Analisis Kualitatif Dan Analisis Kuantitatif Dari Ekstrak Heksan, Aseton, Etanol Dan

Air Dari Daun Mengkudu (Morinda Citrifolia L.)

Rusdi1), Rahmiati1), Harrizul Rivai1)

1)
. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFARM) Padang.
Email: rahmiati@gmail.com

ABSTRAK

Morinda citrifolia merupakan tanaman obat yang banyak berkhasiat untuk kesehatan, terutama daun
mengkudu yang dipergunakan untuk obat cacing (antelmintik), peluruh dahak (ekspektoran), penurun panas
(antipiretik) dan melancarkan darah. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis secara kualitatif dan kuantitatif
senyawa kimia yang terkandung dalam ekstrak heksan, aseton, etanol dan air dari daun mengkudu. Hasil yang
diperoleh dari uji kualitatif menunjukan ektrak aseton dan etanol positif mengandung fenol, sedangkan dalam
ekstrak etanol dan air positif mengandung flavonoid, dan tanin positif dalam ekstrak aseton dan etanol. Uji
kuantitatif fenol, flavonoid dan tanin menggunakan metode spektrofotometer ultraviolet-visibel. Hasil yang
diperoleh dari uji kuantitatif menunjukan kadar fenol total dari ekstrak etanol dan aseton sebesar 0,3576 % dan
0,3164 %. Kadar flavonoid total dari ekstrak ekstrak etanol dan air sebesar 2,7897 % dan 2,6905 %. Kadar tanin
total dalam ekstrak aseton dan etanol sebesar 0,6245 % dan 0,6251 %.

Kata kunci: Morinda citrifolia, Kualitatif, Kuantitatif

ABSTRACT

Morinda citrifolia is a medicinal plant that has many health benefits, especially the noni leaf which is
used for worming medicine (anthelmintic), sputum expectorant (expectorant), lowering heat (antipyretic) and
launching blood. This study aims to analyze qualitatively and quantitatively the chemical compounds contained
in hexane, acetone, ethanol and water extracts from noni leaves. The results obtained from the qualitative test
show that acetone and ethanol extracts contain positive phenols, whereas in ethanol extracts and positive water
contains flavonoids and positive tannins in acetone and ethanol extracts. Quantitative phenol, flavonoid and
tannin tests use the ultraviolet-visible spectrophotometer method. The results obtained from the quantitative test
showed total phenol levels from ethanol and acetone extracts were 0.3576% and 0.3164%. Total flavonoid
levels from ethanol extract and water extract were 2.7897% and 2.6905%. Total tannin levels in acetone and
ethanol extract were 0.6245% and 0.6251%.

Keywords : Morinda citrifolia, Kualitatif, Kuantitatif

PENDAHULUAN peluruh haid (emenogoga), peluruh dahak

Mengkudu atau pace (Morinda
citrifolia L.) merupakan salah satu
tanaman obat yang banyak berkhasiat
untuk kesehatan, dan merupakan tanaman
yang mudah tumbuh di daerah tropis
seperti Indonesia, Malaysia dan Pasifik
(Heyne, 1987). Hampir seluruh bagian
mengkudu digunakan sebagai obat, salah
satunya merupakan daun mengkudu, daun
mengkudu selain untuk dipergunakan
sebagai sayuran juga digunakan untuk obat
cacing (antelmintik), pelembut kulit,
(ekspektoran), penurun panas (antipiretik),
dan antiseptik. Untuk itu perlu dilakukan
uji kandungan kimia yang terdapat dalam
daun mengkudu. Secara in vitro daun
mengkudu telah dilaporkan efektif sebagai
antelmintik untuk mengatasi Asricardia
galli pada unggas dan Ascaris suum pada
babi (Soemardji et al 1994).
Hasil penelitian yang telah
dilakukan terhadap kandungan kimia daun
mengkudu (Morinda citrifolia L.)
menunjukan bahwa daun mengkudu positif

