Analisis Kualitatif dan Kuantitatif dari Ekstrak Heksan, Aseton, Etanol, dan Air Dari

Daun Salam (Syzygium polyanthum (WIGHT) Walp.)

Harrizul Rivai1), Susi Yulianti2), Boy Chandra2)

1)
Fakultas Farmasi Universitas Andalas (UNAND) Padang
2)
Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFARM) Padang
Email: harrizul@phar.unand.ac.id; susiyulianti151@gmail.com

ABSTRAK

Penelitian tentang analisis kualitatif dan kuantitatif daun salam (Syzygium polyanthum (WIGHT) Walp.) telah
dilakukan dari ekstrak heksan, aseton, etanol dan air. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis senyawa kimia
yang terkandung dalam masing-masing ekstrak heksan, aseton, etanol, dan air dari daun salam, serta
menentukan kadar metabolik sekunder yang terkandung dalam masing-masing ekstrak daun salam tersebut.
Metode ekstraksi yang digunakan yaitu maserasi untuk pelarut heksan, aseton dan etanol, infusa untuk pelarut
air. Hasil yang diperoleh dari skiring fitokimia dan penetapan kadar menunjukkan ekstrak aseton daun salam
mengandung fenol 0,1202 % dan tanin 0,1452 %. Ekstrak etanol daun salam mengandung alkaloid 0,34 %,
flavonoid 0,512 %, fenol 0,1258 %, dan tannin 0,1688 %. Ekstrak air daun salam mengandung flavonoid 0,486
%, fenol 0,2248 % dan tannin 0,1622 %. Sedangkan ekstrak heksan daun salam tidak mengandung senyawa
metabolit sekunder.

Kata Kunci : Daun Salam, Syzygium polyanthum (WIGHT) Walp., Maserasi, Spektrofotometri Uv-Vis.

ABSTRACT

Research on qualitative and quantitative analysis of bay leaf (Syzygium polyanthum (WIGHT) Walp.) has been
carried out from hexane, acetone, ethanol and water extracts. This study aims to analyze the chemical
compounds contained in each hexane, acetone, ethanol, and water extract from bay leaves, and determine the
secondary metabolic content contained in each bay leaf extract. Extraction method used is maceration for
hexane, acetone and ethanol solvents, infusion for water solvents. The results obtained from phytochemical
scaling and determination of the levels showed that acetone extract of bay leaves contained phenol 0.1202% and
tannin 0.1452%. Ethanol extract of bay leaves contained 0.34% alkaloid, flavonoid 0.512%, phenol 0.1258%,
and tannin 0.1688%. The water extract of bay leaves contained flavonoid 0.486%, phenol 0.2248% and tannin
0.1622%. While hexane extract of bay leaves does not contain secondary metabolites.

Keywords: Bay leaf, Syzygium polyanthum (WIGHT) Walp Maceration, Uv-Vis Spectrophoyometry.

PENDAHULUAN metanol daun salam efektif dalam

Pemanfaatan tanaman untuk
pengobatan secara tradisional sudah
dilakukan oleh masyarakat Indonesia.
Salah satu tanaman yang digunakan adalah
daun salam (Syzygium polyanthum
(WIGHT) Walp.) yakni sebagai obat
diabetes melitus (Peraturan Menteri
Kesehatan Republik Indonesia, 2016).
Ekstrak etanol daun salam dapat
menurunkan kadar glukosa darah pada
tikus dengan metode aloksan karena daun
salam mengandung flavonoid yang dapat
menangkap radikal hidroksil, sehingga
menghambat aksi diabetik dari aloksan
(Studiawan & Santosa, 2005). Ekstrak
menurunkan kadar glukosa darahyang
diberikan kepada pasien diabetes
(Widyawati, et al., 2015).
Pada penelitian skrining fitokimia
tanaman obat daun salam mengandung
flavonoid, alkaloid, steroid, dan tanin
(Agustina, et al., 2016). Penelitian pada
kegiatan biologis dan analisis fitokimia
tiga tanaman obat Indonesia menggunakan
pelarut etanol 95% menunjukkan bahwa
daun salam mengandung tannin, alkaloid,
steroid, triterpenoid, dan flavonoid
(Kusuma, et al., 2011). Pada penelitian
obat herbal dan tradisional didapat bahwa
daun salam mengandung tanin, minyak
atsiri, seskuiterpen, triterpenoid, steroid,

