See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.

net/publication/340732583

ANALISIS KUALITATIF DAN KUANTITATIF KANDUNGAN SENYAWA KIMIA

DARI EKSTRAK HEKSAN, ASETON, ETANOL DAN AIR DARI BUAH PARE
(Momordica charantia L.)

Preprint · April 2020

DOI: 10.13140/RG.2.2.30013.00487

CITATIONS READS

0 1,575

3 authors, including:

Harrizul Rivai Zikra Azizah

Universitas Andalas Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Padang
211 PUBLICATIONS   239 CITATIONS    22 PUBLICATIONS   18 CITATIONS   

SEE PROFILE SEE PROFILE

Some of the authors of this publication are also working on these related projects:

Analysis of drug using the under area curve method by ultraviolet spectrophotometry View project

Preparation and characterization of microcrystalline cellulose from 'jerami padi' View project

All content following this page was uploaded by Harrizul Rivai on 18 April 2020.

The user has requested enhancement of the downloaded file.

ANALISIS KUALITATIF DAN KUANTITATIF KANDUNGAN SENYAWA KIMIA
DARI EKSTRAK HEKSAN, ASETON, ETANOL DAN AIR DARI BUAH PARE
(Momordica charantia L.)

Harrizul Rivai1), Dola Permata Sari2), Zikra Azizah2)

1)
Fakultas Farmasi Universitas Andalas (UNAND) Padang
2)
Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFARM) Padang
Email: Dolapermatas@gmail.com

ABSTRAK

Penelitian tentang analisis kualitatif dan kuantitatif telah dilakukan terhadap ekstrak
heksan, aseton, etanol dan air dari buah pare (Momordica charantia L.). Penelitian ini
bertujuan untuk menentukan kandungan kimia dan kadar kandungan kimia dari ekstrak
heksan, aseton, etanol dan air dari buah pare. Penelitian ini menggunakan metode ektraksi
yaitu perkolasi untuk pelarut heksan, aseton dan etanol, sedangkan pelarut air menggunakan
metode dekok. Kandungan kimia yang didapatkan yaitu alkaloid dalam ekstrak aseton, dan
flavonoid dalam ekstrak aseton, etanol dan air. Kadar alkaloid total dari ekstrak aseton
terdapat sebesar 0,0306 %, dan kadar flavonoid dari ekstrak aseton, etanol, dan air berturut-
turut sebesar 0,0131 %, 0,0121 % dan 0,033 %.
Kata Kunci: Buah Pare (Momordica charantia L.), Gravimetri, Spektrofotometri Ultraviolet

ABSTRACT

Research on qualitative and quantitative analysis has been carried out on hexane,
acetone, ethanol and water extract from bitter melon (Momordica charantia L.). This study
aims to determine the chemical content and the chemical content of extracts of hexane,
acetone, ethanol and water from bitter melon fruit. The study used the percolation extraction
method for hexane, acetone and ethanol solvents, while the water solvent used the decoct
method. The chemical content obtained is alkaloids in acetone extract, and flavonoids in
acetone, ethanol and water extracts. The total alkaloid content of acetone extract was 0.0306
%, and the flavonoid content of acetone, ethanol and water extracts were 0.0131 %, 0.0121 %
and 0.033 % respectively.
Keywords:Bitter Melon(Momordica charantiaL.), Gravimetry,UltravioletSpectrophotometry

PENDAHULUAN dan bermanfaat sebagai antidiabetes

Pare (Momordica charantia L.)
merupakan tanaman yang tergolong ke
dalam famili cucurbitaceae yang dikenal
sebagai pare dan karela. Buah pare
digunakan dalam berbagai sistem
pengobatan tradisional di Asia dalam
waktu yang cukup lama, untuk mencegah
dan mengobati berbagai penyakit, seperti
pengobatan asma, diabetes, malaria, asam
urat, lepra, peradangan, dan penyakit kulit,
karena sifatnya pahit (Ahmad et al., 2016)
(Peraturan Menteri Kesehatan Republik
Indonesia, 2016).
Pengujian fitokimia telah
mengungkapkan bahwa pare mengandung
flavonoid, saponin, terpenoid, alkaloid,
protein, dan steroid (Daniel et al., 2014).
Buah adalah bagian paling aman dan
paling umum dari tanaman yang
digunakan sebagai obat. Buah pare
memiliki rasa yang pahit dan mengandung
senyawa kimia berupa saponin, steroid