1
mengandung steroid dan alkaloid
(Sudarsono, 1989). Dan Berdasarkan
penelitian yang telah dilakukan oleh
Diassianti (2011) menunjukkan bahwa
daun mengkudu (Morinda citrifolia L.)
memiliki kandungan saponin, flavonoid,
polifenol, tanin dan triterpen. Zat aktif
tersebut bersifat bakterisidal dan memiliki
metode tersendiri dalam menghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus
aureus.
Pelarut yang digunakan tergantung
pada pada polaritas senyawa yang akan
disari, mulai dari yang bersifat nonpolar
hingga polar. Air adalah pelarut universal,
digunakan untuk ekstrak produk tanaman
dengan antimikroba. Aseton larut pada
hidrofilik dan komponen lipofilik,
tercampur dengan air. Sangat bermanfaat
dalam membuat ekstrak, terutama untuk
antimikroba dimana lebih banyak senyawa
fenolik harus diekstraksi (Tiwari, et al.,
2011). Pelarut etanol mempunyai kelarutan
sangat mudah larut dalam air, dalam
klorofrom P, dan dalam eter P. Pelarut n-
heksana mempunyai kelarutan praktis
tidak larut dalam air, larut dalam etanol
mutla, dapat dicampur dengan eter, dengan
klorofrom, dengan benzena dan sebagian
besar minyak lemak dan minyak atsiri
(Departemen Kesehatan Republik
Indonesia, 1995).
Berdasarkan hal tersebut, belum
ada ditemukan uji kualitatif dan kuantitatif
dari ekstrak heksan, aseton, etanol, dan air
pada daun mengkudu (Morinda citrifolia
L.). Oleh karena itu, perlu dilakukan
penelitian. Pada penelitian ini digunakan
metode skrining fitokimia untuk
menentukan ada tidaknya kandungan
kimia dalam masing-masing pelarut yang
digunakan. Dengan metoda ini
diharapakan diperoleh data kandungan
fitokimia dan analisis kualitatif dan
kuantitatif dari ekstrak daun mengkudu.
METODE PENELITIAN
Alat
Alat yang digunakan antara lain:
Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu UV-
1800), timbangan analitik (Precisa), kertas
perkamen, kertas saring, spatel, bola hisap,
corong, aluminium foil, wadah maserasi
(botol gelap), penguap vakum (IKA),
erlenmeyer (Iwaki), labu ukur (Iwaki),
batang pengaduk, beaker glass (Iwaki),
tissue, pipet ukur (Iwaki), pipet tetes,
tabung reaksi, rak tabung reaksi, dan plat
tetes.
Bahan
Bahan yang digunakan pada
penelitian ini adalah daun mengkudu
(Morinda citrifolia L.), heksan (Merck),
aseton (Merck), etanol (Merck), air suling
(PT. Brataco), asam sulfat pekat, ferri
klorida (FeCl3), kalium Bromida (KBr),
larutan timbal asetat, ammonia, asam galat,
natrium karbonat, natrium fosfat, gelatin,
Natrium hidroksida, serbuk magnesium
(Mg), larutan asam klorida, asam asetat
anhidrat, kalium permanganat (KMNO4),
asam galat (Sigma), kuersetin (Sigma),
katekin (Sigma), khloralhidras, plat
kromatografi lapis tipis.
Cara Kerja
Penyiapan Simplisia
Sampel yang digunakan untuk
penelitian ini adalah daun mengkudu
(Morinda citrifolia L.) sebanyak 3 kg yang
dipetik langsung pada pukul 09.00 WIB di
Lolong Belanti, Kecamatan Padang Utara,
Padang, Sumatera Barat.
2
Identifikasi Tumbuhan
Identifikasi tumbuhan yang diambil
adalah tumbuhan utuh dari daun
mengkudu. Identifikasi mengkudu
dilakukan di Herbarium ANDA, Jurusan
Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam (FMIPA) Universitas
Andalas (UNAND) Padang, Sumatera
Barat.
Pemeriksaan simplisia daun mengkudu.
Setelah simplisia disiapkan, maka perlu
dilakukan pemeriksaan simplisia menurut
(Departemen kesehatan Republik
Indonesia, 1989).
a. Makroskopik, Helaian daun
umumnya tidak utuh, berwarna
hijau sampai hijau tua kekuningan,
bentuk bundar telur, lebar hingga
berbentuk elip, panjang 4,5 cm
sampai 21 cm, lebar 4,5 cm sampai
8 cm, ujung daun runcing, pangkal
daun meruncing, pinggir daun rata.
Daun penumpu berbentuk bundar
telur, pinggir rata warna hijau
kekuningan, panjang 0,5 cm
sampai 1,5 cm, tangkai daun 0,5
cm sampai 1,5 cm. Tulang daun
menyirip jelas.
b. Mikroskopik, pada penampang
melintang melalui tulang daun
tampak sel epidermis atas terdiri
dari 1 lapis sel berbentuk empat
persegi panjang, kutikula tebal,
stomata sedikit. Epidermis bawah
terdiri dari 1 lapis sel berbentuk
segiempat atas. Mesofil meliputi
jaringan palisade, terdiri 1 lapis sel,
terdapat hablur kalsium oksalat
berbentuk jarum, berkas pembuluh
tipe koleteral. Pada sayatan
paradermal tampak epidermis atas
berbentuk poligonal, epidermis
bawah berbentuk poligonal dinding
antiklinal lurus, stomata tipe
parasitik (Rubiaccae).
Identifikasi KLT
Timbang 300 mg serbuk daun,
campur dengan 5 mL metanol pekat dan
panaskan di atas tangas air selama 2 menit,
dinginkan, saring. Cuci endapan dengan
metanol pekat dengan secukupnya
sehingga diperoleh 5 mL filtrat. Pada titik
pertama lempeng KLT totolkan 30 µL
filtrat, pada titik kedua totolkan 10 µL zat
warna II LP. Elusi dengan campuran etil
asetat P-metil etil keton P-asam format P-
air (50:30:10:10) dengan jarak rambat 15
cm amati dengan sinar biasa dan dengan
sinar ultraviolet 366-nm. Semprot lempeng
dengan alumunium klorida 1 % dalam
etanol LP. Amati dengan sinar biasa dan
dengan sinar ultra violet 366 nm
(Departemen Kesehatan Republik
Indinesia, 1995) .
Uji Kadar Abu, tidak lebih dari 12 %
Timbang 2 sampai 3 g bahan uji
yang telah dihaluskan dan masukkan ke
dalam krus silikat yang telah dipijar dan
ditara. Pijarkan perlahan-lahan hingga
arang habis, dinginkan dan timbang. Jika
dengan cara ini arang tidak dapat hilang,
tambahkan air panas aduk, saring melalui
kertas saring bebas abu. Pijarkan kertas