1
sitral, saponin, dan karbohidrat (Moeloek,
2006). Penelitian lain menunjukkan bahwa
ekstrak daun salam dengan pelarut metanol
mengandung senyawa aktif berupa
alkaloid, flavonoid, saponin, tanin dan
steroid (Evendi, 2017).
Penetapan kadar tanin dalam infusa
daun salam muda dan daun salam tua
secara spektrofotometri sinar tampak telah
diukur pada panjang gelombang
maksimum 745 nm dengan pereaksi Folin
Denis dan natrium karbonat jenuh,
diperoleh kadar daun salam muda dan
daun salam tua berturut-turut sebesar
2,38± 0,036% dan 2,45 ± 0,007%
(Kharismawati, et al., 2009). Ekstrak
flavonoid daun salam dengan bioaktivitas
paling baik sesuai rancangan kombinasi
dihasilkan pada ekstraksi sonikasi dengan
pelarut metanol 96% dalam waktu
ekstraksi selama 15 menit. Kadar
flavonoid pada kondisi tersebut diperoleh
sebesar 0,0116 mg (Oktavia, 2011).
Berdasarkan uraian diatas, belum
pernah dilakukan penelitian tentang
analisis kualitatif dan kuantitatif dari
ekstrak heksan, aseton, etanol dan air daun
salam. Oleh karena itu peneliti tertarik
untuk melakukan penelitian analisis
kualitatif dan kuantitatif dari ekstrak
heksan, etanol, aseton dan air pada daun
salam.
METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat yang digunakan antara lain:
Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu UV-
1800), penguap putar (IKA®), timbangan
analitik (Precisa),lampu UV (Camag),
sonikator (Branson 1800), corong pisah
(Iwaki),erlenmeyer (Iwaki), labu ukur
(Iwaki), gelas ukur (Iwaki),beaker glass
(Iwaki), pipet ukur (Iwaki),batang
pengaduk (Iwaki), silica gel 60 F254,
kertas perkamen, spatel, bola hisap,
corong(Iwaki), alumunium foil, wadah
maserasi (botol gelap), pipet tetes, pisau,
blender (Philips), tabung reaksi (Iwaki),
kertas saring whatman No. 42, krus
porselen, cawan penguap.
Bahan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah simplisia daun salam
(Syzygium polyanthum (Wight) Walp.),
kuersetin (Sigma), katekin (Sigma), asam
galat (Sigma) dan seluruh pelarut serta
pereaksi dibeli dari Merck yaitu, heksan,
aseton, etanol, air suling, metanol, kalium
iodida, raksa klorida, α-naftol, asam sulfat,
pottasium iodide, bismut nitrat, asam
sitrat, timbal asetat, fehling A dan B,
natrium klorida, natrium hidroksida, Folin-
Ciocalteu, Benedictus, alumunium klorida,
natrium asetat, kalium permanganat, asam
asetat, besi (III) klorida, natrium
borohidrat, dan kloroform, amoniak,
kertas pH, etil asetat, asam format, dan
asam asetat.
Prosedur
Penyiapan Simplisia (Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, 1985)
Standarisasi Simplisia Daun Salam
1) Parameter Non Spesifik
2) Parameter Spesifik
Pemeriksaan Kandungan Kimia
Simplisia
a. Pola Kromatografi
b. Kadar Total Kandungan Kimia
Simplisia Daun Salam
Pembuatan Ekstrak
Sejumlah 50,0065 gram serbuk
simplisia kemudian ditambahkan 500 mL
pelarut di maserasi selama 24 jam. Maserat
dipisahkan dengan cara filtrasi
(penyaringan), proses penyaringan ini
diulangi 2 kali, dengan menggunakan jenis
dan jumlah pelarut yang sama. Semua
maserat dikumpulkan, kemudian diuapkan
dengan alat penguap putar (rotary
evaporator) pada suhu dibawah ± 50ºC
sehingga diperoleh ekstrak kenta. Lakukan
hal yang sama terhadap seluruh pelarut
yaitu heksan, aseton dan etanol hingga
diperoleh ekstrak cair.
Selanjutnya pembuatan infusa daun
salam, Sebanyak 50 gram simplisia daun
salam dimasukkan kedalam panci infus
ditambahkan pelarut air sebanyak 500 mL,
lalu dimasukkan kedalam penangas air
2
selama 15-20 menit pada suhu 98ºC,
saring menggunakan kain flanel sehingga
diperoleh ekstrak air daun salam.
Analisis Kualitatif Daun Salam
1. Uji karbohidrat
a. Tes Molish
Kedalam 2 mL ekstrak tanaman,
ditambahkan dua tetes larutan alkohol
α- naftol, lalu campuran dikocok
dengan baik dan beberapa tetes asam
sulfat pekat di tambahkan perlahan
sepanjang sisi tabung reaksi. Cincin
ungu menunjukkan adanya karbohidrat
(Hanani, 2017).
b. Tes Benedict
Untuk 0,5 mL ekstrak tanaman, di
tambahkan 0,5 mL reagen Benedict.
Campuran dipanaskan sampai
mendidih selama 2 menit timbulnya
endapan merah bata menunjukkan
adanya gula (Banu & Cathrine, 2015).
c. Tes Fehling
Penambahan pereaksi fehling A dan B
dalam jumlah yang sama banyak
kedalam esktrak tanaman, akan
menghasilkan endapan kupro oksida
berwarna merah bata (Hanani, 2017)
2. Uji alkaloid
a. Tes Mayer
Satu mL ekstrak tanaman,
ditambahkan dua tetes reagen Mayer
disepanjang sisi tabung reaksi.
Endapan krem putih menunjukkan
adanya alkaloid (Evans, 2002).
b. Tes Wagner
Satu mL reagen Wagner ditambahkan
ke beberapa satu mL ekstrak tanaman
di sepanjang sisi tabung reaksi.
Endapan coklat kemerahan
mengkonfirmasikan tes tersebut
sebagai positif (Evans, 2002).
3. Uji flavonoid
a. Uji Shinoda
Sebanyak 1 mL ekstrak tanaman di
uapkan hingga kering, di tambahkan 1-
2 mL etanol, kemudian sedikit serbuk