1
yang dikenal sebagai charantin dapat
meransang pelepasan insulin dan
menghalangi pembentukan glukosa dalam
aliran darah yang dapat membantu dalam
pengobatan diabetes yang tidak tergantung
insulin (Namdeo et al., 2013).
Kandungan senyawa aktif yang
terdapat dalam buah pare diantaranya
flavonoid, saponin, polifenol, momordisin
dan karantin. Untuk mengetahui kadar
flavonoid total pada ekstrak buah pare
menggunakan pelarut etanol 96 %, di
dapatkan kadar total flavonoid sebesar 0,6
% (Liqolbinisa et al., 2017).
Penelitian sebelumnya juga
dilakukan oleh Naid et al., (2012) untuk
menentukaan β-Karoten pada buah pare
(Momordica charantia L) dengan pelarut
aseton, eter, dan pelarut KOH 15 % dalam
metanol dengan menggunakan
spektrofotometri UV-Vis, didapatkan
kadar β-karoten buah pare 0,7822 mg/100
g. Berdasarkan penelitian dilakukan oleh
Juliana et al., (2010) buah pare diekstraksi
dengan pelarut methanol, n-heksan dan etil
asetat, pada kadar β-karoten pada heksan
didapat (4,1 gram; 8,2 %), asetil asetat (5,4
gram; 42,9 %), dan metanol-air (18 gram;
36 %).
Pelarut yang digunakan tergantung
pada polaritas senyawa yang akan disari,
mulai dari yang bersifat nonpolar hingga
polar. Air adalah pelarut yang digunakan
untuk ekstrak produk tanaman dengan
aktivitas antimikroba. Aseton memiliki
komponen hidrofilik dan komponen
lipofilik yang tercampur dengan air dan
sangat bermanfaat dalam membuat
ekstrak, terutama untuk antimikroba
dimana lebih banyak senyawa fenolik
harus diekstraksi ( Tiwari et al., 2011).
Pelarut etanol mempunyai kelarutan sangat
mudah larut dalam air, dalam kloroform P
dan eter pekat P. Pelarut n-heksana
mempunyai kelarutan praktis tidak larut
dalam air, larut dalam etanol mutlak, dapat
bercampur dengan eter, kloroform,
benzene dan sebagian besar minyak lemak
dan minyak atsiri (Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, 1979).
METODE PENELITIAN
Alat dan bahan
Alat-alat yang digunakan pada
penelitian ini adalah Spektrofotometer
UV-VIS (Shimadzu UV-1800), penguap
vakum (IKA), timbangan analitik
(Precisa), kertas perkamen, Beker Glass
(Iwaki), Corong Pisah (Iwaki), bola hisap,
tabung reaksi (Pyrex), erlemeyer (Iwaki),
gelas ukur (Iwaki), pipet ukur (Iwaki), labu
ukur (Iwaki), corong (Pyrex), blender
(Turbo), aluminium foil, kain flannel,
percolator dan alat-alat yang menunjang
penelitian.
Bahan yang digunakan pada
penelitian ini adalah buah pare
(Momordica charantia L.), etanol
(CH2H50H) (PT. Brataco), heksan
(CH3(CH2)4CH3) (PT. Brataco), aseton
(CH3COCH3) (PT. Brataco), aqua destilata
(H2O) (PT. Brataco), asam sulfat pekat
(H2SO4), kloralhidrat (Merck), ferri (III)
klorida (FeCl3) (Merck), kloroform
(CHCl3) (Merck), kalium bromide (KBr)
(Merck), natrium hidroksida (NaOH)
(Merck), serbuk magnesium (Mg)
(Merck), asam klorida (HCl) (Merck),
amoniak (HN3) (EMSURE®), kalium
iodide (KI) (Merck), natrium karbonat,
Amoniak (NH4) (Merck), methanol
(Merck), etil asetat (Merck), aluminium
klorida (AlCl3) (Merck) dan kuersetin
(Sigma).
Prosedur kerja
Penyiapan simplisia
1. PengumpulanBahan Baku
2. Sortasi Basah
3. Pencucian
4. Perajangan
5. Pengeringan
6. Sortasi Kering
7. Pembuatan serbuk sampel Penetapan
Karakterisasi Simplisia
Karakterisasi simplisia berdasarkan
Farmakope Herbal Indonesia (2008) yaitu
meliputi ujimakroskopis, susut
pengeringan, kadar abu total, kadar abu
2
tidak larut asam, kadar sari larut air dan
sari larut etanol.
Ekstraksi Sampel
Simplisia 50 gram ditempatkan
dalam suatu bejana silinder atau
perkolator, yang sebelumnya telah diberi
kertas saring dan kapas, lalu masukkan
500 mL pelarut (heksan, aseton dan
etanol), secara terpisah. Cairan penyari
dialirkan dari atas ke bawah melalui
serbuk tersebut, sehingga serbuk terbasahi
dengan pelarut, tutup perkolat dengan
aluminium foil, tunggu beberapa jam
sampai cairan penyari akan melarutkan zat
aktif hingga tersaring dan mengalir pada
slang sampai jernih, kemudian diuapkan
dengan alat rotary evaporator sehingga
diperoleh ekstrak cair (Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, 1986).
Timbang sebanyak 50 gram
simplisia buah pare, masukkan ke dalam
bejana dekok atau panci dekok, lalu
tambahkan dengan pelarut air sebanyak
500 mL, setelah itu masukkan ke dalam
penangas air selama 30 menit pada suhu
96-98 oC, sambil sekali–sekali diaduk.
Saring selagi panas melalui kain flannel
sehingga diperoleh ekstrak dari buah pare
(Hanani, 2017).
Analisis kualitatif
Analisis kualitatif dari ekstrak buah
pare antara lain :
1. Uji karbohidrat
Tes Fehling
2 mL ekstrak tanaman, ditambahkan
pereaksi Fehling A dan B dalam jumlah
yang sama banyak kedalam larutan uji,
lalu akan terjadi reduksi menghasilkan
endapan kupro oksida berwarna merah
bata (Hanani, 2017).
2. Uji Fenol
Tes Ferri klorida
3 tetes ekstrak, ditambahkan 3-4
tetes besi (III) klorida. Senyawa fenol
akan memberikan warna hijau hingga
