UJI TOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU JERUK (Scurrula ferrugenia (Jack)
Danser) TERHADAP LARVA UDANG Artemia salina L. SERTA IDENTIFIKASI
GOLONGAN SENYAWA METABOLIT SEKUNDER
Program Studi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Udayana
Jalan Kampus Unud-Jimbaran, Jimbaran-Bali, Indonesia
*Email: novitayulandari99@gmail.com
ABSTRAK
Benalu jeruk, Scurrula ferrugenia (Jack) Danser, dapat dimanfaatkan untuk pengobatan kanker atau
sitotoksik. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui toksisitas ekstrak etanol daun benalu jeruk (Scurrula
ferruginea (Jack) Danser) terhadap larva udang Artemia salina serta kandungan golongan senyawa metabolit
sekunder dengan metode skrining fitokimia. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi dan partisi, Uji
toksisitas dilakukan dengan metode Brine Shirmp Lethality Test (BSLT), dan skrining fitokimia dilakukan dengan
menggunakan beberapa pereaksi pendekteksi golongan senyawa. Maserasi 1 kg serbuk daun benalu jeruk
menghasilkan ekstrak pekat etanol sebesar 49,74 gram. Proses partisi 10 gram ekstrak pekat etanol menghasilkan
5,3838 gram ekstrak pekat n-heksana, 2,2239 gram ekstrak pekat etil asetat, 1,3012 gram ekstrak pekat n-butanol
dan 1,0911 gram ekstrak air. Hasil uji toksisitas ekstrak etanol, n-heksana, etil asetat, n-butanol dan air secara
berturut-turut dengan nilai LC50 162,7565; 83,3017; 147,0026; 660,2279; dan 921, 6679 ppm. Skrining fitokimia
menunjukkan hasil positif terhadap metabolit sekunder alkaloid, saponin, steroid, flavonoid, dan tanin.
Kata kunci: benalu jeruk (Scurrula ferrugenia (Jack) Danser, toksisitas, uji fitokimia
ABSTRACT
The citrus parasite, Scurrula ferrugenia (Jack) Danser, can be used for the treatment of cancer or
cytotoxic. This study aimed to determine the toxicity of the ethanol extract of citrus parasite leaves (Scurrula
ferruginea (Jack) Danser) against shrimp larvae of Artemia salina and the content of secondary metabolite
compounds using phytochemical screening methods. The extraction was carried out by the maceration and
partitioning methods, the toxicity test by the Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) and phytochemical screening
by using several detection reagents. Maceration of 1 kg of citrus parasite leaves yielded a concentrated ethanol
extract of 49.74 grams. The partition process of 10 grams of concentrated ethanol extract produced 5.3838 grams
of concentrated n-hexane extract, 2.2239 grams of concentrated ethyl acetate extract, 1.3012 grams of
concentrated n-butanol extract and 1.0911 grams of water extract. The toxicity test for ethanol, n-hexane, ethyl
acetate, n-butanol and water extracts resulted in LC50 values of 162.7565; 83.3017; 147.0026; 660.2279; and
921.6679 ppm, respectively. Phytochemical screening showed positive results for secondary metabolites of
alkaloids, saponins, steroids, flavonoids, and tannins.
Keywords: citrus parasite (Scurrula ferrugenia (Jack) Danser, toxicity, phytochemical test
129
JURNAL KIMIA (JOURNAL OF CHEMISTRY) 17 (2), JULI 2023: 129 - 136
secara umum dikembangkan oleh masyarakat labu ukur, erlenmeyer, klem, statif, gelas beker,
untuk mengobati penyakit diantaranya sebagai pipet tetes, pipet mikro, pipet ukur, plat tetes,
obat amandel, batuk, campak, kanker, serta luka kertas saring, penjepit, botol reagen, botol vial,
bakar. Efek klinis benalu diduga karena adanya botol untuk maserasi, aquarium khusus BSLT,
senyawa bioaktif yang terkandung didalamnya. aerator, tabung reaksi, penguap putar vakum
Senyawa tersebut adalah flavonoid, steroid, (rotary vacuum evaporator).
