). Peneliti lain melaporkan bahwa
ekspresi protein dinding kista, penanda proses encystation,
terdeteksi 90 menit setelah terpapar medium dengan serum
yang kekurangan lipoprotein (196). Encystation dihapuskan
ketika kolesterol ditambahkan, mengarah ke usulan bahwa
encystation dihasilkan dari kelaparan kolesterol.
Peristiwa encystation.Encystation dapat dibagi menjadi dua
fase, awal dan akhir. Jadwal yang ditentukan oleh berbagai
penelitian agak berbeda, mungkin karena perbedaan pendekatan
yang digunakan. Setelah inisiasi kondisi encystation, organisme
tidak semua memasuki proses encystation pada waktu yang sama.
Oleh karena itu, studi morfologi yang memeriksa perjalanan waktu
dari organisme pertama yang mengista cenderung memberikan
waktu yang lebih awal untuk peristiwa encystation daripada studi
yang bergantung pada kumpulan organisme. Studi morfologi ini
menunjukkan bahwa fase awal selesai dalam waktu sekitar 10 jam
dan fase akhir selesai dalam 16 jam (83). Untuk pembahasan ini, kita
akan mengasumsikan bahwa kejadian awal dan akhir dari berbagai
penelitian dapat dibandingkan.
Fase awal terdiri dari sintesis intraseluler dan transportasi
komponen dinding kista. Tumpukan membran seperti Golgi menjadi
mudah terlihat oleh EM dan mungkin merupakan sarana untuk
mengangkut molekul spesifik kista ke vesikel spesifik encystation
(ESV) (282). Label membran seperti Golgi dengan NBD-ceramide dan
sekresi protein dihambat oleh brefeldin A, seperti yang diharapkan
untuk kompleks Golgi (195). Ekspresi BiP, molekul pendamping yang
ditemukan di UGD, meningkat selama encystation (199). ESV
menjadi terlihat dengan mikroskop cahaya (96) dan mungkin terlibat
dalam trans-
BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 461
pelabuhan blok bangunan ke dinding kista yang baru lahir. Satu
set protein 21 sampai 39 kDa diekspresikan pada fase awal
(281). Antibodi monoklonal terhadap beberapa pita 26 hingga
44 kDa awalnya memberi label pada ESV dan selanjutnya
memberi label pada dinding kista, menunjukkan pengangkutan
molekul ini ke dinding kista (211, 342). Gen yang mengkode dua
protein yang dimasukkan ke dalam dinding kista telah dikloning
dan dikarakterisasi, CWP1 26-kDa (236) dan CWP2 39-kDa (198).
Mereka berhubungan dengan protein kaya leusin dan
membentuk kompleks stabil yang diangkut ke dinding kista
oleh ESV (127, 198). Studi transfeksi dilakukan dengan fusi GFP
termodifikasi dan gen CWP1 telah menunjukkan pentingnya
terminal N untuk mengarahkan protein ke ESV (127). Lokalisasi
ke dinding kista tergantung pada bagian tengah yang kaya
leusin. 110-bp59- wilayah mengapit mengontrol ekspresi
khusus encystation, sedangkan 39 flwilayah anking down-diatur
tingkat stabil RNA diproduksi. Agaknya, ada tumpang tindih
yang signifikan antara masing-masing protein 21 hingga 39 kDa
dan 26 hingga 44 kDa dan CWP1 dan CWP2, tetapi hubungan
pastinya belum ditentukan.
Fase akhir dari encystation terdiri dari penampilan pada
plasmalemma trophozoite situs untuk inisiasi perakitan
filamen dinding kista diikuti dengan perakitan bagian
berfilamen dari dinding kista. Serangkaian protein yang
lebih besar (66-, 78-, 92-, dan 103-kDa) diekspresikan
sebagai tambahan dari protein dengan massa molekul
rendah (281). Mungkin ini termasuk protein 75-, 88-, dan
102-kDa yang ditemukan di dinding kista (80), tetapi protein
yang lebih besar ini belum dikarakterisasi. Satu protein
khusus encystation, enc6, belum diurutkan secara
keseluruhan, tetapi ukuran transkripnya sebesar 4,4 kb akan
kompatibel dengan protein 102/103-kDa (278). Pada saat
encystation selesai, motilitas menghilang. Bagian luar
menjadi bulat dan berserabut, dan organisme tidak lagi
melekat pada permukaan. ESV menghilang,
Jalur enzimatik.Gula dinding kista utama,N
-acetylgalactosamine, diproduksi oleh jalur enzimatik yang
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
diinduksi selama encystation. Aktivitas masing-masing enzim
dalam jalur yang diusulkan telah didokumentasikan (203) (Gbr.
11), dan dua enzim telah dikloning dan dikarakterisasi. Pada
langkah pertama, fruktosa-6-fosfat dari jalur metabolisme
glukosa (Gbr. 1) diubah menjadi glukosamin-6-fosfat oleh
glukosamin-6-fosfat-isomerase (312, 334). Salah satu bentuk
enzim ini (gpi2, atau Gln6PI-A) diekspresikan secara konstitutif
pada tingkat rendah selama seluruh siklus hidup. Transkripsi
bentuk lain dari enzim ini (gpi1, atau Gln6PI-B) sangat
meningkat selama encystation (164, 312, 334). Gen yang diatur
ke atas ini memiliki dua transkrip dengan situs inisiasi yang
berbeda. Transkrip yang lebih pendek diekspresikan secara
konstitutif pada level rendah,9wilayah yang tidak diterjemahkan
(UTR) meningkat secara nyata selama encystation (334). Enzim
lain dalam jalur ini, UDP-N-acetylglucosamine
pyrophosphorylase (40, 41), diatur secara alosterik (41), dengan
peningkatan aktivitas enam kali lipat dari aktivasi oleh
glukosamin-6-fosfat.
Selama encystation, serapan oksigen dan glukosa menurun
secara substansial sehingga serapan glukosa tidak terdeteksi
dalam waktu 16 jam dari paparan kondisi encystation (264).
Namun, serapan aspartat tidak berubah, menghasilkan sugesti
462 ADAM
ARA. 11. Jalur enzimatik untuk sintesisN-acetylgalactosamine,
bagian karbohidrat utama dari dinding kista. Kegiatan untuk semua
enzim ini telah ditunjukkan dalam referensi (203) dalam campuran
trofozoit vegetatif dan encysting, dan jalur yang diusulkan disajikan.
Enzim diberi label sebagai berikut: 1, glukosamin-6-fosfat-isomerase
(164, 312, 334); 2, glukosamin-6-fosfatN-asetilase; 3,
fosfoasetilglukosamin mutase; 4, UDP-N-acetylglucosamine
pyrophosphorylase (40, 41); 5, UDP-N-asetilglukosamin 49
epimerase.
bahwa glukoneogenesis dapat dihasilkan dari impor asam
amino.
Excystation
Faktor pendorong dan penghambat.Pada inang mamalia,
excystation terjadi dengan paparan isi usus kecil proksimal setelah
melewati lingkungan asam lambung. Excystation pertama kali
diinduksi secara in vitro melalui pemaparan kista yang berasal dari
hewan dan manusia pada pH asam (27). Excystation optimal terjadi
setelah paparan pH 1,3 hingga 2,7. Selanjutnya, excystation dari
G.muriskista telah dilakukan pada pH 7,5 dalam buffer fosfat
dengan bikarbonat (101), menunjukkan bahwa pH asam tidak
diperlukan untuk eksistasi. Penghambatan excystation oleh 4-49-
diisotiosianatostilbena-2-29-asam disulfonat (DIDS) menyarankan
bahwa pengasaman vakuolar diperlukan. Studi selanjutnya dari
kista yang diproduksi secara in vitro menemukan pH optimal 4,0.
Excystation difasilitasi oleh protease pankreas dan dihambat oleh
trypsin inhibitor, menunjukkan pentingnya protease dalam
excystation. Selain protease eksternal, aG. lambliacysteine protease
(CP2) dari keluarga cathepsin B diperlukan untuk excystation (344).
Aktivitas protease sistein ditemukan di vakuola seperti endosom-
lisosom. Inhibitor protease sistein mencegah eksistasi tetapi tidak
mempengaruhi pertumbuhan atau replikasi trofozoit. Antagonis
kalmodulin tertentu (TFP dan W7, tetapi bukan W5) menghambat
eksistasi, menunjukkan bahwa kalmodulin mungkin terlibat dalam
eksistasi (24). Eksistasi dihambat oleh antibodi terhadap dinding
kista dan oleh aglutinin bibit gandum (WGA), mungkin dengan
reaksinya dengan satu atau lebih glikoprotein yang ditemukan di
dinding kista (218).
Morfologi excystation.Setelah terpapar dengan kondisi yang
mendorong eksistasi, proses eksistasi menjadi cepat,
CLIN. MICROBIOL. REV.
diselesaikan dalam waktu 10 menit untukG. lamblia(38) atau
untukG.muris(53, 54), dan tampaknya serupa untuk kedua
spesies. Setelah inisiasi eksistasi, satu atau dua pasang tonjolan
sitoplasma (flensa pencegah) tampak berkembang menjadi
flensa ventral (130). Ruang peritrofik dan sayap pencegah
membesar saat trofozoit yang muncul terpisah dari dinding
kista. Secara eksternal, munculnya flagela melalui pembukaan
dinding kista diikuti oleh seluruh trofozoit (38). Karyokinesis
terjadi selama encystation, sehingga trofozoit yang muncul
memiliki empat inti tetapi hanya delapan flagela dari satu
trofozoit. Trofozoit oval menjadi lebih bulat dan kemudian
mengalami sitokinesis dalam waktu 15 sampai 30 menit setelah
eksistasi, sehingga dua trofozoit terbentuk dari satu kista.
GENETIKA DAN BIOLOGI MOLEKULAR
Struktur Genom
Genom dariG. lambliamemiliki fitur yang diharapkan dari sel
eukariotik, termasuk kromosom linier yang diapit oleh telomer
yang mirip urutannya dengan eukariota lainnya (TAGGG) (8,
178). DNA kromosom eukariota membentuk kromatin dengan
berasosiasi dengan empat histon inti (H2a, H2b, H3, dan H4)
dan histon penghubung (H1) untuk membentuk nukleosom.
G. lambliamemiliki keempat histon inti, dan histon ini sangat
mirip dengan eukariota lainnya dan tidak memiliki kemiripan
khusus dengan protein mirip histon Archaea (354). Gen rDNA
kaya GC (31, 69), serta gen penyandi protein tertentu yang
diurutkan dalam beberapa pekerjaan molekuler awal padaG.
lamblia, menyarankan genom kaya GC (3). Namun, G1
Kandungan C dari contig yang telah dirakit sebagai bagian dari
proyek genom telah menghasilkan kandungan GC sebesar 49%,
tidak termasuk gen rDNA (210).
Pemisahan PFGE dari DNA kromosom telah digunakan untuk
menunjukkan hal ituG. lambliatrofozoit memiliki lima kelompok
pertalian kromosom dengan ukuran mulai dari sekitar 1,6
hingga 3,8 Mb (7, 177) (Gambar 12). Laporan awal pemisahan
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
PFGE dariG. lambliakromosom mengidentifikasi empat pita
kromosom bernoda etidium bromida dengan pewarnaan intens
untuk sebagian besar isolat (termasuk ISR dan WB) dan lima
pita untuk JH (7). Probe khusus untuk masing-masing dari lima
pita kromosom isolat JH digunakan untuk menunjukkan bahwa
yang terkecil dari empat pita isolat ISR dan WB mewakili dua
kromosom yang bermigrasi.
Pita yang terwarnai lebih redup dengan etidium bromida
ditunjukkan sebagai varian ukuran kromosom 1, pertama
dengan menggunakan beberapa probe khusus kromosom (7)
dan kemudian dengan pemetaan yang lebih detail dari berbagai
varian ukuran (4, 139). Studi ini menunjukkan bahwa kromosom
1 bervariasi dalam ukuran 1,1-1,9 Mb dan bahwa variasi ukuran
terjadi di kedua daerah subtelomerik (4, 139). Studi sebelumnya
telah menunjukkan bahwa pengulangan tandem unit rDNA
(DNA ribosom) berdekatan dengan wilayah pengulangan
telomerik (TAGGG) (8, 179, 180) dan sering terlibat dalam
penataan ulang subtelomerik. Pengulangan rDNA ditemukan
pada kromosom yang berbeda di antara isolat dari genotipe
yang sama (8). Pengulangan rDNA ditemukan pada salah satu
ujung kromosom 1 isolat ISR, dan sekitar 30% perbedaan
ukuran disebabkan oleh perbedaan jumlah salinan rDNA (4).
VOL. 14, 2001
ARA. 12. Pemisahan JH dan ISR oleh PFGE. Pemisahan PFGE dari
kromosom JH (genotipe A-2) menunjukkan lima pita yang berbeda,
sementara pemisahan PFGE dari kromosom ISR (genotipe A-1)
menunjukkan empat pita pewarnaan yang intens dan dua pita
pewarnaan yang lebih samar. Serangkaian probe spesifik kromosom
telah digunakan untuk mengidentifikasi lima kelompok pertalian
berbeda yang sesuai dengan lima pita isolat JH (7, 177). Pita yang
lebih redup dari isolat ISR mewakili varian ukuran kromosom 1,
seperti yang ditunjukkan oleh seperangkat probe spesifik
kromosom (7) serta pemetaan detail kromosom 1 (139). Salah satu
varian ukuran bermigrasi dengan kromosom 2; karenanya pita itu
diberi label 1b,2. Bagian dari variasi ukuran kromosom 1 adalah
karena variasi jumlah pengulangan rDNA telomerik (4),
tampaknya karena perbedaan DNA berulang di dekat telomere
lainnya. Studi-studi kromosom 1 ini telah mengidentifikasi
setidaknya tiga (4) atau empat (139) varian ukuran kromosom 1
dalam isolat kloning, yang mengarah ke saran bahwa trofozoit
adalah tetraploid setidaknya untuk kromosom 1. Meskipun
daerah pusat kromosomGiardiakromosom tampak cukup
konstan (Adam, tidak dipublikasikan), terdapat variabilitas
substansial pada telomere.
Studi-studi lain menunjukkan jumlah yang lebih besar dari pita-
pita yang diwarnai etidium bromida pada pemisahan PFGE (167,
328), tetapi ini mungkin menunjukkan variasi ukuran dari lima
kromosom. Satu laporan menyarankan ituGiardiaberisi delapan
kromosom dan kromosom berukuran sekitar 650 hingga 800 kb
(disebut kromosom 3) telah digandakan (329) kemungkinan besar
mewakili deskripsi varian ukuran kromosom 1.
Jumlah ukuran kromosom (3.8, 3.0, 2.3, 1.6, dan 1.6 Mb)
(7) menghasilkan perkiraan ukuran genom haploid sebesar
12.3 Mb, mirip dengan perkiraan ukuran 10.6 hingga 11.9
Mb yang diperoleh dengan analisis densitometrik dariBukan
saya fragmen dariG. lambliaDNA (93). Nilai-nilai sekitar 12
Mb ini sesuai dengan perkiraan yang diperoleh dari analisis
G. lambliadata genom (www.mbl.edu/Giardia). Pada
Desember 2000, jumlah panjang contig adalah sekitar 11
Mb, tidak termasuk rDNA repeat atauvspgen, yang belum
dirakit menjadi contigs. Alasan untuk
BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 463
nilai diskrepan 3.03107(251) dan 8.03107(31) diperoleh oleh C
0Analisis T tidak jelas.
Selain identifikasi varian ukuran kromosom 1, bukti lain untuk
poliploidi termasuk identifikasi beberapa alel yang mengandung
berulangvspgen. Itu vspA6gen terletak pada kromosom 4, dan
setidaknya tiga alel berbeda telah diidentifikasi (356); ketiga alel ini
bervariasi dalam jumlah salinan pengulangan 195-bp tetapi memiliki
daerah mengapit yang identik dan memetakan ke lokasi kromosom
tunggal, menunjukkan adanya setidaknya tiga salinan kromosom 4.
Demikian pula, tiga dan empat alel darivspC5gen telah diidentifikasi
dalam garis yang berbeda dari isolat WB (Gbr. 13) (355),
menunjukkan ploidi minimal 3 atau 4 untuk kromosom 5. Dengan
demikian, data kualitatif menunjukkan ploidi minimal 4 (atau
aneuploidi). Sebaliknya, beberapa data kuantitatif telah
menyarankan
ARA. 13. Southern blot menunjukkan heterozigositas alelik dari vspC5
gen serta anggota keluarga gen yang terkait denganvspC5. Direproduksi
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
dari referensi 355 dengan izin Elsevier Science. DNA genomik dari WBA6
(mengekspresikan VSPA6), WB1269 (varian antigenik yang berasal dari
WBA6 dan mengekspresikan VSP1269 [CRP72]), dan WBC5 (varian
antigenik yang berasal dari WB1269 dan mengekspresikan VSPC5)
dicerna denganBamHI, dihapus, dan diperiksa. ( A ) Hasil pencucian
dengan keketatan sedang setelah hibridisasi dengan BS176, sebuah
probe yang memanjang dari293 sampai183 darivspC5. (B) Pencucian
berkekuatan tinggi. (C) Hasil setelah hibridisasi denganvspC5
pengulangan 105-bp. Pita berlabel C5.1 hingga C5.4 menunjukkan empat
alel darivspC5gen. Kosmid diklon untuk masing-masing dari empat alel
dan semuanya identik di wilayah yang mengapit wilayah pengkodean.
Kosmid ini dipetakan ke satu lokasi kromosom dengan menggunakan
PFGE dan enzim restriksi pemotongan langka, menunjukkan bahwa gen
ini benar-benar alelik di alam. Yang terbesar dari empat pita mungkin
mewakili alel yang diekspresikan sebagaimana dinilai dari ukuran
transkrip pada Northern blot (358). Perhatikan bahwa alel terkecil dari
keempat alel dihapus dari genom WBC5. Mekanisme penghapusan ini
belum ditentukan. Pita berlabel S1 hingga S4 mewakili empat berbeda
vspgen (vspC5-S1kevspC5-S4) yang mirip denganvspC5dalam 59wilayah.