biru hitam dengan penambahan larutan
garam besi (III) klorida (Hanani, 2017).
3. Uji Tannin
Tes Ferri klorida
3 tetes ekstrak, ditambahkan 3-4
tetes besi (III) klorida. Senyawa tanin
akan memberikan warna hijau hingga
kecoklatan dengan penambahan larutan
garam besi (III) klorida (Hanani, 2017).
4. Uji Flavonoid
Ekstrak 1 mL ditambahkan 2 mL
etanol, tambahkan 0,5 g serbuk seng
dan 2 mL asam klorida 2 N, diamkan
selama 1 menit, tambahkan 10 tetes
asam klorida pekat, jika dalam waktu 2
sampai 5 menit terjadi warna merah
intensif, maka menunjukkan adanya
flavonoid (Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, 1995).
5. Uji Alkaloid
Tambah ekstrak 5 mL, lalu
tambahkan 1 mL asam klorida 2 N dan
9 mL air, panaskan diatas penangas air
selama 2 menit, dinginkan dan saring.
Pindahkan 3 tetes filtrat pada kaca
erloji, tambahkan 2 tetes bouchardat
LP. Jika pada kedua percobaan tidak
terjadi endapan, maka ekstrak tidak
mengandung alkaloid. Jika dengan
Mayer LP terbentuk endapan
menggumpal berwarna putih atau
kuning dan dengan Bouchardat LP
terbentuk endapan warana cokelat
sampai hitam, maka ekstrak
mengandung alkaloid (Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, 1995).
6. Uji terpenoid
Ekstrak sebanyak 1 mL ditambahkan
2 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes
asam sulfat pekat, perubahan warna
ungu atau merah kemudian menjadi
biru hijau menunjukkan adanya
terpenoid (Banu & Cathyrine, 2015).
7. Uji minyak atsiri
1 mL ekstrak ditambahkan Larutan
kalium permanganat, warna akan
menjadi pucat atau hilang (Hanani,
2017).
8. Uji saponin
Tes Busa
Ekstrak 1 mL ekstrak ditambahkan
10 mL air panas, dinginkan dan
kemudian dikocok kuat-kuat selama 10
3
 menit, maka akan terbentuk buih
selama 10 menit, setinggi 1 cm sampai
10 cm. Ekstrak positif jika ditambahkan
dengan penambahan 1 tetes asam
klorida 2 N, buih tidak akan hilang
(Departemen Kesehatan Republik
Indonesia, 1995).
9. Uji steroid
Ekstrak 1 mL ditambahkan
kloroform dan 5 tetes asam asetat
anhidrat dan biarkan mengering lalu
tambahkan 3 tetes asam sulfat P, maka
akan terbentuk warna biru (Hanani,
2017).
Analisis kuantitatif
Setelah dilakukan analisis kualitatif
pada ekstrak buah pare dengan
menggunakan 4 pelarut, maka diperoleh
hasil positif yaitu flavonoid dan alkaloid.
Langkah selanjutnya yaitu analisis
kuantitatif guna memperoleh nilai kadar
dari masing-masing kandungan senyawa
tersebut.
1. Flavonoid
a. Larutan uji untuk ekstrak cair
Larutan uji untuk ekstrak cair ukur
saksama sejumlah volume ekstrak cair,
encerkan dengan etanol 80% sampai kadar
yang sesuai untuk kolorimetri.
b. Larutan pembanding
Larutan pembanding Timbang
saksama kurang lebih 10 mg pembanding,
larutkan dalam etanol 80%, encerkan
secara kuantitatif dan jika perlu bertahap
dengan etanol 80% hingga kadar 10, 20,
30, 40 dan 50 µg/mL.
c. Pengukuran
Pengukuran pipet secara terpisah 0,5
mL larutan uji dan larutan pembanding,
tambahkan pada masing-masing 1,5 mL
etanol P, 0,1 mL aluminium klorida P
10%, 0,1 mL natriumasetat 1M dan 2,8
mL air suling. Kocok dan diamkan selama
30 menit pad a suhu ruang. Ukur serapan
pada panjang gelombang serapan
maksimum. Lakukan pengukuran blangko
dengan cara yang sarna, tanpa penambahan
aluminium klorida, buat koreksi
seperlunya.(Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, 2010).
2. Alkaloid
Pipet ekstrak 2 mL, sari
menggunakan 100 mL metanol P dan 10
mL amoniak P, panaskan di atas tangas air
selama 30 menit, saring. Ulangi 2 kali
penyarian menggunakan jenis dan jumlah
pelarut yang sama. Tambahkan 50 mL
asam klorida 1 N LP pada kumpulan
filtrat, uapkan hingga volume kurang lebih
25 mL, saring ke dalam corong pisah.
Basakan filtrat dengan amoniak P sampai
pH ± 10, sari 3 kaIi dengan 25 mL
kloroform P. Kumpulkan dan uapkan fase
kloroform pada suhu 50°, kemudian
keringkan pada suhu 1000 hingga bobot
tetap. Hitung sisa pengeringan sebagai
alkaloid total (Departemen Kesehatn
Republik Indonesia, 2008).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini menggunakan sampel
buah pare kurang lebih 3 kg.
Menggunakan empat pelarut yaitu heksan,
aseton, etanol dan air. Tujuan dilakukan
penelitian ini yaitu untuk mengetahui
kandungan senywa kimia yang terdapat
didalam buah pare.
Identifikasi tanaman telah dilakukan
di Herbarium Laboratorium Jurusan
Biologi FMIPA, Universitas Andalas
(ANDA) Kampus Limau Manih Padang
Sumatera Barat. Tujuan identifikasi adalah
untuk mengetahui identitas sampel yang
akan digunakan. Berdasarkan hasil
identifikasi tersebut dapat diketahui
kepastian bahwa sampel yang digunakan
dalam penelitian ini adalah buah pare
(Momordica charantia L.) dengan Famili
Cucurbitaceae.
Hasil makroskopis dan mikroskopis
dibandingkan dengan (Kementerian
Kesehatan Republik Indonesia, 2010).
terbukti kebenarannya bahwa buah yang
digunakan buah pare.
4
 Gambar 1. Hasil makroskopis buah pare