magnesium di tambahkan dan 2 mL
asam klorida 5 M. Warna merah
hingga merah lembayung
menunjukkan adanya senyawa
flavonol, flavonone, flavonolol dan
dihidroflavonol (Hanani, 2017).
b. Uji Timbal Asetat
Satu mL ekstrak tanaman
ditambahkan dengan 5 tetes larutan
timbal asetat. Pembentukan endapan
warna kuning menunjukkan adanya
flavonoid (Tiwari et al., 2011).
4. Uji tanin
Satu mL ekstrak tanaman ditambahkan
dengan 5 tetes larutan ferri klorida
menunjukkan warna hijau hingga biru
kehitaman (Hanani, 2017).
5. Uji terpenoid
Satu mL estrak tanaman ditambahkan
2 tetes asam asetat anhidrat dan 1 tetes
asam sulfat pekat perubahan warna
ungu atau merah kemudianmenjadi
biru hijau menunjukan adanya
terpenoid (Hanani, 2017).
6. Uji minyak atsiri
a) Sebanyak 5 tetes larutan kalium
permanganat ditambahkan pada 2 mL
ekstrak tanaman, maka perubahan
warna kalium permanganat akan
menjadi pucat atau hilang(Hanani,
2017).
b) Kedalam 2 mL ekstrak tanaman
ditambahkan 1 mL asam asetat
anhidrat, kemudian ditambahkan 1 mL
asam sulfat pekat sehingga timbul
warna hijau biru (Hanani, 2017).
7. Uji saponin
Uji Busa:1 mL ekstrak tanaman
dikocok dengan 2 mL air. Jika timbul
busa selama sepuluh menit dan tidak
hilang, setinggi 1-10 cm, pada
penambahan 1 tetes asam klorida 2 N
menunjukkan adanya saponin (Hanani,
2017).
8. Uji fenol
Kedalam 1 mL ekstrak tanaman
ditambahkan 5 tetes besi (III) klorida,
senyawa fenol memberikan warna
hijau hingga biru hitam dalam air atau
etanol (Hanani, 2017).
3
9. Uji asam lemak Sebanyak 0,5 mL larutan induk
Lima tetes asam sulfat 25% di kuersetin konsentrasi 1 μg/mL di pipet
tambahkan kedalam 1 mL ekstrak kemudian cukupkan dengan etanol 80 %
tanaman, lalu panaskan, dan terbentuk dalam labu 10 mL, kemudian pipet
warna cokelat muda menunjukkan sebanyak 0,5 mL larutan kuersetin 50
adanya asam lemak (Hanani, 2017). μg/mL, 1,5 mL etanol P, 0,1 mL
10. Uji Steroid alumunium klorida P 10%, 0,1 mL natrium
Kedalam 2 ml ekstrak tanaman asetat 1 M dan 2,8 mL air suling di
ditambahkan 2 mL kloroform dan lihat tambahkan secara berturut-turut. Kocok
lapisan yang terbentuk, kemudian dan diamkan selama 30 menit pada suhu
lapisan kloroform dikeringkan. Lalu ruang, lalu ukur serapan maksimum.
tambahkan 3 tetes H2SO4 P. Maka d. Pengukuran
akan terbentuk warna biru. (Hanani, Secara terpisah di pipet 0,1 mL larutan
2017). uji dan 0,5 mL larutan pembanding, di
tambahkan pada masing-masing 1,5 mL
Analisis Kuantitatif Daun Salam
etanol P, 0,1 mL alumunium klorida P
1. Alkaloid
10%, 0,1 mL natrium asetat 1 M dan 2,8
Sebanyak 20 mL ekstrak tanaman di
mL air suling. Kocok dan diamkan selama
pipet, dan disari menggunakan 100 mL
30 menit pada suhu ruang. Ukur serapan
metanol P dan 10 mL amoniak P, selama
pada panjang gelombang erapan
30 menit di panaskan diatas tangas air, lalu
maksimum. Pengukuran blanko di lakuka
saring. Ulangi 2 kali penyarian
dengan cara yang sama, tanpa penambahan
menggunakan jenis dan jumlah pelarut
alumunium klorida, buat koreksi
yang sama. Pada kumpulan filtrat di
seperlunya (Departemen Kesehatan
tambahkan 50 mL asam klorida 1 N LP,
Republik Indonesia, 2010).
uapkan hingga volume lebih kurang 25
2. Uji Fenol
mL, saring kedalam corong pisah. Basakan
Kadar senyawa fenol total dilakukan
filtrat dengan amoniak P sampai pH ± 10,
menggunakan metode Folin Ciocalteau.
sari 3 kali dengan 25 mL kloroform P.
Larutan standar atau larutan uji dibuat
Kumpulkan dan uapkan fase kloroform
dalam berbagai konsentrasi yang diperoleh
pada suhu 50 ºC, kemudian di keringkan
dengan cara pengenceran larutan induk
pada suhu 100 ºC hingga bobot tetap.
asam galat.
Hitung sisa pengeringan sebagai alkaloid
1. Pembuatan larutan uji
total (kadar alkaloid total dinyatakan
Sejumlah simplisia yang telah
dalam % b/b) (Departemen Kesehatan
dihaluskan di timbang, di masukkan
Republik Indonesia, 2008).
kedalam labu terukur, encerkan secara
1. Flavonoid
kuantitatif dan jika perlu bertahap dengan
Penetapan kadar flavonoid total
metanol P hingga kadar seperti yang
menggunakan spektrofotometer Uv-Vis.
tertera pada masing-masing monografi.
a. Larutan uji untuk ekstrak cair
2. Pembuatan larutan pembanding
Sejumlah volume ekstrak cair di ukur
Asam galat di timbang 10,0021 gram,
dengan seksama, diencerkan dengan
dimasukkan kedalam labu terukur,
etanol 80 % sampai kadar yang sesuai
encerkan secara kuantitatif dan jika perlu
untuk kolorimetri.
bertahap dengan metanol P hingga kadar
b. Larutan pembanding
lebih kurang 1 mg/mL. Buat pengenceran
Kurang lebih 10,0054 mg pembanding,
larutan pembanding dengan kadar berturut-
di larutkan dalam etanol 80 %, encerkan
turut lebih kurang 15, 30, 45, 60, 75 dan
secara kuantitatif dengan etanol 80%
90 bpj.
hingga kadar 30, 40, 50, 60 dan 70 μg/mL.
3. Penentuan panjang gelombang
c. Penentuan panjang gelombang
maksimum
maksimum