saring beserta sisa penyaringan dalam krus
yang sama. Masukkan filtrat ke dalam
krus, uapkan dan pijarkan hingga bobot
tetap, timbang. Kadar abu total dihitung
terhadap berat bahan yang telah
dikeringkan (Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, 2000).
3
 Uji Kadar abu tidak larut dalam asam
tidak lebih dari 0,5 %.
Didihkan abu yang telah diperoleh
pada penetapan kadar abu total dengan 25
ml asam klorida encer P selama 5 menit.
Kumpulkan bagian yang tidak larut dalam
asam, saring melalui kertas saring bebas
abu, cuci dengan air panas, pijarkan dalam
krus hingga bobot tetap, timbang. Hitung
kadar abu yang tidak larut dalam asam
terhadap bahan yang telah dikeringkan
(Departemen Kesehatan Republik
Indonesi, 2000).
Uji Kadar sari larut dalam air tidak kurang
dari 9,5 %.
Didihkan abu yang telah diperoleh
pada penetapan kadar abu total dengan 25
ml air selama 5 menit. Kumpulkan bagian
yang tidak larut, saring melalui kertas
saring bebas abu, cuci dengan air panas,
pijarkan selama 15 menit pada suhu tidak
lebih dari 450, hingga bobot tetap,
timbang. Perbedaan bobot sesuai dengan
jumlah abu yang larut dalam air. Hitung
kadar abu yang larut dalam air terhadap
bahan yang telah dikeringkan (Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, 2000).
Uji Kadar larut dalam etanol. tidak kurang
dari 3,5 %.
Timbang seksama lebih kurang 5 g
serbuk, yang setalah dikeringkan
Masukkan ke dalam labu bersumbat,
tambahkan 100 ml etanol P, kocok berkali-
kali selama 6 jam pertama, biarkan selama
18 jam. Saring cepat untuk menghindari
penguapan etanol, uapkan 20 ml filtrate
hingga kering dalam cawan dangkal
beralas datar yang telah dipanaskan 105˚
dan ditara, panaskan sisa pada suhu 105˚
hingga bobot tetap. Hitung kadar dalam %
sari larut etanol (Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, 2000).
Ekstraksi Sampel
Sejumlah 50 gram serbuk simplisia
daun mengkudu dimaserasi dengan cara
merendam simplisia kedalam masing-
masing pelarut (heksan, aseton dan etanol)
sebanyak 500 mL (perbandingan 1:10
w/v). Direndam selama 6 jam pertama
sambil sesekali diaduk, kemudian diamkan
selama 18 jam. Sedangkan air secara
Infusa. Maserat dipisahkan dengan cara
filtrasi (penyaringan dengan kain flanel),
proses penyaringan ini diulangi sebanyak 2
kali, dengan menggunakan jenis dan
jumlah pelarut yang sama (heksan, aseton
dan etanol). Semua maserat dikumpulkan,
kemudian di uapkan dengan alat penguap
putar (rotary evaporator) pada suhu
dibawah 50 C sehingga diperoleh
ekstrak cair.
Infusa
10 gram serbuk simplisia
dimasukkan dalam panci dengan air
sebanyak 100 mL, panaskan di atas tangas
air selama 15 menit terhitung mulai suhu
mencapai 90 ºC sambil sekali-sekali
diaduk-aduk. Serkai selagi panas melalui
kain flannel, tambahkan air panas sampai
volume 100 mL (Badan Pengawas Obat
dan Makanan Republik Indonesia, 2010).
Analisis Kualitatif
Analisis kualitatif dari ekstrak daun
mengkudu antara lain :
a. Uji fenol
Ekstrak ditambahkan 2 tetes
pereaksi FeCl3 1 % (b/v). Ekstrak yang
mengandung fenol memberikan warna biru
4
kehitaman atau hijau kehitaman
(Harbone,1987).
b. Uji flavonoid
Ekstrak ditambah dengan sedikit
serbuk magnesium (Mg) dan 2 mL HCL 2
M. Senyawa flavonoid menjadi warna
jingga, kuning hingga merah lembayung.
c. Uji asam lemak
Tambahkan beberapa tetes asam
sulfat 25 % ke dalam beberapa tetes
ekstrak kemudian lakukan pemanasan
sehingga terbentuk warna coklat muda
(Hanani, 2017).
d. Uji tanin
Beberapa mL ekstrak ditambahkan
beberapa tetes FeCl3 10 %. Ekstrak yang
mengandung tanin menimbulkan warna
hijau kehitaman atau biru kehitaman
(Harbone, 1997).
e. Uji karbohidrat
Tes Fehling, identifikasi dilakukan
dengan penambahan larutan Fehling A dan
Fehling B dalam jumlah yang sama bantak
kedalam larutan uji, lalu akan terjadi
reduksi (kadang kadang di perlukan
pemanasan), menghasil endapa kupro
oksida berwarna merah bata (Hanani,
2017).
f. Uji saponin
Ambil 1 ml ekstrak tambahkan 10
ml air kemudian kocok kuat selama 10
menit, apabila terbentuk buih yang stabil
selama tidak kurang dari 10 menit setinggi
1 – 10 cm dan pada penambahan 1 tetes
asam klorida 2 N buih tidak hilang
menunjukan adanya saponin (Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, 1995).
g. Uji minyak atsiri
Ekstrak ditambah dengan larutan
kalium permanganat, warna akan menjadi
pucat atau hilang menunjukkan adanya
minyak atsiri (Hanani, 2017).
h. Uji terpenoid
Ekstrak ditambahkan pereaksi
Liberman – Buchard (asam asetat anhidra
10 tetes dan H2SO4 pekat sebanyak 2
tetes). Larutan dikocok perlahan dan
biarkan beberapa menit. Kandungan
senyawa terpenoid menimbulkan warna
merah atau ungu ( Harbone, 1987).
i. Uji alkaloid
Jika dengan Mayer terbentuk
endapan berwarna putih atau kuning yang
larut dalam metanol P dan dengan
Bouchardat LP terbentuk endapan
berwarna coklat sampai hitam, maka ada
kemungkinan terdapat alkaloid
(Departemen Kesehatan Republik
Indonesia, 1980).
j. Uji steroid
Ekstrak ditambahkan pereaksi
Liberman – Buchard (asam asetat anhidra
10 tetes dan H2SO4 pekat sebanyak 2
tetes). Larutan dikocok perlahan dan
biarkan beberapa menit. Kandungan
senyawa steroid memberikan warna biru
atau hijau (Harbone, 1987).
Analisis Kuantitatif Kadar Total
Golongan Kandungan Senyawa
Setelah dilakukan uji analisis
fitokimia pada ekstrak daun mengkudu,
maka diperoleh hasil positif senyawa
kimia yang terdapat dalam masing–masing