Pada (Gambar 1) buah pare berupa Karakterisasi simplisia meliputi

irisan melintang, tepi tidak rata, tidak makroskopis, mikroskopis, susut
beraturan, tebal 3-5 mm; warna cokelat, pengeringan, kadar abu total, kadar abu
bagian luar berwarna lebih tua dari bagian tidak larut asam, sari larut etanol dan sari
dalam; bauh khas; rasa pahit larut air. Dilakukan dengan tujuan untuk
menjamin keseragaman mutu simplisia
1. Mikroskopis agar memenuhi persyaratan standar
Gambaran mikroskopis yang didapat simplisia. Berikut hasil pemeriksaan
dalam buah pare pare terdapat rambut parameter standar simplisia yang
penutup, sklerenkim dan berkas didapatkan dalam buah pare:
pengangkut bentuk jala buah pare

Tabel I. Hasil pemeriksaan parameter standar simplisia

Hasil
Menurut
No Parameter standar pemeriksaan
FI, 2010
(%)
1 Susut pengeringan 6,5415 % <15 %

2 Kadar abu total 4,9825 % <7,2 %

3 Kadar abu tidak larut asam 0,2414 % <1,5 %

Sari larut etanol 3,3979 % >2,4 %
4

Sari larut air 8,7245 % >8,5 %

5

Tujuan dilakukannya penetapan kandungan mineral internal dan eksternal

susut pengeringan adalah memberikan yang berasal dari proses awal sampai
batasan maksimal mengenai besarnya terbentuknya simplisia, kadar abu total
senyawa yang hilang pada saat proses berkaitan dengan mineral baik senyawa
pengeringan (Departemen Kesehatan organik maupun anorganik yang diperoleh
Republik Indonesia, 2000). Hasil yang secara internal maupun eksternal
diperoleh dari susut pengeringan adalah (Departemen Kesehatan Republik
6,5415 % (Tabel I). Kadar abu total Indonesia, 2000). kadar abu diperoleh
bertujuan untuk memberikan gambaran adalah 4,9825 % (Tabel I).
5
 Kadar abu tidak larut dalam asam
bertujuan untuk mengetahui jumlah abu
yang diperoleh dari faktor eksternal,
bersumber dari pengotor yang diperoleh
dari pasir atau tanah silikat (Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, 2000).
Kadar abu tidak larut asam adalah 0,2414
% (Tabel I). Penetapan kadar sari larut
etanol dan air dilakukan dengan tujuan
untuk memberikan gambaran awal jumlah
senyawa yang dapat tersari dangan pelarut
air dan etanol dari suatu simplisia
(Departemen Kesehatan Republik
Indonesia, 2000). Kadar sari larut etanol
didapat 3,3979 % (Tabel I), sedangkan
kadar senyawa larut dalam air didapathasil
8,7245 % (Tabel I). Hal ini menunjukkan
bahwa jumlah senyawa polar yang dapat
terlarut dalam air lebih besar daripada
jumlah senyawa kurang polar (semi polar
maupun non polar) yang dapat terlarut
dalam etanol. Hasil pengujian ini masih
memenuhi syarat standar dalam pustaka.
Simplisia yang telah kering dan
didapatkan serbuk buah pare kemudian
diperkolasi, pemilihan metode perkolasi
ini karena dapat menggunakan sampel
dalam jumlah yang banyak,
pelaksanaannya sederhana, tidak
memerlukan perlakuan khusus dan
kemungkinan terjadinya penguraian zat
aktif oleh pengaruh suhu dapat dihindari
karena tidak ada proses pemanasan.
Sebelum dimaserasi simplisia daun sirsak
dirajang terlebih dahulu sampai didapatkan
berupa serbuk daun sirsak dengan tujuan
agar pelarut dapat berpenetrasi dengan
mudah sehingga penarikan zat aktif lebih
sempurna (Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, 1985).
Perkolasi sampel dilakukan dengan
menggunakan 3 pelarut yaitu heksan
digunakan sebagai pelarut karena
merupakan senyawa non polar yang
banyak dipilih untuk proses pengekstrakan
bahan alam yang akan di ambil senyawa
non polarnya. Etanol digunakan sebagai
pelarut universal disebabkan karena
sifatnya yang mudah melarutkan senyawa
zat aktif baik yang bersifat polar, semi
polar dan non polar. Keuntungan lain
etanol mudah berpenetrasi kedalam sel.
Aseton digunakan sebagai pelarut karena
aseton banyak larut pada hidrofilik dan
komponen lipofilik, mudah tercampur
dengan air, mudah menguap dan memiliki
toksisitas rendah, aseton sangat bermanfaat
dalam membuat ekstrak.
Dekok di lakukan untuk pelarut air,
air digunakan sebagai pelarut karena air
adalah pelarut universal, digunakan untuk
ekstrak tanaman dengan aktivitas
antimikroba, dan air bersifat polar. Infusa
di lakukan dengan menggunakan panci
infus dan penangas air selama 15 menit.
Setelah diperoleh ekstrak daun sirsak dari
4 pelarut dilakukan uji kandungan
kandungan kimia dan uji kadar dari ektrak
buah pare. Penelitian ini bertujuan untuk
menentukan kandungan dari ekstrak
heksan, etanol, aseton dan air pada daun
sirsak dan menentukan kadar kandungan
kimia dari masig-masing ekstrak heksan,
etanol, aseton dan air pada buah pare.
Penentuan kandungan kimia pada
analisis kualitatif pada ekstrak heksan,
etanol, aseton dan air yang dilakukan
sepuluh uji fitokomia pada analisis
kualitatif yaitu uji karbohidrat, uji fenol,
uji tannin, uji flavonoid, uji alkaloid,
ujiminyak atsiri, uji saponin, uji terpenoid,
dan uji steroid. Hasil yang didapatkan pada
ekstrak heksan tidak menunjukkan adanya
positif pada setiap uji yang dilakukan,
sedangkan pada ekstrak aseton hanya
didapatkan satu hasil positif yaitu pada
metabolit primer asam lemak, begitupun
pada ekstrak etanol dan air yang sama
mendapatkan hasil positif yaitu pada uji
flavonoid dan alkaloid.
6
 Tabel II. Hasil kualitatif dari ekstrak heksan, aseton, etanol dan air

NO Uji kualitatif Ekstrak Ekstrak Ekstrak Estrak

heksan aseton etanol air
1 Karbohidrat - - - -
2 Fenol - - - -
3 Tanin - - - -
4 Flavonoid - + + +
5 Alkaloid - - + -
6 Minyak atsiri - - - -
7 Saponin - - - -
8 Terpenoid - - - -
9 Steroid - - - -