4
 Sebanyak 0,15 mL larutan induk asam
galat konsentrasi 1 mg/ mL di pipet ke
dalam labu ukur 10 mL lalu cukupkan
dengan methanol P hingga menjadi
konsentrasi 15 bpj, lalu di pipet sebanyak
1 mL larutan asam galat konsentrasi 15 bpj
tambahkan 5 mL enceran Folin-Ciocalteu
Fenol LP (7,5% dalam air). Diamkan
selama 8 menit, di tambahkan 4 mL NaOH
1 %, diamkan selama 1 jam dan ukur
serapan maksimumnya.
4. Pengukuran
Masing-masing 1 mL larutan uji dan
enceran larutan pembanding di pipet
ddalam tabung reaksi, di tambahkan 5 mL
enceran Folin-Ciocalteu Fenol LP (7,5%
dalam air). Diamkan selama 8 menit,
kedalam campuran di tambahkan 4 mL
NaOH 1%, diamkan selama 1 jam. Ukur
serapan pada panjang gelombang
maksimum lebih kurang 730 nm, buat
kurva kalibrasi dan hitung kadar fenol total
(Departemen Kesehatan Republik
Indonesia, 2011).
3. Tanin
Penetapan kadar tanin dilakukan
dengan metode spektrofotometri UV-Vis.
a. Larutan pembanding
Pembanding katekin di keringkan
dalam oven pada suhu 105 ºC sampai
bobot tetap. Lalu di timbang lebih kurang
50 mg, masukkan kedalam labu terukur 50
mL, larutkan dalam etil asetat P, sonikasi
selama 5 menit. 2 mL larutan di pipet
masukkan kedalam labu erlenmeyer
bersumbat kaca 100 mL, 50 mL etil asetat
P di tambahkan, sonikasi kembali selama 5
menit.
b. Larutan uji
Kurang lebih 50 mL ekstrak di pipet
kemudian di keringkan dalam oven pada
suhu 105 ºC sampai bobot tetap. Ekstrak
yang sudah d keringkan dimdasukkan
kedalam labu ukur 50 mL, di larutkan
dalam etil asetat P, sonikasi selama 5
menit. 2 mL larutan di pipet di dmasukkan
kedalam labu erlenmeyer bersumbat kaca
100 mL, di tambahkan 50 mL etil asetat P,
sonikasi kembali selama 5 menit.
c. Pengukuran
Serapan larutan pembanding, larutan
uji dan larutan balngko di ukur secara
spektrofotometri pada panjang gelombang
279 dan 300 nm. Serapan larutan uji pada
300 nm tidak lebih dari 0,03. Gunakan etil
asetat P sebagai blanko. Hitung persentase
katekin dalam ekstrak pada panjang
gelombang 279 nm (Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, 2010).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Standarisasi Simplisia Daun Salam
1. Pemeriksaan Pemerian.
2. Pemeriksaan Mikroskopis.
3. Pola Kromatografi Lapis Tipis.
4. Susut Pengeringan 8,1909% ± 0,2377
%.
5. Kadar Abu Total 5,0905% ± 0,0134% .
6. Kadar Abu Tidak Larut Asam 0,7394
% ± 0,0842 %.
7. Kadar Sari Larut Dalam Air 8,5886 %
± 1,0044 %.
8. Kadar Sari Larut Dalam Etanol
11,2617 % ± 0,5816 %.
9. Kadar flavonoid total simplisia daun
salam 3,2321 %.
Hasil Analisis Kualitatif Ekstrak
Heksan, Aseton, Etanol dan Air Daun
Salam
Daun salam yang telah di ekstraksi
menggunakan 4 pelarut yang bebeda yaitu
heksan, aseton, etanol dan air kemudian
dilakukan uji kualitatif kandungan kimia di
tunjukkan pada (Tabel I).
Hasil Penetapan Kadar Ekstrak
Heksan, Aseton, Etanol dan Air Daun
Salam
1. Kadar alkaloid total dari ekstrak etanol
daun salam 0,34 % (Tabel II).
2. Kadar flavonoid total dari ekstrak
etanol dan air daun salam 0,512 % dan
0,486 % di hitung sebagai kuersetin
(Tabel II).
3. Kadar fenol total dari ekstrak aseton,
etanol dan air daun salam 0,1202 %,
0,1258 % dan 0,2248 % di hitung
sebagai asam galat (Tabel II).
5
4. Kadar tanin total dari ekstrak aseton, 0,1688 % dan 0,1622 % di hitung
etanol dan air daun salam 0,1457 %, sebagai katekin (Tabel II).