ekstrak. Kemudian dilakukan uji analisis
kuantitatif untuk menentukan kadar yang
ada di dalam ekstrak daun mengkudu.
Berikut prosedur penetuan kadar total
golongan kandungan senyawa kimia:
5
 a. Penetapan kadar fenol
Penetapan kadar fenol pada
simplisia umumnya ditentukan
menggunakan reaksi Folin Ciocalteu yang
menghasilkan kadar fenol total. Sebagai
pembanding digunakan asam galat
sehingga kadar fenol total dinyatakan
setara dengan asam galat. Absropsi diukur
pada panjang gelombang 732 nm. Untuk
menggunakan metoda Folin Ciocalteu ini
terlebih dahulu dilakukan pembuatan
larutan uji.
Pembuatan larutan uji: timbang
seksama sejumlah simplisia yang telah
dihaluskan masukkan kedalam labu
tentukur, encerkan secaran kuantitaf dan
jika perlu bertahap dengan metanol P
hingga kadar seperti yang tertera pada
masing masing monografi.
Pembuatan larutan pembanding :
timbang seksama sejumlah 10 mg asam
galat, masukkkan kedalam labu tentukur,
encerkan secara kuantitatif dan jika perlu
bertahap dengan metanol P hingga kadar
lebih kurang 1 mg/mL. Encerkan larutan
pembanding buat enceran larutan
pembaning dengan kadar berturut-turut
lebih kurang 5; 15; 30; 50; 70; 100.
Prosedur: pada masing masing 1
mL larutan uji dan enceran larutan
pembanding dalam tabung reaksi,
tambahkan 5 mL enceran folin-ciocalteu
fenol LP (7,5 % dalam air). Diamkan
selama 8 menit, tambahkan 4 mL NaOH 1
%, inkbasi selama 1 jam. Ukur serapan
maing-masing larutan pada panjang
gelombang serapan maksimum lebih
kurang 732 nm, buat kurva kalibrasi
(Kementrian Kesehatan Republik
Indonesia, 2011).
b. Penetapan kadar tanin
Kadar tanin tidak kurang dari 5,2
%, lakukan penetapan kadar secara
spektrofotometri.
Pembuatan larutan pembanding:
keringkan larutan pembanding katekin
dalam oven pada suhu 105º C sampai
bobot tetap. Timbang seksama lebih
kurang 50 mg, masukkan kedalam labu
terukur 50 mL larutkan dalam etil asetat.
Sonikasi selama 5 menit, pipet 2 mL
larutan, masukkan ke dalam labu
erlenmeyer bersumbat kaca 100 mL,
tambahkan 50 mL etil asetat P, sonikasi
kembali selama 5 menit .
Pembuatan larutan uji: timbang
seksama lebih kurang 50 mg ekstrak,
keringkan dalam oven pada suhu 105º C
sampai bobot tetap. Masukkan kedalam
labu tertukur 50 mL, larutkan dalam etil
asetat P, sonikasi selama 5 menit, pipet 2
mL larutan, masukkan kedalam labu
erlenmeyer bersumbat kaca 100 mL,
tambahkan 50 mL etil asetat P, sonikasi
kembali selama 5 menit.
Pembuatan larutan blanko Etil
asetat P: pengukuran ukur serapan serapan
pembanding, larutan uji dan larutan
blangko secara spektrofotometri pada
panjang gelombang 279 nm dan 300 nm.
Serapan larutan uji pada 300 nm tidak
lebih dari 0,03 (Kementrian Kesehatan
Republik Indonesia, 2010).
c. Penetapan kadar flavonoid
Larutan uji untuk ekstrak cair:
ukur seksama sejumlah volume ekstrak
cair, encerkan dengan etanol 80 % sampai
kadar yang sesuai untuk kolorimetri.
Larutan pembanding: timbang
seksama kurang lebih 10 mg pembanding,
larutkan dalam etanol 80 %, encerkan
secara kuantitatif dan jika perlu bertahap
6
dengan etanol 80 % hingga kadar 80 %
hingga kadar 30, 40, 50, 60 dan 70 mL.
Pengukuran: pipet secara berpisah
0,5 mL larutan uji dan larutan
pembanding, tambahkan pada masing
masing 1,5 mL etanol P, 0,1 mL
aluminium klorida P 10 %, 0,1 mL natrium
asetat 1 M dan 2,8 mL air suling. Kocok
dan diamkan selama 30 menit pada suhu
ruang. Ukur serapan pada panjang
gelombang serapan maksimum. Lakukan
pengukuran blanko dengan cara yang
sama, tanpa penambahan aluminium
klorida, buat koresi seperlunya
(Kementrian Kesehatan Republik
Indonesia, 2010)
Hasil dan Pembahasan
Setelah dilakukan penelitian
tentang analisis kualitatif dan kuantitatif
dari ekstrak heksan, aseton, etanol, dan air
dari daun mengkudu (Morinda citrifolia
L.)
diperoleh hasil sebagai berikut :
1. Hasil identifikasi sampel
dilakukan di Herbarium
Laboratorium Jurusan Biologi
FMIPA, Universitas Andalas
(ANDA) Padang menunjukkan
bahwa sampel yang digunakan
adalah tanaman daun mengkudu
(Morinda citrifolia L.) dengan
family Rubiceae
2. Hasil karakteristik dari simplisia
daun mengkudu diketahui bahwa:
a. Makroskopis : Warna daun
Hijau sampai hijau tua
kekunigan, Helaian daun
umumnya tidak utuh, bentuk
daun bundar telur, lebar,
hingga berbentuk elip.
Panjang daun 4,5 cm sampai
21 cm dan lebar daun 4,5 cm
sampai 8 cm. Ujung daun
runcing, pangkal daun
meruncing, pinggir daun rata,
daun penumpu berbentuk
bundar telur, pinggir rata
warna hijau kekuningan.
Panjang tangkai daun 0,5 cm.
Permukaan daun menyirip
jelas (Lampiran 1, Gambar
6).
b. Mikroskopis: Epidermis
bawah dengan stomata,
Fragmen daun dengan hablur
Ca oksalat bentuk rafida,
Hablur Ca oksalat bentuk
jarum, Hablur Ca oksalat
bentuk jarum, Mesofil
dengan hablur Ca oksalat
bentuk rafida, Berkas
pembuluh dengan penebalan
tangga dan spiral.
c. Kadar abu simplisia daun
mengkudu adalah 5,4920 %.
d. Kadar abu tidak larut dalam
asam simplisia daun
mengkudu adalah 0,4779 %.
e. Kadar senyawa yang larut
dalam etanol adalah 14,3257
%.
f. Kadar senyawa yang larut
dalam air adalah 17,8294 %.
g. Hasil kromatografi ekstrak
daun mengkudu dideteksi
dibawah sinar UV pada
panjang gelombang 366 nm
dan diperoleh 3 noda
(Gambar 18) yang masing-
masing memiliki nilai Rf1=
0,43, Rf2= 0,51, Rf3= 0,78.
3. Hasil kualitatif dari ekstrak
heksan tidak ada menunjukkan
hasil positif pada semua ekstrak
uji, ekstrak aseton dan etanol