terpenoid, alkaloid, tanin, dan saponin yang
dapat mengurangi kerusakan sel (Pitoyo, 1996). Cara Kerja
Benalu dapat digunakan sebagai Penyiapan Bahan
antikanker. Hasil penelitian yang dilakukan Daun benalu jeruk yang telah diperoleh
Risky et al, (2016) melaporkan bahwa ekstrak selanjutnya dibersihkan dan dipotong kecil-
n-heksana batang benalu jeruk (Dendrophthoe kecil lalu dikering angin(tidak terpapar sinar
pentandara (L.) Miq) mengandung golongan matahari secara lagsung). Daun benalu yang
senyawa steroid dan bersifat toksik terhadap sudah kering diblender hingga diperoleh serbuk
larva udang dengan nilai LC50 256,455 ppm. halus.
Rini et al, (2019) melaporkan bahwa ekstrak Uji Kadar Air
metanol daun benalu duku hijau (Dendrophthoe Analisis kadar air dilakukan dengan
pentandara (L.) Miq) dan daun benalu duku menggunakan oven. Cawan porselin kosong
merah (Scurrula ferruginea (Jack) Danser) dipanaskan pada suhu 105oC selama 60 menit
bersifat toksik terhadap larva udang dengan dan ditimbang. Pemanasan diulang beberapa
nilai LC50 masing-masing 13,95 ppm dan 22,37 kali hingga mencapai berat konstan (A). serbuk
ppm. daun benalu jeruk dimasukkan sebanyak 2 gram
Dari berbagai jenis benalu, terdapat lalu ditimbang (B), kemudian dipanaskan
daun benalu lain yang masih belum diteliti kembali hingga berat konstan (C). Presentase
toksisitasnya yakni daun benalu jeruk (Scurrula kadar air maksimal pada sampel kering sebesar
ferruginea (Jack) Danser). Penelitian ini 10%.
nantinya dapat memberikan informasi
mengenai toksisitas terhadap ekstrak daun 𝐵−𝐶
% 𝐾𝑎𝑑𝑎𝑟 𝐴𝑖𝑟 = 𝐵−𝐴 𝑥 100% (1)
benalu jeruk terhadap larva udang serta
kandungan golongan metabolit sekundernya
dengan metode skrining fitokimia. Keterangan:
A=Berat cawan kosong
MATERI DAN METODE B=Berat cawan + sampel sebelum dipanaskan
C=Berat cawan + sampel setelah dipanaskan
Bahan
Bahan penelitian yang digunakan adalah Ekstraksi daun benalu jeruk (Scurrula
daun benalu jeruk (Scurrula ferruginea (Jack) ferrugenia (Jack) Danser)
Danser) yang diperoleh di Desa Plaga, Serbuk kering daun benalu jeruk 1 kg
Kabupaten Badung, Bali. Bahan kimia yang diekstraksi dengan teknik maserasi
digunakan adalah etanol 96%, akuades, n- menggunakan 3 liter etanol 96%. Proses
heksana, etil asetat, n-butanol, air laut, dimetil maserasi dilakukan selama 3 kali pengulangan
sulfoksida (DMSO) konsentrasi 10%, ragi, selama 24 jam (3x24 jam) lalu disaring dengan
asam sulfat pekat, asam asetat anhidrida, kertas saring hingga residu dengan filtrat
merkuri klorida, kalium iodida, iodin, bismut terpisah. Filtrat hasil maserasi kemudian
subnitrat, asam klorida, serbuk magnesium, diuapkan dengan vacum rotary evaporator
dietil eter, asetat anhidrat, besi (III) klorida, dan pada suhu 40oC, hingga diperoleh ekstrak pekat
Larva udang (Artemia salina Leach). etanol dan ditimbang. Ekstrak pekat etanol
kembali dilarutkan menggunakan etanol:air
Peralatan (7:3) kemudian diuapkan kembali hingga etanol
Peralatan yang digunakan dalam habis menguap. Ekstrak air dipartisi dengan n-
penelitian ini adalah pisau, gunting, blender, heksana, etil asetat, dan n-butanol sehingga
ayakan, kaca arloji, mortar, cawan penguap, diperoleh empat ekstrak yakni ekstrak n-
gelas beaker, neraca analitik, spatula, kertas heksana, etil asetat, n-butanol dan air. Keempat
saring, plastik wrap, aluminium foil, corong, ekstrak hasil partisi diuapkan kembali dan
gelas ukur, batang pengaduk, corong pisah, ditimbang.