Tabel I. Data Hasil Uji Kualitatif Dari Ekstrak Heksan, Aseton, Etanol dan Air Daun Salam
Ekstrak
No. Pengujian
Heksan Aseton Etanol Air

1. Karbohidrat

- Molish - - - -

- Benedict - - - -

- Fehling - - - -

2. Asam lemak - - - -
- Asam sulfat
3. Fenol

- FeCl3 - + + +

- Timbal asetat - - - -

4. Tanin

- FeCl3 - + + +

5. Flavonoid

- Timbal asetat - + + -

- Shinoda - - - -

6. Alkaloid

- Mayer - - - -

- Wagner - - + -

7 Terpenoid
-As. Asetat anhidrat + as.
Sulfat - - - -

8 Minyak atsiri - - - -
- KMnO4
9 Saponin - - - -
- Tes busa
10 Steroid - - - -
- As. Asetat anhidrat + as.
Sulfat

Keterangan : + = Mengandung senyawa metabolit sekunder

_
= Tidak mengandung senyawa metabolit sekunder

6
Gambar 1. Profil spektra panjang gelombang maksimum kuersetin konsentrasi 50
ppm pada 430, 5 nm

Hubungan Konsentrasi dengan Absorban

0.7
0.6
y = 0,0101x - 0,0579
0.5 R = 0,9996
Absorban

0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Konsentrasi (ppm)

Gambar 2. Kurva kalibrasi Flavonoid

Gambar 3. Profil spektra panjang gelombang maksimum asam galat konsentrasi 15

ppm pada 764 nm

7
 Hubungan Konsentrasi dengan Absorban
0.9
0.8 y = 0,0066x + 0,1979
0.7 R = 0,9997
0.6
Absorban

0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 20 40 60 80 100
Konsentrasi (ppm)

Gambar 4. Kurva kalibrasi Fenol

Tabel II. Data Hasil Uji Kualitatif Dari Ekstrak Heksan, Aseton, Etanol dan Air Daun Salam

Ekstrak biji Alkaloid Flavonoid Fenol total (%) Tanin total (%)
alpukat total (%) total (%)

Ekstrak Heksan - - - -

Ekstrak Aseton - - 0,1202 0,1452

Ekstrak Etanol 0,34 0,512 0,1258 0,1688

Ekstrak Air - 0,486 0,2248 0,622

Pembahasan rumput, batang, akar serta tanah.

Pembahasan Simplisia Pencucian dilakukan untuk menghilangkan
Sampel yang digunakan adalah tanah dan pengotor lainnya yang melekat
Syzygium polyanthum (Wight) Walp. yang pada daun salam, pencucian dilakukan
diambil di Jalan Bakti II, Kelurahan Parak dengan air bersih dan mengalir.
Kopi Alai, Kecamatan Padang Timur, Perajangan dilakukan untuk
Kota Padang, Sumatera Barat. Daun salam mempermudah proses pengeringan,
yang diambil adalah semua jenis daun pengepakan dan penggilingan.
karena sesuai dengan parameter Pengeringan bertujuan untuk memperoleh
standarisasi untuk simplisia daun salam simplisia yang tidak mudah rusak,
dan pengambilan dilakukan pada pagi hari sehingga dapat disimpan dalam waktu
dengan dasar bahwa kandungan bahan yang lebih lama. Selanjutnya sortasi kering
kimia berkhasiat yang ada dalam yang merupakan tahap akhir pembuatan
tumbuhan/tanaman dalam keadaan simplisia, dengan tujuan yaitu memisahkan
maksimal. benda-benda asing dan pengotor-pengotor
Setelah itu dilakukan sortasi basah lain yang masih ada dan tertinggal pada
dengan tujuan memisahkan kotoran- simplisia kering, lalu selanjutnya
kotoran atau bahan-bahan asing lainnya pengepakan dan penyimpanan
dari daun salam seperti tanah, kerikil,