menunjukan positif fenol,
sedangkan flavonoid positif
7
 dalam ekstrak etanol dan air. Dan
tanin positif dalam ekstrak aseton
dan etanol.
4. Hasil perhitungan kuantitatif
kandungan kimia flavonoid dari
ekstrak etanol dan air sebesar
2,7897 % dan 2,6905 %.
Sedangkan kandungan fenol
dalam ekstrak etanol dan aseton
0,3576 % dan 0,3164 %. Dan
kadar tanin dalam ekstrak aseton
dan etanol sebesar 0,6245 % dan
0,6251 %.
Pembahasan
Pada penelitian ini sampel yang
digunakan adalah daun mengkudu yang
sudah berwarna hijau pekat. Daun
mengkudu di ambil pada pagi hari yaitu
pukul 09.00 WIB. Daun mengkudu
diambil di Jalan Lolong Belanti Padang
Utara Sumatera Barat.
Identifikasi tanaman telah
dilakukan di Herbarium Laboratorium
Jurusan Biologi FMIPA, Universitas
Andalas (ANDA) Kampus Limau Manih
Padang Sumatera Barat. Tujuan
identifikasi adalah untuk mengetahui
identitas sampel yang akan digunakan.
Berdasarkan hasil identifikasi tersebut
dapat diketahui kepastian bahwa sampel
yang digunakan dalam penelitian ini
adalah daun mengkudu (Morinda citrifolia
L.) dengan Famili Rubiaceae.
Daun mengkudu yang sudah
diambil sebanyak 3 kg, dilakukan sortasi
basah untuk memisahkan dari bahan-bahan
atau benda asing dari daun mengkudu
tersebut. lalu dilakukan pencucian dengan
air bersih lalu dirajang dengan ukuran ± 1-
2 cm dan ditunggu daun hingga kering
hingga 3 minggu sampai warna daun
kecoklatan. simplisia kering tersebut
dihaluskan menggunakan blender hingga
didapatkan simplisia berupa serbuk halus.
Uji makroskopis yang dilakukan
dengan melihat secara langsung daun
mengkudu hanya dengan menggunakan
organ mata. Di lihat bentuk daun, warna
daun, panjang dan lebar daun. Uji
mikroskopis yaitu menggunakan alat
mikroskop, opti lab, laptop, kaca objek,
klorohidras dan air. Serbuk daun
mengkudu di amati di bawah mikroskop.
Hasil yang di dapatkan dari uji
mikroskopis yaitu epidermis bawah
dengan stomata, Fragmen daun dengan
hablur Ca oksalat bentuk rafida, Hablur Ca
oksalat bentuk jarum, epidermis atas,
mesofil dengan hablur Ca oksalat bentuk
rufida, Berkas pembuluh dengan
penebalan tangga dan spinal.
Kadar abu total bertujuan untuk
memberikan gambaran kandungan mineral
internal dan eksternal yang berasal dari
awal sampai terbentuknya abu, kadar abu
diperoleh adalah 5,4920 % sesuai dengan
standar Departemen Kesehatan Republik
Indonesia 1995 kadar abu tidak lebih dari
12 %. Kadar abu tidak larut dalam asam
adalah 0,4358 % sesuai dengan standar
Departemen Kesehatan Republik
Indonesia 1995 kadar abu tidak lebih dari
0,5. Perhitungan senyawa larut dalam
pelarut etanol didapat 14,3257 % sesuai
dengan standar Departemen Kesehatan
Republik Indonesia 1995 kadar abu tidak
kurang dari 3,5 %, sedangkan kadar
senyawa larut dalam air didapat hasil
17,8294 % sesuai dengan standar
Departemen Kesehatan Republik
Indonesia 1995 kadar abu tidak kurang
dari 9,5 %.
Simplisia yang telah kering dan
didapatkan serbuk daun mengkudu
kemudian dimaserasi, pemilihan metode
maserasi ini karena dapat menggunakan
8
sampel dalam jumlah yang banyak,
pelaksanaannya sederhana, tidak
memerlukan perlakuan khusus dan
kemungkinan terjadinya penguraian zat
aktif oleh pengaruh suhu dapat dihindari
karena tidak ada proses pemanasan.
Sebelum dimaserasi simplisia daun
mengkudu dirajang terlebih dahulu sampai
didapatkan berupa serbuk daun mengkudu
dengan tujuan agar pelarut dapat
berpenetrasi dengan mudah sehingga
penarikan zat aktif lebih sempurna
(Departemen Kesehatan Republik
Indonesia, 1985).
Maserasi sampel dilakukan dengan
menggunakan 3 pelarut yaitu heksan,
etanol dan aseton. Heksan digunakan
sebagai pelarut karena merupakan senyawa
non polar yang banyak dipilih untuk
proses pengekstrakan bahan alam yang
akan di ambil senyawa non polarnya.
Etanol digunakan sebagai pelarut universal
disebabkan karena sifatnya yang mudah
melarutkan senyawa zat aktif baik yang
bersifat polar, semi polar dan non polar.
Aseton digunakan sebagai pelarut karena
aseton banyak larut pada hidrofilik dan
komponen lipofilik, mudah tercampur
dengan air, mudah menguap dan memiliki
toksisitas rendah, aseton sangat bermanfaat
dalam membuat ekstrak.
Maserasi dilakukan selama 3 hari
dengan 3 kali pengulangan. Maserat
diuapkan dengan rotary evaporator, agar
proses penguapan lebih cepat. Infusa
dilakukan untuk ekstraksi dengan
menggunakan pelarut air. Air digunakan
sebagai pelarut karena merupakan pelarut
universal, digunakan untuk ekstrak
tanaman dengan aktivitas antimikroba, dan
air bersifat polar. Infusa dilakukan dengan
menggunakan panci infus dan penangas air
selama 15 menit. Setelah diperoleh ekstrak
daun mengkudu dari 4 pelarut dilakukan
uji kandungan kandungan kimia dan uji
kadar dari ektrak daun mengkudu.
Selanjutnya dilakukan Uji
Kromatografi lapis tipis (KLT), yang
merupakan metode analisis kualitatif
dengan cara memisahkan komponen-
komponen sampel berdasarkan perbedaan
kepolarannya dengan tujuan menentukan
banyaknya komponen senyawa. Pada
percobaan ini digunakan plat silika gel F254
yang bersifat polar sebagai fasa diam. Fasa
gerak yang digunakan adalah etil asetat-
metilketon-asam format-air (50:30:10:10).
Kemudian dilakukan penotolan sampel
pada plat KLT dan dimasukan dalam
chamber yang berisi fasa gerak.
Selanjutnya noda dideteksi dibawah sinar
UV pada panjang gelombang 366 nm dan
diperoleh 3 noda (Gambar, 18) yang
masing-masing memiliki nilai Rf1= 0,43,
Rf2=0,51, Rf3= 0,78.