130
Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Daun Benalu Jeruk (Scurrula Ferrugenia (Jack) Danser) terhadap Larva Udang
Artemia Salina L. serta Identifikasi Golongan Senyawa Metabolit Sekunder
(N. K. N. Yulandari, W. S. Rita, N. L. Rustini)
131
JURNAL KIMIA (JOURNAL OF CHEMISTRY) 17 (2), JULI 2023: 129 - 136
Ekstraksi daun benalu jeruk ekstrak pekat etanol ditunjukkan pada Tabel
Ektraksi daun benalu jeruk menggunakan 4.1.
metode maserasi. Serbuk benalu jeruk sebanyak Tabel 4.1 Hasil Partisi Ekstrak Etanol Daun
1 kg dimaserasi dengan 3 liter etanol (3 x 24 Benalu Jeruk
jam) menghasilkan 49,74 gram ekstrak pekat Jenis Berat Warna Ekstrak
etanol. Proses maserasi dipengaruhi oleh Ekstrak Ekstrak (g)
beberapa faktor diantaranya jenis pelarut, n-Heksana 5,3838 Hijau Pekat
ukuran simplisia, lama proses maserasi, serta Etil asetat 2,2239 Kuning
proses pengadukkan. Saat maserasi zat aktif n-Butanol 1,3012 Kuning
akan larut karena adanya perbedaan konsentrasi kecokelatan
antara larutan zat aktif di dalam sel dengan yang Air 1,0911 Merah Bata
di luar sel, sehingga larutan yang terpekat
didesak keluar. Peristiwa tersebut berulang Uji toksisitas daun benalu jeruk
sehingga terjadi keseimbangan konsentrasi Uji toksisitas daun benalu jeruk
antara larutan di luar sel dan di dalam sel dilakukan dengan Metode Brine Shirmp
(Dadang dan Prijono, 2008). Ekstrak pekat Lethality Test menggunakan larva udang
etanol kembali dilarutkan menggunakan Artemia salina Leach. Uji toksisitas akut
etanol:air (7:3) lalu etanol diuapkan. Hal ini dilakukan selama 24 jam untuk mendeteksi efek
bertujuan untuk mempermudah proses partisi, toksik setelah pemberian zat uji. Efek
apabila saat partisi masih terdapat etanol maka toksiksitas diukur dengan cara menghitung nilai
tidak terjadi pemisahan pada saat dipartisi LC50 (Lethal concentration 50%) atau kematian
dengan etil asetat. Ekstrak n-Heksana diperoleh larva udang pada 50% hewan uji selama 24 jam
paling banyak karena mengandung senyawa pengamatan. Katagori toksisitas berdasarkan
non-polar, sedangkan Ekstrak air paling sedikit nilai LC50 yakni toksik tinggi 0-100 ppm, toksik
disebabkan oleh senyawa polar yang tersisa sedang 100-500 ppm, toksik rendah 500-1000
sangat sedikit. ppm, dan tidak toksik >1000 ppm (Hamidi et
Ekstrak air dipartisi dengan pelarut n- al., 2014). Hasil uji toksisitas daun benalu jeruk
heksana, etil asetat dan n-butanol. Hasil partisi ditunjukkan pada Tabel 4.2.
132
Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Daun Benalu Jeruk (Scurrula Ferrugenia (Jack) Danser) terhadap Larva Udang
Artemia Salina L. serta Identifikasi Golongan Senyawa Metabolit Sekunder
(N. K. N. Yulandari, W. S. Rita, N. L. Rustini)
Berdasarkan uji toksisitas ini diketahui metabolit sekunder yang terdapat pada ekstrak
bahwa ekstrak daun benalu jeruk termasuk pekat etanol dan hasil partisi daun benalu jeruk
kategori toksik karena nilai LC50 kurang dari sebagai senyawa aktif toksik. Hasil skrining
1000 ppm. Sifat toksik diperkirakan disebabkan fitokimia disajikan pada Tabel 4.3 yang
oleh senyawa aktif yang terdapat pada ekstrak menunjukkan ekstrak pekat etanol daun benalu
daun benalu jeruk, namun hasil ekstrak n- jeruk positif terhadap alkaloid, saponin, steroid,
heksana memiliki efek toksisitas lebih besar flavonoid, dan tanin. Tabel 4.4 yang
dibandingkan dengan ekstrak etanol menunjukkan hasil skrining fitokimia pada
diakibatkan aktifitas dari golongan senyawa ekstrak hasil partisi daun benalu jeruk.