Berdasarkan hasil analisis kualitatif
yang didapatkan sangat sedikit yaitu
alkaloid dan flavonoid. Dibandingkan
dengan hasil peneliti yang dilakukan oleh
(Daniel et al., 2014) yang mendapatkan
hasil yang positif flavonoid, saponin,
terpenoid, alkaloid, protein, dan steroid.
Begitu juga dengan peneliti lain (Ahmad et
al., 2016) mendapatkan hasil positif
alkaloid, fenolik, saponin, asam lemak,
protein, dan flavonoid. Hasil kualitatif ini
dipengaruhi oleh beberapa faktor yaitu saat
melakukan maserasi, yaitu saat penarikan
zat aktif belum sempurna sehingga
berpengaruh untuk uji fitokimia. Faktor
lain yaitu berdasarkan tempat tumbuh
tanaman.
Dilihat hasil dari reaksi kimia yang
terjadi pada pengujian kualitatif dari
ekstrak heksan, aseton, etanol dan air pada
(Tabel II) yaitu pada uji karbohidrat
dimana ekstrak tidak menunjukkan reaksi
dengan penambahan fehling A dan B,
reaksi kimia tidak terjadi reduksi yg
membuat terbentuknya endapan kupro
oksida menjadi warna merah bata.
Sehingga percobaan yang dilakukan
memperoleh hasil negatif karena tidak
terjadi endapan sama sekali. Pada uji
saponin ekstrak 1 mL ekstrak ditambahkan
10 mL air panas, dinginkan dan kemudian
dikocok kuat-kuat selama 10 menit, maka
akan terbentuk buih selama 10 menit,
setinggi 1 cm sampai 10 cm. Ekstrak
positif jika ditambahkan dengan
penambahan 1 tetes asam klorida 2 N,
buih tidak akan hilang, hasil yang
diperoleh negatif.
Uji terpenoid menggunakan ekstrak
sebanyak 1 mL ditambahkan 2 tetes asam
asetat anhidrat dan 1 tetes asam sulfat
pekat, perubahan warna ungu atau merah
kemudian menjadi biru hijau. Hasil ya g
didapat tidak ada yang positif, Pada uji
minyak atsiri menggunakan ekstrak 2 tetes
ditambah dengan larutan kalium
permanganat, warna akan menjadi pucat
atau hilang menunjukkan adanya minyak
atsiri dan pada uji terpenoid menggunakan
ekstrak 1 mL ditambahkan kloroform dan
5 tetes asam asetat anhidrat dan biarkan
mengering lalu tambahkan 3 tetes asam
sulfat P, maka akan terbentuk warna biru,
maka hasil yang didapat negative sama
dengan uji minyak atsiri
Uji fenol dan tannin menggunakan
pereaksi yang sama yaitu besi (III) klorida
yang mana hasilnya menunjukkan warna
endapan biru hitam, pada percobaan yang
dilakukan tidak menunjukkan hasil
endapan biru hitam pada semua ekstrak,
sehingga hasil fenol dan tannin yang
diperoleh yaitu negatif.
Uji alkaloid Pada pengujian senyawa
alkaloid didapatkan hasil positif untuk
ekstrak aseton dengan penambahan ekstrak
5 mL, lalu tambahkan 1 mL asam klorida 2
N dan 9 mL air, panaskan diatas penangas
air selama 2 menit, dinginkan dan saring.
Pindahkan 3 tetes filtrat pada kaca erloji,
tambahkan pereaksi Mayer LP terbentuk
endapan menggumpal berwarna putih atau
7
kuning mengandung alkaloid, terdapat
pada ekstrak aseton. dan pada pengujian
flavonoid didapatkan hasil positif dengan
menambahkan ekstrak 1 mL ditambahkan
2 mL etanol, tambahkan 0,5 g serbuk seng
dan 2 mL asam klorida 2 N, diamkan
selama 1 menit, tambahkan 10 tetes asam
klorida pekat, jika dalam waktu 2 sampai 5
menit terjadi warna merah intensif, maka
menunjukkan adanya flavonoid, terdapat
positif pada ekstrak aseton, etanol dan air
(Tabel II).

Gambar 2. Spektrum serapan kuersetin dengan aluminium klorida pada panjang gelombang
431,5 nm

Tabel III. Nilai absorbansi kuarsetin ditambah aluminium klorida dari berbagai konsentrasi

Konsentrasi (µg/mL) Absorbansi

10 0,205
20 0,350
30 0,480
40 0,620
50 0,749

Kurva Kalibrasi Kuersetin

0,8 y = 1,35828x + 0,07340
R= 0,99958
0,6
Absorban

0,4

0,2

0
0 10 20 30 40 50 60
konsentrasi (µg/mL)