Penentuan kandungan kimia pada
analisis kualitatif pada ekstrak heksan,
etanol, aseton dan air yang dilakukan
sepuluh uji fitokomia pada analisis
kualitatif yaitu uji karbohidrat, uji asam
lemak, uji fenol, uji tannin, uji flavonoid,
uji alkaloid, ujiminyak atsiri, uji saponin,
uji terpenoid, dan uji steroid. Hasil yang
didapatkan pada ekstrak heksan tidak
menunjukkan adanya positif pada setiap
uji yang dilakukan, sedangkan pada
ekstrak aseton dan etanol menunjukan
positif fenol, sedangkan pada flavonoid
menunjukan positif dalam ekstrak etanol
dan air. Dan tanin positif dalam ekstrak
aseton dan etanol.
Berdasarkan hasil analisis kualitatif
yang didapatkan sangat sedikit yaitu tanin,
fenol, flavonoid. Sedangkan hasil
penelitian yang telah dilakukan oleh
(Sudarsono, 2011) didapatkan daun
mengkudu mengandung steroid dan
alkaloid. Penelitian yang dilakukan oleh
9
(Diassanti, 2011) didapatkan hasil
kandungan dari daun mengkudu yang
mengandung saponin, flavonoid, polifenol,
tanin dan triterpen. Hasil kualitatif ini
dapat kemungkinan besar dipengaruhi oleh
beberapa faktor yaitu saat melakukan
maserasi, kemungkinan besar penarikan
zat aktif belum sempurna sehingga
berpengaruh untuk uji fitokimia. Faktor
lain yaitu pengambilan daun yang
ditentukan dengan mengambil daun yang
berwarna hijau pekat saja, sehingga tidak
dapat diketahui bahwa daun yang
berwarna hijau pekat itu banyak
mengandung zat aktif atau tidak. Dilihat
dari reaksi kimia yang terjadi pada
pengujian kualitatif yaitu pada uji
karbohidrat dimana ekstrak tidak
menunjukkan reaksi dengan penambahan
fehling A dan B, reaksi kimia tidak terjadi
reduksi yg membuat terbentuknya endapan
kupro oksida menjadi warna merah bata.
Sehingga percobaan yang dilakukan
memperoleh hasil negatif karena tidak
terjadi endapan sama sekali. Begitupun
pada uji asam lemak reaksi kimia yang
terjadi juga tidak memberikan hasil yang
akurat.
Uji fenol dan tanin menggunakan
pereaksi yang sama yaitu besi (III) klorida
yang mana hasilnya menunjukkan warna
endapan biru hitam, pada percobaan yang
dilakukan menunjukkan hasil endapan biru
hitam pada ekstrak etanol, sehingga hasil
fenol dan tanin yang diperoleh yaitu
positif. Uji flavonoid menunjukkan reaksi
kimia yang terjadi antara ekstrak dan
pereaksi, yaitu ekstrak etanol dan esktrak
air dapat bereaksi saat penambahan etanol,
serbuk Mg dan asam klorida 5M yang
menunjukkan terbentuknya warna merah
hingga merah lembayung, tetapi tidak pada
esktrak heksan dan aseton.
Uji alkaloid menunjukkan negatif
terhadap semua ekstrak heksan, aseton,
dan etanol air yaitu negatif, hal ini juga
terjadi reaksi kimia saat ekstrak
ditambahkan reagen mayer yang tidak
membentuk endapan krem putih.Uji
minyak atsiri juga tidak memberikan
rekasi kimia apapun pada ekstrak, karena
hasil yang didapatkan tidak
menghilangkan kalium permanganat pada
ekstrak, sehingga hasil yang diperoleh
memberikan hasil negatif pada ekstrak
etanol, heksan, aseton dan air.
Reaksi kimia juga tidak terjadi
pada uji saponin. Saat ekstrak ditambahkan
dengan air, timbul busa dengan
pengocokan namun hilang dalam waktu 10
menit. Hasil percobaan yang dilakukan
menunjukkan semua ekstrak tidak
mengadung saponin. Begitu juga pada uji
terpenoid dan steroid yang menunjukkan
hasil negatif untuk semua ekstrak, pada
terpenoid ekstrak tidak menunjukkan
reaksi kimia saat penambahan asam asetat
anhidrat dan asam sulfat sehingga tidak
terbentuk warna biru hijau, begitu juga
pada uji steroid, ekstrak tidak memberikan
rekasi kimia yang memberikan warna hijau
saat ditambahkan kloroform dan asam
sulfat. Sehingga hasil percobaan yang
didapatkan dari uji terpenoid dan uji
steroid negatif untuk semua ekstrak.
Penetapan kadar fenol total
menggunakan metode Folin- Ciocalteu
yang absorbansinya diukur pada panjang
gelombang 732 nm, larutan standar yang
digunakan adalah asam galat direaksikan
dengan reagen Folin-Ciocalteu
menghasilkan warna kuning setelah itu
ditambah dengan natrium hidroksida
sebagai pemberi suasana basa. Selama
reaksi berlangsung, gugus hidroksi pada
senyawa fenolik bereaksi dengan Folin-
Ciocalteu membentuk kompleks
10
molibdenum tungsten berwarna biru. satu gugus fenol senyawa katekin disebut
Selanjutnya dilakukan pengukuran juga senyawa polifenol (Arif, 2003).
absorban larutan standar asam galat dari Selanjutnya dilakukan penetapan
beberapa konsentrasi 20, 30, 40, 50 dan 60 kadar katekin, penentuan panjang
mg/mL, kemudian dibuat kurva kalibrasi gelombang dilakukan dengan cara
diperoleh persamaan regresi linear y = mengukur larutan standar katekin yang
0,11642 + 0,00975x dengan koefesien menunjukan hasil panjang gelombang
korelasi (r) = 0,9998 didapat kadar rata- maksimum katekin 279 nm. Dari hasil
rata fenol total pada ekstrak etanol dan perhitungan yang diperoleh pada ekstrak
aseton sebesar 0,3586 % dan 0,3164 %. aseton dan etanol sebesar 0,6245 % pada
Penetapan kadar flavonoid total ekstrak aseton dan ekstrak etanol sebesar
dari ekstrak etanol dan air dari daun 0,6251 %. Hal ini menunjukan kandungan
mengkudu dilakukan dengan tanin tertinggi terdapat pada ekstrak etanol.
menggunakan metode kolorimetri
aluminium klorida (AlCl3) yang mana Tabel I. Hasil Pemeriksaan Uji Kualitatif
fungsi nya adalah membentuk kompleks
yang stabil antara gugus hidroksil dan No
Kandunga
n senyawa
Pereaksi
Paramete
r
Ekstrak
heksan
Ekstrak
aseton
Ekstrak
etanol
Estrak air