Kosmid untuk masing-masing gen ini dikloning; masing-masing berbeda
di daerah mengapit, dan masing-masing dipetakan ke lokasi kromosom
yang berbeda oleh PFGE. Urutan darivspC5-S1DanvspC5-S2adalah 0,96%
identik denganvspC5di wilayah probe 176-bp. Hilangnya sivspC5-S3pita
setelah pencucian dengan kekencangan tinggi (B) menunjukkan bahwa
pita tersebut kurang mirip denganvspC5. Band untukvspC5-S1ke vspC5-
S4tidak terlihat dengan probe berulang (C), konsisten dengan kurangnya
pengulangan 105-bp pada gen ini.
464 ADAM
ploidi yang lebih tinggi. Data semikuantitatif berdasarkan pemindaian
densitometri pemisahan PFGE menyarankan total 30 hingga 50 molekul
DNA kromosom (6 hingga 10 salinan dari setiap kromosom) (7). Begitu
pula dengan total kandungan DNA sebesar 1,343108
bp (31, 84) dibagi dengan kompleksitas genom 1,23107bp
menghasilkan perkiraan ploidi 10 hingga 12. Klarifikasi yang
mungkin dari ploidi dariG. lambliatelah disediakan oleh analisis
penyortir sel yang diaktifkan fluoresensi dari trofozoit fase
stasioner dan pertumbuhan vegetatif serta kista, menggunakan
E.coli DNA kromosom sebagai kontrol (25). Hasil analisis
penyortir sel yang diaktifkan fluoresensi menunjukkan bahwa
trofozoit bergantian antara 4Ndan 8N(Nadalah genom haploid),
dengan sebagian besar trofozoit stasioner di 4Nnegara. Hasil ini
menunjukkan kemungkinan bahwa masing-masing trofozoit
mengandung dua inti diploid dan replikasi DNA terjadi segera
setelah pembelahan inti sehingga sebagian besar trofozoit
berada di G2fase replikasi DNA. Jika interpretasi ini benar,
trofozoit memiliki ploidi efektif 4, tetapi pengukuran kuantitatif
trofozoit stasioner akan menghasilkan ploidi 8.
Untuk setiap organisme dengan ploidi lebih besar dari 1, tingkat
heterozigositas alelik tertentu diharapkan. Tingkat heterozigositas
umumnya rendah pada organisme seksual karena rekombinasi
meiosis tetapi dapat menjadi sangat tinggi pada organisme
aseksual, seperti yang telah ditunjukkan pada rotifera (347). Sejak
Giardiaspp. diasumsikan sebagai organisme aseksual kuno, orang
mungkin mengharapkan tingkat heterozigositas alelik yang sangat
tinggi. Namun, tingkat heterozigositas alelik diG. lambliasebenarnya
cukup rendah. Meskipun heterozigositas nomor salinan berulang
untukvspgen telah ditunjukkan (356, 358), serta delapan perbedaan
nukleotida antara dua alel yang berbeda darivspA6gen, tingkat
heterozigositas diidentifikasi dalam 12 kb urutan isomerase
triosephosphate (tim) gen dari beberapa isolat kurang dari 0,02%
(17). Tingkat heterozigositas alelik yang diidentifikasi dalam proyek
genom juga sangat rendah (A. McArthur dan G. Olson, komunikasi
pribadi). Alasan tingkat heterozigositas yang rendah ini belum
ditentukan. Alasan potensial bisa berupa seks yang tidak dikenali
Giardiaatau hilangnya nukleus secara intermiten.
Sistem Transfeksi
Pengembangan sistem transfeksi transien dan stabil telah
memberikan kontribusi besar bagi pemahaman kita tentang
genetikaG. lamblia. Deskripsi awal dari sistem transfeksi terdiri
dari ekspresi transien luciferase diapit di 59diakhiri oleh daerah
pendek gen GDH dan pada 39diakhiri dengan sinyal
poliadenilasi diduga (361). Dalam sistem transfeksi ini dan
selanjutnya, DNA diperkenalkan melalui elektroporasi.
Selanjutnya, transfeksi episomal yang stabil dilakukan
menggunakan resistensi puromisinpakgen (305) atau resistensi
neomisinneogen (318) sebagai penanda yang dapat dipilih.
Rupanya, plasmid bakteri yang digunakan sebagai kerangka
vektor transfeksi mengandung urutan yang berfungsi sebagai
asal replikasi diG. lamblia.
Perbedaan yang menarik antara isolat WB (genotipe
A) dan isolat GS (genotipe B) dalam disposisi DNA yang ditransfeksi
diidentifikasi (305). DNA diperkenalkan sebagai plasmid superkoil ke
dalam WB yang direplikasi sebagai vektor episom, sementara vektor
linier diintegrasikan ke dalam genom WB dengan ho-
CLIN. MICROBIOL. REV.
rekombinasi mologous (305). Sebaliknya, transfeksi GS dengan
DNA vektor linier atau sirkular menghasilkan integrasi homolog,
dan replikasi vektor episomal yang stabil tidak terjadi.
Pengenalan DNA secara homolog ke dalam genom tidak
menghasilkan KO dengan penghapusan total alel tipe liar,
mungkin karena sifat poliploid dari genom. Selain ekspresi
penanda resistensi obat, GFP termodifikasi diekspresikan (305)
dan kemudian digunakan untuk mempelajari transpor protein
dalam trofozoit (76, 127). Tingkat ekspresi luciferase yang tinggi
telah diperoleh dengan menggunakanG. lambliavirus sebagai
vektor untuk pengenalan DNA asing (364, 365). Penggunaan
vektor virus menghasilkan tingkat ekspresi luciferase yang
sangat tinggi selama setidaknya 30 hari tanpa pemilihan obat.
Transkripsi dan Terjemahan
Transkripsi diG. lambliajelas bersifat eukariotik; meskipun
demikian, ia memiliki sejumlah fitur yang lebih merupakan
karakteristik prokariota. Seperti pada semua eukariota, transkrip
diproduksi di dalam nukleus dan diangkut ke sitoplasma untuk
diterjemahkan. Poliadenilasi transkrip khas untuk eukariota, tetapi
pendek 59UTR dan kurangnya intron secara umum lebih merupakan
karakteristik prokariota (walaupun intron mungkin relatif jarang
pada eukariota uniseluler). Juga, berbeda dengan eukariota lainnya,
kebanyakanG. lambliatranskrip tampaknya tidak dibatasi pada 5
mereka9berakhir.
Analisis transkrip dariA-DanB-gen tubulin mengungkapkan
bahwa 59UTR hanya memiliki panjang 6 nukleotida untuk gen-
gen ini (160). Analisis selanjutnya dari yang lainG. lamblia
transkrip dilakukan dengan analisis ekstensi primer,
perlindungan nuclease S1, dan 59amplifikasi cepat ujung cDNA
telah mengungkapkan bahwa transkrip lain juga pendek 59UTR,
mulai dari ukuran 0 hingga 14 nukleotida (5). Satu pengecualian
hingga saat ini adalah gen glucosamine-6-phosphate isomerase
B, yang memiliki dua transkrip, sebuah transkrip konstitutif
dengan 59 UTR 3 sampai 4 nukleotida dan transkrip dengan
146-nukleotida 59UTR yang diinduksi selama encystation (164).
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
Pendek 59UTR menyarankan kemungkinan ituG. lamblia
promotor mungkin terletak di dekat awal bingkai bacaan
terbuka. Kemungkinan ini didukung oleh pengamatan terhadap
sekumpulan motif yang sangat terkonservasi pada tahun 59-
lantaianking daerah dari sejumlah gen sitoskeletal (136). Urutan
konsensus AATTAAAA diidentifikasi di lokasi inisiasi transkripsi
dengan situs inisiasi aktual yang berlokasi di TA (atau CA).
Wilayah kedua 20 hingga 35 nukleotida di hulu dari situs inisiasi
transkripsi, CAAAAA(A/T)(T/C)AGA(G /T)TC(C/T)GAA diusulkan
sebagai wilayah promotor, dan urutan konsensus ketiga ,
CAATTT, ditemukan di240 hingga270. Ketika wilayah hulu diuji
dalam uji transfeksi, urutan 44-bp dari gen GDH memberikan
aktivitas transkripsi maksimal (305), mengkonfirmasikan bahwa
promotor GDH pendek dan terletak di dekat wilayah
pengkodean. Penghapusan dan analisis mutasi wilayah
promotor GDH mengkonfirmasi pentingnya wilayah kaya AT di
lokasi inisiasi serta wilayah CAAAT 34 bp di hulu (360).
Pengikatan khusus dari daerah hulu 51-bp langsung ke protein
ekstrak nuklir 68 kDa ditunjukkan oleh analisis pergeseran pita
dan dengan ikatan silang UV (360). Sebuah penghapusan dan
analisis mutasi dariberlaripromotor menunjukkan bahwa
aktivitas promotor maksimal
VOL. 14, 2001
hadir di wilayah dari -51 hingga -2 dan wilayah yang lebih jauh ke
hulu tidak berkontribusi pada fungsi promotor (319). Komponen
terpenting untuk aktivitas promotor adalah wilayah -51 hingga -20;
porsi yang lebih kecil dari wilayah itu memberikan aktivitas
promotor yang berkurang.
Selain promotor di hulu kodon inisiasi, daerah hilir 8
hingga 13 nukleotida telah disarankan sebagai potensial
E.coli-seperti urutan Shine-Dalgarno. Identifikasi urutan 15
basa dalamG. lambliaSS rRNA (GUCCGCGCCCCCGAG)
menyebabkan pencarian database untuk urutan
komplementer di 59daerah urutan pengkode protein.
Sebagian besar dari 59 sekuens yang dievaluasi memiliki
sekuens komplementer dalam 300 bp dari kodon inisiasi.
Konsensus (misalnya, CCGGGGGGGGCUU) secara nyata
meningkatkan efisiensi translasi (hingga 5.000 kali lipat)
tanpa secara signifikan mempengaruhi laju transkripsi
ketika dimasukkan dalam uji transfeksi (363).
Transkrip telah dianalisis untuk menentukan apakah transkrip
tersebut memiliki 7-metilguanosin atau tutup lainnya pada 59
berakhir. Total polyadenylated RNA dianalisis untuk menentukan
apakah 59ujungnya rentan terhadap T4 RNA ligase (363). Mereka
tahan terhadap 59fosforilasi kecuali diobati dengan calf intestinal
alkaline phosphatase untuk menghilangkan 59fosfat. Hasil ini
menunjukkan bahwa RNA terfosforilasi tetapi tidak tertutup.
Pengobatan dengan enzim pirofosfatase asam tembakau dekapping
tidak meningkatkan fosforilasi, juga menunjukkan kekurangan 59
capping. Hasil ini menunjukkan bahwa sebagian besar RNA
poliadenilasi tidak memiliki 79penutup metilguanosin. Namun,
karena penelitian dilakukan dengan menggunakan mRNA total
daripada spesifik transkrip, masih mungkin bahwa transkrip individu
dapat dibatasi. Faktanya, untuk transkrip gen glucosamine-6-
phosphate isomerase B yang diproses secara berbeda, transkrip
konstitutif dengan 5 pendek9UTR tidak dibatasi sedangkan transkrip
dengan yang lebih panjang (146-nukleotida) 59 UTR yang
diekspresikan selama encystation memang memiliki penutup,
seperti yang ditunjukkan oleh ligasi RNA setelah pengobatan
dengan pirofosfatase asam tembakau (164). Apakah ini adalah 7-
methylguanosine atau jenis tutup lainnya tidak ditentukan.
Transkrip relatif pendek39UTR dengan ekor poli(A)
pendek biasanya dimulai sekitar 10 hingga 30 nukleotida di
luar kodon stop. Urutan, AGTPuAAPy, mendahului ekor
poli(A) sekitar 10 nukleotida dan telah diusulkan sebagai
sinyal poliadenilasi (3, 273).
Molekul RNA nuklir kecil terlibat dalam penyambungan pra-
mRNA nuklir (snRNA U1, U2, U4, U5, dan U6) dan pra-rRNA (sno-
RNA U3, U8, U14, snR10, dan snR30) untuk menghasilkan yang
matang RNA (256). Banyak dari molekul ini dari eukariota lain
memiliki tutup trimethylguanosine di 59akhir. Sejumlah
kandidat snRNA dariG. lambliayang imunopresipitasi oleh anti-
trimethylguanosine antiserum; topi dikonfirmasi oleh
kerentanan reaktivitas antibodi terhadap efek dekap dari
pirofosfatase asam tembakau. Peran dan identitas pasti dari
calon snRNA belum ditentukan. Ini akan menjadi perhatian
khusus untuk menentukan apakah penyambungan mRNA
terjadi karena intron belum teridentifikasi dalamG. lamblia
karakteristik gen hingga saat ini.
Karakterisasi awal gen rRNA dan rDNA mengungkapkan
bahwa molekul rRNA jauh lebih kecil daripada molekul
eukariotik 18S (SS rRNA) atau 28S atau rRNA subunit besar
(LS rRNA) eukariotik tipikal dan faktanya bahkan sedikit.
BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 465
lebih kecil dari 16S dan 23SE.colimolekul rRNA (31, 69).
Pengulangan rDNA kecil, tetapi memiliki organisasi dan
urutan yang konsisten dengan eukariota (lihat “Giardiadan
diplomonad lainnya sebagai eukariota bercabang awal” di
atas). Selain itu, komponen alat translasi lainnya, termasuk
faktor elongasi 1A,faktor perpanjangan 2A,eRF1, eRF3,
RPB1, dan RNA polimerase III (Tabel 3), jelas merupakan
eukariotik.
Giardia lambliaVirus
Sebuah virus RNA beruntai ganda diidentifikasi diG. lamblia
trofozoit mengikuti pengamatan dari 6,2-kb doublestranded RNA
mengkontaminasi preparat asam nukleat (64, 337). Virus ini tidak
berselubung dan ikosahedral, dengan diameter 33 nm, dan
menginfeksi nukleus dengan sekitar 200 eksemplar per nukleus
(337).G. lambliavirus (GLV) memiliki protein kapsid mayor 100-kDa
yang bergantung pada protease sistein untuk pembelahan menjadi
protein matang (362). Bingkai pembacaan terbuka kedua
mengkodekan polimerase RNA yang bergantung pada RNA 190-kDa
(338, 349). Sebagian besar isolat axenic mengandung atau rentan
terhadap infeksi GLV (termasuk isolat dari genotipe A dan B),
sementara sebagian kecil isolat sangat resisten terhadap infeksi
(225). Infeksi GLV terjadi melalui endositosis (323), dan kerentanan
terhadap infeksi bergantung pada reseptor spesifik yang ditemukan
pada permukaan membran sel (302). Virus kedua juga telah
diidentifikasi; ia juga memiliki genom RNA untai ganda 6,2 kb tetapi
mengkodekan protein kapsid yang sedikit lebih kecil (95 kDa), yang
berbeda secara signifikan dari protein kapsid GLV 100 kDa (322).
ANTIGEN PERMUKAAN DAN VARIASI ANTIGENIK
Kejadian dan Signifikansi Biologis
variasi antigenik
G. lambliatrofozoit menjalani variasi antigenik dari
keluarga antigen permukaan kaya sistein imunodominan in
vitro dan in vivo (6, 12, 243). Studi awal antigen permukaan
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
G. lambliamenunjukkan perbedaan di antara strain-strain
dengan pemeriksaan imunoelektroforesis silang dan uji
imunosorben terkait-enzim (306) dan perbedaan yang
mencolok dalam massa molekul “produk-produk sekresi-
ekskretoris” dari iodinasi-permukaan yang berbeda.G.
lambliaisolat (247, 250). Antigen permukaan bervariasi
dalam jumlah dan ukuran dari sekitar 50 sampai 200 kDa
dalam studi dari 19 isolat (250). Antibodi monoklonal (MAb
6E7) untuk antigen permukaan 170-kDa (awalnya disebut
CRP170 tetapi sekarang disebut VSPA6) dari isolat WB
bersifat sitotoksik untuk trofozoit WB tetapi tidak untuk
isolat yang mengekspresikan antigen permukaan lainnya
(242). Trofozoit WB diklon ganda dengan membatasi
pengenceran dan diinkubasi dengan MAb 6E7; beberapa
organisme selamat dan benar-benar resisten terhadap efek
sitotoksik MAb 6E7 (243). Salah satu garis organisme kloning
ini (WB1269) memiliki antigen berlabel permukaan 68-kDa
(awalnya disebut CRP68 tetapi sekarang disebut VSP1269),
sementara yang lain (WB1267) memiliki antigen permukaan
64-kDa (VSP1267). Antibodi monoklonal (MAb 5C1) yang
reaktif dengan antigen permukaan WB1267 bersifat
sitotoksik untuk trofozoit WB1267.
466 ADAM
rentang ukuran. Data selanjutnya telah mengkonfirmasi bahwa masing-
masing organisme mengekspresikan hanya satu VSP pada satu waktu
(245); deteksi beberapa pita berlabel permukaan di beberapa penelitian
dihasilkan dari subpopulasi trofozoit yang mengekspresikan beberapa
tipe VSP yang berbeda. Dalam budaya axenic, variasi terjadi kira-kira
sekali setiap 6 sampai 12 generasi dengan frekuensi 1023
ke 1024(244).
Variasi antigenik kemudian dikonfirmasi pada model hewan
(12, 118, 119) dan pada sukarelawan manusia yang terinfeksi
(248). Trofozoit WB kloning yang mengekspresikan VSPA6
diinokulasi ke gerbil, dan trofozoit yang dikumpulkan dari usus
mereka 7 hari kemudian menunjukkan populasi trofozoit yang
mengekspresikan banyak VSP dengan ukuran mulai dari 50
hingga 170 kDa (12). Trofozoit yang dikumpulkan 28 hari setelah
infeksi serupa dengan yang dikumpulkan pada 7 hari.