8
(Departemen Kesehatan Republik
Indonesia, 1985).
Sampel yang digunakan untuk
pengujian ini adalah daun salam (Syzygium
polyanthum (Wight) Walp.) yang telah
dilakukan uji identifikasi di Herbarium
Universitas Andalas (ANDA), jurusan
biologi FMIPA Universitas Andalas
Kampus Limau Manis, Padang, Sumatera
Barat, Indonesia dengan hasil specimen
Syzygium polyanthum (Wight) Walp.
(famili: Myrtaceae).
Pembuatan Ekstrak
Setelah itu dilanjutkan dengan
pembuatan ekstrak cair, sampel yang
sudah kering, diblender dan diayak
kemudian ditimbang sebanyak 50 gram
dengan menggunakan timbangan analitik
untuk dijadikan ekstrak. Ekstrak dapat
dibuat dengan cara maserasi yaitu dengan
merendam simplisia dalam pelarut pada
suhu kamar sehingga kerusakan atau
degradasi metabolit dapat diminimalisasi.
Pada maserasi terjadi proses
kesetimbangan konsentrasi antara larutan
luar dan didalam sel sehingga diperlukan
pergantian pelarut secara berulang dan
dengan pengadukan (Hanani, 2017).
Simplisia yang telah ditimbang di
maserasi. Kemudian maserat dikumpulkan
lalu diuapkan dengan penguap putar
(rotary evaporator) pada suhu ± 50 0C,
penguapan ini bertujuan menguapkan
pelarut sehingga diperoleh ekstrak cair.
Lakukan hal yang sama terhadap seluruh
pelarut yaitu aseton dan etanol hingga
diperoleh ekstrak cair.
Selanjutnya pembuatan infusa daun
salam dengan cara menimbang sebanyak
50 gram simplisia daun salam dan
dimasukkan kedalam panci infus dan
ditambahkan dengan pelarut air sebanyak
500 mL, lalu dimasukkan kedalam
penangas air selama 15-20 menit pada
suhu 98 ºC, lalu saring menggunakan kain
flanel sehingga diperoleh ekstrak air daun
salam.
Analisis Kandungan Kimia
Dari Tabel I menunjukkan hasil
pengujian yang negatif pada uji steroid,
uji saponin, uji minyak atsiri, uji terpenoid,
uji asam lemak dan uji karbohidrat. Dan
menunjukkan hasil yang positif pada
pengujian alkaloid, uji flavonoid,uji tanin,
dan uji fenol. Pada ekstrak heksan tidak
diperoleh kandungan kimia hal ini
dikarenakan heksan mempunyai
karakteristik tidak polar, volatile,
mempunyai bau khas dan umumnya
heksan digunakan untuk mengekstraksi
minyak nabati (saifudin, 2014). Selain itu
umur tumbuhan, jenis dan lingkungan
tempat tumbuh juga dapat mempengaruhi
hasil analisis kandungan kimia dari
tumbuhan yang mengakibatkan perbedaan
kandungan senyawa kimia dan kadar
kandungan senyawa kimia (Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, 1985).
Faktor lain yang juga mempengaruhi yaitu
sifat senyawa kimia, pelarut yang
digunakan serta alat yang tersedia (Hanani,
2017).
Pembahasan Kadar Senyawa Kimia
1) Kadar Alkaloid Total Pada Ekstrak
Etanol
Penetapan kadar alkaloid total
dilakukan dengan metode gravimetri,
metode gravimetri adalah salah satu
metode penentuan secara kuantitatif
dengan cara mengukur berat komponen
dalam keadaan murni setelah melalui
proses pemisahan (Hanani, 2017).
Penambahan amoniak P bertujuan agar
Amoniak P bereaksi dengan asam klorida
yang membentuk garam yang larut dalam
air sedangkan alkaloid kembali dalam
bentuk basa dan tidak terlarut dalam air
tetapi mudah larut dalam kloroform.
Alkaloid dalam keadaan bebas dapat
diekstraksi dengan pelarut kloroform,
sehingga dihasilkan ekstrak kloroform
yang merupakan alkaloid total.
Berdasarkan hasil perhitungan kadar
alkaloid total elstrak etanol diperoleh
kadar sebesar 0,34 % (Tabel II). Hasil
yang diperoleh sesuai menurut standar
yang ada pada Farmakope Herbal
9
Indonesia Edisi I (2008) yaitu tidak kurang
dari 0,30 %.
2) Kadar Flavonoid Total pada Ekstrak
Etanol dan Ekstrak Air
Penetapan kadar flavonoid total dari
ekstrak etanol dan ekstrak air daun salam
dilakukan dengan menggunakan metode
kolorimetri alumunuim klorida secara
Spektroskopi UV-Vis yang dihitung
sebagai kuersetin.
Penambahan etanol P berfungsi
sebagai peningkat kelarutan, alumunium
klorida P yang berfungsi untuk
memberikan efek batokromik dengan
melakukan pergeseran kearah panjang
gelombang yang lebih panjang, sehingga
merubah panjang gelombang standar
kuersetin untuk masuk kedalam range
panjang gelombang UV-Vis, sehingga
menghasilkan juga efek hiperkromik atau
peningkatan intensitas larutan standar
kuersetin menghasilkan warna yang lebih
kuning (Chang et, al., 2002). Natrium
asetat yang sebagai penstabil. Kocok dan
diamkan selama 30 menit pada suhu ruang.
Hal tersebut dimaksudkan agar reaksi
antara larutan standar kuersetin dengan
pereaksi-pereaksi yang ditambahkan dapat
berlangsung dengan sempurna.
Penentuan panjang gelombang maksimum
dari larutan standar kuersetin adalah 403,5
nm pada konsentrasi 50 µg/mL (Gambar
1).
Berdasarkan kurva kalibrasi pada
Gambar 2 diperoleh persamaan regresi y=
0,0101x - 0,0579. Koefisien korelasi r =
0,9996, angka ini mendekati 1 yang berarti
terdapat korelasi yang sangat tinggi antara
absorban dan kadar senyawa serta
menunjukkan hubungan antara keduanya.
Berdasarkan (Tabel II) diperoleh kadar
flavonoid total masing-masing pada
ekstrak air dan ekstrak etanol sebesar