kimia dari semua ekstrak. Berdasarkan skrining fitokimia, ekstrak
etanol positif mengadung alkaloid. Reaksi uji
Skrining fitokimia alkaloid dengan pereaksi Meyer disajikan pada
Skrining fitokimia dilakukan dengan Gambar 1 dan reaksi uji alkaloid dengan
beberapa pereaksi guna mengetahui jenis pereaksi Wagner disajikan pada Gambar 2.
I2 + I- I3-
Coklat
+ KI + I2 + I3-
N N
K+
Coklat
Kalium-Alkaloid
endapan
Gambar 1. Reaksi Identifikasi Golongan Gambar 2. Reaksi Identifikasi Golongan
Alkaloid Dengan Pereaksi Meyer Alkaloid Dengan Pereaksi Wagner
(Marliana et al., 2005) (Marliana et al., 2005)
133
JURNAL KIMIA (JOURNAL OF CHEMISTRY) 17 (2), JULI 2023: 129 - 136
OH O
(HgCl2) yang ditambahkan dengan kalium H2O H
iodida berlebih. Pasangan elektron bebas yang CH 2OH
O COOH + OH
134
Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Daun Benalu Jeruk (Scurrula Ferrugenia (Jack) Danser) terhadap Larva Udang
Artemia Salina L. serta Identifikasi Golongan Senyawa Metabolit Sekunder
(N. K. N. Yulandari, W. S. Rita, N. L. Rustini)
DAFTAR PUSTAKA
O O
HCl
Mg + Cl- Dadang dan Prijono, D. 2008. Insektisida
OH OH
O OH
+ Nabati: Prinsip, Pemanfaatan, dan
Flavanol
+
Pengembangan. Departemen Proteksi
O
-
O
Cl-
Tanaman Fakultas Pertanian IPB.
Cl +
OH OH Bandung.
OH
OH Hamidi, M. R., Jovanova, B., and Tatjana, K. P.
Garam flavilium 2014. Toxicological Evaluation of The
merah tua
Plant Product Using Brine Shrimp
Gambar 5. Reaksi Uji Golongan (Artemia salina L.) Model, Journal of
Flavonoid Dengan Pereaksi Wilsatater Pharmaceutical. 60(1): 9-18.
(Maeliana et al., 2005) Harbone, J. B. 1996. Metode Fitokimia
Penuntun Cara Modern Menganalisis
Berdasarkan uji tanin menunjukkan hasil Tumbuhan, a.b. Kosasih Padmawinata
positif setelah terbentuknya warna hitam. Hal dan Imam Sudiro, Edisi II, ITB,
ini terjadi karena adanya reaksi besi (III) Bandung.
klorida melibatkan struktur tanin yang Ikalinus, R., Widyastuti, S. K., dan Setiasih,
merupakan senyawa polifenol yang terdapat N.L. E. 2015. Skrining Fitokimia Ekstrak
gugus fenol akan membentuk senyawa Etanol Kulit Batang Kelor (Moringa
kompleks berwarna biru atau hitam kehijauan oleifera). Indonesia Medicus Veterinus.
menunjukkan adanya tanin (Ikalinus et al., 4(1): 71-79.
2015). Reaksi antara tanin dengan besi (III) Illing, I., Safitri, W., dan Erfiana. 2017. Uji
klorida dapat dilihat pada Gambar 6. Hasil uji Fitokimia Buah Dengen, Jurnal
fitokimia yang dilakukan oleh Rizky et al., Dinamika. 1(8): 66-84.
2016 pada batang benalu tanaman jeruk Marliana, S. D., Suryanti, V., dan Suryono.