Kurangnya perubahan nyata dari 7 menjadi 28 hari membantah
peran kekebalan yang didapat dalam memilih varian antigenik.
Namun, hasilnya agak berbeda pada model tikusG. lamblia
infeksi.G. lambliatrofozoit pada tikus telanjang athymic dan
heterozigotnu/1tikus mengubah tipe VSP bertepatan dengan
pengembangan anti humoralvsprespon antibodi (119).
Sebaliknya, tikus scid tidak mengembangkan respons antibodi
dan trofozoit tidak mengalami variasi antigenik. Jadi, dalam
model tikus, respons antibodi terhadap VSP mungkin
merupakan kekuatan selektif untuk varian antigenik.
Ketika sukarelawan manusia diinokulasi dengan trofozoit GS
kloning dengan intubasi duodenum, empat dari empat menjadi
terinfeksi trofozoit yang mengekspresikan VSPH7 (72 kDa). Hanya 1
dari 13 yang terinfeksi organisme yang mengekspresikan VSPB6
(200 kDa), menunjukkan bahwa kemampuan untuk bertahan hidup
di usus manusia lebih besar dengan satu VSP dibandingkan dengan
yang lain. Apakah ini karena seleksi terhadap satu VSP atau seleksi
positif untuk yang lain belum ditentukan. Pola perubahan
selanjutnya selama 22 hari setelah infeksi menunjukkan hilangnya
VSPH7 secara bertahap diikuti dengan munculnya VSP lain dengan
imunoreaktivitas berbeda. Hilangnya VSPH7 disertai dengan
perkembangan antibodi serum menjadi VSPH7, menunjukkan
kemungkinan bahwa respon imun menyebabkan variasi antigenik.
Alasan biologis alternatif atau tambahan yang mungkin untuk
variasi antigenik mungkin adalah adaptasi terhadap lingkungan
usus yang berbeda. Beberapa bukti untuk kemungkinan ini
disediakan oleh perbedaan kerentanan protease untuk jenis
antigen VSP yang berbeda (252). Trypsin dan chymotrypsin
beracun bagi trofozoit WB yang mengekspresikan VSPA6
(reaktif dengan MAb 6E7). Beberapa organisme bertahan
setelah terpapar protease ini, dan ketika mereka kemudian
tumbuh di hadapan trypsin dan chymotrypsin, mereka tidak lagi
rentan terhadap efek sitotoksik dan menyatakan VSP alternatif
yang tidak reaktif dengan MAb 6E7.
Variasi antigenik juga telah didokumentasikan selama siklus
encystation dan excystation (217, 320). In vitro encystation
diikuti oleh eksistasi trofozoit yang mengekspresikan VSP
TSA417 mengakibatkan hilangnya TSA417 dari membran
plasma diikuti dengan kemunculannya di vakuola perifer mirip
lisosom (211, 320). Selama excystation, transkrip TSA417
digantikan oleh berbagai lainnyavsptranskrip. Ini terjadi terlalu
cepat untuk menjadi hasil seleksi varian antigenik yang selamat
dari eksistasi dan mungkin mewakili pergeseran antigenik yang
diinduksi. Variasi antigenik ini selama eks-
CLIN. MICROBIOL. REV.
cystation dapat meningkatkan kelangsungan hidup dengan menghindari
respon imun usus atau dengan adaptasi terhadap faktor usus penting
lainnya.
Dengan demikian, dua hipotesis utama mengenai tujuan variasi
antigenik adalah (i) penghindaran pertahanan kekebalan inang dan
(ii) memungkinkan organisme untuk bertahan hidup di lingkungan
usus yang berbeda. Harus ditekankan bahwa hipotesis ini tidak
saling eksklusif. Pemahaman yang lebih baik tentang alasan biologis
variasi antigenik akan difasilitasi jika peran VSP diketahui. Ini juga
akan informatif untuk mengetahui apakah diplomonad yang hidup
bebas sepertiHexamitamemiliki protein yang homolog dengan VSP
dan jika mereka mengalami variasi antigenik.
Struktur dan Biokimia VSP
Studi biokimia awal dari VSP (kemudian disebut produk ES)
menunjukkan bahwa mereka rentan terhadap protease. Mereka
tidak mengikat serangkaian lektin, menunjukkan bahwa mereka
tidak terglikosilasi (247). Sebagian gen untuk salah satu antigen
permukaan ini kemudian dikloning dari pustaka ekspresi
menggunakan MAb 6E7. Analisis urutan mengungkapkan
protein kaya sistein (12%) dengan motif CXXC yang sering (6).
Urutan selanjutnya dari sejumlahvspgen telah menunjukkan
sejumlah karakteristik yang sama untuk semuavspgen. Mereka
semua kaya sistein (12%), dan sebagian besar sistein hadir
dalam motif CXXC. Ketika trofozoit dilabeli secara metabolik
dengan sistein radiolabeled, sebagian besar label dimasukkan
ke dalam VSP (6, 11). Telah dikemukakan bahwa sistein ini hadir
dalam bentuk ikatan disulfida, karena gugus tiol bebas belum
terdeteksi pada VSP yang dimurnikan (14, 266). Namun,
keberadaan gugus tiol pada permukaan trofozoit menunjukkan
bahwa sistein VSP mungkin tidak semuanya berikatan disulfida
(116). Apakah tingkat ikatan disulfida berubah secara in vivo
dengan tingkat oksigenasi yang berbeda dari lingkungan
sekitar belum ditentukan.
Setelah sintesis, VSP diangkut melalui UGD
(211) ke membran, di mana mereka melapisi membran
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
secara difus (112, 275). Jumlah VSP yang lebih kecil juga
dapat dideteksi dalam vakuola perifer mirip lisosom,
menunjukkan kemungkinan bahwa vakuola ini terlibat
dalam daur ulang VSP (211). VSP memiliki sinyal peptida
sekitar 14 sampai 17-asam amino yang mungkin mewakili
peptida sinyal untuk pengangkutannya melalui UGD.
Peptida sinyal dibelah, 14 asam amino dari VSPH7 isolat GS
(201) dan 17 asam amino dari TSA417 isolat WB (14).
38 asam amino C-terminal VSP 0,90% dilestarikan pada tingkat
asam amino dan nukleotida. Setiap VSP yang dilaporkan sampai
saat ini diakhiri dengan motif asam amino CRGKA pada organisme
genotipe A dan B. Terminal C yang dikonservasi dapat mewakili
domain penahan membran. Bukti untuk proposal ini telah
dilaporkan dalam pekerjaan yang menunjukkan perbedaan dalam
termini C dari VSP yang terikat membran dan yang disekresikan
(267). Fragmen 3.500-kDa dibelah dari terminal C dari VSP terkait
membran sebelum sekresi. Situs pembelahan yang disarankan
adalah antara K dan S dari motif NKSGLS yang sangat terkonservasi
(267), yang terdiri dari asam amino 33 hingga 38 dari terminal C
(235). Motif NKSGLS ini umumnya dilestarikan pada organisme
genotipe A (88) tetapi tidak ditemukan padavspH7gen dari GS,
organisme genotipe B (253).
VOL. 14, 2001 BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 467

TABEL 5.vspkeluarga gen genotipe A-1G. lamblia

Kromosom
TerkaitvspgenA Dibandingkan dengan prototipe Komentar Referensi)
lokasi

vspA6 4 Sekitar 21 salinan pengulangan 195-bp 11 9

vspA6-S1 . Identitas urutan 90% di seluruh gen 4 salinan pengulangan 195-bp yang sama 237, 357

vspA6-S2 75–91% identitas 5 Empat salinan dari pengulangan 201-bp 75% 357
identik dengan pengulangan 195-bp

vsp1267 Dua salinan konvergen identik 3 kb terpisah 26 235

vspC5 5 salinan pengulangan 105-bp 355, 358
vspC5-S1 . Identitas 96% di 59wilayah diikuti oleh 4 Salinan sebagian dari satu pengulangan 355
divergensi tiba-tiba
vspC5-S2 . Identitas 96% di 59wilayah diikuti oleh 5 Salinan sebagian dari satu pengulangan 355
divergensi tiba-tiba
vspC5-S3 Hibridisasi silang ke 59wilayah 5 355
vspC5-S4 Cross-hibridisasi ke 59wilayah 5 355

TSA417 (vsp417-1) 112

vsp417-2(sdt 11) Wilayah dengan identitas 55–90% lebih banyak 91
gen
vsp417-4 57–58% identitas kevsp417-1Danvsp417-2 88

CRP136 1/22 Mungkin telomerik di lokasi; 23 eksemplar a 51, 330

ulangi 120-bp
CRP65 86–96% identitas di wilayah yang tidak berulang 1/22 Empat salinan pengulangan 228-bp 52
APrototipevspgen dicetak tebal dan terkaitvspgen diindentasi.
BDilaporkan berada pada kromosom 3, tapi mungkin pada kromosom 1 atau 2; lihat bagian tentang struktur genom.

Ituvsp39UTR memiliki sinyal poliadenilasi diduga umum
untuk semuaG. lambliastrain, AGTPuAAPy (3, 273), segera
didahului oleh urutan ACTPyAGPuT, yang terkadang dimulai
dalam kodon terminasi (88, 320) dan (YM Yang dan R. Adam,
pengamatan tidak dipublikasikan).
Berdasarkan urutan divspgen serupa dengan yang ditunjukkan
dalam pengikatan seng oleh protein nuklir, telah diusulkan bahwa
gen VSP dapat mengkodekan protein pengikat seng. Kemampuan
untuk mengikat seng diperlihatkan untuk VSPH7 dan VSP lain tetapi
juga ditemukan di wilayah VSP yang tidak mengandung motif
“pengikatan seng” (254). Selain seng, VSPH7 mampu mengikat
logam lain termasuk besi. Laboratorium lain, menggunakan VSP4A1
DanvspA6-S1(357) serta CRP136 dan CRP65 (52). Contoh-contoh
ini menunjukkan bahwavsprepertoar gen telah diperluas
dengan duplikasi gen diikuti oleh divergensi. Urutan untuk
salah satunyavspgen (vspA6-S1atauvspG3M) dari dua isolat
yang terpisah secara geografis (WB dari Afganistan dan G3M
dari Peru) identik pada wilayah pembanding (237, 357),
menunjukkan bahwa perbedaan ini bukanlah proses yang
sangat cepat. Sejumlahvspgen yang terkait dengan TSA417 (
vsp417) telah diidentifikasi dari isolat genotipe A-1 dan A-2.
Perbandingan telah menunjukkan bahwa perbedaan antara
genotipe lebih kecil dari perbedaan antara anggota inivsp
keluarga gen, menunjukkan bahwa perbedaan antara berbagai

Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.

(CRISP90) dari isolat genotipe A, menunjukkan kemampuan VSP
tereduksi tetapi tidak teroksidasi untuk mengikat seng. Namun,
tingkat pengikatan secara substansial lebih rendah dari seng
equimolar: jumlah protein dan dianggap tidak signifikan secara
biologis (266).
Semua VPS yang dilaporkan memiliki potensi situs
glikosilasi terkait-N (201); analisis biokimia VSP4A1
mendemonstrasikan GlcNAc terkait-O daripada glikosilasi
terkait-N yang lebih umum ditemukan (268). VSP4A1 juga
palmitoylasi di bagian berlabuh membran dari wilayah C-
terminal (267, 268). Pekerjaan selanjutnya telah memperluas
temuan glikosilasi dan palmitoylasi ke VSP lainnya, termasuk
VSPA6 dan VSPH7 (131).
Organisasi Genomik darivspGen dan Potensi
Mekanisme Variasi Antigen
Selain tanda 3 mereka9kesamaan,vspgen menunjukkan
tingkat identitas yang berbeda di wilayah lain. Dalam
beberapa kasus, ada tingkat kesamaan yang tinggi di
seluruh gen. Misalnya, ada dua salinan konvergen yang
identikvsp1267gen terpisah sekitar 3 kb (235) dan ada lebih
dari 90% identitas di daerah yang tidak berulangvspA6
anggotavsp417keluarga gen terjadi sebelum divergensi antara
genotipe A-1 dan A-2. Ituvspgen dari genotipe B isolat GS juga
muncul dalam keluarga (246, 253) tetapi menunjukkan
kesamaan denganvsp gen genotipe A hanya pada terminal C 38-
asam amino-asam yang dilestarikan dan pada motif CXXC.
Ada juga contoh identitas dekat yang diikuti oleh divergensi
mendadak, menunjukkan bahwa dalam beberapa kasus,vsp
repertoar telah diperluas dengan rekombinasi antaravspgen.
Misalnya,vspC5menunjukkan identitas yang dekat dengan
vspC5-S2dari kira-kira2150 hingga194 dan kevspC5-S1dari2150
hingga 1130 (355). Pemahaman yang lebih lengkap tentangvsp
repertoar dan organisasi gen akan tersedia ketika urutan
diperoleh sebagai bagian dariGiardiaproyek genom telah
dirakit.
Ituvspgen hadir pada sebagian besar jika tidak semua kromosom
dan tersebar secara wajar di seluruh genom. Tampaknya memang
ada beberapa pengelompokan gen seperti yang ditunjukkan oleh
keterkaitan beberapa genvspgen (misalnya,vsp1267) (Tabel 5) dan
dengan kedekatanvspgen pada beberapa klon kosmid (Yang dan
Adam, tidak dipublikasikan).
468 ADAM
Variasi antigenik pada trypanosomes Afrika sering dikaitkan
dengan penataan ulang genom, seperti transposisi duplikasi ke
lokasi telomerik (32, 290). Oleh karena itu, menarik untuk
diketahui apakahvspgen bersifat telomer dan apakah ada
penataan ulang genom yang terkait dengan variasi antigenik.
Data saat ini menunjukkan bahwa sebagian besarvsp gen tidak
terkait telomer (355–357). ItuvspA6gen tidak ditemukan di 150-
dan 240-kbBukanI fragmen telomer kromosom 4 (356), danvsp
wilayah yang dilestarikan tidak berhibridisasi dengan wilayah ini
(Adam, tidak diterbitkan). Penataan ulang genom tidak secara
langsung terkait dengan variasi antigenikvspA6(356) atauvspC5(
358).
Giardiatrofozoit memiliki ploidi minimal 4, jadi setidaknya ada
empat alel dari setiap gen. Karena definisi alel yang biasa tidak
dapat digunakan dalam organisme yang diduga aseksual, gen
telah dianggap alel ketika mereka memetakan ke lokasi
genomik yang sama. Untuk sebagian besar gen, alel identik
atau hampir identik satu sama lain, terkadang mengandung
heterozigositas pada satu atau dua lokasi (17). Namun, dalam
kasus yang mengandung pengulanganvspgen, sepertivspA6
DanvspC5, alel yang berbeda dapat dibedakan dengan nomor
salinan berulang yang berbeda (356, 358) (Gbr. 13). Tiga alel
berbeda dari vspA6gen telah didokumentasikan yang berbeda
dalam jumlah salinan (yaitu, 8, 9, atau 23) dari pengulangan
195-bp (356). Selain perbedaan jumlah salinan berulang, alel
dengan jumlah salinan terbesar berisi 8 substitusi nukleotida
dalam wilayah pengkodean. Beberapa substitusi ini mengubah
komposisi asam amino, tetapi tidak mengubah kerangka
pembacaan. Daerah mengapit dari ketiga alel itu identik.
Terlepas dari bingkai pembacaan terbuka dan daerah mengapit
yang identik, transkrip kondisi-mapan diekspresikan hanya dari alel
dengan nomor salinan berulang terbesar seperti yang
didokumentasikan oleh ukuran pita yang benar pada blot Utara
selain pengurutan RNA langsung, yang mengidentifikasi nukleotida
substitusi khusus untuk alel dengan nomor salinan berulang
terbesar. Dengan demikian, transkrip dapat dideteksi hanya dari
salah satu alel meskipun tidak ada perubahan urutan yang jelas
yang dapat menjelaskan perbedaan ekspresi.
ItuvspC5gen adalah gen lain yang mengandung pengulangan,
mengandung 17 hingga 26 salinan pengulangan 105-bp. Dalam hal
ini, genom WBA6 mengandung empat alel berbeda darivspC5gen
(17, 20, 21, atau 26 pengulangan) sedangkan genom WBC5 (berasal
dari WBA6) hanya mengandung tiga alel yang berbeda (26, 21, atau
20 pengulangan). Tidak ada perbedaan urutan di antara alel yang
berbeda, baik dalam pengkodean maupun di daerah mengapit.
Namun, analisis Northern hanya mengidentifikasi satu band yang
paling konsisten dengan transkrip dari alel yang mengandung 26
pengulangan. (Karena pendek 59dan 39UTR, ukuran transkrip
sangat cocok dengan wilayah pengkodean.)
Studi awal menyarankan rekombinasi signifikan yang melibatkan
vspA6(CRP170) gen (6) dan penghapusan salinan terkait ekspresi
vspA6dalam isolasi tidak lagi mengekspresikanvspA6
(9). Namun, data selanjutnya menunjukkan bahwa peristiwa rekombinasi
ini dapat dijelaskan dengan perubahan dalam jumlah salinan berulang
untuk pengulangan yang mengandungvspgen (355–358) Selain
perubahan jumlah salinan berulang, studi pemetaan kromosom dari
vspA6DanvspC5gen telah mengungkapkan tidak ada perubahan dalam
lokasi genomik dan organisasi dalam isolat di mana tertentuvspgen
diekspresikan atau tidak diekspresikan (356, 358). Ini
CLIN. MICROBIOL. REV.
menunjukkan bahwa variasi antigenik tidak terjadi dengan
memindahkan vspgen ke situs ekspresi.