0,486% dan 0,512%. Hasil ini memenuhi
persyaratan yang terdapat dalam
Farmakope Herbal Indonesia Edisi I
(2008), yaitu tidak kurang dari 0,40 %.
3) Kadar Fenol Total Pada Ekstrak Air,
Ekstrak Etanol dan Ekstrak Aseton
Pada penelitian ini penentuan kadar
fenol total menggunakan metode Folin
Ciocalteu. Reagen Folin-Ciocalteu
digunakan karena senyawa fenolik dapat
beraksi dengan Folin membentuk larutan
berwarna yang dapat diukur
absorbansinya. Prinsip dari metode Folin-
Ciocalteu adalah terbentuknya senyawa
kompleks berwarna biru yang dapat diukur
pada panjang gelombang 765 nm.
Pereaksi ini mengoksidasi fenolat
(garam alkali) atau gugus fenolik-hidroksi
mereduksi asam heteropoli (molibdenum-
tungsten) yang terdapat dalam pereaksi
Folin- Ciocalteu menjadi senyawa
kompleks molibdenum-tungsten. Senyawa
fenolik bereaksi dengan reagen Folin
Ciocalteu hanya dalam suasana basa agar
terjadi disosiasi proton pada senyawa
fenolik menjadi ion fenolat. Untuk
membuat kondisi basa maka digunakan
natrium hidroksida. Gugus hidroksi pada
senyawa fenolik bereaksi dengan reagen
Folin Ciocalteu membentuk kompleks
molibdenum-tungsten berwarna biru yang
dapat terdeteksi dengan spektrofotometer.
Semakin besar konsentrasi senyawa
fenolik maka semakin banyak ionfenolat
yang akan mereduksi asam heteropili
(fosfomolibdat-fosfotungsten) menjadi
kompleks molibdenum-tungsten sehingga
warna biru yang dihasilkan semakin pekat
(Tahir, 2017).
Pada penentuan kadar fenolat total, di
peroleh serapan maksimum asam galat
pada 674 nm pada konsentrasi 15 µg/mL.
Berdasarkan kurva kalibrasi pada
Gambar 4 diperoleh persamaan regresi y=
0,0066x + 0,1979. Koefisien korelasi r =
0,9997, angka ini mendekati 1 yang berarti
terdapat korelasi yang sangat tinggi antara
absorban dan kadar senyawa serta
menunjukkan hubungan antara keduanya.
Berdasarkan diperoleh kadar fenolat total
masing-masing pada ekstrak air, ekstrak
etanol dan ekstrak aseton sebesar 0,2248
% , 0,12586 % dan 0,1202 %.
10
4) Kadar Tanin Total Pada Ekstrak Banu, K. Sahira & Cathrine, DR. L.
Aseton, Etanol dan Air (2015). General Techniques
Penetapan kadar tanin dilakukan denga Involved in Phytochemical Analysis.
metode spektrofotometri UV-Vis dengan International Journal of Advanced
mengunakan senyawa standar katekin. Research in Chemical Sience
Untuk menentukan kadar tanin total (IJARCS), 2(4): 25-32.
dengan metode Spektrofotometri UV-Vis Chang, C., Yang, M., Wen Hand Chern J.
(Shimadzu UV- 1800). (2002). Estimation of Total
Hasil pengukuran serapan larutan Flavonoid Content in Propolis by
pembanding pada panjang gelombang 279 Two Compementary Colometric
yaitu 0,262 nm dan larutan uji ekstrak Methods.J Food Drug Anal.
aseton 0,244 nm kadar yang diperoleh Departemen Kesehatan Republik
0,1457 %, ekstrak etanol 0,249 nm dengan Indonesia.(1979). Farmakope
kadar 0,1688 %, dan ekstrak air 0,265 nm Indonesia (Edisi ketiga).Jakarta:
dan kadar yang diperoleh sebesar 0,1622 Departemen Kesehatan Republik
%. Indonesia.
Departemen Kesehatan Republik
KESIMPULAN
Indonesia.(1985). Cara Pembuatan
Dari data yang diperoleh dalam penelitian Simplisia. Jakarta: Direktorat
ini, dapat disimpulkan bahwa: Jendral Pengawasan Obat dan
Kandungan senyawa kimia dari ekstrak Makanan.
aseton yaitu fenol dan tanin. Kandungan Departemen Kesehatan Republik
senyawa kimia dari ekstrak etanol yaitu Indonesia. (2000). Parameter
alkaloid, flavonoid, fenol dan tanin. Satandar Umum Ekstrak Tumbuhan
Kandungan senyawa kimia dari ekstrak air Obat. (Edisi 1). Jakarta: Direktorat
yaitu flavonoid, fenol dan tanin. Namun, Jendral Pengawasan Obat dan
pada ekstrak heksan tidak adanya Makanan, Direktorat Pengawasan
kandungan senyawa kimia yang Obat Tradisional.
ditemukan. Departemen Kesehatan Republik
Kadar alkaloid total pada ekstrak Indonesia. (2008). Farmakope
etanol 0,34 %.Kadar flavonoid total Herbal Indoensia. (Edisi 1). Jakarta:
berturut-turut pada ekstrak etanol dan air Departemen Kesehatan Republik
sebesar 0,512 % dan 0,486 %. Kadar fenol Indonesia.
total berturut-turut pada ekstrak aseton, Departemen Kesehatan Republik
etanol dan air sebesar 0,1202 %, 0,12586 Indonesia. (2010). Farmakope
% dan 0,2248 %. Serta kadar tanin total Herbal Indoensi Suplemen I. Jakarta:
berturut-turut dari ekstrak aseton, etanol Departemen Kesehatan Republik
dan air sebesar 0,1452 %, 0,1688 % dan Indonesia.
0,1622 %. Departemen Kesehatan Republik
Indonesia. (2011). Farmakope
DAFTAR PUSTAKA Herbal IndoensiaSuplemen II.
Agustina, S., Ruslan., Wiraningtyas, A,. Jakarta: Departemen Kesehatan
(2016). Skrining Fitokimia Tanaman Republik Indonesia.
Obat di Kabupaten Bima. Cakra Evans. W. C, (2002). Treasend Evans
Kimia, 4 (1): 71-76. Pharmacognosy. Harcourt Brace and
Badan POM RI. (2008). Taksonomi Company. London.
Koleksi Tanaman Obat Kebun Evendi, A. (2017). Uji Fitokimia dan Anti
Tanaman Obat Citeureup. Jakarta: Bakteri Ekstrak Daun Salam
Badan Pengawasan Obat dan (syzygiumpolyanthum) Terhadap
Makanan Republik Indonesia. Bakteri Salmonella typhi dan