Gambar 3. Persamaan kurva kalibrasi kuarsetin ditambah aluminium klorida

8
 Tabel IV. Kadar flavonoid total ekstrak buah pare
Sampel Serapan
Ekstrak aseton 0,256
0,251
0,250
Ekstrak etanol 0,432
0,436
0,444
Ekstrak Air 0,241
0,244
0,243
Tabel V.Kadar alkaloid buah pare
Hasil cawan kosong (W0)
kosong + hasil
pengeringan (W1)
41,9600
41,9607
41,9605
Penentuan kadar kimia dari analisis
kuantitatif dari ekstrak heksan, aseton,
etanol dan air pada (Tabel IV) hasil positif
yang didapat pada yaitu alkaloid terdapat
pada ekstrak aseton, dan flavonoid yang
terdapat pada ekstrak aseton, ekstrak
etanol dan ekstrak air buah pare. Kadar
alkaloid total pada ekstrak aseton adalah
0,0306 % ± 0,0051 %. Kadar flavonoid
total pada ekstrak aseton 0,0131 % ±
0,0023 %, ekstrak etanol 0,0121 % ±
0,0017 % dan ekstrak air 0,033 % ±
0,0060 % (Tabel IV).
Penetapan kadar flavonoid total dari
ekstrak aseton, etanol dan air dari buah
pare dilakukan dengan menggunakan
metode kolorimetri aluminium klorida.
Prinsip penetapan kadar flavonoid metode
aluminium klorida adalah pengukuran
berdasarkan pembentukan warna dan
terjadinya pembentukan kompleks antara
aluminium klorida dengan gugus keton
pada atom C- 4 dan gugus hidroksi pada
atom C-3 atau C-5. Penetapan kadar
Kadar %
0,0131 %
0,033 %
0,0121 %
Hasil cawan
Kadar %
41,965
41,9632 0,0306 %
41,9637
flavonoid total dilakukan dengan
menggunakan spektrofotometri Uv-Vis
karena flavonoid mengandung system
aromatic yang terkonjugasi sehingga
menunjukkan pita serapan kuat pada
daerah spektrum sinar ultraviolet dan
spektrum sinar tampak (Harborne, 1987).
Pada penelitian ini digunakan kuersetin
sebagai larutan standar untuk menentukan
kadar flavonoid total dari ekstrak etanol
dan air daun sirsak. Digunakan kuersetin
karena kuersetin merupakan flavonoid
golongan flavonol yang memiliki gugus
keton pada atom C-4 dan juga gugus
hidroksi pada atom C-3 dan C-5 yang
berdekatan.
Sebanyak 10 mg kuersetin ditimbang
dan dilarutkan dalam 10 mL etanol 80%,
kemudian dibuat pengenceran dengan
berbagai konsentrasi yaitu 10 µg/mL, 20
µg/mL, 30 µg/mL, 40 µg/mL dan 50
µg/mL dengan cara masing-masing
konsentrasi dipipet 0,3 mL, 0,4 mL, 0,5
mL, 0,6 mL, dan 0,7 mL lalu dicukupkan
9
volumenya sampai 10 mL dengan pelarut
etanol 80%. Digunakan deret konsentrasi
karena metoda yang digunakan adalah
metoda yang menggunakan persamaan
kurva baku, untuk membuat kurva baku
terlebih dahulu dibuat beberapa
konsentrasi untuk mendapatkan persamaan
linear untuk menghitung kadar. Kemudian
pipet secara terpisah 0,5 mL larutan
pembanding dan 0,5 mL larutan uji yaitu
ekstrak etanol dan air lalu tambahkan 1,5
mL etanol P sebagai peningkat kelarutan,
kemudian tambahkan 0,1 mL aluminium
(III) klorida yang dapat membentuk
kompleks sehingga terjadi pergeseran
panjang gelombang kea rah visible
(tampak) yang ditandai dengan larutan
menghasilkan warna yang lebih kuning
(Chang et al., 2002), 0,1 mL natrium asetat
yang berfungsi sebagai penstabil dan 2,8
mL air suling. Setelah itu diinkubasi
selama 30 menit, dengan tujuan agar reaksi
antara larutan standar kuersetin dengan
pereaksi-pereaksi yang ditambahkan dapat
berlangsung dengan sempurna sehingga
intensitas warna yang dihasilkan lebih
maksimal (Azizah & Faramayuda, 2014).
Pengukuran absorbansi dilakukan
menggunakan spektrofotometri UV-Vis
dengan panjang gelombang maksimum
431,5 nm pada (Gambar 2). 10 ppm nilai
absorbansinya (0,205), 20 ppm nilai
absorbansinya (0,350), 30 ppm nilai
absorbansinya (0,480), 40 ppm nilai
absorbansinya (0,620), dan 50 ppm nilai
absorbansinya (0,749) (Tabel 3). Untuk
menghitung kadar total flavonoid, mula-
mula absorbansi sampel yang telah dibuat
dihitung rata-ratanya. Hasil rata-rata
sampel yang telah didapat pada (Gambar
3) dimasukkan kedalam persamaan garis
liniear y = 1,35828x + 0,07340 sehingga
diperoleh kadar total flavonoid ekstrak
aseton adalah 0,0131 %, etanol adalah
0,0121 % mg/mL dan ekstrak air adalah
0,33 % mg/mL.
Penetapan kadar alkaloid total dari