Ekspresi spesifik alel darivspgen dan tidak adanya
perubahan urutan atau penataan ulang DNA yang terkait
dengan variasi antigenik menunjukkan kemungkinan
bentuk kontrol epigenetik untukvspekspresi gen. Tidak ada
DNA termetilasi atau "J" di dalamnyaGiardia(335),
menentang DNA yang diubah sebagai sarana pengendalian
vspekspresi gen. Apakah perubahan dalam struktur
kromosom atau status asetilasi histon terlibat dalam
pengendalianvspekspresi gen belum dipelajari.
Antigen Permukaan Lainnya
Taglin adalah antigen permukaan yang bermigrasi sebagai doublet
28- dan 30-kDa pada Western blots (343) dan memiliki aktivitas lektin
yang diinduksi protease (184). Setelah pengobatan tripsin mengikat
mannose-6-fosfat. Antigen ini tidak berubah-ubah, dan ekspresinya
konstan sepanjang encystation dan excystation (320).
G. lambliatrofozoit juga memiliki antigen 49-kDa (GP49)
yang melekat pada permukaan membran oleh jangkar
glikosilfosfatidlinositol (GPI) (61). Selama sintesis jangkar
GPI, fosfatidilinositol eksogen dimasukkan, tetapimyo
-inositol diubah menjadi fosfatidilinositol sebelum
penggabungan (317). Jangkar GPI tidak tunduk pada
pembelahan oleh fosfolipase C, berbeda dengan berbagai
molekul permukaan GPIanchored lainnya, termasuk
glikoprotein permukaan varian trypanosome (43). GP49
konstan di antara isolat yang berbeda dan tidak
menunjukkan variasi dalam satu isolat (61).
KESIMPULAN
Kemajuan yang signifikan telah dibuat dalam pemahaman
tentang hubungan filogenetikG. lambliake diplomonad lain dan
eukariota lainnya. Resolusi kontroversi mengenai posisi filogenetik
dari diplomonad dan hubungan antara berbagaiGiardiaspesies dan
G. lambliagenotipe akan tergantung pada perbandingan urutan
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
lebih lanjut dan studi biologis. Tidak jelas mengapaG. lamblia
mempertahankan genom poliploid dengan dua inti yang tampaknya
identik. Pemahaman tentang bagaimana simetri nuklir
dipertahankan dan keuntungan selektif yang diberikan oleh dua inti
harus memfasilitasi pemahaman kita tidak hanya tentangG. lamblia
tetapi juga prinsip-prinsip biologi umum. Dekade sebelumnya telah
berkontribusi secara substansial pada pemahaman kita tentang
pemrosesan dan transportasi protein dalam trofozoit vegetatif dan
organisme pembentuk kista. Investigasi lebih lanjut berjanji untuk
membantu pemahaman kita tidak hanya tentang kesamaan dengan
eukariota lain tetapi juga perbedaan utama yang dapat memberikan
target untuk intervensi terapeutik.
VSP yang melapisi permukaan trofozoit tampaknya
memainkan peran nyata dalam biologi organisme, namun
peran ini belum dipahami. Pemahaman lebih lanjut tentang
struktur dan biokimia VSP dapat menghasilkan wawasan
tentang peran biologis VSP dan alasan variasi antigenik.
Pertanyaan yang sama pentingnya adalah mekanisme yang
digunakanG. lambliamengontrol ekspresi darivspgen.
Ekspresi darivspgen berubah selama proses encystation dan
excystation serta selama pertumbuhan vegetatif,
VOL. 14, 2001
tetapi tidak ada perubahan DNA yang dikaitkan dengan variasi
antigenik. Oleh karena itu, mekanisme epigenetik adalah kandidat
yang paling menjanjikan saat ini.
Dekade berikutnya akan melihat penerapan kemajuan
genomik saat ini untuk menjawab pertanyaan menarik dan
penting ini. Proyek genom akan memungkinkan identifikasi
komponen enzimatik dari berbagai jalur biokimia dan akan
menyarankan jalan penelitian baru serta strategi terapi
baru.
UCAPAN TERIMA KASIH
Saya berterima kasih kepada banyak kolega atas saran yang bermanfaat,
termasuk Lidya Sánchez, CW Birky, dan Ted Nash. Saya mengucapkan terima kasih
kepada Lynda Schurig atas bantuan tokoh jalur biokimia. Terima kasih kepada Claire
Payne atas bantuannya dalam mendapatkan mikrograf elektron.
REFERENSI
1.Referensi dihapus.
2.Abaza, SM, JJ Sullivan, dan GS Visvesvara.1991. Profil isoenzim dari empat
strainGiardia lambliadan infektivitasnya terhadap jirds. Saya. J. Trop.
Kedokteran Hyg.44:63–68.
3.Adam, RD1991. Biologi dariGiardiaspp. Mikrobiol. Putaran.55:706–732.
4.Adam, RD1992. Variasi ukuran kromosom padaGiardia lamblia: peran
pengulangan rDNA. Asam Nukleat Res.20:3057–3061.
5.Adam, RD2000. ItuGiardia lambliagenom. Int. J. Parasitol.30:475–
484.
6.Adam, RD, A. Aggarwal, AA Lal, VF de la Cruz, T. McCutchan, dan
TE Nash.1988. Variasi antigenik dari protein kaya sistein padaGiardia lamblia.
J.Exp. Kedokteran167:109–118.
7.Adam, RD, TE Nash, dan TE Wellems.1988. TheGiardia lamblia trofozoit
mengandung set kromosom yang terkait erat. Asam Nukleat Res.16:
4555–4567.
8.Adam, RD, TE Nash, dan TE Wellems.1991. Telomer lokasi Giardiagen
rDNA. Mol. Sel. Biol.11:3326–3330.
9.Adam, RD, YM Yang, dan TE Nash.1992. Keluarga gen protein kaya sistein
Giardia lamblia: hilangnya gen CRP170 dalam varian antigenik. Mol. Sel.
Biol.12:1194–1201.
10.Aggarwal, A., RD Adam, dan TE Nash.1989. Karakterisasi a
Protein struktural 29,4 kilodalton dariGiardia lambliadan lokalisasi ke disk
ventral. Menulari. Imun.57:1305–1310.
11.Aggarwal, A., JW Merritt, Jr., dan TE Nash.1989. Protein permukaan
varian kaya sisteinGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.32:39–47.
12.Aggarwal, A., dan TE Nash.1988. Variasi antigenik dariGiardia lamblia in
vivo. Menulari. Imun.56:1420–1423.
13.Aldritt, SM, P. Tien, dan CC Wang.1985. Penyelamatan pirimidin diGiardia
lamblia. J.Exp. Kedokteran161:437–445.
14.Aley, SB, dan FD Gillin.1993.Giardia lamblia: Pemrosesan pasca-translasi
dan status residu sistein yang terpapar di TSA 417, antigen permukaan
variabel. Exp. Parasitol.77:295–305.
15.Alonso, RA, dan DA Peattie.1992. Sekuens nukleotida dari gen alfa
giardin kedua dan analisis molekuler gen alfa giardin dan transkrip dalam
Giardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.50:95–104.
16.Andrews, RH, M. Adams, PF Boreham, G. Mayrhofer, dan BP Meloni.
1989.Giardia intestinalis: bukti elektroforesis untuk kompleks spesies. Int.
J. Parasitol.19:183–190.
17.Baruch, AC, J. Isaac-Renton, and RD Adam.1996. Epidemiologi molekuler
dariGiardia lamblia: pendekatan berbasis urutan. J. Menginfeksi. Dis. 174:
233–236.
18.Barwick, RS, DA Retribusi, GF Braun, Pantai MJ, dan RL Calderon. 2000. Surveilans
untuk wabah penyakit yang ditularkan melalui air—Amerika Serikat, 1997–1998. Morb.
Makhluk hidup. Minggu. Pengawasan Rep. CDC. Sum.49(SS-4):1–36.
19.Baum, KF, RL Berens, dan JJ Marr.1993. Nukleosida purin dan transpor
membran sel nukleobaseGiardia lamblia. J.Eukaryot. Mikrobiol.40:643–
649.
20.Baum, KF, RL Berens, JJ Marr, JA Harrington, and T. Spector. 1989.
Penyelamatan purin deoksinukleosida diGiardia lamblia. J.Biol. kimia 264:
21087–21090.
21.Belhadri, A.1995. Kehadiran centrin dalam parasit manusiaGiardia: indikasi lebih lanjut
tentang keberadaannya di mana-mana pada eukariota. Biokimia. Biofisika. Res.
Komunal.214:597–601.
22.Benachenhou-Lahfa, N., P. Forterre, dan B. Labedan.1993. Evolusi gen
glutamat dehidrogenase: bukti dua keluarga protein paralog dan pola
percabangan archaebacteria yang tidak biasa di pohon kehidupan
universal. J.Mol. Evol.36:335–346.
23.Berens, RL, dan JJ Marr.1986. Metabolisme analog adenosin pada Giardia
lamblia. Implikasi untuk kemoterapi. Biokimia. Pharmacol.35: 4191–4197.
BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 469
24.Bernal, RM, R. Tovar, JI Santos, and ML Munoz.1998. Kemungkinan peran
kalmodulin dalam eksistasiGiardia lamblia. Parasitol. Res.84:687–693.
25.Bernander, R., JE Palm, dan SG Svärd.2001. Ploidi genom dalam berbagai
tahapGiardia lamblialingkaran kehidupan. Sel. Mikrobiol.3:55–62.
26.Bertram, MA, EA Meyer, JD Lile, dan SA Morse.1983. Perbandingan
isozim dari lima axenicGiardiaisolat. J. Parasitol.69:793–801.
27.Bingham, AK, dan EA Meyer.1979.Giardiaexcystation dapat diinduksi secara in
vitro dalam larutan asam. Alam277:301–302.
28.Blair, RJ, dan PF Weller.1987. Penyerapan dan esterifikasi asam arakidonat oleh
trofozoitGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.25:11–18.
29.Blanchard, R.1888. Keterangan sur le megastome usus. Banteng. Soc. Kebun
binatang. Fr.13:18.
30.Bockman, DE, dan WB Winborn.1968. Lokalisasi mikroskopis elektron
feritin eksogen dalam vakuolaGiardia muris. J. Protozoa. 15:26–30.
31.Boothroyd, JC, A.Wang, DA Campbell, dan CC Wang.1987. Pengulangan
DNA ribosomal yang luar biasa kompak pada protozoaGiardia lamblia.
Asam Nukleat Res.15:4065–4084.
32.Borst, P., W. Bitter, PA Blundell, I. Chaves, M. Cross, H. Gerrits, F. Van
Leeuwen, R. McCulloch, M. Taylor, dan G. Rudenko.1998. Kontrol situs
ekspresi gen VSG diTrypanosoma brucei. Mol. Biokimia. Parasitol.91: 67–
76.
33.Brodsky, RE, HC Spencer, Jr., dan MG Schultz.1974. Giardiasis pada
pelancong Amerika ke Uni Soviet. J. Menginfeksi. Dis.130:319–323.
34.Brown, DM, JA Upcroft, dan P. Upcroft.1993. Sistein adalah tiol berat
molekul rendah utama diGiardia duodenalis. Mol. Biokimia. Parasitol. 61:
155–158.
35.Brown, DM, JA Upcroft, dan P. Upcroft.1995. Detoksifikasi radikal bebas
diGiardia duodenalis. Mol. Biokimia. Parasitol.72:47–56.
36.Brown, DM, JA Upcroft, dan P. Upcroft.1996.AH2Oksidase NADH
penghasil O dari parasit protozoaGiardia duodenalis. eur. J. Biochem.241:
155–161.
37.Bruderer, T., C. Wehrli, dan P. Köhler.1996. Kloning dan karakterisasi gen
penyandi dari piruvat fosfat dikinaseGiardia duodenalis. Mol. Biokimia.
Parasitol.77:225–233.
38.Buchel, LA, A. Gorenflot, C. Chochillon, J. Savel, and JG Gobert.1987.
Eksistasi in vitro dariGiardiadari manusia: studi mikroskop elektron
pemindaian. J. Parasitol.73:487–493.
39.Bui, ET, PJ Bradley, dan PJ Johnson.1996. Asal evolusi yang umum untuk
mitokondria dan hidrogenosom. Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat 93:
9651–9656.
40.Bulik, DA, DG Lindmark, dan EL Jarroll.1998. Pemurnian dan
karakterisasi UDP-N-acetylglucosamine pyrophosphorylase dari encysting
Giardia. Mol. Biokimia. Parasitol.95:135–139.
41.Bulik, DA, P. van Ophem, JM Manning, Z. Shen, DS Newburg, dan
EL Jarroll.2000. UDP-N-acetylglucosamine pyrophosphorylase, enzim
kunci dalam encystingGiardia, diatur secara alosterik. J.Biol. kimia 275:
14722–14728.
42.Campbell, SR, H. van Keulen, SL Erlandsen, JB Senturia, and EL Jarroll.
1990.Giardia sp.: perbandingan kariotipe elektroforetik. Exp. Parasitol.71:
470–482.
43.Carrington, M., N. Carnall, MS Crow, A. Gaud, MB Redpath, CL
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
Wasunna, dan H. Webb.1998. Sifat dan fungsi glikosilfosfatidilinositol-
fosfolipase C padaTrypanosoma brucei. Mol. Biokimia. Parasitol.91:153–
164.
44.Cavalier-Smith, T.1987. Asal usul sel eukariotik dan archaebacterial. Ann.
NY Acad. Sains.503:17–54.
45.Cavalier-Smith, T.1998. Sistem kehidupan enam kerajaan yang direvisi. Biol. Pendeta
Camb. Filos. Soc.73:203–266.
46.Cavalier-Smith, T., dan EE Chao.1996. Filogeni molekuler dari archezoan
yang hidup bebasTrepomonas agilisdan sifat eukariota pertama. J.Mol.
Evol.43:551–562.
47.Cedillo-Rivera, R., JA Enciso-Moreno, A. Martinez-Palomo, dan G.
Ortega-Pierres.1989.Giardia lamblia: analisis isoenzim dari 19 strain
axenic yang diisolasi dari pasien bergejala dan tanpa gejala di Meksiko.
Trans. R. Soc. Trop. Medi Hyg.83:644–646.
47a.Pusat Pengendalian Penyakit.1989. Wabah giardia-sumber umum
sis—Meksiko Baru. Morb. Makhluk hidup. Minggu. Reputasi.38:405–407.
48.Cerva, L., dan E. Nohýnková.1992. Sebuah studi mikroskopis cahaya dari kursus
pembelahan selGiardia intestinalistrofozoit yang ditumbuhkan secara in vitro. Folia
Parasitol. (Praha)39:97–104.
49.Chavez, B., R. Cedillo-Rivera, dan A. Martinez-Palomo.1992.Giardia
lamblia: studi ultrastruktural dari efek in vitro benzimidazoles. J. Protozoa.
39:510–515.
50.Chen, LM, Y. Chern, SJ Ong, and JH Tai.1994. Kloning molekuler dan
karakterisasi gen terkait ras dari subfamili ran/tc4/spi1 diGiardia lamblia.
J.Biol. kimia269:17297–17304.
51.Chen, N., JA Upcroft, dan P. Upcroft.1995.AGiardia duodenalisgen yang
mengkode protein dengan beberapa pengulangan homolog toksin. Parasitologi
111:423–431.
52.Chen, N., JA Upcroft, dan P. Upcroft.1996. Keluarga gen penyandi protein
kaya sistein baru diGiardia duodenalis. Gen169:33–38.
470 ADAM
53.Coggins, JR, dan FW Schaefer.1984.Giardia muris: pemindaian mikroskop
elektron eksistasi in vitro. Exp. Parasitol.57:62–67.
54.Coggins, JR, dan FW Schaefer.1986.Giardia muris: analisis ultrastruktur
eksistasi in vitro. Exp. Parasitol.61:219–228.
55.Coombs, GH, dan M. Müller.1995. Metabolisme energi pada protozoa
anaerobik, hal. 33–47.Di dalamJJ Marr dan M. Müller (ed.), Biokimia dan
biologi molekuler parasit. Pers Akademik. Ltd., London, Inggris Raya.
56.Corliss, JO1981. Apa hubungan taksonomi dan evolusi protozoa dengan
protista? Biosistem14:445–449.
57.Corliss, JO1984. Kingdom protista dan 45 filumnya. Biosistem 17:87–126.
58.Dai, YP, CS Lee, dan WJ O'Sullivan.1995. Sifat urasil
fosforibosiltransferase dariGiardia intestinalis. Int. J. Parasitol.25: 207–
214.
59.Dan, M., dan CC Wang.2000. Peran alkohol dehidrogenase E (ADHE)
dalam metabolisme energiGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol. 109:
25–36.
60.Das, S., CD Schteingart, AF Hofmann, DS Reiner, SB Aley, dan FD Gillin.1997.
Giardia lamblia: bukti penyerapan dan pelepasan asam empedu terkonjugasi
yang dimediasi oleh pembawa. Exp. Parasitol.87:133–141.
61.Das, S., A. Traynor-Kaplan, DS Reiner, TC Meng, dan FD Gillin. 1991.
Antigen permukaan dariGiardia lambliadengan jangkar
glikosilfosfatidilinositol. J.Biol. kimia266:21318–21325.
62.Davey, RA, PL Ey, dan G. Mayrhofer.1991. Karakteristik transpor timidin
diGiardia intestinalistrofozoit. Mol. Biokimia. Parasitol.48: 163–171.
63.Davey, RA, G. Mayrhofer, dan PL Ey.1992. Identifikasi transporter
nukleosida spesifisitas luas dengan afinitas untuk bagian gula diGiardia
intestinalistrofozoit. Biochim. Biofisika. Acta1109:172–178.
64.De Jonckheere, JF, dan B. Gordts.1987. Kemunculan dan transfeksi a
Giardiavirus. Mol. Biokimia. Parasitol.23:85–89.