11
 Escherichia coli Secara In Vitro.
Mahakam Medical Laboratory
Technology Journal. 2 (1): 1-9.
Gandjar, I.G. & Rohman, A. (2013). Kimia
farmasi analisis. (Cetakan IX).
Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
Hanani, E. (2017). Analisisn Fitokimia.
Jakarta: Buku Kedokteran EGC.
Harbone, J.B. (1987). Metode Fitokimia:
Penuntun Cara Modern
Menganalisa Tumbuhan . Bandung:
Penerbit ITB.
Harismah, K dan Chusniatun. (2016).
Pemanfaatan Daun Salam (Eugenia
polyantha) Sebagai Obat Herbal dan
Rempah Penyedap Makanan. Warta
LPM, 19 (2): 110-118.
Kementrian Kesehatan Republik
Indonesia. (2011). Formularium
Obat Herbal Asli Indonesia. Jakarta:
Menteri Kesehatan Republik
Indonesia.
Kharismawati, M., Utami, P.I.,
Wahyuningrum, R., (2009).
Penetapan Kadar Tanin dalam Infusa
Daun Salam (Syzygium polyanthum
(Wight.) Walp)) Secara
Spektrofotometri Sinar Tampak.
Pharmacy, 6 (1): 22-27.
Khopkar. 2002. Konsep Dasar Kimia
Analitik. Jakarta: UI Press.
Kusuma, I.W., Kuspradini, H., Arung,
E.T., Aryani, E., Min,Y.H., Kim,
J.S., Kim, Y.U., (2011). Biological
Activity and Phytochemical Analysis
of Three Indonesian Medicinal
Plants, Murraya koenigii, Syzygium
polyanthum and Zingiber purpurea.J
Acupunct Meridian Stud: Korean
Pharmacopuncture Institute, 4 (1):
75-79.
Moeloek, F. A. (2006). Herbal and
Traditional Medicine: National
Perspective and Policies In
Indonesia. Jurnal Bahan Alam
Indonesia, 5 (1): 293-297.
Nuratmi, B., Winarno, W.M., Sundari, S,.
(1999). Khasiat Daun Salam
(Eugenia polyantha Wight)sebagai
Antidiare pada Tikus Putih. Media
Litbangkes, 8 (3 & 4): 14-17.
Oktavia, J.D. (2011). Pengoptimuman
Ekstraksi Flavonoid Daun Salam
(Syzygium Polyanthum) Dan
Analisis Sidik Jari Dengan
Kromatografi Lapis Tipis. (Skripsi).
Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Peraturan Menteri Kesehatan Republik
Indonesia. (2016). FormulariumObat
Herbal Asli Indonesia. Jakarta:
Menteri Kesehatan Republik
Indonesia.
Prahastuti, S., Tjhajani, S., Hartini, E.
(2011). Efek Infusa Daun Salam
(Syzygium polyanthum (WIGHT)
Walp.) Terhadap Penurunan Kadar
Kolesterol Total Darah Tikus Model
Dislipidemia Galur Wistar. Jurnal
Medika Planta, 1 (4): 28-32.
Rivai, H., Heriadi, A., Fadhila,H., (2015).
Pembuatan dan Karakterisasi
Ekstrak Kering Daun Salam
(Syzygium polyanthum (WIGHT)
WALP.). Jurnal Farmasi Higea, 7
(1): 54-62.
Robinson, T. (1995). Kandungan Organik
Tumbuhan Tinggi. Terjemahan
Kosasih Padmawinata. Bandung:
ITB.
Saifudin, A. (2014). Senyawa Alam
Metabolit Sekunder Teori Konsep
Dan Teknik Pemurnian. Yogyakarta:
Deepublish.
Studiawan, H & Santosa, M.H. (2005). Uji
Aktivitas Penurunan Kadar Glukosa
Darah Ekstrak Daun Eugenia
polyantha pada Mencit yang di
Induksi Aloksan. Media Kedokteran
Hewan, 21 (2): 62-65.
Tahir, M., Muflihunna, A., Syafrianti.
(2017). Penentuan Kadar Fenolik
Total Ekstrak Etanol Daun Nilam
(Pogostemon cablin Benth) dengan
Metode Spektrofotometri UV-Vis.
Jurnal Fitofarmaka Indonesia, 4 (1):
215-218.
12
Tiwari, P., Kumar,B., Kaur,M., Kaur,M., Wahyuni, S. & Wita, W. (2017).
Kaur,G., Kaur,H., (2011). Hypoglycemic and Antioxidant
Phytochemical Screening and Effects of Syzygium polyanthum
Extraction: A Review. International Leaves Extract on Alloxan Induced
Pharmaceutica Sciencia, 1 (1): 98- Hyperglycemic Wistar Rat. Bali
106. Medical Journal, 3 (3): 113-115.
Verawati, Nofiandi, D., Petmawati, Widyawati, T., Purnawan, W.W.,
(2017). Pengaruh Metode Ekstraksi Atanghwo, I.J., Yusoff, N.A.,
Terhadap Kadar Fenolat Total dan Ahmad, M., Asmawi, M.Z., (2015).
Aktivitas Antioksidan Daun Salam Anti-diabetic Activity of Syzygium
(Syzygium polyanthum (WIGHT) polyanthum (WIGHT) Left Extract
WALP.). Jurnal Katalisator The Most Commonly Used Herb
Kopertis Wilayah X, 2(2): 53-60. Among Diabetic Patient in Medan
North Sumatera Indonesia.
International Journal of
Pharmaceutical Sciences Research,
6 (4): 1698-1704.

13