keton (Hanani, 2017). Absorban diukur

Endapan
pada panjang gelombang 430 nm. Karbohidr
Fehling A kupro
1. + Fehling oksida - - - -
Senyawa yang digunakan sebagai standara at
B berwarna
merah bata

dalah kuersetin, karena kuersetin

Asam Warna
merupakan flavonoid pada atom C3 dan 2.
Asam
lemak
sulfat, cokelat _ - - -
dipanaskan muda

C5 (Hanani, 2017). Selanjutnya dilakukan

Warna
pengukuran absorban, larutan standar 3. Fenol
3-4 tetes
FeCl
hijau
- + + -
3
hingga
kuersetin konsentrasi 20, 30, 40, 50 dan 60 biru hitam

mg/mL dibuat kurva kalibrasi diperoleh FeCl Endapan

4. Tanin - + + -
3 biru hitam
persamaan regresi linear y = 0,01645x +
0,00996 dengan koefisien korelasi (r) = Etanol +
Warna
merah
serbuk Mg
5. Flavonoid hingga - - + +
0,9999 didapatkan golongan flavonoid + asam
klorida
merah
lembayung
pada ekstrak etanol dan air sebesar 2,7897
Reagen Endapan
% dan 2,6905 %. 6. Alkaloid
Mayer krem putih
- -

Penetapan kadar tanin pada daun Asam

mengkudu dilakukan secara 7. Terpenoid

anhidrat +
Asam
Warna
biru hijau
- - - -
sulfat
spektrofotometri UV-Vis, dan
Warna
menggunakan pembanding katekin. 8.
Minyak
Kalium
permangan
menjadi
- - - -
atsiri pucat atau
at
Katekin digunakan karena katekin hilang

merupakan senyawa golongan metabolit Air

Timbul 2
Dikocok
9. Saponin cm lapisan - - - -
sekunder yang secara alami dihasilkan tunggu 15
menit
busa

oleh tumbuhan dan termasuk golongan Klroform

Warna
flavonoid, struktur molekul katekin 10. Steroid + asam
sulfat
biru
- - - -

memiliki dua gugus fenol (cincin A dan

cincin B) dan satu gugus dihidropiran
(cincin C), dikarenakan memiliki lebih dari

11
Gambar Hasil Makroskopik Daun Tabel III. Hasil kadar fenol total dari
Mengkudu ekstrak daun mengkudu
(Morinda citrifolia.L)
Sampel Absorban Kadar Rata-rata (%)
(%)
Ektrak 0,332 0,3168 0,3164
Aseton 0,331 0,3158
0,332 0,3168
Ekstrak 0,371 0,3559 0,3586
Etanol 0,381 0,3660
0,369 0,3539

Tabel IV. Hasil kadar flavonoid total dari

ekstrak daun mengkudu
(Morinda citrifolia.L)
Sampel Absorban Kadar (%) Rata-rata (%)
Ektrak 0,281 2,65 2,6905
Air 0,282 2,66
R3 0,292 2,76
Ekstrak 0,293 2,776 2,7897
Etanol 0,295 2,796
0,295 2,796

R2
Tabel V. Hasil kadar tanin total dari
ekstrak daun mengkudu
R1 (Morinda citrifolia.L)
Sampel Absorban Kadar (%) Rata-rata
Ektrak 0,747 0,6251 0,6245
Aseton 0,748 0,6243
Gambar Hasil Kromatografi lapis tipis 0,748 0,6243
simplisia daun mengkudu. Ekstrak 0,620 0,7525 0,6251
Keterangan : Etanol 0,620 0,7525
- Fase gerak : etil asetat-metilketon- 0,621 0,75

asam format-air (50:30:10:10)

- Fase diam : silika gel 60 F254
- Deteksi : UV366
- Hasil nilai Rƒ simplisia daun
mengkudu
Rƒ1 = 0,43 Rƒ2 = 0,51 Rƒ3
= 0,78

12
 1. Hasil uji kandungan kimia dari
analisis kualitatif menunjukkan
hasil positif fenol dalam ekstrak
aseton dan etanol, sedangkan
flavonoid positif dalam ekstrak
etanol dan air, tanin positif dalam
ekstrak aseton dan etanol.
2. Kadar rata-rata kandungan kimia
fenol total ekstrak etanol dan
aseton yaitu sebesar 0,3576 % dan
0,3164 %, kadar flavonoid total
Gambar 2. Kurva Spektrum serapan ekstrak etanol dan air sebesar
katekin λ maksimum 279 nm, 2,7897 % dan 2,6905 %, kadar
menggunakan alat spektrofometer Uv-Vis( tanin total pada ekstrak aseton dan
Shimadzu 1800) etanol sebesar 0,6245 % dan
0,6251 %.

UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan terimakasih disampaikan
kepada Bapak Drs. Rusdi, MS, Apt selaku
pembimbing I dan Bapak Prof.Dr.H.
Harrizul Rivai, MS selaku pembimbing II
yang selalu memberi masukan, bimbingan
dan motivasi.