65.De Jonckheere, JF, AC Majewska, dan W. Kasprzak.1990.Giardia isolat dari
primata dan hewan pengerat menunjukkan polimorfisme molekuler yang sama
dengan isolat manusia. Mol. Biokimia. Parasitol.39:23–29.
66.Dobel, C.1920. Penemuan protozoa usus manusia. Proses R. Soc.
Kedokteran13:1–15.
67.Drouin, G., M. Moniz de Sa, dan M. Zuker.1995. TheGiardia lambliagen
aktin dan filogeni eukariota. J.Mol. Evol.41:841–849.
68.Dutta, AK, MA Phadke, AC Bagade, V. Joshi, A. Gazder, TK Biswas,
HH Gill, dan SC Jagota.1994. Sebuah studi multisenter acak untuk
membandingkan keamanan dan kemanjuran albendazole dan metronidazole
dalam pengobatan giardiasis pada anak-anak. India J. Pediatr.61:689–693.
69.Edlind, TD, dan PR Chakraborty.1987. RNA ribosom yang tidak biasa dari
parasit ususGiardia lamblia. Asam Nukleat Res.15:7889–7901.
70.Edlind, TD, TL Hang, dan PR Chakraborty.1990. Aktivitas antelmintik
benzimidazol melawanGiardia lambliain vitro. J. Menginfeksi. Dis. 162:
1408–1411.
71.Edlind, TD, J.Li, GS Visvesvara, MH Vodkin, GL McLaughlin, dan
SK Katiyar.1996. Analisis filogenetik urutan beta-tubulin dari protozoa
amitokondria. Mol. Filogenet. Evol.5:359–367.
72.Edwards, MR, FV Gilroy, BM Jimenez, dan WJ O'Sullivan.1989. Alanine
adalah produk akhir utama dari metabolisme olehGiardia lamblia: studi
resonansi magnetik nuklir proton. Mol. Biokimia. Parasitol.37:19–26.
73.Edwards, MR, LA Knodler, JR Wilson, dan PJ Schofield.1993. Transportasi
dan metabolisme alanin olehGiardia intestinalis. Mol. Biokimia. Parasitol.
61:49–57.
74.Edwards, MR, PJ Schofield, WJ O'Sullivan, dan M. Costello.1992.
Metabolisme arginin selama kulturGiardia intestinalis. Mol. Biokimia.
Parasitol.53:97–103.
75.Ellis, JE, MA Wyder, EL Jarroll, dan ES Kaneshiro.1996. Perubahan
komposisi lipid selama in vitro encystation dan aktivitas desaturase asam
lemakGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.81:13–25.
76.Elmendorf, HG, Penyanyi SM, dan TE Nash.2000. Menargetkan protein ke
intiGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.106:315–319.
77.Emmerlich, V., U. Santarius, T. Bakker-Grunwald, dan H. Scholze.1999.
Isolasi dan komposisi subunit dari proteasome 20SGiardia lamblia. Mol.
Biokimia. Parasitol.100:131–134.
78.Erlandsen, SL, dan WJ Bemrick.1987. Bukti SEM untuk spesies baru,
Giardia psittaci. J. Parasitol.73:623–629.
79.Erlandsen, SL, WJ Bemrick, dan J. Pawley.1989. Bukti mikroskopis
elektron beresolusi tinggi untuk struktur filamen dari dinding kista di
Giardia murisDanGiardia duodenalis. J. Parasitol.75:787–797.
80.Erlandsen, SL, WJ Bemrick, DE Schupp, JM Shields, EL Jarroll,
JF Sauch, dan JB Pawley.1990. Lokalisasi immunogold resolusi tinggiGiardia
antigen dinding kista menggunakan SEM emisi lapangan dengan pencitraan
elektron sekunder dan backscatter. J. Histochem. Sitokimia.38:625–632.
81.Erlandsen, SL, WJ Bemrick, CL Wells, DE Feely, L. Knudson, SR
Campbell, H. van Keulen, and EL Jarroll.1990. Budaya dan karakterisasi
AxenicGiardia ardeaedari bangau biru besar (Ardea herodias). J. Parasitol.
76:717–724.
82.Erlandsen, SL, dan DG Chase.1974. Perubahan morfologi pada
CLIN. MICROBIOL. REV.
batas mikrovili dari sel epitel vili yang diproduksi oleh mikroorganisme
usus. Saya. J.Clin. Nutr.27:1277–1286.
83.Erlandsen, SL, PT Macechko, H. van Keulen, and EL Jarroll.1996. Pembentukan
Giardiadinding kista: studi tentang perakitan ekstraseluler menggunakan
pelabelan imunogold dan SEM emisi lapangan resolusi tinggi. J.Eukaryot.
Mikrobiol.43:416–429.
84.Erlandsen, SL, dan EM Rasch.1994. Kandungan DNA tropozoit dan kista
Giardia lambliadengan kuantisasi mikrodensitometri pewarnaan Feulgen
dan pemeriksaan dengan pemindaian laser confocal microscopy. J.
Histochem. Sitokimia.42:1413–1416.
85.Ey, PL, RH Andrews, dan G. Mayrhofer.1993. Diferensiasi genotipe utama dari
Giardia intestinalisdengan analisis reaksi berantai polimerase dari gen yang
mengkode antigen permukaan trofozoit. Parasitologi106:347–356.
86.Ey, PL, T. Bruderer, C. Wehrli, dan P. Köhler.1996. Perbandingan
kelompok genetik ditentukan oleh analisis molekuler dan imunologi
Giardiadiisolasi dari hewan dan manusia di Swiss dan Australia. Parasitol.
Res.82:52–60.
87.Ey, PL, JM Darby, RH Andrews, and G. Mayrhofer.1993.Giardia
intestinalis: deteksi genotipe utama dengan analisis restriksi produk
amplifikasi gen. Int. J. Parasitol.23:591–600.
88.Ey, PL, JM Darby, and G. Mayrhofer.1999. Lokus baru (vsp417–4) milik
subfamili mirip tsa417 dari gen protein permukaan spesifik varian di
Giardia intestinalis. Mol. Biokimia. Parasitol.99:55–68.
89.Ey, PL, RA Davey, dan GA Duffield.1992. Transporter nukleobase
berafinitas rendah pada parasit protozoaGiardia intestinalis. Biochim.
Biofisika. Acta1109:179–186.
90.Ey, PL, K. Khanna, RH Andrews, PA Manning, dan G. Mayrhofer. 1992.
Kelompok genetik yang berbeda dariGiardia intestinalisdibedakan dengan
polimorfisme panjang fragmen restriksi. J. Gen. Mikrobiol.138:2629–2637.
91.Ey, PL, KK Khanna, PA Manning, dan G. Mayrhofer.1993. Gen yang
mengkode protein permukaan utama 69 kilodaltonGiardia intestinalis
trofozoit. Mol. Biokimia. Parasitol.58:247–257.
92.Ey, PL, M. Mansouri, J. Kulda, E. Nohynkova, PT Monis, RH Andrews,
and G. Mayrhofer.1997. Analisis genetik dariGiardiadari hewan ternak
berkuku mengungkapkan genotipe spesifik artiodactyl dan berpotensi
zoonosis. J.Eukaryot. Mikrobiol.44:626–635.
93.Fan, JB, SH Korman, CR Cantor, dan CL Smith.1991.Giardia lamblia: ukuran
genom haploid yang ditentukan oleh elektroforesis gel medan berdenyut
kurang dari 12 Mb. Asam Nukleat Res.19:1905–1908.
94.Farthing, MJ, GT Keusch, dan MC Carey.1985. Pengaruh empedu dan garam empedu
terhadap pertumbuhan dan penyerapan lipid oleh membranGiardia lamblia.
Kemungkinan implikasi untuk patogenesis penyakit usus. J.Clin. Selidiki.76: 1727–1732.
95.Faubert, G.2000. Respon kekebalan terhadapGiardia duodenalis. Klinik. Mikrobiol.
Putaran.13:35–54.
96.Faubert, G., DS Reiner, dan FD Gillin.1991.Giardia lamblia: regulasi pembentukan
vesikel sekretorik dan hilangnya kemampuan untuk menyambung kembali selama
encystation in vitro. Exp. Parasitol.72:345–354.
97.Merasa, DE1988. Morfologi kistaMikroti Giardiadengan mikroskop cahaya
dan elektron. J. Protozoa.35:52–54.
98.Feely, DE, dan JK Dyer.1987. Lokalisasi aktivitas asam fosfatase diGiardia
lambliaDanGiardia muristrofozoit. J. Protozoa.34:80–83.
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
99.Feely, DE, dan SL Erlandsen.1982. Pengaruh cytochalasin-B, Ca rendah11
konsentrasi, asam iodoasetat, dan quinacrine-HCl pada perlekatan
Giardiatrofozoit in vitro. J. Parasitol.68:869–873.
100.Feely, DE, dan SL Erlandsen.1985. MorfologiGiardia agilis: pengamatan
dengan pemindaian mikroskop elektron dan mikroskop refleksi
interferensi. J. Protozoa.32:691–693.
101.Feely, DE, MD Gardner, dan EL Hardin.1991. Excystation dariGiardia
murisdiinduksi oleh media fosfat-bikarbonat: lokalisasi asam fosfatase. J.
Parasitol.77:441–448.
102.Feely, DE, DV Holberton, dan SL Erlandsen.1990. Biologi dari Giardia, P.
1–49.Di dalamEA Meyer (ed.), Giardiasis. Elsevier, Amsterdam, Belanda.
103.Feely, DE, JV Schollmeyer, dan SL Erlandsen.1982.Giardia spp.: Distribusi
protein kontraktil dalam organel lampiran. Exp. Parasitol.53:145–154.
104.Filice, FP1952. Studi tentang sitologi dan riwayat hidup aGiardiadari tikus
laboratorium. Univ. California Publ. Kebun binatang.57:53–146.
105.Fraser, D., N. Bilenko, RJ Deckelbaum, R. Dagan, J. el-On, dan L.
Naggan.2000.Giardia lambliapengangkutan pada bayi Badui Israel:
faktor risiko dan konsekuensi. Klinik. Menulari. Dis.30:419–424.
106.Furness, BW, MJ Beach, dan JM Roberts.2000. Surveilans Giardiasis Amerika
Serikat, 1992–1997. Morb. Makhluk hidup. Minggu. Pengawasan Rep. CDC. Sum.
49(SS-7):1–16.
107.Germot, A., H. Philippe, dan H. Le Guyader.1996. Kehadiran protein kejut panas
70-kDa tipe mitokondria diTrichomonas vaginalismenunjukkan endosimbiosis
mitokondria yang sangat awal pada eukariota. Proses Natl. Acad. Sains.
Amerika Serikat93:14614–14617.
108.Gibson, GR, D. Ramirez, J. Maier, C. Castillo, dan S. Das.1999.Giardia lamblia:
penggabungan asam lemak bebas dan terkonjugasi menjadi fosfolipid berbasis
gliserol. Exp. Parasitol.92:1–11.
VOL. 14, 2001
109.Gillin, FD, dan LS Diamond.1981.Entamoeba histolyticaDanGiardia lamblia: efek
ketegangan sistein dan oksigen pada perlekatan trofozoit ke kaca dan
kelangsungan hidup dalam media kultur. Exp. Parasitol.52:9–17.
110.Gillin, FD, dan LS Diamond.1981.Entamoeba histolyticaDanGiardia lamblia:
respons pertumbuhan terhadap agen pereduksi. Exp. Parasitol.51:382–391.
111.Gillin, FD, MJ Gault, AF Hofmann, D. Gurantz, dan JF Sauch. 1986. Lipid
empedu mendukung pertumbuhan bebas serumGiardia lamblia. Menulari.
Imun.53:641–645.
112.Gillin, FD, P. Hagblom, J. Harwood, SB Aley, DS Reiner, M. McCaffery,
M.So, dan DG Guiney.1990. Isolasi dan ekspresi gen untuk protein
permukaan utamaGiardia lamblia. Proses Natl. Acad. Sains. Amerika
Serikat 87:4463–4467.
113.Gillin, FD, dan DS Reiner.1982. Lampiran flagelataGiardia lamblia: peran
zat pereduksi, serum, suhu, dan komposisi ionik. Mol. Sel. Biol.2:369–377.
114.Gillin, FD, DS Reiner, dan SE Boucher.1988. Faktor-faktor usus kecil mendorong
terjadinya kistaGiardia lambliain vitro. Menulari. Imun.56:705–707.
115.Gillin, FD, DS Reiner, MJ Gault, H. Douglas, S. Das, A. Wunderlich, dan JF
Sauch.1987. Encystation dan ekspresi antigen kista oleh Giardia lambliain
vitro. Sains235:1040–1043.
116.Gillin, FD, DS Reiner, RB Levy, dan PA Henkart.1984. Gugus tiol pada
permukaan protozoa parasit anaerobik. Mol. Biokimia. Parasitol.
13:1–12.
117.Gillin, FD, DS Reiner, dan JM McCaffery.1996. Biologi sel eukariota
primitifGiardia lamblia. Tahun. Pendeta Mikrobiol.50:679–705.
118.Gottstein, B., GR Harriman, JT Conrad, dan TE Nash.1990. Variasi
antigenik padaGiardia lamblia: respon imun seluler dan humoral pada
model tikus. Imunol Parasit.12:659–673.
119.Gottstein, B., dan TE Nash.1991. Variasi antigenik padaGiardia lamblia:
infeksi tikus telanjang dan scid athymic kongenital. Imunol Parasit.
13:649–659.
120.Gray, MW1989. Asal evolusi organel. Tren Genet. 5:294–299.
121.Gupta, RS, K. Aitken, M. Falah, and B. Singh.1994. Kloning dariGiardia lamblia
homolog heat shock protein HSP70: implikasi mengenai asal sel eukariotik dan
retikulum endoplasma. Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat91:2895–2899.
122.Hall, A., dan Q. Nahar.1993. Albendazole sebagai pengobatan infeksi
Giardia duodenalispada anak-anak di Bangladesh. Trans. R. Soc. Trop.
Medi Hyg.87:84–86.
123.Hare, DF, EL Jarroll, dan DG Lindmark.1989.Giardia lamblia: karakterisasi
aktivitas proteinase pada trofozoit. Exp. Parasitol.68: 168–175.
124.Hashimoto, T., Y. Nakamura, T. Kamaishi, F. Nakamura, J. Adachi, K.
Okamoto, dan M. Hasegawa.1995. Tempat filogenetik mitokondria
kekurangan protozoa,Giardia lamblia, disimpulkan dari urutan asam
amino faktor pemanjangan 2. Mol. Biol. Evol.12:782–793.
125.Hashimoto, T., Y. Nakamura, F. Nakamura, T. Shirakura, J. Adachi, N. Goto, K.
Okamoto, and M. Hasegawa.1994. Filogeni protein memberikan estimasi yang
kuat untuk divergensi awal eukariota: tempat filogenetik dari protozoa yang
kekurangan mitokondria,Giardia lamblia. Mol. Biol. Evol.11:65– 71.
126.Hashimoto, T., LB Sánchez, T. Shirakura, M. Müller, and M. Hasegawa. 1998.
Tidak adanya sekunder mitokondria diGiardia lambliaDanTrichomonas vaginalis
diungkapkan oleh filogeni sintetase valil-tRNA. Proses Natl. Acad. Sains.
Amerika Serikat95:6860–6865.
127.Hehl, AB, M. Marti, dan P. Köhler.2000. Tahap-ekspresi spesifik dan
penargetan chimera protein dinding kista-protein neon hijau diGiardia.
Mol. Biol. Sel11:1789–1800.
128.Henze, K., HG Morrison, ML Sogin, dan M. Muller.1998. Urutan dan
posisi filogenetik gen aldolase kelas II pada protista amitokondriat,
Giardia lamblia. Gen222:163–168.
129.Hernell, O., H. Ward, L. Blackberg, dan ME Pereira.1986. Pembunuhan Giardia
lambliaoleh lipase susu manusia: efek yang dimediasi oleh lipolisis lemak susu.
J. Menginfeksi. Dis.153:715–720.
130.Hetsko, ML, JM McCaffery, SG Svärd, TC Meng, X.Que, dan FD Gillin.
1998. Perubahan seluler dan transkripsional selama eksistasi Giardia
lambliain vitro. Exp. Parasitol.88:172–183.
131.Hiltpold, A., M. Frey, dan P. Köhler.2000. Glikosilasi dan palmitoylasi
adalah modifikasi umum dariGiardiavarian protein permukaan. Mol.
Biokimia. Parasitol.109:61–65.
132.Hiltpold, A., RM Thomas, dan P. Köhler.1999. Pemurnian dan
karakterisasi piruvat dikinase fosfat rekombinan dariGiardia. Mol.
Biokimia. Parasitol.104:157–169.
133.Hirt, RP, JMJ Logsdon, B. Healy, MW Dorey, WF Doolittle, dan
TM Embley.1999. Mikrosporidia berkerabat dengan jamur: bukti dari subunit
terbesar RNA polimerase II dan protein lainnya. Proses Natl. Acad. Sains.
Amerika Serikat96:580–585.
134.Holberton, D., DA Baker, dan J. Marshall.1988. Struktur kumparan alfa-
heliks tersegmentasi dari protein giardin dariGiardiasitoskeleton. J.Mol.
Biol.204:789–795.
135.Holberton, DV1973. Struktur halus alat cakram ventral dan
BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 471
mekanisme perlekatan pada flagelataGiardia muris. J. Sel Sci.13:11– 41.
136.Holberton, DV, dan J. Marshall.1995. Analisis pola urutan konsensus
padaGiardiapromotor gen sitoskeleton. Asam Nukleat Res.23: 2945–2953.
137.Homan, WL, FH van Enckevort, L. Limper, GJ van Eys, GJ Schoone,
W. Kasprzak, AC Majewska, dan F. van Knapen.1992. Perbandingan dari
Giardiaisolat dari laboratorium yang berbeda dengan analisis isoenzim dan
probe DNA rekombinan. Parasitol. Res.78:316–323.