ekstrak aseton buah pare menggunakan
metoda gravimetri yaitu suatu metoda
analisis yang didasarkan pada pengukuran
berat, yang melibatkan pembentukan,
pengukuran berat ataupun isolasi dari
suatu endapan. Alkaloid memiliki sifat
basa dari atom nitrogen penyusunnya.
Umumnya alkaloid di dalam tumbuhan
sebagian besar sebagai garam-garam dari
asam-asam organik. Garam alkaloid ini
yang kemudian diekstraksi dengan pelarut
organik yang sesuai. Garam-garam
alkaloid lebih mudah larut dalam pelarut
polar. Penentuan kadar alkaloid dari
ekstrak etanol dan air dilakukan dengan
cara memipet ekstrak sebanyak 20 mL
kemudian sari menggunakan 100 mL
metanol P dan 10 mL amoniak P, lalu
panaskan di atas tangas air selama 30
menit, saring. Kemudian ulangi 2 kali
penyarian menggunakan jenis dan jumlah
pelarut yang sama. Tambahkan 50 mL
asam klorida 1 N LP pada kumpulan filtrat
lalu uapkan hingga volume kurang lebih
25 mL. Saring ke dalam corong pisah.
Basakan filtrat dengan amoniak P sampai
pH  10, sari 3 kali dengan 25 mL
kloroform P. Amoniak P ditambahkan
bertujuan untuk melepaskan ikatan
alkaloid dengan asamnya sehingga
alkaloid kembali berada dalam kondisi
bebas. Akan terbentuk dua lapisan yaitu
lapisan asam dan lapisan kloroform,
kumpulkan dan uapkan fase kloroform
pada suhu 50, kemudian keringkan pada
suhu 100 hingga bobot tetap.
Amoniak P akan bereaksi dengan
asam klorida yang membentuk garam yang
larut dalam air sedangkan alkaloid kembali
dalam bentuk basa dan tidak terlarut dalam
air tetapi mudah larut dalam kloroform.
Alkaloid dalam keadaan bebas dapat
diekstraksi dengan pelarut kloroform,
sehingga dihasilkan ekstrak kloroform
yang merupakan alkaloid total.
penetapan kadar alkaloid dihitung
dari hasil yang dikeringkan pada suhu
tetap. Kadar yang di peroleh dalam
penetapan kadar alkaloid dalam ekstrak
aseton adalah 0,0306 % (Tabel V) .
10
KESIMPULAN Analysis of Momordica Charantia
Dari data yang diperoleh pada L. International Journal of
penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa : Advances in Pharmacy, Biology
1. Kandungan senyawa kimia dari and Chemistry. 3 (1), 214-220.
ekstrak aseton buah pare adalah
alkaloid. Departemen Kesehatan Republik
Kandungan senyawa kimia dari Indonesia. (1985). Cara
ekstrak etanol dari buah pare adalah Pembuatan Simplisia. Jakarta:
flavonoid. Kandungan senyawa kimia Departemen Kesehatan Republik
dari ekstrak air buah pare adalah Indonesia.
flavonoid.
Departemen Kesehatan Republik
2. Kadar alkaloid total pada ekstrak
Indonesia. (1986). Sediaan
aseton adalah 0,0306 % ± 0,0051 %.
Galentika. Jakarta: Direktorat
Kadar flavonoid total pada ekstrak
Jenderal Pengawas Obat dan
aseton 0,0131 % ± 0,0023 %, ekstrak
Makanan.
etanol 0,0121 % ± 0,0017 % dan
ekstrak air 0,033 % ± 0,0060 %. Departemen Kesehatan Republik
Indonesia. (1995). Materia Medica
DAFTAR PUSTAKA Indonesia. Jilid IV. Jakarta:
Ahmad, N., Hasan, N., Ahmad, Z., Zishan, Departemen Kesehatan Republik
M., & Zohrameena, S. (2016). Indonesia
Momordica charantia: for
Tradisional Uses And Departemen Kesehatan Republik
Pharmacological Actions. Journal Indonesia. (2000). Parameter
of Drug Delivery and Standar Umum Ekstrak Tumbuhan
Therapeutics. 6 (2), 40-44. Obat. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia.
Azizah, D. N., Kumolowati, E., &
Faramayuda, F. (2014). Penetapan Departemen Kesehatan Republik
kadar flavonoid metode AlCl3 pada Indonesia. (2008). Farmakope
ekstrak metanol kulit buah kakao Herbal Indonesia (Edisi I). Jakarta:
(Theobroma cacao L.). Kartika Departemen Kesehatan Republik
Jurnal Ilmiah Farmasi, 2 (2), 45- Indonesia.
49. Hanani, E (2017). Analisis Fitokimia.
Jakarta: EGC.
Banu, K. S & Cathrine, DR. L. (2015).
General Techniques Involved In Harborne, J. B (1987). Metode Fitokimia,
Phytochemical Analysis. Penuntun Cara Moderen
International Journal Of Advanced Mengenalisis Tumbuhan (Edisi II).
Research In Chemical Science Penerjemah: K. Padmawiata & I.
(IJARCS). 2 (4), 25-32. Soediro. Bandung: Penerbit ITB.