DAFTAR PUSTAKA

Gambar 3. Kurva Spektrum serapan asam Banu, K. Sahira & Cathrine, DR. L.
galat ditambah folin ciocalteu λ (2015). General Techniques
maksimum 732 nm, menggunakan alat Involved In Phytochemical
spektrofometer Uv-Vis( Shimadzu 1800). Analysis.International Journal of
Advanced Research in Chemical
Sciene, 2 (4): 2349-0403.

Badan POM RI. (2008). Taksonomi

Koleksi Tanaman Obat Kebun
Tanaman Obat Citeureup.Jakarta:
Badan Pengawasan Obat dan
Makanan Republik Indonesia.

Chang, C., Yang, M., Wen H., Chern J.

KESIMPULAN (2002). Estimation Of Total Flavonoid
Berdasarkan penelitian yang telah Content in Propolis by Two
dilakukan dapat disimpulkan: Complementary Colorimetric

13
 Methods. Journal of Food and Drug Jakarta: Direktorat Jenderal
Analysis, 10(3), 178 -182. Pengawasan Obat dan Makanan.

Chun, O. K., Kim D. O., and Lee C. Y.

Departemen Kesehatan Republik
(2003). Suproxide Radical
Scavenging Activity of the Mayor
Indonesia. (2010). Suplemen 1
Polyphenols In Fresh Plums. Journal Farmakope Herbal Indonesia.
of Agricultural and Food Chemistry, Jakarta: Direktorat Jenderal
15 (1), 8067 – 8072. Pengawasan Obat dan Makanan,
Direktorat Pengawasan Obat
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Tradisional.
(1980). Materia Medika Indonesia
(Jilid IV). Jakarta: Departemen
Djauhari, E, 2000. Mengkudu (Morinda
Kesehatan Republik Indonesia.
citrifolia L.) Tanaman Obat
Departemen Kesehatan Republik Potensial. Balai Penelitian
Indonesia, (1989). Materia Medika Tanaman Rempah dan Obat. Jurnal
Indonesia. (Jilid V). Jakarta: Perkembangan Teknologi tanaman
Direktorat Jendral Pengawasan rempah dan obat Vol XV, No 1. p.
Obat dan Makanan, Direktorat 2
Pengawasan Obat Tradisional.
Diassanti, A. 2011, Uji Ekstrak Etanol
Departemen Kesehatan Republik Daun Mengkudu ( Morinda
Indonesia, (1985). Cara Citrifolia L.) sebagai Antimikroba
Pembuatan Simpilisia. Jakarta: terhadap Methicilin Resistens
Departemen Kesehatan Republik Stphylococus Aereus (MRSA)
Indonesia. secara in Vitro, Skripsi,
Universitas Brawijaya, Malang.
Departemen Kesehatan Republik
Indonesia. (1995). Materia Medika. Hanani, E. (2015). Analisis Fitokimia.
Jilid VI. Jakarta: Departemen Jakarta: Buku Kedokteran EGC.
Kesehatan Republik Indonesia.
Harbone, J. B. (1987). Metode Fitokimia,
Penuntun Cara Moderen Menganalisis
Departemen Kesehatan Republik
Tumbuhan. (Edisi 2), Penerjemah:
Indonesia. (2000). Parameter
Padinawinata, K & Soediro, I.
standar umum ekstrak tumbuhan Bandung: Penerbit ITB.
obat. (Edisi 1). Jakarta: Direktorat
Jendral Pengawasan Obat dan Heyne, K. (1987). Tumbuhan Berguna
Makanan, Direktorat Pengawasan Indonesia, Volume II, Yayasan Sarana
Obat Tradisional. Wana Jaya: Diedarkan oleh Koperasi
Karyawan, Badan Litbang Kehutanan:
Departemen Kesehatan Republik Jakarta
Indonesia. (2008). Farmakope Kementerian Kesehatan Republik Indonesia.
Herbal Indonesia. (Edisi 1). (2010). Suplemen 1 Farmakope Herbal

14
 Indonesia. Jakarta: Kementerian
Kesehatan Republik Indonesia.
Kementerian Kesehatan Republik
Indonesia. (2011). Formularium
Obat Herbal Asli Indonesia
(volume 1). Jakarta: Kementerian
Kesehatan Republik Indonesia.
Kementerian Kesehatan Republik
Indonesia. (2014). Farmakope
Herbal Indonesia. Jakarta:
Kementerian Keseahatan Republik
Indonesia.
Mulja, M& Suharman. (1995). Analisis
Instrumental. Surabaya: Airlangga
University Press.
Midellton, E. J. R., Kandaswani, C and
Theoharides, T.C, (2000). The
Effect of Plant Flavonoid on
Mammalian Cells: Implications for
Inflamation, Heart Diseases, and
Cancer. Pharmacol Rev.52 (4) :
673-751
Pramono, S. 1989. Isolasi flavonoid dari
buah pace (morinda citrifolia L.)
Penelitian Tanaman Obat di
Beberapa perguruan tinggi
Indonesia. Fakultas Farmasi.UGM.
Yogyakarta.
Permadi. A. 2008. Membuat Kebun
Tanaman Obat. Pustaka Bunda.
Jakarta
Peraturan Menteri Kesehatan Republik
Indonesia. (2016). Formularium obat
herbal asli Indonesia. Jakarta: Menteri
Kesehatan Republik Indonesia.
Soemardji. A A, N. C. Soegiharto dan L .
Sigit. 1994. Dekok daun Morinda
citrifolia sebagai obat cacing
Abstrak simpsosium penelitian obat
alami VIII dan Muktamar
PERHIPBA VI, Bogor: 65
Mulyono, HAM. (2006). Membuat reagen
kimia di Laboratorium. Jakarta: PT.
Bumi Aksara.
Tiwari, P., Kumar,M., Kaur,M., Kaur,G.,
Kaur,H., (2011). Phytochemical
Screening and Extraction: A
Review. Internationale
Pharmaceutica Sciencia, 1 (1): 98-
106.
Rukmana, R. 2000 Mengkudu Budidaya
dan Prospek Agribisnis R.kanisius.
Yogyakarta
15