138.Hopkins, RM, BP Meloni, DM Groth, JD Wetherall, JA Reynoldson, and
RC Thompson.1997. Pengurutan RNA ribosom mengungkapkan
perbedaan antara genotipeGiardiaisolat pulih dari manusia dan anjing
yang tinggal di lokasi yang sama. J. Parasitol.83:44–51.
139.Hou, G., SM Le Blancq, E. Yaping, H. Zhu, and MG Lee.1995. Struktur
kromosom penyandi rRNA yang sering disusun ulang diGiardia lamblia.
Asam Nukleat Res.23:3310–3317.
140.Hoyne, GF, PF Boreham, PG Parsons, C. Ward, dan B. Biggs.1989.
Pengaruh obat pada siklus selGiardia intestinalis. Parasitologi 99:333–
339.
141.Hrdy, I., E. Mertens, dan E. Nohynkova.1993.Giardia intestinalis: deteksi
dan karakterisasi piruvat fosfat dikinase. Exp. Parasitol.76: 438–441.
142.Inagaki, Y., dan DW Ford.2000. Evolusi sistem terminasi terjemahan
eukariotik: asal-usul faktor pelepasan. Mol. Biol. Evol.17:882–889.
143.Isaac-Renton, JL, C. Cordeiro, K. Sarafis, and H. Shahriari.1993. Karakterisasi
Giardia duodenalisdiisolasi dari wabah yang ditularkan melalui air. J.
Menginfeksi. Dis.167:431–440.
144.Jansen, RP, EC Hurt, H. Kern, H. Lehtonen, M. Carmo-Fonseca, B.
Lapeyre, dan D. Tollervey.1991. Konservasi evolusioner fibrillarin protein
nukleolar manusia dan ekspresi fungsionalnya dalam ragi. J. Sel Biol.113:
715–729.
145.Januschka, MM, SL Erlandsen, WJ Bemrick, DG Schupp, dan DE Feely.
1988. Perbandingan dariMikroti GiardiaDanSpironucleus muriskista di
tikus: studi mikroskopis imunositokimia, cahaya, dan elektron. J. Parasitol.
74:452–458.
146.Jarroll, EL, dan DG Lindmark.1990. Metabolisme Giardia, hal. 61–76.Di dalam
EA Meyer (ed.), Giardiasis. Elsevier, Amsterdam, Belanda.
147.Jarroll, EL, P. Manning, A. Berrada, D. Hare, dan DG Lindmark.1989.
Biokimia dan MetabolismeGiardia. J. Protozoa.36:190–197.
148.Jarroll, EL, P. Manning, DG Lindmark, JR Coggins, dan SL Erlandsen.
1989.Giardiakarbohidrat spesifik dinding kista: bukti adanya
galaktosamin. Mol. Biokimia. Parasitol.32:121–131.
149.Jarroll, EL, PJ Muller, EA Meyer, dan SA Morse.1981. Metabolisme lemak
dan karbohidrat dariGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol. 2:187–196.
150.Jarroll, EL, dan Paget TA.1995. Metabolisme karbohidrat dan asam amino
padaGiardia: ulasan. Folia Parasitol. (Praha)42:81–89.
151.Jimenez, BM, dan WJ O'Sullivan.1994. Sintetase CTP dan enzim
metabolisme pirimidin ribonukleotida padaGiardia intestinalis. Int. J.
Parasitol.24:713–718.
152.Johnson, PJ, CJ Lahti, dan PJ Bradley.1993. Biogenesis hidrogenosom
pada protista anaerobikTrichomonas vaginalis. J. Parasitol. 79:664–670.
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
153.Kabnick, KS, dan DA Peattie.1990. Analisis in situ mengungkapkan bahwa
dua inti dariGiardia lambliasetara. J. Sel Sci.95:353–360.
154.Kaneda, Y., dan T.Goutsu.1988. Analisis lipid dariGiardia lambliadan
media kulturnya. Ann. Trop. Obat Parasitol.82:83–90.
155.Karanis, P., dan PL Ey.1998. Karakterisasi isolat axenic dari Giardia
intestinalisdidirikan dari manusia dan hewan di Jerman. Parasitol. Res.84:
442–449.
156.Kattenbach, WM, PF Pimenta, W. de Souza, dan P. Pinto da Silva. 1991.
Giardia duodenalis: studi fraktur-beku, fraktur-flip dan sitokimia.
Parasitol. Res.77:651–658.
157.Keeling, PJ, dan WF Doolittle.1996. Kode genetik non-kanonik dalam garis keturunan
eukariotik awal yang menyimpang. EMBO J.15:2285–2290.
158.Keeling, PJ, dan WF Doolittle.1997. Bukti bahwa isomerase triosefosfat
eukariotik berasal dari alfa-proteobakteri. Proses Natl. Acad.
Sains. Amerika Serikat94:1270–1275.
159.Keister, DB1983. Budaya Axenic dariGiardia lambliadalam media TYI-S-33 yang
dilengkapi dengan empedu. Trans. R. Soc. Trop. Medi Hyg.77:487–488.
160.Kirk-Mason, KE, MJ Turner, dan PR Chakraborty.1989. Bukti pemimpin
mRNA tubulin pendek yang tidak biasa dan karakterisasi gen tubulin di
Giardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.36:87–99.
161.Knodler, LA, MR Edwards, dan PJ Schofield.1994. Kumpulan asam amino
intraseluler dariGiardia intestinalis, Trichomonas vaginalis, DanCrithidia luciliae.
Exp. Parasitol.79:117–125.
162.Knodler, LA, R. Noiva, K. Mehta, JM McCaffery, SB Aley, SG Svärd,
TG Nystul, DS Reiner, JD Silberman, and FD Gillin.1999. Isomerase
protein-disulfida baru dari protista yang menyimpang awalGiardia
lamblia. J.Biol. kimia274:29805–29811.
163.Knodler, LA, EO Sekyere, TS Stewart, PJ Schofield, dan MR Edwards.
1998. Kloning dan ekspresi enzim prokariotik, arginin
472 ADAM
deiminase, dari eukariota primitifGiardia intestinalis. J.Biol. kimia 273:
4470–4477.
164.Knodler, LA, SG Svärd, JD Silberman, BJ Davids, dan FD Gillin. 1999.
Regulasi gen perkembangan padaGiardia lamblia: bukti pertama untuk
promotor dan diferensial khusus encystation 59pemrosesan mRNA. Mol.
Mikrobiol.34:327–340.
165.Kofoid, CA, dan EB Christensen.1915. Tentang pembelahan biner dan berganda di
Giardia muris(Rumput). Univ. California Publ. Kebun binatang.16:30–54.
166.Kofoid, CA, dan ED Christensen.1920. Tinjauan kritis tentang nomenklatur
flagelata usus manusia. Univ. California Publ. Kebun binatang.20:160.
167.Korman, SH, SM Le Blancq, RJ Deckelbaum, dan LH Van der Ploeg.1992.
Investigasi giardiasis manusia dengan analisis kariotipe. J.Clin. Selidiki.89:
1725–1733.
168.Krebber, H., C. Wostmann, dan T. Bakker-Grunwald.1994. Bukti
keberadaan satu gen ubiquitin diGiardia lamblia. FEB Lett. 343:234–236.
169.Kulda, J., dan E. Nohýnková.1978. Flagelata usus manusia dan usus
spesies lain, hal. 1–138.Di dalamJP Kreier (ed.), Protozoa parasit, vol. II.
Academic Press, Inc., New York, NY
170.Kulda, J., dan E. Nohýnková.1996.Giardiapada manusia dan hewan, hal. 225–
422.Di dalamJP Kreier (ed.), Protozoa parasit, edisi ke-2, vol. 10. Academic Press,
Inc., San Diego, California.
171.Kyradji, S., dan AS Bagnara.1998. Karakterisasi gen penyandi
phosphoribosylpyrophosphate synthetase (PRS) dariGiardia intestinalis.
Mol. Biokimia. Parasitol.97:225–228.
172.Lambl, W.1859. Mikroskopische untersuchungen der Darmexcrete.
Vierteljahrsschr. Prakst. Heikunde61:1–58.
173.Lanfredi-Rangel, A., M. Attias, TMU de Carvalho, WM Kattenbach, dan
W. de Souza.1998. Vesikel perifer trofozoit dari protozoa primitifGiardia
lambliamungkin sesuai dengan endosom awal dan akhir dan lisosom. J.
Struktur. Biol.123:225–235.
174.Lanfredi-Rangel, A., WM Kattenbach, JAJ Diniz, dan W. de Souza. 1999.
Trofozoit dariGiardia lambliamungkin memiliki struktur seperti Golgi.
Mikrobiol FEM. Lett.181:245–251.
175.Lanzendörfer, M., P. Palm, B. Grampp, DA Peattie, dan W. Zillig.1992. Urutan
nukleotida dari gen yang mengkode subunit terbesar dari RNA polimerase III
yang bergantung pada DNA dariGiardia lamblia. Asam Nukleat Res. 20:1145–
1145.
176.Laoworawit, P., CS Lee, dan WJ O'Sullivan.1993. Deoksinukleosida kinase
dariGiardia intestinalis. Mol. Biokimia. Parasitol.60:37–44.
177.Le Blancq, SM, dan RD Adam.1998. Dasar struktural heterogenitas
kariotipe padaGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.97:199–208.
178.Le Blancq, SM, RS Kase, dan LH Van der Ploeg.1991. Analisis a Giardia lamblia
telomer pengkodean rRNA dengan [TAGGG]Nsebagai pengulangan telomer.
Asam Nukleat Res.19:5790–5790.
179.Le Blancq, SM, SH Korman, dan LH Van der Ploeg.1991. Penataan ulang
kromosom penyandi-rRNA yang sering terjadi diGiardia lamblia. Asam
Nukleat Res.19:4405–4412.
180.Le Blancq, SM, SH Korman, dan LH Van der Ploeg.1992. Penataan ulang
kromosom spontan pada protozoaGiardia lamblia: estimasi tingkat
mutasi. Asam Nukleat Res.20:4539–4545.
181.Lee, CS, BM Jimënez, dan WJ O'Sullivan.1988. Pemurnian dan
karakterisasi fosforilase uridin (timidin) dariGiardia lamblia. Mol. Biokimia.
Parasitol.30:271–277.
182.Lee, FJ, J. Moss, dan M. Vaughan.1992. Manusia danGiardiaFaktor
ADPribosylation (ARFs) melengkapi fungsi ARF diSaccharomyces
cerevisiae. J.Biol. kimia267:24441–24445.
183.Leipe, DD, JH Gunderson, TA Nerad, dan ML Sogin.1993. RNA ribosom
subunit kecil1dariHeksamita inflatadan pencarian cabang pertama di
pohon eukariotik. Mol. Biokimia. Parasitol.59:41–48.
184.Lev, B., H. Ward, GT Keusch, dan ME Pereira.1986. Aktivasi lektin pada
Giardia lambliaoleh protease inang: interaksi inang-parasit baru. Sains
232:71–73.
185.Levine, ND, JO Corliss, FEG Cox, G. Deroux, J. Grain, BM Honigberg, GF
Leedale, AR Loeblich, III, J. Lom, D. Lynn, EG Merinfeld, FC Page, G.
Poljansky, V. Sprague , J. Vavra, dan FG Wallace.1980. Klasifikasi
protozoa yang baru direvisi. J. Protozoa. 27:37–58.
186.Li, Z., dan NF Phillips.1997. Keterlibatan dan identifikasi lisin di situs PPi
dari fosfofruktokinase yang bergantung pada pirofosfat dariGiardia
lamblia. Biochimie79:221–227.
187.Lim, RL, WJ O'Sullivan, dan TS Stewart.1996. Isolasi, karakterisasi dan
ekspresi gen penyandi cytidine triphosphate synthetase dariGiardia
intestinalis. Mol. Biokimia. Parasitol.78:249–257.
188.Lindmark, Dirjen1980. Metabolisme energi protozoa anaerobik Giardia
lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.1:1–12.
189.Lindmark, Dirjen1988.Giardia lamblia: Lokalisasi aktivitas hidrolase dalam
organel trofozoit yang mirip lisosom. Exp. Parasitol.65:141–147.
190.Lindmark, DG, dan EL Jarroll.1982. Metabolisme pirimidin diGiardia
lambliatrofozoit. Mol. Biokimia. Parasitol.5:291–296.
191.Linstead, D., dan MA Cranshaw.1983. Jalur katabolisme arginin
CLIN. MICROBIOL. REV.
lism di flagelata parasitTrichomonas vaginalis. Mol. Biokimia. Parasitol.8:
241–252.
192.Liu, SM, DM Brown, P.O'Donoghue, P. Upcroft, dan JA Upcroft. 2000.
Keterlibatan ferredoksin dalam resistensi metronidazolGiardia duodenalis
. Mol. Biokimia. Parasitol.108:137–140.
193.Lu, SQ, AC Baruch, and RD Adam.1998. Perbandingan molekuler Giardia
lambliaisolat. Int. J. Parasitol.28:1341–1345.
194.Lujan, HD, LG Byrd, MR Mowatt, dan TE Nash.1994. Serum Cohn fraksi
IV-1 mendukung pertumbuhanGiardia lambliain vitro. Menulari. Imun.62:
4664–4666.
195.Lujan, HD, A. Marotta, MR Mowatt, N. Sciaky, J. Lippincott-Schwartz,
dan TE Nash.1995. Induksi perkembangan struktur dan fungsi Golgi
pada eukariota primitifGiardia lamblia. J.Biol. kimia270: 4612–4618.
196.Lujan, HD, MR Mowatt, LG Byrd, dan TE Nash.1996. Kelaparan kolesterol
menginduksi diferensiasi parasit ususGiardia lamblia. Proses Natl. Acad.
Sains. Amerika Serikat93:7628–7633.
197.Lujan, HD, MR Mowatt, GZ Chen, dan TE Nash.1995. Isoprenilasi protein
pada protozoaGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.72:121–127.
198.Lujan, HD, MR Mowatt, JT Conrad, B. Bowers, dan TE Nash.1995. Identifikasi
novelGiardia lambliaprotein dinding kista dengan pengulangan kaya leusin.
Implikasi untuk pembentukan granul sekretori dan perakitan protein ke dalam
dinding kista. J.Biol. kimia270:29307–29313.
199.Lujan, HD, MR Mowatt, JT Conrad, dan TE Nash.1996. Peningkatan
ekspresi molekul pendamping BiP/GRP78 selama diferensiasi eukariota
primitif. Biol. Sel86:11–18.
200.Lujan, HD, MR Mowatt, dan TE Nash.1996. Kebutuhan lipid dan serapan
lipid olehGiardia lambliatrofozoit dalam kultur. J.Eukaryot. Mikrobiol.43:
237–242.
201.Lujan, HD, MR Mowatt, JJ Wu, Y.Lu, A. Lees, MR Chance, dan
TE Nash.1995. Pemurnian protein permukaan varian-spesifik dariGiardia
lambliadan karakterisasi sifat pengikatan logamnya. J.Biol. kimia 270:
13807–13813.
202.Lujan, HD, dan TE Nash.1994. Penyerapan dan metabolisme sistein oleh
Giardia lambliatrofozoit. J.Eukaryot. Mikrobiol.41:169–175.
203.Macechko, PT, PA Steimle, DG Lindmark, SL Erlandsen, dan EL Jarroll.
1992. Enzim pensintesis galaktosamin diinduksi ketikaGiardiaencyst. Mol.
Biokimia. Parasitol.56:301–309.
204.Maroulis, SL, PJ Schofield, dan MR Edwards.2000. Peran Kalium dalam
MenanggapiGiardia intestinalisuntuk stres hipo-osmotik. Mol. Biokimia.
Parasitol.108:141–145.
205.Marshall, J., dan DV Holberton.1993. Urutan dan struktur protein
kumparan baru dari bundel mikrotubulusGiardia. J.Mol. Biol. 231:521–
530.
206.Marshall, J., dan DV Holberton.1995.Giardiagen memprediksi protein tangkai
kepala pengikat nukleotida 183 kDa. J. Sel. Sains.108:2683–2692.
207.Martin, W., dan M. Müller.1998. Hipotesis hidrogen untuk eukariota
pertama. Alam392:37–41.
208.Mayr, E.1998. Dua kerajaan atau tiga? Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat95:9720–
9723.
209.Mayrhofer, G., RH Andrews, PL Ey, dan NB Chilton.1995. DivisiGiardiaosolat
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
dari manusia menjadi dua kumpulan yang berbeda secara genetik dengan
analisis elektroforesis enzim yang dikodekan pada 27 lokus dan dibandingkan
denganGiardia muris. Parasitologi111:11–17.
210.McArthur, AG, HG Morrison, JEJ Nixon, NQE Passamaneck, U. Kim, G.
Hinkle, MK Crocker, ME Holder, R. Farr, CI Reich, GE Olsen, SB Aley, RD
Adam, FD Gillin, and ML Sogin.2000. Itu Giardiabasis data proyek
genom. Mikrobiol FEM. Lett.189:271–273.
211.McCaffery, JM, GM Faubert, dan FD Gillin.1994.Giardia lamblia: lalu lintas
protein permukaan varian trofozoit dan epitop dinding kista utama selama
pertumbuhan, encystation, dan peralihan antigenik. Exp. Parasitol.79:236– 249.
212.Meloni, BP, AJ Lymbery, dan RC Thompson.1988. Elektroforesis isoenzim
dari 30 isolatGiardiadari manusia dan kucing. Saya. J. Trop. Medi Hyg.38:
65–73.
213.Meloni, BP, dan RC Thompson.1987. Studi banding pada kultivasi in vitro
axenicGiardiaasal manusia dan anjing: bukti variasi intraspesifik. Trans. R.
Soc. Trop. Medi Hyg.81:637–640.
214.Meloni, BP, RC Thompson, AM Strandën, P. Köhler, and J. Eckert. 1991.
Perbandingan kritis dariGiardia duodenalisdari Australia dan Swiss
menggunakan elektroforesis isoenzim. Akting Trop.50:115–124.