Chang, C., Yang, M., Wen, H & Chern, J.
(2002). Estimation of Total
Flavonoid Content in Propolis by
Two Complementary Colorimetri
Methods. Journal of Food and
Drug Analysis, 10 (3), 178-182.
Juliana, A, V., Aisyah, S & Mustapha, I.,
(2010). Isolasi dan Karakterisasi
Senyawa Turunan Terpenoid Dari
Fraksi n-heksan Momordica
charantia L. Jurnal Sains dan
Teknologi Kimia. 1 (1), 88-93.

Daniel, P., Supe, U & Roymon, M, G. Kementerian Kesehatan Republik

(2014). A Review Phytochemical Indonesia. (2010). Suplemen 1

11
 Farmakope Herbal Indonesia
(Edisi I). Jakarta: Kementerian
Kesehatan Republik Indonesia.

Liqolbinisa, H., Rismawati, E., Syafnir, L.,

(2017). Pengujian Potensi
Antioksidan dan Penetapan Kadar
Flavonoid Total Ekstrak Buah
Pare. Prosiding Farmasi. 3 (2),
673-677.
Naid, T., Muflihunna, A., & Madi, O, I.,
(2012). Analisis Kadar β-Karoten
Pada Buah Pare (Momordica
charantia L.) Asal Ternate Secara
Spektrofotometri UV-Vis. Majalah
Farmasi dan Farmakologi. 13 (3),
127-130.
Namdeo, K, P., Bodakhe, S, H., Dwedi, J.,
& Saifi, A. (2013). A review on
antidiabetic of M. charantia Linn.
Internasional Journal of
Pharmaceutical Research and Bio-
science. 2 (6), 475-485.

Peraturan Menteri Kesehatan Republik

Indonesia. (2016). Nomor 6
Tentang Formularium Obat Herbal
Asli Indonesia. Jakarta: Menteri
Kesehatan.
Tiwari, P., Kumar, B., Kaur, M., Kaur, G,.
& Kaur, H. (2011). Phytochemical
Screening and Extraction.
Internationale Pharmaceutica
Sciencia. 1 (1), 98-106.

12

View publication stats