(Dendrophtoe pentandra (L.) Miq.) 2005. Skrining Fitokimia dan Analisis
mengandung senyawa alkaloid, saponin, Kromatografi Lapis Tipis Komponen
steroid, flavonoid dan tannin. Kimia Buah Labu Siam (Sechium edule
OH
Jack. Swaetz.) dalam Ekstrak Etanol,
OH
HO O O OH Jurnal Biofarmasi, Jurusan Kimia
OH Fe
- FMIPA, Universitas Sebela, Surakarta.
HO OH
COOH O COOH
3(1): 26-33.
FeCl3 + 3HCl + Mohsen M., Neda A., Eko S., Fadzilah A. A.,
HO OH
COOH Saravana K. J., Shajarahtunnur J., and
COOH
Javad H. A. 2016. Antioxidant Activity
and ROS-Dependent Apoptotic Effect
Gambar 6. Mekanisme Reaksi Uji of Scurrula ferruginea (Jack) Danser
Golongan Tanin Dengan Pereaksi Fecl3 Methanol Extract in Human Breast
(Simaremare, 2014). Cancer Cell MDA-MB-23. Plos One. 1-
36.
SIMPULAN Muryama, K., and Iso, H. 2014. Overview of
the role of antioxidant vitamins as
Ekstrak etanol, n-heksana, etil asetat, n- protection against cardiovascular
butanol, dan air daun benalu jeruk bersifat disease: Implication for aging. In aging:
toksik terhadap larva udang Artemia salina Oxidative Stress and Dietary
Leach dengan nilai LC50 berturut-turut Antioxidants, edited by Preedy, V.R.
162,7565; 83,3018; 147,0026; 660,2279; dan London, UK: Elsevier. pp 213-224.
921,6679 ppm. Kandungan metabolit sekunder Pitoyo. 1996. Benalu Holtikultura:
yang terdapat pada ekstrak daun benalu jeruk Pengendalian dan Pemanfaatan, Trubus,
yakni alkaloid, saponin, steroid, flavonoid, dan Agriwidaya.
tanin.
135
JURNAL KIMIA (JOURNAL OF CHEMISTRY) 17 (2), JULI 2023: 129 - 136
Rini H., Lamek M., Adnyanac I. K., dan Setiabudi, D. A. Tukiran. 2017. Uji Skrining
Partomuan S. 2019. Uji Fenolik Dan Fitokimia Ekstrak Metanol Kulit Batang
Toksisitas (Brine Shrimp Lethality Test) Tumbuhan Klampok Watu (Syzygium
Ektrak Metanol Daun Benalu Duku litorale), Unesa Journal of Chemistry.
Hijau (Dendrohtoe pentandara (L.) 6(3): 155-160.
Miq) Dan Merah (Scurrula ferruginea Simaremare, E. S. 2014. Skrining Fitokimia
(Jack) Danser), Talenta Conference Ekstrak Etanol daun Gatal. Pharmacy,
Series: Science & Technology. 2(1): 84- 11(1): 98-107.
87. SNI 01-2891-1992. 1992. Cara Uji Makanan
Rita, W.S., Swantara, I.M.D., and Sugiantini, dan Minuman. Pusat Standarisasi
N.L. 2019. Anticancer Activity of Industri. Departemen Perindustrian.
Curcuma zedoaria (Berg.) Roscoe Svehla, G, 1985. Analisis Anorganik Kualitatif
Essential Oils Against Myeloma Cell. Mikro dan Semimikro, Edisi Kelima,
Journal Himpunan Kimia Indonesia. Bagian I. Kalman Media Pusaka.
1(1): 23-28. Jakarta.
Rizky, M. A., Rudi, K., dan Partomuan, S. Townsend, N., Nocholas, M., Scarborought, P.,
2016. Isolasi dan Identifikasi Senyawa and Rayner, M. 2015. Cardiovascular
Kimia dari Ekstrak n-Heksana Batang desease in Europe- epimiological
Benalu Tanaman Jeruk (Dendrophtoe update. European Heart Journal.
pentandra (L.)Miq.). Jurnal Kimia 36(40): 2696-2705.
Mulawarman. 14(1): 36-41.
136