215.Mendis, AH, RC Thompson, JA Reynoldson, A. Armson, BP Meloni, and
S. Gunsberg.1992. Penyerapan dan konversiL-[U14C-]aspartat danL-[U14
C-]alanin ke14BERSAMA2oleh trofozoit utuhGiardia duodenalis. Komp.
Biokimia. Fisik. Ser. B102:235–239.
216.Meng, TC, SB Aley, SG Svärd, MW Smith, B. Huang, J. Kim, dan
FD Gillin.1996. Imunolokalisasi dan urutan caltractin/centrin dari
eukariota bercabang awalGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.79:103–
108.
217.Meng, TC, ML Hetsko, dan FD Gillin.1993. Penggantian antigenik TSA
417, protein permukaan variabel trofozoit, setelah penyelesaian
VOL. 14, 2001
siklus hidup dariGiardia lamblia. Menulari. Imun.61:5394–5397.
218.Meng, TC, ML Hetsko, dan FD Gillin.1996. PenghambatanGiardia lamblia
excystation oleh antibodi terhadap dinding kista dan oleh aglutinin bibit
gandum. Menulari. Imun.64:2151–2157.
219.Mertens, E.1990. Terjadinya pirofosfat: Fruktosa 6-fosfat 1-
fosfotransferase diGiardia lambliatrofozoit. Mol. Biokimia. Parasitol.40:
147–149.
220.Mertens, E.1993. ATP versus pirofosfat: glikolisis ditinjau kembali pada protista
parasit. Parasitol. Hari ini9:122–126.
221.Mertens, E., E. Van Schaftingen, dan M. Müller.1989. Kehadiran
pirofosfat fruktosa-2,6-bifosfat-insensitif: fosfotransferase fruktosa-6-
fosfat dalam protozoa anaerobikJanin Tritrichomonas, Trichomonas
vaginalisDanIsotricha prostoma. Mol. Biokimia. Parasitol. 37:183–190.
222.Meyer, EA1970. Isolasi dan budidaya axenicGiardiatrofozoit dari kelinci,
chinchilla, dan kucing. Exp. Parasitol.27:179–183.
223.Meyer, EA1976.Giardia lamblia: isolasi dan kultivasi axenic. Exp. Parasitol.
39:101–105.
224.Miller, RL, DJ Nelson, SW LaFon, WH Miller, dan TA Krenitsky. 1987.
Aktivitas antigiardial guanin arabinosida. Studi mekanisme. Biokimia.
Pharmacol.36:2519–2525.
225.Miller, RL, AL Wang, and CC Wang.1988. IdentifikasiGiardia lamblia
mengisolasi rentan dan tahan terhadap infeksi oleh virus RNA beruntai
ganda. Exp. Parasitol.66:118–123.
226.Minotto, L., EA Tutticci, AS Bagnara, PJ Schofield, and MR Edwards.
1999. Karakterisasi dan ekspresi gen karbamat kinase dariGiardia
intestinalis. Mol. Biokimia. Parasitol.98:43–51.
227.Mintz, ED, M. Hudson-Wragg, P. Mshar, ML Cartter, dan JL Hadler. 1993.
Giardiasis bawaan makanan di lingkungan kantor perusahaan. J. Menginfeksi.
Dis. 167:250–253.
228.Mohareb, EW, EJ Rogers, EJ Weiner, and JI Bruce.1991.Giardia lamblia:
analisis fosfolipid isolat manusia. Ann. Trop. Obat Parasitol. 85:591–597.
229.Monis, PT, RH Andrews, G. Mayrhofer, dan PL Ey.1999. Sistematika
molekuler protozoa parasitGiardia intestinalis. Mol. Biol. Evol. 16:1135–
1144.
230.Monis, PT, RH Andrews, G. Mayrhofer, J. Mackrill, J. Kulda, JL Isaac-
Renton, dan PL Ey.1998. Silsilah baru dariGiardia intestinalis
diidentifikasi dengan analisis genetik organisme yang diisolasi dari anjing
di Australia. Parasitologi116:7–19.
231.Monis, PT, G. Mayrhofer, RH Andrews, WL Homan, L. Limper, dan
PL Ey.1996. Analisis genetik molekuler dariGiardia intestinalisisolat pada
lokus glutamat dehidrogenase. Parasitologi112:1–12.
232.Morgan, RO, dan MP Fernandez.1995. Filogeni molekuler annexin dan
identifikasi homolog primitif diGiardia lamblia. Mol. Biol. Evol.12:967–979.
233.Morgan, UM, JA Reynoldson, dan RC Thompson.1993. Aktivitas beberapa
benzimidazol dan inhibitor tubulin terhadapGiardiaspp. in vitro.
Antimikroba. Agen Kemoterapi.37:328–331.
234.Moss, DM, GS Visvesvara, HM Mathews, dan DA Ware.1992.
Perbandingan isoenzim axenicGiardia lambliastrain. J. Protozoa.39: 559–
564.
235.Mowatt, MR, A. Aggarwal, dan TE Nash.1991. Konservasi sekuens
terminal karboksi di antara protein permukaan spesifik varianGiardia
lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.49:215–227.
236.Mowatt, MR, HD Lujan, DB Cotten, B. Bowers, J. Yee, TE Nash, dan
HH Stibbs.1995. Ekspresi yang diatur secara perkembangan aGiardia
lambliagen protein dinding kista. Mol. Mikrobiol.15:955–963.
237.Mowatt, MR, OLEH Nguyen, JT Conrad, RD Adam, dan TE Nash. 1994.
Heterogenitas ukuran di antara yang terkait secara antigenikGiardia lamblia
protein permukaan varian-spesifik adalah karena perbedaan jumlah salinan
pengulangan tandem. Menulari. Imun.62:1213–1218.
238.Mowatt, MR, EC Weinbach, TC Howard, dan TE Nash.1994. Pelengkap an
Escherichia coliglikolisis mutan olehGiardia lambliaisomerase triosefosfat.
Exp. Parasitol.78:85–92.
239.Murtagh, JJ, Jr., MR Mowatt, CM Lee, FJ Lee, K. Mishima, TE Nash, J.
Moss, dan M. Vaughan.1992. Protein pengikat nukleotida guanin pada
parasit ususGiardia lamblia. Isolasi gen yang mengkode faktor ribosilasi
ADP sekitar 20 kDa. J.Biol. kimia267: 9654–9662.
240.Narcisi, EM, CV Glover, dan M. Fechheimer.1998. Fibrillarin, protein
pengolah RNA pra-ribosom yang dilestarikan dariGiardia. J.Eukaryot.
Mikrobiol.45:105–111.
241.Narcisi, EM, JJ Paulin, dan M. Fechheimer.1994. Kehadiran dan lokalisasi
vinculin diGiardia. J. Parasitol.80:468–473.
242.Nash, TE, dan A.Aggarwal.1986. Sitotoksisitas antibodi monoklonal
terhadap subset dariGiardiaisolat. J. Imunol.136:2628–2632.
243.Nash, TE, A. Aggarwal, RD Adam, JT Conrad, and JW Merritt, Jr. 1988.
Variasi antigenik padaGiardia lamblia. J. Imunol.141:636–641.
244.Nash, TE, SM Banks, DW Alling, JW Merritt, Jr., dan JT Conrad. 1990.
Frekuensi varian antigen diGiardia lamblia. Exp. Parasitol. 71:415–421.
BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 473
245.Nash, TE, JT Conrad, dan JW Merritt, Jr.1990. Varian epitop spesifik
Giardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.42:125–132.
246.Nash, TE, JT Conrad, dan MR Mowatt.1995.Giardia lamblia: identifikasi
dan karakterisasi keluarga gen protein permukaan varian-spesifik.
J.Eukaryot. Mikrobiol.42:604–609.
247.Nash, TE, FD Gillin, dan PD Smith.1983. Produk ekskresi-sekretori dari
Giardia lamblia. J. Imunol.131:2004–2010.
248.Nash, TE, DA Herrington, MM Levine, JT Conrad, dan JW Merritt, Jr.
1990. Variasi antigenik dariGiardia lambliapada infeksi manusia
eksperimental. J. Imunol.144:4362–4369.
249.Nash, TE, DA Herrington, GA Losonsky, dan MM Levine.1987.
Eksperimen infeksi manusia denganGiardia lamblia. J. Menginfeksi. Dis.
156: 974–984.
250.Nash, TE, dan DB Keister.1985. Perbedaan produk ekskretoris-sekretoris
dan antigen permukaan di antara 19 isolatGiardia. J. Menginfeksi. Dis.
152:1166–1171.
251.Nash, TE, T. McCutchan, D. Keister, JB Dame, JD Conrad, dan FD Gillin.
1985. Analisis restriksi-endonuklease DNA dari 15Giardia isolat yang
diperoleh dari manusia dan hewan. J. Menginfeksi. Dis.152:64–73.
252.Nash, TE, JW Merritt, Jr., dan JT Conrad.1991. Keragaman isolat dan
epitop dalam kerentananGiardia lambliauntuk protease usus. Menulari.
Imun.59:1334–1340.
253.Nash, TE, dan MR Mowatt.1992. Karakterisasi aGiardia lamblia varian-
spesifik permukaan protein (VSP) gen dari isolat GS/M dan perkiraan
ukuran repertoar gen VSP. Mol. Biokimia. Parasitol.51:219–227.
254.Nash, TE, dan MR Mowatt.1993. Protein permukaan varian-spesifik dari Giardia lamblia
adalah protein pengikat seng. Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat90: 5489–5483.
255.Nevalainen, L., I. Hrdy, dan M. Müller.1996. Urutan aGiardia lamblia
pengkodean gen untuk enzim glikolitik, piruvat, fosfat dikinase. Mol.
Biokimia. Parasitol.77:217–223.
256.Niu, XH, T. Hartshorne, XY He, dan N. Agabian.1994. Karakterisasi RNA
nuklir kecil diduga dariGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.66:49–57.
257.Nohria, A., RA Alonso, dan DA Peattie.1992. Identifikasi dan karakterisasi
gen gamma-giardin dan gen gamma-giardin dariGiardia lamblia. Mol.
Biokimia. Parasitol.56:27–37.
258.Nygaard, T., CC Bennett, G. Grossman, MR Edwards, dan PJ Schofield.
1994. Penghabisan alanin olehGiardia intestinalis. Mol. Biokimia.
Parasitol.64:145–152.
259.O'Handley, RM, ME Olson, D. Fraser, P. Adams, and RC Thompson. 2000.
Prevalensi dan karakterisasi genotipikGiardiapada anak sapi perah dari
Australia Barat dan Kanada Barat. Dokter hewan. Parasitol.90:193–200.
260.Ortega, YR, dan RD Adam.1997.Giardia: ikhtisar dan pembaruan. Klinik.
Menulari. Dis.25:545–549.
261.Page, JP, NR Munagala, and CC Wang.1999. Titik mutasi pada guanin
fosforibosiltransferase dariGiardia lambliamemodulasi pengikatan
pirofosfat dan katalisis enzim. eur. J. Biochem.259:565–571.
262.Paget, TA, EL Jarroll, P. Manning, DG Lindmark, dan D. Lloyd.1989.
Respirasi pada kista dan trofozoit dariGiardia muris. J. Gen. Mikrobiol.135:
145–154.
263.Paget, TA, ML Kelly, EL Jarroll, DG Lindmark, dan D. Lloyd.1993.
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
Pengaruh oksigen pada fermentasi padaGiardia lamblia. Mol. Biokimia.
Parasitol.57:65–71.
264.Paget, TA, PT Macechko, dan EL Jarroll.1998. Perubahan metabolisme pada
Giardia intestinalisselama diferensiasi. J. Parasitol.84:222–226.
265.Paget, TA, MH Raynor, DW Shipp, dan D. Lloyd.1990.Giardia lamblia
menghasilkan alanin secara anaerob tetapi tidak dengan adanya oksigen.
Mol. Biokimia. Parasitol.42:63–67.
266.Papanastasiou, P., T. Bruderer, Y. Li, C. Bommeli, dan P. Köhler.1997.
Struktur primer dan sifat biokimia dari protein permukaan varian-spesifik
Giardia. Mol. Biokimia. Parasitol.86:13–27.
267.Papanastasiou, P., A. Hiltpold, C. Bommeli, dan P. Köhler.1996.
Pelepasan varian protein permukaanGiardiake isoform larutnya dimediasi
oleh pembelahan selektif dari domain terminal karboksi yang
dilestarikan. Biokimia35:10143–10148.
268.Papanastasiou, P., MJ McConville, J. Ralton, dan P. Köhler.1997. Protein
permukaan varian-spesifik dariGiardia, VSP4A1, adalah protein glikosilasi
dan palmitoylasi. Biokimia. J.322:49–56.
269.Parenti, DM1989. Karakterisasi proteinase tiol padaGiardia lamblia. J.
Menginfeksi. Dis.160:1076–1080.
270.Park, JH, PJ Schofield, dan MR Edwards.1997.Giardia intestinalis: pemulihan volume
sebagai respons terhadap pembengkakan sel. Exp. Parasitol.86:19–28.
271.Park, JH, PJ Schofield, dan MR Edwards.1997. Piruvat kinase hadir di
Giardia intestinalis. Exp. Parasitol.87:153–156.
272.Park, JH, PJ Schofield, dan MR Edwards.1998.Giardia intestinalis:
karakterisasi glutamat dehidrogenase yang bergantung pada NADP. Exp.
Parasitol.88:131–138.
273.Peattie, DA, RA Alonso, A. Hein, dan JP Caulfield.1989. Lokalisasi
ultrastruktur giardin ke tepi mikroribbon cakramGiarida lambliadan
urutan protein nukleotida dan deduksi alfa giardin. J. Sel Biol.109:2323–
2335.
474 ADAM
274.Phillips, NF, dan Z.Li.1995. Mekanisme kinetik dari fosfofruktokinase yang
bergantung pada pirofosfat dariGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.
73:43–51.
275.Pimenta, PF, PP da Silva, dan TE Nash.1991. Varian permukaan antigen
dariGiardia lambliaberhubungan dengan adanya lapisan sel yang tebal:
survei imunositokimia sayatan tipis dan label fraktur. Menulari. Imun.59:
3989–3996.
276.Prescot, DM1994. DNA protozoa bersilia. Mikrobiol. Putaran. 58:233–267.
277.Proctor, EM, JL Isaac-Renton, J. Boyd, Q. Wong, dan WR Bowie. 1989.
Analisis isoenzim isolat manusia dan hewanGiardia duodenalisdari British
Columbia, Kanada. Saya. J. Trop. Medi Hyg.41:411–415.
278.Que, X., SG Svärd, TC Meng, ML Hetsko, SB Aley, dan FD Gillin. 1996.
Transkrip yang diatur secara perkembangan dan bukti pemrosesan
mRNA diferensial diGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.81:101–110.
279.Reeves, RE, DJ Selatan, HJ Blytt, dan LG Warren.1974. Pirofosfat:D
-fruktosa 6-fosfat 1-fosfotransferase. Enzim baru dengan fungsi glikolitik
6-fosfofruktokinase. J.Biol. kimia249:7737– 7741.
280.Reeves, RE, LG Warren, B. Susskind, dan HS Lo.1977. Jalur piruvat-ke-
asetat yang menghemat energi diEntamoeba histolytica. Sintase piruvat
dan tiokinase asetat baru. J.Biol. kimia252:726–731.
281.Reiner, DS, H. Douglas, dan FD Gillin.1989. Identifikasi dan lokalisasi
antigen spesifik kistaGiardia lamblia. Menulari. Imun.57:963– 968.
282.Reiner, DS, M. McCaffery, dan FD Gillin.1990. Penyortiran protein
dinding kista ke jalur sekresi yang diatur selama diferensiasi eukariota
primitif,Giardia lamblia. eur. J. Sel Biol.53:142–153.
283.Reiner, DS, CS Wang, dan FD Gillin.1986. Susu manusia membunuhGiardia lamblia
dengan menghasilkan produk lipolitik beracun. J. Menginfeksi. Dis.154:825–832.
284.Riley, DE, dan JN Krieger.1995. Analisis molekuler dan filogenetik dari urutan
keluarga kinase yang bergantung pada siklin (CDK) yang diamplifikasi PCR dari
perwakilan garis keturunan eukariota paling awal yang tersedia. J.Mol. Evol.
41:407–413.
285.Roger, AJ, HG Morrison, dan ML Sogin.1999. Struktur primer dan
hubungan filogenetik gen malat dehidrogenase dariGiardia lamblia.
J.Mol. Evol.48:750–755.
286.Roger, AJ, SG Svärd, J. Tovar, CG Clark, MW Smith, FD Gillin, and ML
Sogin.1998. Gen chaperonin 60 mirip mitokondria diGiardia lamblia: bukti
bahwa diplomonad pernah memiliki endosimbion yang terkait dengan
nenek moyang mitokondria. Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat95:
229–234.
287.Rozario, C., L. Morin, AJ Roger, MW Smith, dan M. Müller.1996. Struktur
primer dan hubungan filogenetik dari gen gliseraldehida-3-fosfat
dehidrogenase dari flagelata diplomonad yang hidup bebas dan parasit.
J.Eukaryot. Mikrobiol.43:330–340.
288.Rozario, C., dan M. Müller.1995. Struktur primer dari gen diduga adenilat
kinaseGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.71:279–283.
289.Rozario, C., MW Smith, dan M. Müller.1995. Urutan primer dari gen
fosfofruktokinase terkait pirofosfat diduga dariGiardia lamblia. Biochim.
Biofisika. Acta1260:218–222.
290.Rudenko, G., M. Cross, dan P. Borst.1998. Mengubah akhir: variasi
antigenik diatur pada telomer trypanosoma Afrika. Tren Mikrobiol.6:113–
116.
291.Sarafis, K., dan J. Isaac-Renton.1993. Elektroforesis gel medan pulsa
sebagai metode biotypingGiardia duodenalis. Saya. J. Trop. Medi Hyg. 48:
134–144.
292.Sánchez, LB1998. Aldehyde dehydrogenase (CoA-acetylating) dan
mekanisme pembentukan etanol pada protista amitokondriat,Giardia
lamblia. Lengkungan. Biokimia. Biofisika.354:57–64.
293.Sánchez, LB, MY Galperin, dan M. Müller.2000. Acetyl-CoA sintetase dari
eukariota amitochondriateGiardia lambliamilik superfamili asil-CoA
sintetase (pembentuk nukleosida difosfat) yang baru dikenal. J.Biol. kimia
275:5794–5803.
294.Sánchez, LB, T. Hashimoto, dan M. Müller.1996. Urutan gen enzim malat
Giardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.82:145–151.
295.Sánchez, LB, HG Morrison, ML Sogin, dan M. Müller.1999. Kloning dan
pengurutan gen asetil-KoA sintetase (pembentuk ADP) dari protista
amitokondriat,Giardia lamblia. Gen233:225–231.
296.Schimmang, T., D. Tollervey, H. Kern, R. Frank, dan EC Hurt.1989. Protein nukleolar
ragi yang terkait dengan fibrillarin mamalia dikaitkan dengan RNA nukleolus kecil dan
sangat penting untuk kelangsungan hidup. EMBO J.8:4015–4024.
297.Schofield, PJ, M. Costello, MR Edwards, dan WJ O'Sullivan.1990. Jalur
arginin dihidrolase hadir diGiardia intestinalis. Int. J. Parasitol.20:697–699.
298.Schofield, PJ, MR Edwards, G. Grossman, dan EA Tutticci.1995. Aktivitas
pertukaran asam amino transporter alaninGiardia intestinalis. Exp.
Parasitol.80:124–132.
299.Schofield, PJ, MR Edwards, dan P. Kranz.1991. Metabolisme glukosa pada
Giardia intestinalis. Mol. Biokimia. Parasitol.45:39–47.
300.Schofield, PJ, MR Edwards, J. Matthews, dan JR Wilson.1992. The
CLIN. MICROBIOL. REV.
jalur katabolisme arginin diGiardia intestinalis. Mol. Biokimia. Parasitol.51:
29–36.
301.Schupp, DG, MM Januschka, LA Sherlock, HH Stibbs, EA Meyer,
WJ Bemrick, dan SL Erlandsen.1988. Produksi layakGiardia kista in vitro:
penentuan dengan pewarnaan pewarna fluorogenik, eksistasi, dan
infektivitas hewan pada tikus dan gerbil Mongolia. Gastroenterologi 95:1–
10.
302.Sepp, T., AL Wang, dan CC Wang.1994. Kebal GiardiavirusGiardia lamblia
tidak memiliki reseptor virus pada permukaan membran sel. J.Virol. 68:
1426–1431.
303.Shi, W., NR Munagala, CC Wang, CM Li, PC Tyler, RH Furneaux,
C.Grubmeyer, VL Schramm, dan SC Almo.2000. Struktur kristal dari
Giardia lambliaguanin fosforibosiltransferase pada 1,75 Å. Biokimia 39:
6781–6790.
304.Simon, CE1922. Sebuah kritik terhadap giardiasis manusia yang diduga berasal dari
hewan pengerat. Saya. J. Hyg.2:406–434.
305.Penyanyi, SM, J. Yee, dan TE Nash.1998. Pemeliharaan episomal dan
terintegrasi DNA asing diGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol. 92:59–
69.
306.Smith, PD, FD Gillin, NA Kaushal, dan TE Nash.1982. Analisis antigenik
dariGiardia lambliadari Afghanistan, Puerto Rico, Ekuador, dan Oregon.
Menulari. Imun.36:714–719.
307.Smith, PD, FD Gillin, WM Spira, dan TE Nash.1982. Giardiasis kronis: studi
tentang sensitivitas obat, produksi toksin, dan respons imun pejamu.
Gastroenterologi83:797–803.
308.Sogin, ML, JH Gunderson, HJ Elwood, RA Alonso, dan DA Peattie.1989.
Arti filogenetik dari konsep kerajaan: RNA ribosom yang tidak biasa dari
Giardia lamblia. Sains243:75–77.
309.Soltys, BJ, M. Falah, dan RS Gupta.1996. Identifikasi retikulum endoplasma pada
eukariota primitifGiardia lambliamenggunakan mikroskop cryoelectron dan
antibodi terhadap Bip. J. Sel Sci.109:1909–1917.
310.Soltys, BJ, dan RS Gupta.1994. Mikroskop imunoelektronGiardia lamblia
sitoskeleton menggunakan antibodi terhadap acetylated alpha-tubulin.
J.Eukaryot. Mikrobiol.41:625–632.
311.Sommer, JM, H.Ma, dan CC Wang.1996. Kloning, ekspresi dan
karakterisasi phosphoribosyltransferase guanin yang tidak biasa dari
Giardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.78:185–193.
312.Steimle, PA, DG Lindmark, dan EL Jarroll.1997. Pemurnian dan
karakterisasi isomerase glukosamin 6-fosfat yang diinduksi encystment di
Giardia. Mol. Biokimia. Parasitol.84:149–153.
313.Stevens, TL, GR Gibson, R. Adam, J. Maier, M. Allison-Ennis, and S. Das.
1997. Penyerapan dan lokalisasi seluler lipid eksogen olehGiardia lamblia,
eukariota primitif. Exp. Parasitol.86:133–143.
314.Stiles, CW1902. Jenis spesies genera tertentu dari flagelata parasit,
khususnya genera Grassi tahun 1879 dan 1881. Zool. Anz.25:689
315.Stiller, JW, dan BD Hall.2000. Atraksi cabang panjang dan model rDNA
evolusi eukariotik awal. Mol. Biol. Evol.16:1270–1279.
316.Strandën, AM, J. Eckert, dan P. Köhler.1990. Karakterisasi elektroforesis
Giardiadiisolasi dari manusia, sapi, domba, dan anjing di Swiss. J.
Parasitol.76:660–668.
317.Subramanian, AB, S. Navarro, RA Carrasco, M. Marti, and S. Das. 2000.
Peran inositol eksogen dan fosfatidilinositol dalam sintesis jangkar
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
glikosilfosfatidlinositol GP49 olehGiardia lamblia. Biochim. Biofisika. Acta
1483:69–80.
318.Sun, CH, CF Chou, dan JH Tai.1998. Transfeksi DNA yang stabil dari
patogen protozoa primitifGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol. 92:
123–132.
319.Sun, CH, dan JH Tai.1999. Identifikasi dan karakterisasi promotor gen ran
pada patogen protozoaGiardia lamblia. J.Biol. kimia 274:19699–19706.
320.Svärd, SG, TC Meng, ML Hetsko, JM McCaffery, dan FD Gillin. 1998.
Variasi antigen permukaan terkait diferensiasi pada eukariota purba
Giardia lamblia. Mol. Mikrobiol.30:979–989.
321.Svärd, SG, C. Rafferty, JM McCaffery, MW Smith, DS Reiner, dan
FD Gillin.1999. Gen reseptor partikel pengenal sinyal dari eukariota yang
menyimpang awal,Giardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.98: 253–264.
322.Tai, JH, SC Chang, CF Chou, and SJ Ong.1996. Pemisahan dan
karakterisasi dua giardiavirus terkait dalam protozoa parasit Giardia
lamblia. Ilmu pengetahuan virus216:124–132.
323.Tai, JH, SJ Ong, SC Chang, and HM Su.1993. Giardiavirus masuk Giardia
lambliaTrofozoit WB melalui endositosis. Exp. Parasitol.76:165– 174.
324.Tibayrene, M., F. Kjellberg, dan FJ Ayala.1990. Sebuah teori klonal
protozoa parasit: struktur populasiEntamoeba, Giardia, Leishmania,
Naegleria, Plasmodium, Trichomonas, DanTripanosomadan konsekuensi
medis dan taksonomi mereka. Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat
87: 2414–2418.
325.Tollervey, D., H. Lehtonen, R. Jansen, H. Kern, dan EC Hurt.1993. Mutasi
yang peka terhadap suhu menunjukkan peran ragi fibrillarin dalam
pemrosesan pra-rRNA, metilasi pra-rRNA, dan perakitan ribosom. Sel 72:
443–457.
VOL. 14, 2001
326.Townson, SM, GR Hanson, JA Upcroft, dan P. Upcroft.1994. Sebuah
ferredoxin murni dariGiardia duodenalis. eur. J. Biochem.220:439–446.
327.Townson, SM, JA Upcroft, dan P. Upcroft.1996. Karakterisasi dan
pemurnian piruvat:feredoksin oksidoreduktase dariGiardia duodenalis.
Mol. Biokimia. Parasitol.79:183–193.
328.Upcroft, JA, PF Boreham, dan P. Upcroft.1989. Variasi geografis diGiardia
kariotipe. Int. J. Parasitol.19:519–527.
329.Upcroft, JA, A. Healey, dan P. Upcroft.1993. Duplikasi kromosom pada
Giardia duodenalis. Int. J. Parasitol.23:609–616.
330.Upcroft, P., N. Chen, dan JA Upcroft.1997. Organisasi telomerik dari keluarga
gen toksin yang bervariasi dan dapat diinduksi pada eukariota kunoGiardia
duodenalis. Genom Res.7:37–46.
331.van Keulen, H., DE Feely, PT Macechko, EL Jarroll, dan SL Erlandsen.
1998. Urutan dariGiardiarRNA subunit kecil menunjukkan bahwa tikus
dan muskrat diparasit oleh spesies unikMikroti Giardia. J. Parasitol.84:
294–300.
332.van Keulen, H., RR Gutell, MA Gates, SR Campbell, SL Erlandsen,
EL Jarroll, J. Kulda, dan EA Meyer.1993. Posisi filogenetik Diplomonadida
yang unik berdasarkan urutan RNA ribosom subunit kecil yang lengkap
dariGiardia ardeae, G. muris, G. duodenalisDanHeksamita sp. FASEB J.7:
223–231.
333.van Keulen, H., WL Homan, SL Erlandsen, and EL Jarroll.1995. Urutan tanda
tangan tiga nukleotida dalam rRNA subunit kecil membelah manusia Giardia
dalam dua genotipe yang berbeda. J.Eukaryot. Mikrobiol.42:392–394.
334.van Keulen, H., PA Steimle, DA Bulik, RK Borowiak, and EL Jarroll.1998.
Kloning dua didugaGiardia lambliagen isomerase glukosamin 6-fosfat
hanya satu yang diaktifkan secara transkripsi selama encystment.
J.Eukaryot. Mikrobiol.45:637–642.
335.Van Leeuwen, F., MC Taylor, A. Mondragon, H. Moreau, W. Gibson, R. Kieft,
dan P. Borst.1998. beta-D-Glucosyl-hydroxymethyluracil adalah modifikasi DNA
yang dilestarikan dalam protozoa kinetoplastid dan berlimpah di telomere
mereka. Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat95:2366–2371.
336.Vitti, GF, WJ O'Sullivan, dan AM Gero.1987. Biosintesis uridin 59-
monofosfat diGiardia lamblia. Int. J. Parasitol.17:805–812.
337.Wang, AL, dan CC Wang.1986. Penemuan virus RNA untai ganda spesifik
diGiardia lamblia. Mol. Biokimia. Parasitol.21:269–276.
338.Wang, AL, HM Yang, KA Shen, and CC Wang.1993. Genom RNA beruntai ganda
Giardiavirus mengkode polipeptida kapsid dan protein fusi mirip gagpol
dengan pergeseran bingkai terjemahan. Proses Natl. Acad. Sains. Amerika
Serikat90:8595–8599.
339.Wang, CC, dan S. Aldritt.1983. Jaringan penyelamatan purin diGiardia lamblia.
J.Exp. Kedokteran158:1703–1712.
340.Wang, CC, dan HW Cheng.1984. Penyelamatan nukleosida pirimidin oleh
Trichomonas vaginalis. Mol. Biokimia. Parasitol.10:171–184.
341.Wang, CC, R. Verham, SF Tzeng, S. Aldritt, dan HW Cheng.1983. Metabolisme
pirimidin dijanin Tritrikomonas. Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat 80:
2564–2568.
342.Ward, HD, AV Kane, E. Ortega-Barria, GT Keusch, dan ME Pereira.1990.
Identifikasi yang diatur secara perkembanganGiardia lamblia antigen
kista menggunakan GCSA-1, antibodi monoklonal khusus kista. Mol.
Mikrobiol.4:2095–2102.
343.Ward, HD, BI Lev, AV Kane, GT Keusch, dan ME Pereira.1987. Identifikasi
dan karakterisasi taglin, pengikat manosa 6-fosfat, lektin aktif tripsin dari
Giardia lamblia. Biokimia26:8669– 8675.
344.Ward, W., L. Alvarado, ND Rawlings, JC Engel, C. Franklin, dan JH
McKerrow.1997. Enzim primitif untuk sel primitif: protease yang
diperlukan untuk eksistasiGiardia. Sel89:437–444.
345.Weber, K., A. Schneider, N. Muller, dan U. Plessmann.1996. Poliglisilasi
tubulin pada diplomonadGiardia lamblia, salah satu eukariota tertua. FEB
Lett.393:27–30.
346.Weber, K., A. Schneider, S. Westermann, N. Muller, dan U. Plessmann.
BIOLOGI DARIGIARDIA LAMBLIA 475
1997. Modifikasi pascatranslasi alfa dan beta-tubulin diGiardia lamblia,
eukariota kuno. FEB Lett.419:87–91.
347.Welch, DM, dan M. Meselson.2000. Bukti evolusi rotifera bdelloid tanpa
reproduksi seksual atau pertukaran genetik. Sains288: 1211–1215.
348.Werries, E., A. Franz, H. Hippe, and Y. Acil.1991. Pemurnian dan
spesifisitas substrat dari dua proteinase sisteinGiardia lamblia. J.
Protozoa.38:378–383.
349.Putih, TC, dan CC Wang.1990. Aktivitas RNA polimerase dependen RNA
terkait dengan virus RNA beruntai gandaGiardia lamblia. Asam Nukleat
Res.18:553–559.
350.Whittaker, RH, dan L. Margulis.1978. Klasifikasi protista dan kingdom
organisme. Biosistem10:3–18.
351.Wiesehahn, GP, EL Jarroll, DG Lindmark, EA Meyer, dan LM Hallick.
1984.Giardia lamblia: analisis autoradiografi replikasi nuklir. Exp.
Parasitol.58:94–100.
352.Williams, K., PN Lowe, dan PF Leadlay.1987. Pemurnian dan
karakterisasi piruvat:feredoksin oksidoreduktase dari protozoa anaerob
Trichomonas vaginalis. Biokimia. J.246:529–536.
353.Woese, CR, O. Kandler, dan ML Wheelis.1990. Menuju sistem alami
organisme: proposal untuk domainArkea, Bakteri, DanEucarya. Proses
Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat87:4576–4579.
354.Wu, G., AG McArthur, A. Fiser, DA Salidouble, and ML Sogin.2000. Inti
histon dari protista amitokondriat,Giardia lamblia. Mol. Biol. Evol.17:
1156–1163.
355.Yang, Y., dan RD Adam.1995. SekelompokGiardia lambliavarian-spesifik
permukaan protein (VSP) gen dengan hampir identik 59daerah. Mol. Biokimia.
Parasitol.75:69–74.
356.Yang, YM, dan RD Adam.1994. Ekspresi spesifik alel dari varian protein
permukaan spesifik (VSP).Giardia lamblia. Asam Nukleat Res.22: 2102–
2108.
357.Yang, YM, dan RD Adam.1995. Analisis keluarga yang mengandung pengulangan
Giardia lambliagen protein permukaan varian-spesifik: keanekaragaman melalui
duplikasi dan divergensi gen. J.Eukaryot. Mikrobiol.42:439–444.
358.Yang, YM, Y. Ortega, C. Sterling, dan RD Adam.1994.Giardia lamblia trofozoit
mengandung banyak alel dari gen protein permukaan varian-spesifik dengan
pengulangan tandem 105-pasangan basa. Mol. Biokimia. Parasitol.68:267– 276.
359.Yee, J., dan PP Dennis.1992. Isolasi dan karakterisasi gen dehidrogenase
glutamat dependen NADP dari eukariota primitif Giardia lamblia. J.Biol.
kimia267:7539–7544.
360.Yee, J., MR Mowatt, PP Dennis, dan TE Nash.2000. Analisis transkripsi
gen glutamat dehidrogenase pada eukariota primitif, Giardia lamblia.
Identifikasi promotor gen primordial. J.Biol. kimia275:11432–11439.
361.Yee, J., dan TE Nash.1995. Transfeksi transien dan ekspresi kunang-kunang
luciferase diGiardia lamblia. Proses Natl. Acad. Sains. Amerika Serikat92:5615–
5619.
362.Yu, D., CC Wang, dan AL Wang.1995. Pematangan protein kapsid giardiavirus
melibatkan pemrosesan proteolitik posttranslasional oleh protease sistein.
J.Virol.69:2825–2830.
Diunduh dari https://journals.asm.org/journal/cmr pada 16 Maret 2023 oleh 202.58.197.169.
363.Yu, DC, AL Wang, CW Botka, and CC Wang.1998. Sintesis protein pada
Giardia lambliamungkin melibatkan interaksi antara kotak hilir (DB)
dalam mRNA dan anti-DB dalam RNA ribosom mirip 16S. Mol. Biokimia.
Parasitol.96:151–165.
364.Yu, DC, AL Wang, dan CC Wang.1996. Amplifikasi, ekspresi, dan
pengemasan gen asing oleh giardiavirus diGiardia lamblia. J.Virol. 70:
8752–8757.
365.Yu, DC, AL Wang, CH Wu, and CC Wang.1995. Ekspresi kunang-kunang
luciferase yang dimediasi virus dalam protozoa parasitGiardia lamblia.
Mol. Sel. Biol.15:4867–4872.